白血病 の亜鉛代謝 に関す る研究 第1編
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(2) 186. 斉. 藤. そ こで 著 者 は まず 本 篇 に お い て は 白血 病 患 者 に お け る末 梢 血顆 粒 球 中 の 亜 鉛 量 をMc. Nary法. を用 い. 公. 男. 酸 を 用 い てPH. 5.5に 調 整 す る.こ の 染 色 液 は使 用. の 都度 新 調 した.染 色 操 作 は,よ. く清 拭 し た ス ラ イ. て 測 定 し白 血 病 の 病 型 との 相 関,治 療 に よ る臨 床 経. ドグ ラス を用 い,末 梢 血 液 塗 抹 標 本 を 作 製 し,直 ち. 過 との相 関 な ど につ き詳 細 に検 討 し,さ らに実 験 白. に乾 燥,約1時. 間後 脱 亜 鉛 水 中 に3回 速 か に 浸 す こ. 血 病 に お け る 白血 病 発 症 との 関 係 につ い て も追 求 し. とに よ り溶 血 せ しめ る.乾 燥 後 上 記 染 色 液 を か け,. 若干 の 新 知 見 を得 たの で報 告 す る.. 染色 液 が澄 明 な緑 色 か ら淡 黄 色 に変 る ま で約20〜30. 2.. 分 間 染 色 した後 脱 亜 鉛 水 で3回 洗 滌 す る. 実 験 材 料 な らび に 実 験 方 法. Azur. 1) 実 験 材 料. Ⅱ溶 液 で120分. 間 後 染 色 を行 い,グ. ル ゲ ル で封 入 し鏡 検 す る. (Fig. 正 常対 照 群 と し て健 康 人20才 よ り55才 ま で の男13 例,女12例,計25例. を え らん だ.実 験 群 の 白血 病 患. 者 に つ い て は昭 和44年 〜45年 岡 山大 学 医 学 部 第 二 内. Ⅱ) 判 定 法(Fig Fig. 0.1% リセ ロ ー. 1). 1,)の. 如 く顆 粒 球 の 細 胞 質 中 に. for. in Granulocytes. 1′ Scor‑Mothod. Zn. 科 に 入 院 せ る急 性 骨 髄 性 白血 病(以 下AML)26例, 急 性 リ ンパ 性 白 血 病(以 下ALL)8例,単 血 病(以. 下MoL)2例,慢. CML)9例,慢 2例,赤. 球性 白. 性 骨 髄 性 白血 病(以 下. 性 リンパ 性 白血 病(以 下CLL). 白 血 病(以 下EL)2例. の 合 計48例 を え ら. び そ の 各 々 につ い て 未 治 療 時,治 療 に よ る完 全 寛 解 期 な らび に 不 完 全 寛 解 期(木 村 の 判定 基 準14)によ る) お よ び増 悪 期 にお け る未 梢 血 液 塗 抹 標 本 を用 い た. そ の 他 白 血 病 類 縁 疾 患 と して 悪 性 リン パ腫5例. につ. い て も同 様 に して 作 成 し た標 本 を用 い た.実 験 白血 病 と して は1960年 パ リ大 学J.. Bernhard教. 分 与 され,そ れ 以 来教 室 に てBalb/cマ され て い るRauscher白 2). 授より. ウ ス に継 代. 血 病15)を 用 い た.. なわ ち顆 粒 を 全 く認 め な い もの を0度,10ケ. 顆 粒球 亜 鉛 量:Ⅰ)染. 色 法Mc. Nary原. の う ちDithizone‑Aceton‑Water法. セ トン溶 液1.5容. に対 し脱 亜 鉛 水1容. Dithizone. Method. for. A.. of. Staining. B.. 2.. Dilute. 3.. Ajust. 1.5:1 PH. Staining. Zn. Granule acetone. Zinc. free. water. IN. acetic. acid. with. of. solution. Nucleus. solution. Method fresh. After. 1 hour. zinc. free. Place. on A. Allow. to. has. staining. stain. changed. yellow. air dip. dried. blood. quickly. 3. smears times. in. flood. with. water. solution 4.. 5.5. Granulocytes. of. with. Azur Ⅱ. Staining. 3.. absolute. Solution. 1. Prepare 2.. in. dithizone. 1. 0.1% C.. in. Solution. 1. 0.02%. Histochemical. Zn. rack. until from. (for. and. staining clear. solution. green. to. straw. 20〜30min.). 5.. Rinse. in. 3. 6.. Stain. 2. hours. changed in. in. zinc. solution. free B. ア. を加 え,IN酢. 1. Demonstration. 法. の変法 によ り. 染 色 した.す な わ ち染 色 液 は0.02%Dithizone加. Fig. Granules. に従 って0度 か ら4度 ま で の5段 階 に分 類 した.す. 実験方法 a). Zn. 染 色 され る黄 金褐 色 の顆 粒 の数 に よ り,こ れ を原 法. water. もの Ⅰ度,30ケ. ま で の もの を Ⅱ度,60ケ. Fig 2 Total Zn Score and Nontreated. in Normal Leukemia. までの. まで の もの. Subjects.
(3) 白血病 の亜鉛 代謝 に関す る研究 を Ⅲ度,顆. 粒 の 充 満 し て い る も の を Ⅳ 度 と し,各. 本 に つ き100ケ. の 顆 粒 球 を 数 え,そ. し て"Total. Zinc. Scoreの0度. Score"と. 標. の 各 度 数 を加 算 し た.ま. か ら Ⅳ 度 に 至 るGradeを. たZinc. 横 軸 に と り,. ALL, 性. 187. CLL,. MoL,. EL,の. リ ン パ 腫 に 分 け てTotal. にFig. 3の 如 くCML,. つ い て,悪. 各病 型 お よ び 悪. Zinc MoL,. 性 リ ン パ 腫 で は1例. 康 人 の 下 限 値 以 下 に 分 布 し た.. す る 点 をpiotし. 数 例 の た め 比 較 は 困 難 で あ る が,. を"Zinc. Score. b). Gram"と. 好 中 球alkalin. Ⅱ). Blue. 判 定 法:陽. RR法. As‑. を 用 い た.. AMLは. 0度 か ら Ⅳ 度 に 設 定 し 陽 性 率,陽 性 指 数 を 算 定 し た.. き か っ た.. Total. Zinc. 実 験 成 績. Zinc. 康 人 対 照25例. 均値は. 別,年 令 別 に よ る 有 意 差 は. 認 め ら れ な か っ た. (Fig Ⅱ). のTotal. 範 囲 に 分 布 し,平. あ っ た.性. 未 治 療 時 のScore:. 間 に 広 く 分 布 し,か. 48例 の 白 血 病 全 症 例. Zinc. 治療 に よ る臨 床 経 過 との 相 関: AML,. 両 病 型 に つ い て そ の 全 経過 を 院時)ま. た は 治療 に よ り一 旦 寛 解. した 後再 び血 液 像 ま た は 骨髄 像 の増 悪 した 時 期 (B):木 村 の 白 血病 の 治療 効 果 判定 基 準 に 従 い 不 完 全 寛 解 と判定 され る時 期. Scoreは70〜227の. Fig 4 Total Zn‑Score of Leukemia. Zinc. Scoreの. at the Various under. 経時. Stages. Treatment. な り大 きい バ ラ ツ キ が 認 め られ. た が 平 均 値 は161±32.3で も の が 多 か っ た. (Fig. b). CLLは177.5で. の 三 期 に分 ち,そ の間 のTotal. 白血 病 患者 に つ い て a). れ に 対 し,. (C):同 じ く完 全 寛 解 と判 定 され る時 期. 2). を 一 括 し て み る とTotal. お よ び悪. 136.0±12.4で. バ ラ ツ キ が か な り大. ALLは193.7±5.4,. (A):未 治療(入. Scoreは174〜240の. 200.2±18.8で. CMLの. Score. Ⅰ) 正 常 値 に つ い て:健. CML,. 少. 健 康 人 と の 間 に 有 意 差 が 認 め ら れ な か っ た.. c). 1). EL,は. 低 値 を と る も の が2/3を 占 め る が 他 は 正 常 範. 囲 に 入 り,平 均 値165.0±29.4で. 性 度 判 定 基 準 は 朝 長 らに 従 っ て. 3.. MoL,. 健 康 人 に 比 し 明 ら か に 低 値 を 示 し た.こ. 長 ら16)に よ るNaphthol. phosphate‑Fast. は 全例 に. 性 リ ン パ 腫 は そ れ ぞ れ126.2±12.3,. phosphatase. Ⅰ) 染 色 法:朝 Mx. よ ぶ こ と に し た.. 比較す る. EL,で. を の ぞ きい ず れ も健. そ の 度 数 を縦 軸 に と って そ の 座 標 上 に そ れ ぞ れ 対 応 て こ れ を 結 ぶ こ と に よ り出 来 上 る 図. Scoreを. 健 康 人 に比 し低値 を示 す 2). 病 型 別 相 関:全 症 例 をAML,. CML,. Fig 3 Total. Zn‑Score. and Types. of Leukemia. A:. Nontreatment. or Relaps. B: Incomplete C:. Complete. Remission Romission. 的変 動 を比 較 検 討 した.そ の結 果AML, 何 れ につ い て もA期 よ りB期,. CMLの. C期 へ と移 行 す るに. つ れ,す な わ ち化 学 療 法 に よ り寛 解 に導 入 され るに つ れ そ れ ぞ れ のTotal. Zinc. Scoreの. 平 均値 は低 値. よ り正 常 値 へ と推 移 す る傾 向 が 認 め られ た. (Fig 4) この傾 向 はCMLに. お い て特 に 著 明 で あ り,後 述 す. る如 くZinc. Gramに. Score. よ りそ の 推 移 が よ り明.
(4) 188. 斉. 藤. 公. 男. 瞭 に と ら え ら れ た. b). 顆 粒 球 のTotal. Zinc. phosphatase. Scoreと. alkaline. Scoreと. Zinc. phatase. Scoreを,縦. Scoreを. Fig 7. の相関について. 両 者 を 同 時 に 測 定 し 得 た 白 血 病30症 軸 にTotal. 好中球. Zinc Score Gram. in Various. Types. of Leukemia. 例 につ い て 横. 軸 にalkaline. と りそ の 値 をplotす. phos. る にFig. 5. の 如 く両 者 の 間 に 有 意 の 相 関 は 認 め られ な か っ た.. Fig 5 Zn Score of Neutrophils and Zn Content of 30 Cases of Leukemia. Zn. Score. Fig 6 Zn Score. and Alkaline Phosphatase. Score. CMLで. は0度 が最 も多 く Ⅰ度 か らⅣ度 に す す む. に 従 って 漸 減 す る EL,お. 左 方推移. 型 を示 した. MoL.. よ び 悪 性 リ ンパ 腫 で は. 左方推移. 型 に近. い 型 を示 した.対 照 と して え らん だ再 生 不 良性 貧 血 お よ び敗 血 症 で は い ず れ も健 康 人 の. ピ ラ ミッ ド. 型 に近 い値 を示 した. Zn. し か る に, Fig. CMLの. b). Seore. み 抽 出 して 両 者 の 関 係 を み る に. 6の 如 く 相 関 係 数, r=0.662で. 中等度の相関 が. 認 め ら れ た. 2). Zinc. Score. Gram"はFig Ⅰ). 正 常 型(健. 康 人 対 照)に. Ⅱ度 が 最 も多 く30〜40%を ピラ ミ ッ ド 型 を 示 し た. Ⅱ). 各 病 型 を通 じて 未 治 療 時 の 特 異 なpatternか. CMLに Fig. 7の 如 く で あ る. つ いて. 未 治 療 時 のpattern:. 型 が 認 め られ ず,. ALLで. 均 等 に 出 現 し,し. た が って. 7の 如 く未 治療 時 の ピラ ミ ッ ド. がELに 3). AMLで. は一 定 の. は Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,度 梯形 型. がほぼ. を 示 し た.. 左方推移. な わち. 型 か ら寛 解 に. 型 へ と推 移 した.少 数 例 で あ る. つ い て もこ の傾 向 が 明 瞭 で あ っ た. 実 験 白血 病(Rauscher白. Total. 白 血 病 患 者 につ い て a). ら完. 復 帰 す る傾 向 を示 した.こ の 関 係 は. お いて 最 も明 瞭 に捉 え られ た.す. つれ. 占 め これ を 頂 点 とす る. 推移. 全 寛 解 に到 達 す るに つ れ, Normal patternで あ る ピラ ミ ッ ド 型 へ と推 移 し増 悪 に 伴 い 再 び未 治 療 時 のpatternに. Gram. 前 述 の 如 き 方 法 に よ り作 成 し た 各 病 型 別 の"Zinc Score. 治 療 経 過 に よ るpatternの. Zinc. Scoreの. 成 熟 雄 性Balb/cマ. 血 病)に. 検 索(Fig. ウス を次 の4群. よる. 8) に分 ち,白 血. 病 の発 症,進 展 と顆 粒 球 亜 鉛 量 の 推 移 を比 較 検 討 し た..
(5) 白血 病 の亜 鉛 代 謝 に 関 す る研究 Gram"を. Fig 8 Changesof Zn‑ScoreinRauscherLeukemia. 189. 作 成 す る こ と に よ っ て,よ. 得 る こ と, のZinc. Rauscher白. り端 的 に 把握 し. 血 病 マ ウ ス の末 梢 血顆 粒 球. ScoreはRauscher. Virus接. 種後 脾にお け. る白 血 病 の 発 症 に ら び に進 展 と密 接 に関 連 して変 動 す る こ と,な 1). ど が 明 ら か に な っ た.. 染 色方 法 に つ い て の 考 按. そ もそ も血 液 塗 抹 標 本 中 の 顆 粒 球 亜 鉛 をDithizone を 用 い て 組 織 化 学 的 に 染 色 す る 方 法 は, Nary11)に. よ り考 按 さ れ た が,. 1957年Mc‑. 1964年Szmigielski12). ら は こ れ を 用 い て 白 血 病 を含 む 悪 性 腫 瘍 患 者 で は顆 粒 球 亜鉛 量 が特 異 的 に低 下 し診 断 的 意 義 が 高 い こ と 第1群:無. 処置対 照群. を 報 告 し注 目 さ れ た.以. 第2群:正. 常 マ ウ ス脾 ホ モ ジネ ー トを腹 腔 内 に 接. が,そ Mc. 種 せ る群 第3群:. Rauscher白. 血 病 マ ウ ス の20%脾. ネ ー ト よ り 得 たRauscher. ホモ ジ. Virus. 0.2ml. を腹 腔 内 に接 種 せ る群 第4群:摘. 脾 後 にRauscher. Virusを. 同様 に 接. につ い て前 述 と同様 の 方法 で膊 ホ モ ジ. ネ ー ト接 種 前,同 接 種 後5日, び30日 目に顆 粒 球 のTotal 第1群. Naryの. 10日, 15日, 20日 及. Zinc. とDithizone‑Complex. とん ど有 意 の 差 を認 め な か った.こ れ に対 し第3群 Virus接 種 後 第3週. 目 ごろ よ り末 梢. を 加 え た の み の もの で あ るが 後 者 はDithizone. 酸 ナ ト リ ウ ム,シ. リウ ム 等 を 脱 亜 鉛 水 に と か し, Complex. forming. bufferを. Nary自 yellow. 208,接. 種 後5日. Virus接. 目210, 10日 目180,. 種前 に は. 15日 目175,. と い って い る.し. か し そ の他 の 報 告 者 の 多 くは い づ. Virus接. Mc. Scoreは. 減 少 し始 め,第3週. 減 少 を示 す.第4群 及 び第2群. で は接 種 後2週. 常 にPH. 目 ま で は第1群. PH. 至 り150, 30日 目 で145と 第3群. 目に. に比 して や や お くれ. て はい るが や は り著 明 な減 少 傾 向 を認 め た. (Fig 8). あ っ た の でPH. 総 括 と考 按. 色 し そ のScoreを. Scoreは. 健 康 人 の それ と比 し全 般. 的 に低 下 す る が病 型 別 に比 較 す る とCMLに. おいて. 最 も明 瞭 な低 下 が認 め られ る こ と,ま た,治 療 に よ. 3.7,. 者 はWolff18)のDithizone. に よ る 種 々 の 金 属 の 抽 出 率 に 及 ぼ すPHの. 顆 粒 は 他 にDithizonateを く,亜. PH. 比 較 し最 も高 い 値 い を 示 し たPH. 採 用 して い る.著. 5.5を. れ に して も こ の 程 度 のPHの. 以 上 の 実 験 結 果 を総 括 す る に 白血 病 患 者 の末 梢 血 顆 粒 球 中 のZinc. 4.8,. それ ぞれ 調 整 した液 で同 一 人 の 標 本 を染. す る 実 験 成 績 か らPH. 4.. 浦 ら17)は. 法 に よ るDithizone‑Aceton‑Waterは. 4.8〜4.9で. 5.5に. 4.8を. Dithizone‑Aceton‑. の み を 用 い る こ と に し た.杉. Nary原. 目 に至 り著 明 な. と有 意 の 差 を認 め な か っ た が第3週. で は や は り良 好. な 染 色 は 得 られ な か っ た の で, Water法. Zinc. 性 顆 粒 が得 られ な か. 者 も追 試 を 行 っ た が そ の 理 由 は 不 明. だ がDithizone‑Complex‑buffer法. 20日 目147, 30日 目153と 漸 減 す る,即 ちRauscher 種 後10日 目 よ りす で に末 梢血 球 のTotal. Szmigielski12). 常 松 ら10)は 後 者 に よ っ て も著 明 な 顆 粒 を 証 明 し得 る. っ た と云 う.著. ScoreはRanscher. 呈 す る の み で顆 粒 は 出. 現 し な か っ た と云 っ て い るの に 対 し,. 現 が認 め られ,脾 Zinc. ア ン化 カ. 5.5に 調 製 し た. 身 も後 者 に よ っ て は 顆 粒 球 の. れ も後 者 に よ っ てDithizone陽. Total. PH. 用 い る 方 法 で あ る.. pinkを. 血 中 の 有 核 細 胞 数 が増 加 し,急 激 に 白血 病 細 胞 の 出 は 著 明 に腫 大 し始 め る.こ の 間 の. に対 し脱 亜 鉛. と結 合 す る 亜 鉛 以 外 の 金 属 に よ る共 染 を さ け る た め. し か しMc. とほ. 液1.5容. 者 は. 水1容. 胞 体 がlight. に お い て も第1群. と が あ る.前. Dithizone‑Acetom溶. 計 測 した.. で はRauscher. buffer法. 0.02%. で は全 経 過 を通 じ200前 後 の値 を 示 しほ とん. ど変 動 は認 め られ ず,第2群. Scoreを. ち. 原 法 に はDithizone‑Aceton‑Water法. チ オ 硫 酸 ナ ト リ ウ ム,酢. 種 せ る群. 以 上 の4群. 来 数 多 くの追 試 が 行 わ れ た. の 評 価 は 必 ず し も一 定 し て い な か っ た.即. 影 響 に関. え ら ぶ こ と に し た.何 下 で陽 性 に染 色 され る. 作 り得 る 他 の 金 属 で は な. 鉛 に よ る もの と 考 え て 大 差 な き もの と考 え ら. れ る. こ こ で 用 い られ て い るDithizoneに. よ る組 織 化 学. る寛 解 導 入 につ れ て 低 値 よ り正 常 値 に復 帰 す る傾 向. 的 染 色 法 は 白 血 球 に 含 ま れ る 亜 鉛 の う ち遊 離 形 の も. の 認 め られ る こ と,こ れ らの 関 係 は"Zinc. の,あ. Score. る い は蚕 日質 と の結 合 の比 較 的 弱 い部 分 を 染.
(6) 190. 斉. 藤. 公. 男. 色 して い る もの と思 わ れ る が この場 合 実 際 の 白 血 球. の成 績 に最 も近 似 して い る が そ の バ ラ ツ キ は か な り. 亜 鉛 量 を どの 程 度 忠 実 に反 映 して い るか が 最 も基 本. 大 き く, 174〜240の 間 に分 布 して い る.染 色 液 は調. 的 な 問題 と な る.そ. 整 後 短時 間 内 に 使 用 して い る の で これ に 起 因 す る も. こで高 杉 ら13)は厳 密 な 条 件 下 に. 癌 患 者 よ り純 粋 に分 離 した 白 血 球 に つ い て 湿 式 灰 化. の か も知 れ な い.. 後 化 学 的 に定 量 を行 い,同 時 に 同 じ患 者 の 末 梢 血 顆 粒 球 のZinc. Scoreを. に 相 関 係 数r=0.71. 算 定 し両 者 の 関 係 を比 較 す る (P<0.01)で. 正 の 相 関 を認 め. 本 法 に 白血 球 亜 鉛 量 の 半 定 量 的 測 定 法 と しての 実 験. さて 当 内科 に 入 院 せ る未 治 療 の 白 血 病 患 者48例 に つ い て入 院時 のTotal. Zinc. る こ とな く一 括 してplotす. Scoreを. 病 型 を考 慮 す. る と48例 中28例 は健康 人. 対 照 群 の 下 限値 以 下 で あ り,平 均 値 も健康 人200.2. 的 根 拠 を与 え た.又 臨床 例 を重 ね て 悪 性 腫 瘍 の 生 物. に対 し161.4で. 学 的 診 断 法 と して の意 義 を高 く評 価 して い る.白 血. 準 偏 差 は32.4を 示 し,白 血 病 群 の明 確 な低 下 と伴 定. 病 の 各 症 例 に つ き白 血 球 を純 粋 に分 離 す る こ と は,. す る こ とは や や 困難 の 如 く思 わ れ た.そ. 特 に非 白血 性 の 場 合 実 際 上 多 大 の 困 難 を伴 う もの で. 病 型 別 に分 け てpfotす る とFig 3の ご と くな り,リ. あ る の で,操 作 が 極 め て 簡 易 で あ り,経 時 的 変 動 を. ン パ性 白血 病 で は急 性,慢. 追 跡 す る上 に も患 者 に 負 担 をか け る こ との 少 い本 法. しめ て い る の に対 し,骨 髄 性 白 血 病 は低 値 を示 し,. は臨 床 検 査 法 と して 卓 れ た 価 値 を有 す る と考 え られ. と くに慢 性 型 に お い て全 例 が 健 康 人 対 照 の下 限値 以. る.. 下 に 入 り最 も明 瞭 な低 下 を示 して い る. Szmigielski. 次 に染 色 枝 術 上 の 問 題 と してMc. Nary11)は 血 液. あ った が バ ラ ツ キ が か な り大 き く標. ら20)は本 法 を用 い てAML. こで これ を. 性 共 に殆 ん ど正 常 囲 を 範. 14例,. CML. 18例, CL. 塗 抹 標 本 を脱 亜 鉛 水 中 で 十 分 に溶 血 させ る こ との重. L 4例, Hodgikiu. 要 性 を強 調 して い る.そ. 各 種 細 胞 と くに顆 粒 球 系 細胞 な ら び に末 梢 血 に お け. Carbonic. anhydraseと. 合せ る鉄,あ. の 理 由 と して 赤 血 球 中 の 結 合 す る亜 鉛,血 色 素 と結. る い は こ れ らイ オ ン の組 合 せ な どに よ. ってDithizone顆. 粒 反 応 が 抑 制 され ると考 え,溶 血. 9例 そ の他 に つ い て骨 髄 に お け る. る顆 粒 球 につ い てZinc. Scoreを. 算 定 し,亜 鉛 は 骨. 髄 に お い て後 骨 髄 球 の段 階 で 始 めて と りこ ま れ,細 胞 の成 熱 と共 に次 第 に増 加 す る こ と,末 梢 血 中の 顆. に よ りこれ らの 影 響 を除 去 す る こ とが必 要 で あ る と. 粒 球 は 骨髄 中 の そ れ に比 し約30%高. 値 を示 す こ と,. 考 えて い る.し か し脱 亜 鉛 水 中 に何 度 も浸 す こ とに. ま た 白血 病 の病 型 分 類 で はAMLで. 最 も低 値 を示 し. よ り白 血球 もか な りの 変 性 を受 け る た め必 ず し も美. CMLが. 麗 な 染色 像 が 得 られ な い.そ. か な低 下 を示 して い る の に対 しCLLで. buffy. coatを. こ でBrunner19)ら. は. 用 いて 両 者 の 欠 点 を補 い得 る と して. これ につ づ き何 れ も健 康 人 対 照 に比 し明 ら は む しろ健. 康 人 対 照 よ り高 値 を示 した と述 べ て い る が, ALL. い る.著 者 もこの 方 法 を追 試 す る一 方,呼 気 に よ り. につ いて は全 く触 れ て い な い.著 者 の 成 績 で はAL. 血 液 塗 抹標 本 を溶 血 させ る方 法 を用 い た と ころ両 者. L 7例,. 共 に原 法 に 比 し美 麗 な染 色 標 本 は得 られ る が,赤 血. り増 加 傾 向 は認 め られ な か った が 骨 髄 性 白血 病 と,. 球 の 影響 を完 全 に除 外 し得 な いた めか 再 現 性 に乏 し. リン パ性 白血 病 との 間 に は有 意 の 差 が 認 め られ た.. い う らみ が あ る.ま た実 際 問 題 と して 非 白血 性 白血. この点 に関 して は常 松10)ら も同 様 な 成 績 を得 て 白血. 病 の場 合buffy. 病 の病 型 鑑 別 に役 立 つ 可 能 性 が あ る と して い るが,. の で結 局,原. coatを. 作 る こ と 自体 が 困 難 で あ る. 法 に従 い 脱 亜 鉛 水 に3回 浸 す こ とに よ. り赤 血 球 を 溶 血 しめ る方 法 を用 い た. 2). Mc. Nary法. 2例 のScoreは. 何 れ も正 常 範 囲 に あ. や は り リン パ性 白血 病 は,何 れ もCLLでALLは 含 ま れ て い な い.. に よ る健 康 人 顆 粒 球 亜 鉛 量,な. らび に 白 血 病 患 者顆 粒 球 亜 鉛 量 につ い ての 考 察 正 常 値 は報 告 者 に よ りか な りの 差 が認 め られ る. す な わ ちSzmigielski12)に. CLL. よれ ば178±12.42. (10人). 次 に未 治 療 時Zinc L,. CMLに. Scoreの. 低 下 の 明 らか なAM. つ い て抗 白血 病 剤 に よ る化 学 療 法 を行. っ て寛 解 が導 入 され る に つ れ て, Scoreは. 次第に上. 昇 し正 常 範 囲 に復 帰 す る傾 向 を 示 して い る.ま た逆. 高 杉 ら13)によれ ば175±15.3 (30人)で. 性,年 令 に よ. に再 び臨 床 血 液 所 見 が 増 悪 傾 向 を た ど る時 は ,Zinc. る差 は認 め られ な か った と云 う.杉. 浦 ら17)は試 薬. Scoreも. Dithizone‑acefon‑Water調. 整 後 の 経 過 日数 に よ り. その 染 色 性 に差 異 のあ る こ と を 見 出 し調整 後20日 以 後 の 染 色 液 で は安 定 した 値 を と り203±4.18で た と云 う.さ て著 者 の 成 績 は200.2±18.8で. あっ 杉浦 ら. 再 び低 値 に も ど って い る.こ の傾 向 はAM. Lよ り もCMLに. つ い て よ り明 らか で あ る.本 法 を. 用 い て 白血 病 の 臨 床 経 過 との 間 の相 関 を詳 細 に検 討 した報 告 は他 に ま だ認 め られ な い.そ. こで これ を実. 際 の 白血 病 の 治 療 効 果 の 判 定 に役 立 て るた めTotal.
(7) 白血 病 の 亜 鉛 代 謝 に 関す る研 究 Zinc. Scoreの. Gradeに. み で 比 較 す るの で は な く,こ れ を 各. わ けてplotし"Zinc. Score. Gram"を. い た が これ に よ り治 療 効 果 の 経 時 的変 動 を,よ. り端. 的 に把 握 し得 る と考 え られ る.と. つい. くにCMLに. 4). 描. 191. 好 中 球alkaline. phosphatase値. との相 関 に. ついて 金 属 と結 合 し た 酵 素 は2つ alloenzyme"と"Metal. の グ ル ー プ 即 ち"Met. enzyme. complexes"に. 分. て は左 方 推 移 型 か ら正 常 型 へ の変 化 が明 瞭 に把 え ら. れ る と考 え ら れ て い る24).前者 は 金 属 が 蚕 白 分 子 と 強. れ る.. 固 に 結 合 し完 全 な 酵 素 活 性 の 喪 失 な し に は そ の 蚕 白. 3). 他 の測 定 法 に よ る 白血 病 患 者 白血 球 亜 鉛 量 と. の比 較検 討. か ら分 離 す る こ と は 出 来 な い し,又 金 属 を 除 去 し 得 な い.一. 1950年Gibsonら21)は 性 白血 病4例,単. 骨 髄 性 白血 病10例,リ. 球 性 白血 病2例. ンパ. に つ い て 白血 球 を. 分 離 し,白 血 球 数106ケ あ た りの 亜 鉛 量 をDithizone 抽 出 に よ り化学 的 に 定 量 し た結 果,未 治 療 時 に お い. や か に 結 合 し て い る もの で 金 属 と の 結 合 に 特 異 性 が な く,透. 析 可 能 で あ り前 者 に 比 し は る か に 大 き な 酵. 素 蚕 白 の グ ル ー プ で あ る. 亜 鉛 と 関 係 し た もの で 前 者 に 属 す る 代 表 的 な 酵 素. て は全 例 に お い て 例 外 な く正 常 範 囲 以 下 に低 下 して. はCarbonic. い る こ とを見 出 した.さ. れCO2±H2O〓H2CO3の. らに同 一 症 例 につ いて ウ レ. 透 析 に よ りそ の. 方 後 者 は 金 属 と極 め て ゆ る. anhydraseで. 主 と して 赤 血 球 中 に含 ま 反 応 を 触 媒 しCO2の. タ ン あ る い はX線 に よ り治 療 を受 け た後 は その 値 が. 交 換 に 必 要 欠 くべ か ら ざ る もの で あ る.そ. の他数種. 上 昇 し2例 に つ い て は正 常 範 囲 に1例 で は正 常 値 以. のDehydrogenase,. どが知 ら. 上 に増 加 して い る.さ. れ て い る が 白 血 球 中 のAlkaline‑phosphataseも. らに 治 療 に よ り白 血 球数 が 減. Carboxypeptidaseな. 少 す るに つ れ て 単位 白血 球 数 あ た りの亜 鉛 量 は増 加 し. の 中 に 属 す る.一. 両 者 の 間 に は 逆 相 関 の 存 す る こ と が示 され て い る.. ydraseやAlkaline. ま た1961年Fredricksら22)はCLL L 22例,. ALL. 3例,. MoL. 12例, CM. 12例, AML. 方 人 白 血 球 中 に はCarbonic phosphataseと. 燥 重 量(g)あ た り0.3%の. 7例 につ. 占 め る と 云 わ れ る.こ. 正 常 人 白 血球 亜 鉛 量 に対 す る百 分 比 で表 す とCLL. complexの. CML. 60%,. ALL. 60%,. AML. 95%で 何 れ. も正 常 人 に 比 し減 少 して い る こ と を示 し た.さ CMLに. らに. つ い て は治 療 に よ る 白血 球 数 の 減 少 に伴 い. anh. は 別 に単 位 乾. 亜 鉛 を含 む蚕 白が 存 在 す る. が そ の 量 は 白 血 球 中 に 含 ま れ る 全 亜 鉛 量 の 約80%を. い て 同様 な方 法 に よ り白血 球 亜 鉛 量 を計 測 し た結 果. 50%,. こ. さ てMc. れ は 上 記 のMetal. enzym. 方 に 属 す る も の と考 え ら れ る. Nary法. は その 原 理 か らみて 白血 球 中 に. 含 ま れ る遊 離 の 亜 鉛,あ 較 的 不 安 定 な 部 分,即. るい は蚕 白質 との 結 合 の 比 ら 後 者 を 染 色 し て い る もの と. 白血 球 亜 鉛 量 が 上 昇 す る こ と を確 認 して い る. 一 方Dennesら23)は 放 射 化 分 折 を用 い て 白血 球 亜. 考 え ら れ,. 鉛 量 を 測 定 した 結 果,正 常 人 で は平 均8.9±1.4μg/. 梢 血 白 血 球 に つ い てTotal. 109cellsに 対 し白 血 病 で は0.93±0.08μgと 著 明 な 低. phosphataseと. 下 を認 め て い る,又. リンパ 性 白 血 病 の 白 血 球 亜 鉛 量. に 健 康 人対 照群 に つ い て 両 者 の 相 関 を求 め た が何 れ. は そ の 白 血球 数 と逆 相 関 に あ る こ と を見 出 してい る.. も有 意 の 相 関 が 認 め られ た か っな の は寧 ろ当 然 で あ. これ らの 成 績 を顆 粒 球 のTotal る値 と比 較 す るにScore法. Zinc. で はALLに. Scoreに. よ. つ, CLL. Alkaline. phosphatase中. の亜鉛量 によ. っ て 直 接 に 影 響 を 受 け な い もの と 思 わ れ る.同 Zinc. 一末. ScoreとAlka1ine. を同 時 に 算 定 し得 た 白血 病 例 な らび. ろ う.Fredricks22)ら. は 分 離 され た 白 血 球 に つ い て. 化 学 的 に 定 量 さ れ た 亜 鉛 量 とAlkalie. phosphatase. い て は正 常 群 に 比 し有 意 の 低 下 を認 めて い な いの に. 活 性 値 と を 比 較 し 両 者 間 に 全 く相 関 が 認 め られ な か. 対 し上 記 の方 法 にて 分 離 され た 白血 球 につ いて 計 測. っ た と 云 う.し. す る とむ しろCLL,. み を え ら び 同 一 症 例 の 臨 床 経 過 中 の 変 動 値 も含 め 両. ALLに. て 著 明 に減 少 して い. か る に 著 者 は 白 血 病 症 例 中CMLの. る傾 向 に あ る.こ の 差 違 の 原 因 につ いて はScore法. 者 の 相 関 を検討 した と こ ろ中 等 度 の 相 関 が 認 め られ. で計 測 して い るの は顆 粒 球 中 の 亜 鉛 量 で あ るが,リ. た.. CMLの. 場 合 好 中 球 のAlkaline. phosphatase. ンパ性 白 血病 で は腫 瘍 化 して い るの は リンパ 球 系 で. 値 が 低 下 す る こ とは 極 め て 特 異 的 で 診 断 的 意 義 を有. あ るた め,顆 粒 球 系 細 胞 の み 観 察 し たの で は著 変 が. す る もの と し て 広 く 臨 床 的 に 用 い られ て お り,寛. 認 め られ な い の が寧 了 当 然 か も知 れ な い.又,こ. に 向 い正 常 の 顆 粉 球 系 造 血 が 回 復 す る に つ れ て 正 常. の. こ とは逆 に 白 血 病 患 者 白血 球 減 少 機 序 が 白血 球 の 腫 瘍 化 と密 接 な 関 係 を有 す る こ と を示 唆 す る もの で あ ろ う.. 値 に 近 ず く例 が 多 い と され て い る.一 もCMLに. 方Zinc. お い て 最 も著 明 な 低 値 を 示 し,寛. 解. Score 解 につ. れ て 正 常 値 に近 ず くこ と が本 実 験 に よ り確 め られ た..
(8) 192. 斉. した が って 少 く と もCMLに. 藤. 公. つ い て は この 両 者 間 に. 12.3で 低 下 傾 向 が 最 も 著 明 で あ り, ±29.4で. 有 意 の 相 関 が 認 め られ るの は 偶 然 で はな いであ ろ う. 5). 実 験 白血 病 に よ る検 索. Rauscher. virus接. 男. キ が 認 め ら れ た.ALL及. 種群 で は末 梢 血 中 の 有 核 細 胞. Zinc. (3). 種 後 わ ず か に5日 目位 よ りす で に顆 粒 球. Scoreの. (4). 増殖. nc. 像 が電 顕 に て捉 え られ て い る.そ の 後 脾 の 腫 大 を 始 とす る 白 血病 の 進展 に つ れ てZinc. Scoreは. 治 療 と の 相 関 を み る に,治. 療 に よ り寛 解 へ 導. め ら れ た.. 値 す る.即 ち長 尾 ら25)によ れ ば丁 度 この 時 期 に相 当 virusの. は対 照 群 に比. 入 さ れ る に つ れ 低 値 よ り正 常 値 へ 復 帰 す る 傾 向 が 認. 減少 傾 向 の 認 め られ た こ と は注 目 に. し てす で に脾 の 巨 核 球 内 にRauscher. びCLLに. し有 意 の 低 下 が 認 め ら れ な か っ た.. 数 の 増 加,脾 の 腫 大 な どの 出現 す る以 前 にRauscher virus接. Zinc. Scoreを. Score. 異 るpatternが. 更 に減. 各Grade別. Gram"を. 得 ら れ た.治. に つ れNormal. にplotし. pattern(ピ. 療 に よ り寛 解 に 達 す る ラ ミ ッ ド型)に. 増 悪 に つ れ 再 び 未 治 療 時 のpatternに. virusを. 示 し た.こ. る時 期 がRanscher. virus接. Scoreの. 減 少 し始 め. 種 後15日 〜20日 目 頃 で. の 関 係 はCMLに. 近 ず き,. も どる傾 向 を. お い て 最 も明 瞭 に 捉 え. ら れ た. 2). 非 摘 脾 群 に 比 しや や 遅 延 して は い る が,結 局 非 摘 脾. Rauscher白. 血 病 マ ウ ス に つ い てRauscher. 群 と殆 ん ど同 じ レベ ル に まで 低 下 して い る.こ れ ら. Virus接. の事 実 は顆 粒 球 のZinc. よ り経 時 的 に 計 測 し た.. Scoreの. て"Zi. 作 製 す る に各 病 型 に よ りや や. 少 傾 向 を た ど って い る.剔 脾 を行 った後 にRauscher 接 種 した 群 で はZinc. AMLは165.0. こ れ に つ ぎ低 値 を 示 し た が か な りの バ ラ ツ. 減 少 機 序 が 白血 病. の発 症 な ら びに 進 展 と密 接 な関 連 を有 して い る こ と. 種 後 末 梢 血 白 血 球 亜 鉛 量 をMc. Nary法. そ の 結 果 脾 の 巨 核 球 内 でRauscher し始 る 時 期 に 一 致 しZinc. を物 語 って い る.. Scoreも. に. Virusが. 増殖. 減 少 傾 向 が 始 り,. 白 血 病 の 進 展 に つ れ 急 速 に 減 少 し た.. 5. 1). 結. 論. 3). 岡 大 第 二 内科 に入 院 せ る 白血 病 患 者48例 に つ い て 未 梢 血 中の 顆 粒 球 亜 鉛 量 をMc. Nary法. (1). に. Zinc. よ り計 測 し次 の 結 果 を得 た. (1) 未 治 療 時 に お け るTotal 値 は161±32.3で. 以 上 の 成 績 よ り 次 の 如 く結 論 され る. Nc. Nary法. Score. Gramを. に よ る顆 粒 球 亜 鉛 量 の測 定 時 作 る こ とは 白血 病 の 病 型 の補. 助 診 断(AMLとALLの. Zinc. Scoreの. 正 常 人 対 照(25例)の. 平均. (2). 平 均 値200.2. ±18.8に 比 し低 値 を示 す もの が 多 か っ た.. して,さ. らに治. 白 血 球Zinc. Scoreの. 減 少 機 序 は 白血 病 の. 発 症 な らび に そ の進 展 と密 接 な 関 係 を有 す る もの と. (2) これ を病 型 別 に検 討 す る にCMLは126.2±. Studies. 鑑 別)と. 療 効 果 の 判 定 基 準 と し て 有 用 で あ る.. 考 え ら れ る.. on Zinc. Metabolism. in Leukemia. Kimio Saito Department of Internal Medicine, Okayama University Medical School Okayama, Japan (Director: Prof. Kiyoshi Hiraki) Part. 1.. Estimation. The and animals unknown.. presence has. of Zinc. Score. of Zinc. in living. been. In recent. recognised days,. much. in Granulocytes organisms. since attention. of Leukemic and. 1869. has. its. role. as. an essential. its. metabolism. to the. significance. However, been. given. Patients. by. Mc Nary's nutrient remains of Zinc. Method for. still. plants widely. metabolism.
(9) 白 血 病 の 亜 鉛 代 謝 に関 す る研 究. in. malignant. tumors.. its. clinical. significance.. The. author. tried. The. to. results. study. of. Materials The cases. subjects. of. of. acute. chronic. the. myelogenous. cases. of. leukemia. lymphoma. were. Medicine,. Okayama adult. types. of. between. of. in. Zinc. tion,. selected. the. to. related. and. the. the. Zinc. peripheral. score. and. blood was. results. Zinc. of. these. between. studies. presented. 1) value. The in. 2). On. markedly but. total. the. 3). gave. On. 4). whole. proved. by. was. 5) useful well. It. as 6). has. in. the. estimating. decreased. at. megakaryocytes These. intimately. gram. tended. with time. lapse. to. of. of. results related. the. seem to. to the. s. 2. Internal. total. of. 25. relati. the. amounts. Method.. of. experimental. patients. before. th. mutual. In. addi. leukemia.. while. of diseases, value. of. and. the. average. treatment.. CML. showed. a. 165.0•}29.4. in. AML,. CLL. did. not. show. any. the as. plotting. total. the. frequencies the. normal. pattern. in. of. low. value. rec. treatment.. to. the the. tendency. the. according. to. according. type. of. pattern. before. to. diseases,. as. the. treatment. but. condition. as. Zinc. score. and. types. of. the. the. (AML. peripheral. inoculation time. of. when. blood. Rauscher. Rauscher. advanced,. that. the. decreasing. well. as. to. the. the on im. the. condition. gram. serve. CML.. identifying. leukemia. as. by. a the. Zinc and. score ALL). of. leukemias. virus this. of. total. to. rapidly. mechanism. in. the. began. value. developmt. granulocytes virus,. of leukemia.. Rauscher. Zinc. proliferate. score in. decreased. Zinc. score. in. a as. treatment.. after. suggest onset. the. low. was. approach. in. score. time. and. the. 200.2•}18.8,. a. by. marked. the. the. to. spleen. of the. estimated. Nary.. ALL. there. return most. Zinc. corresponding in. to. that. efficacy. malignant. between. and. we. types. by. improved. somewhat. diagnosis. similarly. and. of. correlations. Mc. of. values.. prepared. tendency. demonstrated. the. were. were. supplementary. deciding. In. mice. 7). a. it. gram,. most to. treatment,. differed. tendencies. been as. leukemic. ytes. while Such. role. score. a. to. score. was. in. followed in. symptoms. pattern. observed. treatment,. aggravated.. Zinc the. Clinic. females. 8 of. (CLL), cases. Second. tthe. by. 5. (AML), 9 cases. group. to. the. 12. development. group. according. variation. find. Conclusion. average,. control. to. follows.. 161•}32.3. score. the. treatment. the. (MOL),. as. study. patients. control. as. in. relationship as. the. score. there. Zinc. the. the. at. Zinc. total. and. healthy low. considerable. level. Looking of. as. from. normal. the. was. 126.0•}12.3. a. studying. to. in. the. of. difference. overing. the. at. value. latter. significant. score. patients. looking low. grade. Zinc. leukemic. Zinc. and. well. and. after. as. Results. to. to. as. onset. leukemia. leukemia. as. males. purpose. leukemic. the. are. 13. course of. cases. admitted. well. clinical. granulocytes studied. all. as. and. follows.. leukemia. lymphocytic. 48. control. score. leukemia. as. myelogenous. monocytic. chronic of. the. acute. of. of. For. total. of. cases. diseases,. selected.. in. presented. Methods.. total. the. metabolism are. cases. 2. the. For. were. correlation. The. as. 26. 2 cases. (EL). University.. persons. onships. (CML),. leukemia. leukemia. of (ALL),. Zinc. studies. and. consisted. leukemia. erythrocytic. healthy. study. lymphocytic. the. these. 193. leukoc.
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