組 織 培 養 法 に よ る栓 球 並 に 紡 錘 状 細 胞 の研 究
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(2) 1618. 浜. 聰. 小 板 様 小 体 と して断 片 的 に記 述 し,教 室 の 角 南16),. を 採 取 し,直 ちに1分 間3,000回 転10〜20分 遠沈し,. 田村22)が骨髄 組織 培 養 に於 け る墨 粒貪 喰 能 及 び生 体. 上 層 の 血 清 を分 離 した.. 染色 につ い ての研 究 で,栓 球 の態 度 を 一 部述 べ てい るに過 ぎ ない.こ の 意 味 に於 て私 は教 室 に 於 け る各. 発 育 促 進 物 質 とし ては 市 販V. ラB12. 100γ)を. B12溶 液(チ ョコ. 用 い た.. 培養 法 を駆 使 して栓 球及 び紡 細 の代 表 的 な 健 康 人栓. 実 験 器 具 は メ ス以 外 は全 て乾 熱 滅菌 した,. 球 並 に 家鶏 紡 細の 運 動,墨 粒 貪 喰能 及 び中 性 紅生 体. 実 験 操作:量. 染 色 に つ き長 時 間 検索 した.. 全 て1ccの. 抑 々人 並 に哺 乳 類 の栓 球 の運 動 に関 す る研 究 は古 く,既 に1865年Schultze62)に. より 行 わ れ てい る.. 彼 は 保 温装 置 を利 用 し,栓 球 をKugelchen(小. 球). 的関 係 を厳 密 にす るた め,添 加液は. ツ ベル ク リ ン注 射 器, 1/2針を使用 した.. 先 づ培 養 組 織を グ レー フ ェ刀で 取 り出し,リ ンゲル 氏 液 中で 充 分洗 い,粟 0.9mmの. と呼 ん で,こ れ が 血 液 中 で凝 集 す る ことを 認 め て い. 粒 大 に 切 る.次 に図の如 く. 厚 さの 良 質 載物 硝 子 上 に 血 済1滴 滴下し,. 培 養 標本 模 型図. る.栓 球 の 明 視野 顕 微 鏡 に よる生 態 観察 は多 く,本 邦 に於 て も安 頭2)の 栓 球 の 運動,凝 集 等 に関 す る報 告 が あ るが,他 の血 球 に 比 し,著 し く小 型 で 薄 い本 細 胞 の 詳 細 な 観 察 は 困 難 で あ り,こ. の意 味で. Fonio45), Sehaeffer60), Bessis35),栗 原14)の 暗 視野 観察 法 は栓 球 の 歴 史 に新 時 代 を 劃 し た とい え る.更 に最 近 に 至 り位 相 差 顕微 鏡 に よる観 察 法 が栓 球 の 研 究 に も導入 され,明 視野 及 び暗 視野 顕 微 鏡 で は不 能 で あつ た 細胞 の微 細 構造 の追 求 が 可能 と な り,栓 球 の 研 究 は 飛躍 的進 歩 を 遂 げ たの で あ るが,こ れ 等 栓 球 の生 態 観察 は既 述 の 如 く,殆 ん ど全 て栓 球 浮游 血 漿 の懸 滴 標 本 に よ り行 われ た もの で あ り,従 つ て 細 胞 の早 期 死 滅,或 は フ ィブ リン網 形成 の ため栓 球 自 体 の運 動 の 長 時間 追 求 は 不 能で あつ た.本 編 に 於 て 私 は健 康 人 の栓 球 の運 動 能 を教 室 考 案 の簡 易培 養 法 を 利用 して,流 血 中 と殆 ん ど同一 の生活 現 象 を 営 ま しめ,こ れ を 保 温 箱 内で 位 相差 顕 微 鏡 に より長 時 間 追 求 した結 果 に つ き報 告 し,諸 賢 の御 批 判 を仰 ぐ も の で あ る.. 直 径1cm位. の 円形 に 拡 げ,そ の中 央 に培 養 組織を. 置 い て,更 に そ の上 に チ ョコ ラB12 1滴 を添加し, 被 覆硝 子 に て覆 い,直 ち に標 本 を裏 返 して孵卵器に 入 れ る. 観察 方 法:観 察 は37℃. に 保 たれ た保 温箱内で標. 本 の 被覆 硝 子面 よ り位 相 差及 び 明 視野顕 微鏡の油浸 第2章. レ ンズ(100×)を. 実験 材 料 並 に 実験 方 法. 用 い て行 つた.な お 位 相差顕微. 鏡 に よ る場合 は 光 源 に よ る標本 の温度 上昇 を防 ぐた 実験 材 料:予 め 信 越化 学製 の シ リコ ンK99の2%. め,断 熱 フ ィル ター を使 用 した.. 石 油 エ ー テ ル溶 液 を,滅 菌乾 燥 した注 射 針,注 射筒,. 第3章. 試 験 管 に塗 布 し, 1時 間 乾熱 滅 菌 器 に入 れ て焼 きつ. 実 験 成 績. け た.次 で この シ リコ ン塗布 注 射 針,注 射 簡 を使 用. 1)運. して 空腹 時 の 健 康 人正 中 静 脈 よ り約10ccの. 栓 球 は 培養1時 間 後 より既 に 多数 増生 帯に出現 し,. 末梢血. 動 形態. を 採 取 し,速 や か に シ リコ ン塗 布 試験 管 に移 し,直. 活 溌 に特 異 な運 動 を 行 う.出 現 数 は時 間 と共に増加. ち に3,000回 転15分 間 遠 沈 す る と,赤 血球 沈 澱 層 の. し,塗 抹 染 色標 本 に 見 る以上 に 群集 傾 向が著明であ. 表 面 に 白 血球 と共 に多 数 の栓 球 を 含 む 灰 白色 の 薄 層. り,数 個 乃 至 数十 個 相 援 近 し て存在 す るが,本 法に. を 生 ず る.上 澄 を 注 意 深 く捨 て去 り,試 験 管 を 静 か. 於 て は,胞 体 が相 互 に接 着 し,或 は突 起を以 て連結. に37℃. の孵 卵 器 に入 れ, 30〜60分 静 置す る と表 層. す る像 は殆 ん どな く,各 栓球 は互 に適 当 の間編を以. は 一 定 の 硬 さに 凝 固す る.こ の 凝固 層 を培 養 組 織 と. て群 集 し てい る. 一 般 に 本細 胞 は他 の血 球 に 比 し 崩壊 し易 い血球 と. す る.上 記 操作 は全 て 無 菌 的 に行 う. 血 清 採 取 は空 腹 時 の 同 一 健 康 人 の 静 脈 血 約10cc. され て い るが,組 織 培 養法 に よ り出現す る栓 球は長.
(3) 組 織 培 養 法 に よ る栓 球 並に 紡 錘 状 細 胞 の研 究 時 間原 形を保 持 し, 24時 間 後 に 於 て もな おか つ 運 動 を持続す る.. 1619. 分け る事 が 出 来 る. 1亜 型:桿 状 或 は 類 円形 を 示す.. 本 法 に よ る栓 球 の生 態像 は塗 抹 標 本 に 於 て 見 る如 き単 純 な形 態 で は な く.無 核 に して 小 型 で は あ るが, 後述 す る如 く相 当複 雑 な各 種 の運 動 形 態 を とる(写 真1).. 2亜 型:. 1本 乃 至 数本 の 細 い突 起を 透明 部 よ り出. 浅 させ,且 つ この 突 起 を左 右 に振 顫 す る もので あ る. 3亜 型:巾 の広 い 透明 な舌 状 の突 起 を 有 し,こ れ を緩 や か に左 右 に振 顫す る.. 栓球 の胞 体 は細 胞 周辺 部 の比 較 的 透 明 な透 明 部 と, 細胞 中 心部 の顆 粒 部 に 分 け る事 が出 来 るが,顆 粒が 極 めて微 細 で均 等 に 細 胞全 体 に 分 布 し,両 者 を区 別. 4亜 型: 2亜 型 と同様 な 細突 起 を 多 数 出没 させ, 恰 も ヒ トデ状 或 は 星芒 状 を 呈 す る. 以 上 各亜 型 は比 較 的速 や か に互 に 可 逆的 に 移 行 し,. し難 い もの,或 は 偽 核 の 如 く顆 粒 が 集 在す る もの 等,. 且 つ 胞 体 の震 顫 運動 と共 に,微 小 で は あ るが 中 心部. 後述 の各 運動 形 態 に よ り異 つ た 分 布様 式 を呈 す る.. は移 動 す る.こ の移 動 は前 型 と異 り,突 起 を恰 も物. 生態 像 に於 け る栓 球 の大 い さに つ き,明 視 野 顕微. を探 り求 め る如 く振 顫 させ,互 に 接 近 し,或 は離 間. 鏡 を用 い て アベ ツ氏描 画 器に よ り,栓 球500個 の 長. し合 目的 な感 を 抱 か しめ る.し か し白 血球 に 見 る典. 径 及 び短径 を夫 々測定 し た 結 果,長 径 は7.326μ 〜. 型 的 な ア メー バ 様偽 足運 動 は認 め な い.. 0.999μ で 平 均3.487μ. ±0.814μ,短. 〜0 .333μ で 平 均2.406μ. ±. 0.879μ で あ つ た. 栓 球に は 白血 球 に 見 る典 型的 な アメ ーバ 様偽 足運 動 は認 め ら れず,極 め て特 異 な胞 体 の変 形 運動,回 転 運動 等 を 見 るが,私 は運 動形 態 を第1図 に 示す 如 く 4型7亜. 型 に 分 類 した(第1. 図). I型:回. 転運 動. 最 も活 溌 に胞 体 の 回 転運 動 を 行 い,且 つ不 規 則 な方 向 に 自動 的 な位置 移 動 を認 め る.こ の位 置移 動は 非 合 目的 で あ り,他 型 に比 し て最 も速 か で あ る.こ の 際,胞 体 は 円盤 状 を呈 し突 起 を 認めず,顆 粒は 極 め て微 細 で 細 胞全 体に 均等 に 分 布 し,細 胞 は 光 輝性 で透 明 に 見 え る. 本型 は培 養 初 期 に 多 く見 ら れ, 時間 と共 に減 少 す る.且 つ 原組 絵 附近 に比 較 的 多 く,増 生 帯 周 辺部 には少 ない. II型:変 形 運動 本 型は 白血 球 に は見 られ ない 栓 球独 特 の運 動形 態 で あ る.即 ち桿状,類 円 形及 び各種 突 起 を 有す る もの に 変形 す る運 動 を な し,不 規 則 な軽度 の位 置 移 動 を 伴 う.本 型 は 更 に次 の4亜 型 に. 径 は5.328μ. I型 に比 し,顆 粒 が 梢 々 粗大 とな り,胞 体 は 中心. 第1図. 栓 球. 運. 動 形. 態.
(4) 1620. 浜. 聰. 部 の顆 粒部 と周 辺 部 の透 明 部 とに 区別 出来,上 記 各. 第1表. 培養後各経過時間に於ける運動形. 種 突 起 は透 明 部 よ りな り,運 動 に 際 し顆 粒 の移 動 を. 態 の比率(%). 伴 う.且 つ 突 起 は硝 子 面 に 附着 す る傾 向 は殆 ん どな く,粘 着 性 の あ る像 は示 さない. 本 型 は 後述 の 如 く全 経過 を通 じ最 も多 数を 占 め る が,培 養 初 期 に比 し,後 期 には減 少 す る.原 組織 附 近 に 多 く,増 生 帯 周 辺 部 に は少 な い. III型:ブ ラ ウ ン運 動様 震 顫 運動 胞 体 が 梢 々膨 大 し て円形 を なす ものに 見 られ る ブ ラ ウ ン運動 様 震顫 運 動 で あ り,位 置移 動 及 び胞 体 の 回 転 は 殆 ん ど認 め な い. 顆 粒 は偏 側 に高 度 に密 集 し,恰 も核 の 如 き像(偽 核)を 示 し,屡 々胞 体特 に顆 粒部 に 円型 乃至楕 円形 の 空 胞 の 形成 を見 る. 本 型 は 培養 初期 に は 少 数 で あ るが,時 間 と共 に 増 加 し,培 養 後 期 には 相 当 数 を 占め る.増 生 帯 の 中間 乃 至 周 辺部 に 多 く,原 組織 附 近 に は僅 少 で あ る. IV型:膜 様 伸展 胞 体 の 透明 部 が 膜 様 に 伸展 し,殆 ん ど運 動 を認 め な い.本 型 は 最 も大型 で,樹 枝状 の太 い 突 起を 形 成 し,胞 体 内に 不 規 則 に 粗大 な顆 粒 の密 集 す る もの と, 胞 体 が比 較 的 類 円 形 で 中心 部 に顆 粒 が集 在 す る もの とが あ る. 神 展部 は硝 子面 に粘 着 し,対 物 レンズ を 挙上 す れ ば特 に鮮 明 度 を増 す. 培 養 初 期 に は 極 め て少 く,時 間 と共 に増 加す る. 又 増 生 帯 の中 心 部 に は殆 ん ど認 めず,周 辺 部に 多 数 存 在 す る. 2)培. 養 後 時間 的経 過 に よる 運動 形 態 の推 移. 培 養 後1, 3, 6, 9, 12, 24時 間 に夫 々原 組 織 よ り 周辺 部 に 向 つ て放 射 線 上 に あ る栓 球200個. の運 動 形. 態 を 分 類 し,そ の比 率 を 求 め た(第2図,第1表).. 第2図. 培養後各経過時間に於ける運動形 態の比率(平 均). 1時 間 後: 主 と し て 原 組 織 附 近 に 多 く,活. 溌 な 運 動 を 行 う.. 図 表 に 示 す 如 く,. I型,. II型 が 大 部 分 を 占 め,. は31.5〜35.5%.. II型 は55.0〜58.5%,. I型. III型, IV型. は 周 辺 部 に 少 数 認 め る に 過 ぎ な い(III型7.0〜9.5%, IV型1.5〜3.0%). 3時 間 後. 1時 間 後 と 同 様 に 最 も活 溌 に 運 動 し,著 運 動,相. 明 な 回転. 当 速 や か な 位 置 移 動 を 伴 う変 形 運 動 を 見 る. (I型21.0〜32.0%,. II型54.5〜59.5).. IV型 は 少 な く,夫. 々10.0〜14.0%,. III型,. 2.0〜6.5%を. 占. め る に 過 ぎ な い. 6時 間 後: こ の 時 期 に 至 れ ば 増 生 帯 の 中 間 部,周. 辺 部 に も相. 当 数 遊 出 し,依. 然 相 当 活 溌 な 運 動 を 行 う.. 13.0〜24.5%に. 減 少 す る が,. 過 半 数 を 占 め, は 周 辺 部,中 19.5%,. 9時 間 後. 間 後 と同様. 示 し た,. III型, IV型. 54.0〜64.5%を. 間 部 に 於 て 梢 々 増 加 し,夫. 7.0〜9.0%を. I型 は. II型 は3時. 占 め た.. 々10.5〜.
(5) 組 織培 養 法 に よ る栓 球並 に 紡 錘状 細 胞 の 研究 略 々6時 14.0%,. 間 後 と 同 様 の 傾 向 を 示 し,夫. 61.0%,. め るが,回. 16.5〜19.5%,. 転,変. 形,位. 々12.5〜. 察 は 困難 で あ り,従 つ て同法 に よ る ものはSabin58),. 5.5〜10.0%を. 占. 置移 動 は相 当 不 活 溌 とな る.. 12時 間 後: I型,. 1621. 杉 山17)等 超生 体 染色 を 利 用 し た研 究 が比 較 的 多 い. Fonio45)は 暗 視野 顕 微鏡 に よ り栓 球 の機 能 に関 し,. II型 は 減 少 し,夫. 56.5%と. な り,. 16.0%に. 増 加 す る.こ. 々9.5〜16.5%. III型, IV型 が18.5〜28. , 46.0〜 .5%,. 10.0〜. の 時期 に は 随 所 に 空胞 形 成 を. 認 め る.. 劃期 的 な 業 蹟 を残 し,更 に本 法 を用 い てSchaeffer60), Bessis35),栗 原14)の行 つ た研 究 は 栓 球 の生 態 研 究 に 多大 の 貢 献 を な した.暗 視 野顕 微 鏡 に よる方 法 は 輪 廓 を明 瞭 にす る点 で明 視 野 法 に比 し遙 か に優 れ た も. 24時 間 後:. ので あ るが,微 細構 造 の観察 に於 て は電 子 顕 微 鏡及. I型 は6.0〜13.0%,. II型 は31.0〜45.5%に. し, III型, IV型 が27.5〜36.0%,. 減少. 14.0〜27.0%に. び次 の 位 相差 顕 微 鏡 に よ る方法 には 及 ば ない.. 増. 位 相 差 顕微 鏡 に よ る血 球 の微 細 構造 の研 究 は血 液. 加す る.し か し この 時 期 に 於 て もI型II型 の胞 体 の. 学 の 分野 に新 しい 進 歩 を も た らした.本 法 に よ る. 破壊 は極 めて少 く,殆 ん ど原形 を保 つ が, III型, IV. 栓 球 の 観 察 は 近 年 多 くの学 者 に よ り行 われ,就 中. 型 には空 胞 形成,硝 子面 へ の粘 着 に よ る破壊 像 が多. Zucker68), Bessis35)36),森 田31),神 前15)等に よ り栓. く認 め られ る.. 球 の 運動,凝 集 に関 す る詳 細 な報 告 が あ り,生 態 観. 即 ち培 養 に よ り出現 す る栓 球 は1乃 至6時 間 後 に 於 て最 も活 溌 な運 動 を 認 め, I型,. 察 法 で は本 法 が 最 も優 秀 な方 法 とい う こ とが 出来 る.. II型 が過 半 数 を. 扨 て生 態 観 察 に於 て最 も望 ま しい のは 生体 内生 活. 占 めるが,時 間 と共 に 次 第 に減 少 し,初 期 に は極 め. 栓 球 と同 じ状 態 で観 察 す る事 で あ り,従 来 の血 液学. て少 数で あ つたIII型, IV型 は9時 間 後 頃 よ り増 加 し,. 者 も この 目的 の ため に種 々の 方法 を試 み て来 た の で. 特に24時 間 後 に於 ては両 者 で半 数 以 上 を 占 め るに 至. あ る が,上 記 の方 法 に よ る観祭 は全 て 伸展 或 は 懸滴. る.. 標 本 に よ る もので あ り,長 時 間 の観 察 は 細胞 の 死滅 の た め不 能 で あ り,固 有 運動 の外 に 血漿 の流 動 に よ 第4章. 総括並に考按. る他 動 運 動が 極 め て多 く,両 者 の 区別 が困 難 で あ る.. 抑 々人 並 に哺 乳 類 の栓 球 の形 態 学 的研 究 に 従 来 塗. 又 栓 球 浮游 血 漿 の 懸 滴標 本 は フ ィプ リ ン網 形成 のた. 抹 染色 法,生 態 の 明 視野,暗 視 野,並 に 位相 差 顕微. め,栓 球 自体 の固 有運 動 の長 時間 追 求 に は不 利 で あ. 鏡 に よ る方法 及 び 電 子 顕微 鏡 に よ る方法 等が 用 い ら. る.こ の 意 味 に於 て 組織 培 養法 は生 体 内 に於 け る と. れ た.. 全 く同 一 の生 活 現 象を 営 まし めて 観 察す る こ とを 目. 先 づ 塗抹 染 色 標 本 に よ り栓 球 の 形 態 を 系統 的 に追 求 した のは 比 較 的 新 し く, Jurgens51)(1937)が. 正. 常及 び病 的栓 球 の 分類 を 試 み た の に 始 ま り,本 邦 に. 的 と した理 想 的 な生 態 観 察法 とい う こ とが 出来 る. しか し従 来 の 被 覆 培養 法 は特 に小 型 で あ る栓 球 を対 称 とす るには そ の 観 察は 困 難 で あ る.. 於 て も山 尾32)の報 告 が あ るが,勿 論 これ 等 固定 標 本. 教 室 考 案の 簡 易培 養 法27)は位 相 差 効果 を挙 げ得 る. で は 自然 の 形 態 に比 し単 純 化 され,且 つ 運 動能 の観. と共 に,培 養 操作 が簡 易 で あ り,フ ィプ リン網 形 成. 察 は不能 で あ つた.. が な く長時 間栓 球 の固 有 運動 の 詳 細 な観 察 が可 能 で. 最 近Wolpers. et Ruska66)に. 始 ま りBessis34),. あ る.以 下 私 の試 み た 新生 態 観察 法 に よ る成 績 を も. Braunsteiner38) 39), Robertis57)等 に よつ て確 立 され. とに し て,栓 球 の運 動 形 態に つ き,文 献 を参 考 と し. た電 子顕微 鏡 に よ る栓 球 の観 察 で は 形 態学 特 に そ の. て述 べ る.. 微 細構 造 に対 す る 寄 与 は大 な る もの が あ る が,本 法. 先 づ 栓 球 の大 い きに関 す る報 告 は極 め て 多い が,. はそ の操作 に於 て 試 料が 真 空 中 で 高 熱 に熱 せ られ,. 殆 ん ど全 て 塗抹 標 本 に よ る計 測で あ り,特 に山 尾32). 甚 だ し く栓 球 を 傷害 す る欠 点 が あ り,前 法 と同様 栓. は健 康 人栓 球 の 数 及 び形 態 に関 す る論 文 で その 大 い. 球 を薪 鮮 な状 態 で観 察 す るの に は不 適 当 と云わ ざ る. さに つ き多 くの報 告を 引用 して詳 細 に述 べ てい る.. を得 ない.. 即 ちJurgens51)の. 生 の栓 球 の 明 視野 顕 微 鏡 観 察 法 はSchultze62)以 来数 多 くの学 者 に よ り行 わ れ,主. と して そ の凝 集 に. 分 類 に従 い 栓 球 を 分 類 し, 2μ. 以 下 が 大部 分(68%)を. 占 め5μ 以 上 は極 め て稀 で. あ ると し,更 にAfanassiv,. Degkwitz,. Stahl等 の. 関す る報告 が あ り,本 邦 に 於 て も安 西2)の 貴 重 な研. 成 績 と比 較 してい るが略 々同 様 の結 果 を 示 し てい る,. 究を見 る,し か し本 法 では 無 色 で薄 い栓 球 の構 造 観. 又Bessis35)は2〜5μ,稀. に20μ の 巨 大 形 が あ る.
(6) 1622. 浜. 聰. と報 告 して い るが,私 の生 態像 計 測 に よ る成 績 では. 位 置 を変 化 し,更 に 伸展 して休 止 型 に至 る.更 に位. 平 均2.406〜3.489μ. 相 差 顕微 鏡 に よ り循 環 型,樹 枝 状 型,拡 大型及び巨. で あ り,従 来 の 塗 抹 標 本 に よ. る成 績 に比 し大 き く,略Bessisの 1865年Schultzeが. 値 と一 致 した.. 始 め て栓 球 が 凝 集 す る事 実 を. 記述 し て以 来,栓 球 の凝 集 能 に 関す る報 告 は 多 いが, そ の 運動 を詳 細 に 追 求 した の はFonio45)に. 始 ま る.. 大 型 に分 け,各 型 は可 逆 性 で あつ て変 性 とは考 えず 一つ の機 能 相 と考 え た . Zucker68)は シ リコ ン樹脂 塗 布 を行 つ た採 血器具を 用 い静 脈 血 を と り,懸 滴標 本 を作 成 し,位 相差顕微. 彼 は栓 球 浮 游 血漿 を暗 視 野 顕 微 鏡 に よ り観 察 し,栓. 鏡 に よ り栓 球 の運 動 形 態 を観 察 し,回 転運動 をする. 球 の 凝集 を追 求 す る と共 に,運 動形 態 を 刺戟 型 と休. 円盤 型,延 長 型,伸 展 型 及 び長 い 突起 を有す るもの. 止 型 に 分け た.即 ち 前老 は活 溌 に動 き,蜘 蛛 の脚 の. の4型 に 分類 し,各 型 の可 逆 性 を強 調 いてい るが,. 如 き突 起 を有 し,粘 着及 び貪 喰 を 認 め,後 者 は突 起. 大体Fonio,. Bessisの. 分 類 に 準 じて い る.. を 有 せず,顆 粒 が 中 心 に あ り一般 に動 か ない.又 凝. 森 田31)は栓 球 の系 統 的 な研 究 の一 部 として,そ の. 固 阻 止剤 を加 え る と一定 の間 隔 を 以 て離 れ,胞 体 の. 運 動 形 態 を追 求 した.即 ち栓 球 浮游 血漿 の懸滴標本. 密 着 す る ことが な い こ と も観 察 して い る.. を位 相 差 顕微 鏡 に よ り観察 し,ほ ぼ 球形 を呈す るI. Schaeffer60)は3.8%ク え,静 脈 血2.0ccを. エ ン酸 ソーダ0.4ccを. 加. と り, 1時 間 放 置 し て生 ず る栓. 球 層 を暗 視野 顕 微 鏡 に よ り観 祭 し,栓 球 は鳩,蛙 の 紡 細 と同様 突 起 を 有す る こ とを 報 告 し て い る.. 型,ヒ. トデ或 は蜘蛛 の 如 き突 起 を有 す るII型,や や. 胞 体 が 膨 大 し,顆 粒 が 一方 に偏 在 したIII型,膜様に 伸展 したIV型 の4型 に 分類 した. 以 上栓 球 の運 動 に 関す る代 表的 な研 究 の概略 を挙. 栗 原14)は耳 朶 穿 刺血 液 及 び胸 骨髄 穿刺 液 の小 滴 を. げた が, Fonio以. 来 多 くの 学者 は何れ も栓球 の運動. そ の まま直 ちに 載 物硝 子に と り,被 覆 硝 子 で覆 い,. 能 を 認 め てお り,そ の運 動形 態を 大別 して,各 種突. ワセ リン に て封 じて,暗 視 野 顕 微鏡 に よ り観 察 した,. 起 を 有 して運 動 を行 うFonioの. 彼 は栓 球 を次 の5型 に分 類 した.即 ちI型 は恰 も尿. を 有 せ ず 円形 を 呈す る休 止 型,更 に膜 様に伸展 した. 酸塩 の集 合 の如 く単 に微 細顆 粒状 の物 質 か ら な り,. Bessisの 樹枝 状 乃 至 拡大 型 の3型 に 分け る事が出. 細 胞 膜,透 明 質 鞭 毛(突 起)を 認 め ない. II型 は 血. 来 る.し か し,こ れ 等 の 実験 は既述 の 如 く何れ も生. 小 坂 球(栗 原),偽. 足,鞭 毛 を 有 し,細 胞 の中 心 部. 活栓 球 が将 に 死 せん とす る状 態 に於 て断 片的に短時. は顆 粒質 よ りな る. III型はII型 の鞭 毛 を欠 除 す る も. 間 観察 し たに過 ぎ ない.従 つ て個 々 の運 動形態に関. の で あ る. IV型 は血 小 板 球 を有 せ ず,多 数 の 鞭 毛 を. す る詳 細 な追求 は殆 ん ど見 られ ず,且 つ 各観察に於. 有 し,星 形 を呈 し,偽 足 を 有す る もの で あ る. V型. け る標 本 作成 時 よ りの 経過 時 間 が不正 確 で一定せず,. は透 明 質 と円形 顆 粒を 有 す る球 状 体 を呈 す る.各 型. 科学 的 な分類 とはい い 難 い もの が あ る.. は互 に 移行 す るが 遊 走 速 度 は小 で あ り,且 つ 自 然標 本 で は 約1〜2時. 間 迄 は生 々 と して い るが, 3時 間. 所 謂 刺 戟型,突 起. 組 織 培 養 に よ り栓 球 の 運 動 を 観察 した報告は前 原28)に見 るのみ で あ るが,彼 は 巨核球 よ り分離する. 以 後 は機 能 が低 下 す る と報 告 した.彼 のい うII型,. 血 小 板 様小 体 に つ き観 察 し,培 養 基 の状態 により僅. V型 はFonioの. か に 分 子様 運 動 を行 うが,固 有運 動 は認め ていない.. 刺 戟 型 に 相 当 し,他 型 特 にIII型が. 私 は 組織 培 養 に よ り栓 球 に運 動 能 を認 め ると共に,. 休 止 型 に相 当す る もので あ る と考 え られ る. 安 西2)は 栓 球 浮游 血漿 の1滴 を と り, 36℃. で明. 視 野 顕 微 鏡 に よ り観 察 し,他 動 運 動 と共 に 自動 連 動. 運 動形 態 を次 の4型7亜. 型 に公 類 した.本 法に よる. 私 の分 類 は最 も生 活 栓 球 に類 似 した状 態に於 て詳細. を認 め,分 子 様,回 転,移 動,突 起 の 伸縮 運 動 に 分. な 観察 が 可 能 で あ り,更 に各 運 動形 態 の時間的 な推. け,回 転 及 び 移動 は小 型,中 型 に 多 く,大 型,桿 状. 移 の追 求 が 出来 るた め,従 来 の報 告 に比 し更に適確. 等 に は 少 な く,且 つ 栓 球 の 運動 は 凝 集 を促 進 す る一. な もの で あ る と考 え られ る.. 要 因 と して い る.. I型 は 円盤 状 を な し突 起 を 有せ ず最 も活溌 に回転. Bessis35)36)は暗 視野 及 び 位 相差 顕 微鏡 を 利 用 し て. 運 動 を行 う,本 型 は流 血 中 に あ る栓 球の とる運動形. 懸 滴 標本(凝 固 阻 止 を施 し た静 脈 血)に よ り栓 球 の. 態 で あ り,培 養 初 期 に多 く1時 間 後 では約30%を 占. 運動 を追 求 し,ア メ ー バ様 運 動 を否 定 して い る.彼. め るが時 間 と共 に減 少 し, 24時 間 後で は約10%と な. は暗 視 野 顕 微 鏡 で栓 球 の種 々 相 を図 示 して い るが,. る. I型 の 形態 はFonioの. 円 形 乃 至楕 円 形で 内部 に 不動 の顆 粒 を有 す る もの は. で あ るが,彼 の 所 謂刺 戟 型 に 類 似 した運動 をする.. 直 ち に変 形 し, Fonioの 刺 戟 型 とな り,そ の 形及 び. II型 は栓 球 系 細 胞 の代 表 的 な運 動 形態 である.即. 休 止 型 に相 当するもの.
(7) 組織培養法 による栓 球並に紡錘状細胞 の研究 ち アメー バ様偽 足 運動 はBessis35)の. 指 摘 せ る如 く. 1623. 事 を 認 め てい る.こ れ と同 様 に私 の 分 類 した栓 球 の. 認め られ ず,特 有 な 胞体 の変 形 運 動 を呈 し,桿 状 或. 運 動 形 態I,. は類円 形, 1本 乃至 数 本 の 細突 起,巾 の 広い 突 起,. 少 す るが,逆 にIII, IV型 は 初 期 に少 く,時 間 の経 過. II型 は培 養 初 期 に 多 く,時 間 と共 に 減. ヒトデ 状 乃至 星芒 状 の 如 く多数 の 細突 起 を有 す る も. と共 に 増 加す る もの で,こ れ は 前者 が 後者 に 比 して. の等 の4亜 型 を 可逆 的 に 移行 し,且 つ これ等 突 起 を. 機 能 の 活 溌 な事 を示 して い る.. 恰 も物 を探 る如 く振 顫 しつ つ不 規 則に 位 置移 動 を行 う.本 型 が全 経 過 を通 じ常 に最 も多 く約50%を 6〜9時. 間で 最 高値 を 示 し,以 後 次 第 に 減 少 し, 24. 時間後 で は約40%と. な る. II型 にFonioの. 第5章. 占め,. 刺戟型. に相 当す る もの で あ る と考 え られ る.. 結. 論. 健 康 人栓 球の 運 動 形態 を 教 室 考案 の 簡 易培 養 法 に より検 索 し,次 の 結 論 を得 た. 1)人. 栓 球 の簡 易培 養 法 は 位相 差 顕 微鏡 を 使 用 し. III型は やや 胞 体 が膨 大 し,顆 粒 が恰 も核 の 如 く集. て,長 時 間詳 細 な観察 が可 能 で あ り,従 来 の 観 察法. 在 し,軽 度 の ブ ラ ウン運 動 様 振 顫 運動 を 示 す.初 期. に比 し生 体 内 の栓 球 に 近い 状 態 で運 動 形態 を把 握 出. では極 めて 少 く10%前 後 に 過 ぎな い が次 第に,増加 し,. 来 る.. 24時 間後 で は約30%と. な る.本 型 はII型 と次 のIV型. の 中問型 で あ り, Fonioの 休 止 型 に 一致 す る. IV型 は膜 様 に 伸展 して 硝子 面 に 粘 着 し,運 動 は 認. 2)栓. 球 の 大 い さ は 平 均 長 径3.487μ,短. 3)栓. 球 の 運動 形 態 を 回 転 運 動(I型),変. め ない.本 型 の突 起 はII型 の それ とは 異 り,太 く樹. 動(II型),ブ. 枝 状を呈 し硝 子面 に 粘 着 す る. III型と同様 培 養 初 期. 伸展(IV型)の4型7亜. には約10%に 過 ぎ ない が 次 第 に増 加 し, 24時 間 後 で は約20%と. な る.本 型 はFonioの. 休 止 型, Bessis. の樹枝 状 乃至 拡 大 型 に相 当す る. 即 ち複雑 怪 奇 な栓 球 の運 動 は 上記4型 に 分類 出来, 而 も各 運動 形 態 は 夫 々細 胞 機 能 の異 つ た もの で あ る. 径. 2.406μ で あつ た.. 4)各. ラ ウ ン運動 様 震 顫運 動(III型),膜. 形運 様. 型 に分 類 した.. 運 動 形 態 を示 す栓 球 は夫 々異 つ た機 能 を 有. し, I型,. II型 は培 養 初 期 に 多 く,時 間 の 経 過 と共. に減 少 す るが,逆 にIII型, IV型 は 初 期に 少 く,時 間 と共 に 増加 し,前 者 が 後者 に 比 して機 能 が活 溌 な 事 を示 して い る.. と考 え.られ る.従 来 の実 験 方 法 で は長 時 間 の 追求 が 困難 で あ るため,栓 球 の各 運 動 形態 を時 間 を 追つ て 観察 した報 告 は 見 られ ない,従 つ てそ の 分類 は単 な る栓球 の形 態 の 分 類 に過 ぎず機 能学 的 裏 付 け が ない とい え る.組 織 培養 に於 け る時 間 の経 過 と細 胞 の機 能に 関 し ては教 室 亘理33),角 南16),田 村22),小 野8), 大亀7),十 川18)が各種 培 養 法 に よ り夫 々 白血 球 の遊 走速 度,墨 粒貪 喰 能,生 体染 色 の 観点 よ り検 索 し, 白血 球 機能 は培 養 初 期 に 活溌 で,後 期 に は低 下 す る. 擱 筆 す るに 当 り終 始 御懇 篤 な る御 指 導 と御 校 閲 を 賜つ た 恩 師 平木 教 授 並 に角 南 講師 に深 甚 な る謝 意 を 表 す. (本論 文 の 要 旨は 昭 和32年 度 第19回 日本 血液 学 会 総 会 に 於 て発 表 した) (文. 献. 後. 掲).
(8) 1624. 浜. Studies. on Platelets Part. 1.. 聰. and. Motility. Spindle. Cells. of Platelets. by Tissue. in Normal. Culture. Persons. By Satoshi Hama Department of Internal Medicine Okayama University Medical School (Director: Prof. Kiyoshi Hiraki) With author. the. the. movement. of. platelet. 3). The. movement. for. of. the in. On are the. of a. living. in. the. Hiraki. (peripheral. tissue. longer. Clinic. blood). makes of. specimens. like. in. longer. culture period. stretch. more of. author I,. Platelets. numerous time.. or. in. of. Internal. normal. Medicine. persons. and. the. obtained. time and. it. possible. than also. to. with it. observe. in. conventional. makes. detail. method. possible. to. grasp. the. of the. the. pattern. vivo.. diameters. classifed the. somewhat. 4). of. method. average. type. grade. devised. platelets. of. living. platelets. of. platelet. is. 3.487. ft. and. that. of. shorter. 2.406ƒÊ.. namely,. IV. simple. movement The. diameters. of. platelets. specimens. 2). method. motility. results.. This. droplet. simple. the. following 1). of. routine. studied. the. the. rotating like. Brown's. showing. early. contrary. fewer. in. the. former. is. more. and. the. those. platelets. active. stage than. type. platelets. of. culture. increase that. type the. having whereas. of. IV,. patterns. the. latter.. with. lapse. of. trembling. body.. accordingly type. I. number. pattern. 7 subtypes;. III,. entire. the in. and. type. have of. the. types. cell;. stretching. decrease movement. 4. of. movement. they. along the. into. deformation. of. possessing. but. movement. II, and. different. stage. early. type. movement;. such. functions; the. patterns. movement;. and with. of time;. the and. different II the types the. are. more. lapse III. of and. function.
(9) 組 織 培 養法 に よ る栓 球 並に 紡 錘状 細 胞の 研 究. 浜. 論. 写. 文. 附. 図. 真1. 健 康 人栓 球 の種 々相(末 梢 血 培養)(15×100). (a)運 動 型I型,. (b)運. 動 型II型. II型及 びIV型. 及 びIII型. 1625.
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