赤痢菌の代謝に関する研究第2篇
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(2) 164. 松. 溜 水 に 溶 解 し,. HCl又. はNaOHに. 浦. よ りpH. 慶. 第2表. 之. O2消 費 に 於 け る二 基 質 の 相 互 作 用(B). を 修 正 し て 用 い た . 生 菌 浮 游 液:前 M/50燐. 報8)と. 酸 緩 衝 液(0. 同 様 操 作 で 洗 滌 し,. .85% NaCl加)に. 浮 游 し,. 菌 量 は 光 電 比 濁 計 に よ り決 定 し た . 呼 吸 量 測 定: amino酸. Warburg検. の 分 析:. 圧 計9)に. amino酸. chromatography10)に. amino酸. の 定 性 はpaper. よ つ た. 量 は 精 度 が 低 い た め,. .こ. spotの. 剤 と し て はn‑butanol・acetie. 大 き さ よ り. acid・water. 飽 和phenolを. ninhydrine反. の 分 析:そ. phenylhydrazineに そ の2,. 開 (4:. 適 宜 用 い ,発 色 は. 応 に よつ た. keto酸. .. の 定 量 は2. , 4‑dinitro. よ る 比 色 法11),同. 定 は. 4‑dinitrophenylhydrazoneのpaper. chromatography12)に. よ つ た .. 用 い る 実 験.前. で 実 施 し,分 又P32量. れ に よ る定. 量 の 概 略 を 判 定 す る に 止 め た .展. 1:2),水. P32を. よ つ た .. 報 と全. く同 様 の 操 作. 画 はSchneider法13)14)に. はGeiger計. 数 管 に よ る2分. 菌 液(湿. 菌 量10mg). 0.3cc,全. 量3.0ccと. 2.0cc,基 す る,. pH. 質(終 7.2,. 濃 度10‑2M) 1hr.. よ り, 間 の カ ウ. 第3表. O2消 費 に 於 け る二 基 質 の 相 互 作 用(C). ン ト数 と し て 表 わ す こ と と し た .. Ⅲ. 実 験 成 績 第1表. O2消. 費 に 於 け る二 基 質 の. 相 互 作 用(A). 菌 液(湿. 菌 量10mg). 0.3cc,全. 量3.0ccと. 2.0cc,基 す る,. 質(終 pH. 7.2,. 濃 度10‑2M) 1hr.. 菌 液(湿. 菌 量10mg). 0.3cc,全. 量3.0ccと. 2.0cc,基 す る,. 質(終 pH. 7 .2,. 濃 度10‑2M) 1hr..
(3) 赤 痢 菌 の 代 謝 に 関 す る研 究. 第4表. O2消. 費 に於 け る二 基質 の. 165. 第5表. O2消. 相 互 作 用(D). 菌 液(湿. 菌 量10mg). 0.3cc全. 量3.0ccと. 相 互 作 用(E). 2.0cc,基 す る,. 質(終. pH. 7.2,. 濃 度10‑2M). 菌 液(湿. 菌 量10mg). 0.3cc全. 量3.0ccと. succinate同. 呼 吸 に 於 け る二 基 質 の 相 互 作 用. き 検 討 し た.二 い が,こ. 費量 に 現 われ る影響 に つ. 基 質 の組 合 せ の数 は極 め て 多. ゝで は そ の うち の 幾 種 か を 選 び 実 験. す る こ と と し た.即 flexneri 〜5表. 1,. ちSh.. dysenteri. 3,. Sh.. Sh. flexneri 3を 供 試 菌 と し,第1. 合 を 表 中 太 字 を 以 て 表 わ す こ と と し た.こ. 時 添 加 の 際 む し ろO2消. 3に. tryptophane,. 上 述 の 如 くsuccinate,. citrate, lysineの 組. 3,. Sh. Sh .. よ る影 響 を 見 る 7.0. 近 に 於 て 認 め られ た .. 次 に この 組 合 せ に 於 け る呼 吸 促 進 機 構 を う か が う 目 的 か ら,供 aspartate,及. と こ ろ 第2図. 試 菌 三 種 に つ きsuccinate,. びsuccinate,. しincubation後,. こ と,或. 於 てaspartate,. 同時 に. に 示 す 如 く 促 進 率 の 最 大 はpH. 長 をpaper. flexneri 3に. aspartateを. 於 て は 呼 吸 促 進 が 見 ら れ,. こ の 呼 吸 促 進 作 用 のpHに. 合 せ に よ る呼 吸 促 進 が 他 菌 に 比 し顕 著 で あ る はSh.. の相 互作 用. 添 加 す る こ と に よ り, Sh. dysenteri. 般 に各 菌 共 同一 組. tyrosine,. れ ら は い ず れ も注 目す べ き. succinateとaspartate間. に,第1図. に 菌 に よ る 差 異 も 見 ら れ, Sh. dysenteri. histidine,. 2.. 〜7 .5附. 於 てsuccinate対tartarate,. 費 阻害 が. の 興 味 あ る も の に つ き 以 下 検 討 す る.. れ. 合 せ に 於 て 促 進 作 用 の 認 め られ る場 合 が 多 い が,中. 1hr.. flexneri 3に 於 て は 逆 に 呼 吸 阻 害 が 認 め ら れ る.. 吸促 進 的相 互作 用 を示 す場. ら の 表 に 見 ら れ る 如 く,一. 濃 度10‑2M). 7.2,. 上 に 表 示 し た 種 々 の 組 合 せ の 中 よ り二,三. flexneri 1に. に 示 す 如 き 基 質 の 組 合 せ に 於 てO2消. 費 量 を 測 定 し,呼. 質(終. pH. 点 で あ る.. 先 ず 種 々 の組 合 せ の 二 基 質 を 同 時 に 菌 に 添 加 し た 場 合 のO2消. 2.0cc,基 す る,. 1hr.. 見 ら れ る こ と,こ 1.. 費 に 於 け る二 基 質 の. medium中. chromatographyに. glutamateを. 添加. のamino酸. の消. よ り検 討 した. に 示 す 如 き 結 果 を 得 た .即. ち.
(4) 166. 松. 第1図. aspartate,. succinateの. 浦. 相 互 作 用 とpH. 慶. 之. に認 め るに す ぎな かつ た. succinateを 3,. 基 質 と し た 場 合,. Sh. flexneri. 1で. (NH4)2SO4)に flexneri. 液(湿. 0.3cc,. 菌. 1:. 量10mg). 2.0cc.基. 37.5℃,. 質(終. 2:. 3に. 菌 液(湿 succinate,. 3. と す る,. amino酸. Sh.. 於 て は 促 進 が 認 め ら れ な い(第6. NH4+のO2消. のpaper. 菌 量10mg). 0.3cc NH4+(終. aspartate+. succinate. 第2図. は. 費促 進作 用. 濃 度10‑2M). 1hr.. aspartate,. (NH4Cl,或. よ り 呼 吸 が 促 進 さ れ る が,. 第6表. 菌. はNH4+. Sh . dysenteri. pH. 2.0cc.基. 質(終. 濃 度10‑2M) 7.2,. chromatograph. 濃 度10‑2M). 0.3cc,全. 37.5℃,. 量3.0cc. 1hr.. 表).而. し て この 際 の反 応 生. 成 物 を 検 索 す る と,第2図 ま と め て 示 し た 如 dysenteri. 3,. Sh.. く,. Sh. flex. 於 て は これ が 認 め ら. れ な か つ た.以 flexneri. 1で. glutamate. の 生 成 が 認 め ら れ, 3に. Sh.. flexneri. は 著 明 なaspartate,. neri. に. 3で. 上 の 如 く, Sh.. 〓. はaepartate. glutamateの. 反 応 の 起 り難 い. こ と が 推 定 さ れ た. 菌 液(湿. 菌 量20mg). (終 濃 度M/50) pH. 7.2,. 展 開 剤: 発. 2.0cc,基. 0.5cc,全. 37.5℃, n‑ブ. 色:ニ. 質(終. 濃 度M/50)各0.5cc, NH4+. 量3.0ccと. 次 にSh.. す る.. succinate,. 1hr.. タ ノ ー ル ・醋 酸 ・水(4:1:2). flexneri. 3に. aspartateを. し た 際 のO2消. 基 質 と. 費 の 時 間 的 変. ン ヒ ド リ ン 反 応.. 化 を 見 る に 第3図 Sh. dysenteri tate,. 3,. Sh.. glutamate単. 又 基 質amino酸. flexneri. 1に. 於 て はaspar. は 殆 ん ど 検 出 さ れ ず.. 基 質amino酸. 同 時 に 添 加 す る こ と に よ り, の 消 失 は 著 明 と な り,代. と し て 夫 々glutamate,. れ に 対 しSh.. て はaspartate,. succinate同. incubation後. のmedium中. flexneri. 加 の 場 合 に 比 しO2消 が 見 ら れ る が,そ. 3.. れ 以 後 曲 線 は 漸 次 立 ち 上 り,. 3に. 於. 時 添 加 の 場 合 に にglutamate. 質. と し てtartarate,. citrate,. histidine,. lysineな. ど を 単 独 で 添 加 し て もO2消. tryptophane,. 発 生 共 に 認 め ら れ な い に 拘 ら ず, pyruvata.或. succinateに. はO2消. 生 成 を わ ず か. pyruvate,. の 相 互 作 用. 赤 痢 菌 に 於 て は,基. の 生 成 は 殆 ん ど 認 め ら れ ず,又glutamate, 於 て もaspartateの. 費 は む しろ 減 少 す るの. tartarateとglucose, succinate間. 謝 産 物. aspartateのspotが. 検 出 さ れ た.こ. く,. 呼 吸 促 進 的 作 用 の 出 現 が 認 め ら れ た.. の 消 失 も わ ず か で あ つ た.然. る にsuccinateを. の 如. 120´ 頃 迄 は 両 基 質 同 時 添 加 に 於 て は 各 単 独 添. 独 添 加 の 場 合 に は 代 謝 産 物. と し て の 他 のamino酸. も,. つ き,. はsuccinateと. tyrosine, 費,. CO2. glucose,. 共 に 添 加 す る 際 に. 費 の 著 明 な 増 大 が 見 ら れ る .こ. の 種.
(5) 赤 痢 菌 の 代 謝 に 関 ず る研 究. 第3図. 菌 液(湿. 菌 量10mg). 各0.3cc,全 1:. 第5図. 呼 吸 量 に 対 す るaspartate, succinateの. 20cc,基. 対 す るSMの. 質(終. す る,. 2:. succinate,. 濃 度10‑2M). pH. 7.2,. 37.5℃. 3:. aspartate +. 菌 液(湿. 菌 量10mg). 0.3cc,. SM(修. pH. の 組 合 せ の 二 基 質 間 の 相 互 作 用 を 検 討 す るた tartarateを. 代 表 と し,. 供 試 菌 と し て 二,三 先 ずtartarateに. 2.0cc,基. 質(終. 濃 度10‑3M). 濃 度10‑2M). 0.2cc,全. 量3.0cc. 第4図. 37.5℃. 2:. 1.. succinate. tartarate. +. 各 基 質 は20´. 進 率 の最 大. 近 に 認 め ら れ た. tartarateのO2消. 7.2, SM,. succinate, +. 1´:. tartarate,. succinate. 2´: succinate. SM. 体 内 へ の 浸 入 を 充 分 な ら し め る 如 く 注 意 し,. の 如 く促 進 作 用 は. 囲 で 見 ら れ,促. + +. 3を. よ る 呼 吸 促 進 作 用 のpHに. か な り広 いpH範 6.5附. Sh. dysenteri. 実 験 を 行 つ た.. よ る 影 響 を 見 る に,第4図. はpH. 費 促進 作 用 に 影響. と す る. succinate. め,. tartarateのO2消. 相 互 作 用. 量3.0ccと. aspartate,. 167. 費 促 進 作 用 とpH. 後 に 添 加 す る こ と と し た.こ. の. 実 験 結 果 よ り, tartarateの. 呼 吸 促 進 作 用 は. SMに. つ て 適 応 酵 素 の生. よ り阻 害 さ れ ず,従. 成 は 関 与 し な い と 推 定 さ れ た.こ. の実 験 は. citrate,. histidine,. tyrosine,. lysineに. つ い て も行 つ た が 夫 々 同 様 の 結 果 が. tryptophane,. 得 ら れ た. 次 にtartarateに. よ る呼 吸 促 進作 用 に 対 す. る2.4‑dinitrophenol. (DNP)の. 影 響 に つ き検. 討 す る こ と と す る. tartarate,. succinateを. 菌. に 与 え る に 際 し て は そ の 添 加 順 序 に よ り, tartarateの. 呼吸 促進 効 果 に差 異 の 生 ず る こ. と は 第6図. の 示 す 通 り で あ り.. succinateと. せ ね ば促 進作 用 が見 ら れ な い. に 関 し て も,そ 菌. 液(湿. 0.3cc, 1:. 菌. 量10mg). 2.0cc,基. 37.5℃,. し,第7図. 濃 度10‑2M). 2: 2´:. succinate, succinate. 1´: +. pyruvate. +. にO2消. mycine. 費 量 を 測 定 し て,. 通 り で あ る.. SMは. 影 響 は 第5図. の 間10´. DNPの. 阻 害効 果 を. 果 は 同 図(A)〜(C)に. 見 られ. tartarate.. 呼 吸 促 進 作 用 に 対 す るstrepto. (10‑3M)の. 作 用. の添 加 順 序 に よ る 差 異 を 予 想. 置 き に 菌 に 添 加 し,こ. 検 討 し た.結 又tartarateの. DNPの. の 如 き 三 通 りの 順 序 で 基 質 及 び. DNPを30´. 1hr.. pyruvate,. tartarate,. 質(終. tartarateは. 同 時 にか或 は それ に 先立 つ て添 加. に見 られ る. 基 質 に先 立 ち 菌 に加 え菌. る 如 く, DNPを. 最 後に 添 加 した 場合 に は 阻. 害 作 用 が 認 め ら れ な い が,他 tartarateの. の場 合 に於 て は. 呼 吸 促 進 作 用 がDNPに. よ り打 消.
(6) 168. 松. 第6図. tartarateの. 浦. 慶. 呼 吸 促 進 作 用 と添 加 順 序. 之. rateを. 添 加 し てincubateし. れ たP32の. 菌 体 内に 摂 取 さ. 分 布 状 況 を 検 討 し た.. tartarate. に よ る 呼 吸 促 進 作 用 の 至 適pHは6.5附 あ る が,こ. 近に. の 実 験 に 於 て は 比 較 の た めMg++. 添 加 に つ い て も 行 う 必 要 上pH 又citrate,. histidine,. 7.0を. 選 ん だ.. tryptophane,. tyrosine. 添 加 の 場 合 を も 併 せ 実 験 し 結 果 は 第7表. に一. 括 し て 示 し た.同 表 に 見 ら れ る 如 く, succinate, tartarate同. 時 添 加 に 於 て は,. succinate単. の 場 合 に 比 し, Δ7Pにincorporateさ の 著 明 な 増 大 が 認 め ら れ,且 tartarateに 1:. 最 初. tartarate. 30分. 後 に. succinate,. 2:. 最 初. succinate. 30分. 後 に. tartarate,. 2:. 最 初 か ら. tartarate. +. よ るO2消. pyruvateな. 菌 量10mg). 2.0cc,基. 質(終. 第7図. pH. 炭 糖,. ど の 燐 酸 化 合 物)にin. るP32はtartarate添. succinate単 す る,. 存 族(六. 6.5,. 独 の 場 合 よ りは む し ろ減 少 す る こ. と が 認 め ら れ た.. 37.5℃.. tartarateの. 加 に よ り,. 濃 度10‑2M). 0.3cc 全 量3.0ccと. 費 の 増 大(第5表)を. succinate. corporateす 菌 液(湿. れ るP32 この 増 大 は. は る か に 上 廻 つ て い る.Ba溶 三 炭 糖,. 独. 加 に よ りBa溶. にincorporateす. 呼 吸 促 進 作 用 に 対 す る. 2, 4‑dinitrophenolの. Mg++添. 存族. るP32量. が著. 明 に 増 大 す る こ とは 前 報 に 於. 影 響. て 述 べ た 通 り で あ る.以 tartarate添. 上. 加 に よ り認 め ら れ. た 影 響 はcitrate, tryptophane,. histidine,. tyrosine添. 於 て も 見 ら れ,こ. 加に. れ ら添 加 基. 質 の作 用 に類 似 性 の あ る こ と が 推 定 さ れ た. 最 後 にtartarate対glucose, pyruvate或 菌 液(湿 DNP(終 pH. 6.5,. 菌 量10mg). 2.0cc,基. 濃 度10‑5M). 0.3cc,全. tyrosine, nateの. 濃 度10‑2M),. 量3.0ccと. 作 用 はcitrate,. し て. こ れ. histidine,. と 同 様 の. tryptophane,. pyruvate,. 組 合 せ に つ い て も 認 め ら れ,こ に,. DNPに. succi れ ら の. よ り阻 害 さ. れ る 如 き 性 状 の 燐 酸 代 謝 を 含 む こ とが 推 察 さ れ た.. そ こ でP32を. の. tartarate自. 身は分 解 さ れ る も の か 否 か に つ き 実 験 を 行 つ た.先. lysine対glucose,. 呼 吸 促 進 作 用 は 一様. はsuccinate間. 相 互 作 用 に 於 て,. す る,. 37.5℃.. さ れ る こ と を 認 め た.而 DNPの. 質(終. 用 いsuccinateを. 基 質 とした. 呼 吸 時 に 於 け る 燐 酸 代 謝 に 及 ぼ すtartarate 添 加 の 影 響 を し ら べ た.即. ちP32O4を. 酸 緩 衝 液 に 菌 を 浮 游 せ し め, succinate,. 含む 燐 tarta. tartarate添. 加 の 呼 吸 商(RQ)に. を 見 る に 第8表 succinate何 りRQの. の 如 く,基. 及ぼ す 影響 質 がpyruvate,. れ の 場 合 に もtartarate添. 増 大 が 認 め ら れ,こ. 部 はtartarateに. ず. 加に よ. の 発 生CO2の. 一. 由 来 す る も の と 推 察 さ れ た.. 次 に 菌 にtartarate及. びATPを. 加 え,更. にketo酸. 分 解 を 阻 害 す る α, α´‑dipyridyl. (10‑3M)を. 添 加 し てincubateし,. のketo酸. の 検 索 を 行 つ た と こ ろ 第9表. く, tartarate単 認 め ら れ な い が,. 独 添 加 で はketo酸 ATPの. medium中 の如. の生 成 は. 存 在 に 於 て,わ. ずか.
(7) 赤 痢 菌 の 代 謝 に 関 す る研 究. 第7表. 燐 酸 代 謝 に 於 け る二 基 質 の 相 互 作 用 (Sh. dysenteri. 第9表. 169. tartarateの. 3). (Sh.. 菌 液(湿. 分 解 に 対 す るATPの. dysenteri. 3). 菌 量30mg). 阻 害 剤(終. 2.0cc,基. 濃 度10‑3M). 全 量3.0ccと. 質(30μM). 0.25cc,. す る,. 効 果. pH. 0.25cc,. ATP1.0μM,. 6.5,. 37.5℃,. 1hr.. あ る.供 試 赤 痢 菌 に つ き種 々 の 組 合 せ で 二 基 質 を 添 加 し て 呼 吸 促 進 的 な 相 互 作 用 を 検 討 し, そ れ ら の組 合 せ を 作 用 型 式 を 異 に す る 二 つ の 類 型 に 分 類 す る と次 の 如 くな る. 菌 液(湿. 菌 量210mg). 各1.0cc,. 7.0cc,基. Mg++(終. 濃 度10‑4M). 燐 酸 緩 衝 液(P3210μcを と す る,. 第8表. pH. 7.0,. 含 む) 37.5℃,. 呼 吸 商 に 対 (Sh.. 質(終. 濃 度M/50). 1.0cc, 1.0cc,全. incubation. M/50 量10.0cc 1hr.. す るtartarateの. dysenteri. (1). succinat,. glutamateの (2). fumarateに. 組 合 せ.. glucose,. pyruvate或. す るtartarate,. 影 響. tyrosine,. lysineな. pyruvate,或 於 て)は. はsuccinateに. citrate., histidine,. 対. tryptophane,. ど の 組 合 せ.. こ れ ら の う ち(2)で. 3). 対 す るaspartate,. は 一 方 の 基 質glucose,. はsuccinate. (Sh.. dysenteri. 3に. 共 に 前 報 で 述 べ た 如 くMg++に. よ つ. て も 又 呼 吸 促 進 を う け る 特 徴 が あ り推 理 に 有 力 な 手 掛 り を 与 え る.こ. れ に 対 し(1)に. るsuccinate,. 必 ず し もMg++に. fumarateは. 於 け よ. り,呼. 吸 促 進 を うけ る と は 限 ら な い 基 質 で あ. る.以. 下 こ れ ら 二,三. の 例 に つ き そ の 相 互 作. 用 の 機 構 を うか が う こ と と す る. 菌 液(湿 0.3cc,全. 菌 量10mg).基 量3.0ccと. 質(終 す る,. pH. 濃 度10‑2M)各 6.5,. 37.5℃,. 1hr.. 先 ずsuccinate, Sh. dysenteri. のoxalacetateと pyruvateの. 思 わ れ る もの 及 び 著 明 な. 蓄 積 が 認 め ら れ た.. Ⅳ. 総 括 及 び 考 案 二 種 基 質 を 同 時 に 菌 に 添 加 す る際 各 単 独 添 加 の 場 合 に 比 し,そ れ ら二 基 質 間 の 相 互 作 用 の 結 果,呼. 吸 量 が 著 明 に 増 大 され る例 が 多 数. 認 め られ,そ. の 機 構 に 於 て も又 種 々 の 類 型 が. 3,. aspartateの Sh.. 組 合 せ で は,. flesneri. 促 進 的 相 互 作 用 を 示 し,. 1に. Sh.. む し ろ 阻 害 作 用 が 認 め ら れ. 於 て は 呼 吸. flexneri る.ひ. 3で. は. る が え つ. てTonhazy等7)はN.. gonorrhoeaeに. glutamate,. の 呼 吸 促 進 作 用 の 機. fumarate間. 構 にglutamate〓aspartate. transaminationが. 関 与 す る こ と を 推 定 し て い る.赤 もSh.. dysenteri. nate,. aspartate間. 3,. 於 け る. Sh.. flexneri. 痢 菌 に 於 て 1な. どsucci. に 呼 吸 促 進 的 相 互 作 用 の 見.
(8) 170. 松. ら れ る 菌 で はaspartate〓glutamateの が 認 め ら れ,然. ら ざ るSh.. 反 応. flexneri. 3に. は 殆 ん ど 同 反 応 を 認 め 得 な い(第2図) てsuccinate,. aspartate間. tate〓glutamateの. 於 て .従. つ. の 相 互 作 用 にaspar. 反 応 が 重 要 な 役 割. こ と が 推 察 さ れ る .而. 浦. 慶. 之. 結 果 で は な い こ とは,そ 5図)が と,或. し て こ のaspartate〓. 費 曲 線(第. 反 応 初 期 よ り立 ち 上 つ て い る こ は 又 この 促 進 作 用 が 適 応 酵 素 生 成 の 阻. 害 剤streptomycineに. を 果 す. のO2消. よ り阻 害 さ れ な い こ と よ. り推 定 さ れ る. 前 述 の 如 くglucose,. pyruvate,. succinate. glutamateの. 反 応 の 性 状 に つ き 考 察 す る に,. な どtartarateに. よ り呼 吸 促 進 を う け る 基 質. Sh.. 3な. は す べ てMg++に. よ つ て も又 著 明 な 促 進 を う. dysenteri. し た 際NH4+添. ど の 菌 でsuccinateを. 加 に よ つ て も呼 吸 促 進 を うけ. (第6表),且medium中 glutamateの. に はaspartate及 生 成 が 認 め. び. succinateよ. か ら,. aspartic. り の. dehydrogenaseに. dehydrogenase,. つ て. dehydrogenaseに. よ. る二 つ の 反 応. 作 用 に 於 て も燐 酸 代 謝 の 関 与 が 予. 想 さ れ る.こ. P32を. …(1). 表)に. transaminaseに. よ. る も の で は な い と 推 察 さ れ る. Sh. flexneri 3に. 於 て は,. aspar. 加 に よ り各 単 独 の 場 合 に 比 し呼 吸 量 の. 低 下 を 来 す が,こ. れ はaspartate或. 謝 産 物 に よ りsuccinate酸. はその代. 化の何れかの 段階. よ り 更 に 確 認 さ れ る.. が 拮 抗 的 阻 害 を う け る 結 果 と 考 え ら れ,こ 菌 のsuccinate,又. 含 む 菌 浮 游 液 に 基 質succinateを. はaspartate代. の. 添 加 して. 体 内 摂 取P32の. る に,. 加 に 於 て はsuccinate単. Mg++添. 酸 化 合 物)及 pyruvateそ. (ATPな. びBa溶. 分 布 を比 較 す 独 の. ど高 エ ネル ギー燐. 存 族(六. 炭 糖,三. 炭 糖,. の 他 の 燐 酸 化 合 物)にincorporate. さ れ るP32が. 増 大 す る こ と は 前 報 の 通 りで あ. tartarate添. のincorporationは. 加 に 於 て も Δ7Pへ 著 明 に 増 大 し,且. のP32 その増. 大 はtratarateに. よ る 呼 吸 量 の そ れ を は るか. 酵 素 系 が 他 菌 の 場 合 と若 干 相 異 す る こ とを 暗. 上 廻 つ て い る.こ. れ に 対 しBa溶. 示 す る も の と 推 測 さ れ る.こ. incorporationはtartarate添. てsuccinate及 のO2消 に,基. 謝 に関 す る. はMg++を. incubateし,菌. る が,. び. 影 響 を 検 討 し た 実 験 結 果(第7. 場 合 に 比 し Δ7P. succinate,. 呼 吸促. 影 響(第7図),及. 加 え 更 にtartarate或. NH4++α‑ketoglutarate〓glutamate…(2). を 介 し て 行 わ れ る も の で,. の こ と は 又tartarateの. 用 い 呼 吸 時 に於 け る 燐 酸 代 謝 に 対 す る. P32O4を. aspartate〓oxalacetate+NH4+…. tate添. 軛 し た 燐 酸 代 謝 で あ る と 推 定 さ れ る こ とか ら,. tartarateの. 応 はaspartic. glutamic. 呼 吸 促 進 の作 用 点 は 酸 化 と共. 進 作 用 に 対 す るDNPの. よ る 反 応 に よ り 生 成 す る と 考 え ら れ,従 上 述 のaspartate〓glutamate反. け,且Mg++の. tartarateの. ら れ(第2図),生. 成aspartateはNH4+と, oxalacetateと. 基 質 と. の菌 に基 質 とし. びaspartateを. 費 量‑時. 添 加 した 場 合. 間 曲 線(第3図)よ. りす る. 質 添 加 後120´ 頃 か ら は 促 進 作 用 が 現 れ,. nate単. 存 族 へ のP32. 加 に よ り, succi. 独 の 場 合 よ りむ しろ 減 少 す る傾 向 が 認. め ら れ る.こ tartarate添. れ ら の 事 実 よ り 考 察 す る に, 加 に よ り, Mg++添. 加 に於 け る と. 適 応 的 に他 菌 同 様 の 相互 作 用 の機構 が 生 じ る. 同 様 燐 酸 代 謝 の 活 溌 化 を 来 す 結 果ATP〓ADP. も の と 見 做 さ れ る.. の 回 転 が 盛 ん と な り,更. 次 にtartarateに 或 はsuccinateの. 対 す るglucose,. 組 合 せ に つ い て で あ る が,. 赤 痢 菌 に 於 て はtartarate単 はO2消. 費, CO2発. ら ず, glucose,. 独 添 加 の場 合 に. 生 は 共 に 認 め られ な い に 拘. pyruvate或. 添 加 す る こ と に よ り,呼 こ のtartarateに. pyruvate. はsuccinateと. 共に. 吸 を 著 明 に 促 進 す る.. よ る 呼 吸 促 進 がglucoseそ. の 他 の 添 加 に よ り 菌 がtartarateに. 適 応 した. に はATPの. にMg++添. 加 の場 合. エ ネ ル ギ ー は 菌 体 内 保 有 の糖 類. そ の 他 の 燐 酸 化 に 向 け ら れ,た. め にBa溶. 族 へ のP32のincorporationが. 増 大 す る もの. と 考 え ら れ,一 ATPの. 方tartarate添. エ ネ ル ギ ー はtartarate代. 存. 加 に 於 て は 謝 の方 向 に. 向 け ら れ る も の と解 釈 さ れ る. こ の こ と はtartarateが 分 解 さ れ な い に 拘 ら ず,. 単独 添 加 に 於 て は ATPの. 共存 下 で は分.
(9) 赤 痢 菌 の 代 謝 に 関 す る研 究. 解 さ れ,α,α よ り,反. ´‑dipyridylを. 添 加 す る こ とに. 応 生 成 物 と し て のpyruvateの. 蓄積. 用 を 示 す 基 質 の 組 合 せ の 二,三 作 用 機 構 に検 討 を 加 え,次 (1). が 認 め ら れ る こ と か ら も 確 認 さ れ る. 以 上 の こ と か ら,赤 分 解 にglucose,. エ ネ ル ギ ー 源 或 はATPに. succinateな. どの. と す る も の と 推 定 さ れ,又tartarateに 呼 吸 促 進 作 用 もtartarate添 ADPの. よる. 反応 の活 溌化 に起 因す る と考 え られ. る.た. だtartarateの. (2) tartarate,. 分解 機序 の詳 細 に関 し. はglutamate. 反 応 が 関 与 す る.. glucose,. pyruvate,或. citrate,. tyrosine,. 加 に よ るATP〓. の 結 果 を 得 た.. の 相 互 作 用 の 機 構 にaspar. tate〓glutamateの. よ る活 性 化 を 必 要. lysineな. はsuccinate対. histidine,. tryptophane,. ど の 組 合 せ に 於 て は,後. は 各 単 独 で 菌 に 添 加 し て もO2消 共 に 見 ら れ な い が,前 合,著. で あ る.. な ど 後 者 の 添 加 に よ るATP〓ADP反. tyrosineな. histidine,. glucoseそ. 様 そ の分 解 に. の 他 の エ ネ ル ギ ー 源 或 はATPに. る 活 性 化 を 必 要 と す る と 推 定 さ れ,こ. よ れ らに. 関 し て は 後 報 に 於 て 検 討 す る こ と と す る. Ⅴ. 二,三. 結. 1) Grafflin, A. L., and. Chem., 3) Knox, bath. 5) Sevag,. J. V., and. D. E.. Green.J.. 考. 終 りに 臨 み 終 始 御 懇 篤 な る御 指 導 と御 校 閲 を賜 つ. 同 位 元 素 に 関 し 御 指 導,御. 文 7). J. Biol.. 8). 松 浦:岡. 9). Umbreit,. L. H.: Biochem. Biochem.. F., and. and. V. H. Auer. 176, 117, 1948.. ques. N.. 368,. and. E.,. and. 協 力 下 さつ た 金 政 氏 に 感. J.. Pelczar,. J.. Bact.,. 1952.. W.. W.,. Tissue. et. 68巻,. al... 1〜4号.. 1956.. ManometricTechni. Metabolism.. 佐 竹:ク. J., 29, 889, 1935.. 11). 標 準 生 化 学 実 験 法.. Z., 267, 211, 1933.. 12). 佐 竹.ク. 13). 菊 池 他:最. 14). 標 準 生 化 学 実 験 法.文. J.. M.. 山 医 学 会 雑 誌,. 10). M. L. C. Bernheim. 1943.. Tonhazy, 65,. Noyce,. J. Biol. Chem,. Bact., 46, 225,. せ て放射性. 献. Biol.. 1949.. W. E., B. N.. M. G.:. 応 の 活. 吸 促進 的相 互作. R. B. Krakaur:. 177, 641,. 6) Bernheim,. れ はtartarate. た 恩 師 村 上敎 授 に 深 甚 の 謝 意 を 表 し,併. 176, 95, 1948.. 4) Stickland,. 明 な 呼 吸 促 進 を 来 し,こ. 謝 す る 次 第 で あ り ま す.. 参. 2) Taggart,. 生. 論. の 赤 痢 菌 を 用 い,呼. Chem.,. CO2発. 溌 化 に 起 因 す る も の と 考 え ら れ る.. tryptophane,. ど もtartarate同. 費,. 者. 者 と同 時 に 添 加 す る場. て は 解 明 す るに 至 らず 今 後 の 研 究 に 待 つ も の. 而 し てcitlrate,. に つ き,そ の. succinate対aspartate或. の 組 合 せ で は,そ. 痢 菌 で はtartarateの. pyruvate,. 171. ロ マ ト グ ラ フ,共. 立 社,. 文 江 堂,. 36.. ロ マ ト グ ラ フ.共 新 医 学,. 6巻,. 91.. 立 社, 9号,. 江 堂,. 118. 822,. 136.. 1951..
(10) 172. 松. 浦. 慶. 之. Department of Bacteriology, Okayama University Medical School (Director: Prof. Dr. S. Murakami) Studies Report. on. 2:. the. metabolism. Mutual. action. of B. dysenteriae. between. two. substrates.. By Yoshiyuki This. study. is. which. act. substrates From. the. dysenteri. 3,. covered,. they (1). of The. mechanism In. another. is. strates. includes such tion.. the as. tartrate,. bacterial. Sh.. of. succinate the. this. mutual of. mechanism. respiration with. flexneri. 3,. the they. phosphorous citrate,. and. of. by some. two. their. of. mutual. action. mutual. strains. types. aspartate,. respiration action. couples. citrate,. acceletate when. the. of. between. two. action.. B.. dysenteriae,. mechanism. of. such. the. as. action. Sh.. was. dis. follows.. the case. oxidized. determine. experiments. accelerate. tartarate,. can. some 1.. case. of. to. accelerate of. as. can. (2). be. the. out. flexneri. are. In. to. results Sh.. substrates. carried. Matsuura. in. which. are. metabolism etc.. to. substrate. tryptophane,. alone. in. the. glutamate, case. to. of. is. the. organisms.. pyruvate,. with. glucose, or. fact The. each. combinations. substrate. pyruvate,. the. these. alone. and to. of addition activate. succinate couples. latter. mechanism. seemed. or. lysine,. that. oxidation, etc.. these. of. .. reaction.. tyrosine,. spite. coupling glucose,. and. in. aspartate•¬glutamate. one. too,. added. succinate. compared. included. histidine, respiration. or as. of. substrates this. the. ATP _??_. sub cannot. mutual of. and. action substrates ADP. reac.
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