第2編
13
0
0
全文
(2) 126. 金. 充 分 混 和 後diazo混. 液1ccを. 1分 後 に於 て560mμ 更 に420mμ. 皎. 添 加 した 場 合,反. 応. 太. 郎. Fig.. 2.結. に著 明 な 吸収 極 大 を 生 じた他,. これ と対 称 的 に420mμ. 液2mlにmethauol れ にdiazo試. 薬1mlを. 加 え た 後 の 吸収 曲 線 の 経時 的 変化. の極 大 の 低下 が 認 め られ た. 認 め られ る もの の,最 早420mμ. の極大 の 増強 は には 吸 収 は認 め ら. 1). 結 晶bilirubin chloroform溶 methanol 3mlを 薬1mlを. 加 え,こ. の 吸光 度 の増 大 及 び. が, 7〜10分 後 に於 て は 尚560mμ. れ な くな っ た.(Fig.. 晶bilirubin溶. 4mlを. に も僅 か に 極大 の残 存 して い るの が 認. め られ た. 4分 後 に は560mμ. Fig. 1. 田. 液2mlに. 加 え,こ れ にdiazo試. 加 え た 後 の吸 収 曲 線 の経 時 的. 変化. 一 応 未 反 応 物 質 と 仮 に 命 名 して 記 述 を 進 め る . 原15)はchloroform溶. 液 と し たbilirubin定. に つ い て 報 告 し た 際chloroform溶 methanolを6cc加 はalcohol添. 液2ccに. え て い る が,. MalloyもEvelyn8). 加 に よ る 間 接diazo反. は 全 反 応 液 の40%以 る と い い,小. 応 の 定結 に. 上 のalcoholの. 坂 は36%以. 量法 対 して. 添加 が心 要 で あ. 上 と報 告 して い る が,今. 回. は 一 応 原 の 方 法 に 準 じて 実 験 を 進 め る 事 と した.即. 次 い で,添. 加 す るmethanol量. を4, 5, 6ccと し. て 同様 の反 応 を 経 時 的 に追 求 した所,前 者 とほ ぼ同 様 の所 見 が 認 め られ た(Fig2,. Fig3, Fig. 4). 之 等 の 吸収 曲線 に認 め られ る560mμ は明 らか に生 成 され たazo色 うが, 420mμ. 素 によるもの で あ ろ. の 極大 が何 を意 味 す るか につ い て は. 大 の増 加 に相 反 比 例 して 消失 して 行 く点 よ り,. 薬1cc添. 加 のFig.. の極 azo. 色 素 の 生 成 の前 段 階 の もの か,或 は未 反 応 の もの か の何 れ か と考 え られ るが,本 吸 収 を示 す物 質 は 今 は. 第 に 減 少 さ せ て 見 た. 場 合 に は 反 応11分30秒 は 残 存 し, 560mμ. 4に. 於 て は560mμ. で 略 々 最 大 と な り420mμ. も 略 々 一 定 と な つ た の で,次. の 吸収 極 大. 即 断 を 下 し得 な い けれ ど も,少 く と も560mμ. ちdiazo試. の 吸 収 は10〜20分. にdiazo試. Diazo混. の 吸収 薬量 を次. 液0.5ccを. 加 えた. 後 に 於 て も 尚420mμ. の吸 収. の 極 大 の 増 強 は15分 後 に 於 て 漸. く一 定 と な る 事 が 認 め られ た が,. 420mμ. よ り 短 波 長 側 に 於 け る 吸 収 は15分. よ り23分,更. 分 に 於 て 低 下 して い る事 が 認 め られ た. Diaza混. 液 を0.2ccに. した 場 合 に は,. 乃至 そ れ に28. (Fig. 5) 560mμ. の.
(3) Bilirubinoid‑Azo色. Fig.. 3. 結 晶bilirubin methanol. 5mlを. 薬1mlを. chloroform溶 加 え,こ. 液2mlに. 素. に 関. Fig.. す. る 研. 4. れ にdiazo試. 究. 127. 結 晶bilirubin methanol 薬1mlを. 加 え た 後 の 吸 収 曲線 の 経時 的. 変化. chloroform溶. 6mlを. 加 え,こ. 液2mlに れ にdiazo試. 加 えた 後 の吸収 曲線 の 経時 的. 変化. 吸収 は45分, 60分 に 於 て も尚 増 強 して 行 く事 が 認 め. これ を経 時 的 に追 求 す ると550mμ. られ た.尚 この 際 に は60分 後 に於 て も420mμ. と増 大 して は行 ぐが, 8分 に於 て既 に最 高 となつ た. 収 は尚残 存 して い る事 が 認 め られ た.(Fig. 更 に, diazo混 液 を0.1ccに mμ の吸 収 と420mμ. の吸 6).. した 場 合 に は, 560. の 吸 収 との間 には 経 時 的 に図. に 示 す様 な 平 衡 関係 を 保 ち, 560mμ. の 吸 収 は33分. (Fig. 8). Diazo混 液1ccの. 場 合 に は 反応1分 後 に550mμ. に著 明な 吸 収 と400〜390mμ. にか けて の 膨 大 が 認. め られ,こ の場 合 には 吸収 極 少 は450mμ. で も尚最 高 に達 せ ず,非 常 に著 明に残 存 して い るの. れ た.反 応2分 後 に於 て は550mμ. が 認 め られ た(Fig. 7).. 加 し, 400〜390mμ. これ らの 成 績 の 示 す 所 はdiazo試. 薬の 量 が 少量. で あ る場 合 に は反 応 が非 常 に遅 延 し,未 反応 物 質 が 高 度 に残 存 す る事 が認 め られ ると云 う点 で あ る. 次 にbilirubinの roform溶. 液2ccにmethanol. 々 の量 のdiazo混 azo色. 場 合 に 做 いmesobilirubin‑chlo 6ccを 加 え,之 に種. 液 を加 え,経 時 的 に 生成 さ れ る. 素 の 吸収 曲 線 の推 移 を 検 討 し た 所, diazo混. 液2ccを. 加 え た場 合 に は550mμ. し, 440mμ. に 吸収 極大 を 示. に極 小 を示 す 単 峰性 吸 収 曲線 が 得 られ,. の極大 は2, 3分. に認 め ら. の 吸 収 は更 に増. の膨 隆 は減 少 し,極 小 は440mμ. に移動 す るの が 認 め られ, 4分 後 に は550mμ 収 は更 に増 加 し, 400〜390mμ. の吸. の膨 隆 は殆 ん ど消 失. しか か り, 8分 後 に於 て は全 く扁平 な単 峰性 の吸 収 線 を 示 し, 550mμ の 極 大 は13分 以 降 に於 て一 定 とな るの が 認 め られ た.こ の 場 合 の吸 収 極小 は430mμ に 認 め られ た(Fig. 9). 次 にdiazo混. 液 を0.5ccに. 以上 の400〜390mμ らかな390mμ. した場 合 に於 て は,. の膨 隆 は反応2分 後 に 於 て 明. の極 大 と して認 め られ た外,全 般 的.
(4) 128 Fig.. 金 5.結. 晶bilirubin methanol. chloroform溶. 6mlを. 薬0.5mlを. 加 え,こ. 田. 液2mlに. 皎. 太. 郎. Fig.. 6. れ にdiazo試. 結 晶bilirubin methanol ml加. 加 え た 後 の吸 収 曲 線 の 経 時. chloroform溶. 6mlを. 加 え,. 液2mlに. diazo試. 薬0.2. え た 後 の吸 収 曲線 の 経 時 的 変化. 的変化. diazo混 液1ccに. した場 合 に も ほ ぼ 同 様 の 単一. の極 大 を有 す る吸収 曲線 が 得 られ た が(Fig. 13). diazo混 液0.5ccの. 場合 に於 て は540mμ. の吸 収極. な 吸収 曲線 の 推 移 は前 者 とほ ぼ 同様 で あつ た(Fig.. 大 の他 に, 410mμ. 10). 極 大 が 明 瞭 に認 め られ,後 者 は 時間 の経 過 と共 に 吸. 更 にdiazo混 の 吸収 と390mμ. 液を0.2ccに. した場 合 に は550mμ. の 吸 収 と が 図の 如 く対 称 的 に 消長. して行 き,殊 に390mμ. の吸 収 は反 応110分. 後 に於. に未 反 応物 質 に よ る と思 わ れ る. 光 度 を 減 じ, 22分 以 後 に於 て は540mμ. の 吸 光度 に45分 後 に於 て も尚増 強 して い るの が 認め. て も尚膨 隆 と して残 存 す る 事 が 認 め ら れ た(Fig.. られ た(Fig. 14 II),更. 11).. す る と, 540mμ. 以 上mesobilirubinのazo色. 素 の 発現 の 様 子 は. に単 一 の極. 大 を持 つ単 峰 性 吸収 極 大 を持 つ に至 つ た が, 540mμ. 14 I)に. と410mμ. にdiazo混. 液 を0.2ccと. の 極大 の関 係 は(Fig.. 示 す如 くな り, 410mμ. の 極大 に於 て は65. bilirubinに 於 け ると甚 だ 類 似 して い る け れ ど も,. 分後 に於 て も尚膨 隆 と して残 存 す る 事 が 認 め られ. azo色 素 固 有 の 吸 収 極 大 が550mμ. た.. 未 反応 物 質 の極 大 が390mμ. に存 在 す る事 と,. に存 在 す ると云 う点 は. 特 に注 目を 要 す る点 と思 わ れ る. 同様 の実 験 をbilirubindimethplesterに 行 つ た. Diazo混. 液2ccを. 以 上 の成 績 よ りbilirubindimethpleeterのazo色 素 は540mμ. ついて も. 加 え た 場 合 に は540mμ. に 吸収 極大 が 存 在 し,こ れ はdiazo試. 薬 の 量 が減 少 す る に従 い 出現 が 遅延 し,こ れ と 同時 にdiazo試. 薬 の 量 の少 い 場 合 に於 て は410mμ. の吸. に 単 一 の 極大 を 有 す る 吸収 曲線 が 得 られ(Fig.. 収 極 大 の消 褪 が遅 延 す る事 が 認 め られ た こ と に な. 12).. る..
(5) Bilirubinoid‑Azo色. Fig.. 7. 結 晶bilirubin. chloroform溶. 素. 液2mlに. に. 関 す. Fig.. methanol. 6mlを. 0.1ml加. え た 後 の吸 収 曲線 の経 時 的 変化. 加 え,こ れ にdiazo試. 8. 薬. る 研. 究. mesobilirubin thanol 6mlを. 129. chloroform溶 液2mlにme 加 え,こ れ にdiazo試 薬2ml. を 加 え た後 の 吸収 曲線 の 経 時的 変 化. Fig.. 9. mesobilirubin thanol 6mlを. chloroform溶 液2mlにme 加 え,こ れ にdiazo試 薬1ml. を 加 えた 後 の吸 収 曲 線 の経 時 的 変 化. 次 にbilirubin‑azo色. 素 は 特 にalkali性. に於 て は. 不 安 定 で あ る 事 が 知 られ て い る が12),こ 生 成 さ れ たbilirubinoidのazo色. の様 に して. 素 は 放置す る事. に よ り 如 何 な る 吸 収 曲 線 の 推 移 を 示 す か を 検 討 した. 即 ち 前 者 と 同 様 の 方 法 に よ り 調 製 し たazo色 室 温 下(8〜13℃)室. 内 に 放 置 し,経. 素を. 日的 に 吸収 曲. 線 の 推 移 を 検 討 し た. Bilirubin‑chloroform溶 methanolを. 加 え,よ. え た 場 合 に は,反 550mμ. 液2ccに. 対 し6ccの. く混 和 後diazo混 応 後6時. 液1ccを. に 移 動 し, 24時 間 園 に は540〜530mμ. 48時 間 目 に 於 て は520〜515mμ め られ,更. に,. に移 動 す るの が 認. に 遂 日 こ の 極 大 は490〜500mμ. し て 行 く上 に,更. 加. 間 目 に於 て 吸収 極大 が. に420〜430mμ. に移動. に存 在 して い た. 吸 収 極小 は反 応 後 次 第 に 吸光 度 を増 す と共 に極 小 が 430〜440mμ. へ と 移 動 し,遂. 於 て は 図 に 示 す 如 く400〜410mμ. に は 反 応5日. 示 す2峰. 目以 後 に. に 扁 平 な 吸収 を. 性 曲 線 と な る 事 が 認 め られ た(Fig.. 15)..
(6) 130. Fig.. 金. 10 mesobilirubin methanol. chloroform溶. 6mlを. 薬0.5mlを. 加 え,こ. 田. 液2mlに. 皎. 太. Fig.. 郎. 11. れ にdiazo試. methanol. 加 えた 後 の 吸 収 曲 線 の経 時. chloroform溶. 6mlを. 薬0.2mlを. 的 変化. 加 え,こ. 液2mlに れ にdiazo試. 加 え た 後 の 吸収 曲線 の 経 時的. 変化. Diazo混 液 を2ccと. した 場合 に も図 に示 す 如 く. 前 者 と ほぼ 同様 の傾 向を 示 した(Fig. Diazo混 液3ccに. mesobilirubin. 16).. した場 合 に於 て は反 応 液 は24時. て 行 くのが 認 め られ た. Diazo混 液2ccの. 場 合 には24時. 間 目 まで は 前. 間 目ま で は前 者 とほ ぼ 同様 の 傾 向 を示 した が, 48時. 者 と同 様 の推 移 が 認 め られ たが,そ の後 の 吸収 曲線. 間 目に は 吸収 極 大 は最 早 認 め ら れ な くな り,た だ. の変 化 はFig. 19に 見 られ る様 に明 らか な 極大 を持. 540mμ. たな い 曲線 とな つ た.更 にdiazo混. に 極大 の 遺残 と認 め られ る膨 隆 を残 す に 止. 液 を3ccに. ま る事 が 認 め られ,更 に そ れ以 後 に於 て は420〜430. た場 合 に は この 傾 向 は著 しく,反 応 後120〜144時. mμ に単 一 の 膨 隆 を示 す 様 な 吸収 曲線 とな る事 が 認. 間 目に於 て は420〜430mμ. め られ た(Fig. 17).. 収 曲 線 を示 す に至つ た(Fig. 20).. 次 にmesobilirubinに. つ い て見 る と, diazo混 液. し. に扁 平 な 膨 隆 を 持つ 吸. 又bilirubindimethylesterに. 就 い て も同様 に観察. 1ccを 加 え た もの に於 て は反 応 後6時 間 に於 て は未. した,即 ちdiazo混. だ 極大 に変 化 を 認 めな い が24時 間 目 に於 て は極 大 は. て は反 応 後6時 間 に於 て はほ ぼ変 化 を認 め な いけれ. 液1ccで. 作 つ たazo色. 素 に於. 430mμ に 移動 し, 48時 間 目に於 て は この 極大 は420. ど も,そ の後 次 第 に 吸収 極 大 は 短波 長 側 に移 動 す る. mμ に 移動 す るの が 認 め られ た が,こ れ らの 吸収 曲. の が 認 め られ る と共 に,吸 収 極 小 が 次 第 に平 低 とな. 線 の形 はFig. 18に 示 す如 く430mμ. の吸 収 極小 が. り,反 応 後120〜144時. 間 目 に 於 て は 吸収 極 大 は. 次 第 に 吸光 度 を 増 して行 く他 は ほ ぼ近 似 の 曲線 を 示. 480〜500mμ. に於 け る膨 隆程 度 とな つ て来 た事 は図. した が, 72時 間 以 後 に於 て は 吸収 極 大 も更 にわ づ か. に示 す通 りで あ る(Fig. 21). Diazo混 液2ccの. な が ら短 波 長 に移 動 し吸 収極 小 も次 第 に平 低 とな つ. 合 に は この傾 向 は更 に著 しく,反 応 後24時 間 目に於. 場.
(7) Billrnbinoid‑Azo色. Fig.. 12.. bilirubin. dimethylester. 2mlにmethanol 薬2mlを. Fig.. 13 bilirabin. chloroform溶. 液. に. 関 す. Fig.. 加 え,こ れ にdiazo試. 加 え た後 の吸 収 曲 線 の 経時 的 変 化. dimethylester. 2mlにmethanol 試 薬1mlを 化. 6mlを. 素. 6mlを. chloroform溶 加 え,こ. 液. れ にdiazo. 加 え た後 の吸 収 曲線 の経時 的 変. る 研. 究. 14 bilirubin dimethylester 2mlにmethanol 6mlを. 131. chloroform溶 液 加 え,こ れ にdiazo. 試 薬0.2ml(I), 0.5ml(II)を 吸収 曲線 の経 時 的 変 化. Fig.. 加 えた 後 の. 15 結 晶bilirubin chloroform溶 液2mlに methanol 6mlを 加 え,こ れ にdiazo試 薬 1mlを 加え た 後 の吸 収 曲線 の経 時 的 変化.
(8) 132. Fig.. 金. 16. 結 晶bilirubin thaaol 6mlを mlを. Fig.. 17. 田. chloroform溶 液2mlにme 加 え,こ れ にdiazo試 薬2. 皎. 太. 郎. Fig.. 18. 加 え た後 の吸 収 曲 線 に経 時 的 変化. 結 晶bilirubin thanolを. chloroform溶. 加 え,こ. れ にdiazo試. 液2mlにme 薬3mlを. 加 え た 後 の 吸 収 曲線 の軽 時 的 変化. mesobilirubin chloroform溶 methanol 6ml量 加 えdiazo試. 液2mlに 薬1mlを. 加 え た 後 の吸 収 曲 線 の 経 時 的 変 化. Fig.. 19 mesobilirubin. 2mlにmethanol. えdiazo試 薬2mlを 経時的変化. 6mlを. 加. 加 え た 後 の吸 収曲 線 の.
(9) Bilirubinoid‑Azo色. Fig.. 20. mesobilirubin chloroform 溶 液2mlに methanol 6mlを 加 えdiazo試 薬3mlを. 素. に 関. す. Fig.. 22. 加 え た 後 の 吸収 曲線 の 経 時 的 変 化. Fig.. 21. bilirubin. dimethyleater. る 研 究. 133. bilirnbin dimethyleatsr chloroform溶 液 2mlにmethanol 6mlを 加 えdiazo試 薬 2mlを 加 えた 後 の吸 収 曲 線 の経 時 的 変 化. 2mlにmethanol. 6mlを 加 え たdiazo試 薬1mlを の 吸収 曲 線 の経 時 的 変 化. 加 えた後. て 既 に 吸 収 極 小 は 殆 ん ど判 別 出 来 な くな り,吸 大 は500〜520mμ. 収極. に 膨 隆 程 度 と な つ て 現 わ れ た.. そ の 後 は 図 に 示 す 様 な400〜420mμ 単 純 な 曲 線 と な つ た(Fig. 増 加 して3ccと. 22).. に 膨大 を 示 す Diazo混. 液 を 更 に. した 場 合 に は こ の 所 見 は 更 に 明 瞭. に な る事 は 図 に 示 す 通 り で あ る(Fig. これ らの 成 績 よ り見 てazo色. 23).. 素 を 放 置 す る事 に. よ り 変 化 す る 吸 収 曲 線 の う ち特 にdiazo混. 液の 多 い. 場 合 に 於 て 明 瞭 に 認 め ら れ る420〜430mμ. の 吸収. が 何 に よ る もの で あ る か を 検 討 す る 為diazo混. 液そ. の も の を 室 内 に 同 様 の 条 件 の 下 に 放 置 して 吸 収 曲 線 の 推 移 を 観 察 し た 結 果Fig.. 24.に. を 中 心 と す る扁 平 な 吸 収 極 大 が7日. 示 す 如 く420mμ 後 に 認 め られ た.. こ れ に よ り こ れ ら 放 置 後 新 た に 増 強 す る420〜430 mμ. の 吸 収 は 過 剰 のdiazo混. 液 に よ る もの で あ る 事. が 考 え ら れ る. 次 にHeilmeyer16)は azo色. 素 は580mμ. べ て 居 り,又 Anderaen17),. 鉱 酸 に よ り酸 性 と し た 青 色 に 強 い吸 収 極 大 を 持 つ 事 を 述. 比 の 酸 性azo色 Heilmeyer. 等 に りbilirubin測. 素 はThannhauser. & Krebs5)及. &. びHeilmper18). 定 の 基 礎 と な つ て い る が,今. 回.
(10) 134. Fig.. 金. 23.. bilirubin 2mlにmethanol 3mlを. dimethyleater 6mlを. 田. chloroform溶. 液. 加 えdiazo試. 薬. 皎. 太. 郎. Fig.. 25. 結 晶bilirubin methanol 加 え た 後,. 加 えた 後 の吸 収 曲線 の経 時 的 変 化. chloroform溶. 6mlを. 液2mlに. 加 えdiazo試. 薬2mlを. 1時 間 後 濃 塩 酸1mlを. 加 えた. 後 の 吸収 曲線 の 経 時 的 変 化. Fig.. 24. diazo試. 薬 の吸 収 曲 線 の経 時 的 変 化. は前 例 に倣 い原15)の 方 法 に 準 じて 塩 酸 に よ る酸性 azo色 素 と し,之 につ い て室 内放 置に よ る吸収 曲線 の 推 移 を見 る こ とと した. Azo色. 素の う ちdiazo混. 液3cc加. え た もの を放. 置 す る場 合 最 も吸 収 曲 線 の変 動 が 明瞭 に 出現 す る こ とが 上記 実 験 よ り分 つ た の で,こ れ を 用 い て 酸 性 azo色 素 を 作 りそ の 放 置実 験 を行 うこ とが 最 も観察 に便 利 で あ るけ れ ど も,反 応 液組 成 上 水 溶液 を4cc 以 上 とす る と反 応 液 に お い てchloroformが て 来 るた め, diazo混 合 液 を2ccと 酸1㏄. を加 え て酸 性azo色. 分離し. し,こ れ に濃 塩. 素 を 作 り,こ の 放 置実. 験 を行 う こと と した. 即 ちFig. 25に 示 す如 くbilirubin酸 性azo色 は580mμ. 素. に単 一 の 極大 を示 し,之 を 放 置 して も全. く吸 収 極大 の 移 動 は認 め られ な かつ た. Meaobilirubinに 於 て も580mμ. に単一 の 極 大 を. 示 し,放 置 に よ り吸収 極 大 の移 動 は全 く認め られな かつ た(Fig. 26). 同 様 に してbilirubindimethylesterに. 於 て も580. mμ に単一 の吸 収 極 大が 認 め られ,こ の 極大 も放 置.
(11) Bilirubinoid‑Azo色. Fig.. 26. mesobilirubin methanol 薬 を2ml加 mlを. chloroform溶. 6mlを. 液2mlに. 加 え,こ. え て,. 1時. 素. に 関. す. Fig.. る 研. 27. dimethyleaterのazo色. dimethylester. 液2mlにmethanol 薬2mlを. 間 後 に 濃 塩 酸1. 加 えた 後 の 吸 収 曲線 の経 時 的 変 化. 以 上 の 成 績 よ りbilirubin,. 135. bilirubin. れ にdiaso試. に よ り 全 く移 動 を 生 じな か つ た(Fig.. 究. chloroform溶 6mlとdiazo試. 加 え,. 1時 間 後 に 濃 塩 酸1ml. を加 え た後 の吸 収 曲 線 の経 時 的 変 化. 27).. mesobilirubin,. bilirubin. 素 は そ れ 自体 に 於 て は 非 常. に 不 安 定 な もの で あ る と 考 え ら れ る が,之. 等 に塩 酸. を 添 加 し た 場 合 に於 て は 長 く 吸 収 曲 線 の 上 に安 定 性 を 得 て 来 る事 が 認 め られ,諸. 家 の 報 告6) 10)16)と も よ. く一 致 す る事 が 認 め られ た.. 1.3.. Bilirubindimethylester.. に 従 いdiazomethanを 化 し,生. Kuster23)の. じ た 粗 試 料 はalumina. 分 離 し400mμ. 方法. 用 い て 精 製bilirubinをester columnに. にchloroform溶. よ り分 劃. 液 にて 極 大 を有 す る. 黄 色 の 物 質 と し て 取 出 し た. 実 1試 1.1.. 験. の. 部. 2 2.1.. Bilirubin:. 2.2.反. roformに. Merk製. 溶 解 し,. 従 いalumina chloroformに. Gray. columnで. 結 晶bilirubinをchlo &. Whidborne19)の. 精 製 後1%酢. 方法に 酸水 下 に. 溶 出 後 充 分 水 洗 後 脱 水 し,こ. れ を 濃縮. して 使 用 し た. 1.2.. palladiumで. 応. Diazo試. 薬:前. 応 温 度:室. 編 と 同 様 に して 調 製 した. 温(8〜15℃)の. &. 晶bilirubinをalkali溶. Niemann20)の. 還 元 して 粗 試 料 を 得,こ. 方 法 に い従 膠状. 方 法 に21)22)従 いsilica 液 に於 て425mμ. gel columnで. れ を細 川 等 の 精 製 し, chloro. に 吸 収 の 極 大 を 有 す る鮮. 黄 色 の 色 素 と して 取 出 し た.. 下 に反 応 さ. せ た. 2.3.反. 応 方 法:. Bilirubin,. bindimethylesterの3mg. methanol量. は6ccと. mesobilirubin,. %. 本 編 記 載 の 如 くmethanol量. Mesobilirubin.結. 液 に 溶 しFiecher. form溶. Diazo反. 料. biliru. chloroform溶. 液2ccに. を 種 々 変 化 さ せ,或. は. し こ れ に 種 々 の 量 のdiazo試. 薬 を 加 え た. 2.4.酸 bilirubin及. 性azo色. 素 の 生 成:. Bilirubin,. meso. びbilirubindimethylesterのchloroform. 溶 液2ccにmethanol を 加 え た 後30分. 6ccを を 経 過 して,更. 加 え,. diazo混. に1ccの. 液2cc. 濃塩 酸 を.
(12) 136. 金. 添 加 し た も の を 夫 々 の 酸 性azo色. 田. 皎. 太. 郎. 2). 素 として用 に供. Mesobilirubinに. め ら れ る が,こ. した. 2.5.. Diszo混. roform. 液 の 放 置:上. 2ccにmethanol. diazo混. mμ. 記 方 法 に 準 じ, chlo. 6ccを. 加 え,之. に2ccの. spectrophotometer, よ り 記 録 し,同. Model. DK(Beck. に 吸 収 極 大 を 有 し,未. の推 移 の. mμ. 5)同. Bilirubin,. 論. mesobilirubin及. esterのchloroform溶. びbilirubindimethyl. 6). 添 加 後diazo. 様 の 所 見 は 吸 収 極 大 の 位 置 的 な 差 こ そ あ れ,. Bilirubin‑azo色. つ が,反. 素 を 室 内 に 放 置 し た 際,特. 薬 量 の 多 い 場 合 に は420〜430mμ. 大 を 持 つ 吸 収 曲 線 が 得 ら れ る が,こ. に極. れ は反 応 液 中 に. 残 存 す る 過 剰 の 試 薬 に よ る 事 が 認 め られ た.. 素 は560mμ. に吸 収極 大 を持. 応 が 来 だ 完 結 しな い 間 は420mμ. 極 大 が 存 在 す る.こ. びbilirubindimethylesterのazo. Bilirubinoid‑azo色. にdiazo試. 素 を分 光 化 学 的 に検 討 し. 以 下 の 様 な 結 果 を 得 た. 1). れは. 色 素 に 於 い て も認 め ら れ た.. 液 にmethanolを. 試 薬 を 加 え て 生 ず るazo色. 素 を 室 内 に 放 置 す る と, 560. 薬 量 の 多 い 程 著 明 と な る事 が 認 め ら れ た.. mesobilirubin及 結. 素 は540. 反 応 物 質 に因 る と考 え ら. に 存 在 し て い た 吸 収 極 大 は 扁 平 と な り,こ. diazo試. 観 察 に 便 な ら しめ た.. つ いて も全 く同様 の. に 認 め ら れ た.. 4) Bilirubiu‑azo色. 一 試料 の 経 時 的 変 化 は 同. 一 記 録 紙 の 同 一 曲 線 上 に 重 ね て 記 録 し,そ. に 認 め ら れ た.. の 場 合 に はazo色. れ る 吸 収 極 大 は410mμ. 収曲線の測定. mann)に. 過 程 が 認 め られ た が,こ mμ. 置 して 吸 収 曲 線 の 変 化 を 観 察 し た. 3.吸. 反 応 物 質 は390mμ. 素 の 吸 収 極 大 は550. 3) Bilirubindimethylesterに. 液 を 加 え た もの を対 照 実験 と し て室 内 に放. Recording. に,未. 於 け る場 合 も同 様 の過 程 が 認. の 際 に はazo色. の560mμ. に も吸収. の 吸 収 極 大 はdiazo. 7). Bilirubin,. methylesterの. mesobilirubin及 各azo色. 酸 性azo色. 素 は,何. びbilirubindi. 素 に塩 酸 を添 加 して 得 た れ も580mμ. に 吸 収極 大 を持. 試 薬 の 量 が少 な い程 最 高 に達 す るに長 時 を 要 す る と. ち,之. 共 に420mμ. 間 放 置 し て も 吸 収 曲 線 上 有 意 の 変 化 を 認 め な か つ た.. の 吸 収 極 大 も 高 度 に 残 存 す る事 が 認 め. 等 酸 性azo色. 素 は 極 め て 安 定 で,室. 内 に1週. られ た.. 引 1) Fischer,. H., u. Orth,. Pyrrols,. Bd. II,. Verlagsgesellschaft, 2). 山 岡:日. 内 会 誌,. 3) Watson, C. J.: 4). 小 坂:東. H.;. 1940,. 用. Die Chemie des. S. 722 Akademische. M. B. H. Leipzig,. 42,. 531,. 文. 279, 424, 1937. 13) Thiel, A., & Logemann, H.:. 67,. 10,. 19,昭25.. 15). 学 研 究,. 22,. 536,昭27.. Hilger, London, 1943. P. 156.. 岩 田:医. 学 研 究,. 7). 小 坂:東. 京 医 事 新 誌,. 21,. 1270, 67,. 17) Thannhauser,. 昭26. 11,. H. T., & Evelyn,. K. A.:. J.. Biol.. Chem., 119, 481, 1937. J. Lab. & Clin.. Med, 30, 293, 1945. 10) Lemberg, R., & Legge, J. W.. Hematin com. pounds and Bile pigments, p. 154, Interscience Publisches, Inc., New York, 1949. A., & Pater, O.:. J. S., & Andersen, E.; Dtsch.. Arch. Klin. Med., 137, 179, 1921.. 14,昭25.. 9) Ducci, H., & Watson, C. J.:. (1934). 12) Krupeki,. 原:医. 16) Heilmyer, L.: Spectrophotometry in medicine,. 352, 1930. 6). 11) Thiel,. Biochem.. J., 31, 920, 1937.. 5) Heilmyer, L. u. Krebs, W.; Biochem. Z., 223,. 8) Malloy,. Biochem. Z.,. 284, 347, 1936. 14) Haslewood, G. A. D., & King, E. J.:. 1953.. Blood, 1, 98, 1946.. 京 医 事 新 誌,. 献. 18) Heilmyer, L.: Spectrophotometry in medicine, Hilger, London, 1943, P. 159. 19) Gray, C. H., & Whidborne, J.:. Biochem, J.,. 40, 81, 1946. 20) Fischer, H., u. Niemann,. Z.. G.:. physiol.. chem., 127, 317, 1923. 21). 細 川:医. 学 研 究,. 26,. 1165,昭31.. Biochem. Z., 271,. 22) Yamaoka, K., Kosaka, K. & Hosokawa, M.. F.;. 23) Kuster,. Proc. Japan Acad., 32, 688, 1956. A., & Almasy,. Biochem.. Z.,. W.: Z. physiol. chem., 141,40, 1924..
(13) Bilrubinoid‑Azo色. Studies Part. II:. on. 素. 関 す. る 研 究. 137. Bilirubinoid-Azopigments. Spectrophotometrical. Bilirubinoids. に. Studies. of Bilirubin,. of the. Mesobilirubin. Diazo. and. Reaction. on. the. Bilirubindimethylester. By Kotaro. Kaneda. The First Department of Internal Medicine Okayama University Medical School (Director: The. process. bilirubin, the. on. the. indirect. mesobilirubin. diazotised The. sulfanilic following. the. prolonged. in. ption. The. parallel. the. absorption. the. The in. diazo. same. the. diazo. absorption The. decrease. of. methanol been. to. studied. the. bilirubinoids. of. spectrophotometrically,. reaction.. above. were. 550mƒÊ. and. were. of. to. the. amount. at. reach. found at. found. 540mƒÊ. more. maximum. time. 560mƒÊ,. the of. and. absorption. the. diazo. also. at. maximum reagent,. 420mƒÊ. at. and. also. 560mƒÊ the. absor. higher.. at. at. the. adding. in and. the. in. mesbilirubin-azopigment,. 390mƒÊ. before. the. except was. completed.. reaction. was. completed.. bilirubindimethylester-azopigment, at. 410mƒÊ before at. change. except. the. bilirubin-azopigment. remarkable. along. showing. reaction. 560mƒÊ with. was. a. showing. flattened. increase. by. of. leaving. amount. of. and. bilirubin. the. reagent. The. same. results. in. All. of. of. the. acid. a. room. very. a. found. character. the. azopigments. in. in. room,. amount. a of. in. yielded and. week.. in. differences. remained. azopigments,. stable for. plenty. reagent. mesobilirubin a. also slight. bilirubinoid. having. the. bilirubin,. in. the. case. amount. 580mƒÊ,. having. leaving the. excess. were. but. After mƒÊ. them. an. maximum. showing. after. have. on. the. results. absorption. dimethylester,. of. to. maximum. room,. used. remained. maximum. Again. a. 420mƒÊ. results. reaction. obtained;. completed. with. at. same. absorption. it. was. maximum. the. was. were showed. reaction. Kiyowo Kosaka). bilirubindimethylester. acid results. Bilirubin-azopigment before. diazo. and. Prof.. maximum. diazo the. reacting. after. the. no. significant. the. of. mesobilirubin. the. maximum. absorption. reagent,. bilirubindimethylester, and. of. positions. was. which. was. absorption. appeared. found. at to. 400. result. to. 420. from. the. solution. addition. of. showed change. HCl their. on. the. to. the maximum. absorption. each. azopigments absorption. curve. by. at leaving.
(14)
関連したドキュメント
Since histone acetylation levels are determined by the balance of histone acetylases (HATs) and histone deace- tylases (HDACs) activities, inhibition of HDAC activity may
The mean PASI score at Week 14-16 was 4.3 for all first-line patients and 2.9 for those receiving second-line treatment, suggesting that switching to a different biologic therapy
The degree of muscle weakness might have been decreased if a load exercise program had been performed with an attention to convulsions during the time they still occurred..
Abstract：A total of １１２ patients with acute liver injury in the Department of Gastroenterology and Medicine, Fukuoka University School of Medicine,
We measured X-ray spectra using a YAP(Ce)-PMT detector and a lead pinhole at a count rate of 27 kcps, an energy range of 7-100 keV, and a tube current of 20 μA.. The count rate
Effectiveness of cognitive behavioral therapy in treating bipolar disorder An updated meta analysis with randomized controlled
3 Department of Radiological Technology, Kawasaki Medical School Hospital, Kurashiki, Okayama, Japan
Analysis of radiation exposure in patients undergoing neurointerventional radiology by actual measurement versus estimation: effect of medical exposure on
Emphysema and idiopathic interstitial pneu- monias, including idiopathic pulmonary fibrosis (IPF), are conditions defined by distinct clinical,
