博 士 （ 獣 医 学 ） 陳 秉 躍
学 位 論 文 題 名
鶏 伝 染 性 気 管 支 炎 ウ イ ル ス に 起 因 す る 腎 臓 病 変 と そ の 病 理 発 生 に 関 す る 研 究
学 位 論 文 内 容 の 要 旨
鶏 伝 染 性 気 管 支 炎(IB)は ， コ ロ ナ ウ イ ル ス 属 に 属 す る 伝 染 性 気 管 支 炎 ウ イ ル ス(IBV)を 原 因 と す る ， 本 病 は ， 当 初 は 呼 吸 器 病 と し て 発 生 し た が ．1960 年 代 に 入 っ て 以 降 ， 腎 臓 に 著 明 な 病 変 を 形 成し ，高 い致 死率 を示 す病 例が ．世 界 的 に 発 生 す る よ う に な っ た ， 後 者 の 病 例 は ， 腎 親 和 性IBVに 起 因 す る こと が明 ら か にさ れて いる ．そ の腎 臓 病変 は多 岐に わた り， 腎症 ，腎 炎， 問質 性腎炎などと轟 例 別 あ る い は 報 告 者 に よ っ て 病 変 名 が 異 な る ． こ の よ う に 病 変 が 多 岐 に わ た ろ の は ， 病 変 の 時 間 的 経 過 の 把 握 が 重 要 で あ るこ とを 示し てい る， そこ で著 者は ． IBVに よ る 腎 臓 病 変 の 形 態 学 的 特 徴 と 病 理 発生 を， 経時 的な 変化 を 基に して1弸 ら か にす る目 的で 本研 究を 実 施し た，
本 研 究 で は ， 最 初 にIBV感 染 鶏 の 腎 臓 に お け る ウ イ ル ス 標 的 細 胞 を 明ら かに し た ． 次 い で ， 腎 臓 の 宿 主 細 胞 に お け る ウ イ ルス の複 製様 式並 びに 病理 変化 を超 微 形 態 学 的 に 観 察 し た ． そ し て さ ら に ，IBVに 起 因 す る 腎 臓 病 変 に 対 す る強 毒型 伝 染 性 フ ァ ブ リ キ ウ ス 嚢 病 ウ イ レ ス(IBDV)の 影 響 に つ い て 検 討 し た ． 第1章 で は ，IBV感 染 鶏 の 腎 臓 病 変 ， と く ．に その 組織 病変 の推 移と ウイ ルス 抗 原 出 現 と の 関 連 性 に つ い て 検 討 し た ． 実 験 と し て は ，2日 齢 のSPF鶏 の 鼻 腔 内 に 腎 親 和 性IBV (MA‑87株 ） を 接 種 し ， こ れ ら を 接 種 後2日 か ら20日 ま で 経 時 的 に 剖 検 し ， そ の 気 管 及 び 腎 臓 を 病 理 組 織 学 的 並 び に 免 疫 組 織 化 学 的 に 検 索 し た ， 感 染 初 期 に は ， 気 管 粘 膜 に ウ イ ル ス 抗 原 出 現 と と も に 上 皮 の 変 性 が 繊 察 さ れ
た ． そ の 後 、 腎 臓 に 強 い 病 変 が 認 め ら れ た ， こ の 病 変 は 違 位 尿 荊 ｜1管 か ら 集 合 ｜ マ に かけ て主 座し ，こ れ らの 上皮‑刪 包の 脈脹 ，空胞変性・亅裳 死，剥離とともにInJ質´Pト 彡ミ 症 を 示 し た ． ま た ， こ れ ら の 病 変 はI欝 臓 の 皮 質 よ り 髄 質 に 優 勢 で あ っ た ． CL)ネll・ 織 化 学 的 に は 、 ウ イJレ ス 抗 原 は 腎 臓 病 変 の 形 成 に 先 行 し て 出 川 し ， 下 部 ネ フ 口 ン であるヘンレのルーブ尿細管，遠位尿糸lIl管並びに集合a:llll‑,‐，集合管の−｜，．．b13:11IJ也に 多 く 認 め ら れ た ， 経 時 的 に は ， 腎 臓 病 変 は 接 種 後4Elで ウ イ ル ス 抗 原J幼 性 糸lIIJJ包 の 出現を伴って，集合管，集合 荊II管，尿荊ll管上Slll胞 の変´H：，亅裳ラじに始まり，統いて 問 質 に 水 腫 性 変 化 を 伴 う 偽 好 酸 球 ， マ ク ロ ソ ア ー ジ ， リ ン ， ハ 球 泌 潤 が ′ 川二 てい た，
接種後13日以後では，ウイル ス抗原陽性糸I‖胞はね！・j火し，尿i':lll箭，集合荊lt符，集介 管 上 皮 細 胞 の 襾 生 と り ン ノ ヽ 球 ． 形 質 網 ‖ 胞 のlf書 亅 質 ´ ピk浸iNが' jt体 と な っ た ． 以 上の よう にウ イJレス 抗 原出 ユ児 と糾 織j｜｀変の発ユMは慨ね…・．敏し，ホ1ンイJレス ■
は 腎 臓 に 強 い 親 和 性 並 び に 病 原 性 を 持 ち ， 主 に 下 部 ネ フ 口 ン ， 集 合 荊I｜ ｜ 奇ipび に 集 合管を障害すると解された， また，病変は，｜ iiV‑症，1静症ー｜阡炎，Hl｜J質t'謦炎と推移 すろ こと から ，本 病 には 管ーll‖ 質性I野 炎(tubulointerstitial nephritis)とぃ う 彩称 が 病名として適当と考えられた，
第2章 で は ，IBV感 染 腎 臓 の 檪 的i'III胞 に お け るIンイJレ スの ・改 製様 亅 ニ℃ 北び に衛 主 細 胞 の 超 微 形 態 学 的 変 化 を 「 珂 ら か に す るEl的 で 、 第1ゴIとI司 ・ 一 のIB V宏 純 材 料 を2日 齢 のSPF鶏 の 鼻 腔 内 に 接 種 し ． 接 種 後21三Iか ら201三lま で 腎 臓 に お け るtン イ ル ス 感 染 上 皮 細 胞 に つ い て 電 顕 的 に 検 索 し た ． そ の 結 果 ， 感 染 鶏 の 腎 臓 素Itネ 池 に お い て ， ウ イ 渺 ス 粒 子 の 存 在 す る 感 染 上 皮 荊ll胞 が 接 種 後4E．iか ら13 1‥1Ir‑か け て 観 察 さ れ た ． 集 合 管 ，集 合荊Il管， 遠位 尿荊n管 及び ヘン レ のル ーフ 尿荊llj書は ，近 位 尿 細 管 に 比 ベ ， ウ イ ル ス 粒 子 の 複 製 が 優 勢 で ， こ れ に よ るhll胞 小Zヰ ´l酊 の 変 化 が 著 明 で あ っ た ． す な わ ち ， ウ イ ル ス 粒 子 は エ ン ド サ イ ト ー シ ス に よ り ， 宿 主 荊0胞 に 侵 入 し て い た ． 感 染 上 皮 細 胞 は ， 初 期 に は 腫 大 し ， リ ボ ゾ ー ム の 増 加 ， 粗 面 小 胞 体 並 び に ゴ ル ジ 装 置 の 発 達 を 示 し ， ウ イ ル ス 粒 子 が 活 発 に 複 製 し て い た ， ウ イ ル ス 粒 子 の 出 芽 像 は ， 主 に 粗 面 小 胞 体 の 小 胞 体 膜 で 見 ら れ ， ま れ に 外 側 核 膜 で も 糾 ―，876−
察 さ れ た ． ウ イ ル ス の複 製 に 伴い ， 小 胞体 ， ゴ ルジ 装 置 の 拡張 と 空 胞形 成 がEl立 ち 、 そ の 中 に 多 数 の ウ イ ル ス 粒 子 が 認 め ら れ た ，と き に 細 胞質 に1層の 限 界 膜で 囲 ま れ 。内 部 にiま 多 数 の ウイ ル ス 粒子 並 びに 高電子密 度の微 細顆粒が 充j：fiして い る ウ イ ル ス 電 子 密 度 小 体 が 認 め ら れ ． 変 性 し た ウ イ ル ス 粒 子 を 含 む 自 己 貪食 空 胞 も 観察 さ れ た， ウ イJレス 粒 子 は、 上 皮 細胞 の 自 由表 面 か らエ キ ソサ イトー シ ス あるい は細胞膜 の崩壊により放出されていた．感染上皮糸LI‖亅包は、末)Wには腫火 し て 崩 壊 し て い た ． これ に 対 して ．IBVが 感 染し た 近 位 尿細 管 上 皮細1胞 にお い て は ， 細 胞 質 に り ボ ゾ ーム の 増 数は 認 め られ た も のの ， 粗 而 小胞 体 に 乏し く ． ウイ ルス粒子の出芽像並びにウイルス粒子も少なかった．
以 上 の 所 見 か ら ， 腎 臓 に お け るIBVの 標 的 細 胞 は ， 主に 下 部 ネフ 口 ン 並び に 集 合 管 系 の上 皮 細 胞で あるとみ なされた ．この ようなIBVの荊n胞A署I：1性 は．そ れら の 細 胞 が 分 泌 型 細 胞 に属 し ， 蛋白 質 を 合成 す る 粗面 小 胞 体 ，ゴ ル ジ 装置 な ど がよ く発達した細胞であることに基づぃていると解された．
第3章 で は 、IB腎 臓 病 変 の 病 理 発 生 に 対 す る 生 体 防 御能 の 関 わり を 知 るIミI的 で ， 実 験 的 に7日 齢 のSPF鶏 にIBDVを 接 種 し ， そ の14日 齢 の 感 染 耐 過 鶏 と1司 日 齢 の 無 処 置SPF鶏 にIBVを 接 種 し た ． そ し てIBV‑接 種 後30日 ま で 気 管 及 び 腎 臓 病 変 を ， 経 時 的 に 病 理 組 織 学 的 並 び に 免 疫 組 織 化 学 的 に 比 較 観 察 し た ． LBDV+IBV接 種 群 は ，20％ （ 8／40羽 ） の 死 亡 率 を 示 し た が ，IBVの み 接 種 群 に は 死 亡 は 見 ら れ な か っ た ．IBVに よ る 臨 床症 状 と 気 管及 び 腎 臓に お け る肉 眼 病変は，ともにIBDV+IBVjtlTl群が重度で、持続期｜川も長かった．感染初刈の/℃琵．
及 び腎臓 の組織病 変としては，． IBDV+IBvd7>l:fii群並びにIBV宏種餅双方とも｜Id質 の 急 性 病変 を 示 した ． し か し， そ れ らの 病 変程度 は，前 者が後者 における より議 ： 明 で あ っ た ． 感 染 後 期の 腎 臓 病変 は 、IB馴 妾 種群 で は り ンパ 池 胞 様柑 造 形 成を 什 った慢性間質性腎炎を示したのに対し，IBDV十IB馴妾種群は変性した尿老Ill備；を↓｜又 り 囲 ん だ り ン バ 球 浸 潤 及 び 線 維 化 を 特 徴 と す る 憾 性 活 動 性 腎 炎 を 呈 し た ， すな わ ち ．IBDV十IBV接 種群 はIB馴 妾 種 群よ り 、長 ！Wに わたっ ての病変 の持続 をカ；し −877一
免 疫 組 織 化 学 的 検 索 で は ，IBV抗 原 陽 性 反 応 は ． 感 染 初jWに 気 管 の 粥 ！iJJ典 ．I｜ 皮 翻ll 胞 に 見 ら れ ． そ の 後 ， 腎 臓 の 下 部 ネ フ ロ ン ， 集 合 llli‑； 並 び に 集 合 管 の 上 皮 糸l｜I胞 に 検 出 さ れ た ， 抗 原 陽 性 ネ 川 胞 は ，IBDV+IB丶 蝦 種 群 で はIBVの み 接 種 群 よ り ， 多 数 か つ長期に観察された．IBV感染77r.,IUJ・のIB DV+IBV‑Yi,t fil群に児られた慢´ピI：f舌勁´rI：｜itナ 炎像 を呈す ろ腎臓 細織 にも，IBVfiL原陽 ´VI:a:11[胞が認 められ た．
以 上 の 所 見 か ら ，IBVに 感 染 し た 免 疫 欠 損 鶏 は あ る 一 定JW川 に わ た っ てIBVl.li 続感 染を示L． その→iも 変とし て憾´lHI:llrl動 性腎炎 が繼統 して いた，
学位論文審査の要旨
学 位 論 文 題 名
鶏伝染性気管支炎ウイルスに起因する腎臓病変と その病理発生に関する研究
鶏 伝 染 性 気 管 支 炎(IB)は ， コ 口 ナ ウ イ ル ス に 属 す るIBウ イ ル ス(IBV） を 原 因 と す る ． 本 病 は 呼 吸 器 病 を 主 と す る が ， や や 高 い 致 死 率 を 示 し て 腎 病 変 を 形 成 す る 病 型 も あ る ． 後 者 は 腎 親 和 性IB¥rに 起 因 す る が ， 病 変 が 多 岐 に わ た る こ と か ら ， 腎 症 ， 腎 炎 ， 問 質 性 腎 炎 な ど と ， 症 例 別 あ る い は 報 告 者 に よ っ て 病 変 名 が 異 な る ． そ こ で 申 請 者 は ， 腎 親 和 性IBV (¥L‑V87株 ） をSPF鶏 雛 に 接 種 し ， 腎 病 変 の 形 態 学 的 特 徴 と 病 理 発 生 を ， 経 時 的 変 化 を 基 に し て 明 ら か に し た ．
最 初 に ，IBV感 染 雛 の 腎 の 組 織 病 変 の 推 移 とIBV抗 原 出 現 と の 関 連 性 を 検 討 し た ． そ の 結 果 ， 基 本 的 病 変 は 変 性 ・ 壊 死 性 変 化 で ， こ れ が 下 部 ネ フ 口 ン （ ヘ ン レ の ル ー フ と 遠 位 尿 細 管 ） と 集 合 管 系 （ 集 合 細 管 と 集 合 管 ） に 出 現 し た ． こ の 病 変 は ， 進 行 と 共 に 炎 症 性 反 応 を 伴 い ｜ 問 質 に は り ン パ 球 な ら び に 形 質 細 胞 浸 潤 が 目 立 っ た ． 要 す る に ， IBVに よ る 腎 病 変 は 尿 細 管 腎 症 ， 尿 細 管 腎 症 一 尿 細 管 腎 炎 ， 問 質 性 腎 炎 と 推 移 し た ． IBV抗 原 は ， 上 記 の 下 部 ネ フ 口 ン な ら び に 集 合 管 系 の 病 変 に 一 致 し て 出 現 し て い た ． 次 に ，IBV標 的 細 胞 に お け るIBVの 複 製 様 式 な ら び に 細 胞 小 器 宮 の 変 化 を 超 微 形 態 学 的 に 検 索 し た ． そ の 結 果 ， 感 染 初 期 に は り ボ ゾ ー ム の 増 加 ， 粗 面 小 胞 体 な ら び に ゴ ル ジ 装 置 の 発 達 が み ら れ ，IB¥rの 出 芽 像 は 粗 面 小 胞 体 の 小 胞 体 膜 で 主 に 認 め ら れ た ．IBV 増 殖 に 伴 っ て ， 小 胞 体 な ら び に ニ む レ ジ 装 置 の 拡 張 と 空 砲 形 成 が 目立 ち，IBV電子 密度 小 体 あ る い は 自 己 貧 食 空 砲 も 形 成 さ れ ， 細 胞 は 崩 壊 し て い た ． ま た ，IBVの 細 胞 親 和 性 が 下 部 ネ フ 口 ン と 集 合 管 系 で あ る こ と は ， こ れ ら の 細 胞 が 分 泌 型 細 胞 に 属 す る か ら て あ る こ と も 注 目 さ れ た ・
最 後 に ，IB腎 病 変 の 推 移 に 対 す る 生 体 防 御 能 の 関 オ っ り を 検 討 し た ． こ の た め に ， あ ら か じ め 伝 染 性 フ ァ ブ リ キ ウ ス 嚢 病 ウ イ ル ス(IBDV:） を 感 染 さ せ て 液 性 免 疫 を 抑 制 し た 雛 に1BVを接 種し ，組 織学 的な らび に 免疫 組織 学的 に観 察し た． この 結果 ，免 疫弘 ．眦IJ は ，IBrr$病 変 の 程 度 を 強 く し ，IBV抗 原 を 伴 っ た 病 変 を 持 続 さ せ た ． 現 往 ， 野 外 に は IBDWが 広 く 蔓 延 し て お り ， そ の 病 態 は 野 外 の 実 状 を 示 す も の と 解 さ れ た ．
敏 晃
宏 彦
智
敏
倉 本
田 永
板 橋
喜 岩
授 授
授 授
教 教
教 教
査 査
査 査
主 副
副 副
