N- グリコシル化反応
2.2 フラグメント B の合成
Benzyl O-(2,3,4-tri-O-acetyl-α-L-fucopyranosyl)-(1→3)-2-deoxy-2-phthalimido-β-D- glucopyranoside (32).
2糖35 249 mg(0.25 mmol)をジクロロメタン9 mlに溶解させ、これに水1 mlと DDQ
341 mg(1.5 mmol)を加えて室温で2時間攪拌した。TLC(トルエン:酢酸エチル = 3:1)で出発
原料の消失を確認した後、アスコルビン酸緩衝溶液を 10 ml 加えて(反応系が黄色に変化)、
反応を停止させた。反応溶液を飽和食塩水で洗浄した後、有機相を硫酸マグネシウムで乾 燥後、溶媒を減圧下留去してトリオール 36 とともに、ジオール 38 およびその位置異性 体を混合物として得た。この混合物をアルゴン雰囲気下、メタノール 5 ml に溶解させた 後、ナトリウムメトキシド13.5 mg(0.25 mmol)を加えて50 ˚Cで2時間攪拌した。TLC(ク ロロホルム:メタノール = 9:1)で混合物がトリオール36に収束したことを確認した後、反 応溶液を氷浴で冷却し、Amberlyst-15 を加えて中和した。Amberlyst-15 を濾別した後、濾 液を減圧下留去してトリオール 36 を粗生成物として得た。このトリオール 36 をピリジ ン6 mlに溶解させた後、氷浴で冷却しながら無水酢酸を3 mlとDMAP 3 mg(0.025 mmol) 加え、室温で6時間攪拌した。TLC(クロロホルム:メタノール = 9:1)でトリオール36の消 失を確認した後、氷浴で冷却しながらエタノールを10 ml加え、反応終了とした。反応混 合物を減圧下留去した後、残渣をクロロホルムで溶解させ、冷 1 M HCl 水溶液と飽和食 塩水で洗浄した。有機相を硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を減圧下留去し、得られた残 渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(ヘキサン:酢酸エチル = 2:1)で精製して約 150
mg(ca. 0.2 mmol)の2糖37を粗生成物として得た。この2糖37をジクロロメタン2 mlに
溶解させた後、水100 µlとTFA 200 µlを加えて室温で3時間攪拌した。TLC(ヘキサン:酢
酸エチル = 1:1)で2 糖37 の消失を確認した後、氷浴で冷却しながらアンモニア水溶液を
加えて反応終了とし、反応溶液を減圧下濃縮した。得られた残渣をクロロホルムで溶解さ せ、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液と飽和食塩水で洗浄した。有機相を硫酸マグネシウム で乾燥後、溶媒を減圧下留去し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (ヘキサン:酢酸エチル = 1:1〜1:2)で精製してジオール32を119 mg(71%、4段階)得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.72-7.70(m, 4 H, Phth), 7.10-7.02(m, 5 H, Ar), 5.27(dd, J = 1.2, 3.2 Hz, 1 H, 4-HFuc), 5.16-5.12(m, 2 H, 1-HGlc, 3-HFuc), 5.05(dd, J = 3.9, 10.7 Hz, 1 H, 2-HFuc), 4.99(d, J
= 3.9 Hz, 1 H, 1-HFuc), 4.76(d, J = 12.3 Hz, 1 H, PhCHH), 4.50(d, J = 12.3 Hz, 1 H, PhCHH), 4.47- 4.42(m, 1 H, 5-HFuc), 4.35(dd, J = 8.0, 10.5 Hz, 1 H, 3-HGlc), 4.26(dd, J = 8.4, 10.5 Hz, 1 H, 2-HGlc), 4.17(d, J = 1.5 Hz, 1 H, 4-OHGlc), 3.97-3.94(br, 1 H, 6a-HGlc), 3.87-3.83(br, 1 H, 6b-HGlc), 3.64- 3.59(m, 1 H, 4-HGlc), 3.52-3.48(m, 1 H, 5-HGlc), 2.13-2.02(br, 1 H, 6-OHGlc), 2.08(s, 3 H, CH3CO), 1.85(s, 3 H, CH3CO), 1.20(s, 3 H, CH3CO), 1.13(d, J = 6.6 Hz, 3 H, 6-CH3Fuc)
13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ 170.1, 169.6, 169.3, 136.8, 133.9, 131.5, 128.1, 127.6, 127.5, 123.3, 97.5, 97.3, 81.4, 75.1, 71.3, 71.2, 70.8, 67.5, 67.4, 66.1, 62.6, 54.7, 20.7, 19.6, 16.0
ESI-MS : 694.20703 (C33H37O14NNa+, [M+Na]+; calc. 694.21117)
Benzyl O-(2,3,4-tri-O-acetyl-α-L-fucopyranosyl)-(1→3)-O-[(3,4-di-O-acetyl-2-O-benzyl-α-L- fucopyranosyl)-(1→6)]-2-deoxy-2-phthalimido-β-D-glucopyranoside (9).
アルゴン雰囲気下、MS 4A 200 mgとジオール32 26.9 mg(40.0 µmol)、フコシルドナー31 20.6 mg(56.0 µmol)、DTBMP 34.5 g(168 µmol)をCPME 2 mlに縣濁させ、室温で30分攪拌 した。これに対し、MeOTf(1 M 1,2-ジクロロエタン溶液)を168 µl(168 µmol)加え、室温で 2時間攪拌した。TLC(トルエン:酢酸エチル = 1:1)でジオール32の消失を確認した後、ト リエチルアミンを50 µl 加えて反応終了とした。混合物を酢酸エチルで希釈した後にセラ イト濾過し、濾液を飽和食塩水で洗浄した。有機相を硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を 減圧下留去し、得られた残渣を pTLC(トルエン:酢酸エチル = 3:2)で精製してフラグメン トB 9を33.5 mg(84%)得た。また、フラグメントBのβ体を3.1 mg(8%)得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.71(br, 3 H, Ar), 7.36-7.25(m, 6 H, Ar), 7.08-6.96(m, 5 H, Ar), 5.39(dd, J = 3,4, 10.5 Hz, 1 H, 3-HFuc2), 5.31-5.30(br, 1 H, 4-HFuc2), 5.17(br, 1 H, 4-HFuc1), 5.12(dd, J = 3.2, 10.5 Hz, 1 H, 3-HFuc1), 5.05(d, J = 8.3 Hz, 1 H, 1-HGlc), 4.99-4.94(m, 3 H, 1,2-HFuc1, 1- HFuc2), 4.75-4.69(m, 3 H, PhCH2), 4.62(d, J = 12.4 Hz, 1 H, PhCHH), 4.44-4.27(m, 4 H, 2,3-HGlc, 5- HFuc1, PhCHH), 4.25-4.20(br, 1 H, 5-HFuc2), 4.10(d, J = 2.4 Hz, 1 H, 4-OHGlc), 4.02(dd, J = 2.7, 11.2 Hz, 1 H, 6a-HGlc), 3.87(dd, J = 3.4, 10.5 Hz, 1 H, 2-HFuc2), 3.82(dd, J = 5.4, 11.2 Hz, 1 H, 6b-HGlc), 3.68(td, J = 2.4, 8.8 Hz, 1 H, 4-HGlc), 3.62-3.57(m, 1 H, 5-HGlc), 2.13(s, 3 H, CH3CO), 2.06(s, 3 H,
6-CH3Fuc2), 0.97(d, J = 6.6 Hz, 3 H, 6-CH3Fuc1)
13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ 170.2, 170.1, 169.8, 169.7, 169.2, 137.8, 136.7, 133.8, 131.5, 128.4, 128.0, 127.8, 127.4, 127.2, 123.4, 98.1, 97.0, 96.9, 79.8, 74.1, 73.7, 72.8, 71.6, 71.0, 70.9, 70.6, 70.1, 68.0, 67.6, 67.5, 65.6, 64.6, 55.1, 21.0, 20.8, 20.7, 20.6, 19.8, 16.0, 15.8
Anal. Calcd for C50H57NO20 : C, 60.54; H, 5.79; N, 1.41. Found : C, 60.61; H, 5.88; N, 1.41