N- グリコシル化反応
2.1 フラグメント A の合成
Benzyl O-(3-O-tert-butyldiphenylsilyl-4,6-O-cyclohexyliden-β-D-mannopyranosyl)-(1→4)-3,6- di-O-benzyl-2-deoxy-2-phthalimido-β-D-glucopyranoside (16).
アルゴン雰囲気下、MS 4A 10 gとDDQ 1.42 g(6.25 mmol)をジクロロメタン40 mlに懸 濁させ、反応容器を氷浴で冷却しながら攪拌し、マンノシルドナー13 3.90 g(6.0 mmol)と グルコサミン誘導体14 2.90 g(5.0 mmol)のジクロロメタン溶液60 mlを加えた。氷浴中で 30分間攪拌した後に室温に昇温し、さらに3 時間攪拌した。TLC(ヘキサン:酢酸エチル =
2:1)でマンノシルドナー13 が概ね消失したことを確認した後、アスコルビン酸緩衝溶液を
200 ml 加え、5 分間室温で攪拌した(溶液が黄色に変化)。続いて、反応混合物をセライト
濾過し、濾液を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液と飽和食塩水で洗浄した。有機相を硫酸マ グネシウムで乾燥後、溶媒を減圧下留去し、得られた残渣(混合アセタール 15)に対して MS 4A 16 gとDTBMP 4.1 g(20 mmol)を加えて、1,2-ジクロロエタン700 mlに懸濁させた。
氷浴中で30分攪拌した後、MeOTf 1.9 ml(17.5 mmol)を加えて氷浴中でさらに30分攪拌し た。続いて、45 ˚C まで昇温し、24 時間攪拌した。TLC(トルエン:酢酸エチル = 9:1)で混 合アセタール15の消失を確認した後、トリエチルアミンを7 ml加えて反応終了とし、反 応混合物を空冷後、炭酸水素ナトリウムと氷を加えて室温で 15 分攪拌した。ジクロロメ タンで希釈した後、セライト濾過し、濾液を水と飽和食塩水で洗浄した。有機相を硫酸ナ トリウムで乾燥後、溶媒を減圧下留去し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラ フィー(トルエン:酢酸エチル = 25:1〜16:1)で精製して2糖16を3.32 g(63%、2段階)得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.87-6.82(m, 29 H, Ar), 5.10(d, J = 8.3 Hz, 1 H, 1-HGlc), 4.82- 4.79(m, 2 H, PhCH2), 4.61(d, J = 12.2 Hz, 1 H, PhCHH), 4.49-4.39(m, 3 H, 1-HMan, PhCH2), 4.34- 4.13(m, 3 H, PhCHH, 2,3-HGlc), 4.03-3.98(m, 2 H, 4-HMan, 4-HGlc), 3.78-3.44(m, 7 H, 2,3,6a,6b- HMan, 5,6a,6b-HGlc), 2.90-2.84(m, 1 H, 5-HMan), 2.61(br, 1 H, 2-OHMan), 1.98-1.41(m, 10 H, cyclohexyl), 1.14(s, 9 H, C(CH3)3)
13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ 167.5, 138.5, 137.6, 137.1, 136.2, 135.8, 133.8, 133.4, 132.6, 131.5, 129.9, 129.7, 128.3, 128.0, 127.8, 127.7, 127.6, 127.4, 126.8, 123.0, 100.2, 99.8, 97.5, 78.8, 74.5, 74.4, 73.4, 73.1, 71.3, 70.8, 69.8, 68.1, 67.6, 61.2, 55.7, 38.0, 27.7, 26.9, 25.6, 22.6, 22.3, 19.3 [α] = +17.6 (c 1.0, CHCl3)
ESI-MS : 1082.44671 (C63H69O12NSiNa+, [M+Na]+; calc. 1082.44867)
Benzyl O-(2,3,4-tri-O-acetyl-β-D-xylopyranosyl)-(1→2)-O-(3-O-tert-butyldiphenylsilyl-4,6-O- cyclohexyliden-β-D-mannopyranosyl)-(1→4)-3,6-di-O-benzyl-2-deoxy-2-phthalimido-β-D- glucopyranoside (19).
アルゴン雰囲気下、MS 4A 120 mg とキシロース誘導体 18(150 µmol)、2 糖 16 52.8
mg(49.8 µmol)をジクロロメタン2.5 mlに縣濁させ、−40 ˚Cで30分攪拌した。これに対し、
TMSOTfを18 µl(100 µmol)加え、−40 ˚Cで2時間攪拌した。TLC(トルエン:酢酸エチル = 2:1)で反応の停止を確認した後、トリエチルアミンを 30 µl 加えて反応終了とした。混合 物を−40 ˚C で 5 分間攪拌した後、酢酸エチルで希釈してセライト濾過し、濾液を飽和炭 酸水素ナトリウム水溶液と飽和食塩水で洗浄した。有機相を硫酸マグネシウムで乾燥後、
溶媒を減圧下留去し、得られた残渣をゲル濾過(SX-4、トルエン)と pTLC(トルエン:酢酸 エチル = 3:2)で精製して 3 糖 19 を 44.0 mg(67%)得た。また、未反応の 2 糖 16 を 6.2 mg(回収率 : 12%)得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.80-6.74(m, 29 H, Ar), 5.11-5.03(m, 3 H, 1-HGlc, 1,3-HXyl), 4.96(dd, J = 5.1, 7.1 Hz, 1 H, 2-HXyl), 4.80-4.69(m, 3 H, 4-HXyl, PhCH2), 4.52(d, J = 12.2 Hz, 1 H, PhCHH), 4.43(d, J = 12.5 Hz, 1 H, PhHH), 4.35(s, 1 H, 1-HMan), 4.31(d, J = 12.2 Hz, 1 H, PhHH), 4.20-
Glc Xyl Man Glc
3.76(d, J = 2.9 Hz, 1 H, 2-HMan), 3.72-3.64(m, 2 H, 3,6a-HMan), 3.60-3.57(m, 1 H, 6a-HGlc), 3.46(t, J
= 10.4 Hz, 1 H, 6b-HMan), 3.37-3.29(m, 2 H, 5,6b-HGlc), 3.13(dd, J = 6.7, 12.1 Hz, 1 H, 5b-HXyl), 2.84-2.76(m, 1 H, 5-HMan), 2.08(s, 3 H, CH3CO), 2.02(s, 3 H, CH3CO), 1.89(s, 3 H, CH3CO), 1.81- 1.25(m, 10 H, cyclohexyl), 1.10(s, 9 H, C(CH3)3)
13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ 170, 169.3, 168.8, 167.4, 138.3, 137.6, 137.0, 136.4, 136.0, 134.3, 133.4, 131.4, 129.5, 129.4, 128.3, 128.0, 127.7, 127.4, 127.3, 127.2, 126.8, 123.0, 102.4, 99.8, 98.5, 97.2, 80.4, 75.5, 74.8, 74.5, 73.4, 72.6, 70.7, 70.2, 69.7, 69.5, 68.7, 68.5, 68.3, 61.4, 60.8, 55.6, 38.0, 27.7, 27.0, 26.0, 22.7, 22.4, 21.0, 20.9, 20.8, 19.5
[α] = −34.4 (c 1.0, CHCl3)
ESI-MS : 1340.52077 (C74H83O19NSiNa+, [M+Na]+; calc. 1340.52262)
Benzyl O-(2,3,4-tri-O-acetyl-β-D-xylopyranosyl)-(1→2)-O-(4,6-O-cyclohexyliden-β-D-
mannopyranosyl)-(1→4)-3,6-di-O-benzyl-2-deoxy-2-phthalimido-β-D-glucopyranoside (11).
3糖19 1.40 g(1.06 mmol)をHF·Pyの10% DMF溶液4 mlに溶解させ、超高圧反応専用容 器に移し込んだ。反応容器を超高圧装置で 1 GPa まで加圧し、12 時間反応させた。反応 溶液を酢酸エチルで希釈して分液漏斗へ移し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液と飽和食塩 水で洗浄した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を減圧下留去し、得られた残渣を シリカゲルカラムクロマトグラフィー(ヘキサン:酢酸エチル = 1:1)で精製してフラグメン トA-1 11を1.10 g(88%)得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.63-6.77(m, 19 H, Ar), 5.18(t, J = 7.6 Hz, 1 H, 3-HXyl), 5.07- 5.05(m, 1 H, 1-HGlc), 4.96-4.87(m, 3 H, 1,2,4-HXyl), 4.79-4.70(m, 3 H, PhCH2), 4.56(s, 1 H, 1-HMan), 4.49-4.45(m, 2 H, PhCH2), 4.28(d, J = 12.2 Hz, 1 H, PhCHH), 4.23-4.17(m, 3 H, 2,3-HGlc, 5a-HXyl), 3.98-3.93(m, 1 H, 4-HGlc), 3.84(d, J = 3.2 Hz, 1 H, 2-HMan), 3.73-3.72(m, 2 H, 6a,6b-HGlc), 3.66- 3.56(m, 2 H, 4,6a-HMan), 3.52-3.48(m, 1 H, 5-HGlc), 3.42-3.31(m, 3 H, 3,6b-HMan, 5b-HXyl), 2.97- 2.91(m, 1 H, 5-HMan), 2.87(d, J = 9.3 Hz, 1 H, 3-OHMan), 2.07(s, 3 H, CH3CO), 2.02(s, 6 H, CH3CO), 1.99-1.32(m, 10 H, cyclohexyl)
13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ 169.5, 169.3, 169.0, 167.5, 138.4, 137.4, 136.9, 133.4, 131.4, 128.5,
128.0, 127.9, 127.7, 127.4, 127.3, 126.8, 123.0, 102.1, 99.9, 99.8, 97.3, 80.8, 77.5, 74.6, 74.4, 73.8, 70.8, 70.6, 70.4, 70.1, 68.5, 68.4, 68.2, 61.4, 61.1, 55.6, 38.0, 27.9, 25.7, 22.9, 22.6, 21.2, 20.9, 20.8 [α] = −35.3 (c 1.0, CHCl3)
ESI-MS : 1102.40674 (C58H65O19NNa+, [M+Na]+; calc. 2489.95529)
Methyl O-(3,4,6-tri-O-benzyl-2-deoxy-2-phthalimido-β-D-glucopyranosyl)-(1→2)-3,4,6-tri-O- benzyl-1-thio-α-D-mannopyranoside (12).
アルゴン雰囲気下、MS 4A 8 gとAgOTf 3.39 g(13.2 mmol)をトルエン40 mlに縣濁さ せ、−40 ˚Cで30分攪拌した。これに対し、グリコシルクロリド23(6.62 mmol)とマンノー ス誘導体21 2.46 g(5.19 mmol)の1,2-ジクロロエタン溶液(80 ml)を加え、−40 ˚Cで1時間攪 拌した。TLC(トルエン:酢酸エチル = 9:1)でマンノース誘導体21の消失を確認した後、ト リエチルアミンを2 ml 加え反応終了とし、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を10 ml 加え て 15 分間室温で攪拌した。混合物を酢酸エチルで希釈した後にセライト濾過し、濾液を 飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄した。有機相を硫酸マグネシウムで乾 燥後、溶媒を減圧下留去し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(トル エン:酢酸エチル = 20:1)で精製してフラグメントA-2 12を3.42 g(63%)得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.58-7.49(m, 4 H, Phth), 7.34-6.81(m, 30 H, Ar), 5.27(d, J = 7.8 Hz, 1 H, 1-HGlc), 4.86-4.74(m, 5 H, 1-HMan, PhCH2), 4.65-4.44(m, 5 H, PhCH2), 4.39-4.29(m, 3 H, 2,3- HGlc, PhCHH), 4.15(t, J = 2.5 Hz, 1 H, 2-HMan), 4.01(d, J = 12.0 Hz, 1 H, PhCHH), 3.96(d, J = 12.0 Hz, 1 H, PhCHH), 3.82-3.68(m, 6 H, 4,5,6a,6b-HGlc, 3,5-HMan), 3.46(t, J = 9.1 Hz, 1 H, 4-HMan), 3.37(dd, J = 1.8, 10.9 Hz, 1 H, 6a-HMan), 2.92(dd, J = 6.6, 10.9 Hz, 1 H, 6b-HMan), 1.90(s, 3 H, SCH3)
13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ 138.2, 137.9, 137.8, 137.7, 133.3, 131.6, 128.3, 128.2, 128.1, 128.0, 127.9, 127.8, 127.7, 127.5, 127.4, 1273, 127.2, 127.1, 122.9, 96.4, 82.6, 79.7, 79.0, 77.9, 75.1, 75.0, 74.8, 74.7, 73.6, 72.7, 71.8, 70.7, 69.8, 69.3, 55.8, 13.8
[α] = +41.2 (c 1.0, CHCl3)
+ +
Benzyl O-(3,4,6-tri-O-benzyl-2-deoxy-2-phthalimido-β-D-glucopyranosyl)-(1→2)-O-(3,4,6-tri- O-benzyl-α-D-mannopyranosyl)-(1→3)-O-[(2,3,4-tri-O-acetyl-β-D-xylopyranosyl)-(1→2)]-(4,6- O-cyclohexyliden-β-D-mannopyranosyl)-(1→4)-3,6-di-O-benzyl-2-deoxy-2-phthalimido-β-D- glucopyranoside (24).
アルゴン雰囲気下、MS 4A 6 gとフラグメントA-1 11 2.16 g(2.0 mmol)、フラグメント A-2 12 3.14 g(3.0 mmol)、DTBMP 1.85 g(9.0 mmol)をトルエン80 mlに縣濁させ、室温で30 分攪拌した。これに対し、MeOTfを1.0 ml(9.0 mmol)を加え室温で1.5時間攪拌した後、
50 ˚Cまで昇温して12時間攪拌した。TLC(トルエン:酢酸エチル = 3:1)でフラグメントA- 1 11 の消失を確認した後、反応容器を空冷し、トリエチルアミンを 1.3 ml 加えて反応終 了とした。混合物を酢酸エチルで希釈した後にセライト濾過し、濾液を飽和食塩水で洗浄 した。有機相を硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を減圧下留去し、得られた残渣をシリカ ゲルカラムクロマトグラフィー(トルエン:酢酸エチル = 6:1)で精製して 5 糖 24 を 3.90 g(94%)得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.62-6.79(m, 53 H, Ar), 5.26(d, J = 7.8 Hz, 1 H, 1-HGlc2), 5.04(d, J
= 8.1 Hz, 1 H, 1-HGlc1), 4.96-4.74(m, 9 H, 1-HMan2, 1,2,3-HXyl, PhCH2), 4.68-4.32(m, 12 H, 2,3- HGlc2, 4-HXyl, PhCH2), 4.22-4.11(m, 5 H, 1-HMan1, 2-HMan2, 2,3-HGlc1, PhCHH), 4.04-3.93(m, 3 H, PhCH2), 3.89-3.72(m, 8 H, 2-HMan1, 3,5-HMan2, 4-HGlc1, 4,6a,6b-HGlc2, 5a-HXyl), 3.64-3.61(m, 1 H, 5- HGlc2), 3.58-3.50(m, 2 H, 4,6a-HMan1), 3.45-3.21(m, 7 H, 6b-HMan1, 4,6a-HMan2, 5,6a,6b-HGlc1, 5b- HXyl), 3.15(dd, J = 3.1, 10.1 Hz, 1 H, 3-HMan1), 2.74(dd, J = 7.1, 10.5 Hz, 1 H, 6b-HMan2), 2.54- 2.48(m, 1 H, 5-HMan1), 1.94(s, 3 H, CH3CO), 1.89(s, 3 H, CH3CO), 1.88(s, 3 H, CH3CO), 1.73- 1.25(m, 10 H, cyclohexyl)
13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ 169.2, 169.1, 168.8, 167.3, 138.7, 138.4, 138.3, 138.1, 137.9, 137.8, 137.7, 137.6, 137.0, 133.4, 133.2, 131.7, 131.4, 128.7, 128.3, 128.2, 128.1, 128.0, 127.9, 127.8, 127.7, 127.6, 127.5, 127.4, 127.3, 127.1, 127.0, 126.7, 123.0, 101.5, 99.3, 99.1, 98.1, 97.3, 96.6, 79.7, 79.6, 79.4, 76.2, 76.1, 75.7, 72.2, 75.1, 74.9, 74.8, 74.6, 74.1, 73.7, 73.2, 72.8, 71.8, 71.7, 70.8, 70.0, 69.7, 69.5, 69.3, 68.2, 67.9, 61.3, 60.5, 55.9, 55.5, 38.0, 27.9, 25.7, 23.5, 22.7, 21.0, 20.9, 20.7 [α] = −21.5 (c 1.0, CHCl3)
Anal. Calcd for C120H124N2O30 : C, 69.48; H, 6.03; N, 1.35. Found : C, 69.51; H, 6.01; N, 1.23
Benzyl O-(3,4,6-tri-O-benzyl-2-deoxy-2-phthalimido-β-D-glucopyranosyl)-(1→2)-O-(3,4,6-tri- O-benzyl-α-D-mannopyranosyl)-(1→3)-O-[(2,3,4-tri-O-acetyl-β-D-xylopyranosyl)-(1→2)]-(β-D- mannopyranosyl)-(1→4)-3,6-di-O-benzyl-2-deoxy-2-phthalimido-β-D-glucopyranoside (25).
5糖24 29.9 mg(12.2 µmol)をアセトニトリル1 mlに溶解させた後、トシル酸一水和物を
6.8 mg(36.0 µmol)加え、室温で9 時間攪拌した。TLC(ヘキサン:酢酸エチル = 1:1)で5糖
24 の消失を確認した後、トリエチルアミンを 0.1 ml 加えて反応終了とした。反応液を酢 酸エチルで希釈した後に、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液と飽和食塩水で洗浄した。有機 相を硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を減圧下留去し、得られた残渣を pTLC(ヘキサン:
酢酸エチル = 1:1)で精製してジオール25を26.0 mg(91%)得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.64-6.77(m, 53 H, Ar), 5.34(d, J = 8.3 Hz, 1 H, 1-HGlc2), 5.08- 4.98(m, 4 H, 1-HMan2, 1-HGlc1, 1,3-HXyl), 4.92-4.87(br, 1 H, 4-HXyl), 4.85-4.73(m, 7 H, 2-HXyl, PhCH2), 4.59(d, J = 12.2 Hz, 1 H, PhCHH), 4.54-4.41(m, 9 H, 1-HMan1, 3-HGlc2, PhCH2), 4.39- 4.24(m, 5 H, 3-HGlc1, 2-HGlc2, PhCH2), 4.19-4.14(m, 2 H, 2-HMan2, 2-HGlc1), 4.02-3.99(m, 3 H, 5a- HXyl, PhCH2), 3.85-3.75(m, 6 H, 2,6a-HMan1, 3,5-HMan2, 4-HGlc1, 5-HGlc2), 3.69-3.64(m, 2 H, 4-HMan2, 4-HGlc2), 3.61-3.50(m, 4 H, 4-HMan1, 6a,6b-HGlc1, 6a-HGlc2), 3.43-3.35(m, 4 H, 6b-HMan1, 6a-HMan2, 5-HGlc1, 6b-HGlc2), 3.21-3.15(m, 2 H, 3-HMan1, 5b-HXyl), 3.06(d, J = 4.9 Hz, 1 H, 4-OHMan1), 2.88- 2.81(m, 2 H, 5-HMan1, 6b-HMan2), 2.17(br, 1 H, 6-OHMan1), 1.96(s, 3 H, CH3CO), 1.95(s, 3 H, CH3CO), 1.93(s, 3 H, CH3CO)
13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ 169.7, 169.2, 167.5, 138.3, 138.2, 138.1, 137.8, 137.5, 136.9, 133.4, 131.5, 131.4, 128.4, 128.2, 128.1, 128.0, 127.9, 127.8, 127.6, 127.5, 127.4, 127.3, 127.2, 127.1, 126.9, 123.1, 101.1, 100.0, 97.1, 97.0, 96.4, 79.7, 79.1, 79.0, 77.2, 77.1, 76.1, 75.0, 74.8, 74.7, 74.6, 74.3, 73.9, 73.5, 73.5, 73.4, 73.2, 72.9, 71.2, 70.7, 70.5, 70.4, 69.5, 68.6, 68.4, 65.4, 62.2, 61.3, 56.0, 55.6, 31.0, 21.2, 20.9
[α] = −7.16 (c 1.0, CHCl3)
Benzyl O-(3,4,6-tri-O-benzyl-2-deoxy-2-phthalimido-β-D-glucopyranosyl)-(1→2)-O-(3,4,6-tri- O-benzyl-α-D-mannopyranosyl)-(1→3)-O-[(2-O-acetyl-3,4,6-tri-O-benzyl-α-D-
mannopyranosyl)-(1→6)]-O-[(2,3,4-tri-O-acetyl-β-D-xylopyranosyl)-(1→2)]-(β-D-
mannopyranosyl)-(1→4)-3,6-di-O-benzyl-2-deoxy-2-phthalimido-β-D-glucopyranoside (26).
アルゴン雰囲気下、MS 4A 200 mgとAgOTf 7.8 mg(30.2 µmol)をトルエン1 mlに縣濁さ せ、0 ˚Cで30 分攪拌した後−30 ˚Cまで冷却し、さらに 10分間攪拌した。これに対し、
マンノシルドナー10(15.1 µmol)とジオール25 25.1 mg(12.6 µmol)の1,2-ジクロロエタン溶 液(2 ml)を加え、−30 ˚C で 30 分攪拌した後室温まで昇温し、さらに 2.5 時間攪拌した。
TLC(トルエン:酢酸エチル = 2:1)でジオール25の消失を確認した後、トリエチルアミンを 20 µl 加え反応終了とした。混合物を酢酸エチルで希釈した後にセライト濾過し、濾液を 飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄した。有機相を硫酸マグネシウムで乾 燥後、溶媒を減圧下留去し、得られた残渣を pTLC(トルエン:酢酸エチル = 4:1)で精製し て6糖26を23.9 mg(77%)得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.63-6.70(m, 68 H, Ar), 5.33-5.32(m, 1 H, 2-HMan3), 5.29(d, J = 8.3 Hz, 1 H, 1-HGlc2), 5.11-4.98(m, 3 H, 1-HGlc1, 2,3-HXyl), 4.91(d, J = 1.7 Hz, 1 H, 1-HMan2), 4.88- 4.72(m, 10 H, 1-HMan3, 1,4-HXyl, PhCH2), 4.67-4.20(m, 20 H, 1-HMan1, 2-HMan2, 3-HGlc1, 2,3-HGlc2, PhCH2), 4.13(dd, J = 8.4, 10.4 Hz, 1 H, 2-HGlc1), 4.07(d, J = 12.2 Hz, 1 H, PhCHH), 4.01(d, J = 12.2 Hz, 1 H, PhCHH), 3.92-3.68(m, 15 H, 2,6a-HMan1, 3,4,5-HMan2, 3,4,5,6a,6b-HMan3, 4-HGlc1, 4,5,6a-HGlc2, 5a-HXyl), 3.54-3.47(m, 3 H, 4-HMan1, 6a,6b-HGlc1), 3.43-3.32(m, 4 H, 6b-HMan1, 6a- HMan2, 5-HGlc1, 6b-HGlc2), 3.17-3.09(m, 3 H, 3-HMan1, 4-OHMan1, 5b-HXyl), 2.93-2.85(m, 2 H, 5-HMan1, 6b-HMan2), 2.08(s, 3 H, CH3CO), 1.95(s, 6 H, CH3CO), 1.90(s, 3 H, CH3CO)
13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ 170.0, 169.7, 169.1, 168.9, 167.4, 138.6, 138.2, 138.1, 137.9, 137.8, 137.0, 133.3, 131.4, 128.4, 128.2, 128.1, 127.9, 127.8, 127.7, 127.6, 127.5, 127.4, 127.2, 127.1, 127.0, 126.9, 123.0, 101.7, 100.3, 97.8, 97.5, 97.1, 96.6, 80.0, 79.5, 79.2, 78.3, 77.4, 77.2, 76.3, 75.2, 75.0, 74.8, 74.6, 74.2, 74.1, 73.4, 73.2, 72.8, 71.7, 71.6, 71.5, 71.3, 70.7, 70.6, 70.5, 69.2, 69.1, 68.6, 67.5, 66.3, 61.8, 56.0, 55.6, 31.0, 21.2, 21.0, 20.9
[α] = −3.64 (c 1.0, CHCl3)
ESI-MS : 2489.95692 (C143H146O36N2Na+, [M+Na]+; calc. 2489.95529)
Acetyl O-(3,4,6-tri-O-acetyl-2-deoxy-2-phthalimido-β-D-glucopyranosyl)-(1→2)-O-(3,4,6-tri-O- acetyl-α-D-mannopyranosyl)-(1→3)-O-[(2,3,4,6-tetra-O-acetyl-α-D-mannopyranosyl)-(1→6)]- O-[(2,3,4-tri-O-acetyl-β-D-xylopyranosyl)-(1→2)]-(4-O-acetyl-β-D-mannopyranosyl)-(1→4)-3,6- di-O-acetyl-2-deoxy-2-phthalimido-β-D-glucopyranoside (28a).
アルゴン雰囲気下、6 糖 26 247 mg(100 µmol)をシクロヘキセン20 ml、エタノール10
ml、酢酸 10 ml からなる混合溶液に溶解させ、室温で攪拌した。これに対し、20% 水酸
化パラジウムを 250 mg 加え、加熱還流条件下 60 時間攪拌した(油浴温度 : 90 ˚C)。
MALDI-TOF MASSで全てのベンジル基の消失を確認し、空冷した後セライト濾過した。
濾液を減圧下留去して得られた残渣をピリジン10 mlに溶解させ、氷浴で冷却しながら無 水酢酸を5 ml加え、6時間攪拌した。MALDI-TOF MASSで標的化合物28aの生成を確認 した後、氷浴で冷却しながらエタノールを10 ml加え、反応終了とした。反応混合物を減 圧下留去した後、残渣を酢酸エチルで溶解させ、1 M HCl 水溶液と飽和食塩水で洗浄し た。有機相を硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を減圧下留去し、得られた残渣をpTLC(ヘ キサン:酢酸エチル = 1:4)で精製して6糖28aを180 mg(93%、2段階)得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.84-7.70(m, 8 H, Ar), 6.44(d, J = 9.0 Hz, 1 H), 5.87(t, J = 9.0 Hz, 1 H), 5.66(dd, J = 9.0, 10.5 Hz, 1 H), 5.31-5.28(m, 3 H), 5.19-5.02(m, 5 H), 4.98-4.91(m, 2 H), 4.79- 4.76(m, 3 H), 4.63(br, 1 H), 4.48(br, 1 H), 4.42-4.24(m, 7 H), 4.08-3.82(m, 9 H), 3.76-3.68(m, 3 H), 3.57-3.42(m, 4 H), 2.26(s, 3 H, CH3CO), 2.16-1.94(m, 42 H, CH3CO), 1.88(s, 3 H, CH3CO), 1.84(s, 3 H, CH3CO)
13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ 170.5×2, 170.4, 170.0, 169.8×2, 169.7, 169.5, 169.4, 169.2, 169.1, 168.9, 168.3, 167.2, 134.3, 131.2, 123.5, 99.5, 98.8, 98.2, 97.2, 97.0, 89.6, 74.1, 73.3, 72.5, 72.1, 70.6, 69.6, 69.2, 68.8, 68.7, 68.6, 68.0, 67.8, 65.8, 65.5, 62.3, 62.1, 62.0, 61.8, 54.3, 53.4, 21.0, 20.9, 20.8, 20.7, 20.6×2, 20.5×2, 20.4
[α] = −17.0 (c 1.0, CHCl3)
+ +
O-(3,4,6-Tri-O-acetyl-2-deoxy-2-phthalimido-β-D-glucopyranosyl)-(1→2)-O-(3,4,6-tri-O-acetyl- α-D-mannopyranosyl)-(1→3)-O-[(2,3,4,6-tetra-O-acetyl-α-D-mannopyranosyl)-(1→6)]-O- [(2,3,4-tri-O-acetyl-β-D-xylopyranosyl)-(1→2)]-(4-O-acetyl-β-D-mannopyranosyl)-(1→4)-3,6-di- O-acetyl-2-deoxy-2-phthalimido-β-D-glucopyranosyl trichloroacetimidate (8).
アルゴン雰囲気下、6糖28a 43.8 mg(22.7 µmol)をDMF 3 mlに溶解させ、室温で攪拌し た。これに対し、ヒドラジン酢酸を 2.7 mg(29.5 µmol)加え、室温で 2 時間攪拌した。
TLC(ヘキサン:酢酸エチル = 1:4)で出発原料の消失を確認し、飽和食塩水を1 ml加え、反
応終了とした。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、飽和食塩水で洗浄した。有機相を硫酸 マグネシウムで乾燥後、溶媒を減圧下留去し、ヘミアセタール 30 を粗生成物として得た。
これをトリクロロアセトニトリル5 mlに溶解させ、さらにDBU 3.2 µl(21.6 µmol)を加え て 12時間室温で攪拌した。TLC(ヘキサン:酢酸エチル = 1:4)でヘミアセタール30の消失 を確認した後、反応溶液を減圧下濃縮した。得られた残渣を pTLC(ヘキサン:酢酸エチル
= 1:4、1%トリエチルアミン溶液)で精製し、フラグメントA 8を36.4 mg(79%、2段階)得
た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.62(s, 1 H, NH), 7.83-7.64(m, 8 H, Ar), 6.54(d, J = 8.8 Hz, 1 H), 5.88(dd, J = 8.8, 10.5 Hz, 1 H), 5.64(dd, J = 9.0, 10.5 Hz, 1 H), 5.33-5.26(m, 3 H), 5.18-5.01(m, 5 H), 4.96-4.92(m, 2 H), 4.77-4.73(m, 3 H), 4.62(br, 1 H), 4.50-4.45(m, 2 H), 4.41-4.22(m, 6 H), 4.11-3.81(m, 9 H), 3.75-3.68(m, 3 H), 3.57-3.43(m, 4 H), 2.24(s, 3 H, CH3CO), 2.14-1.82(m, 45 H)
13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ 170.5, 170.4, 170.0, 169.9, 169.8, 169.7, 169.5×2, 169.4, 169.2, 169.1, 168.9, 160.3, 134.3, 131.2, 131.1, 123.5, 99.6, 98.8, 98.2, 97.3, 97.0, 93.4, 90.1, 74.1, 73.5, 72.7, 72.1, 70.6, 69.7, 69.2, 68.9×2, 68.8, 68.7, 68.2, 67.8, 65.8, 65.6, 62.3, 62.2, 61.9×2, 54.4, 53.5, 21.1, 21.0, 20.9, 20.8, 20.7, 20.6×2, 20.5, 20.4
[α] = −13.5 (c 1.0, CHCl3)
ESI-MS : 2056.43055 (C85H98O48N3Cl3Na+, [M+Na]+; calc. 2056.42830)