別 除 の 関
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(2) 1636. 西. れ をPotter‑Elvehjem 90%エ. Glass. 岡. Flomogenizerに. 入 れ,. タ ノ ー ル 中 で 冷 却 しな が ら ホ モ ゲ ナ イ ズ し た. の ち,エ. タ ノ ー ル を 追 加 して 全 量を40mlと. 15分 振 盪. 20分 遠 沈.上 蒸 発 乾 固 し,緩 ウ ム5mlに. 清 を50℃. 衝 液0.2N. と き,再. pH. イ オ ン交 換 ク ロマ トグ ラ フ イ‑. 強 酸 性 ポ リ ス チ レ ン 樹 脂Dowex 150×0.9cmを. Moore. & Steinの. 50‑X4. 用 い,あ. 調 整 し て お き,以 方 法16)に. らか じめ カ ラム 後 の 操 作 は全 く. 準 じ て お こ な つ た.す. 3.1で 展 開 し た の ち,溶. 3.1. 展 開 温 度 は30,. Collector,柳. Meterを. 75℃. と階 段 的. し た.流. 出液 を東. つ 分 劃 採 取 し た.. 調 整 に はColeman. Model. 18‑. 使 用 した.. 比 色 定 量 はMoore 反 応17)に. pH. 本 製Photo‑Electric. Collectorで2mlづ. 緩 衝 液 のpHの ACPH. 50,. 出 速 度 は 毎 時8mlと. 洋 濾 紙 製Fraction Fraction. 媒 混 和 槽 で0.2N. 5.1を 徐 々 に 加 え な が ら連 続 的 に 溶 媒 を. 変 化 さ せ た.又 に 変 え,流. 重 量). (200〜. pH. pH. ア ミ ノ酸 お よ び そ の 関 連 物 質(mg/100g湿. し た.. な わ ち 展 開 溶 媒 は ク エ ン酸 緩 衝 液 を 用 い, 0.2N. に2N. 下 垂 体 剔 除 ダ イ コ ク ネ ズ ミ脳 の遊 離. び 遠 沈 後 そ の 上 清 の 適 当 量2. 3). 2.2に. 第2表. 2.2ク エ ン酸 ナ ト リ. カ ラムに 加 え て展 開 した.. をpH. 輔. 水 浴上 で 徐 々に. 〜3mlを. 400mesh). 博. & Steinの. よ り,標. ニ ン ヒ ド リ ン改 良. 準 液 に はL‑ロ. イ シ ン溶液 を用 *. い 各 ア ミ ノ酸 の ロ イ シ ンに 対 す る 呈 色 比 で 補 正 し た. 比 色 に はColeman. Junior. mmol/100g湿. 重 量. Spectrophotometerを. エ タ ノ ラ ミン等 を 含 まな い欠 点 が あ り,ニ ンヒ ドリ. 用 い た. ア ミ ノ 酸 の 定 性 はStein18)の たN‑ア. ン法 で は各 呈 色 比 の異 な る多 数 の ア ミノ酸 の総計を. 方 法 に 従 つ た.ま. セ チ ル ・ア ス パ ラ ギ ン 酸 の 定 量 は 同 じ カ ラ. ム を 用 い てTallan 4). ンモ ニ ァを 含 めて の 測定 で あ る ことに真 実の ア ミノ. et al.19)に 従 つ て お こ な つ た.. 窒 素 量 を 測 定 し得 な い欠 点 が あ る.ア ンモ ニアには. ア 三 ノ窒 素 の 定 量. ニ ン ヒ ド リ ン 改 良 反 応 に よ つ て お こ な い,標 に はL‑ロ. ロ イ シ ン標 準液 を 基 準 と して 定 量す る こと並 びにア. 準液. 遊 離 ア ン モニ ア ば か りで な く試 料 を酸 性の緩 衝液に 溶 解 して い る関係 上空 気 中 の ア ンモ ニ アを幾分なり. イ シ ン溶 液 を 用 い た.. と も吸 収 して い る筈 で あ る.ニ ン ヒ ドリン法による 実. 験. 成. 績. と下 垂 体 剔 除 に よ りPope. 下 垂 体 剔 除 ダ イ コ ク ネ ズ ミの 脳 遊 離 ア ミ ノ 酸 お よ び そ の 関 連 物 質 の 濃 度 を 第2表. に 示 し た.今. 験 で 分 析 ・定 量 し 得 た の は20種 類(不 リ ン陽 性 物 質X2を. 含 む)で. 回の実. 明のニ ンヒ ド. あ つ た.比. 較のため に. 併 記 し た 正 常 ダ イ コ ク ネ ズ ミの 値 は 那 須20)の 成 績. り も著 明 な み か け上 の ア ミノ窒 素 の減 少が認め られ た が,こ れ は 上述 の諸 因 子 の影 響 して い るためであ ろ うが,と. もか く脳 の ア ミノ窒 素 が減 少す ることは. 確 かで あ る. 脳 の 代 謝 プ ー ル 中 の 各 ア ミ ノ酸 に お い て は多 数 の ア ミ ノ 酸 が 減 少 す る傾 向 に あ り,そ. で あ る. 下 垂 体 剔 除 に よ り代 謝 プ ー ル の ア ミ ノ 窒 素 量 が 総 量 と し て 減 少 す る こ と は 湯 之 上13)がPope Stevena法21)で. & Stevena法 によ るよ. &. 測 定 し た 結 果 と 一 致 し て い る.ア. ミ ノ 窒 素 量 の 測 定 はPope. & Stevena法. 量 含 ま れ て い る γ‑ア ミノ 酪 酸,タ. で は脳 に大. ウ リ ン,ホ. スホ. の う ち 特 に著 明. に 減 少 す る もの は グ ル タ ミ ン 酸 群 に 属 す る ア ミノ酸 す な わ ち ア ス パ ラギ ン 酸,グ 酪 酸 で,そ. ル タ ミン酸,γ‑ア. の ほ か ア ラ ニ ン,セ. タ ウ リ ン, N‑ア. リ ン,グ. ミノ. ル タ チオ ン,. セ チ ル ・ア ス パ ラギ ン酸,グ. リセ. ロ ホ ス ホ エ タ ノ ラ ミ ン も 減 少 して い る.グ ル タチ オ.
(3) 脳 の遊 離 ア ミノ酸 に つ いて(Ⅸ). 1639. ンは 添 加 試 料 中 の グ ル タ チ オ ン を す べ て 酸 化 型 に 変. ク ネ ズ ミを飼 育 して 著 明 な 蛋 白減 少 を 認 め た と報告. え て お らな い の で や や 不 正 確 で あ る.. し, Bartlett & Gaebler26)も. タ ウ リ ン とホ ス ホ エ タ ノ ラ ミン は こ の ク ロ マ ト グ ラフ ィ ー で は 分 離 しな か つ た の で,該. 当分 劃 を集 め. た 試 料 に つ い て メ チ ル セ ロ ソ ル ブ:水(9:1)を. 溶. イ ヌ に つ い て 下垂 体. 剔 除 で蛋 白合 成率 の減 少を 証 明 して い る.か か る現 象 は蛋 白の生 合成 と下 垂 体機 能 との 関 係 を 示 唆 す る もの で あ る.RNAが. 蛋 白 合成 に関 係を もつ こ とを. 媒 とす る ペ ー パ ー ・ク ロ マ トグ ラ フ ィ ー で 両 者 を 分. Caapersaon27)が 発 見 し て い るが,下 垂 体 剔 除 によ. 離 し定 量 し た.. りRNAが. グ リセ ロ ホ ス ホ エ タ ノ ラ ミ ン はauthentic が な い の でMoore. & Steinの. sample. 記 載 す る 溶 出 位 置16). 減 少 す る こ とはDi Stefano et al.28)が. ダ イ コ ク ネズ ミの 肝 細 胞 で 観察 した 処 で あ る.従 つ て体 蛋 白の減 少 あ るい は蛋 白 合成 率 の 減 少 とい うこ と は蛋 白 合成 に関 与 す る多 くの酵 素 系 の活 性 の変 化. よ り判 定 し た. 軽 度 の 減 少 を 示 す も の は ホ ス ホ エ タ ノ ラ ミ ン,尿.. と共 に,か か るRNAの. 変 動 に も基 づ くもの で あ. の うち尿 素 お よび グル タ. つて ア ミノ酸 → 蛋 白 へ の生 理 的 な 移 動 が 障害 さ れ た. ミ ンは イ オ ン交 換 ク ロ マ トグ ラ フ ィ ー で は定 量 的 な. 結 果 二 次 的 に代 謝 プー ル の ア ミノ酸 組 成 に 影響 を与. 結 果 が 得 ら れ な い の で,表. え た もの と思 われ る.し か しな が ら個 々 の ア ミノ酸. 素,グ. ル タ ミ ン で あ る.こ. に お け る減 少 傾 向 が 真 に. につ いて 分析 して み る と大 多数 の ア ミノ酸 は減 少 の. そ うで あ る と は 断 定 で き な い. ス レオ ニ ン,グ リジ ン,ヒ い.こ. リ シ ン,イ. ス チ ジ ン,ア. イ シ ン,. ル ギ ニ ン は ほ と ん ど変 ら な. の う ち ス レ オ ニ ン,グ. に あ る が,イ. ソ ロ イ シ ン,ロ. リシ ンはや や 増加 傾 向. オ ン交 換 ク ロ マ トグ ラ フ ィ ー に よ る 正. 傾 向 にあ るが,減 少 を 示 さな い ア ミノ酸 もあ り,簡 単 に 遊 離 ア ミノ酸 レベ ル の全 体 的 な 水 準低 下 と して か たづ け るこ と はで きな い. 減 少 を示 す ア ミノ酸 の うちで 最 も著 明 な の は グル. 常 な ら び に 諸 種 条 件 下 に お け る ダ イ コ ク ネ ズ ミ脳 の. タ ミン酸群 すな わ ち グル タ ミン酸,ア スパ ラギ ン酸,. 一 連 の 検 索 の 経 験20)22)23)24)か ら 有 意 な 増 加 で あ る. γ‑ア ミノ酪 酸 で あ る.脳 に お け るグル タ ミン酸 群 の. と は認 め られ な い.. 占め る重要 な 役 割 に つ いて は周 知 の ことが らで あ り, 各 種 の 代 謝 的 変 動 に お け る動 態 もよ くし らべ られ 考. Friedberg. 察. & Greenberg25)は. 白 水 解 物,グ. リ シ ン,グ. ル タ ミ ン酸 等 で 飼 育 して,. 血 漿 の ア ミノ 窒 素 が5〜7倍 筋 で は3倍. て い る.グ ル タ ミン酸 代 謝 に 関 与 す る酵 素 活 性 の研. ダ イ コ ク ネ ズ ミを 蛋. に 増 え,肝,腎,横. 紋. に な つ て も 脳 の ア ミ ノ窒 素 量 の 変 動 は2. %以 下 で あ つ た と報 告 し,ま 連 日施 行,ク. た 湯 之 上13)は 電 撃 の. ロール プ ロマ ヂ ンな らびに ヒ ロポ ンの. 究 の うち下 垂 体 剔 除動 物に お い て 検索 した もの も少 数 な が ら存 在 す る. Zuchlewski 剔 除 ダ イコ ク ネズ ミで はL‑グ 素(肝)の. et al.29)は 下 垂体 ル タ ミン 酸 脱 水 素酵. 活 性 が増 加 を 示 して お り,更 に グル タ ミ. ン酸‑オ キザ ロ酢 酸 トラ ン ス ア ミナ ー ゼ(筋)お. よ. び グル タ ミン酸‑蕉 性 ブ ドー酸 トラ ンス ア ミナー ゼ. 慢 性 投 与 の よ うな 激 し い 代 謝 的 衝 撃 の 際 に も総 ア ミ. (肝)の 活 性 も増 加 す るがGH投. 与 で 両 転移 酵 素 の. ノ窒 素 量 に は 変 化 を 認 め な か つ た と 報 告 して お り,. 活 性 は減 少 し,前 者 で は正 常 値 ま で さが り,後 者 で. 一 般 に 脳 の ア ミノ 酸 総 量 は 諸 種 の 生 体 条 件 に お い て. は1/4に な る と報 告 して い る.脳 に お け る実験 で は. 或 る一 定 範 囲 内 の 値 を 常 に 保 ち 変 動 し が た い も の と. 東1の は 下 垂 体剔 除 ダ イ コ クネ ズ ミにつ い て グル タ. 考 え られ る.し. ミン酸‑オ. か しなが ら下垂 体 剔 除 に よつ て 脳 の. キ ザ ロ 酢 酸 ト ラ ンス ア ミナ ーゼ お よ び. ア ミノ窒 素 量 が 低 下 す る こ と は ニ ン ヒ ド リ ン法 に よ. γ‑アミノ酪 酸 トラ ンス ア ミナー ゼ活 性 を測 定 し各酵. つ て もPope. よ つ て も認 あ ら れ. 素 の活 性 が増 加 す るこ とを 認 め て い る.下 垂 体 剔 除. リ シ ン投 与 に よ り検. 動 物脳 に おけ る グル タ ミン酸脱 水素 酵 素 活 性 に つ い. 成 績 に よ れ ば下 垂 体 剔 除 動. て の報 告 はな いが,グ ル タ ミン酸 の著 明 な 低値 は 脳. 物 で は ア ミノ 酸 異 化 が 増 大 し蛋 白 異 化 は 抑 制 さ れ て. に お いて も肝 と同様 に この酵 素活 性 の増 大 が 予 想 さ. い る.こ れ は 代 謝 プ ー ル 中 の ア ミ ノ酸 レ ベ ル の 低 下. れ る.グ ル タ ミン酸 脱 炭 酸 反 応 に対 す る下 垂 体 の 影. を 意 味 す る こ と で あ り,脳. 響 は不 明 で あ るが,ア. &. Stevena法13)に. る.全 身 の 窒 素 出 納 をN15.グ 査 したHobermanl2)の. に お い て も この よ う な 機. スパ ラギ ン酸,γ‑ア ミノ酪 酸,. 構 の も と に遊 離 ア ミ ノ 窒 素 量 が 低 下 し た もの と 考 え. ア ラ ニ ンは ア ミノ基 転 移 反 応 に よ つて グ ル タ ミン酸. られ る.ま た ア ミ ノ酸 〓 蛋 白 間 の 相 関 々 係 の 変 化 に. と密 接 に 関 係 して お り,こ れ らの ア ミノ酸 が 一 様 に. つ い てLee. 低 値 を 示 す こ とと,ト ラ ンス ア ミナ ー ゼ活 性 の 増 大. & Ayres11)は. つ とに 下垂 体 剔 除 ダ イ コ.
(4) 1638. 西. 岡. 博. 輔. と はい か な る関 係 を もつ もので あ ろ うか.活 性 の 高 結. い グル タ ミン酸 脱 水 素酵 素 と拮 抗 して グル タ ミン酸 1). 量 の 平 衡 維持 に作 用 して い る可 能 性 は存 在 しよ う. 脳 に おけ るN‑ア. セ チル ・ア スパ ラギ ン酸19)30)の. 下 垂 体 剔 除 が 脳 の 遊 離 ア ミ ノ 酸 お よ び その関. 連 物 質 に お よ ぼ す 影 響 に つ い て,強. 代 謝 経 路 につ い て は 未 だ何 も知 られ てな いが,グ ル. ン 樹 脂Dowex. タ ミン酸群 と並 行 して減 少 して い る ことは,こ の ア. て20種 類 を 検 索 した. 2). ミノ酸 の代 謝 的源 泉 が グル タ ミン酸 群 に あ るの で は. 50‑X4. な いか と予 想 され る.. 酸 性 ポ リス チ レ. 150×0.9㎝. カ ラ ムを 用 い. 代 謝 的 に 活 溌 な ア ミノ 酸 群(ア. グ ル タ ミ ン 酸,γ‑ア. 脳 に お いて 活 溌 に代 謝 して い る グル タ チオ ンの減. 論. ミ ノ 酪 酸,ア. スパ ラギ ン酸. ,. ラ ニ ン,セ. リン). に お い て 顕 著 な 減 少 を 認 め た. 3). 少 は グル タ チオ ンの構 成 分 子 で あ るシス テ イ ン,つ. 脳 に 特 異 的 に 存 在 す るN‑ア. セ チ ル ・ア スパ. い で は タ ウ リンの 減 少 を ひ きお こす 可 能性 は十 分 に. ラ ギ ン酸,含. あ る.. ラ ミ ン お よ び 測 定 し得 た 唯 一 の ペ プ チ ッ トで あ る グ. グ リセ ロホ スホ エ タノ ラ ミン,ホ ス ホ エ タノ ラ ミ. ル タ チ オ ン も夫 々 明 ら か な 減 少 を 示 し た . 4). ン,セ リン等 は燐 脂 質 の代 謝 と密 接 に 関係 して い る 物 質 であ り,下 垂 体 と燐 脂 質 との 代 謝 的関 係 の検 討. 燐 ア ミ ン で あ る グ リセ ロ ホ ス ホ エ タノ. 必 須 ア ミノ 酸 は ス レ オ ニ ン,イ. ロ イ シ ン,リ. ジ ン,ヒ. ソロイシン ,. ス チ ジ ン お よ び ア ル ギ ニ ンの. 6種 類 に つ い て 検 索 した が 認 む べ き変 化 は示 さなか. の面 か ら解 明 すべ き問 題 で あ ろ う. 脳 に微 量存 在す るに す ぎ な い必 須 ア ミノ酸 す な わ. つ た.. ち ス レオ ニ ン,イ ソ ロ イ シン,ロ イ シ ン,リ ジ ン, ヒス チ ジ ン,ア ル ギ ニ ンは下 垂 体 剔 除 に よつ て ほ と. 終 り に,御. 懇 篤 な 御 指 導 御校 閲 を 賜 つ た奥 村 二吉. ん ど影響 を受 けな い.こ の こ とは これ らの ア ミノ酸. 教 授 な ら び に大 月三 郎 講 師 に感 謝 の意 を表す るとと. の代 謝 的不 活 溌 さを示 す と共 に,微 量 な が ら もそ の. も に,実. 平 衡 を保 つ べ き諸 酵 素 の 反応 結 果 で あ る と も考 え ら. 井 延 浩,湯. れ る.. で 感 謝 す る.. 文 1) Gjessing,. R.:. Arch.. 2) Reiss,. M.:. J.. 3) Reiss,. M.,. Haigh,. Psychiat.,. ment.. Maggs,. R.,. Reiss,. 8,. 1 (1952). G.,. Schenker,. Hoagland.. H.:. 100,. C. P.,. inology, 4) Pincus,. Sci.,. J.,. 96, 319 (1932). Smith,. R. E.,. S.:. 10) Bleuler,. 11) Lee,. Elmadjian,. Psychosomat.. chiat., 7) Reiss,. 11,. 13). 湯 之 上 茂:. Psychosomat.. Med.,. 12,. 225. 14). 東. 15). 田 中 明:. G., Hoagland,. H.:. Amer.. J.. 16). Moore,. Psy. 106, 641 (1950) M., Stitch,. B.,. 漸:. 211,. A. R.:. J. ment.. Sci., 100,. 17). H. D.:. 20,. Yale J. Biol. & Med., 22,. 岡 山 医 学 会 雑 誌,. 70巻,. 8号,. 2673. G.,. Nelson, Neurol.. W. O.,. Gottlieb,. Psychiat.,. J. B. 70,. 240. 18). Stein,. 19). Tallan, Biol.. A. G., Eglitis, Dewain.. 109, 584 (1953). J. G.:. 未 発 表 塩 野 義 研 究 所 年 報, S., 893. No.. H.:. J.. 5. (1955). Biol.. Chem,,. (1954) W,. H.:. J.. Biol.. Chem.. 211,. (1954) W.. H.: H.. 20). 那 須 弘 之. Amer.. Psychiat.,. 21). Pope,. C.. ・生 G.,. (1939). J.. H.,. Chem.,. A., Stokes,. 1070. W.. Stein,. B., Miller, J.. Stein,. Moore, S., 907. (1953). A.. G. B: Endocrinology,. (1958). G... A. M. A. Arch. 9) Gornall,. (1954). M., Ayres,. 146. 104 (1954) 8) Tourney,. Stuttgatt. Psychiatrie,. 341 (1950). F.,. Med.,. 山 彰 の 諸 氏 に 謹ん. Endokrinologische. 12) Hoberman, V.,. 田 久 男,亀. 489 (1936). Endocr. (1950) 6) Pincus,. M.:. Thieme,. (1949) 5) Pincus,. 之 上 茂,池. 献. 687 (1954). Hemphill,. 験 に あ た つ て 終 始 御 鞭 撻 御 援 助 を 頂 い た深. Biol.. Chem.,. Moors,. S.,. 219,. 257. 化 学,. 30巻,. Stevene,. 201, Stein,. 45 W.. (1953) H.:. J.. (1956). M.. 3号, F.:. 205 Biochem.. (1958) J. , 33,.
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