岡 山 医 学 会 雑 誌
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(2) 2674. 湯. 皮 注,多 5)脳. 之. 上. 動 興 奮 状 態 に あ る も の.. II.非. 下垂体剔除群. ミク ロ キ エ ル ダ ー ル 法12) 13)に 従 い,前. 特 に 体 重80〜100g,未 ズ ミを 用 い た.田. 成 熟 の 純 系 〓ダ イコ ク ネ. 中 式 経 外 聴 道 法9)に. を も つ て 下 垂 体 を 吸 引,別 餌 育 箱 を25℃. よ り,穿. 刺針. 出 し た も の を 確 認 の うえ. に 保 ち,小. 麦 粉,魚. 調 製 し た 食 餌 を あ た え,. 粉,大. 4〜6日. 豆 な どで. 間 を 経 た も の で,. II.ア. 4)は. し た も の を 屠 殺 し た.す. なわ ち鋏 で 一気 に 断 頭 瀉 血. 後 す み や か に 全 脳 を 別 出,ド 中 に ひ た し 冷 凍 す る.こ. ラ イ ア イ ス ・ア セ トン. の 間 約20秒 〜40秒 を 要 す る.. 冷 凍 さ れ た 全 脳 は 表 面 を 濾 紙 で ふ き と り秤 量 す る.. キ エ ル ダ ー ル コ ル ベ ン に 容 れ,硫. え 加 熱,放. 冷 し, Parnasの. 同 溶 液 を 追 加 し て1ml中. 式 に よ り全 窒 素. IV.実. チ オ」 消 費 量. 検 「チ オ 」 消 費 量. 験成績. 同 一 材 料 に つ き 試 料 の 足 りる 限 り2回 測 定 し,平 均 値 をmg単. 位 で 新 鮮 脳100g含. を 以 下 の 表 に 記 載 し た,表 N. P. Nは. 量 に 換 算 した値. 中A.. Nは. ア ミノ窒 素,. 非 蛋 白 窒 素 を 示 す. 第1表. 健. 常. 群. 間 充 分 混 和 磨 砕 し,. 脳100mgを. 含む 均 一 な懸. 濁 液 と し, 30分 間 振 と う, 3000回 転20分 間 遠 心 沈 澱 し上 清 を濾 過 した抽 出液 に つ い て下 記 の方 法 で定 量 し た. す な わ ち,. Pope,. り,濾 液5mlを. Stevens10) 11)ら の 加 銅 法 に よ. メ ス コ ル ベ ン に と り,チ. タ レ イ ン ア ル コ ー ル 溶 液3滴. ダ を 滴 下 し て 微 青 色 に い た ら し め,燐 15mlを. 加 え,さ. す る,こ. れ を 濾 過 し そ の20mlに. し30分 静 置. 純 氷 醋 酸1mlを. え て 酸 性 と し た の ち 純 ヨ ー ドカ リ1gを. 定 し た.ア. 性 ソー. 酸 銅 懸 濁 液*. ら に 水 で 全 量25mlと. 析 出 し た ヨ ー ドを1/200Nチ. モールフ. を 加 え, 1N苛. 加. 加 え て 溶 解,. オ硫 酸 ソー ダ 溶液 で滴. 単 位mg/100g湿. ミ ノ窒 素 量 は 次 の 式 に よ り計 算 し た.. 第2表. N=0.14(a‑b) N:試 a:「 b:三 な お,同. 料 中 の ア ミ ノ 窒 素 量(mg) チ オ 」 溶 液 消 費 量(ml) 塩化 醋 酸 を用 い た盲 検 値 様 の 測 定 を グ リ シ ン,グ. ス パ ラ ギ ン酸 等 に つ い て 試 み,誤. ル タ ミン 酸,ア. 差 の僅 少 な る こ と. お よ び 単 独 で は 測 定 さ れ な い 数 種 の ア ミノ 酸 も 数 倍 量 の グ ル タ ミ ン酸 の 混 在 に お い て 定 量 され る こ と, γ‑ア ミノ 酪 酸,タ. ウ リ ン,グ. ル タ ミ ン の ア ミ ド態 窒. 素 等 が 定 量 さ れ ぬ こ とを 確 め た.. * 燐 酸 銅懸 濁液 の組 成 は 次 の 通 りで あ る. 1). 塩 化 第 二銅 の0.16モ ル水 溶 液. 2). 燐 酸 ソ ー ダ 溶 液(64.5g. 3). 硼 酸 塩 緩 衝 液(57.21g・Na2B407・10H20+100ml 1). 1容+2)2容+3)2容. 酸カ. 装 置 で 蒸 溜 し,受 器 内. 容 を 前 記 と同 じ く ヨ ー ド滴 定 し,次. 塩 化 醋 酸 を 容 れ たPottor‑Elvehjem. 型 ホ モ ゲ ナ イ ザ ー を 用 い て5分. 記 除蛋 白. リ ウ ム と硫 酸 銅 を 混 和 し た 酸 化 剤 お よ び 濃 硫 酸 を 加. b:盲. す べ て 最 終 処 置 後 約24時 間 を 経 過. 氷 冷 し た10%三. 濾 液1ccを. N=0.14(b‑a) a:試 料 のN/100「. ミノ 窒 素 の 定 量. 3),. 蛋 白 窒 素 の定 量. を 算 出 し た.. 動 作 に ぶ く一 般 に 体 重 減 少 を 来 し て い る.. 2).. 茂. Na2HPO4・12H20+7.2gNaOH+水. の 割 合 に 加 え た も の.. →11) 1NHCl+水 →21). (A)電. 重量. 撃 重 積群.
(3) 脳. (B)ヒ. の. ア. ロ ポ ン慢 性 群. ミ. ノ. 窒. 素. 那 須19)ら. 2675. の 研 究 に よ りほ ぼ 近 似 し た パ タ ー ン が 示. され て お り,グ. ル タ ミン 酸 と そ の 代 謝 系 に 属 す る グ. ル タ ミン, γ‑ア ミノ 酪 酸 お よ び ア ス パ ラ ギ ン酸 が そ の 過 半 を 占 め,脳. ア ミノ 酸 代 謝 の 研 究 は 專 ら こ の 系. に 集 中 さ れ て来 た20)21).筆 者 の 研 究 は こ れ ら を 含 め た 十 数 種 の ア ミ ノ酸 お よ び そ の 他 三 塩 化 醋 酸 溶 性 窒 素 化 合 物 の 動 態 を, α‑ア ミ ノ 窒 素 と非 蛋 白 窒 素 量 の 定 量 に お い て 呈 示 し た も の で あ る.加 ミ ノ窒 素 定 量 法 は,単. 銅法 に よ るア. 純 ア ミ ノ酸 の 他,組. 織 抽 出 液,. 加 水 分 解 物 な ど に つ い て も用 い ら れ22), Van‑Slike 氏 法 と ほ ぼ 同 程 度 の 結 果 を あ た え る が10),γ‑ア ミ ノ 単 位mg/100g湿. 第3表. (A)脳. 重量. 醋 酸 は 定 量 さ れ ず,ま. た 一 部 ペ プ チ ド窒 素 も加 わ. る 点 完 全 な 定 量 法 と は い え な い が,他. 下 垂体 剔 除 群. の 微 量 法23)24). に 比 し て 操 作 上 の 誤 差 が 少 い の で 本 研 究 で は もつ ば ら こ の 方 法 に よ つ た.ア 見 る に, Cravioto4)ら 38mg%に. 対 し,イ. ミノ 窒 素 量 に 関 す る文 献 を は ダ イ コ ク ネ ズ ミ正 常 平 均. ン シ ユ リ ン昏 睡 例 で36mg%と. や や 減 少 す る と報 告 し て い る. Anaell, Richter5)ら は 液体 酸 素 で即 時 冷 凍 した もの につ い て ニ ン ヒ ドリ ン 比 色 法 で 定 量 し, 49.7mg%を の 成 績 も こ れ に 近 い.. Flockら. 得 て お り,奥. は 犬 大 脳 につ い て. 23.8(±1.0)mg%をVan‑Slike氏 ger7)ら (B)ク. ロ ル プ ロ マ ジ ン慢 性 群. 法 に よ り,. は 猫 大 脳 皮 質 で 平 均48mg%を. ン比 色 法 で 示 し,か. 村25). Gei‑. ニ ン ヒ ドリ. つ これ に 直 接 電 気 刺 戟 を 加 え た. 直 後 に お い て や や 減 少 傾 向 が み ら れ た と の べ て い る. 筆 者 の 結 果 がAnsellら. に 比 し て や や 低 い の は γ‑ア. ミ ノ 酪 酸,タ. オズ フオエ タ ノー ル ア ミン. ウ リ ン,フ. な ど が 含 ま れ な い か ら で あ る と考 え られ る.す ち 当 教 室 の 那 須19)に 3.0,. 5.8,. ばAnsellら. なわ. よれ ば そ の 窒 素 量 は そ れ ぞ れ. 1.9(mg%)で. あ つ て,こ. れ を加 算 す れ. の 結 果 と か な り一 致 し て い る こ と に な. る. ク ロ ル プ ロ マ ジ ン,覚. 醒 ア ミン,電. 撃 重 積,下. 垂. 体 剔 除 な どの影 響 に よる ア ミノ窒 素 量の 変 動 につ い (* は 約60日 間 注 射 し た も の) 単 位mg/100g湿. て は 資 料 に とぼ し い.け. 重量. いれ ん直 後 にお い て グ ル タ. ミン 酸 の 減 少 が み ら れ る こ と は,ア. ンモニ ア の増 加. の 所 見 と共 に 報 告 さ れ て い る と こ ろ で あ り26),高 す な わ ち 正 常 群 で はA. は 平 均161mg%を 群 で はA.. Nは. 示 し,電. Nが. や や 低 い.. マ ジ ン 群 に お い て143.5と. 平 均36.8,. N. P. N. 撃 群 お よび 下 垂体 剔除 N. P. Nで. は ク ロル プ ロ. 減 少 の 傾 向 が あ り,そ の. 他 の 事 例 で は 正 常 群 と 殆 ん ど 差 が み ら れ な い. V.考. て,脳. い れ ん 全 期 に わた っ. 各 部 位 特 に レ ンズ 核 に ア ミノ 窒 素 の 減 少 が み. られ た と述 べ て い る.筆 に つ い て 実 験 し た3例 て い る.第2表(A)に. 按. 者 が け いれ ん直 後 の ネズ ミ で も有 意 の減 少 が み とめ られ 示 す 電 撃 重 積 群 の平 均 値 は. 正 常 群 に 比 し 低 値 で あ る が 有 意 の 差 とは い え な い.. 脳 遊 離 ア ミノ 酸 の 構 成 に つ い て はRoberts14), para15), Schurr16),. 木27)の 犬 に よ る 実 験 で は,け. Ansell5),. Tallan17),大. Awa 月18),. 下 垂 体 機 能 と ア ミ ノ酸 代 謝 に つ い て, Lotspeich28) は 成 長 ホ ル モ ン が 血 中 ア ミノ 酸 の 組 織 蛋 白 へ の 合 成.
(4) 2676. 湯. を 促 進 せ し め る 作 用 が あ る と の べ,. 之. Russel29)ら. 上. 茂. は. ロル プ ロマ ジ ン投 与 群 で や や低 値 で あ るほかは健常. 腎 摘 出 ネ ズ ミに お い て 成 長 ホ ル モ ン が 血 中 尿 素 排 せ. 群 とへ だ た る と ころ が ない.ク. つ の 低 下 を 来 し た 点 よ り,こ. 謝 抑 制 的 効果 につ い ては す で に報 ぜ られ て お り32),. の ホ ル モ ン が ア ミ ノ酸. の 組 織 へ の 蓄 積 作 用 が あ る と 論 じ て い る .脳. 遊離 ア. ロル プ ロ マジ ンの代. 脳 遊 離 ア ミノ酸 の 動 態 に 関 し て も河 井,柿 本33)ら. ミ ノ酸 の 脳 蛋 白 と の 代 謝 的 移 行 関 係 に つ い て は 今 日. の報 告 が あ るが,な お一 致 した 結果 をみ るに至つ て. な お 不 詳 で あ る が,筆. いな い.非 蛋 白窒 素量 の 減 少 は 著明 な もの では ない. 者 の 実 験 結 果 で は ア ミ ノ酸 量. は 平 均 低 値 を 示 し て い る 点 一 考 に 価 す る と思 わ れ る . た だ し こ の 成 績 は 偏 差 が 大 き く,食 餌,営 ど の 影 響 も あ る と 考 え ら れ る の で,下. が 有 意 の差 とみ られ る.. 養状態 な. 結. 垂 体 剔除 自体. の 影 響 を こ の 結 果 よ り断 ず る こ と は 出 来 な い .ク ル プ ロ マ ジ ン慢 性 投 与 実 験 で 河 井30)は. ダ イコ クネ ズ ミ全 脳 の遊 離 ア ミノ窒 素量 お よび非. ロ. グ ル タ ミン. 酸 系 に 増 加 の 傾 向 が み ら れ た と の べ て い る が,筆. 者. 論. 蛋 白 性総 窒 素 量 を定 量 し,健 常 群 お よび電撃 重積群, ヒ ロポ ン投 与 群,ク. ロル プ ロ マ ジ ン投 与 群 お よび脳. の 結 果 で は こ の 増 減 は 総 ア ミノ 酸 量 に 有 意 の 差 を 生. 下 垂体 剔除 群 に つ い て比 較検 討 した,ア. ぜ し め て い な い.ま. は 加銅 法 に よ り,非 蛋 白窒 素 量 は ミク ロキエ ルダー. は,な. た ヒ ロポ ン投 与 の 影響 に つ い て. お 結 論 を う る に 至 ら な い.非. い て は 奥 村31), Geiger, 如 く,犬,猫,海. 蛋 白窒 素 量に つ. Weil‑malherbe8)ら. も150〜160mg%内. 外 で,ダ. 大 差 が な い 様 で あ る.前. ル 法 に よつ て定 量 した.. の 示す. 〓 な どを 通 じ て 脳 内 含 量 は い ず れ イ コ ク ネ ズ ミも こ れ と. 述 し たGeigerら. ミノ窒 素量. (1)無 処 置健 常 群 に お け る平 均 値 は ア ミノ窒素量 36.8ng/100g,非. 蛋 白窒 素 量161.1mg/100gで. あ. つ た.. の実験で. (2)ア. ミノ窒 素 量 は脳 下垂 体 剔 除 群 でやや低値 を. は 大 脳 皮 質 に電 気 刺戟 を加 えて そ の増 加 を み とめ た. 示 し,そ の他 の 処 置 群 では 変 動 が み られ ない.非 蛋. と い い, Weil‑malherbeに. 白 窒素 量 は ク ロル プ ロ マ ジ ン投 与群 にお いてや や減. よれ ば脳 切 片 の ア ンモニ. ア発 生 が 非 蛋 白窒 素 増 加率 の相 当部 分 を 占 め て い る と の べ て い る.脳. 少 し,そ の 他 の処 置 群 で は 正常 と差 がな い.. 除 蛋 白 濾 液 に 含 ま れ る これ ら の 窒. (3)一 般 に上 記 の種 々の 慢性 処 置を 加 えて も,脳. 素 化 合 物 は ア ミ ノ 酸 の ア ミ ノ基 お よ び そ の 結 合 態 の. 遊 離 ア ミノ酸 量 お よび 総 非 蛋 白窒 素 量は,総 量 とし. 窒 素,ア. て は著 明 な 増 減 を来 さな い.. ン モ ニ ア,タ. ウ リン,尿. 素,ク. フ オ ス フ オ エ タ ノ ー ル ア ミン,ペ を 主 と し,い. レ ア チ ン,. プ チ ドの 一 部 な ど. ず れ も脳 組 織 の 代 謝 過 程 に 関 与 し て い. る と 考 え ら れ る 一 群 の 物 質 で,脳. の 過 程 に も な つ て これ ら 物 質 も何 ら か の 消 長 的 関 聯 を も つ と推 測 され る の で あ る が,筆. 者 の 実 験 では ク. 参 1) Krebs,. H. A... Bioch.. 2) Weil-Malherbe,. J.. H.:. 終 りに の ぞみ 終 始 御 指 導,御 校 閲 を賜 つ た奥村教. 活 動 の 興 奮 と抑 制. 44,. Physiol.. 考. 授,実 験 に 多大 の 御 協 力 を得 た長 瀬 寛子 君に心か ら 感 謝 申 し上 げ ます.. 文. 159 (1949) Review,. Science,. 30,. J. 61,. 3) Hamilton,. P. B.:. J.. Biol.. R, 0.,. Massieu,. Chem.,. 158, 397. (1945). Proc.. Soc.. Exp.. G.. Biol.. 9). & Izquirdo, Med.,. 78, 856. 11). D... Bioch.. J.. 田 中 明 ・塩 野 義 研 究 所 年 報, No.. C. G. & Stevens,. 赤 堀 四 郎:ア. 57,. 12). 落 合,津 篇)南. V.. Flock. J.. Biol.. Chem.. 200,. 529 (1953) 7) Geiger,. & Green,. R. H.:. Bioch.. M. F.:. 5(1955). Bioch.. J. 33,. ミ ノ 酸 及 び 蛋 白 質,. 172,共. 立出. 版 社(1947). G. B. & Richter,. 70 (1954) 6) Eunice,. H.. 1070 (1939). (1951) 5) Ansell,. 665 (1953). 210 (1955). 10) Pope,. 4) Cravioto.. 118,. 8) Weil-Malherbe,. 549 (1950). J. J.:. 献. A.,. 13). J.. & Magness,. J.. 藤 井 暢 三:生. Biol.. 本 共 著:有. 機 定 量 分 析 法(微 量. 山 堂.. 14) Roberts, Dobkin,. 田,阪. 化 学 実 験 法(定. E. & Frankel,. Med.. 74,. 量 篇)南. 山 堂.. S. : Proc. Soc. Exp.. 383 (1950).
(5) 脳. 15) Awapara,. J.,. Seale,. J.. B.:. 16) Schurr, L. M.;. 18). Biol.. J.. Biol.. H. H.,. Biol.. Chem.. Chem.. 須 弘 之,青 107(1958). 19). 那 須 弘 之:生. 化 学,. 20). Waelsch,. B... H.. 301. ノ. &. 25). 182,. Dawson,. R. M.. 22). 赤 堀 四 郎,水. 素. 2677. J. R... 奥 村 二 古,大. 29 (1950). 26) Richter,. & Stein, W.. H... 176,. No.. 学 と 生 物 学,. 4(1958)掲. Advances. in. C,.. Biochem,. 47,. J.. Biol.. No.. 8, 1113. W. D.:. J. Biol.. Chem., 185,. 221. (1950). Chem.. J.. R. M. C... 1199 (1948). (1953). 載 予 定.. prot.. 191, 787 (1951). 山 達 也 ・医 学 と生 物 学. 岡 山 医 学 会 雑 誌, 65巻,. 28) Lotspeich, 30,. Chem.. D. & Dawson,. Chem.,. 27) 高 木 秀 雄. 山 達 也:医. J. Biol. 月 三 郎,青. 投 稿 中.. 29) Russell,. (1951). 21). 窒. 24) Spies,. 927 (1954). 大 月 三 郎,那 3号,. R.. ミ. 187, 35 (1950). S.. 211,. Fuerst,. ア. H. T. & Henderson,. Moore,. 46巻,. VI,. A. J.. Chem.. P. E., Thompson,. 17) Tallan, J.. Landua,. の. 386. J. A... Endocrinology,. 48,. 30). 河 井 清:岡. 山 医 学 会 雑 誌, 69巻,. 31). 奥 村二 吉. ・ 福 岡 医 科 大 学 雑 誌,. (1950). 462 (1951). No.. 12 .. 28巻,. 1013. (1935). 190,共. 島 三 一 郎 編. 蛋 白 質 化 学,I. 32) Yagi,. ,. 立 出 版社 .. 23) Woiwood,. 177,. A. J... Bioch.. J.. Free Part. 1. On. 45,. 413 (1949). 33). Amino-Nitrogen. the. Amino. Nagatsu,. 柿 本 泰 男,中. of the. and. K.,. T., Ozawa,. 島 久:薬. Brain. Rat. 学 研 究, 29巻,. 4号.. Tissue. Non-Protein-Nitrogen. the. T.: Nature,. 891 (1956). Contents. in. Brain.. By Shigeru Department. Amino were. and. 1) from. nitrogen. by. results In. nitrogen. Amino. non-protein-nitrogen The. of Neuro-Psychiatry Okayama Uuiversity (Director: Prof. Nikichi Okumura). non-protein. determined.. were. the. the. as. normal. Yunoue. in. fresh. was. rats. brains. measured. micro-Kjeldahl. by. Medical. under. the. School.. variously. copper. method. treated of. conditions. Pope. and. Stevens,. procedure.. follows: control. 34.3•`38.5mg/%,. group,. and. the. the mean. mean of. of. amino-N. non. contents. protein-N. was. was. 36.8mg%,. 161.1mg%,. ranged ranging. from. 140.3•`184.1mg%. 2) both in. In. the. amino-N the 3). group In. case and injected. the. normal. group,. weeks),. appreciable In. general,. protein-nitrogen. of. repeated. electroshocked. non-protein-N with. showed. in decrease. it keep. can. be relatively. group of. the. amino-N. injected. constant. that. contents. levels. contents by. were daily,. were. those. was of. to. 20•`30. also. almost. for. slightly. chlorpromazine contents. the. amounted These. (60mg/kg. with. non-protein-N. concluded. daily, change.. repeatedly. rats, the. (twice. appreciable. methylpropamine. hypophysectomized while. rats no. times), normal. 3weeks).. lower. than. (10mg/kg. in. daily. the for. found. amino-nitrogen. above-menthioned. as. well. treatments.. as. non. 3.
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