IRUCAA@TDC : 生理的細胞死の機構とその意義 : T細胞の分化過程における細胞死を中心に

全文

(1)Title Author(s) Journal URL. 生理的細胞死の機構とその意義 : T細胞の分化過程における細胞死を中心に木崎, 治俊歯科学報, 92(6): 989-1001 http://hdl.handle.net/10130/2097. Right. Posted at the Institutional Resources for Unique Collection and Academic Archives at Tokyo Dental College, Available from http://ir.tdc.ac.jp/.

(2) 989. 歯学の進歩･現状-. 生理的細胞死の機構とその意義* - T緬胞の分化過程における細胞死を中心に木崎治俊東京歯科大学生化学講座. Mechanisms and Roles of Physiological Cell Death in T Cell Ontogeny Harutoshi KiZAKI Department of Biochemistry, Tokyo Dental College. はじめに. 現在,臓審移植をめぐって死の問題が社会的にも話題を集めているが,生物,ヒトの死の問題は生物学的,医学的な観点のみならず社会学的にも極めて重要な課蓮であり,その研究は多岐多様にわたっている｡生物学的観点からのみみても,種の死滅,イ固体の死,臓器の死,細胞の死と産物の持っ基本的な階層性により死の定義も, 研究対象も,研究目的も,研究方法も全く異なってい. 死の意義と機構について述べる｡細胞死に関しては鼻近,幾つかの総説,解説が出版されているので参考にされたい囲)o 細胞死の概念, ji短と意義 1.細胞死の研究とは綿胞の死と関連する産物現象は発生,形態形成,老化癌化,生体防御反応,外的要因による退行性病変. る｡生物の基本が細胞であるとの立場に立てば,その機構を細胞レベルで明かにすることは,発生,形態形成, 老化等の生物学的観点からも,医学的観点からも重要で. 表1細胞死と医学のかかわり (1)細胞死の防御を目的とする 1虚血性障害(心虚血,脳虚血,外科俊嚢等) 2 変性性疾患(神経筋疾患等) 3 感染性,中毒性疾患 4 老化の防止 5 体外での臓器,組織保存 6 その他(莱,毒物等からの保護). あると考えられる｡特に医学では表1に示すごとく,組織にとって必須な機能を持つ細胞を死から護ることを目的とする場合と,生体にとって有害,又は有害になるであろう細胞の死を積極的に促進,除去することを酎勺とする場合があり,細胞死の研究は直接,病態の把握,疾病の予防,治療に深く関わっている｡本稿では第1には細胞死の観念,分幾,意義等について述べ,第2に細胞. (2)細胞死の促進を目的とする 1 悪性塵症の治療 2 免疫抑制 3 不妊,美容形成,体重減量 4 その他. 性免疫を司るT細胞の分化と成熟にかかわる生理的細胞 *本稿は第244回東京歯科大学学会総会(平成3年11月9 E上千葉)において特別講演したものである｡ 75-.

(3) 木崎:生理的細胞死の機構とその意義. 990. 等,多岐にわたりその研究の立場により細胞死の考えか. 等),栄養障害等の非生理的要因により生じ, Virchow. たも異なっている｡しかし,細胞の死は最終的には細胞. 以来病理学者の主たる研究領域であり,いわゆる壊死. の持つ全ての機能,すなわち代謝,分泌,運動,増殖等. (ネクローシス)をきたす｡二つめは,生理的細胞死であ. の機能の不可逆的な消失と細胞構築の破壊として定義さ. り外的要因による細胞死とは異なり,特定の細胞に特定. れる7)｡しかも要因の如何にかかわらず細胞の最終的な. の時期に特定の数だけに誘発され,纏胞分裂と同様に高. 崩壊過程は共通と考えられる｡しかし,その誘発と初期. 度に制御された生命現象の一つであり重要な生体調節機. の過程は要図により異なり,この初期過程からの分子機. 構であると考えられる｡この細胞死の観点から体細胞は. 構を逐次解明し整理していくことが細胞死の研究と考え. 大きく二つにわけて考えたい｡ (イ)長寿命固定性分裂終. られる(図1)｡すなわち細胞死の研究とは死の状態の解. 了綿胞群及び可逆性分裂終了細胞群｡これらの細胞は胎. 析ではなく,細胞の死へ到るまでのプロセスの解明であ. 児期で分裂増殖分化してしまい生後は分裂せず個体の寿. るといえる｡従って,脳死判定の楽しさは,前述した如. 命と同じだけ生きられるか(神経細胞,筋編胞等),また. く各細胞の全機能の不可逆な消失と,組織学的構築の破. は潜在的に増殖能力を保持し,何らかの状況下では増殖. 壊を死-のプロセスのどの時問に臓器レベルで設定するかというところにある｡. することのできる細胞群(線維細胞,軟骨細胞,骨糸田脂,腎抽胞,肝細胞等)である｡これらの細胞では老化過程そのものが死と関連してくる｡又生体調節機能の一. 細胞死の過程. 生. 発 <cQ O Q W fc O K 請. 環として,纏胞分化,細胞選択過程にみられるfE理的細. 初期過程終末過程. 胞死,アポト-シス(後述)がみられる. (臼)分化性または増殖性分裂細胞群.これらの細胞はいわゆる幹細胞から生じ分裂分化し,鼻終的に短寿命性分裂細胞となり, 終末分化により死にいたる細胞(血球,表皮細胞,暢管粘漠細胞等)である｡これら細胞にも終末分化による死と,分化過程における綿月包の選択に伴うアポトーシスがみられる｡この様に細胞死は様々な様相を呈することからも生化学的に統一的に取り扱うことは莱しいが,次第にその総. 図1 細月包死研究のコンセプト. 合的な研究が進んできている｡このような観点からまず 2.細胞死の分戴. 簡単に外的要図による細胞死の機構を考察し,次いで生. 体細胞の死は細胞の持っ性賛,死の要因によりその定. 雀的細胞死,特にアポトーシスの概念について考えてみたい｡. 義も研究のフィロソフィーも異なっている｡そこでま. ず,綿胞死をその誘因,機構,形態学的観点,生物学的. 3.外的要因による細胞死(壊死)の生化学的機構. 意義により概略二つに分戴して考えてみたい(表2)o その一つは外的要図,すなわち虚血,毒物,薬物,物理的 (温度,放射線等)要因,生物的要因(細菌,ヴィールス. 外的要図による細胞死の過程は病丑学,薬理学の立場から詳糸田に研究がなされている｡近年になり糸田胞の保護を目的にその生化学的機構が明らかにされてきているo 虚血を例にとれば図2に示すごとく細胞の酸素センサー. 表2 細胞死の分楽. であるミトコンドリアでのATPの生成の低下,それに伴う解糖系の活性化による乳酸が蓄積され綿胞内pHが. 1外的要因による死(病聖的細胞死). 低下し種々の細胞内代謝が障害される ATPの低下は. 壊死(ネクローシス). 膜でのイオン透過性を障害し綿胞の浮腫,カルシウムイオンの細胞外,小胞体からの糸田胞賛内への流入によりカ. 2 生理的細胞死. ルシウム依存性の障害(表3)が換起される8)o通常綿胞. a長寿命固定性分裂細胞群及び可逆性分裂終了細胞群｡. 外のカルシウム濃度は1-1.3〃Mと極めて高いのに比. 老化,細胞自壊(アポトーシス) b分化性及び増殖性編胞群｡終末分化,細胞自壊(アポトーシス). し,細胞内は0.05-0.3fiMと低い濃度に保たれている｡膜の障害による編胞外からのカルシウムの流入や, 細胞内でのカルシウム貯蔵箇所(小胞体,ミトコンドリ 76.

(4) 歯科学報 Vol. 92, No. 6 (1992). 991. 4.生理的細胞死:アポトーシス壊死とは異なり組織の中の特定の細胞が縮小し(壊死 -化 I , , 酸. ー. では膨化),隣接する細胞から離れ,クロマチンは凝縮し,核の濃縮が起こる｡細胞表面の微紡毛が消失,平坦化し,大小の突起が出現し,やがて細胞は断片化する｡. P T A. /. しかし膜やミトコンドリア等の綿胞内小器官は正常に保. a. フンポ. C. たれている｡次いでこれらはマクロファージや近接する. i. /. 小胞体主・!'l . 代謝障害 iォim. __ー内. Ca放出. 細胞に宴金されたり,管腔内に放出される(図3)｡この. ニーi])レモジュl)ン変化 [Ca]f. iiZI. 1断. フオスフォリパーゼ細胞骨格変化活性化ミトコンドリア石灰沈着. ︺. ミトコンドリア睦. 細柏崎lヰ1+--. 図2. w-一化. /. ような細胞死の形態は壊死と異なり, 1972年Kerrlは壊死(ネクローシス)に対しアポトーシス(細胞自壊)と名付け,これらの所見は種々の生理的な細胞の死に共通して観察されると報吾した｡アポトーシスとは木の葉や花びらが散るように死ぬことからdropping offの意のギリシャ語からつけられたものであり,日本では最初,山田,大山等により枯死,自爆死として紹介された｡｡生理的な細胞死は表4に示すように種々の生聾的状態で観. 細胞形態変化. 壊死の生化学的機序. 察され,形態形成,組織の選択,産休防御, fE体の細胞動態の維持に極めて重要な役割を担っているoまた癌細胞にも日射こ誘発されている事,ある種の遺伝性疾患により誘発される事も報吾されている｡発産,分化の過程で観察される細胞死は,極めて高度. 表3 カルシウムイオンによる細胞死の機構. 1 ホスホリパーゼA2の活性化 (膜リン脂薯の分解による麓障害) 2 カルシウム依存性の細胞骨格変化 (細胞分裂,綿胞内物質輸送,分泌,レセプターの代謝回転,細胞運動等の障害,形態変化等) 3 カルシウム依存性タンパク分解酵素の活性化 4 カルシウム依存性のDNA障害(エンドヌクレアーゼ活性化,トポイソメラーゼIIの阻害等). に制御されていると考えられる事から,プログラム死ともいわれている｡しかし,アポトーシスは形態学的所見による定義であり,プログラム死は機構を基にした定義であり,大部分は一致するかもしれないが必ずしも同義語ではない｡またアポトーシスには後述するようにその初親にDNAの特徴的な切断が伴うことが多くみられる表4 生理的細胞死. 1且重発生と形態形成:口蓋愈合時の上皮細胞, ミュラー氏管の退縮,発生時の神経細胞死,此間細胞死,両棲嚢の尾部退縮等 2 正常組織での細胞交替環象:小膳粘膜,副腎網状層細胞,リンパ腺,表皮細胞,水晶体上皮等 3 萎縮,退縮環象:原因除去に伴う骨,肝,膳, 唾液腺肥大の萎縮 4 ホルモンによる調節:子宮内麓,前立腺,副腎皮賛,黄体,乳腺,胸腺のホルモンによる細胞死の調節 5 免疫塊象: T細胞のクローン選択,細胞障害性 T細胞の標的細胞,マクロファージ等 6 毒物,薬物,放射線,高温治療等による誘導 7 腫痘内での自然発生する生理的細胞死 8 遺伝性疾患:免疫不全症,失語症,神経筋変性疾患,奇形等. 5 ミトコンドリア機能の障害. ア)からの動員はカルシウム依存性の細胞障害を喚起する｡捕体,外傷,エンドトキシン等による膜障害性因子による細胞死ではこの細胞内カルシウムが重要な因子となる｡一方,虚血後に血流を再開した時や,四塩化炭素のように活性酸素やフリ-ラジ*)レを生成したり,ヒドロキシアミン等求核性の代謝中間体を生成する薬物では肢脂宴の過酸化やグルタチオンの減少とそれに伴うチオールタンパクの障害,共有結合形成によるタンパク機能障害, DNAの切断等が細胞死の原因と考えられている9)｡いずれにせよ壊死の初期過程では細胞膜の障害が重要な位置を占めている｡ 77 -.

(5) 木崎:生理的細胞死の機構とその意義. 図3 アポトーシスの形態学的変化 (文献6 )を参照にして作成) が,アポトーシスすべてにこのDNA切断が伴うとはか. な状態では,捕体や細胞障害性T森田胞,キラーT細胞,. ぎらない｡従ってプログラム死が全てDNA切断が初期. ナチュラルキラーT轟田胞,さらにはマクロファージや,. 過程にみられるとは限らない｡. それらの分泌する園子により標的となる細胞に死が誘発. これらの観点をふまえ,免疫現象と関連した細胞死の意義と機構についてで考察したい｡. されるo一方, 4建的条件下でも,胸腺内でのT細胞のレパートリーの形成時にみられる自己反応性T細胞の除去や,ホルモンによる胸腺,リンパ組織でのホメオス. T細胞の分化,成熟と細胞死. ターシスの維持や,細胞交替項象に関連して細胞の死が. 免疫系は自己と非自己とを識別し,非自己に対しては. 観察される｡これらの綿胞の死は,免疫機能の分化,成. 抗体または免疫綿胞と特異的に反応することにより,そ. 熟にとり,重要な役割を担っている｡その機構,意義に. れらを除去する重要な生体防櫛機構の一つであるo この. ついて考えてみたい｡生理的な細胞死は増殖や分化と同. 免疫反応には細胞の死が重要な役割を担っている｡病的. じように巧妙に調節された過程であり,その障害は免疫 78 -.

(6) 歯科学報 Vol. 92, No. 6 (1992) 不全症,自己免疫疾患の発症と関連し,またリンパ増殖. 993. ているo これらのことから考えれば, T綿胞系の幹細胞. 症,癌化,老化等とも関連しているであろう｡ EE体防御. にも同じように何らかの園子,おそらく数種のサイトカ. 機構におけるT細胞, B細胞の役割については各々多く. インやC S Fが増殖,分化と関連しあって細胞生命の維. の教科書,参考書があるのでそれを参照されたい｡. 持,逆に死の制御をしていると考えられるが,魂在のところ充分に解明されていない｡. 1. T細胞の分化,成熟と細胞死の多様性 T細胞の分化,成熟の過程は, T細胞表面抗原に対す. 2)胸腺内でのT細胞の分化と細胞死. る種々のモノクローナル抗体の開発,フローサイトメト. 胸腺はT細胞の分化と成熟の中枢となる免疫臓器であ. リーの技術向上,クローン綿胞株の樹立,胎児胸腺の臓. り,神経系でいえば中枢神経(脳)に相当すると考えられ. 器培養法の確立,トランスジェニックマウス等の利用に. るoプロT細胞は胸腺内に入り前胸腺綿胞(プレT)とな. より,次第にその全貌が明かにされようとしている｡. り,大別して三つ過程により分化成熟する16)その-つ. 造血幹細胞から末棺での成熟したT細胞にいたるまで. は数多くの抗原に対応するためのT細胞レセプター. には多くの過程があり,既述したように,それぞれの過. (T C R)の発現と主要組織適応抗原(MH O拘束性の婆. 程で細胞死の意義も機構も多様であると考えられるO そ. 得(成熟したT細胞は自己のMHC分子とともに提示さ. こでまず, T細月包の分化成熟の過程と細胞死との関連性. れた抗原にのみ反応する),次いで自己反応性の抽胞の. について考えてみたい(図4).. 除去(クローンの選択)による自己寛容の成立(自己と反. 1)造血幹細胞から胸腺前馬区細胞(プロT)への分化成. 応する細胞再の不活化と消滅),次いで機能的にも成熟したT舶包への分化の過程,これらを経て末槽へと移行. 熟 T細胞は骨髄の造血幹細胞からリンパ球系幹細胞へと. し,各リンパ組織でT細胞としての機能を発揮する｡こ. 分化し,その後T細胞系の幹綿胞を経て胸腺前馬区細胞. の間の分化の過程はTCRに対するモノコローナル抗体. (プロT)に分化し,これら前枢細胞はその細胞表面にも. とT細胞機能に置接関連した分子(CD 4, CD 8)の表. つ胸腺への移行に関与するホーミングレセプターや11). 面への発塊により解析されマウス胸腺細胞は大別して. 胸腺組織より分泌される走化因子12)などにより胸腺内に. 4君羊, 8種(=分けることができる(表5)｡胸腺皮覚でプ. 移行すると考えられている｡この間,幹細胞由来と考え. レT如胞からCD4, CD 共にネガティブなダブルネ. られるクローン細胞を用いた研究により,インターロイ. ガティブ(DN)細胞からCD8を発壊し,ついでCD4. キン3, 4, 6等のサイトカインが幹細胞からプロT編. を発重し,ダブルポジティブ(DP)細胞となる｡ TCR. 脂-の増殖と分化に関与していることが示唆されている. の再構成はD Pの分化段階で終了しT C Rが発壊されて. が13)細胞の4命の維持にいかなる因子が関与している. くる｡ TCRのうち自己MHCのクラスIに拘束された. か,また,いかなる細胞の選択が行われているか明かで. 抗原提示をうけたものはCD 8陽性(キラー細胞)とな. はない｡赤芽球系の細胞が腎より分泌されるエリスロポ. り,クラスIHこ拘束されて抗原をみることのできるもの. イエチンにより14)又,マクロファージ,頼粒球系の幹. はCD 4(ヘルパー細胞)のシングルポジティブ(S P)細. 細胞ではコロニー刺激園子(CSF)により15)その細胞. 胞へと分化する｡この過程でみられる舶包死は｢自己｣. 生命が維持され,それら因子の減少はこれら細胞にアポ. を認識する細胞を積極的にその細胞の自壊機能を発現す. トーシスを誘発することにより,細胞数の調節が行われ胸腺皮賛他覚 _. j CD3. ￨. ○. 7蝣0"H. (CD4-CD8-) Double positive (CI) +CD8+). ○ CD 3. CD4+. TCRTCRγ∂+ TCRαβ+. CD 8+. C D 雲++. T 死. Double negative. ○. ○. Single positive. (CD4-CD8+). C D 4+. Single positive. (CD4+CD8-;. 図4 T細胞の分化過程 -79. TCRTCRαβ十 TCRTCRαβ+ TCRαβ+. ^r co cr> o o> 4 4 1. 蝣¥¥. CD8〉. 表塊型 (%) 末梢. -. 表5 マウス胸腺細胞の表面抗原による分楽. 5 5. 5 5.

(7) 994. 木崎:生理的細胞死の機構とその意義. ることにより死滅除去するネガティブセレクションの過. る｡いずれにせよここで, MHC分子やペプチドの提示. 程である｡免疫学的手法及びチミジンをラベルした胸腺. という胸腺内での微綿環境,すなわち細胞間賛,細胞と. 細胞のキネティクスの解析から, DP段階でその85-90. 細胞外マトリックスとの相互作用がT細胞の選択に重要. %は死滅除去されるという｡一方,この積極的なネガ. な役割を担っていることがうかがえる｡. ティブセレクションをまぬがれた細胞で,しかもさらに. 2)胸腺の放綿環境と細胞死･ストローマ細胞との相互作用. S Pの機能性T細胞への分化に失敗した綿胞は,胸腺. 胸腺内にはT細胞以外にストローマ綿月包といわれる,. 内,又は末棺組織へ移行し,異なった機構ですみやかに死滅除去されると考えられる｡. 上皮細胞,樹状細胞,マクロファージ,線碓芽細胞,筋. 3)末櫓でのT細胞の運命. 様綿胞があり,さらには末櫓とは若干異なるB細胞も存. 末櫓に移行したT細胞は種々のリンパ組織で,おそら. 在し複雑な散細環境を形成している｡この中でも,特に. くは休止状態にあり,抗原との接触により特定のクロ-. 上皮細胞,マクロファージ,樹状細胞とT細胞との接着. ンが増殖し,その免疫作用を発揮する｡活性化され増殖. によるMHC分子やペプチドの提示,相互作用,又,こ. したT細胞がどのように死滅除去されるのか,また言己憶. れら細胞の分泌する可溶性因子(サイトカイン,胸腺ホ. T細胞がどのように死をまぬがれ生存するのか興味ある. ルモン等)がMHC拘束性と自己寛容という二つの選択. 課題である｡塗聖的には末櫓T綿胞は廠粒球でみられる. に関与している｡さらには全身性ホルモン(副腎皮賛ホ. 終末分化と同じ様に, T編胞存在部位の微細環境や液憧. ルモン,甲状腺ホルモン,性ホルモン),内因性オピオ. 園子等により制御され,死に到ると推測されるが,詳細. イド,自律神経系等の胸腺細胞機能の成熟との関連性が. には解明されていない Perillo等17)はヒト末櫓T細胞. 示唆されている｡近年,平峯等2°はマウス胸腺上皮細胞から樹立した株. の培養法を確立し, Hayflichlの培養線維芽細胞で待られたと同じ様に, T細胞自体にも固有の老化と寿命が. 細胞と未熟胸腺細胞とを共培養することにより,上皮細. あることを示唆している｡この様に, T細胞の分化,成. 胞と結合したり,上皮綿胞の細胞質突起に固まれたT細. 熟に伴い観察される編胞死も,分化の過程により多様な. 胞の中にアポトーシスの所見がみられることを報害して. 様相を呈する｡このうち,胸腺内でのT纏用包レパート. いる｡又,松原等22)は上皮様細胞から産塗されるT綿胞. リー形成時のクローンの選択における編胞死が,細胞の. 増殖因子(TCGF)の存在下で,特定のTクローン細胞. 選択という観点から最も重要と考えられる｡. が特異抗原の添加により,ストローマ細胞との相互作用. 2.胸腺内でのクローン選択と細胞死. により死滅することを報害している｡マクロファージに. 1) T細胞レパートリーの形成. も抗原提示能があること,マクロファージ由来のイン. 胸腺内丁抽月包のレパ-トリーはMHC拘束性と自己寛. ターロイキン1や腫痘壊死因子(TNF a)が細胞死を修. 容という二つの選択をうけることにより形成される｡こ. 飾すること(後述),さらにT細胞自身も自己寛容の導入. の二つの機構を説明するために,最近,大きく別けて二. に働くことも示唆されている.胸腺細胞にはフイブィロ. つのモデル,アフイニティーモデルとペプチドモデル. ネクチン等細胞外マトリックスに対するレセプターの発. 19, 20)が考えられている｡詳細はそれぞれの文献を参照. 覚もみられ24)胸腺内ではストローマ細胞,編胞外マト. されたい｡アフイニティーモデルはTCRが自己のMH. リックスとT細胞との接着因子を介した相互作用が細胞. C分子と結合する際のアフイニティーの違いにより説明. 死の誘導や修飾に極めて重要な役割を担っていると考え. するもので,自己のMHC分子に幅広い親和性のTCR. られる｡胸腺内でのT細胞の接着園子を介したストロー. をもっクローンが全て拡大し(ポジティブセレクショ. マ細胞や細胞外マトリックスとの相互作用は抽胞死のみ. ン),自己抗原を介して自己のMHC分子と強く結合す. ならずT細胞の増殖,分化,皮薯から髄さらには末. る(高親和性)TCRをもっT細胞が死滅除去されるとい. 棺への移行にも関与している｡. う説である｡又,ペプチドモデルは,自己のMHC分子. 3.胸腺細胞アポプト-シスの機構. と胸腺上皮特異的なペプチド(自己のMH C分子以外の. 1)細胞死の初期過程(DNA切断と遺伝子発覚). 自己抗原)を認識したTCRを持っT糸田胞が拡大し,. それでは胸腺細胞はいかなる機構で死に到り,いかに. MHC分子と末栖中にある自己抗原で胸腺上皮にある自. 制和されているのだろうかo. 己抗原とは異なるが交叉反応性を持つ抗原を認識する. マウスやラットにグルココルチコイドを投与したり,. TCRを持つT細月包のみが死滅除去されるという説であ. 放射線をかけると投与後数時間から被膜直下から皮賛内. -80-.

(8) 歯科学報 Vol. 92, No. 6 (1992). 995. 層にかけ胸腺T細胞のアポトーシスが観察される｡これ. (論文作成中)｡ Gaido等29)は正常胸腺細胞核内に存在. らは培養未分化胸腺細胞(D P綿胞)でも観察され,その. する分子量約30万のカルシウム,マグネシウム依存性エ. 際,舶包融解(トリハンブル-趨生体染色又は乳酸脱水. ンドヌクレアーゼの他に,グルココルチコイドにより,. 素酵素の細胞外逸脱で測定)に先行してT繍胞クロマチ. 胸腺轟田胞やステロイド感受性Tリンパ腫細胞に分子量約. ンのリンカー部位,すなわち180-200塩素対のDNAの. 18万の既存のものとは異なったエンドヌクレアーゼが誘. 長さをもつ,ヌクレオソ-ム単位の切断が観察される. 導されることを報害している｡しかしこの酵素もヒスト. (図5)｡この様な特徴的なDNAの切断を触媒する酵素. ンと強固に結合しているためその性寛の詳細は不明であ. はカルシウム,マグネシウム依存性のエンドヌクレアー. る｡ Alnemri等はその存在も否定しいる30)｡いずれに. ゼと考えられている25)｡事実,本酵素の阻害剤である亜. せよこのエンドヌクレアーゼの酵素学的性質の解明が必. 鎗イオン27)やアルミ∼ン25. 26)によりDNAの切断は阻. 須であろう｡さて,この初期過程にみられるDNAの切. 害される｡胸腺細胞核内には正常でもカルシウムとマグ. 断はアクチノマイシンDやサイクロへキシミドで阻害さ. ネシウムで活性化され,ヌクレオソ-ム単位のDNAの. れる DNAの切断の阻害により,細胞は死からまぬ. 切断を触媒する酵素が存在する25, 27)｡アポトーシスの初. がれることから, DNA切断が細胞死の一原因として考. 期過程にみられるDNAの切断がこの酵素の活性化か,. えられ,しかもこの過程がある種の遺伝子(♯)の発現に. この酵素の誘導によるものかは明かではない｡又,ブルココルチコイド処理によりクロマチンDNA分解酵素に. 依存していると推察される｡それでは一体どの様な遺伝子(群)が発項しているので. 感受性の部位が多く発現する28)ことから,このエンドヌ. あろうか｡それは｢死｣の遺伝子といっていいのだろう. クレアーゼに対するクロマチンの感受性が変化すること. か｡結論からいえば,タンパク, RNA, cDNAの解. も考慮されなければならないが,我々の教室の大西等は. 析からしても,残念ながら現在のところ胸腺細胞の. この切断が遺伝子の特異的部位に起きるのではなくラン. ｢死｣の遺伝子(群)については明かになっていない｡グ. ダムにDNAのリンカー域で起きる事を明かにしている. ルココルチコイドや放射線処理により数分から数十分に,胸腺舶包の核マトリックスにいくつかの共通のタン. 1 2 3 4 5. パクが誘導され,その後数時間後には又異なったタンパクがされることが報吾されているが31)これらタンパク (bp). の同定や機能については明らかにされていない｡ Gaido 等29)のいう新しいエンドヌクレアーゼもその-つかもしれないし, McConkey等は内在性の非常にターンオーバーの遠いエンドヌクレアーゼを想定している32)｡星川等33)ラット培養胸腺細胞をデキサメサゾン処聾することにより減少するmRNAとそれに対応するcDNA を分離し,デキサメサゾンによりその転写が低下することを見出しているが,その本能は禾明である｡ Owen等 34)はグルココルチコイドにより死に関与する新しい核内タンパクと膜タンパクの二つをDNAよりクローニングしそのアミノ酸配列を報吾しているが,その機能についてはまだ明らかにされてはいない｡ Yuh等35)は増殖に関与する14のプロトオンコジンの動態を,ステロイド感受性のと卜Tリンパ芽球性白血病細胞を材料として検索し,ステロイドホルモンで細胞死に到る細胞でのみ, C. 図5 デキサメサゾンとデオキシアデノシンによる胸腺細胞DNAの切断(文献27)参照) (1培養前胸腺, 2 デキサメサゾン処理綿胞, 3 デオキシアデノシン処理細胞, 4 対照胸腺細胞,5 マーカー). -mycのmRNAレベルが初期に減少することを報害している｡しかし,正常胸腺舶包での舶包死とプロトオンコジンの動向に関しては明らかではない｡最近,濠胞性リンパ腫の染色体転座に関与するオンコジンBel-2がミトコンドリア内膜タンパクをコード 81 -.

(9) 996. 木崎:生理的糸田胞死の機構とその意義. し,その過発場によりBリンパ球のプログラム死が阻害. 体刺激でDNAの切断を伴って死にいたるT綿胞-イブ. スオ. メホ. のみならず, T細胞にも発現している37)小高等38)は抗. Jタ￣￣←. 代謝変動. されることが報吾された36)｡このBel-2はBリンパ球. 外部からのシグナル. シス破綻. 細胞内情報伝達機構. 細胞異常反応. リドーマにBel-2を導入し過発現することにより,抗. l. 体による細胞死が阻害されることを見出している｡酵母. 危険信号の発現. でもミトコンドリア外膜に存在するタンパク輸送に関与. ＼＼＼. するタンパクI S P42等39)がその4命維持に必須である. /. 自壊機構の誘発. 遺伝子発現 RNAとタンパクノ合成. ことから考えても,ミトコンドリア膜タンパクが生命の維持,逆に編胞死と関連しているとも考えられる.ここ. / ＼. で輿味のある点は,いわゆる熱ショックタンパク,又は. 細胞骨格異常エンドヌクレアーゼ活性化. ストレスタンパクの一群が編胞に増殖,分化さらにはタンパクの小胞体あるいはミトコンドリアへの輸送に関与していることである｡. ＼ DNA-5J断. これらの事実は少なくとも死に関与してくる遺伝子又. 細胞死. はタンパクは単-ではなく,プロトオンコジン,ストレ. 図6 胸腺細胞死の機構の仮説. スタンパク等を含む複雑な過程であり,死の指令をする遺伝子(群),制掬する遺伝子(群),進行を司る遺伝子. オキシアデノシン,デオキシグアノシンによりDNA切. (群)等に整聖しながら解析されねばならないだろう0. 断が誘発される27)ことから,これらプリンヌクレオシド,又はその代謝産物の蓄積により細胞にある種の代謝. 2) DNA切断の誘発とその制御(細胞死の細胞内情報伝達機構による調節). 擾乱がおこることにより,綿胞に危険信号が誘発される. 前述した如くDNAのヌクレオソーム単位の切断が胸. とアポトーシスが発覚することを意味している｡あたか. 腺綿胞のアポトーシスの初斯過程としての一つの指標と. も,ある神経のシナプス綿胞が異常なインパルスを出す. 考えてもよかろう｡このようなDNAの切断はグルココルチコイドや放射線のみならず,胸腺綿胞をカルシウム. のを防ぐため自らアポトーシスにより死にいたる過程と似ている｡. イオノフォア(A23187,イオノマイシン"¥40, 41)サイ. 筆者等はマウスの培養胸腺細胞を用い,カルシウムイ. クリックAMP上昇物薯私43)サイクリックAMP誘. オノフォアで誘発されるDNAの切断は, Cキナーゼを. 導体42)プリンヌクレオシド(アデノシン,デオキシア. 活性化するホルボールエステルの少量の添加により対照. デノシン,デオキシグアノシン¥ 27)環境化学物薯,チ. のレベルにまで低下し,逆にDNAの合成が促進される. トラクロロジベンゾダイオキシン44)さらには抗癌剤で. ことを見出した(図7)oすなわち細胞死(ネガティブセ. もあり分化誘導剤でもあるアラビノシルサイトシン等. レクション)へのシグナルがもう一つ別のシグナルが加. (Kizaki, H. etal.投稿中),さらにはマウス胸腺細胞. わることにより増殖(ポジティブセレクション)へのシグ. ではプロテインキナーゼCを活性化するホルボールエス. ナルに変換する事を意味している｡ラット,ヒト胸腺編. テルによっても,編胞融解に先行して換起され,しかも. 胞でも同じ様な観察がなされている｡さらに,ホルボー. これらは全て,グルココルチコイド誘発と同じ様に. ルエステルはレセプター(プロスタグランヂンE2,アデ. mRNAとタンパクの合成に依存した過程であり41)全. ノシン,イソプレテレノール)を介するサイクリックA. てに共通した機構が関与していると示唆される｡. MPの生成を阻害するにもかかわらず,少量のサイク. これらのことから,細胞死の誘発は,図6に示す如く. リックAMPで誘発されるDNA切断を増強する45). 一つには,綿胞外からの何らかのシグナルがレセプター. McConkey等はホルボールエステルがラット胸腺細胞. を介して編胞内カルシウムイオンの上昇,サイクリック. ではサイクリックAMPによるDNA切断を阻害するこ. AMPCAキナーゼ), Cキナーゼ等を介した細胞内情報. とを報吾しているが,筆者等との違いが,動物種差によ. 伝達機構により核内に情報を伝達し,遺伝子(群)の発寛とそれに続いてエンドヌクレアーゼの活性化とDNAの. るものか,実験条件の差異によるものか卯寺点では明ら. 切断を換起することを意味している｡もう一つには,デ. かでない｡インターロイキン依存性のT細胞株では,インターロイキン2の除去に伴うアポト-シスがホルボー. 一82一.

(10) 歯科学報 Vol.. I, No. 6 (1992). 997. されることを見出している｡この事は正常のグルココルチコイド存在下で過度なTCR/CI) 3複合体を介した刺激を受けた細胞のみが死を免れ,ポジティブセレク V d. ションへと分化することを示唆する輿昧深い知見である｡また伊藤等53)はリンパ球の表面に発現されるFas. U W j > ′ ＼ V N d ^ ヽヽ再 +. 抗原の抗体によりアポトーシスが誘発されることを見出し,その生理的意義の解明がまたれる｡最近, TCR,表面抗原CD4, CD の分子構造も次第に明らかになり,それらを介するタンパクのリン酸化,さらにはチロキシンリン酸化と関連した,プロトオンコジン1ckやfyn,脱リン酸化と関連したCD45を介した未熟胸腺細胞での細胞内情報伝達機構も次第に明らかにされつつあり,細胞死との関連性についても,我々の教室の東等により研究が進められている｡. 図7 ホルボールエステル(TPA)によるカルシウムイオノフォア(A23187)で誘導される DNA切断の阻害とDNA合成の促進(文献 41)参照). 胞死には, (イ)T細胞自体の性薯(TCR, CD4,CD. ルエステルで阻害されることも報吾されている47)｡これ. 且サイトカイン,胸腺ホルモンの関与),(ハ)全身性の. らの事実はいくつかの細胞内情報伝達機構のクロストー. ホルモン等の多くの園子がかかわり合い,制榔されてい. クにより細胞死と増殖という正反対の現象が,密接に関. る複雑なる過程であると推測される｡胸腺ホルモンに関. 以上述べてきた如く胸腺内での細胞選択にかかわる綿 8, CD45,その他のレセプター等の発現), (ロ)胸腺の秋綿環境(ストローマ細胞,細胞間基質との相互作. しては本学内科学水野嘉夫教授の総説54)を参考にされた. 連しあって制御されていることがうかがわれる｡. い｡. それでは実際に庄理的にいかなる因子がDNAの切断. 4.胸腺細胞死の異常と病態. と細胞死の誘発,制御にかかわっているのだろうか｡鼻近,成熟T細胞に対しては分裂を引き起こす抗CD 3抗. 胸腺細胞内で観察される細胞死はT舶包レパートリー. 体が未熟胸腺細胞に48)又, T白血病細胞や胸腺細胞と. の形成に不可欠である｡従ってその異常,すなわち細胞. 胸腺腫細胞の-イブリドーマ49, 50)においてもTCRと. 死の元進,あるいは阻害は免疫機能の異常をきたすこと. CD 3複合体を介してアポトーシスが誘発されることが. が推測される｡. 示された｡しかもインターロイキン1がそのDNA切断. プリン代謝酵素,アデノシンデアミナーゼ,プリンヌ. と細胞死を利和することも報吾されている51)マクロ. クレオシドホスホリラ-ゼの欠損症(環在,日本では. ファージより分泌されるもう一つのサイトカイン,腫症. 各々6例と1例が報吾されている)では,胸腺舶包,及. 壊死因子(TNF a)はと卜胸腺細胞の分化したS P抽胞. び末梢T細胞の著しい減少又は消失に伴い免疫不全症を. には増殖補助因子(コーマイトゲン)として作用するが,. 換起する｡その一因は代謝されるべきプリンヌクレオシ. マウスの未分化胸腺細胞では,プロスタグランディン. ドとその代謝物質(デオキシATP,デオキシGTP)の. E2やアデノシンレセプターを介するサイクリックAM. 蓄積によるDNAの前駐物要となるデオキシヌクレオチ. pにより誘発されるDNAの切断を促進する(投稿. ド合成が阻害されること(増殖死と考えられる)ととも. 中)｡同じサイトカインが分化段階の異なる細胞により. に,これらによる未熟胸腺細胞のアポトーシスの元進に. 一方には増殖の補助的役割をなし,一方では舶包死の補. ょると考えられる27)このようなアポトーシスの促進は. 助的園子となることを示している｡. 先天性の酵素欠損症のみならず,記述した如く環境化学. ブルココルチコイドは胸腺細胞死に関与している最も. 物質,抗癌剤,免疫抑制剤でも観察されることから,環. 重要な生華鋸勺ホルモンである｡近年,岩田等52'はT轟田胞. 境汚染,薬剤の使用時の副作用としても充分考慮されね. ハイブリドーマ,マウス胸腺綿月包を用い,正常域濃度の. ばならない｡さらには,栄養との関連性(微量元素やビ. グルココルチコイドによるアポトーシスが特定の濃度の. タミン等)も臨床医学的には重要であろう｡クローナルデリッションが何らかの原図により阻害さ. TCRとCD 3複合体を刺激する抗体の存在により阻害 -83.

(11) 998. 木崎:生理的細胞死の機構とその意義. れれば,自己と反応するT細胞が末梢に出ることにな. マチン凝縮,核濃縮,核,細胞質の断片化等,胸腺細胞. り,自己免疫疾患の一因となることが推測されるo事. アポートシスと共通した過程を示す生理的な綿月包死は. 実,マウス腹腔内に免疫抑制剤,サイクロスポリンAを. 種々の形態,組織形成,細胞交替場象に伴い観察される. 投与すると,本来死ぬべき細胞が死を免れ,自己反応性. ことから,生聾的な細胞死はかなり共通の概念でとらえ. T抽胞による自己免疫疾患が惹起される｡加令現象に伴. られると考えられるo もちろんDNAの-本鎖切断や,. う自己抗体の出現頻度の増加も,このT細胞レパート. タンパク分解酵素の活性化等が細胞死の初期過程にみら. リーの形成障害に一因があるのかもしれないo. れる場合もあり,全てが同一の機構で説明される訳では. 加令に伴い顕著にみられる胸腺の萎縮は,プロTの胸. ない｡. 腺内移行の減少や,胸腺内での分裂能の低下に加え,その一因としてアポトーシスの関与も考えられ,自己免疫. むすび. の頻度の上昇と共に老化寛象との関連性も推刺される｡. 体細胞にみられる生聾的な細胞死は,その細胞の持っ. 胸腺内ではクローン選択により細胞が死にいたる｡又. 性掌により,寿命(老化),終末分化,細胞の選択による. 末梢に移行したT編胞も,おそらく終末分化として死に. 死,病的細胞の排除等,種々の概念としてとらえられ. 到る｡もし何らかの機転でこれらの死のプログラムが不. る.従って,これらは進化と共に生物が獲待してきた蓋. 活化されれば,細胞は不死化,又は癌化すると考えられ. 本的な機構と考えられる｡癌化,又は不死化した細胞. るo事実, Effros等はと卜末梢T細胞を培養し,禾死. は,細胞死機構の変異した細胞とも考えられ,細胞死の. 化した一つの細胞株を得ている55)もし不活化されたア. 研究上の一つの重要な試料でもある｡ T細胞の分化,成. ポトーシスの機構を何らかの方法で,活性化できれば,. 熟に伴い観察される細胞の死も,その過程により多様で. 症の治療法とも結びっくことができようo三羽等の新4. あることは既に述べてきた｡中でも胸腺内でのT細胞レ. 期脳由来抗癌因子(NCBF)による癌治療,ミュラー氏. パートリー形成時の細胞の選択に伴う死は,生体防櫛の. 管阻害園子(MI S),プロジェステロン浩抗剤等による. 中枢となる免疫系の確立に憂要な役割をはたし,その機. 癌治療は標的編胞にアポトーシスを誘導することにより. 構の障害は種々の病態を引き起こす｡又,老化,癌化と. 治療効果を得ようとする考えに基づくものである56). も関連し,その研究は医学的にも生物学的にも重要であ. このようにT細胞の分化,成熟に伴う細胞死の異常は. る｡. 免疫不全症,自己免疫疾患,老化,癌化等,医学的にも塗物学的にも極めて重要な課題を提供している｡. 免疫学的な方法による綿胞除去機構の研究と共に,ハイブリドーマやクローン細胞を用いた細胞生物学的,分. 5. DNA切断現象と生理的細胞死. 子遺伝学的,分子生物学的,タンパク工学的により細胞. T編胞のアポトーシスの腔には細胞融解に先行してヌ. 死にかかわるレセプター,表面抗原,接着園子,情報侯. クレオソーム単位のDNAの切断がみられた｡この様な. 達機構について,より分子レベルでの研究が着々と進行. D N Aの切断は生体内で観察される他の塗聖的な綿胞死. している｡これらの成果は尊にT細胞死の機構の解明の. にもみられるのであろうか5, 6)｡. みならず,神経系,内分泌系などの綿胞死の機構又はそ. 細胞障害性T細胞により標的細胞にDNAの切断が誘. れらとの関連性についても多くのインパクトを与えるこ. 発されるが,これにはmRNA,タンパクの合成を必要. とが期待される｡歯科医学毎域でも免疫現象と関連した. としない｡おそらくはアポトーシスに関与するリンホト. 疾患(歯周病,シェ-グレン症候群等),顎顔面の奇. キシン,又はその関連物薯が直接作用するのではないか. 形,口腔症,移植,粘膜再建等細胞死とは密接に関連し. と考えられる｡腹側前立腺細胞は窒丸摘出(アンドロゲ. ていると考えられ今後,これらと関連ずけ研究の発展を. ンの減少)によりDNA切断を伴ったアポトーシスにい. 期したい｡. たるo肝細胞でも混和な条件下での虚血やある種の薬剤により同じ様にアポトーシスが換起される｡又水晶体上皮編胞,赤芽球, H L -60細胞の栗粒球への終末分化, 末梢栗粒球の終末分化の過程,また培養神経舶包で神経栄養因子の除去によってDNAの切断が観察されている｡. 終わりに本稿発表の機会を与えてくださった金竹哲也学会長はじめ学会関係の諸先生方に深謝いたします｡また本稿の我々の研究は慶応義塾大学医学部医化学教室石村巽教授,鈴木和子助手,同数生物学教室多EE]隈卓史博士,小高千加子博士,および東京歯科大学生化学講座の方々の協力によるものであり,心より深謝いたします｡. DNAの切断は証明されていないが,組織学的にクロ 84 -.

(12) 歯科学報 Vol. 92, No. 6 (1992). 999. Molecular and cellular events of T cell develop-. 文献 1)特集笥田胞死" (1984) :細胞, 16(6). 2)特集"細胞死" (1989) :細胞, 21(4).. ment. Adv. Immunolっ44 : 207-264. 17) Perillo, N. L., Walford, R. L., Newman, M., andEffros.R.B. (1989) : Human T lymphocxytes. 3) Davies, I., and Sigee, D. C. eds. (1984) : Cell. possess a limitedin vitrolifespan. Exp. Gerontol. , 24 : 177-187.. ageing and cell death. Cambridge Univ. Press, Campbridge 4) Potten, C. S. ed. (1987) : Perspectives on. 18) Hay flick, L. (1965) : The limited in fitro lifetime of human diploid cell strains. Exp. Cell. mammalian cell death. Oxford Univ. Press, Oxford 5) Arends, M. J., and Wyllie, A. H. (1991) :. Resっ37 : 614-636. 19) Fink, P. J. (1988) : Stop and go in thymus.. Apoptosis : Mechanisms and roles in pathology, Int. Rev. Exp. PathoL, 32 : 223-254.. 20) Marrack, P., and Kappler, J. (1988) : The. 6) Tome, L. Dっand Cope, F. 0. eds. (1991) :. T-cell repertoire for antigen and MHC. Immunol.. Immunol. Today, 9 : 077- 000. Today., 9 : 308-314. 21) Hiramine, C., Hojo,KっKoseto,MっNakagawa, T., and Mukasa, A. (1990) : Establishment of. Apoptosis : The molecular basis of cell death. Cold Spring Harbor Laboratory Press. 7) Scappelli, D. G., and Iannaccone, P. M. (1990) : Cell injyury and errors ofMmetabolism.. a murine thymic epithelial cell line capable of inducing both thymic nurse cell formation and. In Anderson's Pathology 9 th ed. (Kissane, J. M.. ed.)pp.. 1-65蝣C.. V.. MosbyCoっSt.. thymocyte apoptosis. Lab. Invest., 62 : 41-54.. Louis. 22) Matsubara, HっKosaka, HっSogo, SっMaruo,. Orrenius, SっMcConkey, D. JっBellomo, Gっ and Nicotera, P. (1989) : Role of Ca2+ in toxic. S.,Sugihara, S., Asano, Y., Kohno, Y., Kmoto, M., Suzuki, G., Ishimura, K., Fujita, H.,. cell killing‥ TiPS, 10 : 281-285.. Hamaoka, T., and Fujiwara, H. (1990) : T cell. 9) Boobis, A. R., Fawthrop, D. J., and Davies, D. S. (1989) : Mechanism of cell death. TiPS,. clones are killed by a thymic stromal cell monolayer following stimulation of T cell. 10 : 275-280.. 10) Kerr, J. F. R., Wyllie, A. H., and Currie, A.. receptor with antigen and/or H- 2 molecules. (1972)Apoptosis : a basic biological phenomenon with wide-ranging- implication in tissue kinetics Brit. J. Cancer, 26 : 239-257.. on the monolayer. Int. Immunol., 2 : 755-763. 23) Suzuki, GっKawase, Y., and Hirokawa, T.. ll) Reichert, R. A., Wissman, I. L., and Butcher,. cultured thymus lobes upon intimate contact. (1989) : Tolerance induction in the organwith allogenieic thymus lobes.Eur. J.Immunolっ 19 : 1525-1530.. E. C. (1986) Pmtogeny of lymphocyte homing receptor espression in the mouse thymus. J. Immunolっ136 : 3535-3582. 12) Imhof,G.A.,Deug-enier, M-A., Girault, J-Tっ. 24) Cardarelli, P. M., Crispe, I. N., and Pierschbacher, M. D. (1988) : Preferential expression of. Champion,S.,Damais, C, Itoh, T., and Thiery,. fibronectin receptors on immune thymocytes. J. Cell Biolっ106 : 2183-2190.. Jっ(1988) : Thymotaxin : A thymic epithelial peptide chemotactic for T-cell precursors. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 85 : 7699-7703.. 25) Cohen, J. J., and Duke, R. C. (1984) : Glucocorticoid activation of a calcium-dependent. 13) Palacios, R., Samaridis, J., Thorpe, D., and. endonuclease in thymoocytes nuclei leads to cell death. J. Immunol., 132 : 38-42.. Leu, T. (1990) : Identification and characteriza-. 26) McConkey, D. J., Hartzell, P., Nicotera, P., and Orrenius, S. (1989) : Calcium-activated. tion of pro-Tlymphocytes and lineage-uncommitted lymphocytes precursors from mice with three novel surface markers. J. Exp. Med.,. DNA fragmentation kills immature thymocytes. FASEB Jっ3 : 1843-1849.. 172 : 219-230.. Erythropietin retards DNA breakdown and. 27) Kizaki, H., Shimada, H., Ohsaka, Fっ and Sakurada,T. (1988) : Adenosine.deoxyadenosine,. prevents programmed death in erythroid. and deoxyguanosine induce ]⊃NA cleavage in. progenitor cells. Science, 248 : 378-381.. mouse thymocytes. J. Immunol., 141 : 16521657.. 14) Koury, M. J., and Bundurant, M. C. (1990) :. 15) Williams,G. T., Smith, C. A., Spooncer, E., Dexter, T. M., and Talor, D. R. (1990) : Hae-. 28) Zaret, K. S., and Yamamoto, K. R. (1984) :. mopoietic colony stimulating factors promote. Reversible and persistent changes inchromatin. cell survival by suppressing apoptosis. Nature,. structure accompany activation of a glucocor-. 343. :. 76′. ticoid-dependent enhancer element. Cell, 38 : ･38.. -79.. 16) Fowlkes, B. J., and Pardoll, D. W. (1990) : 85.

(13) 1000. 木崎:生理的細胞死の機構とその意義. 29) Gaido, M. L., and Cidlowski, J. A. (1991) :. Muramatsu, J., and Ishimura, Y. (1989) :. Identification, purification, and characterization. Activation of a suicide process of thymocytes. of a calcium-dependent endonuclease (NUC18) from apoptotic rat thymocytes. J. Biol. Chem., 266 : 18580-18585.. through DNA fragmentation by calcium lonophores and phorbol esters. J. Immunol., 143 : 1790-1794.. 30) Alnemri, E. S., and Litwack, G. (1989) :. 42) Kizaki, H., Suzuki, K., Tadakuma, T., and. Glucocorticoid-induced lymphocytolysis is not mediated by an induced endonuclease. J. Biol. Chemっ264 : 4104-4111.. Ishimura, Y. (1990) : Adenosine receptor-media ted accumulation of cyclic AMP-induced Tlymphocyte death throgh internucleosomal. 31) Voris, B. P., and Young, D. A. (1981) :. DNA cleavage. J. Biol. Chem., 265 : 5280. Glucocorticoid-induced proteins in rat thymus cells. J. Biol. Chem., 256 : 11319-11329.. 5284.. 43) McConkey, D. J., Orrenius, S., and Jondal, M. (1990) : Agents that elevate CAMP stimulate. 32) McConkey, D. J.,Hartzell,P., and Orrenius, S. (1990) : Rapid turnover of endogenous endonucl ease activity in thymocytes:Effects of inhibitors. DNA fragmentation in thymocytes. J. Immunol. 145 : 1227-1230.. of macromolecular synthesis. Arch. Biochem. Biophysっ278 : 284-287.. McConkey, D. J., Hartzell, P., Duddy, S. K., Hakansson, H., and Orrenius, S. (1988) : 2,. 33) Hoshikawa,YっIzawa,Mっand Ichii, S. (1988) :. 3, 7, 8 - Tetrachloro-dibenzo-p-dioxin kills. Cloning of glucocorticoid-responsive mRNA in the rat thymus. Endocrinol. Japon., 34 : 429' 437.. immature thymocytes by Ca2+ - mediated endonuclease activation. Science, 242 : 256-259. 45) Suzuki, H., Tadakuma, T., and Kizaki, H.. 34) Owens, G. PっHahn, W. EっandCohen, J. J. (1991) : Identification of mRNAs associated with programmed cell death in immature thymocytes. Mol. cell. Biolっ11 : 4177-4188.. 35) Yun, Y-Sっand Thompson, E. B. (1989) :. (1991) : Modulation of thymocyte apoptosis by isoproterenol and prostaglandin E2. Cell. Immunolっ134 : 235-240. 46) McConkey, D. J., Hartzell, P., Jondal, M., and Orrenius, S. (1989) : Inhibition of DNA. Glucocorticoid effect on oncogene/growth gene. fragmentation in thymocytes and isolated. expression in human Tlymphoblastic leukemic cell line CCRF-CEM. J. Biol. Chem., 264 :. thymocyte nuclei by agents that stimulate protein kinase C. J. Biol. Chem., 264 : 133913402.. 10904-10910.. 36) Hockenbery, D., Nunez, G., Milliman, C, Schreiber, R. D., and Korsmeyer, S. J. (1990) : Bcl-2 is an inner mitochondrial membrane. 47) Rodriguez-Tarduchy, Gっ and Lopez-Rivas, A. (1989) : Phorbol esters inhibit apoptosis in IL - 2 - dependent Tlymphocytes. Biochem. Bio-. protein that blocks programmed cell death. Nature 348 : 334-336.. phys. Res. Communっ164 : 1069-1075. Smith, C AっWilliams, G. TっKingston, E. J., and Owen, J. J. T. (1989) : Antibodies to CD. 37) Tsujimoto, Y., Cossman, J., Jaffe, E., and Croce, C. M. (1985) : Involvement of the bcl- 2. 3 / T-cell receptor complex induce by apoptosis. gene m human follicular lymphoma. Sience, 228 : 1440-1443.. 38)小高千加子,瀬戸加大,多田隈卓史(1990) : Bel2遺伝子産物の過剰発現はT舶包-イブリドーマの細胞死を抑制する｡日本免疫学会総会学術集会記録,. m immature T cells in thymic cultures. Nature, 337 : 181-184. 49) Takahshi, S., Maecker, H. T., and Levy, R. (1989) : DNA fragmentation and cell dea血 mediated by T cell antigen receptor/CD 3 complex on a lukemia T cell line. Eur. J.. 20 : 483.. 39) Baker, K. P., Schaniel, A., Vestweber, D., and Schatz, G. (1990) : A yeast mitochomdrial. Immunolっ19 : 1911-1919. 50) Odaka Cっ Kizaki, Hっ and Tadakuma, T.. outer membrane protein essential for protein import and cell viabillity. Nature, 348 : 605-. (1990) : T cell receptor-mediated DNA fragmentation and cell death in T cell hybridomas. J. Immunolっ144 : 2096-2101.. 609.. 40) Wyllie, A. H., Morris, R. G., Smith, A. L., and Dunlop, D. (1984) : Chromatin cleavage in apoptosis:association with condenced chromatin. 51) McConkey, D, JっHartzelL PっChow, S. Cっ Orrenius.S., andJondal,M. (1990) : Interleukin 1 inhibits T cell receptor-mediated apoptosis in immature thymocytes. J. Biol. Chem., 265 : 3009 -3011.. morphology and dependence on macromolecular synthesis. J. Pathol., 142 : 67-77. 41) Kizaki, H., Tadakuma, T., Odaka, C,. 52) Iwata, M., Hnaoka, S., and Sato, K. (1990) : -86-.

(14) 歯科学報 Vol. Rescue of thymocytes and T cell hybridomas from glucocortioid-induced apoptosis by stimulation via the T cell receptor/CD 3 complex : a possible in vitro model for positive selection of the T cell repertoire. Europ. J. Immunol., 21 : 643-648. 53) Itoh, N., Yonehara, S., Ishn, A., Yonehara, M., Mizushima, SっSameshima, MっHase, Aっ Seto, Yっand Nagata, S. (1991) : The polypeptide. I, No. 6 (1992) 1001. くに血小板凝集能,後天性免疫不全症候群(AIDS)を中心に｡歯科学報, 87 : 109-119. 55) Effros, R. B., Perillo, N. L., Bhuta, S., and Walford, R. (1990) : In vivo studies of human T lymphocyte senescence. In Molecular Biology of Aging (Finch, C. E., and Johnson, T. E. eds.) pp. 265-279- Alan R. Liss, Inc. 56) Tritton, T. R., and Hickman, J. A. (1990) : How to kill cancer cells : Membranes and cell signaling as targets in cancer chemotherapy. Cancer Cells, 2 : 95-105.. encoded bythe CDNA for human surface antigen Fas can mediate apoptosis. Cell, 66 : 233-243.. 54)水野嘉夫(1987) :胸腺ホルモンをめぐる諸問題,と. 87 -.

(15)