ヒト白血病細胞におけるビンデシンレセプターについて

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ト ツカ キヨウ イチ 氏名(生年月日〉 本 籍 学 位 の 種 類 学位授与の番号 学位授与の日付 学位授与の要件 学 位 論 文 題 目 論 文 審 査 委 員

戸 塚

恭 一 ( 医学博士 乙第634 号 昭和58 年12

月

16 日 学位規則第

5

条第

2

項該当(博士の学位論文提出者〉 ヒ 卜 白 血 病 細 胞 に お け る ビ ン デ シ ン レ セ プ タ ー に つ い て ( 主 査 〉 教 授 滝 沢 敬 夫 ( 副 査 〉 教 授 内 田 幸 男 ， 教 授 杉 野 信 博

論 文 内 容 の 要 旨

目的 ピンカアルカロイドの新しい誘導体であるビンデシ ンの白血病に対する治療効果は症例によって異なって いる.このような治療効果の差異は白血病細胞のビン デシン結合能の差異による可能性が考えられる.さら にそのような差異がビンデシンレセブターの数，ある いは親和性の差異による可能性も考えられ， ヒト白血 病細胞におけるビンデシンレセプターの検討を行なっ た 実験方法 1)ヒト慢性骨髄性白血病急性転化由来株細胞 K562 におけるビンデシンレセプターの測定. K562 細胞の3H_ ピンデシンを3TC にて一定時間併置 し，細胞への取り込みを液体シンチレーションカウン ターにて測定した.比較のために急性リンパ性白血病 (ALL) 由来株細胞MOLT-4 ，急性前骨髄球性白血病 (APL) 由来株細胞HL-60 についても同様の検討を行 なった 2 ) 白血病患者末梢血中の白血病細胞のビンデシン 結合能と白血病細胞病型およびその治療効果との関 係. 白血病患者の末梢血をへパリン採血し，フイコー ル・コンレイ法にて白血病細胞を分離し， 3H 司ピンデシ ンと 4 時間卵子、置し，細胞に取り込まれた放射活性を A とした.また 3H_ ビンデシンとともに200 倍の非標識ビ ンデシンを加えて細胞に取り込まれた放射活性をB とした.A からB を差しヲ|いた値を特異的結合能とし た 結果および考察 1)ヒト慢性骨髄性白血病急性転化由来株細胞 K562 におけるビンデシンレセプターの測定. ( 1 ) 3H_ ビンデシンと K562 の 結 合 は 鮮 置 時 間 を 増 すにつれて増加し， 4 - 6時間でほぼプラトーに近づ いた. K562 と3H_ ビンデシンを2 時間勝置すると， 3H_ ビンデシンと K562 の結合を認めたが，その時点で200 倍濃度の非標識ビンデシンを添加することにより H ビンデシンは K562 の結合部位より置換され，結合 の可逆性を示した. 3H ービンデシンと K562 の結合は加 え た 細 胞 数 に 比 例 し て 増 加 し た . 以 上 の 所 見 よ り K562 に ビ ン デ シ ン レ セ プ タ ー が 存 在 す る と 考 え ら れ た ( 2 ) 3H ビンデシンと K562 の結合は，ビンデシン， ピンクリスチンおよびピンプラスチンにより濃度依存 性に阻害されたが，シトシンアラピノシド，ダウノマ イシン， 6MP リボース添加では阻害されなかった.し たがって， ビンカアルカロイドに特異的で，共通の結 合部位が推定された. ( 3 ) K562 ， MOLT-4 ， HL-60 ，正常リンパ球と3H_ ビ ン デ シ ン の 結 合 をScatchard 分 析 し ， レ セ プ タ ー 数 ( s i t e s / )llec を算定すると，各々4.9X10 6_，6.3x10 6_， 3.4X10 6_{，1. 5x10} 6_{であり ，Kd(M) は4.2x -Ol} 7_，4.8X 1 0 - 7_{， 4.5X -01} 7_{， 3.3X 0-1} 7_{であり ，Kd は細胞間で大} きな差異はないが， レセプター数はK562 とMOLT-4 で多い.つまり臨床的にビンカアルカロイドとプレド ニゾロン (VP 療法〕が有効なALL および慢性骨髄性 白血病急性転化 (CMLin BC) 由来の株細胞でレセプ

784-ター数が高値を示し，その治療効果との関係が推定さ れた. 2 ) 白血病患者末柏、血中の白血病細胞のビンデシン 結合能と白血病病型および治療効果との関係. 末梢血白血病細胞に対する特異的ピンデシン結合能 を平均士

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_{で表わすと，急性骨髄性} 白血病

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であった.

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，

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に比して有意に 高い結合能を示した.

CMLinBC

は

AML

に対して有 意に高値を示した.したがって

ALL

と非リンパ性白 血病との鑑別にビンデシン結合能の測定は有用と考え る

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例，

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例全例に

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療法が行な われた.

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_{以上の例は，以下の例に比し}

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療法の有効例が有意に多く， ピンデシン結合能の 測定によって，

VP

療法の治療効果を予測する可能性 を示した

論 文 審 査 の 要 旨

本 研 究 は 白 血 病 株 細 胞

K562

，

MOLT-4

，

HL-60

に つ い て ビ ン デ シ ン レ セ プ タ ー を 測 定 し ， 白 血 病 細 胞 と 治 療 効 果 と の 関 係 を ， と く に ピ ン デ シ ン 結 合 能 の 面 か ら 明 ら か に し た も の で あ る . 白 血 病 の 治 療 ， と く に

VP

療 法 ( ピ ン カ ア ル カ ロ イ ド と プ レ ド ニ ゾ ロ ン 〉 の 有 効 性 を 理 論 づ け 学 術 上 価 値 あ る 論 文 と みとめる. 主論文公表誌 ヒト白血病細胞におけるビンデシンレセプターにつ いて 東 京 女 子 医 科 大 学 雑 誌 第

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巻 第

8

号

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頁〔昭和

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年

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月

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日発行〕 副論文公表誌 1)溶血性貧血の成因と治療，予防に関する研究. 心弁置換術後患者における貧血に関する血液 学的検討. 厚生省特定疾患溶血性貧血調査 昭和

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年度 業 績

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頁〔昭和

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年

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月発行〉 2 ) 急性白血病の寛解率および生存期間に影響する 諸因子について. 臨床血液

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昭(

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-785-3 ) 急性骨髄性白血病患者の白血病性コロニー形成 細胞に関する研究. 医学のあゆみ

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ヒト白血病細胞

K562

におけるビンデシンレセ プターについての研究. 医学のあゆみ

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(ヒト白血病株細胞におけ るピンデシンレセプター〕

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Cancer

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6 ) 白血病細胞のピンデシン結合能と白血病病型お よび治療効果. 医学のあゆみ

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