Jpn. J. Equine Sci. 4(2) : 177-198 (1994) 177
Ⅱ.シ ンポ ジ ウム
シ ン ポ ジ ウ ム-ウ
マの 品種成 立 の歴 史 と個 体
識別-1.ウ マ 品種成 立 の歴 史 的背 景
北海道大学名誉教授 八 戸 芳 夫 人 間 は ウマ の 品種 造 形 につ いて は,そ の家 畜 化 の 時 点 か ら絶 えず 考 え,絶 えず 推 進 し て きた もの で あ っ て,そ の成 果 は将 に人 間 の 大 昔 か らの 智 恵 に よ る もの で あ る。 した が っ て ウ マ の 品種 成立 とな れ ば,そ の 歴 史 は ウ マ の歴 史 とい う よ りは,む し ろ人 間 の 歴 史 そ の もの と も言 え よ う。 しか し,数 多 い ウ マ 品種 の 中 に は,人 間 の 力 と い う よ りは,む しろ 自然 が つ くりあ げた と しか 考 え られ な い もの もあ り,そ の 内容 は興 味 の つ きな い と ころ で あ る。 馬 産 な り改 良 に加 え られ て きた人 的 な要 因 は数 多 く挙 げ られ る もの の,そ の 中 で も,絶 対 的 と も 言 え る強 い影 響 を与 え て きた もの は,な ん と言 っ て も"戦 争"で は な い か と考 え られ る。 国 と国,民 族 と民 族 等 々,こ の広 い地 球 上 に は 必 らず 争 い ご とが 絶 え な か っ たが,そ の た び に不 可 欠 な もの として ウマ が 登 場 し,戦 力 と して大 き な 役 割 を演 じて きた だ け に,戦 に適 した ウ マ を思 向 す る よ う に な るの も当 然 と言 え,こ の こ とが 世 界 的 に ウマ の 改 良 方 向 を戦 争 向 き に して き た こ と に な る。 しか し,こ の戦 争 とい う大 き な要 因 は,ウ マ に 関 して は,将 来 に向 けて 全 く考 え られ な い状 況 に 至 っ た わ けで,何 か 大 き な喜 び を禁 じ得 な い。 ウ マ と共 に お ど りあ が って 喜 び た い 気 持 ちで あ る。 そ れ だ け戦 争 に制 約 され る こ とが 大 きか った の で あ ろ う。 品種 造 成,品 種 改 良 を行 な う とい う こ とは,人 間 が行 な うの で あ るか ら,そ の 実施 者 の 意 向 が ど の程 度 で あ っ て,ど の よ うな 方 向 を と るか が 重 要 に な るが,ど の場 合 で も言 え る こ とは,そ の 経 済 的 ゆ と りで あ ろ う。 長 い歴 史 の 中 で,英 国 が果 た して きた ウ マ 改 良 の実 績 は偉 大 で あ る。 そ の場 合,英 国 が持 つ 当 時 の 経 済 的 ゆ と りは無 視 出来 な い重 要 な要 因 で あ っ た に ちが い な い。 英 国 は,当 時 実 質 的 に七 つ の海 を支 配 し,世 界 の 到 る所 に膨 大 な植 民 地 を保 有 し,従 っ て経 済 的 に は全 く申 し分 の な い状 況 下 に あ っ た ば か りで な く,当 時 の 英 国 貴 族 達 に好 個 の趣 味 的 方 向 を与 え た もの が 動 物 の 改 良,品 種 の造 成 で あ った と言 え る。 今 迄 に ない もの を,交 配 に よ っ て新 た に造 成 して い く喜 び は彼 等 貴 族 た ちの 気 持 ち を いや が 上 に も盛 り上 げて い った ら し く,こ の こ とは決 し て ウ マ ば か りで な く,他 の 家 畜 例 え ば ブ タや 緬 羊, イ ヌ 等 々 に顕 著 に見 られ る もの で あ る。 ウ マ につ い て も,彼 等 が 手 が けた もの は,サ ラ ブ レ ッ ドの造 成 ば か りで はな く,多 方 面 の 用 途 に む け て の 思 い切 っ た 品種 造成 は只 々 驚 嘆 す る ばか りで あ る。 改 良 に は,ど う して も遺 伝 資 源 が 豊 富 で な けれ ば思 う よ うな実 績 は あ げ られ な い の で あ り,そ の 意 味 で世 界 の多 くの地 域 か ら遺 伝 資 源 を入 手 で き る状 況 下 に あ っ た英 国 は,最 もめ ぐ まれ て い た と 言 え よ う。 しか し,ど の よ うな条 件 が と との っ て い て も, 基 本 的 に必 要 な の は,実 際 に改 良 に直 面 す る人 間History of breed development and individual identification in the horse : 1. Historical background of equine breeds development
の 問題 で あ る。 一例 を紹 介 す る と,ア メ リカ大 陸 で は,数 万 年 前 の"最 後 の 氷 河 期"に ウマ が 全 滅 して 居 り,そ の 後1519年 に 至 っ て メ キ シ コ海 岸 に つ い た17頭 の ス ペ イ ン ウ マ が そ の 後 入 っ て き た ス ペ イ ン ウマ と共 にム ス タ ン グ とし て西 部 土 着 馬 の根 幹 馬 とな って い った 。 信 じが た い程 の耐 久 力,機 敏 性,知 能 の 高 さ,ウ マ の能 力 を超 え た ス ピー ドそ れ か ら超 人 的 な理 性 を持 つ 幻 の ウ マ と し て 余 り に も有 名 な存 在 に な っ た。 一 方,Indian Ponyに は このMustangの 血 液 も少 な か らず 含 ま れ て 居 る。 IndianPonyは,ウ マ を 所 有 す るIndianの 一 部 族 名 か ら 一 般 にCayuse(カ イ ユ ー ス)と 呼 ば れ て い る が,こ のCayuseがMustangの 本 当 の 特 徴 を 代 表 す る も の で は な く て,か な りMustangよ り も 劣 る も の と さ れ て い る 。Cayuseが か な り劣 化 し て し ま っ た の は,Indianが ウ マ の 血 統 に 全 く考 慮 を 払 わ ず,し か も,良 い 雄 馬 た ち を き そ っ て 自 分 達 の 乗 用 に 使 う こ と の み を 考 え,そ の 結 果, 最 悪 の 雄 馬 が 雌 馬 と の 交 配 に あ て ら れ て き た か ら で あ る 。 この よ うな人 的 な問 題 は,き わ め て率 直 に ウマ の 資 質 に影 響 す る もの で あ っ て,心 す べ き こ とで あ ろ う。 人 口 の比 較 的 密 集 して い た早 い 頃 の ア メ リカ 東 部 の 連 中 は,旧 大 陸 か ら多 くの す ぐれ た ウマ を輸 入 し て い た。 これ らの輸 入 馬 は,ア メ リカ 新 大 陸 に お け る い ろ い ろ な条 件 の下 で,ま た各 種 の 需 要 や 生 産 者 の好 み な どに よっ て,種 々 の 明 確 な タイ プ の ウ マ に選 抜 さ れ て い っ た 。 さ ら に,交 雑 や 異 系 交 配 の方 法 に よっ て洗 練 さ を加 え,ま た 環 境 に よ る変 更 な どを う けな が ら,今 日,ア メ リカで 登 録 さ れ て い る よ うな素 晴 ら しい 品種 が 生 まれ て い っ た。 これ らの素 晴 ら しい 短期 間 の 成 果 は,結 局 は ア メ リ カ 人 達 が 旧 大 陸 に は 負 け た く な い とす る 信 念 か ら,ヨ ー ロ ッパ レ ベ ル 以 上 の ウ マ を 強 く要 望 し た こ と に 他 な ら な い 。 し か も そ の 遂 行 に は フ ロ ン テ ィ ア ー ス ピ リ ッ ト と結 び つ け て 考 え る と納 得 が い く。 例 え ば,SulkyTrottingRaceへ の 強 い 関 心 か ら, サ ラ ブ レ ッ ド を 基 本 と し てStandardbredと 命 名 さ れ る よ う に な っ た す ぐれ た 品 種 の 造 成 は 素 晴 ら し い も の で あ る 。 中 国 大 陸 に お け る ウ マ 改 良 の 歴 史 も ま た 独 特 の 経 過 を辿 り,そ の ス ケ ー ル の 大 き さ,強 い ウ マ づ く りへ の 自信 な ど,た し か に 抜 群 の ウ マ 大 国 を 形 成 し て 居 る 。 しか し,内 蒙 古 自治 区,西 蔵 自治 区,新 彊 自治 区 の 巨 大 馬 産 地 は果 て しな い大 草 原 を か か え,草 原 との 調 和 を巧 み に維 持 し なが らの ゆ っ く り した 世 代 交替 の 妙 味 は,さ す が に貫 縁 を示 す ウ マ大 国 で あ る。 そ して,3自 治 区の 民 族 た ち は,自 分 た ち の所 管 す る草 原 の ウマ た ち を他 民 族 に渡 す こ とは あ り 得 ない とし,そ の理 由 は,ウ マ た ち が駄 目に な る か ら と豪 語 す る。 そ れ ほ ど自分 た ち の ウ マ あ つ か い に絶 大 な 自信 を持 っ て い る。 彼 等 は きわ め て大 まか な態 度 で馬 群 に接 し,ウ マ を し て 自分 た ち に心 服 させ る特 技 を有 して い る の が 印 象 的 で あ る。 この よ うな所 で は独 特 の ウ マ改 良 の手 段 が 肯 ぜ られ る よ う長 い 目で将 来 を見 守 る必 要 が あ ろ う。 わ が 国 に お け る過 去 の ウ マ 改 良 につ い て は,経 済 的 な貧 困,必 要 な遺 伝 資 源 が 入 手 出 来 な か った こ と,戦 争 等 々 に よ り,か な りお くれ て 了 った こ とは残 念 な こ とで あ る。 そ れ だ け に,こ れ らの ウ マ の改 良 に つ い て は,能 率 的 な 科 学 的 手 法 を充 分 と り入 れ て,し か もそ の過 程 は楽 し ぐす す め るべ き もの と考 え る。
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シ ンポ ジ ウム-ウ
マの品種成立の歴 史
と個体識別-2.軽 種 馬の 血統 登 録 と外 貌 上 の特 徴
日本軽種馬登録協会 下飯 坂 隆 少 数 の基 礎 資源 の 後 裔 が競 走 馬 として 急 速 に改 良 され,現 在 全 世 界 で 毎 年10数 万 頭 生 産 さ れ て い るサ ラ ブ レ ッ ドに ま で 発 展 し えた の は,18世 紀 に英 国 で 開始 され た競 走 成績 記 録 制 度 と血 統 登 録 制 度 の賜 物 で あ り,的 確 な 個体 識 別 は,こ の 二 つ の制 度 を支 え る重 要 な 要 素 で あ った 。 1.我 が 国 に お け る外 貌 上 の 識 別 昭 和23年 に,当 時 の 軽 種 馬 登 録 協 会 に よ っ て 「馬 の 毛 色 及 び 特 徴 記 載 要 領 」 が 定 め られ,そ の 後 改 正 が重 ね られ て現 行 の もの に至 って お り,こ れ に拠 っ て個 体 識 別 を行 っ て い る。 「要領 」 の 順 序 に従 い概 要 を紹 介 した い 。 1)毛 色 毛 色 は栗 毛(21.5%),栃 栗 毛(1.3%),鹿 毛 (53.5%),黒 鹿 毛(13.7%),青 鹿 毛(2.3%), 青 毛(0.3%),芦 毛(7.4%)の7種 と して い る。 ()内 の%は,昭 和63年 か ら平 成4年 ま で の5 ヵ年 間 に血 統 登 録 を行 っ た サ ラ ブ レ ッ ド系 統産 駒 約46,400頭 の 毛 色 内 訳 で あ る。(以 下,図1「 馬 体 各 部 の名 称 」 を参 照) 栗 毛:被 毛 は黄 褐 色 で長 毛(ま え が み,た て が み,尾)は 被 毛 よ り濃 い もの か ら淡 い もの まで あ る。 栃 栗 毛:被 毛 は黒 味 が か っ た黄 褐 色 か ら黒 味 の 非 常 に濃 い もの まで あ る。 鹿 毛:被 毛 は明 る い赤 褐 色 か ら暗 い もの まで あ るが 長 毛 と四肢 の下 部 は黒 色 で あ る。 黒 鹿 毛:被 毛 の色 合 い は黒 味 が か っ た赤 褐 色 で, 黒 味 の程 度 に よ り相 当黒 く見 え る もの まで あ る。 1.鬚(ま え が み) 2.額 3.眼 盂(が ん う) 4.鼻 梁(び り ょ う) 5.鼻 端(び た ん) 6.鼻 孔(び こ う) 7.上 唇 8.下 唇 9.顎 10.頬 11.咽 喉(い ん こ う) 12.耳 下(じ か) 13.頸 14.頸 溝(け い こ う) 15.肩 16.肩 端(け い た ん) 17.胸 前(む な ま え) 18.上 膊(じ ょ う は く) 19.肘(ひ じ) 20.前 膊(ぜ ん ば く) 21.夜 目(よ る) 22.前 膝(ぜ ん し つ) 23.管 24.球 節(き ゅ うせ つ) 25.繋(つ な ぎ) 26.蹄 冠(て い か ん) 27.蹄(て い) 28.臀 端(で ん た ん) 29.臀(で ん) 30.股(こ) 31.後 膝(こ う し つ) 32.脛(け い) 33.飛 端(ひ た ん) 34.飛 節(ひ せ つ) 35.項(う な じ) 36.鬣(た て が み) 37.髻 甲(き こ う) 38.背 39.腰 40.腰 角(よ う か く) 41.尻(し り) 42.尾 根(び こ ん) 43.帯 径(お び み ち) 44.肋 45.腹 46.慊 47.距 毛(き ょ も う) 図1.馬 体 各 部 の 名称History of breed development and individual identification in the horse : 2. Colours and markings description for racehorse registration
図2.頭 部 の 白徴(記 載 例 の 一 部) 青 鹿 毛:全 身 殆 ど黒 色 で眼 及 び鼻 の周 辺,腋, 賺 等 が 僅 か に褐 色 で あ る。 青 毛:被 毛,長 毛 共 に黒 色 で あ る。 芦 毛:基 礎 の毛 色 は栗 毛,鹿 毛 又 は青 毛 等 で あ り,被 毛 全 体 に 白色 毛 が混 生 し,年 齢 が進 む につ れ て 白色 の度 合 が 強 くな る。 今 世 紀 初 め か ら盛 ん に な っ た メ ンデ ル の遺 伝 の 法 則 の初 期 の研 究 中著 名 な もの は ウマ の 毛色 遺 伝 に 関 す る も の で,多 数 の 学 者 の 研 究 はGencral Stud Book(英 国 サ ラ ブ レ ッ ド血 統 書)か ら得 ら れ た ウ マ の毛 色 遺 伝 例 を分 析 した もの で あ った 。 近 年 は他 の哺 乳 動 物 の毛 色 遺 伝 と対 比 した研 究 が 行 わ れ た。 これ らの研 究 か ら栗 毛 は青 毛,鹿 毛, 芦 毛 に対 して劣 性(下 位)の 関係 にあ り,従 って 栗 毛 同士 の交 配 か らは他 の通 常 の 毛色 は生 まれ な い こ と,芦 毛 は他 の通 常 の毛 色 に対 して 上位 の 関 係 に あ り,従 っ て芦 毛 馬 は少 な くと も片親 が 芦 毛 で な け れ ば な らな い こ とが確 認 され て,親 子 関 係 め判 断 基 準 に も考 慮 され た。 2) 特 徴 特 徴 に は,先 天 的 に備 わ っ て い る特 徴 と,後 天 的 に生 じ生 涯 消 え る こ とが な い特 徴 とが あ る。 (1) 白斑 A.頭 部(図2参 照) 星:額 に あ る 白斑 を い い,こ ぶ し大 以 上 の もの を 大 星,母 指 頭 大 以 下 の もの を小 星 とい う。 形 状 に よ っ て 曲星,環 星,乱 星 が あ る。 流 星:星 が 下 方 に流 れ た もの,大 流 星,小 流星, 曲流 星,環 流 星,乱 流 星 が あ る。 鼻 梁 白:鼻 梁 に あ る 白斑 で,鼻 骨 幅 以 上 の 白斑 を 鼻 梁 大 白,母 指 頭 幅 以 下 の もの を鼻 梁 小 白 とい う。 鼻 白:鼻 に あ る 白斑,幅 に よっ て鼻 大 白,鼻 小 白 とす る。 唇 白:唇 に あ る 白斑,上 唇 に あ る もの を上 唇 白, 下 唇 に あ る もの を下 唇 白 とい う。 幅 に よっ て唇 大 白,唇 小 白 とす る。 作:額 か ら鼻 梁 を経 て鼻 に続 い て い る白斑,幅 が 概 ね 一 定 し て鼻 骨 幅 を保 ち真 直 な もの,鼻 骨 幅 を越 え る もの を大 作,母 指 頭 幅 以 下 の もの を細
181 図3.肢 下 部 の 白徴 作 とい う。 白面:額 か ら鼻 に至 る白斑 で,顔 面 の 半 分以 上 に またが る もの又 は幅 が両 眼 に及 ぶ もの をい う。 な お,顔 に生 じた 白色 毛 で,白 斑 に は至 らな い 刺 毛 の うち特 に額 又 は鼻 梁 に あ る刺 毛 を額刺 毛 又 は鼻 梁 刺 毛 と して 白斑 に準 じて 記 載 す る。 上 記 の 白斑 が一 つ だ けの こ と もあ れ ば,い くつ かが 組 み合 わ され て存 在 す る こ と も あ り,頭 部 の 上 か ら下 へ 向 か っ て列 記 す る。 B.肢 の下 部(図3参 照) 微 白:蹄 冠 の 白斑,大 き さ概 ね母 指 頭 大 以 下 の も の。 小 白:蹄 冠 の 白斑,幅 が 蹄 冠部 の 半 周 に及 ぼ な い もの。 半 白:長 さ は蹄 冠 か ら管 の 半 分 以 下,幅 は球 節 の 下 部 で肢 の半 周 以 上 あ るが 全 周 に は達 し な い も 図4.記 載 す る旋 毛 の名 称 お よ び部 位 の 。 白:長 さ は蹄 冠 か ら管 の半 分 以 下,幅 は球 節 の下 部 で 肢 の全 周 に及 ぶ もの。 長 白:長 さ は蹄 冠 か ら管 の半 分 以 上 に達 し,幅 は 管 の 中央 部 と球 節 よ り下 部 で,肢 の全 周 に及 ぶ もの 。 細 長 白:長 さが 蹄 冠 か ら管 の半 分 以 上 に達 し,幅 は管 の 中央 部 で は肢 の全 周 に及 ば な い が,少 な く と も球 節 よ り下 で肢 の全 周 に及 ぶ もの。 長 半 白:長 さ は蹄 冠 か ら管 の半 分 以 上 に達 し,幅 は肢 の どの部 位 で も全 周 に及 ん で い な い もの 。 下 肢 の 白斑 は,左 前,右 前,左 後,右 後 の1頂に 記 載 し,例 え ば,左 前 小 白右 後 一 白,右 前後 三 白, 左 前 細 長 白左 後 小 白 な ど とす る。 (2) 旋 毛 ウ マ の被 毛 は傾 斜 して生 え て お り,毛 の 流 れ が で き て,そ の起 点 や終 止 部 が種 々 の状 態 に集 合 し て生 ず る の が旋 毛 で あ る。 旋 毛 は個 体 に よ り存 在 す る部 位 が 一 定 で な く,生 時 か ら一 生 消 えな い た め我 が 国 で は古 くか ら,存 在 す る部 位 に よっ て 特 殊 な用 語 を用 い て特 徴 と して記 載 して い る。 現 在 は以 下 の19種 類 の 旋 毛 を 使 用 して い る。
(図4参 照) 珠 目:額 に あ る旋 毛,眼 の上 線 よ り上 に あ る もの を珠 目上,眼 の 上 線 と下 線 の間 の もの を珠 目正, 下線 よ り下 の もの を珠 目下 と記 載 し,2個 以 上 あ る場 合 は数 を,珠 目の な い もの を珠 目欠 とす る。 華 粧:鼻 梁 中 央 か ら鼻 孔 まで の 間 に あ る もの。 頬 辻:頬 の 一 円 にあ る もの 。 轡 搦:頬 の 前 方 か ら 口角 まで に あ る もの。 吭搦:咽 喉 と頚 の 下 縁 で,頚 の 上 約1/3以 上 に あ る旋 毛 。 髪 中:た て が み の 生 え ぎわ 約3cm以 内 で,耳 下 か ら 髻甲 前端 まで にあ る旋 毛 。 但 し耳 を倒 した 部 位 内 に あ る もの は記 載 しな い 。 頸 中:頸 に あ り,吭 搦,髪 中,波 分 以 外 の 部 位 に あ る もの。 波 分:頸 の下 縁 で,頸 の 約2/3以 下 に あ る も の。 長 さ が 約10cm以 上 の もの を波 分 長,2個 以 上 あ る もの は数 を記 載 す る。 双 門:胸 前 両 側 の上 部 に あ る旋 毛 。 浪 門:胸 前 中心 線 上 約3cm幅 以 内 に あ る旋 毛 。 柏 生:胸 前 両 側 下 部 の旋 毛,但 し,柏 生 が 無 い 場 の み,左 柏 生 欠,柏 生 欠 の よ う に記 載 。 押:髻 甲 に あ る旋 毛 。 鐙端:肩 の後 縁 と帯 径 の 間 に あ る旋 毛 。 初 地:前 膊 以 下 球 節 縁 まで に あ る旋 毛 。 芝 引:肋 の後 縁 か ら腹 まで の部 位 で,肘 と後 膝 と を結 ぶ 線 よ り上 に あ り側 面 か ら見 え る もの 。 芭 蕉:賺 に あ る旋 毛 。 但 し旋 毛 の 中心 が慊 の 下 縁 よ り約10cm以 上 上 方 に あ る も の だ け芭 蕉 上 と して 記 載 す る。 骨 正:芭 蕉 の 下 方 に あ る旋 毛 。 後双 門:臀 に あ る旋 毛 。 沙 流 上:飛 節 上 縁 か ら球 節 上 縁 まで に あ る旋 毛 。 これ 以 外 の 部 位 に旋 毛 が あれ ば,例 え ば肋 旋 毛, 背旋 毛 の よ う に,部 位 を付 し て記 載 す る。 (3) そ の 他 の 特 徴 上 記以 外 に次 の もの は部 位 を明 記 して記 載 す る。 刺 毛:頭 部,四 肢 下 部 以 外 の 著 し い もの。 白斑:(頭 部,肢 部 を除 く。)母 指 頭 大 以 下 の も の を小 白斑 とす る。 異 毛 斑:白 斑 以 外 の有 色 斑 紋 で明 瞭 な もの。 岩 陥:体 表 の 一.部が 凹 陥 して い る もの。 創傷 痕 等 の 損 徴:特 に明 瞭 で 特 徴 とな る もの。 入 墨 又 は烙 印:部 位,形 状 を記 載 す る。 そ の 他:輪 眼(角 膜 の周 囲 が 白色 で一 周 して い る もの),又 は 魚 目(虹 彩 の色 素 を欠 き 白い もの) も記 載 す る。 2.諸 外 国 に お け る外 貌 上 の識 別 第 二 次大 戦 後,輸 送 手 段 の 進 歩 に伴 い競 走 馬 の 国 際交 流 が激:化し,ま た 生 産 頭 数 も増 加 して,正 確 な個 体 識 別 は益 々 重 要 性 を増 し て きた 。 世 界 の競 馬 政 策,運 営 上 の 規 則 の統 一 な どを 目 的 と し て,1967(昭 和42)年 か ら競 馬 統 轄 機 関 国際 会 議(通 称,パ リ国 際競 馬 会 議)が 毎 年 行 わ れ て い るが,発 足 早 々 の会 議 で 各 国 の 言 語 は異 な っ て い るが個 体 識 別 記 載 方 式 をで き る限 り統一 し た い との趣 旨 で,個 体 識 別 用語 の対 照 テ キス ト作 成 が 提 案 さ れ,1972(昭 和47)年 に 国 際 個 体 識 別 用 語 集(International Glossary-International Sys tem for describing horscs )が 発行 され た 。
そ の後 パ リ国際 競 馬 会 議 か ら分 離,独 立 して サ ラ ブ レ ッ ドの血 統 登 録 業 務 に 関 す る事 柄 を専 門 的 に審 議 す る国 際 血 統 書 委 員 会 が組 織 され,こ の 委 員 会 か ら再 度1989(平 成 元)年 に 「用 語 集 」 の 改 訂 版 が 刊 行 され た(図5)。 全 面 的 に これ に従 う こ とを強 制 して は い な い が, 各 国 の 記 載 方 法 を調 整 し よ う とす る計 画 は徐 々 に 進 行 して い る。 血 統 登 録 機 関 の職 員 が 直 接 毛 色,特 徴 を記 録 す るの は農 務 省 が す べ て の ウ マ の登 録 を行 っ て い る フ ラ ンス と日本 位 で あ り,そ の ほ か の 国 は公 認 の 獣 医 師 或 い は生 産 者 自信 が 採 徴 して い る た め,指 導 は行 わ れ て い るが,同一 国 内 の特 徴 記 載 に も多 少 の個 人 差 は あ る。 1) 毛 色 各 国 の 毛 色 表 示 に基 本 的 な相 違 は勿 論 無 いが, 米 国 の 表 示 は,栗 毛(chestnut),鹿 毛(bay), 黒 鹿 毛 又 は 青 鹿 毛(darkbayorbrown),青 毛 (black),芦 毛(黒 色 を基 礎 と す る も の をgray, 赤 色 毛 の交 じ った もの をroanに 分 け る。)に 固 定
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図5.「 国 際個 体 識 別 用語 集(改 定 版)」 の一 部
NB-This Certificate should be lodged, without delay, with the Racing Authority of the Country to which the horse has been imported,
232 ENGLISH
STUD
BOOK CERTIFICATE
.
(ISSUED
UNDER
THE
AUTHORITY
OF
THE
JOCKEY
CLUB
.)
図6． 昭 和9年 英 国 よ り輸 入 の レ イモ ン ドの 輸 出 証 明 書 (特徴-流 星 ・右 後 蹄 球 蹄 冠 白 ・体 高 約16ハ ン ド)
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図8.平 成5年 英 国 よ りの 輸 入馬 の個 体 識 別 証 明 書欄(輸 出証 明書 裏 面) (珠 目右 上 ・髪 中 ・波分 長 ・左 芭 蕉 上 ・左 骨 正 ・胸 前 右 肩 傷 痕)
187 しい る一 方,フ ラ ンス,ド イ ツ な ど は一 つ の 毛 色 を 明 る い もの か ら暗 い もの まで細 か く分 けて い る。 2) 特 徴 1960年 代 の 中 頃 まで は,白 斑 だ け を特 徴 と し て 記録 す るの が 習 慣 で あ った が(図6),そ の 後, 英 国 とフ ラ ンス で 頭 部 の旋 毛 を記 載 す る よ うに な り初 め た 。 頭 部 の 白斑 に は 星 をstar,鼻 梁 白 を stripe,鼻 白 をsnip或 い は 白面 をbaldと す る よ う に若 干 の用 語 は あ る もの の位 置,大 き さ,形 状 を 文 章 で 記 録 す る た め に採 徴 す る人 に よっ て表 現 に 幾 分 の 違 い は あ る。肢 部 の 白 斑 に も蹄 冠 白white coronet,繋 白whitepastern,の よ う に 白斑 部 位 を記 録 す る様 式 は あ るが頭 部 の 白斑 と同様 な こ と が あ るの は勿 論 あ る。 1972年 版 の 「用 語 集 」 か ら,頭 部 と頸 に あ る 旋 毛 の 記 録 方 法 が 説 明 され て い る(図7)。 現 在,英 国 ・アイ ル ラ ン ドか ら届 くウ マ の輸 出 証 明 書 に は,日 本 で い う,双 門,初 地,芭 蕉 上, 後 双 門 な どが 記 載 され て い る もの まで見 られ る よ う に な った(図8)。 3) そ の他 の特 徴 米 国 は,競 走 馬 の頭 数 が圧 倒 的 に多 く頻 発 す る 替 え馬 事 件 防止 に入 墨 が 開発 され,現 在 は競 馬 が 行 わ れ て い る全 州 の競 馬場 に入厩 す る と上唇 の 内 側 に入 墨 が施 され て い る。 馬体 の 写 真 に よ る識 別 は更 に古 くか ら一部 の 州 で初 め られ て た が,現 在 はニ ュー ヨー ク州 競 馬 協 会 の 競 馬 場 で,馬 体 と夜 目(附 嬋)の 組 写 真 が 個 体 識 別 の補 強 に用 い られ て い る。 オ ー ス トラ リア とニ ュ ー ジ ー ラ ン ドは早 くか ら, 両 肩 の烙 印 を識 別 の補 助 に利 用 して お り,定 め ら れ た 烙 印 を,血 統 登 録 の 申込 み以 前 に生産 者 が 実 施 す る よ う義 務 付 け られ て い る。 「マ イ ク ロチ ッ プ」 の利 用 に つ い て 国 際血 統 書委 員 会 で も話 題 に の ぼ っ て お り,近 年我 が 国 で も畜 産 一 般 を対 象 と して研 究 が行 わ れ て い る。
シ ン ポ ジ ウ ム
ウマの 品種 成 立 の歴 史 と個 体 識 別
3.軽 種 馬 の血 液 型検 査
競走馬理化学研究所 三 浦 信 義 軽種 馬 の 正 しい 血 統 の保 持 は,競 走 馬 の改 良 と 競 馬 の 公 正 確 保 に と り大 切 な要 件 の一 つ で あ り, 血 統 の正 否 の判 定 と個 体 識 別 を最 も合 理 的 に行 う 方 法 は現 在 の と ころ血 液 型 を応 用 す るほ か は な い 。 ウ マ の血 液 型 検 査 は,血 液 を赤 血 球 と血清 に分 離 し,溶 血 反 応 と凝 集 反応 に よっ て 赤 血 球 抗 原 型, 水 平 式 ポ リア ク リル ア マ イ ドグ ラ ジ ェ ン トゲ ル 電 気 泳 動 法,で ん粉 ゲ ル 電 気 泳 動 法 お よび 水 平 式 ポ リア ク リル ア マ イ ドゲ ル 等 電 点 電 気 泳 動 法 に よ っ て血 清 蛋 白質 型 お よび 赤 血 球 蛋 白質 型 を検 査 し て い る。 これ に基 づ い て 父,母,子 の血 液 型 か ら親 子 関係 を判 定 して い る。 これ らの検 査 方 法 は,こ の 分 野 の 学 識 経 験 者 を もっ て構 成 され る血 液 型 検 査 法 審 議 委 員 会 に お い て慎 重 に検 討 され た もの で あ る。 また 当研 究 所 は, 世 界 の 血 液 型 研 究 機 関 お よ び研 究 者 で構 成 さ れ て い る国 際 動 物 遺 伝 学 会 に加 盟 して お り常 に各 国 と の 技 術 交 流 を行 っ て い る。 近 年,国 際血 統 書 委 員 会 の要 請 に よ りサ ラ ブ レ ッ ド種 に お い て は血 液 型 検 査 の標 準 化 の為 の試 験 が3回 実 施 され,検 査 項 目 の最 少 標 準 が決 定 され た 。 ワー ク シ ョッ プで 今 後 個 体 識 別 お よび この親 子判 定 の検 査 方 法 に導 入History of breed development and individual identification in the horse :3. Blood typing service in light-breed
horses
•\ 1. ISBC Requirements for "approval" of a Thoroughbred Stud Book .
•\ 2. Minimum blood typing Standards for Thorough-breds
表3．配合変更の解決シナテム数す べ きDNA多 型 が 研 究 課 題 とさ れ て い る。
1.国 際 血 統 書 委 員 会 と 国 際 動 物 遣 伝 学 会 と の 関 連
国 際 血 統 書 委 員 会(International Stud Book
Committee;ISBC)は,サ ラ ブ レ ッ ド 血 統 書 を
「公 認 」 す る た め のISBCの 要 件 を 決 定 し(表1),
国 際 動 物 遺 伝 学 会(International Society for Ani
mal Gentics;ISAG)に,血 液 型 の 分 類 の 標 準 化 を 依 頼 し た 。1987年 か ら,国 際 サ ラ ブ レ ッ ド血 液 型 検 査 標 準 化 試 験 が 実施 され,こ の ワー ク シ ョ ップ で検 討 決 定 さ れ た,サ ラ ブ レ ッ ド血 液型 検 査 最 少 標 準 検 査 項 目 を用 い(表2),個 体 識 別 お よび 親 子 判 定 を実 施 す る こ と とな っ た。 2.当 研 究 所 の 軽 種 馬 の 血 液 型 検 査 実 績 1973年4月 よ り 血 液 型 検 査 事 業 を 開 始 し, 1992年 末 ま で に,サ ラ 系 統:種 雄 馬2 ,252頭,母 馬11,372頭,子 馬55,821頭,そ の 他(競 走 用 輸 入 馬,繁 殖 登 録 の 雌 馬 等)17,381頭,ア ラ 系 統:種 雄 馬1,281頭,母 馬6,591頭,そ の 他639頭, 計155,431頭 で あ る 。 こ の 内,親 子 関 係 の 判 定 は,20年 間 で 延 べ 115,814件 を 実 施 し,否 定 率 は0.22%で あ る 。 血 液 型 検 査 項 目 は,当 初 赤 血 球 抗 原 型:16フ ァ ク タ ー,血 液 蛋 白 質 型:4シ ス テ ム で 開 始 し, 現 在 は,赤 血 球 抗 原 型:7シ ス テ ム24フ ァ ク タ
189 表4.配 合 変 更 の 解 決 シス テ ム と父権 否 定 率 ー 血 液 蛋 白質 型8シ ス テ ム ま で に増 加 し て い る 。 こ の 間 の 親 子 判 定 の 判 定 効 率(父 権 否 定 率)は, 73.8%, 77.6%, 82.5%, 86.3%, 90.6%, 95.0%, 97.0%と 向 上 し て い る 。 親 子 判 定 の 効 率 を検 討 す る た め に昨 年 の配 合 変 更 例(一 頭 の繁 殖 雌 馬 に異 な る種 雄 馬 二 頭 以 上 を 交 配 し た もの)153件 を調 査 した 結 果,138件 が 解 決 して い る。 す な わ ち,15シ ス テ ム の 血 液 型 か ら一頭 の種 雄 馬 を親 子 関係 が な い と して否 定 し た。 解 決 率 は90%で あ る。 解 決 した138件 の解 決 シ ス テ ム数 を調 査 す る と,表3に 示 す よ う に,シ ス テ ム の 数1が27.5%, 2が36.2%, 3が26.8 %, 4が5.8%, 5が2.9%, 6が0.7%で あ る。 さ ら に,ど の シス テ ム で 種 雄 馬 の親 子 関 係 を否 定 した か,理 論 値 の 各 シ ス テ ム の父 権 否 定 率 と比 較 す る と,表4に な る。 この 結 果 か ら,理 論 値 と 実 際 の 解 決 率 は,非 常 に良 く一致 して い る。 父 権 否 定 率 を さ らに 向上 す る為 に は,松 本 秀 雄 著 「血 液 型 に よ る親 子 鑑 定 」 の 父権 否 定 の総 合 確 立 を参 考 に す る と(表5),ヒ トの 法 医 学 の レベ ル は,ABO式 を始 め30シ ス テ ム の 検 査 で,こ れ は ち ょ う どウ マ の倍 の シス テ ム を検 査 して い る こ と に な る。 ウ マ と 同 じ15シ ス テ ム で は,96.7%で あ る。 さ ら に15シ ス テ ム を 検 査 す る と99.5%に な る。 す な わ ち,各 シス テ ム の 排 除 率 が 大 き けれ 表5.父 権 否 定 の 総 合 確 立(ヒ ト) 松本秀雄 「血液型 による親子鑑 定」 より
•\ 6. Guidelines for the interpretation of blood typing tests in horses ば 別 だ が,ウ マ で もさ ら に15-20シ ス テ ム の 検 査 項 目 を追加 しな れ ば この レベ ル に は到 着 出 来 な い と思 わ れ て い る。 これ は,年 間一 万 頭 以 上 を検 査 し な けれ ば な ら な い ウ マ の血 液 型 検 査 業 務 に は適 さな い 。 1993年 国 際 動 物 遺 伝 学 会 の ウ マ 部 会 は ウ マ の 血 液 型 の ガ イ ドライ ン を作 成 し,そ の 中で 親 子 判 定 に 関 す る排 除基 準 を定 め だ(表6)。 今 後 は,冒 頭 で述 べ た よ う に,国 際 血 統 書 委 員 会 と国 際 動 物 遺 伝 学 会 の 関 連 か ら,DNA多 型 の 研 究 が 強 力 に推 し進 め られ る と思 い ます 。 この研 究 の成 果 か ら真 の意 味 の遺 伝 子 レベ ル の 個 体 識 別 お よ び親 子 判 定 が 可 能 に な ります。
191
シ ン ポ ジ ウ ム-ウ
マ の 品種 成 立の歴 史 と個 体
識別-4.ウ マの個 体 識 別 を 目的 と したDNA型
解 析
JRA競 走 馬総合研究所 向 山 明 孝 競 走 馬 を 目的 と した ウ マ の育 種 ・繁殖 の長 い 歴 史 の 中 で最 も重 要 視 さ れ て きた の が血 統 で あ り, 今 日で は国 際 的 な血 統 登 録 事 業 に まで発 展 して い る。 この ウ マ の血 統 登 録 に お い て,各 個 体 の識 別 や 親 子 関 係 の確 認 の た め に交 配 記 録 や血 液 型 な ど が利 用 され て きた 。 最 近,遺 伝 子 工 学 の 発 展 に伴 っ て,こ の ウ マ の 血 統 登録 を 目的 とした 個 体 識 別 や 親 子 判 定 の新 し い 指標 としてDNA型 分 析 法 が注 目 され て い る。 そ こで,ウ マ の個 体 識 別 を 目的 と したDNA型 分 析 法 に つ い て の研 究 開 発 の 現 況 につ いて 概 説 す る。 1.ウ マ の ゲ ノム研 究 につ い て は じめ に,DNA型 分 析 の 基 本 と な る ウ マ ゲ ノ ム の研 究 状 況 に つ い て若 干 触 れ て み た い。 ウマ のゲ ノ ム解 析 に お い て基 本 とな るの は,ウ マ の 細 胞 中 に存 在 す る2種 類 の ゲ ノムDNAで あ る。1つ は細 胞 核 の 中 に存 在 す る核DNAで あ り, も う1つ は細胞 の オ ル ネ ガ ラで あ る ミ トコ ン ド リ ア 中 に 存 在 す る ミ ト コ ン ド リ アDNA(mt DNA)で あ る。 この う ち,ウ マ(Domestic horse, Equus caballus)の 核DNAは,細 胞 核 内 に あ る染 色 体(2n=64本)を 形 成 し,そ の 全 塩 基 数 は 約30億 対 と算 出 され て い る。 ま た,全 塩 基 数 の うち,エ ク ソ ン と称 さ れ る約10%の 塩 基 配 列 部 分 に は約10万 個 の遺 伝 子 が コ ー ドさ れ て い る と 推 定 さ れ て い る。 し か し な が ら,1992年 現 在 で 約30個 の ウ マ の 遺 伝 子 が 同 定 さ れ て い る に過 ぎ ない 。 これ らの遺 伝 子 は,一 般 的 に ウ マ の ゲ ノ ム 解 析 と遺 伝 子 マ ッ ピ ン グ を行 う過 程 に お い て見 い だ さ れ る が,そ の 出 発 点 と な る の は ウ マ ゲ ノ ム DNAラ イ ブ ラ リー の 構 築 と遺 伝 子 の ク ロ ー ニ ン グ な らび に シー クエ ン シ ン グで あ る。 ウ マ の ゲ ノ ム研 究 は数 年 前 に着 手 され た ばか りで あ り,充 分 な研 究 体 制 は構 築 され て い ない が,今 後 研 究 機 関 や研 究 者 数 が増 加 す る に従 って 急 速 に発 展 し,多 くの有 用 な遺 伝 子 が検 出 され て くる もの と思 わ れ る。 この よ うな ウ マ ゲ ノム解 析 の研 究状 況 の 中 で, 重 点 的 に研 究 が進 め られ て い るの が ウマ の 個体 識 別 を 目的 と したDNA多 型 研 究 で あ る。 2.個 体 識 別 を 目的 と したDNA多 型 マ ー カ ー と して の条 件 とそ の種 類 一般 に,個 体 識 別 や 親 子 判 定 に利 用 す るた め の DNA多 型 マ ー カ ー は,次 の5つ の条 件 を満 た す もの で な けれ ば な らな い とされ て い る。 1)対 立 遺 伝 子(allele)が 多数 で あ る こ と。 2)ヘ テ ロ接 合 率 が 高 い こ と,す なわ ち対 立 遺 伝 子 の 出現 頻 度 に偏 りが ない こ と。 3)多 型 性 を示 す領 域 の塩 基 配 列 数 が 少 ない も の で あ る こ と,す な わ ち,PCR増 幅 が 可 能 で,正 確 な塩 基 数 や繰 り返 し配 列 数 が 容 易 に 算 出 さ れ る範 囲 の もの で あ る こ と。 4)単 座 位(シ ン グ ル ロ ー カ ス)の 塩 基 配 列 多 型 で あ り,染 色 体 上 の座 位 が確 認 され た もの で あ る こ と。 5)突 然 変 異 が 生 じな い安 定 した塩 基 配 列 構 造
History of breed development and individual identification in the horse : 4. DNA analysis for individual identifi-cation of horses
表1.国 内 ・外 にお い て 現在 研 究 中 の ウ マ のDNA型 分 析 法 領 域 で あ る こ と。 ウマ にお い て も,個 体 識 別 や 親 子 判 定 を 目的 と したDNA多 型 マ ー カ ー と し て 用 い る場 合,こ れ らの5つ の 条 件 を満 た した もの で あ る こ とが必 要 不 可 欠 な もの と考 え られ る。 そ の 理 由 は,DNA 型 分 析 が 単 に ウ マ の育 種 や繁 殖 の た め の 指標 とし て 利 用 され る ば か りで な く,当 面 は ウマ の 血 統 登 録 を 目的 と した個 体 識 別 や親 子 判 定 の た めの 指 標 と して 利 用 さ れ る た め で あ る。 す な わ ち,DNA 型 分 析 は ウ マ の親 子 判 定 の否 定 事 例 にお け る よ り 重 要 な証 拠 事 項 とな り,訴 訟 科 学 の 一 翼 を担 う こ とか ら,必 然 的 に そ の 条件 は厳 し く,ま た 正 確 性, 再 現 性 か つ不 変 性 が確 認 され た もの で な けれ ば な らな い。 ヒ トお よび ウ シ,ブ タ,ヒ ツ ジ,イ ヌ,マ ウ ス な どの動 物 にお い て は,す で に これ らの条 件 を満 た すDNAマ ー カ ー が 多 数 見 い だ さ れ,一 部 の DNAマ ー カ ー が 個 体 識 別 や 親 子 判 定 の た め に利 用 され て い る。 こ れ ら のDNAマ ー カ ー の 主 体 は,核DNAに お け る全 塩 基 数 の 約90%を 占 め る 非 遺 伝 子 コ ー ド部 位(イ ン トロ ン)に 存 在 す る高 度 縦 列 反復 配 列 多 型(VNTR)を 指 標 した もの で あ り,マ ル チ ロ ー カ ス 多 型(DNAフ ィ ン ガ ー プ リ ン ト法), シ ン グル ロー カ ス多 型,反 復 配 列 内塩 基 置換 多 型 (MVR)お よ び マ イ ク ロ サ テ ラ イ ト 多 型 (STR)の4種 類 が 報 告 さ れ て い る。 ま た,遺 伝 子 コ ー ド部 位 で あ るエ ク ソ ン部 位 の 塩 基 配 列 で は, 点 突 然 変 異 多 型 お よび 多塩 基 置 換 多 型 の2種 類 に 分 類 さ れ て い る。 一 方,ミ トコ ン ド リアDNAに お い て はHお よ びL鎖 内 の 点 突 然 異 変 多 型 お よ び Dル ー プ 内 塩 基 置 換 多 型 の2種 類 が 報 告 さ れ て い る 。 ま た,こ れ ら のDNAマ ー カ ー に よ る 多 型 検 出 法 と し て,サ ザ ン プ ロ ッ ト ・ハ イ ブ リ ダ イ ゼ ー シ ョ ン 法,PCR・PAGE・EB染 色 法,PCR・RFLP 法,PCR・SSCP法,PCR・ リ バ ー ス ・ド ッ ト ・プ ロ ツ ト法 お よ びPCR・ ダ イ レ ク ト シ ー ク エ ン ス 法 な どが 開 発 さ れ て い る 。 3.国 内,外 で 研 究 さ れ て い る ウ マ のDNA多 型 マ ー カー の 種 類 現 在,国 内 お よび 外 国 の研 究 機 関(ベ ン チ ャ ー 企 業 を 含 む)に お い て 研 究 さ れ て い る ウ マ の DNA多 型 マ ー カ ー の種 類 は表1に 示 す 通 りで あ る。 そ こで,次 に ウ マ の各DNA多 型 マ ー カ ー の 概 要 につ い て 述 べ る。 4.遣 伝 子 非 コ ー ド部 位 に お け る ウ マ の 個 体 識 別 の た めのDNA多 型 マ ー カ ー ウマ ゲ ノム の遺 伝 子 非 コ ー ド部 位 で あ るイ ン ト ロ ン(介 在 配 列)に は,ヒ トや他 の動 物 と同様 に 多 数 の繰 り返 し塩 基 配 列 が存 在 して い る もの と考 え られ る。 ま た,そ の 繰 り返 し塩 基 配 列 は平 均l kbpに1ヵ 所 の 割 合(合 計 約3,000ヵ 所)で 存 在 し て お り,全 ゲ ノ ム の2-40%を 占 め,か つ動 原 体 や 末 端 部 位 に局 在 す る こ と も,ヒ トお よび マ ウ ス の ゲ ノ ム解 析 に よっ て 明 らか にな って きて い る。 この反 復 配 列 の うち,数10塩 基 程 度 を1単 位 とす る比 較 的短 い 同 じ塩 基 配 列 が 何 回 も縦 列 反 復 し て
193 表2.ウ マ の4品 種 に お け る マ イ ク ロ サ テ ラ イ トDNA多 型(HTG2,HTG4,お よ びHTG5)の 各alleleの 出 現 頻 度 *北 海 道和 種、 木曾 馬 、 トカ ラ馬 、 御 崎 馬 い る 部 位 は ミニ サ テ ラ イ ト と呼 ば れ て い る。 こ の ミニ サ テ ラ イ トで は,反 復 回 数 が 各 個 体 に よ っ て 著 し く 異 な っ て い る 部 位 が 存 在 す る が,こ の DNAの 繰 り返 し 配 列 数 の 違 い,す な わ ち,縦 列
反 復 配 列 数 の 多 型(variable number of tandem
repeats : VNTR )で は,一 般 に ヘ テ ロ 接 合 度 が 高 く,極 め て 高 度 な 多 型 性 を 示 す た め,ウ マ の 個 体 識 別 の た め の 有 力 なDNAマ ー カ ー と し て も 最 も 注 目 さ れ て い る 。 こ のVNTRに よ るDNAマ ー カー を 指 標 に し た 個 体 識 別 法 と し て,「 マ ル チ ロ ー カ ス 多 型 」 と 「シ ン グ ル ロー カ ス 多 型 」 とが あ る 。 こ の う ち,マ ル チ ロ ー カ ス 多 型(DNAフ ィ ン ガ ー プ リ ン ト法 と称 さ れ て い る)は,ヒ トや 各 種 の 動 物 に お け る 初 期 のDNA多 型 マ ー カ ー と し て 研 究 が 行 わ れ て き た 。 ウ マ に お い て もGerorges,M.ら(1988),CoP pieters,W.ら(1990)お よ びMariat,D.ら(1992) な ど,ま た わ が 国 で は 後 藤 ら(1992)お よ び 橋 口(1993)な ど 多 く の 研 究 者 に よ っ て 研 究 開 発 が な さ れ た 。 特 に,ウ マ ゲ ノ ムDNAをFinfI, HaeIIIな ど の 制 限 酵 素 で 消 化 し た の ち,繰 り返 し配 列 構 造 を有 す るMl3フ ァー ジ,3'HVRcore 配 列 お よび 合 成 オ リゴ ヌ ク レオ チ ドを プ ロ ー ブ と して,サ ザ ン プ ロ ッ ト ・ハ イ ブ リダ イ ゼ イ シ ョン 法 に よ って 多 数 の ハ イ ブ リバ ン ドパ タ ー ン を示 す DNAフ ィ ン ガ ー プ リ ン ト像 を 得 た。 しか し,こ の マ ル チ ロー カ ス 多 型 分 析 法,す な わ ちDNAフ ィ ンガ ー プ リ ン ト法 は,当 該 プ ロー ブの 塩 基 配 列 に類 似 す る ウマ の ゲ ノ ムDNA中 の 多 数 の ミニ サ テ ラ イ ト(VNTR)部 位 との ク ロ ス ハ イ ブ リ ダ イ ゼ イ シ ョ ンに よっ て生 じたバ ン ドパ ター ンで あ る こ とか ら,ハ イ ブ リダ イ ゼ イ シ ョ ン時 の 温 度 や 洗 浄 条 件 に よっ て検 出 され るバ ン ドパ タ ー ンが 異 な っ て くる こ と,ま た検 出 され た各 バ ン ドの繰 り 返 し数 や 塩 基 数 を 算 出 で きず,DNA型 と し て の 評 価 や デ ー タ フ ァイル 化 が 困難 で あ る こ と,さ ら に は突 然 変 異 率 が 高 い な ど多 くの 問題 点 が 明 らか にな った た め,現 在 で は個 体 識 別 法 と して は使 用 され て い ない 。 一 方,VNTRを 指 標 と した シ ン グ ル ロ ー カ ス に よ るDNA多 型 検 出 法 は,反 復 配 列 の 繰 り返 し 数 の違 い(VNTR)が 各 個 体 で 異 な る こ と に よ っ て生 じ る多型 現 象 を利 用 す る点 で は前 述 のマ ル
図1.ALF DNA sequencer を 用 い た ウ マ のSTR多 型(HTG4 お よ び5)解 析:raw date
チ ロー カス 多 型 と同 じで あ る。 この 方法 の特 徴 は, 単 一 遺 伝 子 座 位(single locus)に の み認 め られ る 反 復 配 列 の繰 り返 し数 の 違 い(VNTR)を 制 限 酵 素 に よ るDNA断 片 の 長 さ の 違 い(restriction fragment length polymorphism : RFLP )と して 表 わ す こ とに よ っ て個 体 識 別 を行 う こ とで あ る。 す な わ ち,特 定 の 染 色 体 上 に1箇 所 の み 存 在 す る VNTR構 造 とそ れ に隣 接 す る塩 基 配 列 部 位 と を 同 時 に認 識 す る プ ロ ー ブ を用 い て サ ザ ン プ ロ ッ ト ・ハ イ ブ リダ イ ゼ イ シ ョ ン法 で検 出 す るた め, ス トリ ンジ ェ ンシ ー が極 め て安 定 して い る。 また, 最 近 で は,PCR増 幅 法 に よ り多 型 性 を 示 す 特 定 の反 復 配 列 部 分 の み を短 時 間 で 多 量 にPCR増 幅 した の ち,電 気 泳 動 お よび特 異 染 色 に よ って,こ の シ ン グル ロ ー カ スVNTR多 型 を簡 便 に分 析 す る方 法 が 開発 され て い る。 この 方 法 で は1種 類 の シ ン グル ロ ー カ スVNTRプ ロ ー ブ あ るい は プ ラ イ マ ー を用 い た場 合,検 出 され るDNAバ ン ドは 1な い し2本 で あ るが(両 親 か ら遺 伝 した繰 り返 し配 列 数 が 同 じで あ る同 型 接 合 体 の場 合 に は1本 のDNAバ ン ドの み が 検 出 さ れ る),各DNAバ ン ドの 出 現頻 度 は数%と 低 く,そ の異 型 接 合 率 も 極 めて 高 い た め,高 度 な個 体 識 別 が可 能 で あ る。 さ ら に,各 個 体 のDNAパ タ ー ン は,比 較 的 小 さ な 塩 基 配 列 数 の範 囲 に分 布 して い るた め,DNA 標 準 マ ー カー との対 比 に よっ て,各 対 立 遺 伝 子 を alleleNo.と し て 表 示 す る こ とが で き る。 し か し,1種 類 の シ ング ル ロ ー カ スVNTRプ ロ ー ブ を用 い て のDNA型 分 析 で は,各 個 体 に対 して 両 親 か ら そ れ ぞ れ1つ ず つ のVNTR遺 伝 子(1種 類 の 繰 り返 し配 列 数)が 遺 伝 され る た め,そ の DNA兄 弟 姉 妹 間 に お い て は 同 型 で あ る例 が 出 現 し,親 子 判 定 に は有 効 で あ るが,一 家 系 内 で は, 特 定 の個 体 を識 別 す る こ と はで き ない こ とが あ る。 この弊 害 を な くす た め に は少 な く ともヘ テ ロ接 合 率 を高 い 数 種 類 のVNTRを 組 み合 わ せ て,個 体 識 別 を行 う こ とが必 要 で あ る。 ウ マ の ミニ サ テ ライ トDNA多 型 に関 す る研 究 は,Flint,J.ら(1988)が ウ マ の ゲ ノ ムDNAの zeta globin遺 伝 子 を研 究 す る 中 で,14bpを1単 位 とす る繰 り返 しDNA配 列 を最 初 に報 告 した が, この縦 列 反 復 配 列 に は多 型 性 は見 い 出 だ され な か
195 っ た 。 そ の 後,今 日 ま でBuitkamp,J.ら(1991) お よ びKashi,Y.ら(1992)な ど の 多 くの 研 究 者 が 種 々 の プ ロ ー ブ を 用 い て ク ロ ー ニ ン グ を行 っ て い る が,現 在 ま で ウ マ の 個 体 識 別 に必 要 な 条 件 を 満 た し,実 用 化 で き る よ う な シ ン グ ル ロ ー カ ス の VNTRマ ー カ ー を 見 い 出 す ま で に 至 っ て い な い 。 次 に,遺 伝 子 非 コ ー ド 部 位 に お け る 多 型 性 DNAマ ー カ ー と し て 注 目 さ れ て い る の が,マ イ ク ロ サ テ ラ イ ト(microsatellite)に お け るDNA 多 型 マ ー カ ー で あ る 。 す な わ ち,こ のDNAマ ー カ ー は,GT,ATTあ る い はGATGな ど2-5塩 基 の 繰 り 返 し 配 列(短 鎖 縦 列 反 復 配 列:short tandem repeat : STR と称 さ れ て い る)が 核 ゲ ノ ムDNAば か りで な く,最 近 で は ミ ト コ ン ド リ ア DNAに お い て も 見 い だ さ れ て お り,特 に(CA) nの 繰 り返 し 配 列 は ゲ ノ ム 中 の50,000ヵ 所 に 存 在 す る と推 定 さ れ て い る。 ウ マ に お け るSTR多 型 は,Ellegrcn,H.ら (1992)に よ っ て 最 初 に報 告 され,そ の 多 型 性 の 検 出 は基 本 的 に はPCR増 幅 に よっ てDNAフ ラ グ メ ン トを得 た の ち,比 較 的 煩 雑 なRI標 識 法 に よ っ て 検 査 し て い る。 最 近,我 々 も こ のSTR多 型 に つ い て 独 自 に研 究 を進 め,新 た に非RI法 で あ る 蛍 光 標 識 プ ラ イ マ ー を 用 い たPCR増 幅 及 び DNAシ ー クエ ン サ ー 分 析 に よ る ウマ の個 体 識 別 の た め のSTR多 型 検 出法 を考 案 した 。 す な わ ち, この 方 法 は,各STRをPCR増 幅 す る た め の プ ラ イ マ ー対 の うち,片 方 の み の プ ライ マ ー の5'末 端 に リ ンカ ー ア ー ム付 きア ミダ イ ト試 薬 を縮 合 さ せ てFITCを 標 識 し,こ の蛍 光 標 識 プ ラ イ マ ー を 用 い てPCR増 幅 したDNAフ ラ グ メ ン ト(PCR 産 物)の サ イ ズ を,全 自動DNAシ ー ク エ ンサ ー を 用 い て 分 析 す る もの で あ る。 特 に,PCR時 に 蛍 光 プ ラ イ マ ー が対 合 し たDNAフ ラ グ メ ン トお よびM13DNAシ ー ク エ ンス ラダ ー マ ー カ ー,あ る い はallelicマー カ ー を 同 時 に,DNAシ ー ク エ ンス用 の変 性 ポ リア ル リル ア ミ ドゲ ル を用 い て電 気 泳 動 分 離 し,レ ー ザ ー に よ る蛍 光励 起 光 とし て 検 出 す るた め,図1に 示 す よ う にDNAフ ラ グ メ ン トのsizeを 正 確 に,か つ迅 速 に求 め る こ とが で きる。 現 在,ウ マ の マ イ ク ロ サ テ ラ イ ト(STR)に よ る多 型 性 マ ー カ ー と し て,GTの2塩 基 繰 り返 し 構造 を 有 す るHTG2,HTG3,HTG4,HTG5 お よ びHTG6な ど18種 の マ ー カ ー が 見 い だ さ れ て い る。 この う ち,HTG4お よ びHTG5は 対 立 遺 伝 子(allele)数 が 多 く,ま た 表2に 示 す よ う に各alleleの 出現 頻 度 は比 較 的 偏 りが な く,異 型 接 合 率 が 高 い こ とか ら,ウ マ の個 体 識 別 お よび親 子 判 定 のDNAマ ー カ ー として 極 め て 有 望 な もの と考 え られ る。 最 近,Bowling,A.ら(1993)は, ウマ の血 液 型 に よ る親 子 関係 不 一 致 例 に つ いて， ウマ の血 液 中 の 白血 球 と毛 根 鞘 細 胞 か ら抽 出 した DNAを 用 い て,こ のGTの2塩 基 繰 り返 し構 造 に よ るSTR分 析 を 行 い,こ の 不 一 致 の 原 因 が 血 液 キ メ ラ に よ る もの で あ る こ との証 明 に利 用 して い る。 こ の よ う に,2塩 基 繰 り返 し構 造 に よ る STR分 析 法 は利 用 性 の 高 いDNAマ ー カ ー で あ る が,DNAポ リ メ ラ ー ゼ の ス リ ッ ピ ン グ(ま た は ジ ャ ン ピ ン グ と も称 して い る)が 生 じや す く,主 バ ン ド以 外 に副 バ ン ド(シ ャ ドウバ ン ド)が 出 現 す る た め,DNA型 あ るい はDNAサ イ ズ を判 定 す る際 にや や 困難 な こ とが あ る な どの 欠 点 が あ る。 そ こで,こ の欠 点 を避 け るた め,3な い し4塩 基 の繰 り返 し配 列 を指 標 し たSTR分 析 法 を採 用 す る のが 得 策 で あ り,ま た個 体 識 別 力 を高 め るた め, 少 な く と も数 種 類 のSTRのDNAマ ー カ ー を組 み合 わ せ てDNA多 型 分 析 を行 う必 要 が あ る。 5.遺 伝 子 コ ー ド部 位 に お け る 多 型 性DNAマ ー カ ー の種 類 このDNAマ ー カ ー は,構 造 遺 伝 子,す な わ ち 遺 伝 子 コ ー ド(エ ク ソ ン)部 位 に お け る塩 基 置 換 多 型 を指 標 と したDNAマ ー カ一 で あ る。 こ の 構 造 遺 伝 子 内 の 塩 基 置 換 を 指 標 と し た DNAマ ー カ ー は,点 突 然 変 異 型 多 型 と多 塩 基 置 換 多 型 とが あ る。 点 突 然 変 異 型 多 型 は,Rando,A.ら'(1986)が ウ マ の β一 グ ロ ビ ン遺 伝 子 内 の1塩 基 置 換 に よ る RFLP分 析 を行 った よ うに,構 造 遺 伝 子 に つ い て の ゲ ノ ム解 析,特 に遺 伝 病 や先 天性 代 謝 異 常症 な ど各 種 の疾 患 に 関 与 す る遺 伝 子 研 究 に お い て,
DNA診 断 マ ー カ ー を 開 発 す る過 程 で 見 い だ さ れ る こ とが 多 い 。 一 般 的 に ゲ ノム 中 に は,DNA複 製 時 にお け る ミス な どに よ っ て1塩 基 の挿 入,あ る い は 欠 失 が500-1,000塩 基 に1ヵ 所 の 割 合 で 認 め られ て い る。 通 常 は これ ら のDNAマ ー カ ー は 個 体 に よ って あ る制 限 酵 素 確 認 部 位 に塩 基 置 換 が あ れ ば その 部 位 は,制 限 酵 素 で切 断 さ れ るか,ま た は切 断 さ れ な い,す な わ ち,DNA断 片 の 長 さ の 違 い(RFLP)と な っ て 検 出 さ れ る が,対 立 遺 伝 子 は2つ の み で あ り,ま た 遺 伝 子 頻 度 は0.5以 上 で あ るた め,ウ マ の 個 体 識 別 の た め の高 度 な 多 型 性 を示 すDNAマ ー カ ー と して は期 待 で き な い。 一 方,多 塩 基 置換 多 型 を 指 標 と したDNAマ ー カ ー は,血 液 型 抗 原 や 他 の 表 現 形 質,ま た は生 態 機 能 の発 現 ・調 節 に関 与 す る遺 伝 子 な どの 中 で発 見 さ れ て い る。 この う ち,特 に組 織 適 合 性 抗 原 (MHC)遺 伝 子 群 の 中 で 見 い だ され る多 塩 基 置 換 多 型 は ヒ トや 多 くの 動物 で研 究 され,個 体 識 別 用DNAマ ー カ ー とし て利 用 さ て い る。 ウ マ に お い て は,多 塩 基 置 換 多 型 を指 標 とし た DNAマ ー カ ー と して は,前 述 の組 織 適 合 性 抗 原 (MHC)遺 伝 子 群,す な わ ち ウ マ の 白 血 球 抗 原 (ELA)遺 伝 子 につ い て の 研 究 が 進 ん で い る。 初 期 に は4回 にわ た っ てELAシ ス テ ム を構 成 す る 抗 原 お よ び抗 体,な らび に これ らの 抗 原 を支 配 す る遺 伝 子 の 国際 比 較 同定 試 験 が行 わ れ た 。 その 結 果,特 に血 液 型 のAシ ス テ ム とELA-Aお よびB は接 近 した3つ のlocus上 に あ る こ と,ま たAシ ス テム とELA-Aは 強 い 連 鎖 関 係 に あ り,さ ら に ELA-wl3は ク ラ スII抗 原 で あ る こ とが 明 らか に な った 。 そ の後,Vaiman,M.ら(1986),Gluer in,G.ら(1987)お よ びHanni ,K.ら(1988)は, MHC遺 伝 子 解 析 の 最 も進 ん で い る ヒ トのHLA 抗 原 や マ ウ ス のH-2抗 原 遺 伝 子 を構 成 す る塩 基 配 列 が,他 の 動 物 のMHC遺 伝 子 の 塩 基 配 列 と 極 め て相 同性 が 高 い こ とに 注 目 し,HLAク ラ ス 1お よびII抗 原 遺 伝 子 を ク ロ ー ニ ング す るた め の プ ロー ブ と各種 の 制 限 酵 素 を用 い て サ ザ ンプ ロ ッ ト ・ハ イ ブ リダ イ ゼ ー シ ョ ン を行 い,RFLP解 析 に よ る ウマ のDNA多 型 解 析 を行 っ た が,個 体 識 別 に利 用 可 能 なELA抗 原 遺 伝 子 群 に 属 す る単 座 位 支 配 のDNAマ ー カー を見 い だ す こ とが で き な か った 。 一 方,Gyllensten,U.B.ら(1990)お よびSzalai, G.ら(1993)は,HLAク ラ スII抗 原遺 伝 子 で あ るDQβ 遺 伝 子 をPCR増 幅 す る プ ラ イ マ ー (GH28,GH29)を 作 製 し,ウ マ のDQβ 遺 伝 子 の 部 分 的 な ク ロ ーニ ング を行 っ て塩 基 配 列 を解 読 す る と同 時 に,塩 基 置 換 多 型 お よ びD(歩 偽 遺 伝 子 と考 え られ るDXBlocus領 域 の 塩 基 配 列 との 相 同 性 につ い て 検 討 した。 そ こで,我 々 の研 究 グ ル ー プ で は こ れ らの 情 報 を 基 に,新 た に ヒ トの HLAD()B遺 伝 子 の第2エ ク ソ ン部 位 を増 幅 す る プ ラ イ マ ー を合 成 し,ウ マ ゲ ノ ムDNAを 鋳 型 と し てPCR増 幅 を 行 っ た と こ ろ,ヒ トゲ ノ ム DNAと 同 様 に 約260bpのDNA断 片 が 増 幅 す る こ とが で きた 。 こ のPCR産 物 をベ ク タ ー に組 換 え て ス ク リー ニ ン グ を行 い,230bpの イ ンサ ー ト を有 す る ク ロー ン を得 た の ち,全 自動DNAシ ー ク エ ンサ ー を用 い た ジ デオ キ シ法 に よ っ て塩 基 配 列 を解 読 した と こ ろ,ヒ トのDQβ 遺 伝 子 で あ る DQ鎖DWI2遺 伝 子 と84%の 相 同性 を 示 す こ と が 明 らか とな っ た 。 また,こ のD(塑 遺 伝 子 の 塩 基 配 列 中 に は 多 くの 塩 基 置 換 部 位 が 認 め られ る こ とか ら,こ れ らの領 域 をPCR増 幅 さ せ た 産 物 に つ い てRF:LP多 型 解 析 を行 っ た と こ ろ,数 多 く のalleleが 検 出 さ れ,個 体 識 別 用 のDNAマ ー カ ー と して極 め て有 効 で あ る こ とが 判 った。 また, ウ マ の ク ラ スII遺 伝 子 で あ るDPお よびDR遺 伝 子 の塩 基 配 列 の解 読 も始 ま って お り,こ の 領 域 に お い て も塩 基 置 換 配 列 に よ る多 型 マ ー カ ー が 見 い だ され る可 能 性 が あ る。 これ らの多 塩 基 置 換 に よ るDNA多 型 検 出 法 と し て は,前 述 の よ うに サ ザ ンプ ロ ッ ト ・ハ イ ブ リ ダ イ ゼ イ シ ョ ン法 な い しPCR増 幅 法 を 用 い た RFLP解 析 に よっ てDNA型 と し て検 出 す る こ と が 可 能 で あ る が,PCR法 に よ るDNA増 幅 及 び ReverseDot-Blot法 を利 用 した 簡 単 な検 査 法,さ ら に 最 近 で は,一 本 鎖 高 次 構 造 多 型 解 析 法 (PCR-SSCP)も 用 い られ る よ う に な っ て き て い る。
197 6.お わ り に 以 上 の よ うに ウ マ の核 ゲ ノ ム にお け る遺 伝 子 非 コ ー ド部 位 お よび遺 伝 子 コー ド部 位 にお け る多 型 マ ー カ ー を中心 に概 説 した が,現 在 核DNAと は 異 な る も う1種 類 のDNA,す な わ ち ミ トコ ン ド リ アDNA(mtDNA)の 多 型 性 に つ い て も検 討 され て い る。特 に,我 々 の研 究 グル ー プ に よ っ て, ウ マmtDNA複 製 の 開 始 部 位 で あ るDル ー プ 領 域 の ク ロー ニ ン グ とシー クエ ン シ ン グが 行 わ れ, そ の 全 塩 基 配 列 が 解 読 され て い る。mtDNAは 母 性 遺 伝 し て い る た め,正 確 に は個 体 識 別 を 目的 と したDNAマ ー カ ー とは言 え な い が,母 子 判 定 に は重 要 な マ ー カ ー とな る。 こ の よ う に,ウ マ の 個 体 識 別 を 目 的 と し た DNA型 の研 究 は着 実 に進 ん で お り,近 い 将 来 に は従 来 の血 液 型 検 査 に 加 え て,DNA型 分 析 が 導 入 さ れ る こ とに な る もの と思 わ れ るが,こ れ らの 総 合 的 な検 査 に よっ て,正 確 で 信 頼 性 の 高 い ウマ の個 体 識 別 お よび親 子判 定 が 可 能 に な る もの と考 え られ る。
シ ン ポ ジ ウ ム
ウマの 品種成 立 の歴 史 と個 体 識 別
5.座 長 の総 括
東京農業大学 渡 邊 誠 喜 東京大学農学部 塩 田 邦 郎 競 走 馬 を 目的 と した ウ マ の育 種/繁 殖 の 長 い 歴 史 の 中 で血 統 は最 も重 要視 され て きた 。 最 近,競 走 馬 の生 産 数 の増 加 と国 際 交 流 が盛 ん にな った こ とか ら,血 統 登 録 は 国 際 的 な 事 業 に まで 発 展 し, 益 々 そ の 重 要性 が増 して きた 。 その 結 果,現 行 の 血 液 型 検 査 に よ る親 子 鑑 別 よ りも さ らに高 い精 度 が 要 求 さ れ る よ う に な っ て き た の で あ る。1987 年 に は国 際 血 統 書 委 員 会 よ りDNA解 析 に よ る個 体 識 別 の 方 法 の 検 討 が 要 請 され,現 在,世 界 各 国 で 遺 伝 子(DNA)に よ る個 体 識 別 方 法 の 導 入 に つ い て,新 た な方 法 の開 発 と整 備 が 行 わ れ る に至 った 。 今 回 の シ ン ポ ジ ウ ム で は,ウ マ の 品種 の成 立 に つ い て そ の歴 史 的 あ る い は民 族 学 的背 景,現 在 の 個 体 登 録 お よ び近 未 来 の解 析 技 術 に つ い て講 演 と 活 発 な討 論 が 行 わ れ た。 まつ,ウ マ の 品種 成 立 の歴 史 的背 景 につ い て八 戸 芳 夫 氏(北 海 道 大 学 名 誉 教 授)に 講 演 をお願 い した。 ウ マ の 品種 改 良 に は,人 的 要 素 と自然 要 素 (地理 的 条 件)と の2つ の 要 素 が 複 雑 に か ら み 合 って 主 要 な要 因 を な して い た。 自然 環 境 の厳 し さ が 有 力 な選 抜 とな り強 健 な 品種 が つ くられ た もの もあ るが,当 然 の こ とな が ら,人 的諸 条件 が ウマ の改 良 の方 向 と速 度 を規 定 して きた 。 これ に は経 済 的 ゆ と り と,材 料 の収 集,人 間 の 意 欲 な ど も含 まれ る。 ヨー ロ ッパ,ア メ リカ,ア ジ ア な ど,世 界 各 地 の ウマ の 改 良 や,ウ マ と人 間 の 分 化 を例 に, 日本 が ウ マ を改 良 す る に は今 が チ ャ ン スで あ る こ とが強 調 され た 。 その 手 段 として,遺 伝 子 工 学 的 手 法 を含 む 科 学 的 手 法 を取 り入 れ,雑 種 を つ か い な が ら,急 ぎ過 ぎず 確 実 に行 うべ き で あ る とい う 考 えが 紹 介 され た 。 確 か に,日 本 で は これ まで に これ ぞ とい う品 種 造 成 の実 績 は な か っ た が,こ れ らの 諸 条 件 を考 え る と,現 在 は 日本 に お け る品種 の 造 成 に とって 重 要 な時 期 で あ る。 現 在,日 本 で 行 わ れ て い る軽 種 馬 の血 統 登 録 と 外 貌 上 の 特 徴 に つ い て,毛 色,頭 部 と肢 部 の 白斑, 旋 毛,等 の特 徴 に つ い て下 飯 坂 隆氏(日 本 軽 種History of breeds development and individual identification in the horse : 5. Comments by chairmen
馬 登 録 協会)よ り詳 し く紹 介 され た 。 国 際 血 統 書 委 員 会 は個 体 識 別 の表 現 法 を可能 な か ぎ り統 一 す る方 向 が 望 ま し い と し,馬 体 部 位 の名 称,性,毛 色 お よ び,特 徴 記 載用 語 対 照 テ キ ス トと して 国 際 個 体 識 別 用 語 集 を発 行 して い る が,個 体 識 別 の た め の 特 徴 記 載 項 目 も国 毎 に多 少 異 な り,入 れ 墨, 烙 印,マ イ ク ロチ ッ プ な どの人 工 的手 段 も開発, 利 用 され て い る国 もあ る。 ウ マ の 国際 化 時 代 を考 え る と き,こ れ らの 国 際 的 統 一 が 強 くの ぞ まれ る。 軽 種 馬 の正 しい 血 統 の 維 持 は,競 走 馬 の改 良 と 競 馬 の公 正 確 保 に と り極 めて 重 要 な要 件 で あ る。 血 統 の正 否 の判 定 と個 体 識 別 を最 も合 理 的 に行 う 方 法 は現 在 の と こ ろ血 液型 を応 用 して 行 わ れ て い る。 血 液 型 検 査 の現 状 と問題 点 が 三 浦 信 義 氏(競 走 馬 理 化 学 研 究 所)に よ り紹 介 さ れ た 。 昭 和48 年 の 血 統 型 検 査 の 開 始 以 来,15万 頭 以 上 の 検 査 が 行 わ れ,か な り信 頼 性 の 高 い検 査 が 実施 され て き て い る。 現 在,日 本 で は血 統 登 録 は15シ ス テ ム38項 目 の 血 液 型 検 査 が 行 わ れ て い るが ,さ ら な る精 度 の 向 上 を 目標 に ウ マ の個 体 識 別 を 目的 と したDNA型 解 析 が 開発 さ れ つ つ あ る。 最 後 にDNA解 析 に つ い て ウ マDNA研 究 の最 前 線 で活 躍 して い る 向 山 明 孝 氏(JRA競 走 馬 総 合 研 究 所)か ら最 近 この 分 野 の 研 究 動 向 に つ い て 報 告 が あ っ た。 本 分 野 の 最 近 の 発 展 は め ざ ま し く, ミ ニ サ テ ラ イ トDNA,マ イ ク ロ サ テ ラ イ ト DNAの 利 用 が か な り進 み,同 研 究 所 で はES2000 と名 付 けた ミニ サ テ ライ トDNAの ク ロー ニ ング に成 功 し,ま た,マ イ ク ロサ テ ラ イ トDNAの 蛍 光 標 識 に よ る解 析 法 を世 界 に先 駆 け て 開発 した。 こ の ほ か,構 造 遺 伝 子 の 多 型 や ミ トコ ン ド リア DNAの 多 型 を利 用 した個 体 識 別 法 の 開 発 が 行 わ れ て い る様 子 が 紹 介 され た 。 シ ンポ ジ ウム の 講 演 でDNAに よ る親 子 鑑 別 の 実 用化 に大 き く近 づ い て い る こ とが 理 解 で きた 。 しか し,DNAに よ る鑑 定 方 法 が 確 立 して も,血 液 型 検 査 に よ る方 法 が 必 要 無 くな る こ とは な く, 今 後 は これ らの組 み 合 わ せ が 重 要 とな ろ う。 また, 個 体 識 別 の 手 技 が 血 液 型 判 定 や,DNA多 型 解 析 に よ っ て,よ り正 確 に 実施 され る よ う にな った と し て も,既 存 品種 の維 持 や新 しい 品種 の造 成 は登 録 事 業 の維 持 ・推 進 あ っ て の事 で あ り,そ れ が た め に は最 も簡 便 で,正 確 で あ る外 部 形 態 的特 徴 の 記 載 が 重 要 で あ る。DNAレ ベ ル で の 解 析 は単 に 血 統 登 録 の 手 段 とし て の み で な く,ウ マ の改 良 へ の利 用 の 可 能 性 につ い て の八 戸 氏 の講 演 で も語 ら れ た よ う に,将 来 の 様 々 な実 用 的 価 値 を含 ん で い るの で あ る。 そ の た め にDNAに よ る ウ マDNA 解 析 法 の 開発 は国 際 的 な登 録 基 準 として 各 国 で 開 発 が競 わ れ て い るの で あ る。
