博 士 論 文 概 要
論 文 題 目
細胞 - 基材界面の蛍光観察に特化した 温度応答性高分子超薄膜に関する研究
Ultra-thin temperature-responsive polymer layer for bioimaging
申 請 者
福守 一浩
Kazuhiro Fukumori
応用化学専攻 化学工学研究
２ ０ １ ０ 年 ４ 月
Ｎｏ.1 温 度 応 答 性 高 分 子 と し て 知 ら れ る p o l y (N- i s o p r o p y l a c r y l a m i d e ) ( P I PA A m )を 電 子 線 重 合 法 に よ り 固 定 化 し た 温 度 応 答 性 培 養 皿 は 3 2 ° C を 境 に 培 養 皿 表 面 が 高 温 側 で 疎 水 性 、 低 温 側 で 親 水 性 に 変 化 す る 。 こ の 性 質 を 利 用 す る こ と で 温 度 変 化 に よ り 培 養 皿 表 面 上 で 細 胞 の 接 着 ・ 脱 着 を 制 御 す る こ と が で き る 。 さ ら に 、 本 表 面 を 利 用 す る こ と で コ ン フ ル エ ン ト 状 態 ま で 培 養 し た 細 胞 を シ ー ト 状 で 回 収 す る こ と が 可 能 で あ る 。 近 年 の 報 告 で は 、 こ れ ら 細 胞 の 接 着 ・ 脱 着 現 象 は ポ リ ス チ レ ン 製 組 織 培 養 皿( Ti s s u e - C u l t u r e - P o l y s t y r e n e : T C P S )上 に 固 定 化 さ れ た ポ リ マ ー 層 の 厚 み が 約 1 5 n m の 超 薄 膜 の 場 合 に の み 観 察 さ れ 、 そ の 厚 み が 約 3 0 n m 程 度 ま で 厚 く な る と 細 胞 の 接 着 性 が 著 し く 低 下 す る こ と が 明 ら か に な っ て い る 。こ の 違 い は 、 疎 水 性 基 材 で あ る T C P S に よ る グ ラ フ ト P I PA A m 鎖 に 対 す る 脱 水 和 の 促 進 が 寄 与 し て い る 。 す な わ ち 、 膜 厚 が 薄 い 1 5 n m の P I PA A m 固 定 化 表 面 は よ り 疎 水 性 を 示 す が 、 こ れ よ り も 厚 い 3 0 n m で は 1 5 n m の と き の そ れ よ り も 水 和 し て い る と 考 え ら れ 、超 薄 膜 の 固 定 化 ゲ ル の 物 性 は 基 材 表 面 物 性 の 影 響 を 受 け る こ と が 推 察 さ れ る 。 一 般 的 に 、 細 胞 接 着 、 増 殖 、 生 理 的 機 能 は 材 料 の 表 面 物 性 に よ り 影 響 を 受 け る こ と が 知 ら れ て い る 。こ れ は 材 料 表 面 に 吸 着 し た 細 胞 外 マ ト リ ッ ク ス( E x t r a C e l l u l a r M a t r i x : E C M )等 の タ ン パ ク 質 と イ ン テ グ リ ン 等 の 細 胞 膜 表 層 の E C M 受 容 体 が 結 合 す る と 、 イ ン テ グ リ ン の ク ラ ス タ リ ン グ や 受 容 体 か ら の 接 着 に よ る 細 胞 内 シ グ ナ ル の 伝 達(受 容 体 活 性 化 に よ る シ グ ナ ル 伝 達 な ど) に よ っ て 引 き 起 こ さ れ る 。 従 っ て 、 材 料 表 面 で の タ ン パ ク 質 吸 着 お よ び 細 胞 接 着 現 象 を 捕 ら え る 事 は 、 細 胞 接 着 に よ っ て 引 き 起 こ さ れ る 細 胞 機 能 変 化 の 解 析 、 解 明 に お い て 極 め て 重 要 で あ る 。
本 研 究 で は 、 界 面 近 傍 の み を 高 感 度 に 観 察 で き る 全 反 射 型 蛍 光 顕 微 鏡( To t a l I n t e r n a l R e f l e c t i o n F l u o r e s c e n c e M i c r o s c o p y : T I R F M )に 着 目 し 、T I R F M に よ る 細 胞 接 ・ 脱 着 時 の 測 定 が 可 能 な 温 度 応 答 性 ガ ラ ス 表 面 の 作 製 と 、 そ の 表 面 物 性 が 培 養 細 胞 に あ た え る 影 響 に つ い て の 検 討 を 行 っ た 。
本 論 文 は 、 以 下 の 4 章 よ り 構 成 さ れ る 。
第 １ 章 は 、温 度 応 答 性 高 分 子 ゲ ル の 特 性 と そ れ を 固 定 化 し た 表 面 の 応 用 を 既 往 研 究 か ら 振 り 返 り 、温 度 応 答 性 表 面 と 培 養 細 胞 と の 相 互 作 用 に つ い て 現 状 で 未 解 明 な 点 を 明 ら か に し た 。 次 い で 、 本 論 文 の 目 的 と 意 義 を 議 論 し た 。
第 2 章 で は 、 電 子 線 重 合 法 に よ り 種 々 の モ ノ マ ー 濃 度 で 温 度 応 答 性 高 分 子 を ガ ラ ス 表 面 に 固 定 化 し 、 そ の 表 面 特 性 が 培 養 細 胞 の 接 ・ 脱 着 に 与 え る 影 響 を 検 討 し た 。X 線 光 電 子 分 光 法 に よ り C , O , N , S i の 元 素 組 成 比 を 測 定 し た と こ ろ 、作 製 し た 温 度 応 答 性 表 面 の 元 素 組 成 比 は モ ノ マ ー の 構 造 か ら 計 算 さ れ る 理 論 値 と 精 度 よ く 一 致 し 、ガ ラ ス 表 面 上 に P I PA A m が 固 定 化 さ れ た こ と が 確 認 さ れ た 。次 に ガ ラ ス 表 面 上 に 固 定 化 し た P I PA A m 量 を 、AT R / F T- I R を 用 い て 定 量 し た と こ ろ 、仕 込
み モ ノ マ ー 濃 度 の 増 加 に 従 い ゆ る や か な 増 加 傾 向 を 示 し 、5 か ら 5 0 w t %仕 込 み の モ ノ マ ー 濃 度 に た い し て 、 そ れ ぞ れ 0 . 8 4 か ら 1 . 4 9 µ g / c m2 の 値 と な っ た 。 ま た 固 定 化 さ れ た ポ リ マ ー 膜 厚 を 測 定 す る た め 、 ポ リ マ ー 層 を U V エ キ シ マ レ ー ザ ー で 部 分 蒸 散 さ せ そ の 断 面 を 原 子 間 力 顕 微 鏡( A t o m i c F o r c e M i c r o s c o p y : A F M )で 観 察 し た 。そ の 結 果 、仕 込 み モ ノ マ ー 濃 度 の 増 加 に 従 い ポ リ マ ー 膜 厚 は 3 . 5 か ら 9 . 6 n m の 範 囲 で 増 加 す る こ と が 確 認 さ れ た 。 こ の 結 果 よ り 、 仕 込 み モ ノ マ ー 濃 度 を 変 化 さ せ る こ と で 、P I PA A m 固 定 化 層 の 厚 み を ナ ノ メ ー ト ル オ ー ダ ー で 制 御 で き る こ と を 確 認 し た 。つ い で 、こ れ ら の 表 面 の 2 0 ° C お よ び 3 7 ° C で の 水 に 対 す る 濡 れ 性 を 静 的 接 触 角 法 に よ り 評 価 し た 。そ の 結 果 、す べ て の P I PA A m 固 定 化 ガ ラ ス 表 面 で 、 高 温 側 で は 疎 水 性 を 示 し 、 低 温 側 で は 親 水 性 を 示 す 温 度 応 答 性 の 表 面 で あ る こ と が 確 認 さ れ た 。 ま た 、 モ ノ マ ー 濃 度 の 増 加 に と も な い 表 面 が よ り 親 水 性 に 変 化 し た 。 こ れ は 、 ポ リ マ ー の 厚 み が 増 加 す る こ と で 、 ポ リ マ ー 表 層 部 の 高 分 子 鎖 の 分 子 運 動 性 に 対 す る 基 材 物 性 に よ る 抑 制 が 小 さ く な る た め 、 そ の 結 果 、 高 分 子 鎖 の 水 和 が 促 進 さ れ 、 親 水 的 な 表 面 に な っ た た め と 考 え ら れ る 。
続 い て 、作 製 し た P I PA A m 固 定 化 ガ ラ ス の 細 胞 接 着 性 お よ び 脱 着 に つ い て ウ シ 頚 動 脈 由 来 内 皮 細 胞 を 用 い て 評 価 を 行 っ た 。 そ の 結 果 、 ポ リ マ ー 膜 厚 の 一 番 薄 い 3 . 5 n m の 表 面 が 最 も 接 着 性 が 高 く 、膜 厚 の 増 加 に と も な い 細 胞 の 接 着 性 が 低 下 し た 。 ま た 、 膜 厚 7 . 4 n m 以 上 の P I PA A m 固 定 化 表 面 で は 細 胞 が 接 着 し な か っ た 。 こ の 結 果 は 、 ポ リ マ ー 膜 厚 の 増 加 に と も な う 表 面 の 親 水 性 化 の 結 果 と 傾 向 が 一 致 し て い る 。 つ ま り 、 水 中(培 地 中)の P I PA A m 固 定 化 層 は 相 転 移 温 度 以 上( 3 7 ° C )で も 脱 水 和 し て い る が 、固 定 化 層 の 厚 み が 増 加 す る に 従 い 高 分 子 鎖 の 水 和 が 促 進 し 、 細 胞 接 着 を 抑 制 す る 表 面 と な っ た 。ま た 、低 温 処 理 に よ り P I PA A m を 固 定 化 し た ガ ラ ス 表 面 か ら 1 時 間 以 内 に ほ ぼ 全 て の 細 胞 が 脱 着 し た 。
こ れ ら の 結 果 か ら 、 温 度 変 化 に よ り 培 養 細 胞 の 接 ・ 脱 着 の 制 御 が 可 能 な 温 度 応 答 性 表 面 を 作 製 す る た め に は 、4 n m 以 下 の 超 薄 膜 P I PA A m 層 を 構 築 す る こ と が 必 要 で あ る こ と が 明 ら か に な っ た 。
第 3 章 で は 、 温 度 応 答 性 高 分 子 薄 膜 表 面 の 水 和 状 態 の 解 析 と 細 胞 接 着 タ ン パ ク の 吸 着 挙 動 に つ い て 検 討 を 行 っ た 。 乾 燥 時 に お い て 3 . 3 お よ び 8 . 8 n m の 2 種 類 の ポ リ マ ー 膜 厚 の P I PA A m 固 定 化 表 面 に U V エ キ シ マ レ ー ザ ー を 照 射 し 、微 細 加 工 を 行 っ た 。 次 に A F M を 用 い て 2 5 ° C お よ び 3 7 ° C の 条 件 で 微 細 加 工 部 位 の 水 中 測 定 を 行 っ た 。 そ の 結 果 、 ポ リ マ ー 膜 厚 3 . 3 n m の 表 面 は 6 . 0 n m ( 3 7 ° C )か ら 8 . 0 n m ( 2 0 ° C )と 温 度 変 化 に と も な い ポ リ マ ー 層 が 膨 潤 し た の に た い し て 、 膜 厚 8 . 8 n m の 表 面 で は 、1 2 . 9 n m ( 3 7 ° C )か ら 2 5 . 4 n m ( 2 0 ° C )と よ り 大 き な 厚 み の 変 化 が 観 察 さ れ た 。 ま た 3 7 ° C に お い て 微 小 領 域( 3 × 3 µ m )の 表 面 形 状 を 測 定 し た と こ ろ 、 P I PA A m 表 面 の 脱 水 和 に よ る マ ッ シ ュ ル ー ム 状 の 凝 集 が 確 認 さ れ 、 そ の 大 き さ は 膜 厚 3 . 3 n mの 表 面 で 5 0 n m 程 度 だ っ た の に 対 し 、膜 厚 8 . 8 n mの 表 面 で は 1 0 0 n m
Ｎｏ.3 程 度 だ っ た こ と か ら 、 膜 厚 の 薄 い 表 面 で よ り 脱 水 和 が 促 進 さ れ て い る こ と が 確 認 さ れ た 。 次 に 細 胞 接 着 タ ン パ ク 質 で あ る フ ィ ブ ロ ネ ク チ ン を 、 上 記 の 2 種 類 の 表 面 に 3 7 ° C で 2 4 時 間 反 応 さ せ そ の 吸 着 量 を 定 量 し た と こ ろ 、そ れ ぞ れ 膜 厚 3 . 3 n m の 表 面 で 3 3 0 n g / c m2 (膜 厚 3 . 3 n m )と 膜 厚 8 . 8 n m の 表 面 で 1 3 0 n g / c m2と 大 き く 異 な る 値 を 示 し た 。 ま た 、 フ ィ ブ ロ ネ ク チ ン 吸 着 後 の 表 面 を A F M で 測 定 し た 結 果 、 そ の 吸 着 の 形 態 に 差 が 見 ら れ た 。 膜 厚 3 . 3 n m の 表 面 で は 繊 維 状 の 凝 集 が 見 ら れ た の に 対 し 、 膜 厚 8 . 8 n m の 表 面 で は 球 状 あ る い は 環 状 の 形 態 が 見 ら れ た 。 こ れ ら の 結 果 か ら 、3 7 ° C に お い て 膜 厚 8 . 8 n m の 表 面 は 膜 厚 3 . 3 n m の 表 面 と 比 較 し て 水 和 が 促 進 さ れ て お り 、 細 胞 接 着 タ ン パ ク と の 相 互 作 用 が 弱 い こ と が 確 認 さ れ た 。そ の た め 、相 転 移 温 度 以 上 の 3 7 ° C に お い て も 膜 厚 8 . 8 n m の 表 面 は 細 胞 非 接 着 性 を 示 す と 考 え ら れ る 。 さ ら に 、 表 面 に 吸 着 し た フ ィ ブ ロ ネ ク チ ン の 吸 着 形 状 も 異 な っ た こ と か ら 、R D G 部 位 な ど の モ チ ー フ が 隠 れ た 立 体 構 造 に な っ て い る 可 能 性 が 示 唆 さ れ た 。
第 4 章 は 、 温 度 応 答 性 高 分 子 表 面 か ら 低 温 処 理 に よ り 剥 離 す る 培 養 細 胞 の 膜 タ ン パ ク の 挙 動 を T I R F M に よ り 測 定 し 、 タ ン パ ク 質 分 解 酵 素 で あ る ト リ プ シ ン を 用 い た 場 合 と の 違 い を 検 討 し た 。細 胞 膜 貫 通 タ ン パ ク で あ る イ ン テ グ リ ンβ1 を 蛍 光 染 色 し た 正 常 ヒ ト 臍 帯 静 脈 内 皮 細 胞 を P I PA A m 固 定 化 ガ ラ ス 表 面 に 播 種 し 、低 温 処 理 お よ び 0 . 1 %ト リ プ シ ン に よ る 2 種 類 の 剥 離 方 法 を T I R F M に よ り 測 定 し た 。 そ の 結 果 、 低 温 処 理 に よ り 方 法 で は 、 接 着 細 胞 が 約 5 分 で 伸 展 状 態 か ら 球 状 に 変 化 し 、 部 分 的 に イ ン テ グ リ ン を 基 材 表 面 に 残 し な が ら 剥 離 し た 。 ま た 、 一 般 に イ ン テ グ リ ン の ク ラ ス タ ー は 、細 胞 の 伸 展 、移 動 に お い て 0 . 1 - 0 . 5 µ m / m i n 程 度 の 速 度 で 移 動 す る こ と が 報 告 さ れ て い る 。 今 回 、 細 胞 の 脱 着 に と も な う ク ラ ス タ ー の 移 動 は 、約 1 5 秒 で 数 µ m 移 動 す る 非 常 に 変 化 の 大 き な も の だ っ た 。一 方 、ト リ プ シ ン 処 理 に よ る 細 胞 の 剥 離 過 程 で は 基 材 表 面 に 大 部 分 の イ ン テ グ リ ン 分 子 が 残 存 す る 結 果 が 観 察 さ れ た 。 こ れ は ト リ プ シ ン 処 理 に よ る 細 胞 の 剥 離 過 程 で 、 イ ン テ グ リ ン 分 子 が 切 断 さ れ た た め と 考 え ら れ る 。 以 上 の 結 果 か ら 、 作 製 し た 温 度 応 答 性 表 面 上 の 細 胞 膜 タ ン パ ク の 挙 動 精 度 よ く 測 定 す る こ と に 成 功 し た 。
以 上 の よ う に 、 本 論 文 で は 、 電 子 線 重 合 法 を 用 い て ガ ラ ス 表 面 上 に 温 度 応 答 性 超 薄 膜 を 構 築 し 、そ の 表 面 物 性 が 培 養 細 胞 に 与 え る 影 響 に つ い て 詳 細 に 検 討 し た 。 ま た 、 作 製 し た 表 面 を 用 い て 、 細 胞 膜 タ ン パ ク の 蛍 光 イ メ ー ジ ン グ に よ り 、 細 胞 剥 離 法 の 違 い に よ る 膜 タ ン パ ク へ の 影 響 を 評 価 し た 。T I R F M に よ る 観 察 と 、表 面 物 性 の 評 価 を 組 み 合 わ せ る こ と で 、 種 々 の 培 養 細 胞 に 合 わ せ た 温 度 応 答 性 表 面 の 精 密 設 計 に 利 用 で き る と 期 待 さ れ る 。
早稲田大学 博士（工学） 学位申請 研究業績書
氏 名 福守 一浩 印
（２０１０年３月１９日現在）
種 類 別 題名、 発表・発行掲載誌名、 発表・発行年月、 連名者（申請者含む）
1. 論文
○（報文）
○（報文）
2. 講演
1. Temperature-responsive glass coverslips with an ultra thin poly(N-isopropyla- crylamide) layer, Acta Biomater., 5, 470-476, (2009), Kazuhiro Fukumori, Yoshikatsu Akiyama, Jun Kobayashi, Masayuki Yamato, Kiyotaka Sakai, Teruo Okano.
2. Characterization of ultra-thin temperature-responsive polymer layer and its polymer thickness dependency on cell attachment/detachment properties, Macromol. Biosci., in press, Kazuhiro Fukumori, Yoshikatsu Akiyama, Yoshikazu Kumashiro, Jun Kobayashi, Masayuki Yamato, Kiyotaka Sakai, Teruo Okano.
1. 温度応答性高分子薄膜ゲルの膨潤、収縮の物性評価, 第 58 回高分子討論会, 熊本, 2009年9月, 福守一浩, 秋山義勝, 熊代善一, 小林純, 大和雅之, 酒井清孝, 岡野光夫. 2. 原子間力顕微鏡を用いた温度応答性高分子薄膜の物性評価, 第 58 回高分子学会年次 大会, 神戸, 2009 年 5 月, 福守一浩, 熊代善一, 秋山義勝, 小林純, 大和雅之, 酒井清 孝, 岡野光夫.
3. Observation of cell detachment behavior from temperature responsive polymer grafted surfaces using total internal reflection fluorescence microscopy, 8th International Symposium on Frontiers in Biomedical Polymers, Mishima, 2009, May, Kazuhiro Fukumori, Yoshikatsu Akiyama, Yoshikazu Kumashiro, Jun Kobayashi, Masayuki Yamato, Kiyotaka Sakai, Teruo Okano.
4. バイオイメージングを指向した温度応答性ガラス表面の作製, 日本医工学治療学会 第25回学術大会, 大阪, 2009年4月, 福守一浩, 秋山義勝, 小林純, 大和雅之, 酒井清 孝, 岡野光夫.
5. 温度応答性超薄膜ゲル表面の膜厚依存による細胞接着性の変化, 第 3 回バイオ・ナノ テクフォーラムシンポジウム, 東京, 2009年3月, 福守一浩, 熊代善一, 秋山義勝, 小 林純, 大和雅之, 酒井清孝, 岡野光夫.
6. Correlation between cell detachment kinetics and temperature-responsive polymer relaxation upon temperature reduction monitored by atomic force microscopy, 14th International Symposium on Recent Advances in Drug Delivery Systems, Salt Lake City, UT, USA, 2009, February, Yoshikazu Kumashiro, Kazuhiro Fukumori, Yoshikatsu Akiyama, Masayuki Yamato, Kiyotaka Sakai, Teruo Okano.
Ｎｏ.2 早稲田大学 博士（工学） 学位申請 研究業績書
種 類 別 題名、 発表・発行掲載誌名、 発表・発行年月、 連名者（申請者含む）
2. 講演 7. Cells adhesion/detachment control onto temperature-responsive glass coverslips modified with ultra thin poly(N-isopropylacrylamide) layer and its application of cell detachment process observed by TIRF microscopy, 14th International Symposium on Recent Advances in Drug Delivery Systems, Salt Lake City, UT, USA, 2009, February, Yoshikatsu Akiyama, Kazuhiro Fukumori, Masayuki Yamato, Kiyotaka Sakai, Teruo Okano.
8. 温度応答性高分子膜上における細胞接着性の評価, 第57回高分子討論会, 大阪, 2008 年9月, 熊代善一, 福守一浩, 秋山義勝, 大和雅之, 酒井清孝, 岡野光夫.
9. 温度応答性表面の細胞接着特性と表面近傍に特化した細胞剥離挙動への応用, 第 57 回高分子討論会, 大阪, 2008年9月, 福守一浩, 秋山義勝, 小林純, 大和雅之, 酒井清 孝, 岡野光夫.
10. 温度応答性ガラス表面の作製とバイオイメージングへの応用, 第 72回化学工学会秋 季大会, 仙台, 2008年9月, 福守一浩, 秋山義勝, 小林純, 大和雅之, 酒井清孝, 岡野 光夫.
11. 温度応答性ガラス表面を構築した細胞培養基材の開発, 日本医工学治療学会 第 24 回学術大会, 幕張, 2008年4月, 福守一浩, 秋山義勝, 大和雅之, 酒井清孝, 岡野光夫. 12. 温度応答性ガラス表面を構築した細胞培養基材の開発, 第 10 回日本組織工学会, 東
京, 2007年11月, 福守一浩, 秋山義勝, 大和雅之, 酒井清孝, 岡野光夫.
13. 温度応答性ナノグラフト層を構築したガラス表面の作製と細胞培養への応用, 第 56 回高分子学会年次大会, 京都, 2007 年 5 月, 福守一浩, 秋山義勝, 菊地明彦, 大和雅 之, 酒井清孝, 岡野光夫.
14. Control of cell detachment on poly(N-isopropylacrylamide) grafted glass surfaces, Society For Biomaterials 2007 Annual Meeting, Chicago, IL , USA, 2007, April, Kazuhiro Fukumori, Shitaroh Iwanaga, Yoshikatsu Akiyama, Akihiko Kikuchi, Masayuki Yamato, Kiyotaka Sakai, Teruo Okano.
15. 温度応答性ナノグラフト層を構築したガラス表面の作製と細胞培養への応用, 第 28 回日本バイオマテリアル学会大会, 東京, 2006年11月, 福守一浩, 岩永進太郎, 秋山 義勝, 菊地明彦, 大和雅之, 酒井清孝, 岡野光夫.
16. Control of cell detachment on poly(N-isopropylacrylamide) grafted glass surfaces, 2006 International Symposium on Micro-NanoMechatronics and Human Science, The Eleventh Symposium “Micro-NanoMechatronics fro Information-Based Society”, Nagoya, Japan, 2006, November, Kazuhiro Fukumori, Shitaroh Iwanaga, Yoshikatsu Akiyama, Akihiko Kikuchi, Masayuki Yamato, Kiyotaka Sakai, Teruo Okano.
17. ガラス表面での温度応答性表面の作製と TIRFM による細胞剥離観察への応用, 第 55回高分子討論会, 富山, 2006年9月, 福守一浩, 岩永進太郎, 秋山義勝, 菊地明彦, 大和雅之, 酒井清孝, 岡野光夫.
種 類 別 題名、 発表・発行掲載誌名、 発表・発行年月、 連名者（申請者含む）
2. 講演 18. 温度応答性ナノグラフト層の厚みと細胞接着への影響, 第35回医用高分子シンポジ ウム, 東京, 2006年8月, 福守一浩, 岩永進太郎, 秋山義勝, 菊地明彦, 大和雅之, 酒 井清孝, 岡野光夫.
19. 温度応答性ナノグラフト層を構築したガラス表面の作製, 第 55回高分子学会年次大 会, 名古屋, 2006年5月, 福守一浩, 岩永進太郎, 秋山義勝, 菊地明彦, 大和雅之, 酒 井清孝, 岡野光夫.
20. 温度応答性ナノグラフト層の厚みと細胞接着への影響, 第15回インテリジェント材 料/システムシンポジウム, 東京, 2006年3月, 福守一浩, 岩永進太郎, 秋山義勝, 菊 地明彦, 大和雅之, 酒井清孝, 岡野光夫.
21. 温度応答性ナノグラフトゲルを構築したガラス表面の作製と細胞培養への応用, 第 54回高分子討論会, 山形, 2005年9月, 福守一浩, 岩永進太郎, 秋山義勝, 菊地明彦, 大和雅之, 酒井清孝, 岡野光夫.
22. 電子線照射を用いた温度応答性ガラス表面の作製と物性評価, 第 54回高分子学会年 次大会, 横浜, 2005年 5月, 福守一浩, 岩永進太郎, 秋山義勝, 菊地明彦, 大和雅之, 酒井清孝, 岡野光夫.
