免疫組織 究 電顕的 学的研 下垂 体 腺脛 濾胞 細胞 光顕的

正 誤 表

金沢大学 十 全 医学 会 雑誌 第¹0 0巻 第6号 1055−^{1 0 6 9 く1 9911}

下 垂体腺 脛^{に お} け る濾胞星細 胞^の光 顕的^， 電 顕 的な ら び^に免疫組織^{学 的研}究

金沢大学 医 学 部脳 神 経 外 科学 講 座 く主任^こ山 下 純 宏教 授1

立 花 修

く平成3 年10 月 8 日受 付う

10 5 5

p^．1 0 5 6

F ig^．1．

誤

F i_g^．1^． Do uble⁻im m u n o e n zym ^atic labell ing of the n o r m al ade n ohy pophysis^． So m e follic ulo⁻Steuate

くF SI c eus a r e stained with 地 主i 軋J 敷

a cid ic D r Otein くG F A P l a ntibodie s a s sho w n b_y

へ

rしへノ W もノーハ 仙 へ 醐

dia min obe n zid ine mA B l くbr o w n stainin_gl， Wh il_e

othe r F S c ells ar eim m u n o stained with a nti⁻ke r atin

a ntibtxlie s a s sho w n b_y 4⁻Chlo r o⁻1⁻n aPhthol く^{b lu e−Violet stain in}gl^{． X}3 0 0．

正

F i_g．1． Do uble⁻ir n m u n o e n zym atic labelling of the nor m al aden ohy pophysis． So m e fo11ic ulo⁻Stellate

く^{F S}I ^{cells a re stain ed wit h a nti}−^{ke r atin a ntibodie s}

a s sho w n b_y dia min obe n zi din e のA Bl くbro w n Stainingl， W hile othe rF S c ells a r e im rn u n o stain ed

w

ith 員 地 i^室如阜¹無_．^{芝へ異質蕪}えJ，．無望，^{a ntibodie s a s}

sho^wn b_y 4⁻Chlo r o−¹−^{n a}Phtholく^{b lu e}−^{vi01etstainingl．}

X3 0 0．

p^，1t ほ8 F ig ^．3^，

誤

F i_g．3． Do uble壷一 mu n O e n Z叩1 atic labe11h−g Of a n o n−^{fu n ctio n m} g pituita ry ade n o ma． T he r e a r e gr o s sly t^{w o} t 与．p^{e S O}f F S c ells こ O n e is po sitiv efo r a nti⁻G F A P a ntibod ie s a s sho w n b_y D A B tbr o wn stainging， S m all a r r o w

he ad l ^wh ile the othe ris p^{o s}it iv efo r a nti⁻ke r at

．ⁱⁿ．^{aJltibodie s a s sho w n by}

4−^{Ch lo r o−1−n a}Phthol ぐb lu e−^{Violet stain ing，1a rge a n．o w he ad l． A fe w F S}

c e11s くa r r o wl a r e do ub le stained wi th both a nti⁻G F A P a nt ibcd i^{e s a 皿}d

a nti−^{ke r atin a ntibcdie s． X3 0 0．}

正

F ig^．3^． D^{o u}ble⁻i^{m m} u n o e n zym atic labelling of a n o n⁻functio ning pitui^tary ade n o m a． T he r e a r e gr o s sly tw o t y p^{e s o}f F S c ells 二 O n e is po sitiv e fo r a nti−^{kノへJe r a}伸^tin一^{a ntibodie s a s sho w n by D A B くbr o w n stainging， S m all a r r o w}

he adl ^{while the othe ris} po sitiv e fo r a nti⁻G F A P a ntibod ie s a s sho w n by 4⁻Chlo r o⁻トn aphtholく^{blu e−vi0王et stainirl}g，1a rge a rr o w he adl^． A fe w F S

c ells くa r r o wl a r e do ub le stain ed wi th both anti⁻G F A P a ntibodi^{e s a n}d

a nti⁻ke r atin a ntibodie s^． X3 0 0^．

金沢大 学十 全 医学 会 雑誌 第1 00巻 第6号 1 05 5 ⁻1 0 6 9く1 9帥

下垂体腺腰 ^{に お} け^る濾胞星細胞^の光顕 的，

電 顕 的^{な ら びに}免疫組織学的研究

金 沢 大学 医学 部脳 神 経 外 科 学 講座 く主 任^こ山下 純 宏 教 授1

立 花 修

く平 成3年1 0月8 日受付コ

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濾 胞星細 胞 くfonic ulo⁻Ste11ate c ellンは下垂体 前 葉^にお け る 6 番 目の細 胞と し て ， 1 9 5 7年，

F 訂qt血訂 によ り発 見さ れ た が， そ の由 来や機能に つ い ては不 明な点が多^{い ．}本 論 文^{に お い}て は， ヒト の 正常 下 垂体5 例と下垂体 腺 腰1 0 2例を対 象と し て， 光 顕 的， 電 顕 的な ら びに免疫 組 織 化 学 的な検 索を行

い_， 濾 胞星 細 胞の由来や機 能^{に つ い て}考 察し た0 免疫 組 織化 学 的検 索には S^．1 00 蛋 白や各 種^の中 間 径

フ ィラ メ^ント蛋 白^に対す る抗体を 用^いた． その結 果， 正常の下垂体 前 葉^において は， 滞 胞 鼻紙 胞は全 細 胞^の2 ^旬 5 ％を占め た^{． 一}方，下 垂体 腺 腰^{に お い}て は，1 0 2例 中2 2例^に濾 胞 星細 胞が み ら れ た が， うち 4 例で は濾胞星細 胞が全 細 胞^{の2 0}％ 以上 を占め ていた． 濾 胞 星細 胞は， S⁻1 00 蛋 白や gli al fib ri ua ry a cid ic pr oteinくG F A PJ や ケ ラ チン に対す る抗 体^に陽 性を 示 し た が，特^に抗^{ビ メン}チン抗体^に最も強^い反 応を 示 し た． G F A P と ケ ラ チン に対す る免^疫2 重 染 色^を行う と， 源 胞星細 胞は抗 G F A P 抗体^に陽 性の群と，

抗ケ ラ チ^ン抗 体^に陽 性の群^に大 別さ れ た^． 電 顕 的^には， 濾胞星細 胞は 星型の胞 体と^， 楕 円形の核を持 ち， 胞 体 内^には多数のフリ ^ー リ ボ ソ ^{ー ム}と中間 径フ ィラ メ^ントが分 布し て^いた が， 分泌 顆 粒は み ら れ な かっ た． 濾 胞 星 細 胞は 3 ^〆− 7偶^の細 胞が接 着し^， 濾 胞を と り囲み^， 濾 胞^に向かい多数の微 絨毛と少 数の 繊毛 を出し て^いた^． 濾 胞は主と し て顆 粒状ないし無 定 形の物 質であり，

一 部に は壊 死 細 胞^の残淀も み ら れ た^． 隣接し た濾 胞 星 細 胞 間に は， デス モゾ^{ー ム}や接 着 帯^{な ど の}各 種^の細 胞 間 接 着 装 置^が発 達し てい た^． ま た^， 濾 胞 星 細 胞と腺 腰細 胞との間には， ヘ ミ デ^{ス モ} ゾ^{ー ム}に似た接 着 装置^{が み ら れ た． こ の接 着} 装置は従来 記 載さ れ ていな^いが， り 接着斑 は濾 胞星細 胞側の み^に存 在す る， 2I 細 胞 内 線維^は凍 着斑 に向^{か い}平 行^に集 束す る， 3ン 濾胞星細 胞と腺 腰 細 胞の細 胞 膜は約2 5n m の間 隔で 互^{い に}平 行に走 行 し， そ の間 隙は均^一 な物 質^で満た さ れ ている， こと な ど が特 徴 的^であ^った ^． 以 上 よ り， 濾 胞星細 胞^に は， 抗 G F A P 抗体に陽性で神 経 外 胚 葉 由 来の も^のと， 抗ケ ラ チン抗 体^に陽性で口腔粘 膜 由 来の も の の 両者が存在す る^こと が推 定さ れ た^． ま た， 濾 胞星細 胞は壊 死^に陥^っ た腺 腰 細胞の細 胞 残 溶を隔離して い る も の と推 定さ れ た^．

Key ^{w or}ds fo11ic ulo⁻Stellate c e11，im m u n ohistc x Ih emi stry， pituita ry ^ade n o m a，

i

nte r m ediate fila m e nt

下垂体 前 葉^{には 6} 種 類^の細胞が存 在し， そのう ち 5 細 胞と は著し く形 態 学 的特 徴を異にす る^． この細 胞は 種類^は分泌 顆粒を有す る腺 細胞で あ る^こと は よ く知ら 1 95 7年， Fa rq^uha r によ り ラットの下垂体 前 葉^にお^い れ て^いる^． 第6 番 目の細 胞は， 膠 質 様 物 質を含む濾 胞 て発 見さ れ，

L L濾 胞 細胞 く^{follic ula r c}瑚^，， と し て記 載 を と り囲む様^に分 布し て お り， 分泌顆 粒を持たず， 腺 さ れ た が^1，， 星型を 呈 す る た め， 後 年 ^l唱 細 胞 く^steuate

A b br e viatio n s ニ D A B ， d ia m in obe n zid ine三E M ， ele ctro n mic r o s c op y ニ G F A P ， glial fib ri11a ry a cidic p^{r o}tein _三 H E_， he m ato xyl in ⁻e O Sin _三 P A S， p^eriod ic a cid⁻S chiff_三 P R L， p^{r O}la ctin _三 G H

，

g^{r o w}th ho r m o n eニA C T fL ^{adr e ntx o rtic otr o}pic h o n n o n ei T S H_，th_yr oid stin1 ulatin _g ho rm O n e ニ F S，fonic ulo⁻Stellate

1 05 6 立

c elll^，， と も言わ れ た^2，． 近 年に至 り， V ila⁻Po r cile が提 唱し た ^一．液 胞 星 細 胞 く^{fouic ulo−Stellate c e11}r^， と言う名 称が汎用 さ れ て^いる^3，． 濾 胞星細 胞はヒト の 正常 下 垂 体 前 葉 細 胞の約3 ^旬 5％を占め る が^4桝， 下 垂 体 腺腰に お^いて多 数の液 胞星細 胞が み ら れ た と^いう報 告は わず か し か な^{い 棚 川． こ}れ は， 通 常^{の へマ} ト キ^シリ^{ン ー エ} オ ジンくhe m ato xyl in⁻e O Sin ． H El 染 色^によ る光 顕 的 観 察で は濾 胞星 細 胞を同 定す る^こと は困 難である た め と 思わ れ る^{1 1．} し か し，1 9 8 0年， Nak房血a ら^8，が濾 胞星細 胞は免 疫 組織 化 学的^に抗S⁻1 0 0 蛋白 抗 体^に陽 性である こと を報 告し て 以来， 光 顧 的^にも濾 胞星細 胞を同 定す る^こと が容 易に なった^． そ の後， 濾 胞星細 胞は抗

gli al fibrnla rya cidic pr otein くG F A Pl 抗 体^にも陽 性を 呈 する^こと よ り^珊， 神 経 外 胚 葉 由 来^であること が 示唆さ れ た． 本 研 究^{に お い}て は， 濾胞星細 胞の由来と機 能を 知る た めに， 正常 下 垂体^およ び下垂体 腺腫^に対し， 光 顕 臥 電 鋳 的検 索^{， な ら びに}抗 中 間 径^{フ ィ}ラ メ^ント蛋 白 抗体を用^いた免疫 組 織 化 学 的 検 索を行った^．

対象およ び方法

1 9 7 0年か ら1 9 8 6年^{に か}け^て， 死後 早 期の剖 検 時^に採 取し た 正常下 垂 体5例と， 手 術 時^に採 取し た下 垂 体 腺 腫1 0 2例を検 索の対 象と し た^． 剖 検 例の内訳は， 脳 出 血1例， 脳腫 瘍2例， 脳 挫 傷1 例^{お よ び}脳 梗 塞1例 で， 2 5歳か ら 4 6歳の男 性2 例と女 性3例である^{． 一} 方， 下 垂 体 腺 腫の内訳は， プロ ラ ク テ^ンくpr ola ctin ，

P R Ll 産 生 腺 腫^{1 8}例， 成 長ホル モ ンくgr o wth hor m o^． n e ， G 叩 塵 生 腺 腫2 4例， 副 腎 皮 質 刺 激ホル モ ン

くadr e n t x o rtic otr opicho rm O n e， A C T印 産 生腺 塵⁵軋 甲 状 腺 刺 激^{ホ ル モ ン} く^thyr oid stim ulating ho r m o n e_，

T S印 産 生 腺 腫1 例お よ び非 機 能 性下 垂体 腺 腫5 4例

で， 1 5歳か ら8 2歳の男性5 6例と女 性4 8例である^． I ． 光顕的観 察

1 ^． H E 染 色お よ び Pericd ic a cid⁻Sch iffくP A SI 染色 正常 下垂体^お よ び下 垂 体 腺 腫は， 摘 出後す み やか に 3．7％ 中性 緩 衝ホ^ルマ リ^{ン に}て固 定し た^． 型 通り^パラ フ ィ ンに包壊 し た後， 厚さ 5 _ノノ m の薄 切々片を作 製 し， H E 染 色と P A S 染 色を施し た⁻

2 ^． 酵 素抗 体 法の単染 色

免疫 組 織 化 学 的検 索用^に使 用し た抗 体は， ウ サギの 抗S⁻1 0 0 蛋 白 く希 釈 倍 率， 112 5 0J， 抗 G F A P り1 3 0 01， 抗ケ ラ チンく56 K D と 6 4 K D ， 1ノ4 0 0I，抗デ^スミ ンく1ノ5 01 ポ リ ク^{ロ ー} ナ^ル抗 体， お よ び^マウスの抗ビ メ^ンテ^ンり ハ⁰1，抗^{ニ ュ ー ロ フ ィ}ラ メントく68 E D， 1

ノ5 01 ^{モ ノ}ク^{ロ ー} ナル抗 体で あ る^{． い}ずれ も D A E O 社 くSa nta Ba rba r a， C alifo mi a， U S Al よ り市 販さ れ て^い る も の を 用^いた^， pe r O Xida s e⁻a nti_pe r o xida s e 法によ り 反 応さ せ，d i am in d be n zid h ^eく^{D A B}l ^にて発 色さ せ た^． 以上 の免 疫 組 織 化 学 的 染 色^{に お いて は， 1}次 抗体を正 常ウ サギ血 清に置 換し た も の を対 照群と し た^．

3 ^． 酵 素 抗 体 法の 2 重 染 色

1次 抗 体と し て， 抗ケ ラ チ^ンある^いは抗S⁻1 0 0蛋白

F ig^．1^． D 皿ble⁻in1 m u n O e n Zym atic labe11 in _g of the n o r m al ade n oh_{y p}ophysis． So m e follic ulo⁻Stellate

く^{F S}I ^{c e11s a r e stain ed with an ti瑠1i al fib ri 1la ry}

a cid ic pr otein くG F A Pl a ntibodie s a s sho w n by d iam inobe n zid in e くD A Bl く^{br o w n stain ing}l， Wh ile oth e r F S c ells a r eim m u n o stain ed wi th anti⁻ke r atin 卿^tibcd ie s a s sho w n b_y 4⁻Ch lo r o⁻1⁻n aphthol くb lu e⁻Violet stain in_gl^{． x}3 0 0^．

下垂体 腺 魔の濾 胞星細 胞 1 0 5 7

E F

Fig^．2． Aこ He m ato xylin an d e o sin stain in_g of a n o n⁻fu n ctio n l ng pituita ry ade n o ma． A

n u mbe r of follicle s a r e s e e n a m o ng chr o m ophobe ade n o ma c ells，butitisimpo s sible to

d istinguish F S c e11sfr o m ade n o m a c e11s． BこRadic ula r cy topla s mic pr o c e s s e s of F S c ells

i

n a n o n⁻fu n ctio nin_{g p}ituita ry ade n o m a a r e 血m u n o stained with a nti⁻S⁻1 00 pr otein

a ntibcd ie s． C こA n u mbe r of P A S⁻pO Sitiv e fouicle s a r e s e e n am O ng ade n o ma c eus． Dこ

F S c ells a r eim m u n o stain ed with an ti⁻G F A P a ntibod ie s． EこF S c ells a r e im m u n o stained w

i th a nti⁻ke r atin antibod ie s． Fこ F S c ells a r e im m u n o stained with an ti^．vim e ntin

a

ntibcd ie s． A⁻F， X4 6 0．