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再 実験的研究 建術 膝 前 十字靭帯 牛 由 来 異種腱を用

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Academic year: 2021

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金 沢大 学 十全 医 学 会 雑誌

9 7

6

1 1 6 卜 1 1 7 5

1 9 8 8

1 1 6 5

異種 腱 を用 十 字靭 帯建 術 実験 的 研 究

金 沢

大 学 医 学 部

整 形

外科 学 講座 く主

進教 掛

6 3

1 2 月 2 0

受 付う

グ ル タ

デ ヒ ド で

固 定 保 存

し た

異 種 腱

t

前 十 字靭 帯

再 建 材 料

と し て

臨床 応

用 が

可 能

で あ る

る た め

膝 関 節

移 植

す る

実験

経 時 的

再 建 緻帯

組 織 像

観 察

せ て

強 度

測 定

免疫 学 的 検 討

え た

組 織 学 的

に は

異種 腱

を 用

再 建 靭

は2 4

と の

癒 合

ら れ

6 0

で は

靭帯

骨 梁

と が

直 接 移 行

固 着

し て い た

再 建 前 十字 靭 帯

最 大 引

強度

時 間

経 過

々 に

増加 傾 向

あ り

3 2

で は 正

30

近 く を 示 し た

異 種 腱

免 疫性

し て は

51

C

r 標 識 細胞 障害 試験

調

た と こ ろ

異種 腱

よ る

細 胞 性 免 疫

問 題

な ら な

範 囲

以 上 よ り

素材

と し た

異 種 腱

膝 前十 字 靭 帯

再 建 材 料

と し て

臨 床 応

用 の

可 能性

が 示

さ れ た

K

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前十字 靭 帯 くa n

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A C L

l

主 要

安 定 装 置

で あ る が

し ば し ば ス ポ

活動

交 通 事 故

屈 曲

わ り

損 傷

さ れ る

A C L が

損 傷

さ れ て い て も

支持機 構

損傷

さ れ な け れ ば

は 比

較 的 良

機 能

ら か な 不

安 定性

を 示 さ な い た め

傷 時

看過

さ れ る 場

し か し

十 分

関節

安 定

ら れ な

場合

将 来関 節

変性

を も た ら す

l 桐

わ れ て

そ こ で

A C L

損傷

次 修 復 失 敗 例

陳旧例

し て は

再 建 術

な わ れ

人 や

動性

人 で は そ の 必

要 性

自 家腱 移 植 法

と し て は

H

e

y

G

r o v e s4 ,

大 腿 筋膜

有茎移 植

し て 以

腸 脛靭 帯半 腱 横 筋 腱膝 蓋靭 帯

用 さ れ て き た

し か し

れ に し

健 常構 造

犠牲

け ら れ ず

く の

場 合 強 度

に お

十分

で あ る

そ こ で そ れ

わ る

方 法

と し て

同種 腱 移 胤

人 工

靭 帯

異 種 腱 移 植 等

え ら れ て き た

臥 著者

素 材

X

e n o

t

e c

h

研 究 所

発 し

異種騰

人 の A C L

損 傷

再 建 材 料

と し て

臨床 応

用 で き る か を

調

る た め に

犬 を 用 て A C L を

異 種

交換 移 植

し た

移 植 腱

組 織 学 的 観 察

な い

t

力 学 的 強度

測 定

し た

ま た

異 種 腱

免疫 性

A b b

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A C L

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n

有 無

を も

検 討

し た

材 料

お よ び

方 法

畜殺 場

採 取

し た

生 食

分 に リ ン ス を

な い

付 着

し た

脂肪 組 織

結 合 組織

除 去

し た

汚 染

ぐ た め

冷 蔵

し て お き

グ ル タ

ル ア ル デ ド の

最 高

浸透

る た め に

室 温

応 くc r o s s

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n

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n

g

J

さ せ た

殺 菌

0

2

グ ル タ

ル ア ル デ ヒ ド

緩 衝保 存 溶 液 内

入 固

定保 存 く

4

遮惜別

し た も の で

Y

型 を し た

さ 1 9 0

m m 直 径約

4

m m

異種 腱 く

X

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C

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aH 図 り

を 用

工 I

実験 動 物

重 8

1 1 k g の

雑 種

犬 を 用

組 織 学 的 観

8

強度

測 定

に 1 8

免 疫 学 的検 討

に 7

頭 合 計

3 3

使

用 し た

全 て ケ

ジ で

飼 育

移 植 前 後

訓練

な わ な か

工 軋

移植 腱

植 方

移 植

立 ち

移 植 腱

生食

た し た

容 器 内

最 低

2

分 間 曲

げ た り

た り し

す す

最 低

5

間 浸

し て お く

操作

を 2

合計

3 回

Ii

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(2)

1 1 6 6

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は ケ ダ ラ

2 0

m

g

k g

l 筋 注 麻 酔 下右 後 肢

膝蓋 外 側 緑

よ り

縦切 開

入 し

膝 蓋骨

内側

翻 転

脂 肪 滑 膜

ひ だ を

圧 排

し て A C L を

十 分 露 出 乱 腿 骨 及

脛 骨

付 着 部

切 離 摘 出

す る

A C L が

付 着

し て

部 位

そ れ ぞ れ

4

m m

を ド リ

開 孔

異 種腱

関 節 腔 内

移植

し て そ の

大 腿 骨 外 額 側

脛骨 内額 側

し て

適 度

緊 張下

両端

々 ス テ イ プ ル ニ

個 ず

つ に

固 定

す る

く図

2

1 創 閉鎖 後膝 関 節

を6 げ

屈 曲 位

大 腿

よ り

下 腿 下

ま で 6

週 間

ギ プ

固定

す る

術 後

4

8

1 2

1 6

2 4

3 2

6 0

逐 次

ブ タ

腹 腔 内 注

入 に て

観 察

1 V

観 察 方

1

移 植 腱 く再 建 熱 帯1

組 織 学 的 所 見

移 植 腱

肉限 的

観 察 後大 腿 骨 脛 骨

長 軸方

切 片

し て

ト キ

オ ジ ン

染 色

な い

執 帯

各 部 分

組織 学 的 変化

及 び

と の

固着 状態

に つ

観 察

し た

2

再 建 執 帯

強 度

両 膝 関 節

外 側

副 靭 帯後 十 字 靭 帯関節包

な ど を

全 切 除 後大 腿 骨 移 植 廉 く左

健 側

対 照

と す る

1 脛骨

に し て

採 取

す る

採 取 後 時 冷 凍 保 存

す る

測 定 前

に ス テ イ プ

除去

ト を

入 し て

解 凍後膝 軽度 屈 曲位

再建 轍帯

強 度

能 引

試 験 器

T E N SI

L O N

U T M III

く東 洋

ド ウ イ

東 京1

を 用 て 50

c mm

i

n

速 度

最 大 引

強 度 く

k g f

l破断

m ml

k g f

m ml 破 損

k g ト

m m

こ つ い

測 定

し た

く図

3

1

3

異種 腱 移植

免疫 性

有無

異 種 腱

よ る

細 胞 性 免 疫

め ら れ る か ど う か を

B

r u n n e r

5 1

方法

じ て

5

C

r 標 識 細 胞 障害 試 験

調

異 種 腱 移 植

6

3

頭 ず

2

つ の

は 1 カ

月 後

異 種 腱

小片

多 数

1 0 日

間 隔

で 3 回

皮 下

移 植

な わ な か

ま た

の 1

9 日

間 隔

で 2 回 に

け て

末 梢

血 リ ン パ

静 注

し て

陽 性 対

照 と し た

予 め

採 取

し た

末 梢

血 リ ン パ

を フ ィ ト

幼 君 化

し た

後 く

5 メ g

m

l

3 日

C O

2培 養 器

培 勤 SI

C

r

標 識

し た

標 的細 胞

異種腱 移 植

よ り

感 作

さ れ た 犬 6

陽 性 対 照

1

末梢

血 リ ン パ

1 二 5 0 で

え て

3 7

0

C で 4

時 間 培 養

破 壊

さ れ た

標 的 細 胞

か ら

解 離

す る

SI

C

r

放射 能

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6 5 3

A L O K A

束 剥

し た

以 上

実 験 方 法

模 式 図

す る と

4 の

く な る

細 胞 障 害 度

標 識

し た

標 的 細 胞

培養 液

ロえ た も の か

解 離

す る

5

C

r

自 然 解 離 放 射 能

(3)

異 種 腱

に よ る

前十 字 靭 帯 再 建

研 究

同 量

標 識

し た

標 的 細 胞

3

倍 量

蒸 留 水

3

度 凍 結 解 凍

し て 人 工

標 識 細 胞

し た

解 離

す る

5

C

r

最 大解 離 放 射 能

と し て

に よ り

め た

細胞 障 害度 解 離c

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m 自 然解 離c

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m

最 大 解 離c

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解 離

し た

5

r

再 取

り込 み は な と さ れ て い る

5 1

C

r

放 射 能

測 定

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を用

4

統 計 学 的 検 討

ら れ た 測

定 値

平 均値

標 準 偏 差

で 示 し た

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1 1 6 7

移 植 魔

組織 学 的

所 見 1

術 後

4

異 種 腱

骨 梁

と の

管 新 生

線 維 性 組 織

増 生

そ の

異種 腱

線推 束 間

に も

入 し て い た

異 種 腱 周 囲

骨 梁

孔 時

生 じ た

微 小 骨 折

よ る と

わ れ る

仮 骨 形 成

ら れ た

く図

5

1

2

術 後

8

仮 骨

は か な り

吸収

さ れ

新 生 血 管

減 少

々 に

線維 性組 織

置 換

さ れ て い た

3

術後

1 2

仮 骨

消 失

腱 周 囲

骨 梁

の 凹

が 平 坦

4

退

か ら 8

週 後

ら れ た

幼 君

線 維 芽 細胞

減 少

て い た

く図

6

I

4

術 後

1 6

異種 腱 周 囲

骨 梁

は 互 い に

融 合

し て

肥 厚

異 種 腱

骨 梁

と の

に は

幼 君

線 維 芽細 胞

線 維

増 生

ら れ た

5

術後

24

異 種 腱 周 囲

線 維 性 組 織

に ち

と な り

骨 梁

よ り

移 植 腱

線 推 性 化 骨

が 認 め ら れ

そ の

癒 合

し て い た

宿

主 の

線 推 性 組

腱 内

入 し

膠 原 線 維 束

沿

増 生

し て

く図 り

6

術 後

3 2

骨 梁

く な り

線 維 性 組 織 内

で は 骨

進 行

め ら れ た

7

術後

60

異 種腰 組 織

波状

線維

が 明

め ら れ

種 腱

宿 主

吸 収

さ れ

残存

し て い た

周 囲

骨 梁

と の

線 推 性 組 織

介在

ら れ

骨 梁

直 接

移行

し て

固着

し て

た く図 8 ト

な お

全経 過

異種 腱

す る

拒 絶

を 示 唆 す る リ ン パ

球 浸 潤 等

所見

め ら れ な か

王 王

A C L

再 建 靭帯

強度

1

A C L

能 引

試験

器 に よ り A C L が

断 裂

す る

場 合

全例

脛 骨 付 着 部

で の

剥離 骨 折

靭 帯 内

に お け る

断裂

め な か

そ れ ら の

最 大 引

強度 く

k g f

l破 断 伸

mJ

k g f

lm m

l

k g f

m 叫 等

平 均 値

及 び

標 準 偏 差

1 に 示 し た

破 損

に は

個体 差

が あ り

き な バ ラ ツ キ が

め ら れ た

2

再建 靭帯

強 度

(4)

1 1 6 8

1

ン 術 後

4

の 7

7

% 程 度

な く

弾 性

指 標

で あ る

プ も

再 建 靭帯

脛骨 側

よ り

け て

測 定 不 能

8

3

と 小 さ

破 断伸

び は 正

A C L と の

りな 2

1 術 後

8

破 損

1 9

5

断裂 部位

は3

強 度

均 値

は 4

9 士 0

1 4 k g f で 正

脛 骨 接 着 部

種 腱

外 側 部 分

し て

脛骨

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X

2 0 0

(5)

異 種 腱

に よ る

前 十字 靭 帯 再 建

研 究

断裂

し た

3

ン 術 後

1 2 遇

1 1 69

1 6

7

8

過 後

と 比

し て

り な

断裂

は 2

脛 骨 接 着 部

1

骨 接 着 部

で 認 め た

最 大引

強 度

々 4

1 術 後

1 6

は 8

2 3

4

増 加

し て

る が

破 損

意 外

1 2 過

最 大 引

強 風 破 損

Fi g

6

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5 2

(6)

1 1 7

P

と も

9

1 0

7

減 少

し て お り

か ろ う じ て ス ロ

プ が3 1

6

軽 度 増 加

し て

断 裂 部 位

は 2

大腿 骨 接 着 部

1

脛 骨 接 着 部

で あ

5

う 術 後

2 4

破 損

と も

の 3 6

3

3 1

9

ま で

増 加

て い る が

最 大 引

強度

は 1 9

と ま だ

断 裂 部位

は 2

大 腿 骨脛 骨

両 接

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4 7 士 0

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(7)

種 腱

よ る

前 十 字靭 帯 再 建

研 究

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着 部

1

脛 骨 接 着 部

6

I 術後

32

最 大引

強 度

破 損

増加

そ れ ぞ れ 正

の A C L の 2 8

6

3 5

5

3 9

4

を 示 し て

断 裂 部位

は 2

大 腿 骨 腰 骨

両接 着 部

1

脛骨 接 着 部

で あ

く図

9

川上

5 1

C

r 標 識細 胞 障 害 試 験

よ る

細 胞 障 害 度

1 0 は

細 胞 障 害

異 種 腱 移 植 後

時 間

関 係

を 示

細胞 障 害度

は 5 日

1

7 士 4

9

% くn

6

下 同

I

1 4 日

旦 1

3 士 3

3

を 示 し

か に

減 少

す る も の の 2 8 日

6 2 日

は そ れ ぞ れ 3

2 士 3

5

3

8 士 4

0

々 に

増 加

し て い る

6 7 日

は 2

9 3

3

と ど ま

陽 性 対 照

で は 5 日

1 8

0 士 0

7

1 4 日

1 3 士 1

9

時 的

減 少

す る も

28 日

62 日

6 7 日

は そ れ ぞ れ 2 1 士 1

6

3 2

1 士 8

0

3 6 士 9

6

と 上

を 示 し た

諸 家

報 告

を み る と

6 I7 I

く の

場 合 対 照

非 特 異 的 解離

は 1 0

内 外

で あ り

細 胞 障 害 度

が 1 0

え る

場 合

細 胞 性 免 疫

が あ る と

わ れ て

本 実 験

性対

照 が 1 0

以 上 を 示 し た の に

し て

実 験 系

で は

平 均

5

で あ

以 上 の

結 果

よ り

牛 由 来

異 種 腱 移植

に よ る

細 胞 性 免 疫

問題

な ら な

え ら れ る

1

4 2 8 6 2 6 7 d 叩

8

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C

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