究 病 態 関 実験的研 機能 閉 塞 性黄痘 肝切除 後 肝

肝

機能

閉 塞 性 黄痘 肝 切 除 後

病 態

関

実 験 的 研 究

金沢 大 学 医 学 部 外 科 第^二学 講 座 は任^こ宮 崎速 夫 教授コ

滞 敏 治

く平 成3年1 月14 日受付¹

閉 塞 性 発 症が肝 切 除 後^の肝ミ t^{l コ ン}ド リ ア機 能に及 ぼ す影 響を雑種^の成 熟イ ^ヌを用^{い て}検 討し た^． 総 胆 管 結 蟄^にて黄 痘を作 成し， 1 過 後^{に 4}0％ 肝 切 除及 び菌症解 除 手 術を併 施し た． 対 照 群は単 開腹1凋 後^に4 0％ 肝 切 除を行^った． 対 照 群で は肝ミ トコ ンド リ ア機 能は肝切除後1 日目^に最上昇し 1 週 後^に肝切 除 直 前^に復し た^{■ 一}方 黄 痘群^の肝^ミトコ ンド リア機 能は嚢痕 作 成1過 後には軽 度 克 進し た． し か し， こ の黄 痘 群に お け る肝 切 除 後^の機 能 克 進は 1 週 目ま で遷 延し て^みら れ た もの の対 照群に比^べ有 意に抑 制さ れ た^． ま た発 症 群^お け る血 液 生 化 学 検 査 成 績は総 蛋 軋 血 清アルブミ ン傾，

へパブ ラスチ^ンテ^ストが肝

切除 後 有 意^に低 下し． 黄痘 群で は肝 切 除 後1 過の肝 湿 重量 再 生 率も有 意^に低 値で あ^った^． 以上よ り， 黄 痘 肝 肝 切 除 後は肝^ミト^{コ ン}ド リ^ア機 能 先進が抑 制さ れ， その結 果と し て 蛋白 合 成^の低 下， 肝 再 生率の低 下が惹 起さ れ た^， す な わ ち． 閉塞 性 発癌に対す る肝 切 除で は術 後^の肝ミ ト^コ ンド リ ア機 能低 下を予 測し た術 前， 術 中， 術 後 管理 が 重要^であ る^こと が 示 さ れ た^．

E ey ^{w o r}ds 閉 塞 性 黄 痘， 肝^{ミ トコ ンド リ ア}機 能， 黄 痘 肝 肝 切 除， 肝 再 生， 蛋 白 合 成

近 年肝切除 術^の手 術 手 技な ら びに術 前 術 後 管理能 力

の向上^{1 ト 牒}によ り広範 囲肝 切 除術は よ り安全 に行わ れ

る よ うになっ て き た． ま た， 胆 道 系悪性 腫 瘍^に対し て 積極 的に根 治 手 術を め ざ す努 力が払わ れ， 肝 門 部 胆 管 癌や胆 褒 痛に対し て肝切除 術を施 行す ること が多く なって き た^{6 ト 1 1−．} し か し， 胆 道 系悪性 腫 瘍で は閉 塞 性 黄痘を合 併す る^こと が多く黄痘 肝肝 切 除 時^には術 後^に 肝 不全を中 心と す る合 併症 が し ば し ば発 生し， 問 題と

な ること が少な く な^い．

肝葉の ^一 部を切 除す る と残 存 肝で は D N A 合 成．

R N A 合 成， 蛋 白 合成が盛ん と な り， 肝 細 胞の分裂が

著し く克 進し^{1 2 I}， 肝^ミトコ ンド リ ア機 能が冗 進す る こ

と が知ら れ て^いる^{l 錮} 冊^一方，黄 痘 肝で は^ミト^{コ ン}ド リ ア膜が強く障 害さ れ， 肝^ミト^{コ ン}ド リ ア機 能が低 下す る といわ れ て^いる^{1 5 ト l 射．} さ らに， 黄痘 肝^に肝切除を加 え た際^の残 存 肝は貴痘 解 除 術^を付 加し ないと その再 生

A b b_{r e v}iatio n s こA D P_， ade n o sin e d i_pho sphate

は抑 制さ れ ること が報 告^劫1さ れて いる^． しかし， 黄 痕 肝 肝切 除術 後^の病 体^に関す る研 究は依 然と し て少な く， よ り安 全な肝切除術^の施 行^のた め^には残 存 肝の再 生機 能^を解 明す ること が 重要な課 題と な る^．

本研 究では， イヌ に お い て総 胆 管を結 歎し^て作 成し た閉塞 性 黄痘 肝に おいて肝切除と同時^に黄痘 解 除を行

い_， 残 有肝の機 能を肝^ミト^コ ンド リア機 能を中心^に経

時 的^に検 索し た^． その結 果 黄 痘 肝^{に お け る}肝切除術^の 安全性^につ いて幾つ か の知 見を得たの で報 告す る^．

対 象およ び方法 工^． 実 験 動 物^およ び作 成 法

体 重1 0 kg 前 後^の雑 種^の成 熟イ^ヌを 用^い た^． 麻 酔 は， 塩 酸ケ ダミ ンくketa mi n e H C Il を 1 2^．5m gノk_g 皮 下注し， 導入後チ オペ ンタ^ー ルナ ト リ ウ^ム く^{th io}pe nt⁻ al s ud iu mさ 2 5^m gl回 を静注し て維 持し た^．

こ A lb， alb u minニ B D L， b ile du ct li_gatio n 三 G O T _{， g}luta mic o x alo a c etic tr a n s a min a s eニ G P T l gluta mi c p y^{r u v}ic tr a n s ami n a s e三 H P T_， hep^apla stin te st 三M it_， mi_to ch o ndriaニR C R， r e Spir ato ry ^{c o n}tr olr atioニT P

，tOtal _protein

1 1 8

閉 塞性 黄 痘は十^二指 腸 直上 で胆 嚢管 合 流部 位^{よ り}十

二指腸 側の総 胆 管を 2 重^に結 致し^， 切 離し た^， 正常イヌ肝は Pric e^{2 1，}によ る と左か ら外側 左 葉， 内 側 左 葉， 方 形 葉， 内側 右 葉， 外 側 右 葉， 尾状 葉の 6 葉

に分葉し て お り， 本 研 究で は全 肝の4 0％と な る肝 左2 葉を切 除し た． な お左2 葉の重 量は 1 0頭の検 討で は 4 2 ．8^士3 ^．2％と なっ た^． 肝 切 除は肝 門 部であら か じ め 切 除 予定 領 域の肝 動 脈， 門脈， 肝 管 技を結 勢し て行っ

た− ま た黄 痘 肝 解 除 術と し て は胆 嚢 十^二指 腸 吻合を施 行し た^．

黄 痘 作 成の有 無^によ り以 下の2 群に分け た^． 対 照 群^こ単 開 腹 後1週に て肝 左2 葉を切 除し た．

貴 痘 群^こ先 述し た ご と く， 開 腹に て閉 塞 性 黄 痘を作

Co ntrol _gr oup Ja t l nd ice g r^{o u}p

F i_g．1． D iagr a m of b ile du ct ligatio n， hepate c⁻ to my ^{a n}d chole cysto⁻du ode n o sto m y^． Co ntr ol g^{r o u}p ^{r e c e}iv ed 4 0％r e s e ctio n of the liv e r o n e W e ek aft_{e r} sim ple lapa r ato m y^． Ja u nd ic e gr o up ^{w a s} p^{r e}p^{a r e}d by ligatio n of the c o m ^． m o n b ile du ct， a nd both 4 0％ r e s e ctio n of the

liv r e a nd j^{a u nd ic e r el}e a sl ng Ope r atio n w e r e pe rfo r m ed o n e w e ek the r e afte r． G B， gall bla⁻

d de rニ L L，1eft late r a1 lobeニL M ，1eft m ed ia

lobeニQ ， qu adr ate lobeニ R M ， riaht m edial lobei R L，righ ^tlate r al lobeニC_，C a udat_e lobe．

成 後， 1過にて対 照 群と同様に肝 左2葉 切 除を行^い，

同 時^に黄痘 解 除 手 術^を併 施し た．

これ ら対 照群， 黄 痘 群^{につ い}て術 前， 肝 切 除 術， 肝 切 除後1 日， 2 日， 3 日， 7 日目^に各^々犠 牲 屠 殺を行

い_， 肝 組織の採 取， 血 液 生 化 学 的 検 査お よ び肝 重 量の 測 定を行^った^．

I工． 検 査 項 目^およ び方 法 1 ^{． 一}般 生化 学 検 査

11 血 清 総^{ビ リル ビン}値 Je ndr a s si k⁻C legh ^{o r n} 法^{2 2，}

21 血清 総 蛋 白 く^total _pr otein

， T Pl^．B C G 法^{2 3I} 31 血 清ア^ルブ ミン量 くs e r u m albu min，A lbト電 動 泳 動 法^瑚

41 血 清 gl^{uta mic o x alo a c etic t}r a n s ami n a s e 活 性 傾 くglut_{a m}ic o x alo a c etic tr a n s a min a s e， G O Tト Ka r m e n 法^{2 51}

51 血 清 gluta mic p yr u vic tr a n s a min a s e 活 性 傾 くgluta mic p y^{r u v}ic tr a n s a min a s e， G P TJ⁻Ka r m e n

法^恕I

6l ^{ヘ パ} プ ラス チ ^ン テ^ス ト くhepapla stin te st_， H P Tl^{． へ パ}ブ ラスチ ^ンテ^ス ト 用試 薬 く^{エ ー} ザ イ ， 東 京1

2 ． 肝 湿 重 量 再 生 率

重 量 再 生 率は Grind lay^{2 の}の計 測 法^に従った^． す な わ ちく屠 殺 時 肝 重 量 ^一肝 切 時 残 肝 重 畳1^＋肝 切 時 残存 肝重 量^Xl O O^によっ て算 出し た^．

3 ^． 肝ミ ト^{コ ン}ド リ アくmito cho ndria，M iり 機 能 脱 血 屠 殺 後す み や かに肝 右 葉 内側 葉よ り約5g の肝

組 織を採 取し， Oz a w a ら^{2 乃}の方 法に準じ． M it の分離

調 整を行った^． 酸 素 消 費 量は自 記 呼 吸 酸 素 測 定 装 置

Table l^． Pr epa r atio n of liv e r mito cho ndria

L iv e r tis s u e

O Ho m oge niz e

O 2，0 0 0 rp^{m x} 7 mi n

Supe r n ata nt

O 2_，0 0 0 rpm x 7 min

Supe r n ata nt

O l O，0 0 0 rpm x 12 min

Pr e ci_pitate

O l O，0 0 0 rpm x 1 2 min

Pr e cipitate

O 7，5 0 0 rpm x 12 min

Pr e cipitate

O Pola r ogr aphy

P O⁻1 0 0 A 型 く柳 本 製 作 所， 京 都I を用^いて測 定し た．

反応 液^には 0．3 M m a n nitol，1 0m M Tris^．pho sphate

buffe rくpH 7^■4I，1 0m M K C l，2m M M gcl2 を 用^い． 基 質と し て 4^m M _glut_{a ma}te を使 用し た^． M it の酸 素 消 費 量を C h^{a n c e2 5，}の定 義によ る state4呼 吸と， さ らに ade n o sin ed i_pho sphat_eくA D PI を 2 0 0_JL M を加え て リ ン酸化を お^こな わ せ た ^state3 呼 吸に つ いて測 定し た^． M i^t の機 能は呼吸調 節 比 くr e spir ato ry c o ntr ol r atio，

R C RI， 酸 化 的リン酸 化 能 くA D P10ン， 活 動 呼 吸の酸 素 消費 量 く^State3 a ctivit y，State3I ^およ び A T P 生成 量 くpbo sノ^m gl を測 定し て判 定さ れ た^．

E I^． 統 計 学 的検 討

各 測定 値は平 均 値^士標 準 偏 差 くm e a n士S^．D1． で表し，

各 測 定値の比 較 検 定には stude nt のt 検 定を 用^い ．

p く0^．0 5にて有 意^の差と し た．

成 績

工． 血清 絵ビ リル ビン値^の変 化

対照群で は， ど リ^ル ビンは肝 切 除 前か ら肝 切 除後7 日目ま^で0^■い⁻0^■5m gノdl の範 囲 内^にあり，上昇はみら れ な か^った^{． 一} 方黄 痘 群で は， ど リル ビンが費 痘 作 成

Ie ek aft e rB D し^一トt h y^{s a}r tc rhepa t e cto 4y

F ig⁻2^■ Total b ilir ub in le v el in s e r u m afte r b ile

du ct li_gatio n くB D Ll a nd afte r hepate cto my^． M e a n v alu e s士S−D− a r e gi^{v e n} fo r e a ch _gr o up こ

0 ， C O ntr Ol _gr o up i 争，j^{a u n}d ic e gr o up^． Nu m ⁻

be r s of dog u s ed fo r e a ch _gr o up w e r e 5 fo r e a ch point．

1 週 後^には 6^．3 士0^．6mgノd l と上 昇し た が，肝 切 除 後^は 経 時 的^に減 少が み ら れ， 肝 切 除後7 日目^には 0^．5 士0 ^．1

mgノd l と ほ ぼ 正常^に回復し た^． 工工^． G O T の変 化

対 照群で は前値2 4^．8 士5^．4 U から肝 切 除後1 日目^に 2 08 士4 3 U と最も高^い上昇を み た が， 以 後 経 時 的^に漸

0 0

0 0

0 0

0 0

00

ハ

已

h 戸 託 訪 二 ち

h 一

て コ u d ト

8

0 1 rl飴り ^{1 2 3 7 rぬ ysJ}

l既k af te r8 帆−一触y s af t打 鵬 阿 t^{e C}tO ■y

F i_g．3． G O T a cti vi_{t y} in s e r u m afte r b ili du ct li_gatio n くB Dり a nd afte r hepate cto my^． S igni⁻ fic a nt le v el in c o mparis o n with the c o ntr ol

g^{r o u}p at e a ch day ニ^ー，p く0．0 5i

轟 書

，p く0^．0 1^．

へ

已

．

巳 読

亡

こ

霊

−

こ

じ 句

E

U

l既k art e r別札一^{−−1 by saJt e rhe 脚 t e Ctく廿 y}

Fig^．4． G P T a ctivit y in s e r u rn afte r b ile du ct li_gatio nくB D LJ a nd afte r hepate cto m y^． S i_gni^． fic a nt le v el in c o m pa ris o n with the c o ntr ol

gr o up at e a ch day ニ^韓，p く0．0 5i ^{． ．}，p く0．0 1．

1 2 0

滅し， 肝 切 除 後7 日目^には 4 8 士 8 U と ほ ぼ肝 切 除 前借

に復し た^． 黄 痘 群で は黄 痘 作 成 後1 過 日^に2 7 8 土4 1 U と 上昇し， 肝 切 除後¹ 日目^には 4 7 2 士9 3 U と最 高 値を 示 し た が， 以後 対 照群と同様に経 時 的に低下し た^． し か し， 肝切 除後7 日目で も 2 1 3 士 5 9 U と対 照 群に比^べ 有 意に高値 くp く0．0 11 であっ た．

正I． G P T ^の変 化

対 照 群で は前 値4 1．3 士1 3 U か ら肝 切 除 後1 日冒で

ハ

葛ミ

V

−

己 讃

u 岬

u

芯 盲

J a

−

ヨ

ー

声

0 1r^{le ek}ノ1 2 3

フ し

7 rぬy sJ

Te ek af te rB D L−．^{＋−Da y s af te rhe p ate cto ■y}

Fig^．5^． Total pr otein in s e r um afte r b ili du ct ligatio n くB D Ll ^{a n}d afte r hepate cto m y^． S igni⁻ fic a nt le v el in c o mpa ris o n with the c o ntr ol

gr o up at e a ch day ニ

＋ ＋

，p く0．Ol．

八

竜 ミ

レ 亡 叫

−

月

−

帽

．

己 顔

Te ek ^aEte rB Dl−．^{，−Da y s af te rhe阿 te C t r Ny}

Fig^．6． Se r u m al bu min afte r b ili du ct li_gatio n a nd afte r hepate cto my^． S ignific a nt le v el in C O m pa ris o n with the c o ntr ol gr o up ^{at e a c}h day i

．

，p く0．0 5i

H

，p く0．0 1．

2 0 8士4 3 U と最 高 値と な り， 以 後 G O T と同 様^に低 下 し た． 黄痘 群で は黄痘 作 成1 週 後2 1 6 0 士 1 2 1 U と 上昇 し た が， 肝 切 除 後は再上昇す る^こと な く経 時 的^に漸 減 し た． しか し， 肝 切 除 後7 日目で も 2 7 8 士1 3 2 U と対 照 群 比^べ有 意^に高 値 くp く0^．0 1J ^であった．

I V ． T P ^の変 化

対 照 群は前 借5^．9 士0^．1_gノdl か ら肝 切 除 後1 日 軋 2 日目と低 下し， 3 日目よ り 上昇に転じ， 肝 切 除後7

He 問te C t O ■y

Te ek ^af te rB D L−^−■−^{Days afte rh}e 一組 t e C t O ty

Fi_g．7． C h^{a n}g^{e s} of the hepapia stin te st afte r

bili du ct li_gatio n く^{B D L}l ^{a n}d afte r hepate cto⁻ m y^． S i_gnific a ntle v el in c o m p^{a r}is o n with the C O ntr Ol _gr o up ^at _{e a c}h day i

＋

， p く0．05こ

． ＋

，

p く0．0 1．

ハ

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0

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1 2 3 7 くd^a_y^sフ

Day^{s a}rte r hep^ate cto 4y

F ig^．8． C ha nge s of hep^atic r ag^{e n e r a}tio n r ate afte r hepat_{e c}to m y^． S i_gnific a nt le v el in c o m pa ris o n with the c o ntr ol _gr o up i ^り ，

p く0．0 1^．