Title
び慢性大細胞型B細胞性リンパ腫における増殖およびアポ
トーシス関連マーカーの発現( 内容の要旨(Summary) )
Author(s)
李, 軼琳
Report No.(Doctoral
Degree)
博士（医学）甲 第473号
Issue Date
2001-03-24
Type
博士論文
Version
URL
http://hdl.handle.net/20.500.12099/14662
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氏名 (本籍) 学位の種類 学位授与番号 学位授与日付 学位授与の要件
学位論文題目
審 査 委 員 李秩､琳(中国)一
博
士(医学)
甲第 473 号 平成13年
3 月 24 日学位規則第4条第1項該当
び慢性大細胞型B細胞性リンパ腫における増殖およぴアポトーシス関連 マーカーの発現 (主査)教授高
見 剛 (副査)教授 玉舎
輝ノ彦
教授森
脇 久隆
論 文 内 容 の 要 旨 【目的】び慢性大細胞型B細胞性リンパ腫(DLBL)は二欧米ではB細胞性非ホジキンリンパ腫の約40%,本邦でも約
50%を占ある重要な悪性腫瘍であり,異なる臨床像,遺伝子変異,治療反応性,予後を持っ複数の病型を包括しているものと考えられている｡しかしながら,pLBLめ壷型分類は進んでおらず,有用なマーカーもいまだ明ら
かではない｡腫瘍増殖は細胞増殖と細胞死特にアポトーシスとのバランスが重要であり,Ki-67,C-myC,･p53,
bcl-2,bax,SⅦrVi㊥沌どの発現を解析した報告も多いが,それらめ意義は報告者間で差があり,予後診断のみならずDLBLの亜型分類に有用か否かいまだ議論のわかれるところである｡
本研究はB細胞性リンノヰ廟細胞増殖の指標としtKi-67とc-myC蛋白の尭現を,アポトーシス関連マーカーとし
てbcl-2,bax,P53遺伝子産物の発現を検討し,TdTによるnick end-1abeling(TUNEL)法により検出されるアポトーシス細胞の出現状況と比較することで,予後の推定,亜型分類に有由な情報を得ることを目的として行わ
れた｡ 【対象】 ･本研究では1990年∼1999年に収集,診断されたリンパ腫症例の中から･二 標準的治療が施され,かつ,臨床経過が明らか寧B細胞性リンパ腫55例を解析に用いた｡いずれもリンパ腫の診断は組織形態学的所見と各種表面マー
カー検査結果た基づき,REAL分類で下された｡ 症例の内訳は底意性(Working Formulationの底意性群+中
間群のDLBL以外より成る)B細胞性リンパ腫12例,DLBL(WFの中等度悪性群)43例の,合計55例である｡性
別は男性37例,女性18例で,年齢は22歳∼91歳(平均63歳),検討した標本の採取部位はリンパ節(節性)37例, 節外組織(節外性)18例であった｡ 【方法】 常法通り作製されたホルマリン固定パラフィン包埋切片を用い,免疫組織化学を行った｡細胞増殖関連マーカーとし七Ki-67,CrmyC蛋白,アポトシス関連マーカーとしてはbcl-2,bax,幽こ対する抗休を一次試秦として
用豆､た｡Ki-67,b占1-2,p53,baxでは切片をクエン酸緩衝液中で加熱処理し,C-myC用切片はトリプシン処理をして抗原を賦活化した｡一次抗体は一晩反応し,ビオチン化二次抗体,ABCペルオキシダーゼを用いるABC法
で染色した｡ただし,baxではABC法の次にビオチン療識タイラマイド,ペルオキシダーゼ標識アピジンを追加
す卑qSA法で染色した｡アポトーシスに陥った細胞の検出は標本中のDNA切断末端にdigoxigenin標識d-UTPを
結合させ,ペルオキシダーゼ標識抗digoxigenin抗体で検出した占いずれも
光学顕微鏡下に高倍率で観察し,Ki-67;LLC一甲yC･bcl-2,bax,P53は500個の腫瘍細胞を数えて百分率で･TUNEL法では同様に1･000個の細胞を数え
て千分率で示した｡その際,連続切片上の腫瘍細胞が最も多い同じ領域で算出することを心掛け,核小体を認め る細胞を対象とした｡ 【結果】 DLBLを検討する前に,染色結果を低悪性群と比較した｡Ki-67は低悪性群(12例)が20.0(平均値)±14.5 (標準偏差),DLBL(43例)が86.7±20.9(p<b.001),C二mycは2.63±6.り22(低悪性群),49.1±34.5(DLBL) (p<0.001)の陽性率を示し,いずれも両群間に有意差が認められた｡しかしながら,p53(p=0.飢9),ならび にTUNEL(p=0.200)ではDLBLが低悪性群より陽性率が高い症例が多く,また,bcl-2(p=0.308)ではDLBLー49-が低悪性群より陽性率が低い症例が多いものの,いずれも両群間に有意差はみられなかった｡以後の検討ではこ れら低悪性群の平均値に標準偏差値を加えた(bcl-2では引いた)値を,∵参考値として用いた｡ 1.Ki-67:DLBIJ43例のうちKi-67陽性率が参考値(34.5%)より低値を示したのはわずか3例で.そのうちの2 例は濾胞性リンパ腫より移行したDLBLの例であった｡各症例の陽性率と原発部位,予後,C-myC,P53,bcl-2, bax,TUNEL陽性率との間には,特定の傾向はみられなかった｡
