関す 実験的研究 影 響 輸 液 及 す 酸イ 腫瘍増殖

金 沢大 学 十 全医 学 会 雑誌 第

9

4巻 第

1

号

9 5

⁻

1 0 7

く

1 9 8

引^．

腫瘍 増殖 ^に及^ぼ すア ミ ノ酸イ ン ^バ ラ ン ス輸液^の 影響^に 関 す^る実 験 的 研 究

金 沢 大

学 医学 部 第^一外 科 学教 室 は

_任

二

岩

喬教 授

I

大 村 健

川

銅

口

6 0年¹

月

2 1

日

受 付

1

本

研

究

は

， 癌 治 療^{に お}

け る ア

ミ ノ酸

イ

ンバ

ラ

ン ス の意義

を

追 求

し

， 副 作

用

の少

な

^い有周

な ア ミ

ノ酸 混 合 液^の開 発

を 目

的

と し

て行

な わ れ た

^．

ま

ず，腫 瘍 増 殖

と

宿

主

^の窒 素 平衡^の関係

な ど を し ら

^べ

る

実験

で は

，

腹 水 肝癌

^{A H}

¹

3 0 を

移植

し た

雄 性

ド

ン

リ

^{ュ ー ラ}ッ

ト

に対

し

，

3

種^{の ア}

ミ

^ノ酸製 剤

を

7

日

間連 続

し

^て点滴 注

入 し た

^． 実験 群

と し

て， 総 合

ア ミ

^ノ酸 製 剤く

^I

l， m et

hi

o n

i

n e

及 び

cyst

i

n e

を

含

ま な

^い

ア

ミ ノ酸 製剤く

Il

l，

II

に a rgi ⁿ

ⁱ

^{n e}

を

過 量に加

え た

製 剤く

II

り， 生

理

食 塩 水く

I V

l

を そ れ ぞ れ

投 与

^{し た}

群^に， 非 輸 液群く

V

旭 加

え た 5

群

を

設 定

し た

−

ま た 工

群^へ

1 V

群^に

は 2

1．

7

％ 濃度^の

ブ ド ウ

糖

を

投 与

し た

． 輸液 期 間 軋

工

群

で は 正

^の窒 素 平衡

を 示 し た が

， 体 重変 化

は な く

， 腫 瘍

^{重 量 は}

増加

し た

．

と

^こ

ろ が

，

I王

群，

m

群

及 び1 V

群で

は

， 窒 素平 衡

が す

^べ

て

負

で あ り

， 体 重

も

減少

し

，

と く

^に

I V

群

で は

著 明で

あ

^っ

た

． こ

れ ら

の

3

群^{に お}

け る

腰 瘍

重

量

は

， い

ず れ も

減 少

し て

お

り

，

と く

^に

III

群に著

明

であ^っ

た

．

廿

群，

IIl

群 及

び工V

群^で

は

，

血

清

G O T

，

G P T

，

ク

レ

ア チ

エ ン値^の

上

昇

は

認

め ら れ な

か っ

た が

，

血

清

B U N

値

は m

群^で

わ ず

か に

上

昇

し て

い

た

． 肝

の

組 織 学 的検 索

^で は

l

わ ず

か に脂 肪 肝の発 生

が み ら れ た

． 次^に雄性

ド

^ン

リ

^{ュ ー}

ラ

ッ

ト

の腹腔 内に

A H 13 0

細 胞

を

移植

し

，

6 日

後^に

さ き

の実 験

と

同様^{の ス}

ケ ジ

^{ュ ー} ル で輸 液

を

行^っ

た

．輸 液終

了

後，各 群^の腹 水 癌細 胞に つ い て³

H

⁻t

h

_y

m i

⁻

d i

n e

及 び

³

H

⁻u r

id i

n e の取

り 込 み を

測定

し た

．

そ

の結 果，

II

群 及

びIII

群に

お

^い

て

， こ

れ ら

前駆 物質の取

り 込

み

が と も

に抑 制

さ れ て

い

た

．

以 上

の成績^か

ら

，

ア

ミ ノ酸

イ

ンバ

ラ

ン ス輸液

は

， 癌治 療に お

け る

補 助療 法

と し

て有

用

^で

あ る と 思 わ れ る

．

E e

y

^{w o r}ds a n in o a cid imbala n c e，

t

O

t

al

_p

a r e n

t

eral n u

t

ri

t

io n_，h o s

t

⁻

t

um O r r ela

t

io n sh i

_p

．

担 癌宿

主

^{に お い}

て は 腫

瘍^の増 殖^に

と も な

^って様々

な

代謝 障 害

や

代 謝 変動

が

お こって い

る

．

腰

瘍

が

存在

す る

こ

と

に

よ

^って起

る

消 化 管通 過 障 害

や

， 体 液 ^．

血

液喪 失

に起 因

^{す る}

低 栄 養状 態

な ど

，

発 生

機 序

が

解

明 さ れ

てい

る も

の

も あ る が

，

腫

瘍

が

産

生 す る

未

知

の有 毒物 質^に

^よ る

の で

は な

^いか

と

推 測

さ れ る

代 謝 障 害

も

み

ら れ

て い

る

．

生

体 内^の

蛋

白 代 謝

は そ

の 1 つで

あ り

， 腰 瘍

が

．^山 走

の大

き さ

^に増殖

す る と

， 転 移 巣

が

認

め ら れ な

い臓

器

^に お い て

も

自

己 蛋

白の

異

化作

用 が

起

り

， 担 癌宿

主

体の窒

素

平

衡

は

負

と な

って

く る

^{り 2 ，．} こ の

よ う な 蛋

白 代 謝 障害

は

， 栄 養 物の経^口摂 取

が

低

下 す る

^こ

と と あ

^い

ま

っ

て 重

篤

な

低 栄 養状 態

を

惹起

し

， 個^{々 の}

正

常臓

器

機 能

を

低

下

A b br e via

t

io n s こ Ar

g

， a rgi ^{nin e}

ニ

B U N blo od

95

さ

せ

る

こ

と

に

な る

^．

さ ら

^に， こ の

よ う な

状 態

で は

， 細 胞 性 免 疫 能の低

下 を き た す

^こ

と も

報 告

さ れ て お

り

^{3 ト 6 I}， こ

れ が

腫 瘍の増 殖

を

助 長

す る と

^い

う 悪

循環

を

生

ず る

結

果 と な る

． 従^って，

悪

性

腫

瘍^の治療

を

行

う

際

に

は

，

腫

瘍

主

体 的に傾^い

て

い

る

代 謝の流

れ を

， 宿

主 主

体 的^の

も

の に変

え る 必

要

が あ る

．

E I

v e

h

je m⁷1

は

，

生

体^に投 与

す る 蛋

白に，特 定^の

ア ミ

ノ

酸

を

少

量

添加

す る

こ

と

に

よ

^って， 制 限

ア

ミ ノ酸の

不 足 を

助 長

し

，

そ

の

た め

に

発

育障 害

が

生 ず

る

こ

と を

報 告

し

，

こ

れ を ア

ミ ノ酸

イ

ンバ

ラ

ン ス

と

命 名

し た

^．

ア ミ

ノ酸

イ

ンバ ラ ン ス

は

，

そ

の後

蛋

白代 謝^の

み な ら

ず核 酸 代 謝^に

も 影

響

す る

こ

と が

報 告

さ れ

^8j，

悪

性腫 瘍 治 療への応 用

ure a ni

_t

ro

g

^{e n}

三

C r，C r e a

t

ini_{n e}

_ニ

D N A，de s o x

y

^． r

i

bo n u cleic a cid

ニ 5

⁻F U ，

5

⁻flu o r o u r a cil

_三

G O T ，

g

lu

t

a mic ox alo a c e

t

ic

t

r a n s a min a s e

ニ

G P T

，

g

lu

t

a mic

p y

^{r u v}ic

t

ra n s a min a s e

ニ

H is， his

t

idin e

三

工1e

，i_{s o}le u cin e

i

Le u_，le u cin e

ニ

L

_y

s

，1

_y

s l n e

ニ

が

試

み ら れ た が

， 現在

ま で

の

と

こ

ろ

， 実

用

的 手段

^を

開 発

す る ま で

に

は 至

っ

て

^い

な

^い．

今

回

， 著 者

は

経 静脈 的^に

ア

^{ミ ノ}酸

を

投 与

す る

^こ

と

に

よ

^っ

て

， 確 実^に

ア ミ

^ノ酸

イ

^ンバ

ラ

ン ス

を

惹 起

で き る も の と

考

え

， 独 自^に新 組 成^の

ア

ミ ノ酸

イ

^ンバ

ラ

^{ン ス}輸液

K K M

⁻

1

及

び K K M

⁻

2 を

調 整

し

， 投 与

ア ミ

^ノ酸^の組 成

を

変 化

さ せ た

場合^に

み ら れ る

宿

主 な ら び

^に

腫

瘍^に

及 ぼ す

影 響

を

動 物 実験^モ

デ

ル に

お

^い

て

検 討

し た

^．

材 料

お よ び

方

法 l

^． 実験 材 料

1

^． 実験 動 物

全実 験

を

通 じ 約

6

適 齢

の

雄 性

ド

ン

リ

ュ ^ー

ラ

ッ

ト

く静 岡 実験 動 物， 浜 松I

を

使

用 し た

^． 実 験 開 始

ま

^で

は

，

一

定

の

空 調 室 内^で固 型飼 料 く

C h

a r

l

e s

R i

v e r 社 製l

及 び

水 道水

を

自 由経

口

摂 取

せ し め た

．

2

^．

腫

瘍

ド

^ン

リ

^{ュ ー}

ラ

ッ

ト

由 来

の ラ

ッ

ト

腹 水 肝 癌

A H

⁻

1 3 0 は

金沢 大 学

^{が ん}

研 究 所

よ り

分 与

^{を う け た}

^．

^{A 軋 1 3 0}

細 胞

は

同系

ラ

ッ

ト

腹 腔 内^に移 植，継 代

し

， 移 植¹

0 日

目の

腹 水細 胞

を

実験^に供

し た

．

3

． 輸 液 製剤

高菜

グ

^{ルコ ー ス}電 解質 液

と し て

^{バ レ}

メ

ン

タ

^{ー ル 魯}

A

及

び B

く大

五

栄 養，

グ

ルコ ^ー ス濃 度

3 2

^．

5 W

ノ

V

％1

を

，

ま た

総 合

ア ミ

ノ酸 製剤

と し て F A O

ノ

W B O

基 準^射に

も と づ く

市 販

の ア

^{ミ ノ}酸輸 液^モ

リ ブ

^{ロ ン 魯}

を

使

用 し た

^．

さ ら

に

ア

ミ ノ酸

イ

^{ン バ}

ラ

ン ス輸 液

と し て K K M

⁻

1

及

び K K M

⁻

2 を

使

用 し た

． モ

リ プ

^{ロ ン 魯}，

K K M

⁻

1 及 び K K M

⁻

2 の ア ミ

^ノ酸 組 成

は

表

1

に ^一 括 表

示 し た

^．

K K M

⁻

1 で は

モ

リ プ

^ロ ン

魯 の

組 成^か

ら

含 流

ア

ミ ノ酸

m et

h i

o n

i

n eく

M

etl， CySt

i

n e く

C

ysほ 除

き

， 他の

ア

ミ ノ酸

を

等^{モ ル}

比

率

で

増

量 し

^， 総

ア ミ

^ノ酸含 有 量

が

モ

リ ブ

^ロ ン 魯

と

等

し く な る よ う

^に調 整

し て あ る

^．

ま た

，

K K M

⁻

2

で

は K K M

⁻

1 と

同様，

M

et及

び C

ys

を

含

ま な

い

う え

^に全

ア

^ミ

ノ

酸^の

50

％

を

^{a r}gi ⁿ

ⁱ

^{n e} く

A

rgl ^で置 換

し

， 残

り 5 0

％

は

モ

リ ブ

^ロ ン 食中^に含

ま れ る M

et，

C

ys

及

び A

rg

以

外の

ア

ミ ノ酸の比 率

の

約1ノ

2

に調 整

し て

あ

る

^．

4 ． 輸液^{シ ン}

テ

ム

ラ

ッ

ト

に対

し

無 拘束 下^に輸 液

を

行

う た め

の装 置

と し て B i

o^．

C

a n n u

l

a

恐

く^バ

イ オ

^．

メ デ イ カ

社製l

を

使

用 し た

．

ま た

， 輸 液

の

注

入

^に

は

， 電 動 輸 液

ポ

ン

プ

く^マ

イ ボ

ン

B

型

^命

， バ

イ オ

^{． メ}

デ イ カ

社 製1

を

使

用 し た

^．

T

a

b l

e l．

A

m

i

n o a c

i d

c o m po s

i

t

i

o n o

f M

o r

i

pr o n，

K K M

⁻

1

a n

d K K M

⁻

2

M

o r

i

p^{r o n}

K K M

⁻1

K K M

⁻

2

地 血 L

yS

M

et

P ト

e

T ト

r

T

rp

V

a

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S

C

_yS

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yr

A l

a

A

rg

A

Sp

G l

u

G l

y

P

r O

S

e r

0

．

5 6 0

1．

2 5 0 1

^．

1 0 0 0

^．

3 5 0 0

^．

9 3 5 0

．

6 5 0 0

．

1 3 5 0

．

4 5 0 0

^．

8 1 1 0

^．

1 4 5 0

．

0 3 5 0

．

6 2 0 0

．

9 5 5 0

^．

3 8 0 0

^．

6 5 0 1

^．

0 7 0 0

．

3 3 0 0

．

2 2 0

0

．

5 8

5

0

．

3 2 0

1．

3 1 0 0

．

7 2 0 1

^．

1 5 5 0

^．

6 3 5

0

^．

9 8 0 0

^．

5 4 0 0

．

6 8 0 0

．

3 7 5 0

．

1 3 5

0．

0 7 5 0

．

4 7 0 0

．

2 6 0 0

^．

8 5

0

0

^．

4 6 5

0

．

0 3 5 0

．

0 2 0 0

．

6

5

0 0

．

3 5 7

1．

0 0 0

^5．

3 0 0 0

^．

4 0 0 0

^．

2 2 0 0

^．

6 8 0 0

^．

3 7 5

1．1

2 0 0

．

6

1

5 0

．

3 4 5 0

．1

9 0 0

．

2 3 0 0

．1

2 5

1

0

^．

6 4 1 1 0

^．

6 2 5

1

0

^．

6

1

0

く

M

ノ

V

％I

H

． 実 験 方

法

1

^． 癌 細 胞浮 遊 液^の調 整

A H

⁻1

3 0

移 植

ラ

ッ

ト

^か

ら

採 取

し た

癌 性 腹 水

を

， 燐 酸 緩 衝 液， p

H 7

．

4

く

P B S

I ^{に て}約

5

倍^に希 釈

し

，

ト リ

^パ

ン^．

ブ

^{ル ー}

く0

^．

2

％，

M

e r c

k

l 排 除 試 験 法^に

よ り

生細 胞

数

を カ ウ

^ン

ト

後，生細 胞 数^{1 X l}

O

⁸個ノ^m

l と な る よ う

^に

P B S

に

て

希 釈

し

， 癌 細胞 浮 遊 液

を

調 整

し た

．

2

^． 実験

1

こ

ア

ミ ノ酸

イ

^ンバ

ラ

ン ス の誘 導

と

検 査事 項

い 実験 群^の設 定

担癌

ラ

ッ

ト は

各群

6 匹

宛

と し

， 次の

5

群に分

け た

^．

工

群 く対

照

群

う

， 総合

ア

^{ミ ノ}酸製 剤

く

^モ

リ ブ

ロン剣 投 与群

Il

群，

K K M

⁻

1

投 与 群

工 II

群，

K K M

−

²

^{投 与 群}

工V

群，

生 理

食

塩

水投 与 群

V

群， 固

塑

飼 料^の経口自 由 摂 取群

工

^へ

1 ヤ

群の高 張

グ

^{ルコ ー ス}液 投 与

量 は

， 遠 藤

ら

^{1 0 1の} 方 法^に 準

LI

， 1

60

m

l

ノ

k

gl

d

ay く

グ

ルコ ^ー ス

50

gl

k

gノ

M e

t

， m e

t

hio nin e

i

N P C，n O n⁻

p

^{r O}

t

ein c alo rie s

ニ

P B S，

p

h o s

p

h a

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e buffered s alin e

三

P he

，

p

he n

y

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ala nin e

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R N A， ribo n u cleic a cid

_三

T d R，

t

h

_y

midin e

三

T hr．

t

hr e o nin e

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T P N ，

t

O

t

al

_p

a r e n

t

eral

n u

t

ri

t

io n

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T r

p

，

t

^r

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^O

p

h_{a n e}

_i

T

_y

r

，

t y

^{r O S}in e

三

U R

，u rid in e

三

V al，V al

i

ne．

腫壕 増 殖^に

及 ぼ す ア ミ

^ノ酸

イ

^ンバ

ラ

ン ス輸 液^の影 響

T

a

b l

e

2

．

I

ng^{r e}

d i

e nt_{s o}

f

n utr

i

t

i

o n a

l

r eg

i

m e n s

9 7

G

r o up

I G

r o up

II G

r o up

江王 G

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I V

G l

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E l

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P

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M

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A

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o sp h^at_e

G l

u c o n ate

S

u

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i

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id

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E

s s e nt

i

a

l N

o n^．e s s e nt

i

a

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ノ

N

r at

i

o^半

N P C

I

N

r at

i

o ^粕

くpe r

k

gノ

d

ay

l

くpe r

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gl

d

ay

l

くp^{e r}

k

_gノ

^d

^ayI くpe r

k

gノ

d

ayI

50

g

5 0

g

5 0

g

5 0

_g

1

7

■

6

^m

E

_q

1 7

．

O

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^．

8

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E

q

6

．

O

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q

6

，

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6

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6

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E

q l−

6

^m

E

_q

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．

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^．

6

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E

_q

l

^．

2

^m

E

_q l．

2

m

E

q

l

．

2

^m

E

_q

l

．

2

m

E

q 1

5

^■

3

^m

E

q

1

4．

5

m

E

_q

26

．

2

^m

E

q 1

5

．

4

m

E

q

1 0

．

O

m

E

q

l O

^．

O

^m

E

_q

l．

6

^m

E

_q

l

．

6

^rn

E

q

l

．

6

^m

E

q

l

．

6

m

E

q

l

^，

2

m

E

q

l

．

2

^m

E

_q

3

．

8

g

3

^．

7

g

3

．

6

g

3

^．

7

g l．

n

4

1

．

0 0

1

68

1

6 8

1

0

^．

O

m

E

q

l O

．

O

^m

E

_q

l

^，

6

m

E

_q

l

^．

6

m

E

q

l

^．

6

^m

E

_q

l

^．

6

m

E

q

l

，

2

m

E

q

l

^．

2

^m

E

_q

2

．

O

g

5

^．

4

g

O

^．

3 7 1 6 8

m

E

_q，

M illi

equ

i

v a

l

e nt こ^ホ，

R

at

i

o o

f

e s s e nt

i

a

l

l^{n o n．e s s e nt}

i

a

l

a

m i

n o a c

i d

sこ

＋ホ

，

R

at

i

o o

f

n o n⁻pr Ote

i

n c a

l

o r

i

e sl

n

i

tr oge n．

In

f

u s

i

o n o

f

a m

i

n o a c

i d p

^{r e}

p

^{a r at}

i

o n Fa s亡

i

n

g

1 2

す

3 4 5 6 7

工

m

p l

^{a n亡a亡}

i

o n

c

a占n u

l

a亡

i

o n

O

f A H 1 3 0 ふ d i

v

i d i

n

g i

nto

g

^{r o u}

p F i

g⁻1．

P

r oto c o

l

o

f

e xp^{e r}

i

m e nta

l

pr o c e

d

u r e．

d

ay^，

20 0 k

c a

l

ノ

k

gノ

d

ayl

と し た

．

ま た

，

I

^へ

I工 I

群の

ア

ミ ノ酸 製剤投与量

は

7 0 m

l

l

k

gl

d

ay け ^{ミ ノ}酸

7

^．_{4 g}l

k

_gノ

d

ay，

窒

素^1．1

9

_gノ

k

_gl

d

ay

うと し た

．

I

^へ

工 II

群^の非

蛋

白

カ

^ロ

リ

^ーノ窒素

比 くN P C

I

N

r at

i

o

l は

約¹

6 8

で

あ る

．

な

お_，

I V

群^に

は 70

m

l

ノ

k

gl

d

ay の

生 理

食塩 水

を

投 与

し た

^． 各群^の輸 液^の組 成

は

表

2

に

示 し た

．

2

J

実

験

計

画

30 匹

^の

ド

ン

リ

ュ ^ー ラ_ッ

ト

の側 腹

壁

皮

下

^に前 記 癌 細 胞

浮

遊 液

0

^．1D l

l く生

細 胞 数

1

^x l

O

⁷個う

を

接 種

し た

．

1

0

^へ1

2 日

後，腫 瘍 径

^が

約

2 0

m m に達

し た

時 点で

2

4 時 間絶 食

^さ

^せ， 次い で

N

e m

b

uta

l

^偲くp^{e n}to

b

a r

b i

ta

l

⁻

N

a

l

の腹 腔 内 投 与^に

よ る

全

身

麻 酔 下に

S

te

i

ge r

ら

^{1 り}， 宗

田 ら

^{1 2−}の方

法

に準

じ

て_， 右 頸静 脈

よ り 上

大 静 脈に シ

リ

^コ ン

カ テ

^ー

テ

ル

を

挿

入 し

， 無 拘 束下^に

7 日

間 輸液の持 続 点滴

を

行^っ

た く図

り．

8

t

S

a c r

i f i

c e

3

1 測 定車 項

i l

体

重 及 び 腫

瘍

重 量

点 滴 開 始直 前

と

，

7 日

間の点 滴終

了

後の

2 回

体

重 を

計

測 し

， 各 時 点^{で の}計 測値か

ら 腫

瘍

重 量 を

差

し

引^い

た

値

を

宿

主

体

重 と し た

． 宿

主

体

重

の変 化

は

， 点滴 前 後^の 宿

主

体

重

^の増 減

を

，点 滴 前値^に対

す る 百

分率で表

し た

．

腫瘍

重 量 は

， ス ラ

イ デ

ィ ン

グ キ

ャ

リ

^{バ ー}

を

使

用 し

て

腫

瘍の長 径

くL

， m m

う と

短 径，

くW

， m ml

を

計 測

し

，

次

式^に

よ

っ

て

算 出

し た

．

腫

瘍 重

量 く

mg

l

^ニ

L

^x

W

²ノ

2

膿 瘍

重 量

の変 化

は

， 点 滴 前後の腫 瘍

重

量^の増 減

を

，

点 滴 前値に対

す る 百 分

率^で表

し た

．

i

り 窒 素

平

衡 値

点滴 期 間 中^に排

泄 さ れ た

尿

は

，

ト

^ルエ ン

0

^．

1

m

l を

滴

下 し た

^フ

ラ

^スコに採 取

し

，毎

日 K

je

l d

a

h l

法に

て

尿 中 総

窒素 量

を

測 定， 算 出

し た

． こ

れ を

， 輸液 中の窒 素

量

か

ら

差

し

引^い

て

， 窒 素平 衡 値

を

求

め た

．

な

^お， 点 滴 開 始

2

⁴時 間前^か

ら の

絶食

の た め

， 点 滴 期 間 中

の

糞 便 排 泄

量 は き わ め て

少 量

で あ

^っ

た

の で， 糞 便 中^の窒 素 量

は

無 視

す る

こ

と と し た

．

ii

り 血 液生 化 学 検査

7 日

間^の点 滴 終

了

後，

N

e m

b

uta

l 魯

腹 腔 内 投 与に

よ る

全 身麻 酔下に開 腹

し

，下 大 静脈

か ら

^{ヘ パ}

リ

^ン採 血

し

，

以 下の項 目^につ い

て

測 定

し た

．

a ． 血 襲

ア ミ

ノ酸

ア ミ

ノ酸 自 動分 析 機くJ

L C

⁻

20 0 A

，

日

本 電

子

I^に

よ

^っ

て

，

9

種

の ア ミ ノ

酸，

す な わ ち

^{v a}

li

n e く

V

a

l

l ，

M

et_，

i

s o

l

e u c

i

n eく

Il

el ，

1

e u c

i

n e く

L

e ul ，t y^{r O S}

i

n e く

T

yrl ，

p

h

e ny

l

a

l

a n

i

n eく

P h

el ，

1

ys

i

n eく

L

ysl ，

hi

st

id i

^{n e}く

H i

sl ，

A

rg

を

定 量

し た

^．

b

^． 血 清

G O T

及

び G P T

血 清

^{G O T}

及

び G P T は S S C C

準 拠法^で測 定

し た

．

C ． 血 清 尿素 窒 素 く

b l

o o

d

u r e a n

i

t_{r o}g^{e n}，

B U N

l 血 清

B U N は U

r e a s e

U V

法^に

よ

っ

て

測 定

し た

．

d

^． 血 清

ク

^レ

ア チ

^{ニ ン} くc r e at

i

n

i

n e，

C

rl 血 清

C

r

は

安

田

反 応 変法^に

よ

^っ

て

測定

し た

．

4

フ 病

理

組織 学 的 検査

実験 終 了 後

の ラ

ッ

ト は

脱

血

屠 殺 後， 肝

を

摘 出

し ホ

^ル

マ

リ

^ン固定

し た

． 固 定後， 切 片標 本

を

作 製

し

，

H

⁻

E

染 色，

P A S

染 色，

ジ ア

ス

タ

^ー

ゼ

処

理 P A S

染 色

お よ び ズ

ダ^{ン 一}

正I

染 色

を

施行

し た も

の に つ い

て

， 肝 細 胞 内^の脂 肪 沈 着 及

び

グ

リ

^{コ ー}

ゲ

^ン

量 な ど を

観 察

し た

．

3

^． 実 験

2

こ

ア ミ ノ

酸

イ

^{ン バ}

ラ

^{ン ス}輸 液 投 与 後

の ラ

ッ

ト

腹水 癌 細 胞^{に お}

け る

³

H

⁻t

h

y^m

id i

n eく³

H

⁻

T d R

l 及

び

³

H

^．u r

i di

n e く³

H

⁻

U R

l ^の取

り 込 み

い 実 験群

の

設 定

実 験

1

に お

け る と

同様，

工

群

は

総 合

ア

^{ミ ノ}酸 製 剤

を

，

工 I

群

は K K M

⁻

1 を

，

H l

群

は K K M

⁻

2 を

，

工V

群

は

食 塩 水

を そ れ ぞ れ

投 与

す る

群^に分

け

， 各 群

3 匹

宛

と し た

．

2

う 実験 計 画

1

2 匹 の ド

^ン

リ

^{ュ ー}

ラ

ッ

ト

^の腹 腔 内^に前 記 癌 細 胞 浮 遊 液

0

^．

1

^m

l

く生 細 胞数

1

X

l O

⁷個ン

を

接 種

し た

．

5 日

後

か ら 2 4

時間^の絶 食

を

行^い，実験¹

と

同様

の

方 法^で

上

大静 脈

^{に カ}

^{ニ ュレ ー ション}

^を

施

し

， 無 拘 束 下^に

7 日

間 輸 液

の

持 続点 滴

を

行っ

た

．

3

1 ³

H

^r

T d R

及

び

³

H

⁻

U R

の取

り 込 み

点 滴終 了 時^に

^ラ

^ッ

^{ト の}

腹 腔 内^か

ら

癌 性 腹 水 約

1

m

l を

採 取

し

，

た だ ち

^に

1 0

m

l の

赤

血

球 除去

^{用 ト リ}

^ス緩 衝 液くp

H 7

^．

6 5

I

と

浪 私 室 温^に

5

分 間放 置 後， 1

5 0 0

rp^m ，

1 0

分 間遠

^{心 し た}

^． 細 胞

は M E M

培地 く

日

水 製 薬1

で 1 回

洗 浄後，

8 0 メ

ッ シ^ュ

の

ス

テ

ン レ ス網

で

濾 過

し

，

さ ら

に

も

う

1

回

M E M

培 地

で

洗 浄

し た

^． 洗浄 癌 細 胞

は 5

％

仔 牛

血

清 加

M E M

培 地に浮 遊

せ し め

，1 X

l O

⁶

個

ノm

l

の

癌細 胞 浮 遊 液

を 調

製

し た

．

1

検 体^{に つ}

き 6

本^{の ゴ ム}栓 付

小

試験 管

を 用

意

し

，

そ れ ぞ れ

に

上

記 癌 細 胞 浮遊 液

^を 1

m

l

宛 分注

し

，

そ

の

3

体^に

は

m et

h

_y

l

^T3

H

^．

T d R

ほ 本

ア イ ソ ト

^ー

プ

協 会I ^I p

Ci を

， 残

り 3

本^に

は 6

⁻³

H

⁻

U R

ほ 本

^{ア イ}

^ソ

^ト

^ー

^プ

協

会

う 1 ノ^上

Ci を そ れ ぞ れ

添 加

し た

^．

3 7

^Q

C

，

6 0

分 間の

イ

^ン

キ

^{ュ ベ ー ション}後，

た だ ち

^に 水 冷

し

，グ

ラ

ス フ

ィ

^ル

タ

^ー く4

2

4 m m ，

W h

atm a n 社製l

で

細 胞

を

濾 集

し た

． フ ィ ル

タ

^ー

上

の細 胞

は

，

生

食 水で

2

回，

5

％

ト リ ク

^{ロ ー ル}酢 酸^で

2 回

， エ

タ

^{ノ ー ル．エ ー}

テ

ル

混

和 液 く^{4 ニ}

1

う

で 2 回

洗浄 後， 風乾

し た

．

グ ラ

ス フ ィ ル

タ

^ー

は

，風 乾 後¹

⁰

^m

^l

^の

^ト

^{ルエ ン．シ ン}

^チ

^{レ 一}

夕

^ー く

A C S II

，

A

m e r s

h

a m 社 製1

を

含

む

^バ

イ ア

^ル

瓶

^に

入 れ

， 液 体^{シ ン}

チ

レ^ー ショ ン

カ ウ

ン

タ

^ーく

L S じ 7 00

，

ア

ロ

カ

社 製う ^に

よ り

放射 活 性

を

測 定

し た

．

な

^お， 全 実 験

を

通

じ

， 測 定 値

の

有 意 差 検 定

は

，

C

o c

h l

a n^．c o x

の

t検 定 法^に

よ

^っ

た

．

成 績

種^{々 の}

ア ミ

^ノ酸 輸 液

を

点 滴 注

入 し た A H

1

3 0

担 癌

ラ

ッ

ト

に お

け る

， い 宿

主

体

重 及 び 腰

瘍

重 量

の変 化，

2

1 窒 素 平 衡の増 減，

3

う

血

液

の 生

化学 的変 化 等^につ い

て

検 討

し た

．

工

．

体 重 及 び

腫瘍

重 量

^の変 化

7 日

間点 滴 後

の

宿

主 の

体 重 変化

は

，点 滴 前^に比 較

し

，

I

群

が

⁻

0

^．

9 5

^土

4

^．

25

％ く^{m e a n 士}

S

^．

D

^．，

以 下

同様l，

II

貢

ご

l

盲

−

中

蓼

音

． q 亡₋

芸 ど 屋

U

0

0

0

一

7

2

−

一

L IL llI I V V

G

^{r o u}

p

Fi

_g^．

2

^．

C h

a nge s

i

n

b

o

d

y ^w e

i

gh ^t．

^{T h}

^{e c}

^h

^{a nge s}

ⁱ

ⁿ

b

o

d

y w e

i

gh^{t w e r e}

^d

^e

^fi

^{n e}

^{d b}

y t

h

e

f

o r m u

l

a o

f

ニ

く

T b

⁻

C b

l

C b

^X

l OO

く

T b

，

b

o

d

_y w e

i

gh ^t

^b

^e

^f

^{o r e s a c r}

^ifi

^{c eニ}

^{C b}

^，

^b

^o

^d

^y

w e

i

gh^t

^b

^e

^f

^{o r e c a n n u}

^l

^at

ⁱ

^{o n}l^{− ホ，}

^M

^{e a n士}

^S

^．

^D

^．

G

r o up

I

v s． gr o up

III

a n

d

g^{r o u}p

III

v s■ gr O up

I V

，P く

O

t

O5

三 gr O up

I

v s． g^{r o u}p

I V

，p く

0

^．

0

1．