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関 す 研究 各種 肝 胆道系疾 患 け 肝細胞内鋼頼粒

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金 沢 大 学十 全 医 学 会雑 誌

9 6

1

1

5

2 9

1 9 8 7

1

1 5

各 種 胆 道 系 疾 肝 細 胞 内鋼 頼 粒 研 究

病 的断学的 意

食 沢 大学 医学 部 第

学 許 座 く主

田 五 六

教 授1

6

21

月 6 日

受 付I

各種 胆道 系疾 患

7 2 1

パ ラ

ル ア ミ ノ

チ リ デ

網検 出 法 く

糾 検 出 法1

染色

肝 細 胞 内沈 着

す る

網 顆 粒

検 索

し た

な お

鋼 検 出 法 陽性鋼 顆 粒 着僅 度

肝 組 織 内鋼 塵

反 映

し た

網 棚 粒

肝 小葉

再 生 結節

緑 部

肝 細 胞

核 周 囲

ま る も の と

肝 細 胞毛 細 胆 管 周 囲

ま る も の が あ

W il

s o n

1

で は

核 周 囲性

の も

毛 細 胆

開性

混在

鋼糟糠腸憮何個

核 周 囲 性

の も

で あ

銅 噸粒 陽 性 例

4

分頬

で き た

1

原 発性 胆 汁惟 肝 硬 変 原発 性 硬 化性 胆

A l

ag

ill

e 症 候 群

で は

網 顆粒 沈 瀞

高率

榔 闇 系 疾 患 商 率群

1

病 購進 行

し た

高 度

で あ

2

肝 外 閉 塞性 黄 痘 く

ほ と ん ど が

急 性例う

で は 低

軽 度

で あ

た い

胆道 糸痍 恩 低 率群

1

3

慢 性 情動 性 肝 炎

性肝 線 維症

で は

ごあ

た く

肝疾 患 低率 郡上

ず れ も 小

熊改 築進 行

し た

に み

1 れ た

4

W il

s o n

1

で は

中 等 鷹沈瀾

れ た

胆 道 系疾 患 商 率群

で は

黄痘 陽性 例 全例中 等 度 高 度鋼 顆 粒

ら れ

無 煎頂 例

で レ

半数

以 上

銅 噸 粒

ら れ た

胆 道 系疾 患低 率群

で は

爵 痘例に の み 錮粕 粋

J

れ た

肝 疾 患 低 率郡

で は

繭膜

有 無

銅 顆 粒 沈関連 性

は な か

れ ら

所 見

胴 汁

ぺ臥

持続 期 間 胆 管 糸障 軍 部亜

と そ

程度 肝 線 維 化 肝細 胞 障 害

複 合的網 棚 拉沈 掛関 連

す る と

わ れ た

以 ヒよ り

各種 肝胆 道 系 疾 患

頻度

鋼 顆粒

検 出

さ れ

状 態

痛 的 悪戯

が あ

ヒ検 診 断

亨 1 と

れ た

K e

y

w o rds 肝 細 胞 内 鋼 顆 粒 胆 汁 う 肝 生 検 網 代 謝

は 隼 理

体 内存ノ

る 必

墳 微

金属

1

で あ

と し て

指 腸lt

さj

L

較 的 急速

り 込 ま れ

C e r u

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l

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h

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i

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な ど

鋼 結 合 蛋 川

用 さ れ る

そ し て

ん ど

汁 中

粧 さ れ る

1 I コ,

網 代謝

仲 代 謝 異常

W il

s o ll

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lf

j

L

ま た

J

J

jl

l

楳 患に お

糾 代

現 し

性胆 汁 性 肝

げ B C う で 人 品

肝 組 織 内

す る

と が

1J

れ て

j

l 卜 1 ニー

近 隼

S i

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N

1

k

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一,

肝 細 胞 内

メ タ

ナ オ ネ イ

結合

こ の

錮 結 た 性

白頃

が S hi k

ata

Jj

ル セ

染 色

ま る

と が

と な

ま た

肝 組 織 内鋼 塞

光 法

よ り 比

較 的容 易

出来

組 織 内嗣 沈 着機序

意 義

注目

さ れ

1 卜 1 封

報 告

は P B C や W il

s o n

な ど

J12 3 の胆 道 系疾 患

ら れ て

こ で今 臥 著 者

H

し ば し ば

経 験

す る

各棟

胆 道 系 疾 患

対 象

と し

肝 細胞 内

組 織 化

程 度

ま る

を知

胆道 糸 疾 患に お

け る

網代 謝異 常

を知 ろ う と

さ ニ

L

着 像

理 形

態 診 断

う か

検 討

し た

従 来 肝 組 織 内染 色 方法

と し て

の バ ラ

ミ ノベ ン

チ リ デ

嗣 検

法 く

鋼検 出法

鋼 検 出 法

T i

r1 1 n l

嗣 検 出 法

な どが

ら れ て

1 0 I l 巾1 引

嗣検 出

A b br e via

t

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P S C

P

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is

(2)

特 異性

検 出感 度

な り

ま た

T i

m m 鋼 検 出 法

検 出感 度

非 常

金 属

え ば

や 亜

な ど も

可染

さ れ る

1 0 H 吊

今 回研 究

で は

あ る

程 度

染 色 感 度

特 異 性

あ る

鋼検 出 法

を 用

1

さ ら

肝 組 織 内 銅

子 吸

光 法

よ り

化学 的定 立

6 1

ま た

鋼 結 合 蛋 白

め る オ

ル セ

染 色

よ び X

線微 少 部 分析 31

同時肝 細胞沈 着

す る

病 的 意 義

検 討

対 象

お よ び

方 法

昭 和

5 8

1

か ら

昭 和

6 1

9

ま で

金沢 大 学 医学 部第

学 教室診 断 目 的

ら れ て

5 57

例 く針 生 検 肝

5 52

外 科 的 生 検 肝

あ る

分 的 外 科切 除肝

5

例1

お よ び

金 沢 大 学 医 学 部 中 検 病

福 井 県 立病 院

部 市民 病 院最 近生検

1 6 4

例 く針 生 検 肝

7 7

外 科 的 生 検 肝

あ る

分 的 外 科 切 除肝

8 7

例う

対 象

と し た

で は

重 複

し て

肝 生検

わ れ た

6

新 生 児肝 細 胞 内

銅 顆 粒

染 色

さ れ

鋼顆 粒 沈着病 的解 釈

困 難

と さ れ て

2 1 鋸 研 究

で は

れ も 5

以 上

小 児 及

対 象

と し た

れ も 1 0

% 中 性ホ ル

固 定 後

包 埋

さ れ た も の で あ り

5

切 片

作 製

ン の

H E

染色

ア ザ

染 色 ゴ モ

リ の

鍍 銀 染 色 後 述

ル セ

染 色

鋼 染 色

肝 生 検

形 態 学 的 診 断

臨 床所 見

よ び

生 化 学 的 所 見

考慮

し て

慢性 肝 炎

国 際 分 類慢 性 活 動性 肝 炎 く

C A H

l

慢性 持 続 性 肝 炎 く

C P

に 二

C A H は さ ら

S

c

h

e u e r1 9 1門 脈域 相

互 あ る

門脈 域

静 脈

と を

隔 壁軽 度群

程 度に こ

れ ら の

隔 壁

を 示 す

中等 度 高 度 群

と し た

性 肝 障 害

文 部 省 科 学 研 究 費 総 合 研 究

く班 長 武 内 重

郎 教 授う2 0I月旨肪肝

性 肝 炎

性 肝 線椎 症

性 肝 硬 変

と し た

肝 線 維 症

を さ ら

隔壁 形 成

軽度 群

程 度隔壁 形 成

不完 全

結 節 形 成

を 示 す

中 等度 高 度群に 二

し た

な お

脂 肪 肝

の 原

よ る

脂 肪 肝

検 討

し た

P B C の

病 期

田 ら

2 無線 維 化 期 線 維 化 期 硬 変 期

と し た

原 発 性 硬 化性 胆 管 炎 げ

S C

病 期

し て も

P B C

そ れ

無 線 維 化期 線椎 化 猟 肝 硬 変 期

と し た

肝 外 閉 塞 性黄 痘

黄 痘持続 期 間

月 未 満

以 上

の に 二

し た

ル セ

染色

は S h ik

ata

ら の

変 法

ま り

5

パ ラ フ

切 片

ラ し

0

3

%過

酸 液前 処

3 0

1

分う

1

5

%修 酸

脱 色 後

ル セ

溶 液

くI 溶 液

1 0し

1n l

l

0

2

g の

ル セ

濃 塩 酸18Il

2

時 間 反応

さ せ

7ぐ フ%

ア ル

で 分

脱 水

入 し

鏡検

し た

そ し て

肝禰川包内J鳩 界J う鋭 利

ま る 黒

褐 色 赤褐 色顆 粒 物

陽性

と し

検 索 対 象

と し た

胴 染 色

と して

胴検 出 法

キ 剛

ま り

5

声 の パ ラ

ラ し

新 調

し た

染 色 液

く7

% 酢 酸

リ ウ ム

1

m

l

十 パ

ラ ジ

ア ミ ノ

チ リ デ

飽 和

3

m

3 6

0

C

2

4 時間

崎 間

蒸 留 水水 洗 後

ト キ

シ リ

柁 梁

脱 水

入 を

鏡 検

赤褐 色 赤 紫 色

ま る

顆 粒 物

鋼 陽 性

と し た

同 染色 法

水 銀

ウ ム 白 金等 金属 化 合 物

陽 性 反 応

を 示 す が

蒸 留 水1 0 1

H

l l

l

メ チ

ア ミ

チ リ テ

飽 和 柄 油

5

m

l

1 N

硝 酸

3

m

l

3

%過 酸 化 水 素

5

m

l

敏 也 洒

で は

反 応

金 属

は 反

化 学 定

よ び

0

嗣 検 出 法

め た P B C 3

と W il

s o n

1

を と

記 対 照 反応 液 内

反 応

さ せ た が

陰 性

で あ り

鋼検 出法

で 反

す る

物 質

判 断

し た

肝 細 胞

び ま ん

赤 褐 色

ま る 症

P B C

P S C

W il

s o n

で し

ば見

ら れ た が

ず れ も

嗣 確 粒 沈

着 高 度例

媒 染

可 能 性

も あ り

研 究

で は

陽 性

と は し な か

鋼 染 色

と オ

ル セ

慄 色 性 対 照

と し て P B C

剖 検 肝 く後 述化 学 的 定 量

1 3 3 1

JLglg

d

ry

li

v e r鋼 量

を 示 す

常 値

は 2 2

9

5 2

1

JLgg

d

ry

li

v e rl

肝 切 片

を 用

ま た

鋼 頼 粒

と オ

ル セ

陽 性 顆粒沈 着 程 度

半定

表 現

し た

す な わ ち

ま ら な

陰性 肝 小 葉

あ る

再 生 結節

縁 部 肝 細 胞陽性 頑 粒

め る も

軽度 肝 小 葉

あ る

再 生 結 節

綾 部

ほ と ん ど

肝細 胞陽 性 塀 粒

め る も の を

高 度

と し

中間

中等 度

と し た

組 織 化 学 的中等 度 高度鋼 顆 粒沈 着

ら れ た P B C 6

で は

肝 生検 採 取 時肝 組 織 片

2

5

切 し

定 液

で 1

2

時 間 固 定

ス ミ ウ ム後 固 定

脱 水

酸 化

置 換 後

E P O N 81 2

埋 し た

ト リ

ミ ン

L K 王 ヨ

4

8 0

1 で

超薄 切 片

作 製

酸 鉛

よ び

酢 酸

ウ ラ

ル の 二

染 色

透 過

顕 微

くJ

E M l O O 別 で

観 察

し た

さ ら

れ ら

6

症 例

を 用

X

線微 少部 分析 法で 二

次 X

分析

す な わ ち

E P O N

埋 ブ

よ り

0

5

J 切 片

作 製

H i

ta c

h i

(3)

肝細 胞内 鋼 棚職

F i

g

1

C

叩 Pe r gl

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3 2 5

1 7

(4)

K

e v e x

7 0 0 0 く

加 速電

圧 7 5 k

e

V

l で 二

X

検 出

し た

引 用

P B C 4 4

肝 外 閉 塞性 黄痘

2

W il

s o n

1

で は

肝生 検 時 肝組 織

対 照

と し て 正

常成

剖 検 肝

6

肝 組織

を 用

以 下

肝 組 織 内鋼

定 量

411 61採 取

し た

肝 組 織

を デ

乾 燥

さ せ

乾 燥 肝 重 量

め た

乾燥 肝

硝 酸 過 塩 素 酸 く

4

い 混 合液 中

溶 解

さ せ た

れ を

イ オ

し た

蒸留 水

で 2 00

m

l

に メ ス

プ し

れ を

試 量

と し た

網 走 量 方 法

と し て

鋼 標 準 液

1

m gm

l

く関 東 化学

K K

製つ

1 N

H C l

2

5

5

0

7

5

声 g

m

l

希 釈

添加

鋼 標準 液

と し た

試 量

よ り

4

試 験 管

そ れ ぞ れ 2

O

m

l

分 取

そ の

分 取 液

2

5

5

0

7

5

月 gm

l の

銅 棒 準 液

を 1 0 0

1

添 加

混 合 液

吸 光 分 光 光 度 計 く

1

ntr u me nta t

i

o n

L

a

b

o r ato ry 社 製

l し2 5 1

型1

か け

そ れ ぞ れ

吸 光 度

波長

3 2 4

7

n m

測 定

し た

各 液吸 光 度

単 位 試量 当

た り

鋼 添 加 量

方眼 紙

ト し

試 料 中

鋼 添 加 量

測 定

は メ デ ィ カ

サ イ

ン ス特殊 分 析 室 く東京 都フ 協 力

推 計 学 的 処

理 は

X

2検 定

お よ び S

pe a r m a n順 位 相 関 係数

危険 率

が 0

0 5 以

を も

有 意差 あ

判 断

し た

細 胞 内鋼 顆 粒 沈 着

鋼 検 出 法

陽 性

ま る

嗣 顆 粒

染 色

ン に

の 2

種 傾

が み ら れ た

核 周囲 性数 個

か ら

多数

微 細

粗 剛

顆 粒

と し

ら れ

肝 小 葉

再 生 結 節 辺 緑 部

れ た

型っく図

1

2

和 胆管 様変 化

し た

肝細 胞

食 細

同様

鋼 顆 粒

が わ

め ら れ た

細 胞

陰性

電 顕 的

き さ 0

5

3

声 の

密 度

円 形 楕 円形

整 形の 二

と し て

ら れ

く図

3

限 刷 莫

X

線 微 少 部 分析 法

の ラ イ

分析

す る と

4

a

特 異 的

X

る K

a 線 く

8

0 74 k

e

V

l

検 出

さ れ

硫 黄特 異

X

K

a 線 く

2

3 0 7 k

e

V

l

同 時検 出

さd

L

れ ら の

X

さ は

頼 粒

ま た

顆 粒

で も

部 位

て 異 な り

硫 黄

と 1

M

れ る が

検 出

さ れ な

も あ

た く

4

l

1

な お

硫 黄

特 異 的

X

ス ミ ウ

グ ネ

ル の 二

X

同 時 検 出

さ れ た

Fi

g

3

S

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n X

5

0 0 0

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