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Title
フッ化物微量拡散法による離乳食含有フッ化物量測定
Author(s)
柳田, 陵介; 佐藤, 涼一; 石塚, 洋一; 杉原, 直樹
Journal
歯科学報, 116(5): 383-383
URL
http://hdl.handle.net/10130/4124
Right
Description
383 歯科学報 Vol.116,No.5(2016)
口
演
№1:象牙芽細胞における機械刺激感受性 TRPV4チャネルと piezo-1チャネルの機能
発現検索
浅野一磨1),佐藤正樹2),木村麻記2),河野恭佑2),澁川義幸2),田﨑雅和2) 1) 2) (東歯大・学生(第4学年))(東歯大・生理) 目的:象牙芽細胞は象牙質形成細胞であると同時に 感覚受容細胞としても働くことが最近の研究で明ら かになった。象牙芽細胞は細胞膜伸展を受容する機 械刺激受容センサータンパク質を発現しているが, そのイオンチャネル機構は不明であった。近年,細 胞膜機械刺激のみならず様々な侵害刺激を受容する 多刺激感受性センサータンパク質である “transient receptor potential(TRP)チャネル”が報告されて いる。我々は TRP チャネルと圧覚受容に関わ る piezo チャネルが象牙芽細胞に発現し,象牙細管内 液の移動によって生じる機械刺激を受容しているの ではないかと考えた。そこで象牙芽細胞を直接機械 刺激することで生じる細胞膜イオン電流を記録し, 象牙芽細胞の機械感受性を検討した。加えて象牙芽 細胞機械刺激によって生じる三叉神経節(trigemi-nal ganglion : TG)ニューロン間での感覚情報伝達 機構を,ニューロン活動を指標として検討した。 方法:実験にはマウス由来の培養象牙芽細胞系細胞(odontoblast lineage cell : OLC),ラットから急性 単離した象牙芽細胞と TG ニューロンを用いた。機 械刺激は細胞内陽圧刺激とガラス微小管による直 接刺激を用いた。OLC または TG ニューロンの細 胞 膜 に 生 じ る 電 流 と 電 位 変 化 は whole-cell patch clamp 法を用いて記録した。 結果:OLC に50mmHg,75mmHg の細胞内陽圧刺 激を与えると外向き電流振幅が増加し,その増加は 陽圧刺激依存性を示した。TRPV4チャネルまたは piezo-1チャネルの阻害薬は陽圧刺激で誘発される 外向き電流を有意に抑制した。象牙 芽 細 胞-TG ニューロン共培養下で,単一象牙芽細胞に対する直 接機械刺激は,刺激細胞から離れた近傍に存在する TG ニューロンに内向き電流を誘発した。Piezo-1 チャネルの阻害剤は象牙芽細胞への機械刺激で誘発 される TG ニューロンの内向き電流を有意に抑制し た。また象牙芽細胞への機械刺激は TG ニューロン に活動電位を誘発した。 考察:象牙質表面に加えられた刺激は象牙細管内液 の移動を生じる。象牙芽細胞は TRPV4チャネル と piezo-1チャネルでこれを受容し,神経伝達物質 (ATP やグルタミン酸)を放出することで活動電 位が生じ,象牙質痛が発生することが示された。