考察

消光速度の最大値は平均で10.6 ± 2.5 min^–1で，減衰の時定数は11.2 ± 0.8 min であった．以上の測定及び解析結果は，Ca²⁺流入速度は[Ca²⁺]cyt上昇直後で最大 で，以後次の[Ca²⁺]cyt上昇が生じるまで徐々に減少していくこと，すなわちCa²⁺

流入速度も[Ca²⁺]cytの振動と同期して変動していること示すものである．

が周期的に変動することは確かである．

Mn²⁺流入速度を[Ca²⁺]cyt 上昇との時間的関連で解析することにより，マウス 受精卵でのCa²⁺流入速度はCa²⁺遊離の直後に増加すること，それ以後徐々に減 少し，次の Ca²⁺遊離が生じるまでにほぼ未受精卵のレベルにまで戻ることが示 された．このことは，受精時に促進されるCa²⁺流入は，Ca²⁺遊離によって活性 化されるチャネル，いわゆるCRACを介したものであることが示唆される．哺 乳類卵でのCRACの候補として，イノシトール四リン酸（IP4）によって活性化 される Ca²⁺透過性チャネルがある．ハムスター卵に IP4を注入すると，Ca²⁺流 入 が 促 進 さ れ て Ca²⁺ス ト ア の 再 充 填 が 速 ま る こ と が 報 告 さ れ て い る

（Shirakawa & Miyazaki, 1995）．また最近，マウス受精卵でのIP3濃度はCa²⁺

振動と同期して周期的に増加することがわかった（Matsu-ura et al., 投稿準備 中）．これは[Ca²⁺]cyt上昇にともなう PLCのCa²⁺濃度依存的な IP3産生活性に よるものと考えられる．IP3の直接の代謝産物であるIP4の濃度も IP3と同様に 周期的に変動すると予想され， IP4依存性Ca²⁺透過チャネルが存在すれば，そ の活性も[Ca²⁺]cyt上昇後に一過性に活性化されると想定される．

受精卵でのCRACのもう一つの候補は，ストア作動性チャネルSOCである．

多くの体細胞と同様に，マウス卵でも Ca²⁺ストアの枯渇によって活性化される SOCE の存在が示唆されている（Kline & Kline, 1992; McGuinness et al.,

1996）．またSOCの１種であるOrai1チャネルタンパク質や，それを制御する

小胞体膜タンパク質である STIM1 が発現していることも報告されている

（Gómez-Fernández et al., 2009）．マウス受精卵で活性化される Ca²⁺流入が SOCを介したSOCEかどうかについては，本論文の研究課題４で検証する．

研究課題１では，マウス受精卵でのCa²⁺流入は，細胞内Ca²⁺ストアの再充填 のためのCa²⁺を供給することで，Ca²⁺オシレーションの維持に寄与しているこ とが示唆された．しかし，もし Ca²⁺流入が長時間持続的に増大したままの状態 だと，[Ca²⁺]cytがより高いレベルに維持されることになり，その結果卵内でCa²⁺

依存性の自己破壊的なプロセスが活性化されかねない．一過性[Ca²⁺]cyt上昇時の Ca²⁺遊離後に一時的にCa²⁺流入が促進されることは，細胞内Ca²⁺ストアの再充 填に必要最小限の Ca²⁺を供給する効率的なメカニズムであるといえるであろう．

研究課題３（第４章）では，実際にマウス受精卵でのCa²⁺流入がCa²⁺ストアで ある小胞体の内腔のCa²⁺濃度変化に影響を及ぼすかについて検証する．