5. 生薬試験法
5.01 生薬試験法
生薬試験法は，生薬総則に規定する生薬に適用する試験法で ある．
1. 試料の採取
別に規定するもののほか，次の方法によって試料を採取し，
必要ならば気密容器に保存する．
(ⅰ) 小形の生薬，切断生薬及び粉末生薬は，よくかき混ぜた
5.01 生薬試験法 101 .
後，試料50～250gを採取する．
(ⅱ) 大形の生薬はよくかき混ぜた後，試料250～500gを採取 する．
(ⅲ) 1個の質量が100g以上の生薬は5個以上を採取し，試料と するか，又は生薬を適当な大きさに切断してよくかき混ぜた後，
試料500g以上を採取する．
2. 分析用試料の調製
試料をよく混ぜ，粉末生薬はそのまま，粉末生薬でないもの は，別に規定するもののほか，粉末とし，もし，粉末にできな いものは，なるべく細かくした後，薄く広げて平均した部分を とり，分析用試料とする．必要ならば気密容器に保存する．
3. 鏡検 3.1. 装置
光学顕微鏡を使用する．対物レンズは10倍及び40倍を，接 眼レンズは10倍を用いる．
3.2. 鏡検用プレパラートの作成
(ⅰ) 切片：切片をスライドガラス上にとり，封入剤1～2滴を 滴加した後，気泡が封入されないように注意してカバーガラス で覆う．観察に用いる切片の厚さは，通例，10～20μmとする．
(ⅱ) 粉末：粉末の試料約1mgをスライドガラス上にとり，膨 潤剤1～2滴を滴加し，気泡が入らないように小ガラス棒の先 でよくかき混ぜた後，しばらく放置して試料を膨潤させる．封 入剤1滴を滴加した後，組織片が重ならないように均等に広げ，
気泡が封入されないように注意してカバーガラスで覆う．組織 片が不透明な場合は，別に粉末の試料約1mgをスライドガラス 上にとり，抱水クロラール試液1～2滴を滴加した後，小ガラ ス棒の先で混ぜながら突沸しないように加熱し，試料を透明化 する．冷後，封入剤1滴を滴加し，以下同様にカバーガラスで 覆う．
封入剤及び膨潤剤は，別に規定するもののほか，水／グリセ リン混液(1：1)又は水／エタノール(95)／グリセリン混液(1：
1：1)を用いる．
3.3. 生薬の性状の項の各要素の観察
切片は，通例，外側から内側に向かい，次いで細胞内容物の 順に医薬品各条に記載されており，この順に観察する．粉末は，
特徴的なもの又は多量に出現するもの，まれに現れるもの，次 いで細胞内容物の順に医薬品各条に記載されており，この順に 観察する．
4. 純度試験 4.1. 異物
別に規定するもののほか，試料25～500gを量り，薄く広げ て生薬中の異物を，肉眼又は10倍のルーペを用いて選びだし，
その質量を量り，異物の量(％)とする．
4.2. 総BHC及び総DDT(末は，本品の粉末を本品に読み替える) 本操作に用いる塩化ナトリウム，無水硫酸ナトリウム及びカ ラムクロマトグラフィー用合成ケイ酸マグネシウムは，それぞ れ約130℃で12時間以上加熱した後，デシケーター(シリカゲ ル)で冷したものを用いる．また，カラムは，カラムクロマト グラフィー用合成ケイ酸マグネシウム20gを200mLのフラスコ にとり，生薬純度試験用へキサン50mLを加えて激しく振り混 ぜ，直ちに内径約2cm，長さ約30cmのクロマトグラフィー管 に注入し，上部のへキサン層の深さが約5cmになるまでヘキサ ンを流出し，次に無水硫酸ナトリウム8gをカラム上端から入 れ，無水硫酸ナトリウムの上部に少量のへキサンが残る程度ま
で更にへキサンを流出させたものを用いる．
本品の粉末約5gを精密に量り，共栓遠心沈殿管に入れ，生 薬純度試験用アセトン／水混液(5：2)30mLを加え，密栓して 15分間振り混ぜた後，遠心分離し，上澄液を分取する．残留 物は，生薬純度試験用アセトン／水混液(5：2)30mLを用いて，
更にこの操作を2回行う．全抽出液を合わせ，アセトン臭がほ とんどなくなるまで，減圧，40℃以下で濃縮する．濃縮液を 塩化ナトリウム試液100mLを入れた分液漏斗に移し，生薬純 度試験用へキサン50mLを加えて5分間振り混ぜて抽出する．
水層は生薬純度試験用へキサン50mLを用いて再度この操作を 行う．へキサン層を合わせ，塩化ナトリウム試液50mLを入れ た分液漏斗に移し，5分間振り混ぜる．へキサン層をとり，無 水硫酸ナトリウム30gを用いて乾燥した後，ろ過する．残留物 を生薬純度試験用へキサン20mLで洗い，ろ液及び洗液を合わ せ，減圧，40℃以下で濃縮して約5mLとする．この液をカラ ムに入れ，生薬純度試験用へキサン／生薬純度試験用ジエチル エーテル混液(17：3)300mLを用いて1分間に5mL以下の速度 で流出する．全流出液を減圧，40℃以下で濃縮し，生薬純度 試験用へキサンを加えて正確に5mLとする．この液を共栓付 き試験管に移し，硫酸1mLを加えて，注意して振り混ぜる．
次にこの上層液から4mLをとり，別の共栓付き試験管に移し，
水2mLを加えて，軽く振り混ぜる．続いてこの上層液から 3mLを共栓付き遠心管に移し，無水硫酸ナトリウム1gを用い て乾燥した後，遠心分離して上澄液を試料溶液とする．別に α－BHC，β－BHC，γ－BHC，δ－BHC，o,p′－DDT，
p,p′－DDT，p,p′－DDD，p,p′－DDE，それぞれ約10mgを精 密に量り，生薬純度試験用アセトン5mLに溶かし，生薬純度 試験用へキサンを加えて正確に100mLとする．この液10mLを 正確に量り，生薬純度試験用へキサンを加えて正確に100mL とする．更にこの液1mLを正確に量り，生薬純度試験用へキ サンを加えて正確に100mLとし，標準溶液とする．試料溶液 及び標準溶液1μLずつを正確にとり，次の条件でガスクロマト グラフィー〈2.02〉により試験を行う．それぞれの液のα－
BHC，β－BHC，γ－BHC，δ－BHC，o,p′－DDT，p,p′－ DDT，p,p′－DDD，p,p′－DDE，に対応するピークの面積，
ATA及びASA，ATB及びASB，ATC及びASC，ATD及びASD，ATE及 びASE，ATF及びASF，ATG及びASG，ATH及びASHを測定し，次 式によりα－BHC，β－BHC，γ－BHC，δ－BHC，o,p′－ DDT，p,p′－DDT，p,p′－DDD及びp,p′－DDEの量を求める．
α－BHCの量(ppm)
＝ M
(g) BHCの秤取量 α－
×
SA TA
A A ×50 β－BHCの量(ppm)
＝ M
(g) BHCの秤取量
β－ ×
SB TB
A A ×50 γ－BHCの量(ppm)
＝ M
(g) BHCの秤取量
γ－ ×
SC TC
A A ×50 δ－BHCの量(ppm)
＝ M
(g) BHCの秤取量
δ－ ×
SD TD
A A ×50 o,p′－DDTの量(ppm)
＝ M
p
o, ′－DDTの秤取量(g)
×
SE TE
A A ×50
p,p′－DDTの量(ppm)
＝ M
p
p, ′－DDTの秤取量(g)
×
SF TF
A A ×50 p,p′－DDDの量(ppm)
＝ M
p
p, ′－DDDの秤取量(g)
×
SG TG
A A ×50 p,p′－DDEの量(ppm)
＝ M
p
p, ′－DDEの秤取量(g)
×
SH TH
A A ×50
M：本品の粉末の秤取量(g) 総BHCの量(ppm)
＝α－BHCの量(ppm)＋β－BHCの量(ppm)
＋γ－BHCの量(ppm)＋δ－BHCの量(ppm) 総DDTの量(ppm)
＝o,p′－DDTの量(ppm)＋p,p′－DDTの量(ppm)
＋p,p′－DDDの量(ppm)＋p,p′－DDEの量(ppm) 試験条件
検出器：電子捕獲検出器 注入方法：スプリットレス注入法
カラム：内径0.3mm，長さ30mのガスクロマトグラフィ ー用石英製キャピラリーカラムの内壁にガスクロマトグ ラフィー用7％シアノプロピル－7％フェニル－メチル シリコーンポリマーを0.25～1.0μmの厚さで被覆したも の．
カラム温度：注入後，2分間60℃に保ち，その後200℃ま で毎分10℃で昇温し，次いで260℃まで毎分2℃で昇温 する．
キャリヤーガス：ヘリウム
流量：すべての対象物質の保持時間が10分から30分とな るように調整する．
システム適合性
検出の確認：標準溶液1mLを正確に量り，ヘキサンを加 えて正確に10mLとする．この液1μLから得た各対象物 質のピーク面積が，標準溶液から得た各対象物質のピー ク面積の5～15％になることを確認する．
システムの性能：標準溶液1μLにつき，上記の条件で操作 するとき，各対象物質のピークが完全に分離するものを 用いる．
試験の再現性：標準溶液1μLにつき，上記の条件で試験を 6回繰り返すとき，各対象物質のピーク面積の相対標準 偏差は10％以下である．
5. 乾燥減量
別に規定するもののほか，分析用試料2～6gをあらかじめ質 量を量ったはかり瓶に入れ，その質量を精密に量り，105℃で 5時間乾燥し，デシケーター(シリカゲル)で放冷し，その質量 を精密に量る．再びこれを105℃で乾燥し，1時間ごとに質量 を精密に量り，恒量になったときの減量を乾燥減量(％)とする．
ただし，乾燥時間の規定があるときは，規定された時間乾燥し た後，質量を精密に量り，その減量を乾燥減量(％)とする．
6. 灰分
あらかじめ白金製，石英製又は磁製のるつぼを500～550℃
で1時間強熱し，放冷後，その質量を精密に量る．別に規定す るもののほか，分析用試料2～4gを採取し，前のるつぼに入れ，
その質量を精密に量り，必要ならばるつぼのふたをとるか，又 はずら し，初めは弱く 加熱し，徐々 に温度を上げて500～
550℃で4時間以上強熱して，炭化物が残らなくなるまで灰化 する．放冷後，その質量を精密に量る．再び残留物を恒量にな るまで灰化し，放冷後，その質量を精密に量り，灰分の量(％) とする．この方法で，なお炭化物が残り，恒量にならないとき は，熱湯を加えて浸出し，定量分析用ろ紙を用いてろ過し，残 留物はろ紙及びろ紙上の不溶物と共に炭化物がなくなるまで強 熱する．これにろ液を加えた後，蒸発乾固し，強熱する．放冷 後，質量を精密に量り，灰分の量(％)とする．この方法でも炭 化物が残るときは，エタノール(95)少量を加えて潤し，ガラス 棒で炭化物を砕き，ガラス棒をエタノール(95)少量で洗い，エ タノールを注意して蒸発した後，前と同様に操作して灰分を量 る．放冷はデシケーター(シリカゲル)で行う．
7. 酸不溶性灰分
灰分に希塩酸25mLを注意して加え，5分間穏やかに煮沸し，
不溶物を定量分析用ろ紙を用いてろ取し，熱湯でよく洗い，残 留物をろ紙と共に乾燥した後，灰分の項と同様に操作した質量 既知の白金製，石英製又は磁製のるつぼ中で3時間強熱し，デ シケーター(シリカゲル)で放冷後，その質量を精密に量り，酸 不溶性灰分の量(％)とする．得た値が規定の値より大きい場合 は，恒量になるまで強熱する．
8. エキス含量
エキス含量の試験は次の定量法によって行う．
8.1. 希エタノールエキス定量法
別に規定するもののほか，分析用試料約2.3gを精密に量り，
適当なフラスコに入れ，希エタノール70mLを加え，時々振り 混ぜて5時間浸出し，更に16～20時間放置した後，ろ過する．
フラスコ及び残留物は，ろ液が100mLになるまで希エタノー ルで洗う．ろ液50mLを水浴上で蒸発乾固し，105℃で4時間乾 燥し，デシケーター(シリカゲル)で放冷後，その質量を精密に 量り，2を乗じて希エタノールエキスの量とする．乾燥減量に よって得た数値より乾燥物に換算した試料量に対し，エキス含 量(％)を算出する．
8.2. 水製エキス定量法
8.1.の希エタノールの代わりに水を用いて同様に操作し，そ の質量を精密に量り，2を乗じて水製エキスの量とする．乾燥 減量によって得た数値より乾燥物に換算した試料量に対し，エ キス含量(％)を算出する．
8.3. エーテルエキス定量法
別に規定するもののほか，分析用試料をデシケーター(シリ カゲル)で48時間乾燥し，その約2gを精密に量り，適当なフラ スコに入れ，ジエチルエーテル70mLを加え，還流冷却器を付 け，水浴上で4時間穏やかに煮沸し，放冷後，ろ過する．フラ スコ及び残留物は，ろ液が100mLになるまでジエチルエーテ ルで洗う．ろ液50mLを水浴上で蒸発乾固し，デシケーター (シリカゲル)で24時間乾燥し，その質量を精密に量り，2を乗 じてエーテルエキスの量とし，エキス含量(％)を算出する．
9. 精油含量
精油含量の試験は次の精油定量法により行う．
9.1. 精油定量法
医薬品各条に規定する量の分析用試料を，1Lの共通すり合 わせ硬質ガラスフラスコに入れ，5～10倍量の水を加えた後，
精油定量器(図5.01－1)を装着し，定量器の上端に還流冷却器