セルライン,オリゴデンドロサイトセルライン
株化細胞・培地関連
不死化細胞
神経発達の研究に最適なセルライン
■Motor neuronセルライン
神経毒症状の のモデルを開発し,評価するため研究が多く行わ れています。初代培養モデルは,器官型培養で初期胚あるいは新生な組 織を含みます。初代培養の主要な利点は の同部位で長時間,形態 学的にも生理学的にも類似していることですが,神経細胞が発達するの に数日要し,連続的に成長することができないという欠点があります。
また腫瘍細胞モデルの評価が多く行われており,これらのセルは初代培 養よりはるかに便利ですが,それらの神経毒症状の予測能力は,その細 胞が特異的な細胞毒性関連ターゲットを発現するかどうかによります。
したがって,神経細胞の特性と増殖能を保持した細胞株を作製するため 初代神経細胞と腫瘍セルラインとを融合しました。
技術 技術
NSC-34はマウス神経芽腫と胎児のマウス脊椎細胞とを融合したハイ ブリッドセルラインです。培養は,細胞分裂能力を持つ小さく,未分化 な細胞と,より大きい多核性細胞の二つを含みます。これらの細胞はコ リンアセチルトランスフェラーゼ,アセチルコリン結合,貯蔵,解離お よび神経フィラメントの三量体タンパク質を含む運動ニューロンの多く の特性を示します。
特長 特長
NSC-34セルは運動ニューロンに毒性であることが知られているいく つかの化学物質の選択培養に基づいて開発された細胞です。NSC-34 セルは電位依存性のイオンチャネル,細胞骨格形成l組織,および軸索
(内)輸送に影響する薬剤に反応します。様々なイオンチャネルの阻害 剤に対する潜在的な感度は初代運動ニューロン培養と同様です。したが って,不死化モーターニューロン様細胞には,神経毒性研究のモデルと して有用性があります。
品名 品番 包装 希望販売価格 毒劇 貯蔵
Motor Neuron-Like Hybrid Cell Line: NSC-34 CLU140 1バイアル ご照会 A
[メーカー:CEB]
株化細胞・培地関連
動物由来腫瘍細胞株
株化細胞・培地関連
不死化細胞
イヌ/ブタ/ラット由来腫瘍細胞株
本細胞はイヌ/ブタ/ラット腫瘍組織から樹立された株化細胞で,麻布 大学臨床検査技術学科 病理学研究室荻原喜久美先生が樹立され,麻布大 学よりライセンスをうけた細胞株になります。
品名 動物 由来 画像 推奨培地 品番 包装 希望販売価格
Hepatoma Cell イヌ
(マルチーズ)
肝癌細胞 A ① AZACH 1バイアル(5×105cells) ¥ 42,400 Lung Carcinoma Cell イヌ
(シェルティー)
肺癌細胞 B ② AZACL1 1バイアル(5×105cells) ¥ 42,400 Lung Carcinoma Cell イヌ 肺癌細胞 C ② AZACL2 1バイアル(5×105cells) ¥ 42,400 Breast Tumor Cell イヌ イヌ乳腺腫瘍細胞 D ③ AZACB 1バイアル(5×105cells) ¥ 42,400 Fibrosarcome イヌ 線維肉腫細胞 E ④ AZACF 1バイアル(5×105cells) ¥ 42,400 Urothelial Carcinoma Cell イヌ 尿路上皮癌細胞 F ⑤ AZACU 1バイアル(5×105cells) ¥ 42,400 Nephroblastoma Cell ブタ 腎芽腫細胞 G ⑥ AZASN 1バイアル(5×105cells) ¥ 42,400 Hepatoma Cell, Aflatoxin
B1-induced
ラット 肝癌細胞
(アフラトキシンB1誘導)
H ⑦ AZARH 1バイアル(5×105cells) ¥ 42,400 Nephroblastoma Cell ラット 腎芽腫細胞 I ⑧ AZARN 1バイアル(5×105cells) ¥ 42,400
■関連商品:イヌ/ブタ/ラット腫瘍細胞株推奨培地
品名 推奨培地対象番号 品番 包装 希望販売価格
Hepatoma Cell Medium ① AZAGM-CH 2505 ¥ 176,000
Lung Carcinoma Cell Medium ② AZAGM-CL 2505 ¥ 176,000
Breast Tumor Cell Medium ③ AZAGM-CB 2505 ¥ 176,000
A B C
D E F
G H I
[メーカー:PMC]
[メーカー:PMC]
特長 特長
●マイコプラズマ陰性確認済み
●お受け取り後,直ちにご使用にならない場合は液体窒素(または
−70℃以下に)にて保存して下さい。
90
株化細胞・培地関連
HeLa細胞抽出物
株化細胞・培地関連
不死化細胞
HeLa細胞は,1952年に樹立されたヒト由来の最初の細胞株で,
での細胞を用いる試験や研究に幅広く用いられています。一般的に ウエスタンブロットのコントロールとして広く使用されており,細胞培 養から細胞抽出物の調製までを行う研究者も多数おられます。
しかしHeLa細胞は,継続培養による形質の変化,増殖力が極めて高い ことによるラボ内の他細胞へのコンタミネーションのリスク等,その管 理に時間や手間を要します。
CILBIOTECH社では,HeLa細胞抽出物を提供しております。
CILBIOTECH社では,自社開発した完全に自動化された独自の培養 技術により,安定した品質のHeLa細胞抽出物を安価に提供しておりま す。HeLa細胞はGLP(優良試験所基準)に準拠した設備で,5×106 cells/5(細胞生存率93%〜97%)の一定濃度で培養されています。
CILBIOTECH社の製品をご使用頂く事で,培養にかかる時間・コスト の削減が可能となります。是非お試し下さい。
品名 品番 包装 希望販売価格
HeLa Whole cells pellet from 1,0 x 109 cells HeLa細胞ペレット CC-01-10-10 1バイアル ¥ 68,000 HeLa Whole cells pellet from 2,5 x 109 cells HeLa細胞ペレット CC-01-10-25 1バイアル ¥ 76,000 HeLa Whole cells pellet from 5,0 x 109 cells HeLa細胞ペレット CC-01-10-50 1バイアル ¥ 114,000 HeLa Nuclear Extract from 1,0 x 109 cells HeLa細胞核抽出物 CC-01-20-10 1バイアル ¥ 85,000 HeLa Nuclear Extract from 2,5 x 109 cells HeLa細胞核抽出物 CC-01-20-25 1バイアル ¥ 116,000 HeLa Nuclear Extract from 5,0 x 109 cells HeLa細胞核抽出物 CC-01-20-50 1バイアル ¥ 169,000 HeLa Nuclei from 1,0 x 109 cells HeLa 細胞核 CC-01-30-10 1バイアル ¥ 74,000 HeLa Nuclei from 2,5 x 109 cells HeLa 細胞核 CC-01-30-25 1バイアル ¥ 86,000 HeLa Nuclei from 5,0 x 109 cells HeLa 細胞核 CC-01-30-50 1バイアル ¥ 132,000 HeLa Cytoplasm from 2,5 x 109 cells HeLa 細胞質 CC-01-40-25 1バイアル ¥ 77,000 HeLa Cytoplasm from 5,0 x 109 cells HeLa 細胞質 CC-01-40-50 1バイアル ¥ 113,000 HeLa Cytoplasm S100 from 5,0 x 109 cells HeLa 細胞質 CC-01-41-50 1バイアル ¥ 151,000 HeLa Mitochondria from 5,0 x 109 cells HeLa ミトコンドリア CC-01-43-50 1バイアル ¥ 135,000
[メーカー:CIL]
1. Barabino, S.M.L., Sproat, B.S. and Lamond, A.I. (1992). Antisense probes targeted to an internal domain in U2 snRNP specifically inhibit the second step of pre-mRNA splicing. . 20, 4457-4464.
2. Damier, L., Domenjoud, L. and Branlant, C. (1997). The D1-A2 and D2-A2 pairs of splice sites from human immunodeficiency virus Type 1 are highly efficient , in spite of an unusual branch site. . 237, 182-187.
3. Hackel, W.., Fischer, V. and Lührmann, R. (1994). A 69 kD protein that associates reversibly with the Sm core domain of several spliceosomal SnRNP species.
. 124, 261-272.
4. Kleren, M., Blank, V., Logest, F., Vandekerckhove, J., Lottspeich, F., Le Ball, O., Urban, M.B., Kourilsky, Ph., Bauerle, P.A. and Israel, A; (1990). The DNA inding subunit of NF-KB is identical to factor KBF, and homologous to the rel oncogene product.
62, 1007-1018.
5. Lamm, G.M., Blencowe, B.J., Sproat, B.S., Iribarren, A.M., Ryder, U. and Lamond, A.I.
(1991). Antisense probes containing 2-aminoadenosine allow efficient depletion of U5 snRNP from HeLa splicing extracts. . 19, 3193-3198.
6. Lauber, J., Plessel, G., Prehn, S., Will, C.L., Fabrizio, P., Grôning, K., Lane, W.S. and Lührmann, R. (1997). The human U4/U6 SnRNP contains 60 and 90 kD proteins that are structurally homologous to the yeast splicing factors Prp4p and Prp3p. . 3, 926-941.
7. Plessel, G., Fischer, U. and Lührmann, R, (1994). m3G cap hypermethylation of U1 small nuclear ribonucleoprotein (SnRNP) : evidence that the U1 small nuclear RNA-(guanosine-N2)methyltransferase is a non-SnRNP cytoplasmic protein that requires a binding site on the Sm core domain. 14, 4160-4172.
8. Ryder, U., Sproat, B.S. and Lamond, A.I. (1990). Sequence-specific affinity selection of mammalian splicing complexes. . 18, 7373-7379.
9. Will, C.L., Rümpler, S., Gunnewiek, J.K., Van Venrooij, W. and Lührmann, R. (1996).
reconstitution of mammalian U1 SnRNPs active in splicing : the U1:C protein enhances the formation of early (E) spliceosomal complexes. . 24, 4614-4623.
10. Brehm, A., Miska, E.A., MacCance, D.J., Reid, J.L., Bannister, A.J., Kouzarides, T. (1998). Retinoblastoma protein recruits histone deacetylase to repress transcription. 391, 591-601.
11. Cairns, C.A. and White, R.J. (1998) p53 is a general represor of RNA polymerase III transcription. 17, 3112-3123.
12. Iz z a r d, R.A., J a c k s o n, S.P. a n d S m i t h, G.C.M. (1999). C o m p e t i t i v e a n d noncompetitive inhibition of the DNA-dependent protein kinase. . 59, 2581- 2586.
13. Smith, G.C., Cary, R.B., Lakin, N.D., Hann, B.C., Teo, S.̲H., Chen, D.J. and Jackson, S.P. (1999) Purification and DNA binding properties of the ataxiatelangiectasia gene product ATM. 96, 11134-11139.
14. Hughes, P., Tratner, I., Ducoux, M., Piard, K., Baldacci, G. (1999) Isolation and identification of the third subunit of mammalian DNA polymerase d by PCNAaffinity chromatography of Mouse FM3A cell extracts. . 27, 2108- 2114.
15. Pethe, K., Aumercier, M., Fort, E., Gatot, C. and Menozzi, F.D. (2000) Characterization of the heparin binding site of the mycobacterial Heparin-binding hemagglutinin adhesin. 275,1.
16. Deplus, R., Brenner, C., Burgers, W.A., Putmans, P., Kouzarides, T., de Launoit, Y., Fuks, F. (2002) Dnmt3L is a transcriptional repressor that recruits histone deacetylase. . 30, n°17, 3831-3838.
17. Brenner, C., Deplus, R., Didelot, C., Loriot, A., Viré, E., De Smet, C., Gutierrez, A., Danovi, D., Bernard, D., Boon, T., Pelicci, P.G., Amati, B., Kouzarides, T., de Launoit, Y., Di Croce, L. and Fuks, F. (2005) Myc represses transcription through recruitment of DNA methyltransferase corepressor. 24, 336-346.
18. Burgers, W.A., Blanchon, L., Pradhan, S., de Launoit, Y., Kouzarides, T., Fuks, F.
(2007) Viral oncoproteins target the DNA methyltransferases. 26, 1650- 1655
19. Viré, E., Brenner, C., Deplus, R., Blanchon, L., Fraga, M., Didelot, C., Morey, L., Van Eynde, A., Bernard, D., Vanderwinden, J-M., Bollen, M., Esteller, M., Di Croce, L., de Launoit, Y., and Fuks, F. (2006) The Polycomb group protein EZH2 directly controls DNA methylation. 439, 871-874.
20. Jacquenet, S., Méreau, A., Bilodeau, P.S., Damier, L., Martin Stoltzfus, C.
and Branlant, C. (2001) A Second Exon Splicing Silencer within Human Immunodeficiency Virus Type 1 tat Exon 2 Represses Splicing of Tat mRNA and Binds Protein hnRNP H*. ., 276, No 44, Issue of November 2, 40464- 40475
21. Hoffmann,M.H., Tuncel,J., Shriner,K., Tohidast-Akrad, M.Türk;B., Pinol-Roma,S., Serre, G., Schett,G., Smolen,J ;S., Holmdahl,R. and Steiner,G. (2007) The Rheumatoid Arthritis- Associated Autoantigen hnRNP-A2 (RA33) is a Major Stimulation of Autoimmunity in Rats with Pristane-induced Arthritis.
179, 7568-7576
22. Ropers, D., Ayadi, L., Gattoni, R., Jacquenet, S., Damier, L., Branlant, C. and Stévenin, J. (2004) Differential effects of the SR proteins 9G8, SC35, ASF/SF2 and SRp40 on the utilization of the A1 to A5 splicing sites of HIV-1 RNA. ., 279, 29963-29973
23. Gehring, N.H., Lamprinaki, S., Kulozik, A.E. and Hentze, M. (2009) Dissassembly of exon junction complexes by PYM. 137, 536-548 55.
24. Agranat, L., Sperling, J. and Sperling, R. (2010) A novel tissue-specific alternatively spliced form of the A-to-I RNA editing enzyme ADAR2. 7, 1-10 25. Bala, K. (2010) Healing the Achilles Heel of Proteomics. Genetic Engng &
Biotechnol. News, Vol.30, N°3, February 1st 58. Spagnolo, L., Rivera-Calzada, A., Pearl, L.H. and Llorca, O. (2006) Threedimensional structure of the human DNA-PKcs/Ku70/Ku80 complex assembled on DNA and its implications for DNA DSB repair. 22 (4) 511-519
26. Rivera-Calzada, A., Spagnolo, L., Pearl, L.H. and Llorca, O. (2007) Structural model of full-length human Ku70-Ku80 heterodimer and its recognition of DNA and DNAPKcs. 8, 56-62
27. Renz, A. and Fackelmayer, F.O. (1996) Purification and Molecular cloning of the Scaffold Attachment Factor B (SAF-B), a novel human nuclear protein that specifically binds to S/MAR-DNA. . 24 (5) 843-849
28. Ajuh, P., Sleeman, J., Chusainow, J. and Lamond, A.I. (2001) A direct interaction between the carboxyl-terminal region of CDC 5L and the WD40 domain of PRLG1 is essential for pre-mRNA splicing. 276 (45) 42370-42381
29. Taylor, E.M., Copsey, A.C., Hudson, J.J.R., Vidot, S. and Lehmann, A.R. (2008) Identification of the proteins, including MAGE-G1, that make up the human SMC5-6 protein complex. 28 (4) 1197-1206
30. Taylor, E.M., Copsey, A.C., Hudson, J.J.R., Vidot, S. and Lehmann, A.R. (2008) Identification of the proteins, including MAGE-G1, that make up the human SMC5-6 protein complex. 28 (4) 1197-1206
HeLa細胞抽出物 参考文献
HeLa細胞抽出物 参考文献
株化細胞・培地関連
CytoSelect TM クローン原性腫瘍細胞分離キット
株化細胞・培地関連
不死化細胞
使用目的 使用目的
本キットは,固形癌サンプルから少量のコロニー形成細胞を分離する キットです。生検固形癌サンプルをコラゲナーゼで消化後,軟寒天培地 上で6-8日培養すると,細胞がコロニーを形成し,単一細胞が分離でき ます(図1)。分離した生細胞は,様々なアプリケーション(FACS,タ ンパク質/DNAアレイ解析,癌ワクチン研究など)のために簡単に回収 できます。
特長 特長
●クローン原性腫瘍細胞集団からの単一細胞の分離が簡単
●固形腫瘍だけでなく,癌幹細胞の単離にも有用
構成内容 構成内容
●10X CytoSelectTM寒天マトリクス溶液
●CytoSelectTM寒天マトリクス希釈溶液
●DMEM培地
●100X溶解バッファー
●10Xアッセイバッファー
●フィルター
図1 増殖性腫瘍細胞のコロニー形成,分離および再プレーティング
A:培養7日間後における細胞のコロニー形成(赤い矢印)とシングル細胞(黒い矢印)
B:シングル細胞からコロニーの分離
C:3日後のコロニーを再プレーティング(非トリプシン処理)
D:トリプシン処理後1日のコロニーを再プレーティング
固形癌サンプルからコロニー形成細胞を分離します
品名 品番 包装 希望販売価格 毒劇 貯蔵
CytoSelectTM Clonogenic Tumor Cell Isolation Kit CBA-155 CBA-155-5
1キット(5プレップ)
5キット(25プレップ)
¥ 123,000
ご照会 S
S
固形癌 コラゲナーゼ消化
単一細胞へ懸濁
アガーマトリクス に細胞を添加 6〜8日
インキュベーション
コロニーの形成
腫瘍性細胞の分離
分離した腫瘍性細胞を 再度プレーティング
寒天 細胞懸濁液/寒天 単一細胞 細胞のコロニー 標準細胞培養培地
図2 プロトコール
[メーカー:CBL]
92
株化細胞・培地関連
B細胞不死化キット
株化細胞・培地関連
不死化細胞
【ヒト用B細胞不死化キット】
循環B細胞の研究を行うにあたって,末梢血単核球細胞中に8〜10%
程度しかないB細胞を確保するのは至難の業です。これを克服する手段は 現在2つあります。1つはCD40システム(培養技術によりB細胞の長時 間培養を実現),もう1つはEpstein-Barr virus(EBV)を用いてB細 胞の形質転換を行うことです。前者の効率は1%程度,後者は1/106 程 度と,いずれも効率の悪さが課題とされていました。
Human Blood B Booster® Kitは,最も良い条件下でB細胞の不死 化を20%に引き上げることができます。本キット1つで,107の末梢血 単核球細胞から5×104〜2×105のB細胞クローンを得ることができま す。
【動物用B細胞不死化キット】
動物のIg分泌B細胞を不死化させる際,通常は免疫済みマウスの脾細胞 を分離し,これをIg非分泌型マウス骨髄腫細胞(SP2/0)と融合させる ハイブリドーマ技術を採用します。
Animal Blood B Booster® Kitは融合前に刺激を加えることで,不死 化B細胞のクローンを劇的に増加させます。具体的には,6×107の脾細 胞あるいは末梢血単核球細胞中から3×103のB細胞クローンを得ること ができます。
非常に高効率にB細胞を不死化します
品名/構成内容 検証済み動物 品番 包装 希望販売価格 毒劇 貯蔵
Human Blood B Booster® Kit
●サポート1 ●mAb1 ●mAb2 ●EBV1 ●サポート2
●mAb3 ●EBV2 ●ブースター溶液
─ DDXK-HuBBB 1キット
(10×96well)
ご照会 Ra
Animal Blood B Booster® Kit
●サポート1 ●mAb1 ●mAb2 ●サポート2 ●mAb3
●ブースター溶液
Horse, Rabbit, Sheep, Rat, Dog
DDXK-AnBBB 1キット
(6×96well)
ご照会 Ra
[メーカー:DDS]
Day 0 Day 20
Igを分泌したウェルの割合(%)
サンプル1 サンプル2 サンプル3
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100
刺激なし An BBBキット
120G8
c11DC
コントロールマウス 120G8処理マウス
Ly6C Ly6C
B220
14.8% 2.4%
図1 ヒト用キットを用いて作製したB細胞の経時観察
通常B細胞の寿命は2〜3日だが,本キットを使用することによって,20日以上にわたり細胞の成長が 認められた。
図2
ヒト用キットを用いて不死化させた ベロ細胞に,チクングンヤ熱ウイル スを感染させ,チクングンヤ熱ウイ ルスに対するヒトモノクローナル抗 体で検出した。
(左)ベロ細胞(コントロール)
(右)チクングンヤ熱ウイルスに感 染したベロ細胞
図3 マウス骨髄腫細胞(SP2/0)と融合させた 後,Igを分泌したウェルの割合(%)