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■ラット細胞濃縮カラム

ドキュメント内 V W Q R a (ページ 134-145)

品名 カラムにアプライ

できる細胞数 品番 包装 希望販売価格 毒劇 貯蔵 ラット T 細胞 分離カラム, 5パック 

CD3+ T Cell Enrichment Column Pack of 5

50-300x106 RTCC-5 1キット ¥ 43,000 V S ラット T 細胞 分離カラム, 10パック 

CD3+ T Cell Enrichment Column Pack of 10

50-300x106 RTCC-10 1キット ¥ 73,000 V S ラット T 細胞 分離カラム, 25パック 

CD3+ T Cell Enrichment Column Pack of 25

50-300x106 RTCC-25 1キット ¥ 151,000 V S CD4+ T Cell Enrichment Column Pack of 4 200x106 RCD4C-1000 1キット ¥ 68,000 V S CD8+ T Cell Enrichment Column Pack of 4 200x106 RCD8C-1000 1キット ¥ 68,000 V S

[メーカー:RSD]

細 胞 分 離

MagCellect TM  免疫細胞分離キット

細 胞 分 離

免疫細胞磁気分離

ナノレベルのマグネット粒子で細胞を分離!

目的とする細胞のポジティブもしくはネガティブセレクトの技術に は,ナイロンウールカラム,補体媒介(complement-mediated)セル ライシス,良質な抗体選び,蛍光活性化細胞のソーティング,磁気粒子 技術が含まれます。磁気ベースの細胞選択技術は比較的新しい技術です が,そのスピード,柔軟さ及び簡便さから,多くの研究室で広く受け入 れられています。

使用目的 使用目的

R&Dシステムズ社(RSD)のMagCellectTMキットは,液体サンプ ルにおける細胞の分離用にデザインされています。このMagCellectTM は,磁気メモリを持たない鉄の流動体(Ferrofluids)または磁気ナノ粒 子(超常磁性;スーパーパラマグネティック)を利用しています。これ らの粒子は,直径が〜150!と非常に小さいため,コロイド粒子のよう に動きます。この性質により,これらの粒子は攪拌し続けなくても溶液 中に残り,結合反応において効果的に拡散することも可能です。また,

直径が大きい他の多くの磁気粒子と比較して,質量あたりでより高いリ ガンド結合能力を持っています。

特長 特長

●磁気粒子の特性

  スーパーパラマグネティック(超常磁性)粒子は,磁気メモリを持 たない理想的な粒子です。

●粒子のサイズ

  ナノメートルサイズの粒子は,流動体として動くためにカイネティ クス反応は最大限であり,以降のアプリケーションを妨害すること もありません。

●必要な磁場

  強力なマグネットは高額ですが,要求される磁場強度はより低いた め費用の心配はいりません。

構成内容 構成内容

キットには1×109個の細胞の操作に充分な試薬が含まれています。

●MagCellectTM 抗体カクテル

●MagCellectTM Ferrofluid(Goat Anti-Mouse IgG もしくはスト レプトアビジンコンジュゲート)

●MagCellectTM バッファー(10×)

キット以外にご用意いただくもの

●MagCellectTM Magnet(品番MAG997),下図青色装置

●12×75#(55)または 17×100#(155)のポリスチレン丸 底試験管

●滅菌済みパスツールピペットもしくはトランスファーピペット

ご注意: 右側(青)のMagCellectTM  Magnet(品番MAG997)は,キットには含まれません。別 売となっておりますので,ご注意ください。

80 70 60 50 40 30 20 10 0

100      101     102     103     104 CD19-FITC

Relative Cell Number

M1

80 70 60 50 40 30 20 10 0

100      101     102     103     104 CD19-FITC

Relative Cell Number

M1

図1:ヒト B細胞の分離(品番:MAGH103)

フィコールを用いて血液から調製したヒト抹消血単核球(PBMC,A)と,MagCellectTMを用いてそ こから分離されたB細胞(B)。グラフは,CD19-FITCで染色した生存細胞数を示す。分離された細 胞の純度は,98%であった。

図2:マウス CD3 T細胞の分離(品番:MAGM201)

MagCellectTMを用いてそこから分離されたCD3  T細胞(B)と分離前のマウス脾細胞(A)。グラ フは,CD3-FITCで染色した生存細胞数を示す。分離された細胞の純度は,97.5%であった。

図3:ラット CD4 T細胞の分離(品番:MAGR302)

ラット脾細胞(A)と,MagCellectTMを用いてそこから分離されたCD4  T細胞(B)。ドットスポット 40

30

20

10

0

100      101     102     103     104 CD3-FITC

Relative Cell Number

M1

40

30

20

10

0

100      101     102     103     104 CD3-FITC

Relative Cell Number

M1

A. B.

A. B.

A. B.

100      101      102      103      104 4.5%

27% 33.5%

100      101      102      103      104

100      101      102      103      104

3% 93%

100      101      102      103      104

2.5%

測定原理 測定原理

単核細胞懸濁液はまず,不要な細胞をターゲットとする MagCellectTM 抗体カクテルと共にインキュベーションします。次に MagCellectTMス トレプトアビジン Ferrofluid を反応系に添加し,ストレプトアビジンで コートされたナノ粒子と,ビオチン化抗体タグ付きの細胞とを反応させ ます。この細胞懸濁液を含むチューブを磁場(MagCellectTM  Magnet)

にセットし,磁性のタグが付いた細胞をマグネットへ向けて移動させま す(不要細胞画分)。懸濁液中に残ったタグのない細胞もしくは目的とす る細胞群は,チューブをマグネットにセットしたままで,吸引して集め ます。集積した細胞はその後,組織培養,免疫状態のモニタリング及び フローサイトメトリーなどを含む様々なアプリケーションにご利用いた だけます。

126

細 胞 分 離

■ヒト細胞分離キット MagCellect

TM

品名 適用種 カラムにアプライ

できる細胞数 品番 包装 希望販売価格 毒劇 貯蔵 CD3+, T 細胞分離キット 

MagCellectTM CD3+ T Cell Isolation Kit

Human 1×109 MAGH101 1キット ¥ 114,000 S CD4+, T 細胞分離キット 

MagCellectTM CD4+ T Cell Isolation Kit Human 1×109 MAGH102 1キット ¥ 114,000 S CD4+ & CD25+, T 細胞分離キット 

MagCellectTM CD4+ CD25+ Regulatory T Cell Isolation Kit

Human 1×109 MAGH104 1キット ¥ 142,000 S CD14+, T 細胞分離キット 

MagCellectTM CD14+ Cell Isolation Kit

Human 1×109 MAGH105 1キット ¥ 102,000 S B 細胞分離キット 

MagCellectTM B Cell Isolation Kit

Human 1×109 MAGH103 1キット ¥ 114,000 S

[メーカー:RSD]

■マウス 細胞分離キット MagCellect

TM

品名 適用種 カラムにアプライ

できる細胞数 品番 包装 希望販売価格 毒劇 貯蔵 CD3+, T 細胞分離キット 

MagCellectTM CD3+ T Cell Isolation Kit

Mouse 1×109 MAGM201 1キット ¥ 93,000 S CD4+, T 細胞分離キット 

MagCellectTM CD4+ T Cell Isolation Kit Mouse 1×109 MAGM202 1キット ¥ 93,000 S CD4+ & CD25+, T 細胞分離キット 

MagCellectTM CD4+ CD25+ Regulatory T Cell Isolation Kit

Mouse 1×109 MAGM208 1キット ¥ 114,000 S CD8+, T 細胞分離キット 

MagCellectTM CD8+ T Cell Isolation Kit

Mouse 1×109 MAGM203 1キット ¥ 93,000 S B 細胞分離キット 

MagCellectTM B Cell Isolation Kit

Mouse 1×109 MAGM204 1キット ¥ 93,000 S ナイーブ CD4+, T 細胞分離キット 

MagCellectTM Naive CD4+ T Cell Isolation Kit Mouse 1×109 MAGM205 1キット ¥ 93,000 S 記憶 CD4+, T 細胞分離キット 

MagCellectTM Memory CD4+, T Cell Isolation Kit

Mouse 1×109 MAGM206 1キット ¥ 93,000 S ナイーブ CD8+, T 細胞分離キット 

MagCellectTM Naive CD8+, T Cell Isolation Kit

Mouse 1×109 MAGM207 1キット ¥ 93,000 S 造血系細胞分離キット 

MagCellectTM Hematopoietic Cell Lineage Depletion Kit

Mouse 1×109 MAGM209 1キット ¥ 93,000 S

[メーカー:RSD]

■ラット 細胞分離キット MagCellect

TM

品名 適用種 カラムにアプライ

できる細胞数 品番 包装 希望販売価格 毒劇 貯蔵 CD3+, T 細胞分離キット 

MagCellectTM CD3+ T Cell Isolation Kit

Rat 1×109 MAGR301 1キット ¥ 99,000 S CD4+, T 細胞分離キット 

MagCellectTM CD4+ T Cell Isolation Kit Rat 1×109 MAGR302 1キット ¥ 99,000 S B 細胞分離キット 

MagCellectTM B Cell Isolation Kit

Rat 1×109 MAGR303 1キット ¥ 99,000 S

[メーカー:RSD]

■MagCellect

TM

 関連商品

品名 品番 包装 希望販売価格 毒劇 貯蔵

MagCellectTM Magnet MAG997 1each ¥ 103,000 Q

MagCellectTM Anti-IgG Ferrofluid MAG998 15 ¥ 51,000 S MagCellectTM Streptavidin Ferrofluid MAG999 15 ¥ 55,000 S

[メーカー:RSD]

プロトコール

プロトコール は,259〜260ページ参照

細 胞 分 離

PlusCellect TM  細胞分離キット

細 胞 分 離

免疫細胞磁気分離

特定の細胞集団を簡便かつ効果の良く濃縮!

使用目的 使用目的

PlusCellectTMは市販の細胞分離システムとして唯一,2つの異なる抗 体を用いてターゲット細胞を分離・検出する商品です。2種類の抗体を使 うことで精製ステップの後の濃縮効果を直接評価することが容易になり ました。

特長 特長

●操作時間が短く,特異的に目的の細胞を分離可能

●どの単細胞集団にも使用可能

●キット内の抗体は異なるエピトープを認識

●どのストレプトアビジン磁粒子&マグネットシステムにも対応

●本商品により分離された細胞は全てフローサイトメトリーなどの実 験に使用可能

構成内容 構成内容

●ビオチン標識分離用抗体

●蛍光標識(CFSまたはPE)検出抗体

●PlusCellect バッファー

原理 原理

ターゲット細胞はまずビオチン標識抗体でタグをつけ,続いてストレ プトアビジン磁粒子(品番:MAG999)と結合させます。その後,別 売りのマグネットシステムを使い特異的に分離されます。陽性細胞の 濃縮は非捕捉細胞を含む培地を吸引するだけです。さらに,相補的な PlusCellectTM細胞分離キットを使い,不要な細胞を特異的に取り除く ことによって,ターゲット細胞集団をより精製可能です。実験ごとに蛍 光標識(CFSまたはPE)検出抗体を用いて濃縮効率を確認できます。

本商品を使ったときのターゲット細胞の精製度は70%から98%で す。

アプリケーション例 アプリケーション例

プロトコール プロトコール

ヒトEpCAM+ 細胞の分離

EpCAM発現MCF-7細胞を全血細胞に添加。EpCAM  PlusCellectTMキット(品番PLS960)を用い て濃縮する前後のEpCAM+細胞をPE標識検出抗体で染色した。

128

細 胞 分 離

品名 品番 包装 希望販売価格 毒劇 貯蔵

ACE PlusCellectTM Kit PLS929 1キット ¥ 72,000 S

CCR 5 PlusCellectTM Kit PLS180 1キット ¥ 72,000 S

CD4 PlusCellectTM Kit PLS379 1キット ¥ 72,000 S

CD31 PlusCellectTM Kit PLS806 1キット ¥ 72,000 S

CD45 PlusCellectTM Kit PLS1430 1キット ¥ 72,000 S

CXCR 4 PlusCellectTM Kit PLS170 1キット ¥ 72,000 S

E-Cadherin PlusCellectTM Kit PLS1838 1キット ¥ 72,000 S

E-Cadherin+ Cancer/Stem Cells PlusCellectTM Kit PLS748 1キット ¥ 72,000 S EGF Receptor PlusCellectTM Kit PLS1095 1キット ¥ 73,000 S Endoglin/CD105 PlusCellectTM Kit PLS1097 1キット ¥ 72,000 S

EpCAM PlusCellectTM Kit PLS960 1キット ¥ 72,000 V S

E-Selectin PlusCellectTM Kit PLS724 1キット ¥ 72,000 S

HGF Receptor/c-MET PlusCellectTM Kit PLS358 1キット ¥ 73,000 S Integrin α5 PlusCellectTM Kit PLS1219 1キット ¥ 72,000 S

MCAM PlusCellectTM Kit PLS932 1キット ¥ 72,000 S

NCAM-1/CD56 PlusCellectTM Kit PLS2408 1キット ¥ 72,000 S

Nectin-4 PlusCellectTM Kit PLS2659 1キット ¥ 73,000 S

Podocalyxin+ Stem Cells PlusCellectTM Kit PLS1658 1キット ¥ 72,000 S SSEA-4+ Pluripotent Stem Cells Isolation PlusCellectTM Kit PLS1435 1キット ¥ 72,000 S Tie 2+ Endothelial Progenitors PlusCellectTM Kit PLS313 1キット ¥ 72,000 S

VCAM-1 PlusCellectTM Kit PLS809 1キット ¥ 72,000 S

VE-Cadherin PlusCellectTM Kit PLS938 1キット ¥ 72,000 S

VEGF Receptor 2/KDR PlusCellectTM Kit PLS357 1キット ¥ 72,000 S

[メーカー:RSD]

■関連商品

品名/内容 品番 包装 希望販売価格 毒劇 貯蔵

MagCellectTM Streptavidin Ferrofluid

●使用目的

・ R&Dシステムズ社(RSD)のMagCellectTMキットは,液体サンプルにおける細胞の分 離用にデザインされています。このMagCellectTMは,磁気メモリを持たない鉄の流動体

(Ferrofluids)または磁気ナノ粒子(超常磁性;スーパーパラマグネティック)を利用し ています。これらの粒子は,直径が〜150!と非常に小さいため,コロイド粒子のように 動きます。この性質により,これらの粒子は攪拌し続けなくても溶液中に残り,結合反応 において効果的に拡散することも可能です。また,直径が大きい他の多くの磁気粒子と比 較して,質量あたりでより高いリガンド結合能力を持っています。

MAG999 15 ¥ 55,000 S

MagCellectTM Magnet

●使用目的

・ R&Dシステムズ社(RSD)のMagCellectTMキットは,液体サンプルにおける細胞の分 離用にデザインされています。このMagCellectTMは,磁気メモリを持たない鉄の流動体

(Ferrofluids)または磁気ナノ粒子(超常磁性;スーパーパラマグネティック)を利用し ています。これらの粒子は,直径が〜150!と非常に小さいため,コロイド粒子のように 動きます。この性質により,これらの粒子は攪拌し続けなくても溶液中に残り,結合反応 において効果的に拡散することも可能です。また,直径が大きい他の多くの磁気粒子と比 較して,質量あたりでより高いリガンド結合能力を持っています。

MAG997 1each ¥ 103,000 Q

[メーカー:RSD]

ドキュメント内 V W Q R a (ページ 134-145)