初 代 培 養 細 胞 ・ 培 地 関 連
膵臓系細胞培養キット
初代培養細胞・
培地関連
動物由来細胞
細胞と専用培地のお得なセット
膵島（ランゲルハンス島）は主に3種類の内分泌細胞（α細胞，β細 胞，δ細胞）から構成され，膵島の約70％をインスリン分泌細胞であ るβ細胞が占めているといわれています。それぞれの細胞からグルカゴ ン，インスリン，ソマトスタチンを分泌し，糖代謝や脂質代謝等の調節 に深く関与しています。インスリンを分泌する膵島は糖尿病薬研究には 必要な細胞ですが，膵島の調製は難しく，高い技術と経験が必要となり ます。
本キットは，膵臓をコラゲナーゼ処理し，ハンドピックアップ及び密 度勾配遠心により，外分泌細胞等を除去して分離した膵島及び培地のセ ットになります。
特長 特長
●マウスやラットの膵臓をコラゲナーゼ注入処理し，さらにハンドピ ック法にて膵島を分離済み
●ロット管理された専用バッファー，グルコース含有バッファーが付 属
●別売りの膵島用細胞分散液（品番：PNIDM）にて内分泌細胞を自 家調整することが可能
●膵島障害性因子の検索，膵内分泌機能の解析，内分泌機能不全治療 薬の開発等に最適
■膵島の品質について
0 0.1 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0
膵島 膵臓全体 Ins2 mRNA
0.27
0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0
膵島 膵臓全体 Pdx1 mRNA
4900
0 1000 2000 3000 4000 5000
膵島 膵臓全体 Prss1 mRNA
0 1 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0
膵島 膵臓全体 0.34 Ins1 mRNA
level ANRm evitaleR
ラット膵島と膵臓との遺伝子発現比較 0 0.04 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0
膵島 膵臓全体 Ins2 mRNA
0.09 0
0.2 0.4 0.6 0.8 1.0
膵島 膵臓全体 Pdx1 mRNA
151
0 50 100 150 200
膵島 膵臓全体 Prss1 mRNA
0 1 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0
膵島 膵臓全体 0.003 Ins1 mRNA
level ANRm evitaleR
マウス膵島と膵臓との遺伝子発現比較
膵島用細胞分散液で 細胞を分散
位相差画像 インスリン染色 位相差画像 インスリン染色
マウス膵島（10islets, SI=10.0)
0 50 100 150 200
Mm( esoculG)
) Lm /gn ( nilusnI
Time (min) 20
3
0 60 120 180
3mM -60 〜 120min
20mM -0 〜 60min
0 5 10
)Mm( esoculG
) Lm /gn ( nilusnI
Time (min) 20
3
0 60 120 180
3mM -60 〜 120min
20mM -0 〜 60min
ラット膵島（5islets, SI=10.6)
■グルコース応答性によるインスリン分泌能について
図1 リアルタイムPCRでの評価
膵島及び膵臓に発現している遺伝子をリアルタイムPCRで解析し，β-actinで標準化後に相対発現量 を求めた。その結果，本キットの膵島には膵外分泌細胞の混入が極めて少ないことがわかった。
※ 測定遺伝子名：Insulin1（Ins1），Insulin 2（Ins 2），Pancreas duodenum homeobox 1（Pdx1），
Trypsinogen（Prss1）
図2 免疫染色での評価
マウス膵島を抗インスリン抗体を用いて蛍光免疫染色を行った。その結果，膵島の大部分がインスリ ン陽性細胞であることが判明した。
図3 Stimulation Index（20mM-0〜60min画分と3mM-60〜120min画分で分泌したインスリ ン濃度比）での評価
グルコース応答性によるインスリン分泌能を測定し，Stimulation Index（20mM-0〜60min画分と 3mM-60〜120min画分で分泌したインスリン濃度比）での評価を行った。その結果，マウス膵島で のSI値の範囲は5〜20，ラット膵島でのSI値の範囲は2〜20だった（マウス膵島でのSI値は10.0，
ラット膵島でのSI値は10.6）。マウス膵島でのSI値が3以上，ラット膵島でのSI値が2以上の場合に グルコース応答性によるインスリン分泌能が陽性であると示唆される。
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初 代 培 養 細 胞 ・ 培 地 関 連
2-デオキシグルコース（2DG）
細胞内取り込み活性測定キット
初代培養細胞・
培地関連
動物由来細胞
RI使用せずに糖の細胞内取り込み量が測定できます
代謝系の重要物質であるグルコースは細胞内に取り込まれて解糖系で ATPを生成し，また脂肪細胞においては中性脂肪であるトリグリセリド の合成にも利用されています。細胞内へのグルコース取り込み量を測定 することは，細胞そのものの糖取り込み能力や糖消費量に関する情報を 与えるものであり，特に創薬を含めたメタボリックシンドロームの研究 にきわめて有用な手法です。その測定原理は解糖系で代謝されない2-デ オキシグルコース（2DG）を用い，細胞内に残留した2DGを定量する方 法が基本となっています。しかし従来法では2DGをRIで標識するRIA法 が主流を占めていました。
本商品は酵素を用いた比色法により，RIを用いることなく細胞内への 2DG取り込み量が測定できる画期的な測定キットです。
品名 品番 包装 希望販売価格 貯蔵
2-Deoxyglucose uptake measurement kit OKP-PMG-K01 1キット ￥ 88,000 R 2-Deoxyglucose uptake measurement kit（trial size） OKP-PMG-K01T 1キット ￥ 20,000 R
［メーカー：CSR］
RI法 細胞
3H-2DG（緑色）を添加
細胞に［3H］2DGが取り込まれて［3H］2DG6P（赤色）で貯留
細胞を洗浄しても，［3H］2DGは細胞間隙に残る
放射活性では2DGと2DG6Pを区別できない 正確な測定結果を得るためには，
・2DGとスクロースのように2種類の糖を使用して 残存量を推測する
・カラムで2DGと2DG6Pを分離してから測定 （ただしカラム分離能によって重なる恐れがある）
本キット
細胞
2DG（緑色）を添加
原理上残存の2DGには反応しないので，
RI法と比べて正確に測定できる。
図1 測定原理
図2 本キットとRI法の比較
膵β細胞蛍光染色キット
初代培養細胞・
培地関連
動物由来細胞
抗インスリン抗体を利用しマウス，ラットの膵β細胞を特異的に蛍光染色する事が可能です。
使用目的 使用目的
膵島および膵臓内分泌細胞中のインスリン産生細胞（膵β細胞）の特 異的蛍光染色に使用。FITC標識二次抗体を利用。
構成内容 構成内容
10回用
●洗浄液 1005×1本
●ブロッキング液 25×1本
●抗インスリン抗体 204×1本
●蛍光標識二次抗体 204×1本
品名 品番 包装 希望販売価格 毒劇 貯蔵
膵β細胞蛍光染色キット Pancreatic Beta-cell Staining Kit
AK11F 1set ￥ 48,000 S
［メーカー：PMC］
外分泌細胞
透過光
内分泌細胞
本キットにて染色
1st strand cDNA（ヒト膵島）
初代培養細胞・
培地関連
動物由来細胞
余剰移植用膵島の凍結ストックから調製したTotal RNA 0.50を鋳型にoligo（dT）プライマーおよびランダムプライマーを使用して逆転写反応さ せた1st strand cDNAです。
品名 ドナー情報 品番 容量 希望販売
価格
毒劇 貯蔵 年齢 性別 Race BMI
ヒト膵島cDNA(２型糖尿病)
Human Pancreatic Islet cDNA(TypeⅡ diabetes)
56 F Cauc 38.8 HIcDNA-130 504 ￥ 125,000 R ヒト膵島cDNA(非糖尿病)
Human Pancreatic Islet cDNA(non diabetes)
58 51 52
F M F
Afr.Am Cauc Cauc
29.5 28.4 38.8
HIcDNA-132 HIcDNA-133 HIcDNA-135
504504 504
￥ 65,000
￥ 48,000
￥ 65,000
RR R
［メーカー：PMC］
*包装：504＝total RNA 0.50相当となります。
初 代 培 養 細 胞 ・ 培 地 関 連
レーン1：β-ActinのPCR産物（267bp）
レーン2：Insulin1のPCR産物（210bp） レーン3：Insulin2のPCR産物（392bp）
レーン4：Pancreas duodenum homeobox（Pdx）1のPCR産物（371bp）
レーン5：Sulfonylurea receptor（SUR）1のPCR産物（233bp）
レーン6：Inward rectifying potassium channel（Kir6.2）のPCR産物（417bp）
レーン7：Glucose transporter 2のPCR産物（267bp）
1st strand cDNA（ラット・マウス膵臓）
初代培養細胞・
培地関連
動物由来細胞
RT-PCR用テンプレートとして使用できます
膵臓はRNaseの発現が高く，高純度RNAの調製が難しい組織です。
SDラットまたはICRマウス膵臓から調製したTotal RNA 0.50を鋳型 にoligo（dT）プライマーおよびランダムプライマーを使用して逆転写反 応させた1st strand cDNAです。
特長 特長
●RevertAidTM First Strand cDNA Synthesis Kit（Fermentas 社）を用いて調製したcDNAを滅菌水で10倍希釈しています。
●リアルタイム-PCR用テンプレートに使用できます。（本品は完全 長cDNAではありません。クローニングには適さない場合がありま すのでご了承ください。）
●1反応系（204）に必要な容量は，0.1254（Insulin，rRNAな ど）〜2.54（beta-actin，Pdx-1など）を目安に，お客様のご使 用機器に応じた至適量をご確認ください。
品名 週齢 品番 包装 希望販売価格 毒劇 貯蔵
ラット膵臓cDNA
Pancreas cDNA (first strand) SDラット
7〜10週齢
RPCDNA 504 ￥ 20,000 R
マウス膵臓cDNA
Pancreas cDNA (first strand)
ICRマウス 7〜10週齢
MPCDNA 504 ￥ 20,000 R
［メーカー：PMC］
マウス膵臓cDNAを鋳型にしてPCRで増幅後に解析した結果。
*包装：504＝total RNA 0.50相当となります。
頭蓋由来骨芽細胞培養キット
初代培養細胞・
培地関連
動物由来細胞
凍結細胞が追加 背景
背景
骨組織は骨芽細胞などの造骨系細胞，破骨細胞などの骨吸収系細胞，
さらに間質細胞や造血細胞で構成されており，骨代謝研究の際には器官 培養系による総合的な評価に加え，個々の骨細胞の活性を検討する必要 があります。しかし，現在多くの骨芽細胞様の株化細胞が樹立されてい ますが，必ずしも生体内での骨芽細胞の機能が ですべて発現して いるとは限りません。
本培養キットは，ラット頭蓋骨骨片より遊走してくる骨芽細胞を初代 培養しているので，その機能は保持されています。
使用目的 使用目的
骨芽細胞の活性調節機構の解明，骨形成実験などに有用です。
構成内容 構成内容
［メーカー：PMC］
頭蓋骨骨片より遊走してくる骨芽細胞
品番 動物 週齢 組織 容量
OBC01
SDラット
生後2-4日 未熟頭蓋骨
骨芽細胞 25(フラスコ 1本
培養用メディウム 5005 1本
OBC02 骨芽細胞(凍結細胞) 1×106cells 1本
培養用メディウム(凍結) 5005 1本
OBC11 ICRマウス 骨芽細胞 25(フラスコ 2本
培養用メディウム 5005 1本
品名 適用種 品番 包装 希望販売価格 毒劇 貯蔵
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初 代 培 養 細 胞 ・ 培 地 関 連
骨髄細胞培養キット
初代培養細胞・
培地関連
動物由来細胞
培養条件により脂肪細胞へ分化。再生医療をはじめとした幅広い研究に。
背景 背景
●骨髄には，骨や軟骨，脂肪，筋肉，腱，心筋等様々な組織や臓器特 有の細胞に分化しうる骨髄間質細胞と呼ばれる未分化間葉系細胞
（Mesenchymal Stem Cell）が存在します。この細胞は上記のよ うに多分化機能を有していることから，「再生医療」の分野で様々 な研究が進められています。
使用目的 使用目的
本培養キットは，骨髄より得た接着依存性細胞（骨髄間質細胞）の初 代培養（Primary Culture）になります。
本培養系は，種々の化学物質添加，培養条件により分化の方向をコン トロールすることが可能なため，幅広い研究に応用できます。
構成内容 構成内容
［メーカー：PMC］
■培地
品名 品番 包装 希望販売価格 毒劇 貯蔵
骨隋細胞用メディウム Bone Marrow Culture Medium
BMCM 5005 ￥ 26,000 S
［メーカー：PMC］
品番 動物 週齢 組織 容量
BMC01 SDラット
成熟動物 長管骨
骨芽細胞 25(フラスコ 8本
培養用メディウム 5005 1本
BMC02 ICRマウス 骨芽細胞 25(フラスコ 8本
培養用メディウム 5005 1本
品名 適用種 品番 包装 希望販売価格 毒劇 貯蔵
骨髄細胞培養キット F-8 (ラット)
Bone Marrow Cell Culture Kit F-8 Rat BMC01 8bottle ￥ 156,000 S
骨髄細胞培養キット F-8(マウス) Bone Marrow Cell Culture Kit F-8
Mouse BMC02 8bottle ￥ 182,000 S
未分化の骨髄細胞