（東京女医大誌第28巻第9号頁657−662’昭和33年9月）
成熟ラットの異性間パラビオー一ぜ
における精細胞について
凍：京女子医科大学解剖学教室（主任 久保田くら教授）串田つゆ香・中田甲子雄・佐々木紀元
クシダ
カナカダカネオ ササキノリモト
（受付昭和33年7月26日）
1 緒 言 1862年越ert 2）が始めて皮膚橋による幼若ラッ ト体結合を行ったが，充分な成果をあげるにはい たらなかった。1908年頃auerbruch＆Heyde 15） が家兎において手術的結合に成功し“Parabiose” なる術名が附され，ついでHill（1932）5、， Buns− ter＆Meyer（1933）5）らによりさらに結合術式の 改良が加えられるにいたった。同時にパラビオ一 点動物相互間の体液交流に関する研究が盛に行わ れ，最初パラビオーゼ動物相互間はリンパ液のみ の交流からなると考えられたが，諸種の研究の結 果，毛細管吻合を有することが明らかにされた。Huff， Trautman＆van Dyke（1950）6）はパラ
ビオーゼを利用した内分泌方面の研究においてい わゆるホルモンは結合部を容易に移行しうると述 べている。これらの研究にもとづいて多くの実験 的研究が行われ，ことにパラビオ一輪が雌性性器 に及ぼす影響についての報告は数多くみられる。 異性間パラビオーーゼにおける雄性性器に関する研 究は極めて少く，ことに組織学的立揚よりの報告 は全くみられない。異性間パラビオーゼを行うこ とにより睾丸も何らかの影響を与えるであろうこ とを予測し行ったのが本研究である。 H 材料と研究方法 実験には生後5ヵ月を経過した体重：150g前後の同 腹ラットを使用した。また手術の際の麻酔は麻酔用工 t一e7レ吸入を行った。パラビオーゼ手術は概ねMeyer 氏法にしたがった。すなわち互に結合する側の皮膚を 側胸部より下側腹部にかけて切開し，ついで肋骨弓よ り腸骨稜にいたる腹膜に切開を加え，四辺の腹膜およ び皮膚に各々連続縫合を施した。切開創には感染予防 のためペニシリン注射を行った。手術後動物相互間の 離開を防ぐため，両動物間に絆創膏固定を行った。 以上の方式で異性間パラビオーゼを行い，術後7， 15，20，30日（以下P7， P 15， P20， P 30と略記す る）の期間別飼育を行い，4例において畢丸組織を
Zenker， Levi， ChampyおよびCiaccio液などにて固
定，約5μ厚のパラフィン切片となし，Heidenhain 智歯ヘマトキシリン，ヘマトキシリン・エオジン， K：uJJ氏アニリンフクシンなどの染色を施した。 P30 以後の生存例は少数のため，材料採取はP30までに止 めた。 パラビオーゼは行わず皮膚および腹膜切開，縫合等 パラビオ川町の場含とほぼ同手術を行った動物を対照 例とし，比較を試みた。 皿 自i家所見 異性間パラビオーゼを施した揚合の睾丸を肉眼 的に襯察した場合，各例とも固有の階円形を呈し ている。P20， P30にわいて睾丸被膜の緊張が失 われている状態が観察された。重量においては二 期別に大差はないが，P20頃より幾分萎縮感を呈 する。 ユ）精細管の一般的構造 精細管全体の大きさは対照例に比較するとパラ ビオーゼ例では何れの時期でも小であり，P20， P30にいたると精細管の直径は対照例の約i／21（縮 小する。p30にいたると精細管の所々にくびれを 生ずる。 またパラビオーゼの例では，何れも精細胞の配
Tsuyuka KUSHIDA， Kaneo NAKADA ＆ Norimoto SASAKI （Department of Anatomy， Tokyo
列が不規則となり，漸次細胞間隙が広くなる。さ らにP15にいたると10∼20μにも達する不染性の ：大空胞が出現する。 精血細胞及び精母細胞の細胞分裂は精細管に群 集的におこる傾向を示しているため7，分裂の認 められる精細管と全く認められぬ精細管とは判然 区別することができる。したがって両者の精細管 の比を求めることは精子形成の状態を推測する上 に意義あることと思われる。パラビオーゼの各例 について精細管5GO個を選び百分率を求めると， 対照例では細胞分裂を行っている細胞の存在する 精細管は全体の平均16∼17％において認められ るが，パラビオーゼ例ではP7において10％， P 15∼10％，P20∼7％， P30∼6％で各滑面漸次 減少の傾向を示している。 細胞分裂の心血別の変化には有意の差は認めら れない。 2） 異常細胞 すでに7日例において精上皮中に対照例では認 められないところの巨大なる異常細胞を認める。 この細胞の形質内には多数の小空胞を有するため 明調であり，核は偏心に位し，円形で小さく，精 母細胞核に類似している。核小体は認め難い。し ばしば核は2∼5個在り，所謂巨大多核細胞とし て認められ，核は細胞の基底部に存在する。しば しば多核のうち1核が分裂を行いつつある状態も 獄察される。この所謂異常細胞はパラビオーゼの P7及びP15の時期に漸次増伽のf頃向を示す。し かしPfOでは，本細胞はむしろ少く精上皮中に不 染性の空胞が出現し，P30における空胞化はきわ めて著明となる。 3）遊離細胞 P7においてすでに精細管腔内には，精母細胞 の如き細胞が遊離している。パラビオ一心施行日 数経過とともに，この脱落：細胞も数を増しP20， P301（おいては，いつれの精細管腔内にもこれら の脱落細胞によりみたされ，管腔内にばもはや精 子を認めることはできない。しばしば遊離細胞中 に2∼4核の細胞が認められる。この遊離多核細 胞の原形質内は均等に硝子様に染色され，無構造 である。遊離細胞が増加するとともに精上皮中は 殆ど精祖細胞と思われる細胞がほぼ2列に配列し， 管腔側に1層の精母細胞層を認めるようになる。 4） 脂質穎粒について Levi氏固定により褐色に染まる血塊は，パラ ビオーゼの各期共に著明なる変動をしめす。すな わち対照例では，いつれも精細管の基底部に微小 心血をみとめ，時に2∼3μ程度の少量の願粒を 認めるに過ぎないが，P7においては精細管基底 部に2∼3μ程度の頼粒が多数出現する。これら の顯粒はパラビオーゼの日数経過とともに面明に 増加し，P20にいたるとさらに6∼7μ程度の粗 大櫓投が認められ，2∼5μ程度の大小砂粒が精 細管全体にわたり数を増してくる。 Ciaccio氏法をほどこした賊塞もLevi氏固定を 行える際に出現する適役とほぼ同一部位lc Ciacc− io陽性頼粒を認める。いつれも対照例では認め得 ない愈愈が著明なる変化をしめして出現する。こ れらの所謂脂質顯粒は主としてSertoli氏細胞質 内に認められるものであり精子形成過程との間に 密接なる関係がある。すなわち変性程度の高い精 細管程多くの脂質頼粒を含んでいる。 5）糸粒体について ラットの精細胞の糸粒体は一般に微細で，大部 分が顯粒状である。桿状のものは殆ど認められな い。対照例においてもミトコンドリアの量，形態 及び配列状態などは精細胞の機能との間に密接な る関係を有し，変動をしめす。 パラビオーゼ例と対照例との間に形態及び配列 状態において一定の関係を認めることはできなか った。し、かし量的にはパラビオーゼ例の：P7にお いてすでに各精細胞共，著明に減少し，P20， P 30にいたると精細胞でミトコンドリア顯粒は認め 難くなる。
6）Golgi装置について
精細胞のGolgi装置は対照例においては精子細 胞の核上部に，核に接して存在し，やや発達した 加工として認められる場合が多い。時にはGolgi 装置は2，3条の索条として認められる。パラビ 畠山ゼ例のP7， P 15においてはGolgi装置は， すこぶる認め難く，精子細胞にわっか認められる ものは網工を形成せず，2，3条の簡単なる索条 をなす。P20， P 30ではGolgi装置は殆ど認め られない。 皿 考 察 異性間パラビオーゼ施行後，7日目においてす でに精細管内には細胞分裂の減少，’脂質願粒の出 現，異常細胞及び遊離細胞の出現などの変化が認 一 6S8 一一められた。P15においては以上の変化が著しく， P20における精細胞核は濃縮を呈するもめもみら れる。P30に至ると精細管内は精祖細胞及び精母 細胞のみの配列となり，精子形成過程は認められ ない。 精細管内の脂質顯粒の意義については西田（1 952）11）により詳細に報告されているが，パラピオ ーぜ施行後，その期間経過と共に起る脂質顯粒の 増加傾向は，精子形成状態との問に密接なる関連 を思はしむるものがある。すなわち精子形成が滅 弱している精細管ではSertoli氏細胞質内におけ る脂質顯粒が増加する。これは精子形成に関して 精細胞は多くの脂質を必要とするために，Sertoli 氏細胞内の脂質願粒から消費されるが，精子形成 過程に異常をきたし，脂質穎粒はSertoli氏細胞 質内に異常蓄積を起すものと考えられる。 牧野（工951）9）は腫蕩細胞において出現する多 核細胞について，異常核分裂による細胞質の不分 離であると述べているが，精細管内には正常の場 合でも，多核細胞はかなりの頻度に出現する。異 常核分裂に伴い多核細胞は増加するが，この場合 は異常核分裂による細胞質の不分離の他に，細胞 の融着も考えられる。 精細胞におけるミトコンドリアは精子中片形 成に1、，ま7： Golg五装置が精子頭部形成に関与す るということは古くより考えられ，また：最近は組 織化学的に14），あるいは電子顕微心的4・12）にも実 証せられている。 パラビオーゼ例におけるミトコンドリア及び Golgi装置は期間経過と共に減少し，あるいは消 失するなどの所見は対照例とはかなりの相違を示 しており，此の点からも精子形成上の異常を示し ていることがうかがわれる。 睾丸組織の萎縮現象に関しては，最近不可欠 アミノ酸欠乏による実験の結果が報告されてい る8）。また中田（1958）10）は女性ホルモン投与に より睾：丸組織に萎縮現象の起ることを報告した。 パラビオーゼを行うことにより睾丸組織に起る 変化は不可欠アミノ酸の欠乏時，あるいは女性ホ ルモンの投与の際におこる萎縮現象とほぼ同一で ある。…方パラビオーゼ動物問のホルモンが容易 に交流することはすでに多くの学者により報告さ れている。したがってパラビオーゼ施行後に起る 睾：丸組織の萎縮的変化は，所謂ホルモンの異調現 象であることが考えられる。 Iv 結 論 異性闇パラビオ…一一ゼの暗闇別飼育後，睾丸組織 の組織学的観察を行い，主な所見は次のごとくで ある。 1） 精細管上皮はパラビオーゼの期間経過と共 に精細胞配列が不規則となり，異常細胞を認め， 漸次空胞化する。 2） 精細管腔内にはP20以後は殆ど精子を認め ず，遊離細胞で充たされる。遊離細胞は主として 精母細胞であり，P7においてすでに認め漸次増 加の傾向を示す。 3） 精髄細胞及び精母細胞の細胞分裂i数もパラ ビオーゼの嬉戯経過と共に漸次減少の傾向を示 す。 4）脂質穎粒の分布は対照例では極めて少ない がP7からすでに出現し， P15， P20と，漸次増 加，P20， P30においては最：も多く認められる。 5）精細胞中のミトコンドリアはすべて顯粒状 で，その形態及び配列状態には特別の変化を認め ることはできなかった。しかし量的には漸次減少 の傾向を示す。 6）精細胞中のGolgi x一置もパラビオ ・一 tf例で は少く，P20， P30では殆ど認められない。 以上の所見から異性閥パラビオーゼにおける睾 丸組織は，早期に萎縮的変化を示すことが考えら れる。 稿を終るにのぞみ多大の御教示と御助力を賜りまし た本学薬理学教室，小山教授に濃雑なる謝意を表しま す。 文 献
1） Austin， C．R． ＆ Sapsfort． C．S． ： Roy． Micr．
Soc．， 71， 39 （1952）
2） Bert， P．：J． Anat． et physiol． 1， 16 （1864）
3） Bzanster， E． ＆ MeJ’er， R．K．： Anat． Rec．，
57， 339 （1933）
4） Burgos， M H． ＆ Faweett， D． W．：J．
Biophys． Biochem． Cytol．， 2， 223 （1956） 5） Hiil， KT．：J． Exp． Zool． 63， 203 （1932）
6） Huff， R．L．， R． Trautman and D．C． van Dyke：． Am． 」． Physiol． 161， 56 （lq．50）
7）石澤政男：福岡医心，15，6（1922）
255 （1953）
9）牧野佐島部：癌，42，90（1951）
10）申田甲子雄：解剖誌（抄），33，229（1958）
11）西田隆雄：科学，22，475k1952）
12） Palade， G．E．：Anat． Rec．， 114， 427 （1952）
13） Sauerbruch， E． ＆M． H yde．：Mifnchen． med． Wochnschr．， 1， 153 （1908）
14） Schlader， F． and Leuchtenberger， C．： Chromosoma． 4， 404 （1951） 附図説明 第1図：対照例における精細管。Zenker氏固定， ＾マbキシリン・エオジン染色。 第2図：P20における精細管。 Zenker氏固定， ＾マトキシリγ・エオジン染色。 第3図：P30における精細管。 Zenker氏固定， ヘマトキシリン・’＝オジン染色。 第4図：P20における精細管上皮中に空砲化をみと める。Levi氏固定，鉄ヘマトキシリソ染 色。 第5図：P30において精細管腔内に主として精母細 胞に由来せる遊離細胞をみとめる。上皮中 は殆ど精祖細胞のみ配列し精子形成過程は 認められない。Levi氏固定，鉄ヘマトキ シリン染色。 精細管上皮中にP7おいてす．でに図のごと 第6図 き巨大多核細胞を認む。Levi氏固定，鉄 第7図 ヘマトキシIJン染色 第8図：P7における精細管上皮中に各精細胞が融 合せるがごとき状態を認む。Levi氏固 定，鉄ヘマbキシリン染色。 一 660 一
串田・中田・佐々木論：交附図〔1）
第ゴ図
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第3図
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串田・中田・佐々木論：文附図（2） ．磯
