論文審査の結果の要旨
氏名：宮 千 尋
博士の専攻分野の名称：博士（歯学）
論文題名：Porphyromonas gingivalis gingipains induce MUC5AC production in respiratory epithelial cells and in mouse lung
（Porphyromonas gingivalis のジンジパインは呼吸器上皮細胞とマウス肺において MUC5AC
の産生を誘導する）
審査委員：（主 査） 教授 佐 藤 秀 一
（副 査） 教授 米 原 啓 之 教授 今 井 健 一 教授 金 子 忠 良 教授 川 戸 貴 行
歯周病は歯肉の炎症と歯槽骨の破壊を特徴とする炎症性疾患で，30歳以上の約8割が罹患している。
歯 周 病 の 発 症 と 進 展 に は ， バ イ オ フ ィ ル ム に 生 息 す る 口 腔 細 菌 が 複 合 的 に 関 与 し て い る が ，
Porphyromonas gingivalis は最も重要な歯周病原菌である。P. gingivalisは，病原因子として線毛および
LPSを有するとともに，ジンジパインなどのタンパク分解酵素を産生する。ジンジパインはこの菌種 に特有の酵素で，基質の違いからarginine-gingipain (Rgp) とlysine-gingipain (Kgp) とに分類される。
歯周病は歯を喪失する最も大きな要因となるだけでなく，誤嚥性肺炎や糖尿病などの様々な全身疾 患の誘因となることも明らかとなってきた。したがって，歯周病予防は口腔の健康のみならず，全身 の健康維持にも重要との考え方が広まっている。最近では，慢性閉塞性肺疾患 (chronic obstructive
pulmonary disease: COPD) の増悪においても，歯周病が深く関与していることが明らかとなってきた。
肺炎および COPDの際，気管支上皮細胞から分泌型ムチンのコア蛋白であるMUC5ACが過剰産生さ れるため，気道の狭窄や喀痰の原因となり肺炎やCOPDが増悪する。しかし，歯周病および歯周病原 菌が呼吸器のムチン産生に及ぼす影響は不明である。
そこで本研究では，P. gingivalisがMUC5ACの発現を誘導することにより，肺炎やCOPDの発症と 増悪に関与しているのではないかと推察し，呼吸器上皮細胞 (NCI-H292細胞とプライマリー気管支上 皮細胞) およびマウスを用いた実験を行った。
その結果，以下の知見を得た。
1. NCI-H292細胞をP. gingivalis培養上清で刺激した結果，MUC5ACの遺伝子発現と蛋白質産生は上 清の量依存的に誘導された。同様の結果はプライマリー気管支上皮細胞においても認められた。
2. P. gingivalisのLPSと線毛刺激では，MUC5ACの産生は認められなかった。
3. P. gingivalis ジンジパイン欠損株の培養上清を用いた実験から，P. gingivalis 培養上清による
MUC5ACの産生にはジンジパイン，特にRgpが必須であった。
4. マウス肺においてもP. gingivalis培養上清を投与した群においては, 肺の杯細胞にMUC5ACの発 現とムチンの産生が認められた。しかし，in vitroの結果同様，ジンジパイン欠損株の培養上清に
おいてはMUC5ACとムチンの発現誘導は認められなかった。
以上の結果から，P. gingivalisのジンジパイン，特にRgpはMUC5ACの発現を強く誘導することが 明らかとなり，歯周病の進行に伴うP. gingivalisの誤嚥が，ムチンの過剰産生を介して気道の狭窄や喀 痰の原因となりうることが示唆された。本研究の成果は，口腔衛生管理と呼吸器疾患との関連を解明 する上で興味深い基礎的知見を提示しており，医科歯科連携の推進と口腔外科学, 歯周病学ならびに 関連歯科領域分野の発展に寄与するものと考えられた。
よって本論文は，博士(歯学)の学位を授与されるに値するものと認められる。
以 上 令和３年３月１０日
