傷 害 保 護 関す 研究 潰 瘍 指腸粘 膜 実験的 胃十

金沢 大学 十全医 学 会 雑 誌 第9 0巻 第2 号 2 51 ^‑2 68 (1 9 81)

実 験 的^ス ト ^{レ ス}潰瘍 ^{に おけ る}胃 十二指 腸 粘膜^の 傷害^{お よ び}保護 ^に関 す^る研 究

金 沢大 学 医学 部 第 ^一外 科 学 教室 (主任

^:

岩 喬 教授)

林 外 史 英

( 昭和

^{5 6}

年

²

月

^{1 2}

日受付 )

2 5 1

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.

急 性 出 血性 潰瘍^,

^い

わ ゆ る

ス

ト

^レ ス

潰 瘍は, 保 存 的 治療

^に

抵 抗し, 難 治性 疾 患

^の

¹

^{つ で}

^{あ る. そ}

^の

誘 発 因 子と し

て

, 手 術 侵 襲^{一 曲}

に

よ る も

^の

^, 熱 傷

に

よ る C

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頭 部 外 傷, 脳 外 科 手 術 後

^の

C

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が よ く知ら れ

^{て い}

る. そ

^の

病 態 生理

に つ

き, 様

^々

な角 度か ら実 験 的, あ る

い

は臨 床 的 研 究 が な さ れ

て い

る

に

もか か わ らず, 未だ十 分な解 決が得 ら れ

^{て い}

な

い の

が現 況

で

あ る^.

ス ト レ ス

潰 瘍

^の

定 義^{3) 4 )}

に つ い て

は, 研 究 者 間

で い

ま だ 意 見 が分か れ

て い

る.

C

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ら^5】は

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と

い

う言 柴を用

^{い て い}

る が,

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を意 味し

て い

る. S

e p a r a n z a

^{6 )}は, 急 性 粘 膜 病

^の

論 文

^で

, そ れ を病理学 的

^に

,( 1) び ら ん性 出 血 胃 炎

^で

, 枯 膜

^の

び ら ん

の

み

で

_, 療 痕 形 成な し

に

治 癒し,

多 発性

^で

あ り^, 胃 休 部^t 胃底 部

^の

酸 分 泌 領 域

に

発 生 す る も

^の

, (2)C

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'

s u

l

c e r

等

に

見ら れ る 急性 胃 十

^二

指腸 潰瘍 ( 狭 義

の ス ト レ ス

潰 瘍)

で

, 療 痕 形 成し た後

^に

治癒し, 十

^二

指 腸, 胃体 郡

^{の ア}

ル カ

リ領 域

^に

発 生す る も

の

,

に

大 別し

^{て い}

る. 今ま

^で の

実験 潰 瘍

^の

報告

^で

は, 潰瘍

^の

深 遠 度は病理組 織 学 的 分 類

で

は, 粘膜 (U l‑ ^{1) お よ び}粘 膜 下 (U l‑ ^Ⅱ) ^ェ

ロ

ジ オ ン の

浅

^い

病 変が 主体

^で

あ り^, そ

の

好発部 位は,

胃 休部^{7 ト 】O I}と す る も

^の

が多

^い

.

著者は

ス ト レ ス

潰 瘍発生

^の

要 因を探 求し^, か

^つ

そ

^の

対 策を検 討す る目 的

^で

,

ラ

ッ

ト

を 用

^い

無 麻 酔 下

で

四肢 拘 束, 水 浸, 実 験 的

ス ト レ ス

潰 瘍を作 成し, 胃 十

^二

指 腸粘 膜

^の

変 化を, 血 行動 態,

エ ネ

ル

ギ ^ー代 謝, 及び形

態学 的な面よ り検 討し た. さ ら

に

,

ス ト レ ス

潰 瘍

^に

対

す る治 療と し

て

t 試 作し た胃 内潅 流液を 用

^い

, 潰 瘍 発 生及 び, エ ネ

^ル

ギ ^ー代 謝

に

及 ぼす 影響

^{に つ い て}

検 討し

た.

対 象及 び方法

Ⅰ^. 使用動 物

W i

s t a r

系

^ラ

^ッ

^ト

雄 (2 7 0

g

^〜 3 0 0

g

) 1 4 0匹を用

い

た^.

Ⅱ. 実 験 方 法及 び実験群

1)

^{ス ト} レ ス

潰瘍 作成 群 (以後A 群と す る) 及び 方 法

^{: ラ}

^ッ

^ト

は実 験前2 4 時 間は絶 食と し,飲 水

^の

み を と ら せ た^. 先ずt

ラ

ッ

ト

を平 板上

に テ

^ー プ

で

四肢 固 定 し た^. そ

の

後2 0 ℃

^の

恒 温 水 中

^に

, 両下 肢が水 浸す る ま

で

十 分

^に

浸 水さ せ,. 平 板と水 面と

の

角 度を約3 0⁰

に

保

っ た^.

2) 対照群

:

四肢 固定 前

^に

腹 腔 内

^{に チ オ ペ ン タ}

^ー

ル

N

a

3 0

m g

/ k

g

を注 入し^, 外 的 刺 激

^に

全く 反応し な

い

群と し た.

3) 胃 内 潅 流 群 (B群) 及 び海 流方 法,液 組 成

: ス ト レ ス

負 御 寺

^の

胃 十

^二

指 腸 粘 膜

^の

保護, お よ び

^{ス ト}

レ

ス

負 荷 終 了 後

^の

粘 膜

^の

回 復促 進を目 的と し

て

_. 0 ℃

に

冷 即し た 5 % ブ

^{ド ウ}

糖5 0 0

皿

エ

に

,

p

H 調 整

^の

た め N

a

H C O3 を 添 加, 血 管 拡 張を 目 的と し

て

K C 1 4 0

m

E

q

/ L を加え た液を試 作し^, 胃 内 潅流を行^っ た^. 潅 流 方法は. 開 腹 後, 胃を露 出し, 胃 底 部, お よ び十

^二

指 腸 球 部よ り月工側1

^{c m に}

小切 開を加え, 各

^々

1 9 G

^{の チ}

ュ

ー ブ を括 入し, 液

^の

流 入口, 流 出

^口

と し た^. 滴 下 速 度は30

c c

/時 間と し た.

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4) 迷 走 神経 切 断 (C 群)

:

迷 走 神 経 切 断

^に

^{よ る}減 酸 効 果が

ス ト レ ス

潰 瘍

^に

ど

^の

よ う な影 響を与え る か を み る た め

^に

作 成し た.四肢 水 浸

ス ト ^レ ス

負 荷

^に

先 立ち,

開腹し,噴 門よ り 0^.5

c m

上 方

^で

.迷 走 神 経 本 幹を結 繋^, 離 断し た. し か る後,

ス ト レ ス

負 荷を加え た^.

Ⅲ^. 測 定 項 目及 び測 定 方 法 1.

一般 的観 察

1) 血 圧

^の

測 定 ( 頸 動 派 圧

^の

経 時 的変 化)

A 群

^で

測 定し た^.

ス ト レ ス

負 荷前

に

左 外 頚 動脈

^に

2 4 ゲ ^ー

^{ジ の ベ ノ チ}

^{ュ ー} ブ を揺 入し, 日本 光電 社 製

^の

多用 途 監 視 記 録 装 置を用

い て

動脈 圧を経 時 的

^に

測 定し た.

2) 潰 瘍 発 生 状 態

^の

観 察

･･^｢

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ト

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.

5時 間

^の

水 浸

^{ス ト} レ ス

負 荷 後^, 直ち

に

, 胃 十二指腸 を摘 出し, 大 雪 側

^に

沿^っ

^て

切 開^, 粘 膜よ り

^の

出血 状態

を観 察し た.

3) 潰瘍 係数 (以後U ^･ Ⅰ と略す)

粘 膜か ら

^の

出 血,

ビ ラ ン の

観 察 後t 潰 瘍

^の

縦と桟

^の

積を も^っ

て

潰瘍 係 数^川と し た.

4) 血 清ガ

ス ト

リ

ン の

側 定

A 群 及び B 群

^に

お

い て

, 経 時 的

^{に ス ト レ ス}

負 荷 後,

尾静 脈よ り採 血し^, 血 清 分 離し^, R I A 法^{1 2 I}

^に

よ り血清 ガ

ス ト

リ

^ン

値を測定し た.

2^. 血 行 状 態

^の

観 察 1) 胃十

^二

指 腸粘 膜 血流 測 定

① 胃 休部,② 前 庭 部,③ 十

^二

指 腸 球 部 前 壁

^の

中^JL

り こ

,

コ

^ー

テ ィ ン

グ さ れ た白金電 極を胃 十

^二

指腸粘 膜 内

に

刺 入し た.

こ の

電 極^を本 体

^に

接 続 後,

ラ

ッ

ト の

鼻

口

部

^よ

り,3エ/ 分

^の

割 合

^で

水 素ガ

^ス

を 1 分 間 吸 入さ せ た後.記 録 紙 上

^の

水 素イ オ

^ン

消退 カ ^ー プ よ り血 流藍 を測 定し た^.

こ の

測 定

^に

は, U N IQ U E M E D I C A L 社 製

の

p 口G 2 01 水 素

^ク

リ

^{ア ラ ン ス}

式 組織 血流 計を用

^い

た^. 水

素イ オ

^ン

を利 用し た

こ の

方 法は^{1 3 卜 1 5)}, 1964 年

に

A

u

k l

a n

d 等

^に

よ り発 表さ れ た方 法

で

, 体 内

^で

不 活性,

拡 散 性

^の

高

^い

水 素ガ

^ス

を呼吸 と共

^に

吸入さ せ, 血流を 通し

て

生 体

^の

各 組 織 申

^に

^一 定 濃 度

で

飽 和させ,

こ の

軋 水 素ガ

ス の

供 給^を止め, 組 織 中に蓄 積さ れ た水 素ガ

ス

が血 流

^に

よ り洗

^い

流さ れ る状 態を連 続し た ^一

^{つ の}

曲

､ 線,

い

わ ゆ る

^ク

リ

^{ア ラ ン ス}

曲線 ( 図1) と し

^て

求め,

記 録, 解 析し, 組 織 血 流を K

e

t

y の

理論 式^1剛7‑( 図2)

c

i

^: C

i ｡

^.

｡ 入 ｡

= C

i ｡

.｡

‑ そ

^t

… … … … … ‥(^A)

C

i :

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g

^{e n}

g

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b

y

K

e t

y^･

実験 的

ス

ト

レ ス

潰瘍

の

研 究

に

基^{づ き}絶 対 値 (K ⁼ 69.3 / T l /2

^m

L /

m

i

n

/ 1 0 0

g

)

で

求 め る方 法

^で

あ る.

2) 胃粘 膜 血 管 鋳型作成

ス ト レ ス

負荷 後,

ラ

ッ

ト

を 左開 胸し, 胸 部 大 動 脈

^に

1 9 G 八 光針を刺 入^, 固 定し.

一方 門 脈を諾 出し^, 小 切 閑を加え, 脱 血を行^った, 先ず,3 0 ℃

に

加温し た リ

ン

ゲ

^ル

液

^で

全身を十 分 海 流し た後. 更

に

2^.5 % ダ

ル

ク ^ー

ル ア ル デ ヒ ド で

1 分 間 海 流し, 組織 固 定し た.固 定 後.

樹 脂 (M

e r c o x

) を用

い ∴

主剤 (C l ^‑ 2 R)2 0

g に

対し,

硬 化剤( M A ) U^.5

g

を 混 ぜ,1 2 0

^{m m}

H

_g

以下

^の

圧

で

緩か

に

注入し, 室温中

に

5 分 間放 置^{し た}後, 胃を摘 出し た^. 除 蛋白を行う為

に

, 2 0 % K O H 中

^に

3時 間浸し, そ

^の

後 清水 中

^で

1 時 間 洗 浄し た.

こ の

操 作を 5 固 練り返し,

乾燥さ せ, 血 管鋳型 を作成し た^.

こ

れ を, 走 査 電 顕 (日 立製岬^､S‑ ²)

^で

微細 構 造を観 察し た.

3.

a

d

e n

i

n e n u c

l

e o t

id

e の

測 定

2 5 3

1) 粘 膜

^{の ア}

デ

ノ シ ン

3 リ

ン

酸 (A T P) ,

ア

デ

ノ シ ン

2 リ

^ン

酸 (A D P).

ア ミ ノ

酸1 リ

^ン

酸 (A M P〕

^の

測定 5 時 間

の ス ト レ ス

負 荷 後, 摘 出し た胃 十二指 腸

^の

標 本を用

^い

た^. A 群^.B 群

^で

測定し た^.測 定 部位は① 胃休 部, 壇

⁾

前 庭 部, ③ 十

^二

指 腸球 部と し た. ①^〜 ③

^の

部 位 よ り全 層を採 取 後 直ち

に

粘 膜を剥 離し,

ド ラ

イ

ア

イ

ス

,

ア セ

ト

^ン で

凍結し, 重 量を測 定し. 0 ℃

に

冷 却^{し た} 0 ^.5 M 過 素酸^中

^に

入れ, ガ

ラ ス ホ モ

ジ ナ イ ザ ^ー

で ホ モ ジ ナ

イ ズ し, そ

の

上 清を U ^･ Ⅴ法 ( 図3 )

^{に て}

測 定し た.

2) 胃 十二指 腸 粘 膜組 織

^{の a}

d

e n

i

^{n e} n u c

l

e o

ti d

e の

動 態

U ^･ Ⅴ法

で

測 定し た,A T P ,A D P ,A M P を塞

^に

^,粘 膜

の

エネ

^ル

ギ ^ー 代 謝

の

経 時的 変 化

^の

示 標と し

て

_, 計 算 式 (A T P

+

1 / 2 A D P / A T P

⁺

A D P

⁺

A M P)

に

基づ

い て

求め た^{1 8) 欄}

m e

th

o

d

:

t N E

n

d P

o

int t

e c

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iq

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一

m u C O S a

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^･ 0 .2 g O .5 M H C l O

4

‑ 1 2

皿

1

･･･

…

･

C e n

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i fu g

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l O

m

i

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･

, 3 0 0 0

r

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^.

m a n a

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^t

^:

S O

l

u

ti

o n

I 2 0

m

l … … ‥0 ･5 M t

r

i

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b

u

蝕

r

p H 7 ^.6

+

gly

^{c e r a}

^t

^e

^‑3^‑P h

^{o s}

p h

^a

^t

^e

S O

l

u

ti

o n

Ⅱ 0.2 血1.... … .N A D H

十 S u

p

^{e r n a}

^t

^{e n}

^t O.2

m

l

l

m

反乱

汀 e

‑‑‑‑･‥

^→ 皿 e a S u r e

(^E

^l

) 1

S O

l

u

ti

o n

IⅡ 0･0 2

m

l … …

‥G A P D H , P G K_, G D H_, T T M J

l

a

y

^{a s}

id

e

fb

r

l O

m

in

_す m e a S u r e

￠

²

)

E

ユ

ー E

l

⁼ △E

△￡ × 2 3 6 ⁼

r e S u

l 血 g d

e n

血y (

^m

釘^dり

C O n

diti

o n : W a V e

3 4 0

n m

t

e m

pe

^{r a}

^t

^{u r e}

2 0 ^〜2 5⁰c

Fi

g

^. 3.

m e a s u r e m e n t _o

f A T P^.

4^. 病理組 織 学 的 検 討

実 験終 了後, 胃十

^二

指 腸を摘 出し,10 %

^{ホ ル マ}

リ

ン

固 定し た. そ

^の

後, 肉眼 的 及び H ^‑ E 染色を行

^い

検 鏡 し た^.

成 績

1 ^{. 一}般 的観 察 1 ) 血 圧

^の

変化 ( 図4)

ラ

ッ

ト

動 脈 圧は対 照群

で

は 1 06

^±

1 2

^{m m}

H

g

(M

e a n

± S^. D^. 以下 す

べ て

同様)

^で

あ り, 1時 間 後

^の

圧 110

±16

m m

H

g

^,5 時 間 後

^の

圧 102

^±

1 0

m m

Il

g

と

^の

間

に

は 有 意 差を認め な か^った.

2) 潰瘍 発 生 状 態 ( 表1)

巾 m

H g

皿

】

∝

⊃ 叫 S

】 鉱 d

害｣

∞

O t 2 8 ヰ 5 h

r

n :

13

× p

^:

N

.

S

n os

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ⁿ

摘

c a n

t d 肋

r 帥 C e

血

M

i

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F i

_g

. 4. C h

a n g e O

f

c e Ⅳ

i

c

al b l

^{o o}

d p

r e s s u r e

i

n

5 h

o u rs S t r ￠S S

.

A 群

で

ほ, 3 5 匹中 34匹

^に

( 94 %) , B 群

^で

は 50 匹 中3 匹

^に

( 6 %) ,C 群

で

は 2 4 匹 中 21 匹

に

(8 8 % )

^ビ ラ ン

を 認 め た^. A,B ^,C 群と も十

^二

指 腸 球 部

^に

は肉眼的

に ビ ラ ン

は み ら れ ず, す

^べ て

後 胃

^に

限ら れ, 潰 療

^の

深 遠 度は U l ^‑ Ⅰ か ら Ⅱ

^の

浅

^い

潰 瘍

^で

あ^っ た^.

A 群 (

^{ス ト レ ス}

負 荷 群),C 群 ( 迷 走 神 経 切 断 群) 共

に

3 時 間を境と し

^て

,出 血 点

^の

増 加が み ら れ た が,B 群

で

は 3 時間 後に 4 タ右.5 時 間 後

^に

6 % と,著 明な増 加は 認め な か^った^.

3) 潰 瘍 係 数

^の

変 化 ( 図5)

3時 間 後

^に

は A 群

^で

は^,4 8

^±

1 2

^{m I}

ぜ,C 群

^で

は,4 0

±11Ⅰ

Ⅵ

d と急 上 昇し,5時 間後

^に

は A 群

^で

は 5 7

±

1 5

m I

ぜ,C群

で

は 48 ±9

m r

ぱ

で

あ り両 者

^に

は有 意差を認

め な か^っ た. (P

<

0.1)

一方B 群

^で

は,5時 間 後

^に

は 8

^±

4

^{m n}

f

で

あ り,A,C 群

に

比

^べ

低 値

^で

あ^った^.

4) 血 清ガ

ス ト

リ

^{ン の}

変 化(図6)

5 時 間 後

^に

は, 胃 内海 流 群

^で

は60 ±33

p g

/

m

エ,

ス ト レ ス

負 荷 群

^で

は 7 5

^±

4 1

p g

/

m

エ

で

あ り^, 両 者 間

に

は有 意 差を 認 め ず^{, 一} 方,1 時 間 値と 5 時 間 値^を, 各

^々

比較 し

て

も, 値

^に

差を認め な か^っ た^.

2 ^. 血行 動 態

^の

観 察

1) 胃十

^二

指 腸 粘 膜 血流

^の

変 化 ( 図7)

各 群 共

^{に ∴}

実験 開 始時 点に最高 値 ( ① 胃 休 部

;

93

^±

31

m

L /

^m

i

n

/ 1 0 0

g

, ② 前 庭 部

^;

63

^±

1 8

m

L / mi

n

/ 1 0 0

g

.

③十二指 腸 球 取1 5 6

^±

33

^m

エ/

m

i

n

/1 0 0

g

を 呈 し^･実験 開 始 時 測 定 値

^に

比較し^,5 時間 後

^に

は,①

^で

は 3 4

^±

1 3

m

L /

m

i

n

/ 1 00

g

, ②

^で

は 1 4

^±

5

m

L /

m

i

n

/ 1 0 0

g

, ③

^で

は 4 6

^±

8 山 /

^m

i

n /

1 0 0

g

と有 意

^の

減 少を み た^. ( ①

^:

P

^<

0 .0 1 ,②

^:

P

<

0^.01 ^, ③

:

P

^<

0^.0 5) ^.1 時 間 後迄, 急 激な血 流 低 下を臥 そ

^の

後は緩か な減 少

^で

あ り^, ㈲,

②

^で

は 5 時 間

^に

は^, 開始 時

^の

約1 / 2

に

低 下し た が^･ 項)

で

は約1 / 3

^の

低下

^に

と ど ま^っ た^･

2) 胃粘 膜 血 管 鋳 型

^の

所見

樹 脂

に

よ る血 管 鋳型 を走 査 電 敢

^に

よ り観 察し た^■ 正

T

a

b l

e

l. T h

e

加 q

u e n e y o

f

e r o s

i

o n s

i

n e x

p

^{e r}

i

m e n t

al

s t r e s s u

l

c e r s

^･

血

e

1 2 3 4 5

g r O u

p

s

加 S S

卵

^u

p 9 9ら 2 0 % 8 3 9ら 9 1% 9 4 %

ⁿ

⁼3 5

+ v a g o t o m y

4 % 1 2% 6 8% 7 5% 8 8 %

ⁿ

⁼2 4

+

p

^e

血 血

沈

摘 2% 4% ^{4 % 6}%

ⁿ

⁼5 0

実 験 的

^ス

ト

レ ス

潰瘍

^の

研 究

常 粘膜

^で

^{は, 一}般

に

粘 膜 下

^の

動 脈よ り, 粘 膜

に

向か^っ

て

血 管分 布が見ら れ, 緬 動 脈よ り毛 細 血 管

に

な りt 隣 接

^の

血管 同 士が密 接

^に

吻 合し

て い

る

^の

が見ら れ, 網 状

に

な り, 胃内 腔

^に

向か^っ

て い

る^. し か し, 血 管 分布 密 度

^で

は胃休 部と前 庭 郎 問

に

相 違が 見 ら れ た.胃休 部( 写 真1)

で

は, 前 庭 部 ( 写 真2 ) よ り も密な血 管 分 布

^で

あ る. し か し, 隣 接

^の

血 管

^の

吻 合形 態

^に

は相 遵は認め ら れ な

^い

が一 両 者 共

に

_, 血 管 分岐が多

^{い の}

が確認

^で

き た^. 更

^に

拡 大す る と(_写真 3 ), 毛 細 血管 端は丸 味を お

0 】 2 3 4 5 h

r

リー^S

^t

^{r e S S}

^g

^{r O U}

^P

‑ 一 ‑ ^{V a}

^g

^O

^t

^{O m}

^{y g}

^{r O u}

P

w ‑ ‑

p

^e

け

u s

i

o n

g

^{r 飢}

叩

.

F i

g

^. 5^. C b

a n g ^{e o}

f U I

c e r

I

n

d

e x

.

50

80

50

之

‑ 鉱 ト

∽ くq

‡

⊃

∝

】 S

0 1 2 3 ヰ 5 h

r

毒‑‑ ^{P e}

^〃

^{u s}

ⁱ

^{o n}

^g

^{r o}

^叩

^{n :}

¹⁶

^×

｢^{て S}

^t

^{r e S S}

^g

^{r O U P n :}

¹²

^{× ×}

^P

^:

^N

^.

^S

n osl g n

か触

a n

t d 椚

e r o n c e

F

i

_g

･ 6. C h

a n g e O

f

s e r u m g ^{a S} t r

in.

2 5

5

び た盲端

^で

あ^った^{. 一} 方5 時 間

^{の ス ト レ ス}

負荷 後

に

.

出 血 性

^{エ ロ ジ}

オ

^ン

を 認 め た粘 膜

^に

は, 粘 膜 内

に

数か所

に

血 管よ り

^の

樹脂

^の

渦 状

^の

漏 出 ( 写 真4t写 真5) が見 ら れ る. そ

^の

周 囲

^の

隣 接す る血 管 群

^で

^は･漏 出が見ら れ な

い

が, 正常 粘膜 組織と比 較 する と, 全 体

^に

, 毛細 血 管

に

お

い て

, 血 管 壁

^の

不 整が目 立ち, 特に血 管 吻 合 部

械U C O S A L 8L ∝柑 F L O W

m

l /

^m

i

n

/ 1 00

g r

O 1 2 3 4 5 h

r

∵ bu伽s x p く0^.0 耶

】 ‑ ^{C O rplt S n:1 3 × × P く0.Dt}

‑ ‑ ‑ a ntr u l¶ × × × p く

0

.0 5

F i

_g

･ 7^･ C h

a n

g

^{e O}

f b l

o o

d fl

o w

i

n t

h

e

g

^{a s t r o}

d

u o

d

e n

al

I n n C O S a

.

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5

( d 一

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‑

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r

[

二 ｢ ^{∽叩 U S}

重

要

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… %

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伽 ‑r o m

F i

g

^･ 8^･ C h

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f A T P i

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^.