博 士 （ 医 学 ） 北 市 雄 士
学 位 論 文 題 名
モノアミン酸化酵素阻害薬の抗うつ作用，抗不安作用に 対するりチウム増強効果の作用機序に関する研究
（脳内微小透析法及び恐怖条件付けストレスモデルを用いた 神経化学的，行動薬理学的研究）
学位論文内容の要旨
モノ ア ミ ン酸 化 酵 素 阻害 薬(MAO阻 害薬 ） は ，う つ 病 の治 療 に 有効 で あ る こと が 臨 床的 に 報 告 さ れ て い る ． MAOはtypeAとtypeBの2つ の サ ブ タ イ プ に 分 類 さ れ ，MAO‑Aは ド バ ミ ン (DA)， ノ ル ア ド レ ナ リ ン(NA)と セ ロ ト ニ ン(5‑ HT)を 脱 ア ミ ノ 化 し ，MAO‑Bは 主 と し て DAを 脱 ア ミ ノ 化 す る ．MAO阻 害薬 は う つ病 の 治 療の 他 ， 最近 種 々 の不 安 障 害 の治 療 に も用 い ら れ る が ， 選 択 的MAO‑A阻 害 薬 は こ れ ら の 疾 患 に 有 効 で あ り ，MAO‑A阻 害 はMAO阻 害 薬 の 抗 う つ ・ 抗 不 安 作 用 の 主 な 作 用 機 序と 考 え られ て い る．NAまた は5．HTの 再 取り 込 み を阻 害 す る 抗う つ 薬 の効 果 が り チウ ム で 増強 さ れ るの と 同 様に ，MAO阻 害薬 の抗う つ効果が りチウ ム に よ り増 強 さ れる こ と が 明ら か と 詮っ た ． しか し 、MAO阻 害薬 の 抗う つ効果 をりチウ ムが増 強 する 作用機 序はいま だ神経 化学的に 明らかで はない ．そこで 本研究 では，脳 内微小透断実験を用 い ， リ チ ウ ム の 亜 慢 性 投 与 がMAO‑A阻 害 薬 に よ る5−HT，DA，NAの 細 胞 外 濃 度 増 加 作 用 を 増 強 する か ど うか に つ い て検 討 し た． ま た ，リ チ ウ ムとMAO‑A阻 害薬 の併用効 果につい て，不 安 の 動物 モ デ ルで あ る 恐 怖条 件 付 けス ト レ スを 用 い た行 動 薬 理実 験を 行った ．さらにMAO‑B阻 害 薬 に 対 す る り チ ウ ム 亜 慢 性 投 与 の効 果 も 検討 し ，MAO‑A阻 害 薬 に対 す る 効 果と 比 較 した ． 実 験 に は ，Sprague‑ Dawley系 雄性 ラ ヅ ト(180〜280 g)を 使用 し た ．リ チ ウ ム亜 慢 性 投与 の 実 験で は ，lithium carbonate (L12C03;固形飼料 に0.05％ま たは0.2％の濃 度で含む ）を1週 間 経 口投 与 し ，リ チ ウ ム 投与 群 ， 標準 飼 料 投与 群 と もに10mMの 食 塩水 を 自 由 摂取 さ せ た． 薬 物 は 選 択 的 MAO‑A阻 害 薬 clorgyline， 選 択 的MAO‑B阻 害 薬lazabemideを 用 い た ． 脳内 微小透 析法では ガイド カニュー レをラ ットの頭 蓋骨表面 に挿入 固定し、 透忻プローブを内 側 前 頭 前 野 の 組 織 内 に3.Omm露出 さ れ るよ う に 挿入 し た ．手 術 か ら20時 間 後に 人 工 脳脊 髄 液 の 灌 流を 開 始 し，2時 間 後か ら 灌 流液 を40分 ご と に480分間 回 収 した ． サ ン プル 回 収 開始 か ら 200分 後 にclorgyline (10 mg/kg） ま た はlazabemide (10 mg/kg） を 腹 腔 内 投 与 し た ． 回 収さ れた逓 断液を電 気化学 的検出器 付高速液 体クロ マトグラフイーに注入し、透析液中の5‑ HT， DA，NAの細脆外濃度を測定した．
恐怖 条 件 付け ス ト レ スと は 、 電撃 ス ト レス(footshock)を 負 荷 して ショック 箱に条 件付けを 行い、ラットを再ぴ同じショック箱に入れる操作により、引き起こされる´じ、理的ストレスである・
こ の 操作 に よっ てfootshockを加え なくても ラヅト は無動の まま身体 をすく ませると いう防 御反
ー504一
応(freezmg） を示 す ．5分 間の観 察時間 のうち、free血gがみられ る時間 を百分率 （％Free血g） に計算しスコアとして表した・
薬物 投与後の ホーム ケージ内 での自 発運動量 を、赤外 線セン サーを用 いて、 ラットの 水平方向 の移動量の積算値を10分毎にコンピューターに出カして記録した．
本研 究では，Li2COヨ0．2％亜慢 性投与 は，ラヅ ト内側 前頭前野 におけ る細胞外5‐HT濃 度の基 礎値 を有意に 増加さ せたが，Li2COヨ0．05％ 亜慢性投 与は， 細胞外5―HT濃度の基礎値に対して有 意な 影響を与 えなかった．これまでの当研究室の検討ではLちCOヨ0．2％含有飯斛とLi2COヨO．05％ 含 有 飼料 の 一 週間 投 与 後の 血 漿 リチ ウ ム 濃度 は ， それ それO．71土0．05mEq／Lと0．26土O．01 mEq／Lで あった． したが って，Li2COヨ亜 慢性投与 の紐髄 外5‐HT濃度基 礎値に対 する有意 毅増・
加作 用は，リ チウム の臨床的 有効血中 濃度で 認められ ，治療 濃度以下 では認 められな いことが 明 らかとなった．
C10rgylhle急 性 投与 は ラヅト 内側前 頭前野に おける 細胞外5・HT濃 度を有意 に増加さ せた． さ らに ，Li2COユ0．2％亜 慢性投与 群では ，標準飼 料投与 群に比べ て，clorgybe急性投与後の内側前 頭 前 野細 胞 外5‐HT濃度 は 有意に高 値であ った．し かし，LちCOヨO．05嚠亜慢性 投与はc10rgybc 急 性 投与 後 の 細胞 外5‐HT濃度を軽 度増加 させるに とどま り，その 効果は 有意では なかった ．以 上 の 結果 か ら ，臨 床 的 治療 濃 度 をも た ら すLi2COヨO．2勿 亜 慢 性投 与 はc10rgylhle10mg／kg急 性 投 与の 細 胞 外5‐HT濃 度 増加作用 に対し て相加的 に作用 したが， 臨床的 治療濃度 以下のり チウ ム血 中濃度を もたら すLi2COヨO．05％亜慢性 投与は，clorgyHne急 性投与 の細胞外5‐HT濃度増加 作用に有意な影響を与えなかった．
C10rgy弧e急 性 投 与は ラ ッ ト内 側 前 頭前 野 に おけ る 細 胞外DんNA濃 度 を 有意 に 増 加さ せ た ・ 5‐HTに 対 する 効 果 とは 対 照的に，Li2C0ユ （O．05鰯及ぴ0．2％）亜 慢性投 与は細胞 外DA，NA濃 度 の 基礎 値 とclorgylhlc急 性 投与 後 の 細胞 外DA，NA濃度増カ 叶乍用 に対して 影響を与 えなか っ た．
恐怖 条件付け ストレス実験において，2元配置分散分析ではclorgy血cの主効果とL，i2COヨ0．2％ 亜慢 性投与の 主効果 が認めら れたが， 両者の 交互作用 はみら れなかっ た．す なわち，clorgylhle のすくみ行動抑制作用に対してLi2COヨ0．2矚亜慢性投与は相加的に作用した．一方，L，i2COユO．05％ 亜慢 性投与はclorgylhlcとの併用で有意な効果を示さなかった．抗不安作用を示したLi2COヨ0．2％ 亜 慢 性 投 与 とclorgybe10mg／kg急 性 投 与 の 併 用 は 自 発 運 動 量 に 影 響 を与 え な かっ た こ とか ら ，frce血gの 抑 制は 非 特 異的 な 自 発運 動 量 増加 に よる ものでは ないと 考えられ る．5‐HT神経 伝達 の促進に よって セロトニ ン系抗不 安薬はfrce血gを 抑制す ると幸浸告されており，リチウムと cbrgylme併 用 の相 加 的 効果 も こ の仮 説 に より 説 明 さ れる ． 本 研究 に お いて ，c10rgyHne急性投 与とLi2COヨO．2嚠亜慢 性投与の 併用に よる相加 的な効 果は，脳 内微小透 听実験 （細胞外5‐HT濃 度 の 増 加 ） と ， 恐 怖 条 件 付 け ス ト レ ス 実 験 （frce面1gの 抑 制 ） の 両 面 か ら 確 かめ ら れ た．
一 方 ，MAO．B阻 害 薬 で あ るlaZabemideの 急 性 投 与 は ， 細 胞 外5‐HT，DA，NA濃 度 及 び free面lgに 対して 影響を与 えず，リ チウム との併用 でも有 意な効果 は認め られなか った．抗 うつ 作 用 及 ぴ 抗 不 安 作 用 の 作 用 機 序 に はMAO‐B阻 害 よ り もMAO‐A阻 害 が 強 く 関 与し て い るこ と が 臨 床的 に 示 唆さ れ て いる が ， 本研 究 の 神経 化 学 的お よぴ行動 薬理学的 結果はMAO−A阻害 の臨 床効果における重要性を支持している．
以上 の結果か ら、リ チウム亜 慢性投 与は，臨 床的有効 血中濃 度におい てラッ ト内側前 頭前野に お け る 細 胞 外5‐HT濃 度 の 基礎 値 を 増加 さ せ ，MAO‐A阻 害 薬に よ る 細胞 外5―HT濃 度 増加 作 用 に 対 して 相 加 的な 効 果 を示 した．5‐HT神 経伝達の 促進が 不安を減 少させ ることが 報告され てい る恐 怖条件付 けスト レスにお いて，MAO‐A阻害薬 の抗不 安作三用 をりチウ ム亜慢 性投与が 増強し
909 ．やS柵轡幡疑糾茄筈iやb顛響疑qむ水コ紺旺や爾浄蝦Q轢伽囲 く―〇蔓。跫′つ誕ニp婁柵姫群製惴楚りーg雌醤アゼふ柵．や婁柵轡艇刈や婁ふべpNりゃb憩響 りー心柚疑qむ水rI紺殴讐R響證〜卜エ―sま婁やqゼ搬函く．〇く茎。慧旺せ顛響昧袰く二宀い堰e探 磐］Q受やqり−qむホrI心最昧蟶e塚奄将．製n最誕雲心憲廼咲輟ゆp旺撒否N坤韜型瑯矧 くむふ(i製怖b柵幅紺昧輟prI哀Hーgu!zaaij§謎繊羈八w卜丶やま嚢亜諜暈甘〕ti‑ovw．製
学位論文審査の要旨
学 位 論 文 題 名
モノアミン酸化酵素阻害薬の抗うつ作用，抗不安作用に 対するりチウム増強効果の作用機序に関する研究
（ 脳 内微 小 透析 法 及 び恐 怖 条 件付 けスト レスモデ ルを用い た 神 経 化学 的 ，行 動 薬 理学 的 研究 ）
モノ ア ミ ン酸 化 酵 素阻 害 薬(MAO阻 害 薬 ）は，うつ 病の治療 に有効で あること が臨床的 に 報告されて しヽ．る ．さらに ，MAO阻害薬 の抗うつ効果がりチウムにより増強されること が 明 らか と なっ た‐本研 究では，MAO阻害薬のり チウムに よる増強 効果の作 用機序を 解明 す る ため に 脳 内微 小 透析 実 験 とconditioned fear stress(CFS)実 験を用い， リチウム と MAO阻 害薬の併用 効果につ いて検討 した．一 週間のLi：COヨ0．2％亜慢性投与は，ラッ卜内 側 前頭前野に おける細 胞外セロ トニン濃 度の基礎 値を有意 に増加させ ，標準飼料投与群に 比 べ て，clorgyline急性 投 与後 の 内 側前 頭 前野 細 胞 外5−HT濃 度も 有 意に増 加させた ， Li2C030. 05%亜 慢性投与は 軽度増加 させるに とどまっ た．以上 の結果は ，臨床的治療濃度 を 惹 起す る りチ ウム亜慢 性投与はMAO―A阻害薬に よる細胞 外5―HT濃度 増加作用 に対して 相 加 的に 作 用す ることを 示してい る．Li2COヨ亜慢 性投与はclorgyline急性投与 後の細胞 外 ド パミ ン(DA)，ノ ルアドレ ナリン(NA)濃 度増加作用 に対して 影響を与 えなかっ た．CFS 実 験 にお い て，clorgylineのすくみ 行動抑制 作用に対し てLi2C030. 20亜慢性 投与は相 加 的 に作用した が，Li2C030. 05%亜慢 性投与はclorgylineとの併用 で有意な効果を示さなか った． MAO−B阻害薬であるlazabemideの急性投与は，細胞外5ーHT，DA，NA濃度及びfreezing に 対して影響 を与えず ，リチウ ムとの併 用でも有 意な効果 は認められ なかった．以上の結 果 から，リチ ウムによるMAO阻害薬の抗うつ効果増強作用は，MAO一A阻害による細胞外5―HT 濃 度 増 加 作 用 を り チ ウ ム が さ ら に 増 強 す る こ と で え ら れ る こ と が 示 唆 さ れ る ． 質 疑応答では ，本間教 授から，freezingが出現す る過程に どのよう に5‑HTは関与してい る のかにっい て，リチ ウム亜慢 性投与単 独でも抗 不安作用 を有するか どうかについて質問 が あった．こ れに対し て申請者 は，セロ トニン神 経伝達の 促進は本実 験では記憶に影響し て いるという よりも不 安を減弱 している と考えら れること ，リチウム 亜慢性投与で軽度で は あるが有意 な抗不安 作用がみ られたこ とを回答 した．次 いで吉岡教 授から，実験動物に 食 塩水を摂取 させた意 義と効果 にっいて ，リチウ ムの血中 濃度が臨床 的に有効な濃度であ
