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一 免 疫 組織 化学 的 検 討一
藻 寮 女 予 医 科 大 学 窮 二 病 醒 学 （童 紐 １ 笠 島 戴 教 授） 簿 消 他 欝 肉 科 （窒 径 １ 林 イ ケ ダ池
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（受 付 平 成 ７ 年 ２月王 媚 ） Ａ Ｓ 赫 ａｙ ｏ氾 急＆ｅ Ｄ 恕 飯 淋 雄曇ｏｎ ｏｆ Ｉ羽ｄｕｃ肪１ｅ Ｎ三枕ｉｃ Ｏｘｉｄｅ Ｓｙｎ 繍 鵬 ｅ 妥⑧§泌三弼 Ｃｅ 聰抵 繊ｅ 醐 慨 揃 鴨 Ｃｏ胱…竃（ＵＣ） ｗｉ舳 Ｒｅｇ淑 “ｏ 榊 Ｒｅ鮒 ｏ鵬 晦
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ｖ畑 嚇 蜘 け ㈱ 総 曲㎝藪鮒
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対 象 お よ び 方 法
１． 対 象 免 疫 組 織 化 学 的 検 討 に は ＵＣ ユ２例 （手 術 標 本１１ 例， 病 理 解 剖 １ 例） を 検 討 し た． ＵＣ 手 術 標 本 は 東 京 女 子 医 科 大 学 第 二 外 科 学 教 室 の 症 例 を 用 い た． 病 理 解 剖 例 と 虚 血 性 大 腸 炎 例 は， 同 大 学 第 二 病 理 学 教 室 で の 症 例 を 用 い た． ＵＣ の 症 例 は， 犬 出 血， 腹 膜 炎， 申 毒 性 巨 大 結 腸 症 や 癌 化 等 の 診 断 で 外 科 自勺 切 除 さ れ た 大 腸 で あ る． 病 理 組織 学 的 特 徴 が ら， 活 動 期 の 病 態 を 示 す 部 位 と， 非 活 動 期 の 病 態 を 示 す 部 位 の 大 腸 組 織 を 比 較 検 討 し た． な お 対 照 に 用 い た 非 癌 部 組 織１３例 （犬 腸 癌 非 癌 都 ７ 例， 壷 血 性 大 腸 炎 ６ 例） は 大 腸 癌 患 者 の 癌 部 か ら５ｃｍ 以 上 離 れ た 非 癌 部 大 腸 組 織 を 用 い た． 血 漿 中 Ｎ Ｏ。， Ｎ ０。の 濁 定 は， 生 化 学 検 査 で 炎 症 反 応 を 測 定 し た 一 環 と し て， 同 大 学 消 化 器 病 セ ン タ ー 内 科 入 院 申 の 患 者 の う ち 大 腸 生 検 所 見 と 臨 床 所 昆 か ら ＵＣ の 活 動 期， 非 活 動 期 の 判 定 を 行 っ た ５ 症 例 ご と に 行 っ た． ２ ． 方 法 １） 血 漿 申 Ｎ Ｏ。， Ｘ Ｏ。の 測 定 ＮＯ の 半 減 期 は 非 常 に 短 く， 数 秒 で 安 定 な 最 終 生 成 物 で あ る Ｎ Ｏ。，Ｎ Ｏ茗に 酸 化 さ 槻 る ．そ の た め， Ｎ ０ 。，Ｎ ０昌を 測 定 す る こ と で，Ｎ Ｏ の 産 生 を 間 接 的 に 調 べ た． 血 申 Ｎ Ｏ。， Ｘ Ｏ。 濃 痩 は 愚 着 愈 漿 １００μ１ に Ｇｒｉｅｓｓ 試 薬 １００μ１ を 混 合 し， 室 温 で 玉Ｏ 分 閤 静 置 し， 吸 光 光 度 計 （フ ァ ル マ シ ア 杜 製） で５４腕 ｍ の 吸 光 度 を 測 定 し た ２日〕 ． ２） 標 本 作 製 手 術 標 本 お よ び 剖 検 標 本 を１⑪％ 緩 衝 ホ ル マ リ ン で 約２雀時 間 固 定 し， パ ラ フ ィ ン で 色 埋 し た． 包 埋 組 織 か ら３μ ｍ の 連 続 切 片 を 作 製 し， ｈｅｍａｔｏｘｙｉｉｎ− ｅｏｓ１ｎ （Ｈ Ｅ） 染 色， ｅｌａｓｔｉｃ 洲 ａｎ Ｇ１ｅｓｏｎ （Ｅ Ｖ Ｇ） 染 色 を 行 い， 形 態 観 察 を 行 っ た． 篶Ｃ 手 術 標 本 上 で， 胚 門 側 端 で 潰 瘍 形 成 が み ら れ る 都 位 を 活 動 部， 口 側 端 で び ら ん や 潰 瘍 形 成 の み ら 扱 な い 部 位 を 非 活 動 部 と し た． 非 活 動 部 位 と の 比 較 で 活 動 部 位 で は 潰 瘍 形 成 に よ り 表 層 の 粘 膜 湯 瑚 離 し て い る た め， 表 層 の 粘 膜 を 除 い た 閲 質 組 織 を 比 較 検 討 し た． ３） 抗 ヒ ト ｉＮＯＳ 抗 体 作 製 抗 ヒ ト ｉＮ ＯＳ 抗 体 は， ヒ ト １Ｎ ＯＳ２η の Ｃ 末 端 側 の １４ ア ミ ノ 酸 を ペ プ チ ド と し て 合 成 し， 抗 体 作 製 キ ッ ト （ＰＩＥ ＲＣ Ｅ 社 製） を 踊 い ｋｅｙｈ〇三ｅ 三ｉｍ ｐｅｔ ｈｅｍ ｏｃｙａｎ１ｎ と 結 合 し， こ れ を 抗 原 と し て Ｎｅｗ 一 ４３｛ 一紹
Ｚ 勧 ａ舳 嚇 縦 獺 嚇 以 体重駄 動 １こ１遇閥 ごと に
４ 團， 脊 串 を 四 駿 の 皮 下１こ 撞 敏 し 免 疫 し た． 最 終 免 疫 ？ 蘭 後１こ 罫 瀞 豚 よ り 姐 液 登 探 敢 し，３，０００ｒｐ㎜ で３０分 閥 遠 心 分 簸 し 淀． こ の 後， 航 体 糖 製 カ ラ ム を 馳 ・ 晦 Ｇ ｌζ 精 製 し， こ れ を 流 泣 ト 洲 ＯＳ 椀 体 と し 花。 航 体 の 検 憲 は 概餐ｓ 鮭 泌 五〇重 漆 で 確 認 を 行 っ 於 。４
） 双 敏 敬篶ｂ 蹴 漆
陽 性 例 と し て， むｃ 潜 動 都 位 の 患 讃 の 慮 腸 粘 膜生 検穣 本 至 例 を 脇 暁．
Ｗｅｓｔｅｍ ｂ 賊 は 大 陽 糖 膜 綴 縄 溶 解 蔵 分 （ｓｏｌｕｂ！ｅ ｆｏｒ㎜） 婁ｏμ呈妾こ ＳＤ Ｓ ｓｏ量滋茎ｏむ 獅 μ童 を 施 乏 １００衙Ｃ で 進 分 問 イ ン キ ュ ベ イ ト し 走 後， ａｃｒｙｉａ棚１ｄｅ ｇｅ１ に 注 入 し， ２００ｙ， ２ 腕 Ａ で 王 時 聞 電 気 泳 動 装 置 （ア ト ー 鮭 製） で 泳 動 を 行 っ 花． 次暑こ， ウ ェ ス タ ン 転 写 装 置 （マ リ ソ ル 殺 製） １こ て５ 鮒， ２Ｃ ㈱ Ａ で ４ 時 閥 通 電 し， ニ ト ロ 切 晦 一 ス 膜 へ 転 写 し た． ５ ％ ス キ ム ミ ル ク で 玉 時 閥 ブ り ツ 等 ン グ し 花 後，王 ，ＯＯＯ 倍 希 釈 航 ヒ ト 洲 ＯＳ 銃 体 靭 こ ニ ト り セ ル ロ ー ス 膿 を１⑪蒔 閥 反 病 慈 せ 淀 後， ⑪．Ｃ 娩 ｏＶｉ 燐 酸 緩 衡 食 塩 水 娯 ７．２ （鵬 Ｓ妻 で洗 浄 し 怒， 五，Ｏ⑰０傍 稀 釈 の 二 次 抗 体 く η 励 夢 ク 嫁 ス ブ ァ タ ー ぜ 橡 識 ヤ ギ 抗ウ サ ギ 流 偉）３蜘 鋤 腺ヨ 至鱒 閥絋敵し， η 肋
リ 添 ス フ グ タ ー ぜ （淡 映 ） で 発 亀 し 炉 繧｝ ．δ
） 免 疫 纏 織 化 学 的 検 討
脳 ＯＳ 陽 僅 綴 縫 ⑳ 種 類 壷 同 定 す る 淀 め 抗 ピ ト ｉＮ ◎Ｓ 抗 体 （ ウ 吹 ギ、 栄 ジ ク η ナ ー ル， ｘ ２００， 東 京 女 子 医 科 犬 学 第 二 病 理 学 教 室 製） と 共 に， Ｔ リ ン パ 球 の 抗 体 と し て Ｃ 醜 貌 体 （ウ サ ギ， ポ リ ク ロ ナ ー ル，ｘ ２⑰０， ダ コ ジ ャ パ ン 製） ，Ｂ リ ン パ 球 の 抗 体 と し て レ ２６ 抜 体 （マ ウ ス， モ ノ ク ロ ナ ー ル， Ｘ １００， ダ コ ジ ャ パ ン 製） 串 ， マ ク 日 フ ァ ー ジ 系 細 胞 を 認 識 す る 抗 体， す 蓉 勅 ち， Ｄ ＡＫ◎一ＣＤ６８抗 体（マ ウ ス ， 禿 ノ ク ロ ナ ー ル ， Ｘ 王§６， ダ コ ジ ャ パ ン 製 ）２罧〕 ， Ｍ 婁ｃ３８７ 椀 体 ζマ 汐 ス， 篭 ノ ク ８ ナ ー ル，× 王００， ダ コ ジ ャ パ ン 製）， 啄§概 ｙ 搬 航 体 （ウ 妙 ギ， ポ リ ク 四 ナ ー 〃， ｘ§⑬⑭， ダ ３ ジ ャ パ ン 製）， Ｌ 洲・５ 抗 体 （マ 汐 ス， 発 ノ ク 泌 沙 一 払 × 呈， ぶ チ 汐 イ 製） 洲， 樹 状 細 胞 奮 認 識 貧 る 釜一蝸０タ ン パ ク（汐 労 ギ， 斌 リ ク 側 ナ ー ル， 糊 ⑰６， ダ 鴛 ジ 依 パ ン 製） 登 山 次 抗 体 ＆ して 脇 吹．
切 片 を 脱 パ 茅 フ 劣 ン 後， 灼 困 佳 ペ ル 孝 キ シ ダ ー ゼ 活 憧 を０．３飴 遇 酸 化 氷 素 μ タ ノ ー ル で ４也Ｃ， ３０ 分 聞 処 理 し た． な お，，Ｄ 段 Ｋ Ｏ−Ｃ 跳 ８ 航 体， 泌 縁ｃ３８７ 航 体 の 反 榊 こ は 腕 パ ラ フ ィ ン 後， プ澱 テ ア ー ぜ Ｋ で１０分 間 敵 処 理 壷 行 っ 花 後， 鵬 Ｓ で 充 分 洗 漆 し淀 （玉０分 × ５ 醐 ． 次 は， 王０鶏 ヤ ギ 倣 難 で亙９分 闘 爽 縛 翼 的 便 慮 登 ブ 繍 ツ ク し 淀 後， 至 鶏 腕ｖ 旋 撒ｕ醐 ａ１腕 ｍｉ パ 鵬 Ａ） で 希 綴 し 淀 一 次 貌 体 壷 摘 下 し， ４ ℃ で１０ 縛 閥 反 憾 慈 娃 花． そ 抗 誉 扱 ｕ 次 航 俸 で 反 憾 さ ぜ 淀 後， 鵬 Ｓ で 充 分 洗 浄 し 淀． 闘 蟹 法 に て 行 う た め， ペ ル オ キ シ ダ ー 雀 標 識 二 次 抗 体 は ヒ ツ ジ 抗 マ ウ ス 免 疫 グ ロ ブ リ ン Ｆ 鮒 （夏Ｏ⑰倍，淡 搬 ｒｓｈａ獅 Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ 栓 製｝ な い し， ヤ ギ 抗 ウ サ ギ 免 疫 グ ロ ブ リ ン Ｆａぱ （２⑪⑬倍， 医 学 生 物 学 研 究 所 製） を， そ れ ぞ れ １ 路 ＢＳＡ で 希 釈 し 淀 も の を 用 い た． ペ ル オ キ シ ダ ー ゼ 標 識 二 次 航 体 を 至 蒔 聞 室 温 で 反 応 さ ぜ た 後， ＰＢ Ｓ で 充 分 洗 浄 し 危． そ ⑳ 圭 で， ０，０ 跳 （ｗ／∀） ３，３㌧ジア ミ ノ ベ ン ジ ジ ン 四 壇 駿 塩 を 溶 解 し 花Ｏ．０５Ｍ ト リ ス 塩 酸 緩 衝 液 く鯛 ７．§ 〔 醐 ．Ｃ０３％ 遜 酸 化 水 索 勧 腺 花 発 毯 鞭 で 発 亀 し 淀． ヘ マ ト キ シ リ ン で 核 梁 亀 を 行 い， 鰯 水、 封 入 を 行 っ 淀． な 猶， 隆 性 コ ン 帥 づ 蛇 し て 一 次 銃 体 の 代 わ り に， 家 蒐 正 常 血 鑓 あ 閉 ｓ の み 蜜 撤 沈 ．嚢 淀， 抗 原 ＆し て 脇 吹 舎 成 ペ プ 素 Ｎご 攻 る 畷 奴 誠 験 も 行 っ
た ．６
） 統 計 駒 検 討
細 胞 数 は， 高 倍 率 （遂００ 織 で 検 鏡 し、 陽 管１ 鵬 げ る 間 質 の 細 胞１，００ 囎 申 ⑳ 脳 ｏｓ 陽 控 数 を 測 定 し た． 施 管 数 は １ 視 野 ㈱ §倍） で ② 数 と， 陽 後 赦 管 数 の 割 合 と し た． 各 数 獲 は 搬 ａ 姓 ＳＥ で 表 し た． ＦｉＳ 旋 ｒ’Ｓ ｐｒ 帆 ｅｃ圭 純 １ｅ嚢ｓ乏 ｓ１ 鯉 概 狐 ｔ ｄ 沮 ｅｒｅηｃｅ の 検 定 を 溺 い， § ％ 未 溝 の と き に 有 意 差 あ り と し た ｉ７） ．繕
果
亘． 並 漿 寧 Ｎ ０；， Ｎ０；濃 度生 検 標 本 で 活 動 部 彼， 妻鰭 動翻位 芝確認慈 れ淀
症 例 各 ５ 例 ず つ の 滋 鑓 串 災 Ｏ；書 ＮＯ；濃 慶 を 渕 憲 し た ． びＣ の 活 動 期 の 患 讃 斑 簸 ㌘ 憾， 橘 環 漱 糠 蝉 ０） Ｎ ０呈， ㌶ Ｏ宮濃 度 淋 諜 藩 動 鰯 の 患 者 斑 翻 ζ 比 べ 衛 意 は 商 僧 で あ り 淀 伽 く 魯。⑬鋤． 篶 Ｃ の 潜 動 僅 を Ｎ Ｏ；， 一 些３５ 一４尊 Ｎ Ｏ。値 に 相 関 が み ら れ た （図 １） ． ２． Ｈ 湿 標 本 で の 観 察 活 動 部 位 は， 旺 門 側 の 大 腸 で， 好 申 球箏 リ ン パ 球， 形 質 細 胞 や マ ク ロ フ ァ ー ジ 等 の 細 胞 浸 潤 と 腺 券 溝 動 期 活 助 翔 図 玉 閉 ｃｅｒａｔ１ｖｅ ｃｏ ㈱ ｓ （Ｕ Ｃ） 患 者 の 航 漿 申 Ｎ Ｏ； ， Ｎ Ｏ。濃 度 ： 非 活 動 期 と 活 動 期 の 比 較 ＃ Ｐ ＜ ０．０５ 図 ２ ＵＣ 活 動 部 （．ｋ） と ＵＣ 非 活 動 部 （下） の ＲＥ 標 本 ＵＣ 渚 動 部 で は 潰 瘍 彩 成 カミ あ り 表 層 に ｃｒｙｐｔ 紬 ｓ− ｃｅｓｓ の 形 成 が み ら れ る （郷 倍）． ＯＣ 葬 潜 動 部 で は 表 層 粘 膜 は 保 た れ て い る． 炎 症 性 細 胞 浸 潤 は 強 く な い （４０ 倍） ． 管 の 減 少 が あ り， び ら ん お よ び 粘 膜 下 層 ま で の 潰 瘍 の 形 成 （Ｕ１−Ｈ） が み ら れ， 粘 膜 筋 板 の 肥 厚， 粘 膜 下 層 の 線 維 化 が み ら れ た （図 ２ 上）． 非 活 動 部 位 は， 口 側 の 大 腸 で， 潰 瘍 の 形 成カ童み ら れ ず， 炎 症 性 細 胞 浸 潤 の 減 少 カ§み ら れ， 再 生 上 皮 と 杯 細 胞 が 出 現 し て い た． 正 常 部 位 は， 大 腸 粘 膜 の 癌 部 か ら５ｃ㎜ 以 上 離 れ た 非 癌 部 を 用 い た． 腺 管 の 構 造 異 型 カ 滋 く， 好 申 球ヨ リ ン パ 球 等 の 炎 症 性 細 胞 浸 潤 は 殆 ど 認 め ら れ な か っ た （図 ２ 下）． ＵＣ と 異 な っ た 炎 症 疾 患 と し て 虚 血 性 大 腸 炎 （１ｓｃ 脆 狐１ｃ ｃｏ 肚１ｓ） の 組 織 を 用 い た ． 同 部 位 の 組 織 変 化 は， 表 層 粘 膜 は 保 だ れ て い るカミ， 粘 膜 下 層 以 下 に， 小 血 管 の 増 生 ・ 拡 張 と 共 に 浮 腫 と 出 血 カミ認 め ら れ た． ３． Ｗ③ｓ 廠 ｎ ｂ１ｏｔ 法 に よ る 大 腸 組 織 中 ｉＮ ＯＳ
の 証 明
活 動 期 ＵＣ 潰 瘍 形 成 部 の 直 腸 粘 膜 生 検 組 織 を用
い 花 Ｗ ｅｓｔｅｒ 曲 １ｏ 揃 ㎎ で は， １３０次 Ｄ に ｂａ 飼 を 認 め た（輿 ３）． 対 照 と して 用 い た 大 腸 癌 手 術 標 本 の 非 癌 部 組 織 で は ｂａ 舳 を 認 め な か っ た． 分 子 量王３０ ｋ Ｄ に ｂａ 湿 淡 み ら れ，１Ｎ ＯＳ２５〕の 特 異 性 秘 確 認 さ れ た． 鑑 別 す る も の と し て ｃｏ 鵬ｔ１ 蹴 １ｖｅ Ｎ Ｏ ｓｙ斌 瞼 ｓｅ に は 荻ｅ 雌 ｏ 蝸呈 Ｎ Ｏ ｓｙｎｔｈ 鵡 ｅ（ｎ Ｘ Ｏ Ｓ）２６）， ｅ 地 ｏｔｈｅ 晦１ Ｎ Ｏ ｓｙ 赦 ｈａｓ８（ 酬 ＯＳ）２７ 嚇 あ る． 我 々 淋 用 い 淀 ヒ ト ｉＮ ＯＳ の Ｃ 末 端 側１雀ア ミ ノ 酸 は ｎＮ ＯＳ お よ び ｅＮ ＯＳ に 同 じ ア ミ ノ 酸 配 列 は 認 め な か っ 淀．ｎＮ ＯＳ は 分 子 量 が １５５ｋＤ と，１Ｎ ＯＳ（１３０ １３０ｋＤ 一 ＞轟 Ｎｏｒ ㎜ ａＩ ㎜ Ｃ 図 ３ Ｗ ｅｓｔｅ亙ｎ ｂｌｏｔ ＵＣ 涯 動 部 の 直 腸 組 織 で は，１３脈 Ｄ に バ ン ドカ書認 め ら れ た．正 常 コ ン ト ロ ー ル 例 で は バ ン ド は 認 め ら れ な い ． 一 ４３６ 一鰯
鰯葦鰹銘残爽 甑 事 概鶴鰹 鰯１繊 磁１認 篤蟹鰯
縫 瀦 潔 綴 鐙 議 繊 嬢 滋 均 滋。 鶏。 鰯 鰯 鰯 籔 蒲 滋 鰯 鑓壷 穣 畿 難澄 鰯 魏 鑑 鐙 鰯 雛 窺 痩 艦 織 繁 髄 穣 繁 懇 鰯 鰯 ⑳
擦 雛 鐙 綴 魑 種 類 鰯 鰯 篤
穣 畿 繋 鐙 穣 講 陰滋
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穣 繋 愁 滋 繋 擬 穰 簸 滋 鰯 鱒 嚢 鰯 縫 鰯 磯 陽 鑑纐
駿 簸綴騒擁 驚 鰯 鶴 憾鱒錐 鰯 鐵 灘 灘 縫譲鱗鐙
滋 鱗 鰯 繍 鰹 一 藪 鰺 滋。察 麗 醒 簿 磁 漿 瀦 滋 籔 澱 醸 鐙一 凝籏簿 鰯繊 簿蟻
緩 馳 竣 染 毯 篤 滋 漢 駿 較 議 駿 濠 澄 ⑳ 灘鰯 議 験 登
行 つ 淀 繊鶉 陰 縫 警 滋 湧 施岨 むｃ 患 著 ⑳ 藩 動 灘 鑑 ⑳ 潰 蕩 底 讃 淀 は 灘 蕩 燭 麗 を 串 心１饒 滅 ◎曇 陽 獲 綴 飽 舷 集 籏 し て 認 滋 魯 槻 稔 鰯 堪。臼 ． 陰 鰯 膿 蕩 串 ⑳ 姪 串 球 鉦。 受 ⑳ 縄 麗 綻 彪 る 潔 索 滋 フ 茨 一 該 糠 ㊧ 麗 繊 き胞 錐 嚢 欝 っ 淀 太 型 ⑳ 綴 魑澄 線 維 繋 綴 魑 様 鰯 繍 錘 霧 ⑳ 繍 魑 ㊧ 爽 灘 鋤 こ 搬 鵬
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仰 図 ９ ＵＣ 活 動 部 で 中 心 部 の 矢 印 で 示 し た 血 管 内 皮 お よ び 血 管 乎 滑 筋 に ｉＮＯＳ の 発 現 が 認 め ら れ る （１００ 倍 ） ． ＵＣ 患 者 の 活 動 都 位 の 潰 瘍 周 囲 の 消 化 管 の 固 有 筋 層 全 体 に ｉＮ ＯＳ が 弱 陽 性 に 発 現 し た （図 ７ 矢 印）． 非 活 動 都 位 も 固 有 筋 層 は ｉＮ ＯＳ が 弱 陽 性 で あ っ た． 正 常 都 位 での 消 化 管 平 滑 筋 に は ほ と ん ど 発 現 が み ら れ な か っ た． ６． 他 の 病 態 ど し て ｉｓｃｈｅ㎜ｉｃ ｃｏ１ 雌 で の 検 討 Ｉｓｃｈｅｍｉｃ ｃｏ１１ｔｉｓ に お い て の ｉＮ ＯＳ 陽 性 細 胞 と 他 の マ ー カ ー と の 比 較 検 討 を 行 っ た． 浮 踵 状 変 化 の み ら れ る 粘 膜 下 層 の マ ク ロ フ ァ ー ジ， 好 中 球 と 線 維 芽 細 胞 に ｉＮ ＯＳ 発 現 が 高 頻 度 に 認 め ら れ た． 粘 膜 下 層 で の 増 生 ・ 拡 張 し た 毛 細 血 管 の 大 部 分 に，１Ｎ Ｏ Ｓ 発 現 が 認 め ら れ た． し か し， 表 層 粘 膜 は ｉＮ ＯＳ 発 現 が ほ と ん ど 認 め ら れ な か っ た．
考
察
ＮＯ は， ］ 酸 化 窒 素 合 成 酵 素 （ＮＯＳ） に よ り， 基 質 で あ る Ｌ−ａｒｇｉｎｉｎｅ が Ｌ−Ｃ１ｔｒｕ三ｉｉｎｅ に 代 謝 さ れ る 際 に 産 生 さ れ る１帥 ．Ｎ ＯＳ は， ｃＮ ＯＳ と ｉＸ ＯＳ に 大 別 さ れ る１６〕．血 管 内 皮，小 脳 が 代 表 的 な 発 現 部 位 で あ る ｃＮ ＯＳ は 細 胞 内 に 常 に 存 在 し 活 性 発 現 に は， ア ゴ ニ ス ト を 必 要 と し 短 時 問 作 用 す る． こ れ に 対 し， マ ク ロ フ ァ ー ジ， 白 血 球 が 代 表 的 な 発 現 部 位 で あ る ｉＮＯＳ は， 生 理 的 状 態 で は 殆 ど 存 在 し な い．ＩＬ−１β， Ｔ Ｎ Ｆ一α，Ｉ Ｎ Ｆ・γ な ど の サ イ ト カ イ ン や リ ポ ポ リ サ ッ カ ラ イ ド 等 の 刺 激 に よ り 細 胞 が 活 性 化 さ れ る と 細 胞 質 内 に ｉＮＯＳ が 合 成 さ れ る 卿． こ れ ら の サ イ ト カ イ ン の 刺 激 を 受 け て い る と き に は， 主 に ｉＮ ＯＳ を 経 由 し Ｎ０ が 発 生 さ れ る２ ９〕 ． 発 生 し た Ｎ Ｏ は， 周 囲 の Ｈ．Ｏ と 反 応 し，数 秒 で Ｎ Ｏ。， Ｎ Ｏ。の 形 と な り 安 定 化 す る． そ の た め， こ れ ま で は 代 謝 産 物 で あ る Ｎ Ｏ。， Ｎ Ｏ畠や Ｌ− ｃ１ｔｒｕ！ｌｉ羽ｅ を 測 定 し， 聞 接 的 な 方 法 で Ｎ ０ の 生 成 が 示 さ れ て き た’蓼） ．こ れ ら を 用 い 測 定 し た 結 果，活 動 期 の 患 者 血 漿 で は， 非 活 動 期 の 患 者 瓶 漿 に 比 べ 有 意 に 高 く， Ｕ Ｃ の 活 動 性 と Ｎ Ｏ。， Ｎ Ｏ。値 に 相 関 が み ら れ た．こ れ は ＮＯ 産 生 増 加 が 血 漿 中 に 反 映 し て い る と 考 え ら れ る． 酵 素 組 織 学 的 検 討 で は， Ｎ Ａ Ｄ Ｐ 脈 ｄｉａｐｈｏｒａｓｅ で ＮＯＳ の 局 在 は 解 明 さ れ つ つ あ る が 珂 垣 常 的 に 存 在 す る ｃＮ ＯＳ も 検 出 す る た め， 大 部 分 の Ｎ Ｏ を 生 成 し て い る ｉＮ Ｏ Ｓ の 分 布 は わ か っ て い な い． ヒ ト に お い て ＵＣ で の ｉＮ ＯＳ の 分 布， 局 在 を 示 し た 報 告 は 著 者 が 文 献 上 収 集 し た も の で は 皆 無 で あ り， そ の 花 め， 我 々 は ヒ ト の 杭 ｉＮ ＯＳ 抜 体 を 作 製 し， 本 研 究 で 初 め て 免 疫 組 織 学 的 に 局 在 を 示 し た． ｉＮ Ｏ Ｓ の Ｗ ｅｓｔｅ ｍ ｂｌｏｔｔ１ ㎎ で は， １３０ｋ Ｄ に ｂａｎｄ を 認 め た． 鑑 郷 す る も の と し て ｎＮ Ｏ Ｓ と ｅＮ Ｏ Ｓ が あ る． 我 々 カ 湘 い た ヒ ト ｉＮ ＯＳ の Ｃ 末 端 側１４ ア ミ ノ 酸 は ｎＮ ＯＳ お よ び ｅＮ ＯＳ に 同 じ ア ミ ノ 酸 配 列 は 認 め な カ・っ た． ｎ Ｎ Ｏ Ｓ は 分 子 量 が１５５ ｋＤ で あ り ， Ｗ ｅｓｔｅｒれ ｂｌｏｔ 嚇 ｇ で１５５ｋＤ に ｂａｎｄ を 認 め な が っ た．塞 た， 洲 ＯＳ は 神 経 繊 維 に 発 現 さ れ な が っ た． ｅＮ ＯＳ は 赦 管 内 皮 の み に 発 現 し 細 胞 質 穎 粒 に 局 在 す る と い わ れ て い る が， ｉＮ ＯＳ で は 血 管 内 皮 だ け で な く， 血 管 平 滑 筋， マ ク ロ フ ァ ー ジ や 自 血 球 に 認 め ら れ，ｉＮ ＯＳ は 砲 体 内 に ｄ 紺 ｕｓｅ に 認 め ら れ ｃｙｔｏｓｏｌ に 山 致 し た． 以 上 か ら １Ｎ ＯＳ の 特 異 性 が 確 認 さ れ た． ＵＣ の 活 動 部 位 の 潰 瘍 部 に 多 数 の ｉＮＯＳ 陽 性 細 胞 が み ら れ， そ れ は 形 態 的 特 徴 お よ び種 々 の 抗 血 清 を 用 い た 免 疫 組 織 化 学 的 検 討 に よ り， マ ク ロ フ ァ ー ジ， 線 維 芽 細 砲 お よ び 好 中 球 で あ る こ と が 示 さ れ た． 一 方， 非 活 動 部 位 の 腸 管 に は，１ＮＯＳ 陽 性 細 胞カミ 著 明 に 減 少 し て い た．ＣＤ６８陽 性 細 砲 は， 活 動 部位 に 比 べ， 非 活 動 部 位 で 減 少 し て い た が 存 在 は 認 め ら れ た ．Ｃ Ｄ６８ は， 主 に マ ク ロ フ ァ ー ジ， 線 維 芽 細 一 互３９ 一４８ 胞 で 陽 性 に な る こ と か ら， 非 活 動 部 位 で は 活 動 部 位 と 同 様 に マ ク ロ フ ァ ー ジ， 線 維 芽 細 抱 が存 在 す る 述， １ＮＯＳ は 殆 ど 発 現 し て は い な い と 考 え ら れ た ． こ れ ら の こ と か ら， ＵＣ の 活 動 性 と ｉＮ ＯＳ 発 現 と の 相 関 が 示 唆 さ れ た．ＵＣ の 活 動 部 位 の 潰 瘍 部 に 多 数 の ｉＮＯＳ 陽 性 細 胞 が み ら れ る 理 由 と し て， 潰 瘍 周 麗 に 集 籏 し て く る マ ク ロ フ ァ ー ジ や 好 中 球 が ＩＬ−１β や γ Ｎ Ｆ一α 等 を 産 生 し， こ れ ら の 刺 激 に よ り 大 量 の ｉＮＯＳ が 誘 導 さ れ る た め と 考 え ら れ る． そ の 結 果， 局 所 で 産 生 さ れ る Ｎ ０ が 周 匪１の 正 常 組 織 に も 傷 害 を 起 こ す 可 能 性 が 示 唆 さ れ る． 炎 症 性 腸 疾 患 モ デ ル で あ る ｔｒｉｎｉｔｒｏｂｅｎｚｅｎｅ ｓｕｌｆｏｎｉｃ ａｃ１ｄ 大 腸 炎 ラ ッ ト に お い て Ｎ Ｏ 合 成 阻 害 剤 が 炎 症 を 軽 減 す る こ と 洲， ま た，ｉＮＯＳ の 活 性 を 抑 制 す る こ と が 報 告 さ れ て い る ス テ ロ イ ド 剤 が， ＵＣ 患 者 の 腸 管 の 炎 症 の 抑 制 に 有 効 で あ る こ と か ら， Ｎ Ｏ が 組 織 傷 害 的 に 働 く こ と カミ示 唆 さ れ て い る． し か し， ス テ ロ イ ド 剤 の 長 期 投 与 は 重 篤 な 副 作 用 の 発 現 が 問 題 と な る た め， 今 後， よ り 特 異 的 な ｉＮ ＯＳ の 阻 害 剤 が ＵＣ の 治 療 薬 に な る 可 能 性 が 考 え ら れ る． 血 管 で は， 活 動 部 位 の 潰 瘍 部 に み ら れ る マ ク ロ フ ァ ー ジ， 好 中 球 等 のｉＮＯＳ 陽 性 細 胞 の 分 布 と 異 な り， 活 動 部 位 の み な ら ず， 非 活 動 部 位 に も 拡 張 し た 血 管 に ｉＮＯＳ の 発 現 が 認 め ら れ た． 正 常 と 患 わ れ る 都 位 で も， 血 管 に 低 頻 度 で は あ る が，ｉＮＯＳ 陽 性 細 胞 カミ認 め ら れ た． こ の 分 布 よ り ＮＯ カ 沌 管 に 作 用 し， Ｎ Ｏ の セ カ ン ド メ ッ セ ン ジ ャ ー ｃＧ Ｍ Ｐ を 介 し て 血 管 平 滑 筋 を 弛 緩 さ せ る こ と か ら 血 流 を 増 や し害２〕組 織 に 対 す る 酸 素 の 供 給 が 増 加 し， 組 織 へ 保 護 的 に 作 用 を し て い る の で は な い か と 推 測 さ れ る． 以 上 よ り，Ｕ Ｃ に お け る Ｎ Ｏ の 発 現 は，一 方 で 炎 症 の 活 動 性 を 高 め て 組 織 傷 害 的 に 作 用 し て い る と 考 乏 ら れ る が， 他 方 で 局 所 に お け る 斑 流 を 増 加 さ 量 組 織 修 復 的 に 作 用 し て い る と 考 え ら れ る． 稿 を 終 え る１こ 当 た り， 懇 切 な 御 指 奪 を 賜 り ま し た 本 学 第 二 病 理 学 教 室 西 川 俊 郎 助 教 授， 石 山 茂 先 生， 消 化 器 病 セ ン タ ー 内 科 兇 永 篤 助 手， 長 廻 紘 助 教 授， 飯 嫁 文 瑛 勤 手， 第 三 外 科 学 教 室 小 篠 栄 講 師， 標 本 を 提 供 し て 下 さ っ た 第 二 外 科 学 教 室 亀 岡 信 悟 助 教 授 に 深 謝 い た し ま す． ま た， 佳 事 を 支 え て 下 さ っ た 深 沢 哲 雄 主 任 技 師 に 感 謝 い た し ま す． 御 校 閲 を し て い た だ き ま し た 消 化 器 病 セ ン タ ー 内 科 林 直 諒 教 授 と 第 二 病 理 学 教 室 笠 島 武 教 授 に 感 謝 の 意 を 表 し 蒙 す． 文 献 １） Ｗ 鮒 Ｊ ， Ｍ ａｒ ㎝ ｓ Ｒ ： Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ目１ ｕｉｃｅｒａｔｉｖｅ ｄ…ｓｅ ａｓｅ ｏｆ ｔｈ ｅ ｃ ｏｌｏ η． Ｍ ｅｔｈ ｏ ｄｓ Ａ ｃｈｉｅ ｖ Ｅ ｘｐ Ｐ目ｔｈｏ１ ７ ： ５６−７１，ユ９７６ ２） Ｖ ａ 紬 ｅｒ Ｗ Ｋ Ｊ， Ｗ ｉ皿ｋ１∼ｒ Ｋ Ｃ： Ｔ ｈｅ ｆａｅｃａ 閉 ｏｒａ ｉｎ ｕｉｃｅｒａｔ１ｖｅ ｃｏｌｉｔｉｓ． Ｊ Ｍ ｅｄ Ｍ １ｃｒｏ ｂｉｏ１ ８ ： 皇９１− ５０１，ユ９７５ ３） Ｋｅｉｇｈｌｙ Ｍ Ｒ正；，Ａｒａｂｉ Ｙ，Ｄｉｌｎｏｃｋ Ｆ： Ｉｎ温ｕｅｎｃｅ ｏｆ ｉｎＨ ａ ｍ ｍ ａｔｏｒｙ ｂｏ ｗ ｅｌ δｉｓｅａｓｅ ｏｎ ｉｎｔｅｓｔｉｎ ａｌ ｍｉｃｒｏ丑ｏｒ目一 Ｇ 汰 １９ ： １０９９−１１０皇， １９７６ 里） Ｄｉ欲 ｉｎｓｏｌｌ ＲＪ， Ｖ 蛆ｉａ蘂 Ｓ Ａ，Ｃｏｏｋｅ Ｅ Ｍ１： Ｉｎ− ｃｒｅａ ｓｅｄ ｉｎｖａｓｉｖｅ ｐｒｏ ｐｅｒｔｉｅｓ ｉｎ ｐ ａｔｉｅｎｔｓ ｗ ｉｔｈ ｕｌｃｅｒヨｔｉｖｅ ｃｏ１ｉｔｉｓ． Ｇ ｕｔ ２ 工 ： ７８７−７９２． １９８０ ５） Ｂ ｏ ｏｋ ｍ ａｎ Ｍ Ａ ， Ｂ 凹１１ Ｄ Ｍ ： Ｃ ｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ ｏｆ ｉｓｏｌａｔｅｄ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｍ ｕｃ ｏｓａｌ ｉｙ ｍ ｐ ｈｏｉｄ ｃ ｅｉｌｓ ｉｎ ｉ 欄 ａ ｍ ㎜ ａｔｏｒｙ ｂ ｏ ｗ ｅｉ ｄｉｓｅａｓｅ．Ｇ ａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｉｏｇ ｙ ７７ １ ５０３−５１０． １９８０ ６｝ 剛 ａ皿ａ Ｐ Ｗ，醐 εｈ ㎝ ｓ 服，ｕ ｏｙ Ｈ Ｖ ： 互ｓｏ１ａｔｉ ㎝ ａ ｎｄ ｐ ｕｒｉ丘ｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｈｕ ｍ ａｎ ｌａｒｇｅ ｂｏ ｗ ｅｌ ｍ ｕｃ ｏｓａ王 １ｙ ｍ ｐ ｈｏ｛ｄ ｃｅｎ ｓ＝ Ｅ 窪ｅｃｔ ｏｆ ｓｅｐ 目ｒａｔ｛ｏ ｎ ｔｅｃｈ ｎ…ｑｕｅ ｏ ｎ ｆｕｎｃｔ…ｏｎ ａｌ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ． Ｇ 口ｔ ２０ ： １０３７一 玉Ｏ屯６， 至９７９ ７） Ｐ ｅｒ１固１ａ Ｅ Ｐ，Ｂ ｒｏ ｈｅｒｇ ｅｒ Ｇ ： 互ｎ ｖｉｔｒｏ ｓｔｕｄ｛ｅｓ ｏｆ ｕｌｃｅｒ目ｔｉｖ ｅ ｃｏｌ…ｔ１ｓ． 玉Ｉ． Ｃ ｙｔｏｔｏ ｘｉｃ ａｃｔｉｏｎ ｏｆ ｗ ちｉｔｅ ｂｌｏ ｏｄ ｃｅｎｓ ｆｒｏ ｍ ｐ ａｔｉｅｎｔｓ ｏｎ ｈ ｕ ｍ 目ｎ ｆｅｔａｌ ｃｏｌｏ ｎ ｃｅＨｓ． ＪＥｘｐ Ｍｅ壱 １１７ ： ７１７−７３３． １９６３ ８∋ 脆 ｍ１ 帥 遇Ｊ ， Ａ１脾 ｒｔ Ｅ ； 互 舖 ａ ｍ ｍａｔｏｒｙ ｂｏ ｗｅ一 δｉｓｅ 劃ｓｅ ： Ｓｔｕｄｙ ｏｆ ｃｅ１１・ ｍ ｅｄｉａｔｅｄ ｃｙｔｏｔｏ ｘ｛ｃ…ｔｙ ｆｏｒｉｓｏＩａｔｅｄ おｕ ｍ ａｎ ｃｏｉｏ ｎｉｃ ｅ ｐｉｔｈｅｉｉａｉ ｃｅＨｓ ．Ｇｕｔ ２１ ： ３５３−３５９ ．１９８０ ９） Ｋｉ鵬 ｎｅｒ ∬； ， Ｓ ｈｏｒ辻ｅｒ Ｒ Ｇ ： Ｉｎ 脂 ｍ ｍ ａｔｏｒｙ Ｂ ｏ ｗ ｅｌ Ｄ…ｓｅａｓｅ ２ｎｄ ｅｄ． Ｌ ｅａ ＆ Ｆ ｅｂｉｇｅｒ，Ｐ ｈｉｌａ ｄｅｌ− ｐｈｉ囹 ｛１９７５） １０） Ｌｉｐｋｉ聰 Ｍ， 過ｅｒｔｉｏ Ｊ Ｒ ： Ｃ ｅｌｉ ｐｒｏ１…ｆｅｒａｔｉｏｎ ｋｉｎｅｔｉＣＳ ｛ｎ ｔｈｅ ｇ ａＳｔｒＯｉｎｔｅＳｔｉｎａｉ ｔｒａＣｔ Ｏｆ ｍ ａ ｎ． Ｃｅｌｌ ｒｅｎｅ ｗ ａｌ ｉｎ ｃｏｌｏｎ 盆 ｎｄ ｒｅｃｔｕ ｍ．Ｊ Ｃｌｉη Ｉｎ ｖｅｓｔ ４２ ； ７６７−７８る， １９６３ １１） Ａ ｉｋ… Ｘ ＝ Ａ ｓｔｕｄ ｙ ｏｆ ｅ ｎｄｏｔｏ ｘｅ ｍ ｉａ 三ｎ ｕ−ｃｅｒａｔｉｖｅ ｃｏｌｉｔｉｓ ａｎ ｄ Ｃｒｏ ｈｎ’ｓ ｄｉｓｅａｓｅ， ａ ｃ−ｉｎ｛ｃ ａ王 ｓｔｕｄ ｙ． Ａｃｔａ Ｍｅｄ Ｏｋａｙ固ｍ ａ ３２ ： １皇７−１５８， 王９７８ １２｝ Ｇ 丑ｒ ｄ…耐㊤ｒ Ｋ Ｒ ， Ｂ ａＦエｌａｙ Ｇ Ｒ， Ｍ ε Ｃ ａ｛ｇ皿ｅ Ｍ Ｄ ： Ｅ ｎｄ ｏｔｏ ｘｉｎ，ｔｕ ｍ ｏｒ Ｈｅｃｒｏｓｉｓ ｆ罰ｃｔｏｒ ａ 納 ａｎｔ…一ｃ ｏｒｅ ｇｌｙｃｏｌｉｐｉｄ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ｉｎ １ｎ自ａ ｍ ｍ ａｔｏｒｙ ｂｏ ｗｅｌ ｄ…ｓｅａｓｅ． Ｂｒ Ｊ Ｓｕｒｇ ７８ ： ユ考８８Ａ， 王９９１ １３） Ｍ ａｃＤ ｏｍａ１δ ＴＴ，正［ｕ辻ｃｈ三ｍｇ Ｐ， Ｃｈｏア Ｍ １ ｅ１； ａｌ： 一 ４｛Ｏ 一
４９ Ｔ ｕ ｍ ｏ ｒ ｎｅｃｒｏｓｉｓ ｆａｃｔｏｒ ａｎ ｄ …ｎｔｅｒｆｅｒｏ ｎ・９ ａ ｍ ｍ ａ ｐｒｏ６ｕ ｃｔｉｏ ｎ 棚 ｅ ａｓｕｒｅｄ ａｔ ｔｈｅ ｓ壬ｎｇｌｅ ｉｅｖｅｉ ｉｎ ｎｏｒ ｍ 引 ａ ｎｄ １ｎ 舶ｍ ｅｄ ｂ ｕ ｍ ａｎ ｉｎをｅｓｔｉｎ ｅ．Ｃｌｉｎ Ｅ ｘ ｐ Ｉｍ ｍ ｍ ｏ１ ８玉 ： ３０１−３０５．１９９０ 玉司） Ｌｉｇ羽１皿ｓ ｋブ Ｍ ， Ｓｉ ㎜ ①１１ Ｐ Ｌ， Ｋ ａｒ ｍ ｅ１ｉ Ｆ ｅ１： ａ１： Ｒ ｏｌｅ ｏｆ ｉｎｔｅｒ１ｅｕ装ｉｎ１ ｉη ｉΩ刊 ａ ｍ ㎜ ａｔｏ ｒｙ ｂ ｏ ｗ ｅｌ ｄｉｓｅａｓｅ ｄ ｕｒｉｎｇ ａｃｔｉｖｅ ｄｉｓｅａｓｅ． Ｇ ｕｔ ３１ ： ６８６−６８９， ユ９９０ １５） Ｍ ｏｎ６㎜ｄａ Ｓ，Ｐａ１㎜ｅｒ Ｒ Ｍ ３，Ｈｉｇｇｓ Ｅ Ａ ： Ｎｉｔｒｉｃ ｏ ｘｉｄｅ ： Ｐｈ ｙｓ呈ｏ−ｏ蟹 ｙ，ａｎ ｄ ｐｂ ａｒ ｍ ａｃｏ１ｏｇｙ，Ｊ Ｐｈａｒ− ｍ ａｃｏｌ Ｅｘｐ Ｔｈｅｒ ２４３ ： １０９一王近２， 亙９９１ １６； Ｌａｎｃ 鵬 ｔｅｒ ＲＪ＝ Ｎｉｔｒｉｃ ｏｘｉｄｅ ｉ理 ｃｅｉ…ｓ．Ａ ｍ Ｓｃｉ ８０： ２４８−２５９ ．１９９２ 亙７） Ｓ 洲 肌 Ｍ，Ｋ ｍ ｗｌｅｓ Ｇ Ｒ，Ｍ ㎝ ㎝ ｄａ Ｓ ： Ｗｉｄｅ− ｓｐｒｅａ ｄ ｔ…ｓｓｕｅ ｄ量ｓｔｒｉもｕｔｉｏ ｎ ａｎｄ ｃｈ ａｎｇｅｓ 三ｎ ａｃｔｉｖ− ｉｔｙ ｏｆ Ｃ ａ２＋一ｄｅｐ ｅｎ養 ｅｎｔａ ｎｄ Ｃ ａ呈 ㌔…ｎ ｄｅｐ ｅｎｄ ｅｎｔ ｎｉｔｒｉｃ ｏ ｘ…ｄｅ ｓｙ ｎｔｈ ａｓｅｓ． Ｆ Ｅ Ｂ Ｓ Ｌｅｔｔ ２９ｉ ： １里５− １｛９． １９９２ １８） Ｇ ｒｉｓ光 ａ ｍ Ｍ Ｂ ，Ｙ ａ ｍ ａ 幽 丁 ： Ｎ ｅｕｔｒｏ ｐｈｉｌｓ，ｎｉｔｒｏ− ｇｅ ｎｏ ｘｉｄｅｓ， ａｎ ｄｉηｆｌａ ｍ ㎜ 日ｔｏｒｙ ｂｏ ｗ ｅｉ ｄ…ｓｅａｓｅ． Ａ ｎｎ Ｎ Ｙ Ａｃａｄ Ｓｃ… ５６４： ユ０３− ｎ５， 王９９２ １９） Ｍ ｉδｄ１㊤ｔｏ ｍ Ｓ Ｊ ， Ｓ ｈｏｒｔｈ ｏ皿 ｓｅ Ｍ， Ｈ 皿 ｍｔｅｒ Ｊ Ｏ ： Ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｎｉｔｒｉｃ ｏ ｘｉｄｅ ｓｙ ｎｔｈｅｓｉｓ ｉｎ ｕｌｃｅｒａｔｉｖｅ ｃｏ一…ｔｉｓ．Ｌａｎｃｅｔ ３４１： ξ６５−４６６．１９９３ ２０） 肚 ａｍ Ｄ Ｄ， Ｖｉ鵬ｅｒ ＪＪ， Ｍ ｅ竈ｗｉ畠駝 ｍ Ｉ； Ｅｎｂａｎｃｅｄ ｓ ｙ ｓｔ ｅ 竈ｏ… ｃ ｎｉｔ ｒｉ ｃ ｏ ｘ ｉ ｄ ｅ ｐ ｒ ｏ ｄ ｕ ｃｔｉ ｏ ｎ ｉ ｎ ｉｎ刊 ａ ｍ ｍ ａｔｏｒｙ ｂｏ ｗ ｅ１ ｄｉｓｅ ａｓｅ．Ｌ ａｎｃｅｔ ３４丑 ： １１５０． １９９３ ２至） 跳 ｅｒ㎜ ａｍ Ｐ Ａ， Ｌ 細 ｂ 肌 ｈ 亙 Ｖ， Ｗ ｏｏ８ Ｒ 眺 Ｐ鮒 捕 ｃａｔ…ｏ η ａ ｎｄ ｃＤ Ｎ Ａ 艶 ｑ ｕｅｎｃｅ ｏｆ ａｎ ｛ｎｄｕｃｉ− ｂｌｅ ｎｉｔｒｉｃ ｏｘｉｄｅ ｓｙ ｎｔｈａｓｅ ｆｒｏ ｍ ａ ｈｕ ｍ ａ ｎ ｔむ ｍ ｏｒ ｃｅＨ ｌｉｎｅ．Ｂｉｏｃｈｅ欄ｉｓｔｒｙ ３２ ： ｎ ６００一至１６０５， 三９９３ ２２） Ｔｏｗ ｈｉｎ Ｈ Ｔ ， Ｓｔａ 銚 ｅｌｉｍ Ｔ， Ｇｏ 記 ｏ皿 Ｊ ： １≡：１− ｋｅｃｔｒｏｐ ｈｏｒｅｔｉｃ ｔｒａ 鵬 ｆｅｒ ｏｆ ｐｒｏｔｅ１ｎｓ ｆｒｏ ｍ ｐｏｉｙ− ａｃｒｙ１ａ ｍｉｄｅ ｇ ｅｉｓ ｔｏ ｎ三ｔｒｏｃｅＨ ｕｌｏｓｅ ｓらｅｅｔｓ： Ｐｒｏｃｅ− ｄｕｒｅ ａｎｄ ｓｏ ｍ ｅ ａ ｐｐｌｉｃ ａｔ三〇 ｎｓ． Ｐｒｏｃ Ｎ ａｔｌ Ａ ｃａ ｄ Ｓｃｉ Ｕ ＳＡ ７６ １ 里３５０一皇３５４， 王９７９ ２３） Ｐ皿１ｆｏ１ｄ Ｋ Ａ Ｆ，Ｒｉｇ皿但ｙ 羽 Ｍ， Ｇａま辻ｅｒ Ｋ Ｃ： Ｋ Ｐ１二 Ａ ｎｅ ｗ 狐 ｏｎ ｏｃｌｏ ｎａ１ ａ ｎｔｉｂｏ ｄ ｙ ｔｈ ａｔ ｄ ｅｔｅｃｔｓ ａ ｍ ｏｎ ｏｃｙｔｅ／ ｍ ａｃｒｏｐｈ ａｇｅ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ａ ｎｔｉｇ ｅｎ ｉｎ ｒｏ 固ｔｉｎｅ１ｙ ｐｒｏｃｅｓｓｅｄ ｔｉｓｓ理ｅ ｓｅｃｔｉｏ ｎｓ． Ｊ Ｃｉ葦ｎ Ｐ ａｔｈ− ｏｉ ４２ ： 尾互ξ一近２１， 王９８９ ２４） Ｂｈｏｏ 脾 ｗｔ Ｌ，丁皿 畑 砒 Ｒ Ｒ， 恥 ｓｔｅｉ皿 篶 Ａ ＝ Ｉｍ一 ㎜ ｕｐ ｏｈｉｓｔｏ ｃｈ ｅ ｍ ｉｃ ａｌ ｃ ｈａｒａｃｔｅｒ…ｚ ａｔｉｏｎ ｏξ ｔ ｗ ｏ ｎｅ ｗ 卿 ｏ ｎｏ ｃｌｏ ｎ ａ１目 ｎｔｉｂ ｏ ｄｉｅｓ ｒｅａｃｔｉｖ ｅ ｗｉｔｈ おｕ ㎜ ａｎ 竈ｏａｃｒｏｐ ｈａ ｇｅ ｓ 曲 ｓｅｔｓ ａ 納 ｄｅｒｉｖｅｄ ｍ ａ−ｉｇ− ｎ ａｎｃ…ｅｓ ｉｎ Ｂ ５一￡ ｘ ｄ， ｐａｒａ 冊 ｎ−ｅ 閉 ｂ ｅｄｄｅｄｔ…ｓｓｕｅｓ． Ｂｌｏｏｄ ７Ｉ ： １０７９一亙０８５． １９８８ ２５） 腕 欲 ＫＪ，Ｔ Ｍ ｅ ｍ Ａ，Ｓｔ咀ｅｈｒ ＤＪ： Ｍ ａｃｒｏ 凶 ａｇｅ ｎｉｔｒｉｃ ｏ ｘｉ壱 ｅ ｓｙｎｔｈａｓｅ ｓｕｂリ ｎｉｔｓ． Ｊ Ｂ…ｏ− Ｃ ｈｅ 蜘 ２６８： ２１１２０−２１１２９．１９９３ ２６） Ｂｒｅ枇 Ｓ Ｄ， 況 ｗａ皿ｇ Ｍ Ｐ，ＳアＩｌａｅｒ Ｈ Ｓ： α ｏｎｅｄ ａ 邊ｄｅ ｘｐｒｅｓｓｅｄ ｎ 漣ｒ…ｃ ｏｘｉｄｅ ｓｙ ｎｔｈ纈ｓｅ ｓｔｒｕｃｔｕｒ− ａ…ｌｙ ｒｅｓｅ ｍ ｂｌｅｓ ｃ ｙｔｏ ｃ汽ｒｏ竈Ωｅ Ｐ ４ ５０ ｒｅ 碗 ｃｔａ ｓｅ． Ｎ ａｔｕｒｅ ３５１： ７１亀一７王８． １９９２ ２７） Ｍ 丑ｒｓｄｅハ Ａ Ｐ， Ｓεｈａｐｐｅｒｔ Ｔ Ｘ， Ｍｉｃ止 創 丁 ＝ Ｍｏｌｅｃ リｌａｒ ｃｌｏ ｎｉｎ ｇ ａ 納 ｃ 紬 ｒａ ｃ辻ｅｒｉｚ ａｔ１ｏ ｎ ｏｆ ２８） ２９） ３⑪） ３１） ３２） お ｕ 棚 ａｏ ｅｎ ａｏセｈ ｅＨａｌ ｎｉｔｒ量ｃ ｏｘ｛ｄｅ ｓｙｎｔも ａｓｅ． ＦＥ Ｂ Ｓ Ｌｅｔｔ ３０７ ：２８７−２９３，王９９２ Ｎａ 汕 ａ皿 Ｃ： Ｎ …ｔｒｉｃ ｏ ｘｉｄｅ ａｓ ａ ｓｅｃｒｅｔｏｒｙ ｐｒｏ ｄ− ｕｃｔ ｏ｛ ｍａ ｍ ｍａｌ１ａ蘂 ｃｅＨｓ． ＦＡ ＳＥ Ｂ Ｊ ５； ３０５１− ３０６竜， １９９２ Ｈ ｍ ｂｅｒｔ Ｋ ， Ｙｉｃｔｏ ｒｉａ Ｋ 沼 ： Ｎ ｛ｔｒ…ｃ ｏ ｘ三ｄｅ ： Ａ ｐ ａｔｈ ｏｇｅｎｅえ…ｃ ｆａｃｔｏｒ ｉｎ ａ 旭ｔ〇三獅 ｍ Ｕｎｉｔｙ．腕 ｍ ｍ ｏｌ Ｔ ｏｄａｙ １３ ： １５７−１６０． １９９２ Ｂｒｏ 砒 Ｓ Ｄ，Ｇ１ 挑ｔ Ｅ Ｃ，Ｓ苅ｙｄｅｒ Ｈ Ｓ ： Ｎ…ｔｒｉｃ ｏ ｘｉ養 ｅ ｓｙｎｔｈａｓｅ ｐｒｏｔｅｉｎ ａｎｄ ｍＲ Ｎ Ａ ａｒｅ ｄｉ− ｓｃｒｅｔｅｌｙ ；ｏｃａ；曇ｚｅｄ ｉｎ ｎｅ鶯ｒｃ ｎａ１ ｐ ｏｐ ｕ−ａｔｉｏ ｎｓ ｏｆ ｔｈｅ ｍ ａｍ ｍ 目１ｉａｎ Ｃ Ｎ Ｓ ｔｏｇｅｔｈｅｒ ｗｉｔｈ Ｎ Ａ Ｄ ＰＨ δｉａ ｐｈ ｏｒａｓｅ． Ｎ ｅｕｒｏ ｎ ７ ＝ ６１５−６２４． １９９１ ＭｉｌＩｅｒ ＪＳ Ｍ，Ｋａｋｋｉｓ ㎜，Ｃ１趾 ｋ Ａ Ｄ ： Ａ ｍ ｅｌｉｏ− ｒａｔ｛ｏ口 ｏｆ ｃｈｒｏｎｉｃ Ｈ ｅｉｔｉｓ ｂ ｙ ｎｉｔｒ…ｃ ｏ ｘｉｄｅ ｓｙ ｎｔｈ ａｓｅ ｉｎ 繍ｂ…ｔｉｏｎ．Ｊ Ｐｈａｒ伽ａｃｏｌ Ｅｘｐ Ｔｈｅｒ ２６均 ： １１一至６， Ｉ９９３ ］〕ｅ正ｒｉｏｅ Ｐ ， Ｋ 皿ｂ６ｓ Ｐ ： Ｎ 麦ｔｒ…ｃ ｏ ｘｉｄ ｅ ｄｏ 苅 ｏｒｓ ｒｅｄｕ ｃｅ 辻ｈｅ ｒｉｓｅ ｉｎ ｒｅ ｐｅｒｆｕｓｉｏ ｎ−ｉｎｄ むｃｅｄ ｉｎｔｅｓｔｉｎａ１ 榊 ｕｃｏｓａ１ ｐｅｒ㎜ｅａｂ三１ｉｔｙ． Ａ ｍ Ｊ Ｐｈｙｓｉｏ１２６５ ： Ｇ１８９ −Ｇ１９５． １９９３ 一４躯 一
