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研究科學生永田良作 &,bsaku 7Vagala

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(1)

1532

i鶏卵ノ野次的感染二關スル實験的研究

其IV.鶏卵内容ノ細菌二及ボス影響下膳テ

金澤欝科大町細菌學教室(主任谷教授)

研究科學生永田良作

      &,bsaku 7Vagala

(昭和19年3月3日受附) (日本出版會登録番號1126)

第1章鶏珈内容ノ細菌二二スル殺菌作用乃至畿育阻止作用二就テ

   第1節卵黄,卵白ノ各種細菌二

    ・封スル殺菌作用乃至稜育阻     止作用ノ有無,強弱二就テ

     第1項實験材料

 1)被樵卵 當酒室飼育中ノ白色「レグホン」種ノ産 卵セル受精卵ニシテ,産卵後6時聞以内ノ目方509前 後ノモノナリ.使用時卵殼ヲ普通アルコール」次デ「エ rテル』ニテ清拭シ,三二鏡端二「アルコール」ヲ塗布 シ,直チニ火焔二通ジ「アル,・一一ル」ノ燃焼ジ鑑スヲ待 チテ豫メ灼熱セル「ピンセット」ニテ小孔ヲ穿チ,該小        孔ヲ通ジテ,卵白ヲ小甲子引入滅菌三角コルペンJ二 受ケ,樹孔ヲ更二開キテ卵黄ヲ別ノ三角コルペン」二 採リ,各kヲ振盈シテ内容ヲ均一化シ,其ノー定量ヲ 實験二供ス.

 2)使用菌種 E・t(相川株),S・s(片岡株), E.c

(學生株),Sh・dy(A4株), V・c(霜葉株), St・a(教室 在來株)等ニシテ使用時各菌株ノ血温24時間寒天培養

ノモノ1白金耳ヲ5%「ブイヨン食盟水ニテ5百萬倍 二稀羅セルモノヲ使用ス.

     第2項 實 験 方 法

 卵白ヲ生理的食盟水ニテ退滅的二巴羅シ,卵黄ハ其 ノ儘,之ヲ1 ccm宛滅菌試験管二探リ,之二前記菌液 O・5ccm宛加へ良ク振盈混和シデ血温二四チ3時閲,

24時間,48時間,72時間目毎二各試験管内容0・1ccm 宛滅菌「シャーレ」二心リ,二二寒天ヲ加へ画板混和培 養ヲ行ヒ,血温24時聞放置シテ畿生セル菌集落数ヲ樵

ス,

     第3項實 験 成 績

.1)Et, Sh.dyハ濃庫ナル卵白打衣シテ・・其 ノ抵抗力弱ク24時間乃至48時間ニシテ全ク死滅 シ,E・c, S。s等モ亦濃厚ナル卵白二封シテ比較 的抵抗力弱クー一:・時罐育増殖ヲ認ムルモ72時間口

シテ死減シ,V.c及St.aハ抵抗力彊ク封照二比 シ獲育不良ナルモ72時間ニチモ伺卵白中二生存 菌ヲ諮明ス.

 2)卵白ノ稀薄二件ヒ何レノ菌種モ漸次護育

       ひ可良昌シテE.cハ5倍稀繹以上, E.t, S・P, V.c,

St.a等ハ10倍稀繹以上, Sb.dyハ20倍毒心以上 ノ稀薄卵白液二於テ其ノ嚢育ヲ阻止セラレズ.

 3)卵黄ハ供試菌ノ何レニ封シテモ卵白ノ如

キ殺菌作用乃至護育阻止作用ヲ有セズ.

  第2節各個ノ鶏卵二於テ其ノ卵白ノ

   殺菌作用乃至稜育阻止作用ノ比較

     第1項 實 験 材 料

 1)被検卵 朗節二同ジ・

 2)使用菌種 E・t(相川株).使用時普通塞天血温 24時間培養ノモ1白金耳ヲ生理的食盛水ニテ5百萬倍

二稀繹セルモノヲ使用ス.

     第2項 實 験 方 法

 5個ノ鶏卵ノ卵白,卵黄ヲ別々二取リ出シ,卵白ハ 生理的食盟水ニテ遍滅的二稀澤シ卵黄ハ其ノ儘,各々       た其ノ1・Occm宛ヲ滅菌試験管二三リ之二前記菌液ヲ 0・5ccm宛加フ.以下前節實験方法二準ズ.

     第3項 實 験 成 績

 何レノ鶏卵卵白昌於テモ護育阻止作用乃至殺

[ 120 ]

(2)

菌作用ヲ呈シ,個々ノ鶏卵卵白間二特二差異ヲ 認無難シ.

   第3節接種菌量ト卵白ノ殺菌作

    1用乃至護育阻止作用トノ關係

     第1項實験材料

 1)貸越卵 前節『伺ジ・

 使用菌種E・t(相川株),ls ・c(學生麺).

     第2項 實 験 方 法

 卵白ヲ1.Occm宛滅菌試験管二型リ,之二供試菌ノ 普通寒天血温24時間培養ノモノ1白金耳ヲ生理的食盛 水ニテ1萬倍,10萬倍,100萬倍,1000萬倍,1GOOO萬 倍二稀澤セル菌液ヲ夫kO・5・cm宛別々印加フ.以下 前節潮齢方法二準ズ.

     第3項 實 験 成 績

 1)E.tハ其ノ1萬倍稀繹菌液=於テハ卵白

ノ菌襲育阻止作用鎧作難ク,其ノ10萬倍稀繹菌 液ニチハ卵白内ニテ良ク抵抗シ,48時間ニチモ 生存菌ブ認メ,其ノ100萬倍以上ノ国論菌液=

テハ抵抗力弱ク,24時聞乃至48時間ニテ死滅

ス.       .

 2)Ecハ其ノ1萬倍乃至10萬倍稀繹菌液二

番テハ卵白ノ全島阻止作用認メ難ク,100萬倍 稀繹菌液ニチハ卵白内ニテ可成抵抗シ48時聞ニ チモ生存シ,1000萬倍以上ノ稀繹菌液ニチハ48 時間ニテ死滅セリ.要之接種熱量ノ多寡ト卵白

ノ殺菌作用乃至首回阻止作用トハ逆比例ス.

      ゆ

  第4節新蕾鶏卵二於テ其ノ卵白ノ殺

    菌作用乃至獲育阻止作用ノ比較

     第1項 實 験 材 料

 1)被槍卵

 2)使用菌種,第2節第1項二同ジ.

     第2項 實 験 方 法

 鶏卵ヲ産卵後1週間∂2週間,3週間,4週間,5 週間,ナル檬,豫メ25。C艀卵器中二1週聞目毎二新 鮮鶏卵2個宛納メ,ee 6週日目二累卵ヲ取出シ更二封 照タル新鮮鶏卵2個計12個二就キ各々ノ卵白ヲ無菌的

昌探取シ,生理肉食盟水昌テ急減的』謡曲シ卵黄ハ其 ノ儘各・々其ノ1・Occm宛ヲ滅菌試験管昌探リ,之二前 記菌液0.5ccm宛加フ.以下前節實験方法二準ズ.

     第3項實験成績  ・

 1)1週,2週,3週日ヲ経過セル鶏卵卵白

二於テハ何レノ卵白稀晶晶ニチモ,封照タル新

鮮鶏卵卵白液二幅シ其ノ殺菌作用二二顯著ナ

リ.

 2)4週,5週日経過セル鶏卵卵白ハ其ノ濃

厚液ニチハ封照卵白高山比シ其ノ殺菌作用殆ン

ド差異ヲ認メ難キモ,稀澤液ニチハ明力=差異 アリ其ノ嚢育阻止作用著明=減弱シアリ.帥チ 鶏卵ハ4週日以上経過スレ パ其ノ卵白ノ殺菌作 用乃至稜育阻止作用ハ減弱スルモノト思惟セラ

ノレ.

   第5節一卵黄,卵白混合液ノ殺菌     作用乃至詩賦阻止作用=就テ

     第1項 實 験 材料

 1)被検卵

 2)使用菌種 前節二二ジ,

     第2項 實 験 方 法

 卵黄卵白ヲ別々二採リ出シ,卵黄ヲ1%,2%,5

%,10%,20%,,se%ニナル如ク卵白ニテ逓滅的二稀 羅シ,其ノ各 々2 ccm宛ヲ滅菌試験管二探リ,別二

1個ノ鶏卵r全内容混合酒ヲ2ccm別ノ滅菌試験管s 探り,各試験管二E・tノ菌液1ccm宛加フ.以下前 節實験方法二準ズ.

     纂3項 實 験 成 績

 1)50%,20%,IO%卵黄,卵白混合液=於 テハ殺菌作用乃至襲 育阻止作用ヲ認メズ.

 2)2%, 1%,卵黄,卵白混合液二於テハ明 カニ獲育阻止作用ヲ認ムルモ,同封照タル卵黄 混入ナキ卵白液二比シ殺菌力乃至嚢育阻止作用

ノ減弱シアルヲ認ム.

 3)1個ノ鶏卵全内容混和液(約35%卵黄,

卵白混合液二相當ス)ハ卵白ノ如キ殺菌作用乃 至嚢育阻止作用ヲ有セズ,寧ロ獲育ヲ促進スル ヲ認ム.要之卵黄,卵白混合液=於テハ卵白濃 度高ク,卵黄含量少キ程殺菌作用乃至護育阻止 作用顯著ナルモ,卵黄含量一定:量二油日バ殺菌 作用乃至装育阻止作用点ク消失シ,寧日稜育ヲ

・二三ス.

    第6節 細菌榮養素添加昌ヨル      卵白ノ殺菌作用乃至獲育       阻止作用ノ影響二就テ

     第1項 實 験 材 料

t21)

(3)

1534

 1)血忌卵

 2)使用菌種 前節二同ジ.

     範2項實験方法

 卵白ヲ生理的食監水ニテ遍滅的二稀羅シ,之ヲ各5 列ノ試験管二1.Occm宛採リタルモノニ使用菌ノ普通 寒天血盗24時間培養ノモノノ1白金耳ヲ夫々生理的食 盟水,5%「ブイヨン食盛水,10%「ブイヨン食盤水,

        亀        ●

50%「ブイヨン食三水及ピ純「ブイヨン」ニテ千萬倍二 二羅セル菌液1.Occm宛ラ添加ス.之ヲ血温24時間保 チタル後其内容0.1ccm宛ヲ探り普通塞天ヲ用ヒ李板 混和培養ヲ施シ護生セル菌集落数ヲ楡セリ。

     第3項直証.成績

 卵白=微量ノ「ブイヨン」(5%)(10%)ヲ加ヘ タルトキハ,封照卵白液二品シ明カニ其ノ震 育 阻止作用乃至殺菌作用ノ減弱乃至消失ヲ認ム.

而シテ添加「ブイヨン」濃度ガ50%以上二達士バ 卵白ノ爽育阻止作用ハ全ク消失ス.自ロチ生卵白

ハ之二加フ7V  茶uイヨン」濃度二同行シテ獲育阻

止作用ヲ減弱或ハ消失ス.

  第7節 加熱ニヨル卵白ノ殺菌作用乃     至護育阻止作用ノ攣化二黒テ

     第1項 實 験 材 料

 1)被瞼卵

 2)使用血腫 前節二同ジ.

     第2項 實 験 方 法

 卵自ヲ2ccm宛13本ノ滅菌試験管二探リ,其ノ申1 本ヲ手盛トナシ,他ノ12本ヲ夫.々50。C,56。C,60。C

二夫々15分,』30分,60分及ビ60。C,65。C二夫k 5 分,10分,15分間重盟煎中=テ加熱シ,其ノ中へ豫メ 普通寒天二血温24時間培養セルE.t/1白金耳ヲ生理 的忌詞水ニテ千萬倍二稀繹セル菌液1・Occm宛加へ良 ク振盤混和シテ血温二言チ3時間,24時間,48時間目 二試験管内容ノ0・1ccm宛ラ滅菌「シャーレ」二三リ普 通下天ヲ用ヒテ李板混和培養ヲ試ミ三生セル菌集落数

ヲ検セリ.       一

     第3項 實 験 成 績

 卵白ノ加熱50。C乃至56。Cニチハ1時闇ノ

加熱二於テモ術封照即チ加熱セザル卵白ト殆ン

ド相等シキ殺菌力ヲ保有スレドモ加熱60。C 15 分乃至650.C5分=及べバ明力=.卵白ノ稜育阻 止作用減弱ス.65。C 10分ノ加熱ニチハ全ク其

ノ殺菌性能ヲ消失ス.

第2章 鶏卵卵白=溶血性補盟拉溶菌性補髄ノ有無及ビ 卵白ノ細菌性毒素二及ボス影響血温テ

  第1節 卵白ノ溶血性補醗作二二就テ

     第1項實験材料

 1)被瞼卵 前章ノ如キ新鮮鶏卵ヲ使用ス.

 2)使用溶血系 山羊溶血系ヲ使用ス.溶血素(溶 血債1:4000)ハ1:100倍肝管ニテ用ヒ,山羊血球ハ 新鮮ナルモノヲ生理的三門水田テ3回洗雪1 5%トシ テ使用ス.

     第2項實験方法

 5%赤1㎞球ヲ0・5ccm,溶血1素(1:100)ヲ0・5ccmニ テ用ヒ,卵白ハ5乃至100倍二生理的食雨水ニテ遊滅 的二回忌セノk西ノヲ夫々0・5ccm二面饅代用トシテ加 へ,血温二2時閲保チ,更二翌日迄氷室二放置シテ其

ノ成績ヲ判定セリ.

 伺新鮮ナル「モルモット」血清ヲ補盟トシテ同溶血系 二加へ同一虞置ヲ施シ以テ封照トセリ.

     第5項 實 験 成 績

 卵白ヲ補艘トシテ加ヘタル何レノ試験管二於 テモ溶血ヲkサズ,封三二ル「モルモ。ト」血清 ヲ補艦トシテ加ヘタルモノニ於テハ明カニ溶血 現象ヲ呈セリ.帥チ卵白中ニハ溶血性補髄ヲ高

月ズ.

  第2節卵白ノ溶菌性心艘作用二心テ

     第1項實験材料

 1)被楡卵 前節二食ジ.

 2)使用菌種 V・c,使用時血温24時間寒天培養菌 1白金耳ヲ5%「ブイヨン食如水ニテ千萬倍二稀山下 ルモノヲ陣用ス.       ・    /

 3)溶菌血清 使用旧藩該家兎冤疫血清(凝集債200 0倍)ヲ用ヒ,用二臨ミ100倍二稀羅セルモノヲ使用ス.

     第2項 實 験 方 法

 卵白ヲ5倍乃至100倍二生理的食盤水ニテ遍減的二 二繹セルモノヲ各試験管二〇・5ccm二二リ,二二二二

[ 122 ]

(4)

血清蚊菌液0・5ccm宛加へ血温二3時聞保テル二二チ ニ之ヲ滅菌「シャーレ」二夫.々0・1ccm宛探リ普通二天 ヲ用ヒテ4S板混和培養ヲ試ミ三生スル菌集落数ヲ検セ リ.爾新鮮ナル「モルモット」血清ヲ卵白ノ代りニ補饅 トシテ加へ同一庭置ヲ施シ以テ封照トセリ.

     第3項 實 験 成 績

 卵白ヲ加ヘタル試験管二於テハ何レモ溶菌現 象ヲ認メズ,封照タル「モルモット」血清ヲ加へ 同盧置ヲ施セルモノ引墨テハ明カニ之ヲ認メタ

リ.帥チ卵白中置ハ溶菌性補髄ヲ認メズ.

    第3節卵白ノ細菌性毒素二

      封スル影響二:就テ

     第1項實験材料

 1)被検卵前節二同ジ.

 2)使用菌種 CI・t.

 3)マウス.燈重13〜159ノモノヲ使用ス.

     第2項 實 験 方 法

 使用菌ヲ2%葡萄糖加「ブイヨン」二血温1週間培養 シ,其ノ培養濾液ヲ探り,原液亜生理的食盟水ニテ10 倍及100倍二三糧セルモノ1・Occm宛ヲ2列ノ試瞼管 二採リー方ニハ濃厚ナル卵白,他方ニハ生理的押型水 ヲ,夫々同量二二へ,血温二3時間保チタル後各試験 管ノ0.1ccm宛ヲ「マウス」ノ皮下二注射シテ其ノ護病 状態ヲ48時間観察セリ.爾1個ノ試験管二就キ「マウ ス」2疋宛使用セリ.

     第3項實 験 成 績

 毒素原液ニチハ12時間内二,10倍稀繹液=テ ハ48時間内二死亡シ,100倍稀繹ニチハ痙攣ヲ 認ムルモ健在ニシテ且ツ外線タル食盤水ニテ稀 事セルモノト同一ノ成績ヲ得タリ.EPチ卵白ハ 破傷風毒素ヲ中和セズ,

第3章 結

 (1)鶏卵卵白ハ各種細菌二封シ殺菌作用乃至 獲育阻止作用ヲ有シ,其ノ程度ハ各菌種ニヨリ 異ナレリ.

 (2)鶏卵卵白ノ細菌二封スル殺菌作用乃至獲

育阻止作用ハ其ノ濃El{ ・・ 2F行ス.醜

 (3)鶏卵卵黄ハ卵白ノ如キ殺菌作用乃至護育 阻止作用ヲ有セズ,寧ロ護育ヲ促進ス.

 (4)各個ノ鶏卵=於テ其ノ卵白ノ殺菌作用乃 至稜育阻止作用二於テ三二顯著ナル差異ヲ認メ

ズ.

 (5)鶏卵卵白ノ殺菌作用乃至獲育阻止作用ハ 接種菌:量ノ多寡ト逆行ス,

 (6),鶏卵卵白ノ殺菌作用乃至獲育阻止作用ハ

産卵後4週以後漸次減弱スルモノト思惟サル.

 (7)鶏卵卵白ハ之=加フル「ブイヨン」濃度=

比例シテ殺菌作用乃至護育阻止作用ヲ減弱或ハ

消失ス.

 (8)卵白ノ加熱60。C 15分乃至65。C 5分二 於テ卵白ノ殺菌作用ハ減弱シ,加熱65。C 10分

=及べバ卵白ノ殺菌作用乃至嚢育阻止作用ハ全 ク清失ス.      一

 く9)鶏卵全内容混和液ハ細菌ノ獲育ヲ促進

ス.

 (10)鶏卵卵白ハ溶血性補艘並溶菌性補髄ヲ 有セズ且ツ細菌性毒素ヲ中和セズ.

第4章璽第1報ヨリ第rv僧門ノ総括

 岡津産卵後24時間以内ノ薪鮮正常鶏卵並鰐化 中攣敗セル鶏卵,自家貯藏甲州敗セル鶏卵,市 場ヨリ攣敗セルモノトシテ得タル攣敗鶏卵二巴 キ細菌學的検索ヲナシ,新鮮正常鶏卵ハ其ノ2

%二,攣敗鶏卵ハ其ノ58%以上昌細菌ヲ含有ス ル事ヲ確メタリ.即チ鶏卵ノニ次的感染ノ事實

ヲ見回リ.文献ヲ経ク=Wilm, piorkowski,

Lange、 Poppe等ハ「チフス」菌,「パラチフス」

菌,「コレ:ラ」菌,大腸菌等二二キ實験的 昌之等 ノ菌が鶏卵卵殼ヲ通過スル事ヲ確メノニ孜的感 染ヲ惹起スルト述べタルモ,非田下性菌二因ル ニ次的感染二二シテハ未ダ明確二答ヘラレズ,

[ 123 )

(5)

1536

僅二Sachs一一Mttke,梶塚氏等ハ赤痢菌二就キ實 験シ,非蓮動性ノ之等ノ菌ハ如何ナル條件下二 於テモ無疵卵殻ヲ通過シ得ズト述べタリ.鼓二     り於テ余ハ第II報ニテ報ゼルが如ク實験的=細菌

ノ鶏卵卵殻通過能二就キ攻究シ細菌が卵殼上二 於テWqchStumsfahigkeitヲ保有スルナラバV.c,1

E.t, E.c, S.p, S.s, S。e等ノ蓮動性菌ハ無論,

非蓮動菌タルSh.dy, Sh.pdy, Sh.s, A.a, St.a

等モ卵殼ヲ通過シ得ルヲ確メ,尚卵殻通過ノ逞 ノ速ハ細蔚ノ蓮動ノ有無,強弱が關係スルヲ認メ

タリ.然レドモ卵殼ヲ通過スルモ鶏卵内覧テ三 州増殖スルニアラザレバ鶏卵ノニ次的感染ハ意 義少ナシ.余ハ鶏卵内二侵入セル細菌が卵丙二 於テ畿育増殖シー定時間生存シ得ルモノナリや 否やヲ検セルニ上述ノ菌種ハ何レモ鶏卵内二於 テ,血温ニチハ75日乃至90日迄,室温昌テハ100 日迄生存シプルヲ認メCl.t, CLp等ノ丁丁生菌

ハ鶏卵内議テ獲育増殖セズ,之等ノ嫌悟性菌ハ 鶏卵ノニ羨的感染二野シ意義無キヲ確メタリ.

若シ鶏卵が之等病原性油画ヨリ汚染セラル・ナ

ラバ食品衛生上乃至國民保健上重大ナルヲ思

ヒ,引績キ鶴野内二野ケル細菌ノ毒力二就キ實 験シ,V.c, Sh.dy, E.t, S.e等ハ卵内二於テ其

ノ聴力ヲ保有スルヲ見,汚染鶏卵ノ傳染源タリ 得ルヲ確メタリ.樹鶏卵内細菌ノ漁熱二封シ如

何=抵抗スルカヲ槍シ煮沸5分間ニテ死滅スル

ヲ認メタリ.尚更二卵白ノ細菌ノ獲育二封スル

諸多ノ性歌ヲ槍セルニ卵白ハ各種細菌二封シ

A.:Fleming其ノ他諸家ノ云ヘルが如ク殺菌作 用乃至嚢育阻止作用ヲ有スルモ,余ノ實験二於       ヘデハー定菌:量二封シテハ該作用全ク無力化シ,

且ツ卵黄乃至細菌榮養素ノ添加ニヨリ該特異性 ノ減弱乃至消失スルヲ認メタリ.

第5章 第1報ヨリ第IV報迄ノ結論

 (1)薪鮮正常鶏卵並攣敗鶏卵ノ細菌學的二丁 ヲナシi鶏卵ノニ次的感染ノ事實ヲ認メタリ.E  (2)實験的=Escherichia coli, vibrio cQmma,

Eberthella typhosa, Salmonella r>arathyphi, Sal−

mQnella schottmuelleri, Salmonella enteritidis等 ノ蓮動性アル細菌ハ無論,Aerobacter aerogep es,

Staphyl. albus, Shigella dysenteriae, Shigella

para−dysenteriae, Shigella sonneri等ノ非蓮動性 ノ細菌モ卵胞ヲ通過シ且ヅ腔内二長ク生存シ,

鶏卵ノニ吹的感染ヲ惹起ス.

 (3)Clostridium perfdllgens及Clostridium tetani等ノ嫌氣性菌ハ鶏卵ノニ次的感染二封シ 意義ヲ有セズ.、

 (4)感染鶏卵内ノ細菌ハ其ノ毒カヲ保有ス.

即チ汚染鶏卵ハ腸チフス」,「パラチフス」,赤 痢,「コレラ」,食中毒等ノ傳染源タリ得.

 (5)鶏卵卵白ハ各種細菌二三シ殺菌作用乃至 護四二血作用ヲ有スルモ,一定菌四二封シテハ 殺菌力全ク無力化シ且ツ卵黄ノ添加ニヨリ卵白

ノ該特異性ハ浩失シ,寧ロ獲育ヲ促進ス.

1)MQhr 2生化學實験法(藤井著),定量篇

(エ940)=58・ 2)谷:賢學微生物學,第2版

(1940)3146−152・ 3)谷:微生物検査法,第 6版(1942); 137.  4)Witm:Arch. Hyg,

23 (1895):145・ 5) Piorkowski: Arch.

Hyg, 25一(1895):145. 6) Lange: A rch.

Hyg, 62 (1907):201. 7) Poppe: Arb.

ksl. Gesdh. amt, Berl. 34 (1910):186. 8)

Sachs−Milke: Arch. Hyg, 62 (1907):229.

9)梶塚: 陸帰日軍署團誌, 113(1922) :305.  10)

A. Fleming: Pr.oc. rog. Soc., Lond−Ser B:

Biol. Sci. 93 (1922):306. 11) A. Fleming:

Brit. J. exper. Path. 3 (1922) :252. 12)

Nakamura: Z. lmmunit. forsch. 38 (1923):

425. 13) Kimura: Arch. Ilyg u. Bakter.

96 (1925) : 277.

[ 124 )・

参照

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