皮下組織諸細胞ノ「ノイトラル赤 超生盟染色法二就テ
金澤醤科大幅病理學教室(杉山教授指導)
研穿科學生山.浦初男
〃:tTifSlto I脅7/1〃〃 !喜
(昭和13年7月.29日回附)
内 容 抄 録
本報告二於テハ家兎皮下結締織中ノ諸細胞二「ノイ トラル赤超生燈染色ヲ施ス簡便法ラ記載セリ.本法ノ 特異ナル鮎ハ組織片二直接色素溶液ヲ注入セズ,Rin・
ger氏液ヲ注入シタル後該色素生理的食盤水溶液二移 シ,色素ヲ組織二滲透セシムル1ナリ。
目 次
緒 言
實験材料及ピ實験方法 實験成績及ビ考按
結 論 主要文献
緒
組織細胞ノ超生禮染色法二關シテハ從來二方 法アリ.即チ薪鮮結締組織ノ小片ヲ迅速二鋏取
シ,載物硝子上=延べ共上二色素溶液ノ1滴ヲ 落シ,輕ク覆蓋硝子ヲ置キテ検スル法並二組織 片二小注射器ヲ川ヒテ稀薄ナル色素溶液ヲ注入 シ,水腫状ヲ呈セル組織片ノー部ヲ鋏取シテ鏡 槍スル法之ナリ.而シテ前者二於テハ組織片ヲ 十分=薄ク延べルコト實施上容易ナラザル爲組
言
織片中ノ諸細胞ハ顯微鏡下二於テ相重リテ存シ 槻四極メテ困難ナル不便アリ,又後者ノ方法二 從ヘバ「ノイトラル赤ノ如キ比較的無害ナル色 素二野テスラ核染色ヲ來シ易シ.
之等ノ鷺i二鑑ミ,余ハ後者ノ方法二改良ヲ加 へ極メテ容易二野確實二組織細胞=超生膣染色 ヲ施ス方法ヲ考案セシヲ以テコ・二報告セント
ス.
實験材料
1,實験動物 健康家藤
下剃材料及ビ實験方法
2.5000倍「ノイトラル赤生理的食鷺水溶液 3.Ringer氏液
[ ss )
實験方法
家兎ヲ動物毫二三定シテ約2cm干方皮膚毛
髪ヲ勢除シ,70%「アルコt・…ル」ヲ以テ清拭シ乾 燥ヲ待チテ皮膚二小切開ヲ施シ,手早ク米粒大 ノ皮下紅織片ヲ切り取りテRinger氏液ヲ盛iリ タル小「シャーレ」内二入レ置キ手術創ヲ縫合 ス.小「シヤ・…レ」内二丁レ置キタル組織片二小 注射器ヲ用ヒテRinger氏液ヲ萬遍ナク準等二 注入ス.タメ=組織片ハ宇透明水腫状ヲ呈セル 三指頭大ノ二二膨大ス。斯クナシタルモノヲ
5000倍「ノイトラル赤生理的食盛:水溶液:ヲ盛レ ル小「シヤ・…レ」二二シ,「シャーレJヲ密閉シ 37。C丁丁器中二1時間壮丁シタル後,組織片 ノー部ヲ切り取り二物硝子上二二二三ゲ,覆蓋 硝子ヲ以テ被ヒ油浸装置ノ下二鏡槍ス.
本法二於テ最モ特異ナルハ組織二二直接色素 溶液ヲ注入セズ,Ringer氏液ヲ注入シタル後 記素食盤水溶液二移シ,色素ヲ組織中二滲透セ
シムル黙ナリ.此方法二三レバ新鮮歌態ト二二 檬ナル染色顯粒ノ出現ヲ認メ得ベシ.
實験成績及ビ考按
本法二依リ正常家兎皮下霧粗結締一中ノ諸細 胞二超生面染色ヲ施セル顯微鏡像ハ附圖二示ス
如シ.
正常家兎ノ皮下結締組織中二常存スル紬胞ハ 主トシテ結締織成形細胞,組織球及ビ所謂「モ
ノチt・…テン」ニシテ顯粒性白血球及ビ淋巴球ハ 殆ド之ヲ認メタルコトナシ.
1.結締織成形細胞(Fibroblasten叉ハ:Fibro−
cyten)ハ皮下組織二最モ多数二品スル大形ノ細 胞ナリ.而シテ多クハ長紡錘形ヲ呈スレド屡々 不正形,多角形,星形ヲ呈スル菲薄ナル細胞ニ シテ長キ原形質突起ヲ出ス.Dominici(1920),
Heringa ( 1924) , v. M611endorff( 1926) , VS . u. M. v.
M611endOTff(1926)氏等二依レバ此原形質突起 ハ互二融合シテ常二syncytialer Zusammenhang
ヲナスモノナリト云ヘリ.然ル=Maximowハ 此顯二二シ結締織成形細胞ハ時=小ナル集團ヲ 作りテ存在シ細胞相互ノ境界ヲ明瞭二三メ難キ ゴトァレドー般ニハ孤立シテ存在スルモノナリ
ト記載シ居レリ.叉W.H. Lewis(1922),Ben−
ningho任(1923)ハ該細胞原形質突起ハ二二融合 スルモノ=ハアラズ軍二接燭シ居ルニ過ギズト 主張セルガ,更二最近W.H.:Lewis(1926),W.
IPfuhl(1932)二等ハ結締織成形細胞ハ常=孤立 シテ存在スルモノナリト力読セリ.
其原形質バー般二三胞ヲ=有スルコト少ク等質 性二見へ二二細胞ノ境界明瞭ヲ訣ク.「ノイト
ラル赤超生紙染色ヲ施セル場合ハ原形質中二小 ナル染色穎粒が散在性二出現スルヲ観ル.炎竈 二心テ心慮歌態(Reaktionszustand清野, active condion l Maximow)二二ル結締織成形細胞ハ静 止献言二三ケルヨ琳内張ク色素ヲ擬取スレドモ 染色穎粒ノ数が僅二増加シ,梢大形顯粒ヲ見ル ニ留リテ決シテ組織球ノ如ク大小ノ染色穎粒が 細胞ヲ充スガ如キ状態ヲ呈スルコトナシ.時二 原形質中二「ノイトラル赤=染ルコトナキ小ナ ル輝耀性急粒ヲ有スルatトァリ.叉稀二大小多 数ノ室胞ガ「ノイトラル赤二淡染シテ存在スル コトアリ.(MaXimow二依レバ炎誌面ハ組織培 養ノ場合二多シト.)本細胞二面テ雨域特異ナル ハ細胞中=織細ナfibriH5re Strukturヲ観ルコト ナリ.Pfuhlハ此fibril愉e Strukur二關シテ超 生盟染色ヲ施セル場合ノミナラズ固定標本二於 テモ之ヲ認ムト.Maximowモ亦其Textbook of histologyノ中二mitchondriaハ時二細胞艦表 面ヲ走ルtonofibrils(fibroglia fibers)二階ズルコ トアリト記載シ居レリ.余ノ家兎二於ケル観察 二二テモ結締織成形細胞ニハ殆ド常ごfibrillttr St「ukturヲ認メ高目リ.而シテ本細胞ノ核ハ「ノ
イトラル二野生盟染色二三テハ之ヲ認ムルコト 能ハザリキ.
2.下組織球ハ2種ノ形態トナリテ存在ス.
帥チ比較的大形ニシテ紡錘形乃至不正形ヲ呈ス
ル不動性ノ固着1生組織球(flxe H:isti㏄yten)ト,
58 山 浦
比較的小形ニシテ圓形乃至楕園丁,遊走状ヲ呈 スル遊離性組織球(freie Histiocyten)ナリ.前者 バーハ二大形ニシテ,形態ハ紡錘形,三角形叉 ハ不正形ヲ呈シ,原形質内=ハ多籔ノ微細室胞 及ビ少藪ノ輝耀性二二ム脂肪穎粒ヲ含ム.「ノ イトラル赤超生罷染色ヲ施ス時ハ詰論ノ大小不 同=シテ二形乃至楯二形ノ染色穎粒ヲ現ハシ,
同時二二胞モ平門シテ極メテ美麗ナル形態ヲ呈 ス.而シテー般二組織球ハ軍気二存在スルコト 割合二稀ニシテ多二巴ヲナシテ存在スル三叉ハ 大ナル乱丁ヲ作りテ存在スルコト多シ.此二二 關シテハMaximow, Jasswoin(1928)七二が既
二記載シ居レリ。
組織球ノ核ハ本超生盟染色二於テハ全ク認ム ルコトヲ得ズ.然レドモ先人ノ記載二依ルト核 ハ多ク樺二形,時二濁入シテ腎臓形,馬蹄形ヲ 呈スルコトアリト.更二Maximow其他二丁レ バ本細胞核ハ結締織成形細胞核二二シテ常二小 Sシテ固定標本二於テモ核小艦ハ著明ニハアラ ズト.而シテ結締織成形細胞核ハ大=シテ固定 標本二二テハ常二淡染シ中二著明ナル核小盟ヲ 有シ,二等ノ黙ハ二種細胞鑑別ノ重要ナル目標 タリ得ルト記載シ居レリ,然ルニPfuhl, Wハ之 二反封シ核ノ大サニ於テモ染色性二二テモ二種 細胞間=差異ヲ見ラレズ,叉組織球ノ二二於テ モ二二ナル染色ヲ施セバ核小盟ヲ明瞭二三メ得 ルが二二乙種細胞核ノ間ニハ根本的ナ題別ヲ獲 見シ得ズト主張セy.Brodersen(1928)モ「オス ミウム酸(Os1 niumsgure)固定標本二於テ爾細胞 核ノ間=差異ヲ認メザリキ.余ハ家兎皮下組織 片ノー部ヲ「オスミウム酸ヲ以テ固定シ(大月 五,参照)Romamowsky−Giemsa染色ヲ施セル
ニ爾種細胞ヲ殆ド二二シ能ハザリキ.
前述セル如ク固定染色標本二於テ細胞及ビ核 ノ染色性,大サ,核小艦ノ歌詠ヲ以テ爾種細胞 ヲ鑑別センニハ尚多少ノ疑黙ノ存スル所ナレバ 余ハ超生盟染色法ヲ以テ爾種細胞ヲ庭別スルヲ 最モ二品ナリト思考ス・而シテ回忌生心染色法 二品レバ組織球ハ極メテ著明ナル「ノイトラル 赤染色二三ヲ出現スル=反シ,結締織成形細胞
ハ然ラズ.叉結締織成形細胞ハ共原形質中=
fibrillare Strukturヲ明瞭二二メ得ラル・ヲ以テ 二等ノ黙ヲ以テスレバ歯種細胞ノ鑑別ハ極メテ 容易二且確實二途行シ得ルコトヲ附言ス.
後者遊離性組織球(freie Histiocyten)ハ小形ニ シテ原形質突起ナク,二形乃至糖二形ヲ呈シ,
細胞境界ハ明瞭ナリ.「ノイトラル赤超生燈染 色像二於テハ著明ナル大小不同ノ染色穎粒ヲ原 形質内二二ハシ,三三粒ハ核ノ存在スルトオボ シキ周二叉ハ共一二二集魚シテ出現スルコト多 ク,稀二藍籏セル染色三二ハ美シキ花冠歌排列 ヲナスコトアリ.叉「ノイトラル赤染色穎粒ノ 外二室温,脂肪二二ノ存在ヲ認メシムルコトァ
リ.
5.皮下組織中二所謂「モノチーテン」(Mono−
cyten>ト稻サル、所ノ圓形細胞ノ存在スルコト ハMaximow(1902,1906), Weidenreich(1911),
Renaut(1907),清野,:Benninghoff(1923),氏二 心來認メラレタル所=シテ最近話本細胞二面シ テW.P血h1立話多藪諸家ノ記載アリ.本島細 胞ハ正常二於テハ皮下叉ハ筋肉聞ノ結締組織中 二少数二分布シ居ルモノナレド,血管附近叉ハ 脂肪組織二一テハ比較的多藪存在スルモノナ
リ.而シテ本細胞ノ形態バー般二百形ナリ.大 サニ依リテ品種細胞ヲ小淋巴球大ノモノト血液 大軍核球二 匹敵スルモノトニ大別シ得.「ノイト
ラル高高生髄染色ヲ施セル場合Maxhnow(19 06,1929)ハ小二形細胞ハ殆ド染色乱心ヲ現ハ サズ大圓形細胞二於テノミNeutralrot Rosette ヲ形成スト云ヘルモ余ノ場合二於テハイヅレモ 常二美シキNeutralrot Rosetteヲ形域1セリ.
小弓形細胞ノ由二二關シテハ或ハ淋巴球ナリ
トシ(Maximow,:Bloom, Weidenreich, Stieve)或 ハ然ラズ(Schilliii9, Schittenhelm, Aschoff)トナ シテ未ダ確定スル所二三ラズ.此小義形細胞二 關シテハ當教室二百テモ渡邊氏ノ業績アリテ,
「ノイトラル赤超二二染色二品テハ美シキNαレ tralrot Rosetteヲ形成シ,「カルミン」生艦染色陰 性,「オキシダーゼ」反鷹陽性,墨粒鳥喰ハ極メ テ旺盛ナリト,而シテ氏ハ以上ノ三三ノミヲ以
[ 58 ]
テ之ヲ淋巴球一一組織球ト断定スル出品ナシF 云ヘリ.余ノ観察二面テモ一本小謡形細胞ハ美 シキNeutralrot Rosetteヲ形成スルヲ認メ叉墨 粒貧喰旺盛ナリキ.
而シテ小圓形細胞ヨリ大南扇細胞心癖ル,更 二遊離性組織球二至ルマデノー列ノ移行型が存 在スル事實ハ既二Maximow(1902),Weidenreich
(1911),Pfuhl(1932)ガ記載セル所ナリ.余ノ 観察二丁テモ大髄同様ナリキ.四二門門附近二 於テカ・ル移行型が多数出現スルモノノ如シ.
三種ノ細胞二三シテハ三二今後ノ研究二戸ツベ
キナリ.
叉遊離性組織球ト固着性組織球トノ移行,周 回性組織球ト結締織成形細胞トノ移行ノ問題ハ
古來Ranvier(1890,1900), Maximow(1902>,
Weidenreich (1911), B. enninghoff (1923), v. M6一
]lendorff (1926) , W. u. M. v. M61]endorff (1926)
氏等二依り盛二論議セラレタル所ナルモ未ダー 定セル結論二到達セザルモノノ如シ..
4.組織性肥単細胞(Mastzellen)
余目家兎二於テ獲見シタルコトナキモ,Ma・x−
imoW随一メテ三二血管附近二存在スト.
5. undi fferenzierte Mesenchymzellen
Maximowハ毛細血管附近二存在スト云ヘル モ余バカ・ル細胞ヲ確証=認メタルコトナシ.
三種細胞二關シテハMaximow及ビPfuh1ヲ参
照セラレタシ.
結
本報告二於テハ家兎皮下結締組織中ノ諸細胞 二「ノイトラル赤超生乳染色ヲ施ス簡便法ヲ記 載セリ.本法ノ特異ナル黙ハ組織学二直接色素 溶液ヲ注入セズ,Ringer三門ヲ注入シタル後
論
色素溶液二移シ,色素ヲ組織二滲透セシムル鮎 ナリ.此方法二依レバ核染色ヲ來スコトナク極 メテ容易二且確實二超生燈染色ヲ施シ得ベシ.
文
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4294頁,昭和8年. 34)Weidenreich, F., D三コ 口.eukocyten und ve:wandte ZellformeD. Ergebn. d.
Anat. u. Entwicklungsgesch。19,527,19i1. 35)
山浦初男,諸種糖類ノ生盟内輸入が皮下縄朕織内 被細胞系ノ墨粒:君門機能二及ボス影響二酉テ,其
1.十全會雑誌,42巷,3244頁,昭和12年.
附 圖 読 明
第1圖乃至第5圖二品テ家兎皮下組織諸細胞ノ
「ノイトラル赤超生盟染色像ヲ出歯セリ. (Ok.
Homal. III, Objekt. H・1.50倍率700×)
第1圖H:固着性組織球(fixe Ilistiocyten)
F:結締織成形細胞(Fibroblasten)
第2圖 II :固着性組織球(fixe Ilistiocyten)
EH・:遊離性組織球(freie Ilistiocyten), M1:
所謂「モノチーテン」Monocyten)ニシテ血液大軍
核球二匹敵スル大サヲ有スルモノ.
第3圖 H:固着性組織球(fixe HistioCyten)
F:結締織成形細胞(Fibroblasten), M2:「モノチ ーテン」(Monocyten)血液小淋巴球大ノモノ.
第4圖 特配Fibroblaston二焦職ヲ面縛タリ.
第5圖 同上
F:結締織威形細胞(Fibroblasten)H:固着性組
織球 fixe Ilistiocyten)
[ 60 ]
第 1 圓 第2 圖
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