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白 血 病 の 細 胞 学 的 分 類

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Academic year: 2022

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(1)616. 155. 392. 白. 血. 病. の. 細. 胞. 学. 的. 分. 類. 岡山大学医学部平木内科教室(主 任:平 木潔教授) 真. 田. 太. 浩. 田. 善. 小. 塚. 堯. 尾. 上. 修. 咲. 川. 嘉. 信. 西. 原. 達. 郎. 本. 家. 和. 紀. 〔昭 和39年11月26日. 血 液 細 胞 の鑑 別 がMay‑Giemsa染. 介. 色等の死後染色. 受 稿〕. 細 胞 構 成 成 分 に つ い て は,核 酸 お よ び 蛋 白質 で は,. に よつ て の み な され て い た 当時 は芽 球 の 分 類 は著 し. 白血 球 の種 類 に よ る有 意 差 は認 め られ て い な い.炭. く困難 で あ り,白 血 病 の 分 類 も 甚 だ 不 正 確 で あつ. 水 化 物 の 検 出 に は, PAS反. た.最 近血 球 検 査 術 式 の進 歩 に よ り特 に 動 態 観 察 が. 法 が あ るがPAS反. と りい れ られ る に及 ん で不 明 の 分 野 は著 し く縮 小 さ. 時 に は屡 々陽 性 を呈 す る. PAS反. 応 と,メ. タ ク ロマ ジ ー. 応 は 盛 に用 い られ,ま. た 白血 病. 応 は成 熟 好 中球 で. れ た.し か しな が ら,急 性 白血 病,特 に 大 部 分 が 芽. は陽 性 で あ るが,正 常 骨 髄 芽 球 で は大 部 分 陰 性,一. 球 で 占 め られ て い る もの につ い て は,今. 部 陽 性 で あ る.白 血 病 時 に は陽 性 の もの と陰 性 の も. 日な お盛 ん. に論 議 が行 わ れ て い る.現 今 で は 生体 観 察 即 ち位 相. の とが あ る.正 常 淋 巴球 で は殆 ん ど陰 性 で あ る が,. 差 顕 微鏡 観 察,墨. 急 性 淋 巴球 性 白血 病 の 芽 球 は陽 性 を示 す と い われ て. 粒 貪 喰 試 験,ヤ. ー ヌ ス緑 ・中 性 赤. に よ る生体 染 色 等 に よ つ て,骨 髄 芽 球,淋. 巴芽 球 等. の 鑑 別 が 略 確 実 に な し得 る よ うに な つ た.し か し ご. い る.ま た,正 常 赤 芽 球 はPAS反. 応 陰 性 で あ るが,. 赤 血 白血 病 の 赤芽 球 は何 れ も陽 性 を 示 す と され て い. く一 部 に は鑑 別 困 難 な 場 合 が あ り,電 顕 に よ る観 察. る9).顆 粒 白血 球 グ リコー ゲ ン は,類. の進 歩 と,細 胞 化 学 的検 査,螢 光 顕 微 鏡 的観 察 等 の. は 増 加 し,慢 性 骨 髄 性 白 血 病 で は低 下 す る こ とが 認. 活用 に よつ て,更. め られ て い る12).脂 質 の検 出 に は従 来Sudam. に正 確 な 分 類 が 可 能 に な りつ つ あ. 白血 病 反 応 で. Ⅲ, Ⅳ. る.私 達 の 教 室 に お い て は これ ら諸 検 査 術 式 ので き. が 用 い られ て い た が, Sudan black Bを. る だ け多 くの もの を用 い て血 球 鑑 別 を 試 み,綜 合 判. だ よ く染 る.好 中球 顆 粒 は 脂質 を 含 んで お り陽 性 を. 定 を 行 い,白 血 病 分 類 に 多 大 の 成 果 を 収 め て い る.. 呈 す る が幼 若 に な るに 従 い 減 弱 し,骨 髄 芽 球 で は陰. こ こで は特 に 最 近 注 目 され 今 後 の 進展 が 期 待 され る,. 性 の も の もみ られ る.. 細 胞 化学 的検 査,螢 光 顕 微 鏡 的 検 査,電 顕 像 につ い て簡 単 に述 べ る.. 好 中顆 粒(未 熟 顆 粒 を 含 む)に. 近 年 細 胞 化 学 的 検 査 法 の 進 歩 は著 しい も の が あ り,. は,脂 質,蛋. 白質,. 多 糖 類 及 び酵 素 が 局 在 して お り,細 胞 化 学 的 に は安 定Nadi. 細 胞 化 学 的 検 査. 用 い る と甚. 性,ア. oxidase, Peroxidase, ル カ リ性Phosphatase,. DOPA. oxidase,酸. Sudanblack. B,. Di. thizone染 色 が あ る.正 常 及 び 慢 性 骨 髄 性 白血 病 の. 漸 く組 織 か ら血 球 塗 抹 標 本 に つ い て 検 索 が な され る. 好 中球 系 細 胞 は殆 ん ど100%陽. 性 を 示 し,正 常 及 び. よ う にな つ た.血 球 に お け る化 学 成 分 の局 在 場 所 と,. 慢 性 淋 巴球 性 白血 病 の 淋 巴球 はす べ て陰 性 で あ る.. 代 謝 に 関 す るそ の 役 割 及 び 病 的細 胞 に お け る化 学 成. しか し 急 性 骨 髄 性 白 血 病 で は,こ れ らの 陽 性 率 が. 分 の 変 動 等 を 追 求 し,白 血 病 分 類 に あ た つて そ の相. ま ち ま ち で あ り,或 程 度 陽 性 率 が 低 下 す る.特. 違 点 を 検 討 し血 球 鑑 別 に 役 立 て よ うと い う試 み が な. Azur,安. され て お り,有 用 な 所 見 が 得 られ つ つ あ る.. れ る 場 合 で もSudan. 定Nadi. oxidase, Peroaidseで black B染. に. 低下が み ら. 色で は殆 ん ど低下.

(2) 690. 真. せ ずGiemsa所. 見 でAzurに. 田. 染 らな い も ので も,こ. れ らの 細 胞 化 学 的方 法 を 併用 す る こ と に よ り,好 中. 浩. 他6名. 即 ち,淋 巴球 で は 核,胞 体 と もに帯 黄 緑 色 を呈 し, 核 膜 は最 も厚 く明 瞭,核 小 体 は強 緑 色 で あ り,核 網. 顆 粒 特 有 の 陽性 所 見 が 得 られ 淋 巴球 系 細 胞 と の鑑 別. は他 の芽 球 よ り粗 で,胞 体 縁 は明 瞭,少 数 の赤 色 粗. が 可 能 に な る こ と が あ る17).. 大 な顆 粒 が胞 体 全 域 に 少 数 散 在 し,屡 々小 空 胞 状 を. 血 球 内 の 酵 素 に つ い て は, Aldolase, Cytochrom oxidase, Succinic dehydrogenase, Amylophosphorylase,. 呈 す る. 骨 髄 芽 球 で は 核膜 は 緑 色 不 明 瞭 で あ り,核 網 は線. 等 の 活 性 は何 れ も好 中球 系細 胞 に強 く,淋 巴球 系 細. 細 で 殆 ん ど螢 光 を 認 め ず,胞 体 の 緑 色 螢 光 は 最 も弱. 胞 に 低 い所 見 を 呈 す るが,淋. 巴芽 球 に つ い て は な お. く,微 細 針 状 の橙 色 顆 粒 が胞 体 内 に 散在 す る.. 充 分 明 らか で な い. Enolace活. 性 は 骨 髄 芽 球 で は正. 単芽 球 で は核 膜 は最 も うす い が,緑 色 螢 光 が 強 く,. 常 乃 至 高 値 を 示 し,淋 巴球 系 細 胞 で は低 下 が み られ,. 核 網 も非 常 に線 細 で 弱 緑 色 螢 光 を 認 め,核 小 体 の 螢. 急 性 白血 病 に お い て細 胞 鑑 別 上 或 程 度 価 値 が 認 め ら. 光 は 他 の芽 球 よ り強 く,胞 体 も強 い 緑色 を 呈 す る.. れ て い る13).. 細 胞 中心 域 は屡 々拡 大 して黒 くぬ け て見 え,そ の 周. ア ル カ リ性Phosphataseは. 類 白血病 反応 で 上昇. し16),慢 性 骨 髄 性 白血 病 で 低 下 す る18)が,朝 のNaphthol‑AS‑MX. phosphate5)を. 長19). 囲 に赤 橙 色 顆 粒 が 集 簇 し,著 明 に空 胞化 して花 冠 形 成 を 呈 す る.更. にMay‑Giemsa標. 本 で芽 球 と思わ. 用 い る方法 に. れ る細 胞 の 多 くは,螢 光 法 で は そ の細 胞 の所 属 を 特. よ れ ば 鋭 敏 度,再 現 性 と もに 極 め て 良 好 で 簡 単 に 行. 徴 づ け る顆 粒 が 少 数 み とめ られ 容 易 に鑑 別 可 能 で あ. う こと が で き る.し か し 芽 球 の 鑑 別 に は 用 い 得 な. る.. い.以 上 の 如 く正 常 細 胞 と 白血 病細 胞 の 間 並 び に 各. 位 相 差 顕 微 鏡 に よ る圧挫 標 本 の観 察 及 び 運 動 形 態. 血 球 系 統 に お け る酵 素 の差 異 に つ い て 種 々検 索 され. の所 見 及 び 生体 染色 所 見 は 各 芽 球 の 鑑 別 上 甚 だ 有 用. て い る が,い ま の と こ ろ酵 素 活 性 の量 的 な差 が 認 め. で あ るが,こ. られ るの み で,質 的 な 差 は証 明 され て い な い. Brachet test15).血球 の 核 はDNaseに. こで は 省 略 し,終 に 一 括 して 表 示 す る.. 電 顕 像. よつて消化. 血 球 の 電 顕 的観 察 の 重要 性 は 特殊 な 操 作 を 加 え た. され るが,血 球 の 種 類 に よ り消 化 の され 方 に差 が あ. 状 態 で な く,位 相 差 顕 微鏡 に よ る観 察 と同 様,細 胞. り,淋 巴球 は最 も強 く抵 抗 し,対 照 と 同様 に核 は よ. 構 成 要 素 が 生 体 内 に あ る場 合 と極 め て 近 似 した 状 態. く染 色 され るの に 対 し,好 中 球 系 細 胞 の核 は よ く消. で 検 査 で き る点 で 甚 だ す ぐれ て い る.電 顕 像 で は. 化 され て 後 染 色 に染 らな い.こ れ を 幼 若 血 球 の鑑 別. May‑Giemsa染. に 応 用 し,淋 巴芽 球 と,骨 髄芽 球 を 区 別 す る こ とが. の 属 す る系 列 の特 徴 が み られ細 胞 鑑 別 が 可 能 とな る.. で き る.し か し,単 球,好. 酸球,好. 塩 基 球,赤 芽 球. の核 は 殆 ん ど染 色 性 を失 わ な い の で,単 芽 球 と淋 巴 芽 球 の 区 別 は本 法 で は 困難 で あ る. (附).染. 即 ち骨 髄芽 球 で は未 熟 好 中顆 粒 の 存 在 に よ り細 胞 の 同定 を 行 い得 る.ま た顆 粒 の な い幼 若細 胞 に お い て も核,核 小 体,糸 粒 体,小 胞 体 等 の形 態 を 綜 合 検 討. 色 体 構 成 につ い て.慢 性 骨 髄 性 白血 病 に. お い てPhiladelphia染. 色 で 芽 球 と思 わ れ る細 胞 に も,細 胞. 色 体(第7群. の 染 色 体4箇. が 明 らか に 小 さ く,長 脚 の部 分 的欠 損 に よ る もの と 考 え ら れ る)が 異 常 に高 率 にみ られ る他 は,病 型 に よ る特 異 性 は な く,細 胞 鑑 別 に は 役 立 た な い11).. す る こ と に よ り,細 胞 種 を決 定 し う る こ とが 多 い. 淋 巴芽 球.細 胞 は 小 型,辺 縁 平 滑 で細 胞 質 は せ ま い.糸 粒 体 は 大 型 で 短 桿 状 乃至 類 円 形 で 明 る く膨 化 し易 く, Cristaeの 乱 れ が あ る もの が あ る.糸 粒 体 内顆 粒 は極 め て 少 数,細 胞 中心 域 又 は そ の 他 の 部 分 に散 在 す る.胞 体 に は 顆 粒 は稀 で あ る.高 電 子 密 度. 螢. 光 培 養. 法. の 脂 肪 顆 粒 を み る こ とが あ る.粗 面 小 胞 体 は 甚 だ 少. 組織 培 養 培 地 に 培 地 濃 度10,000倍. のAcridine. orangeを 添 加 して 培 養 す れ ば,各 血 球 系 統 に特 異 な. く,滑 面 小 胞体 は 少 数 あ る. Golgi体 の発 育 は 貧 弱. fibrillar formationは. み られ な い.核 は 類 円 形 で屡. 所 見 が 得 られ る.即 ち増 生 帯 構 成 細 胞 の 種 類 並 び に. 々大 な る切 れ 込 み を有 す る.核 質 は 暗 く,色 質 結 節. 成 熟 度 の種 々な 細 胞 の含 ま れ る割 合 に よ り,呈 す る. は な い.核 仁 糸 の 構 造 は比 較 的 明 瞭 で あ る.淋 巴 肉. 色 調 に 差 が み られ,且 つ,増 生 帯 のPatternを. 腫 で は通 常 の 淋 巴芽 球 に 比 し糸 粒 体 が比 較 的小 型 で. に み る こ とが で き るの で あ るが,更. も 同時. に個 々の 芽 球 に. つ い て も特 異 的 な螢 光 像 を 呈 す る ので, May‑Giemsa 所 見 で 不 明 の も の を も分 類 す る こ とが 可 能 で あ る.. 長 い もの が 多 い こ とが 特 徴 で,そ. の他の所見は淋巴. 芽 球 に 類 似 して い る4). 骨 髄 芽 球.細. 胞 は 中 型,辺 縁 は比 較 的 平 滑,時 に.

(3) 白 血 小 突 起 を み る.細 胞 質 は 中 等度.糸. 病. の. 細. 粒体 は 中等大. で 短 桿 状 乃 至 類 円形 を 呈 し時 に 細 長 い.最. 胞. 学. 的. 分. 類. 存 す る も の も あ る.胞 体 に は 小型,略. 691. 円形の未熟顆. も暗 く. 粒 が散 在 す る.粗 面 小 胞 体 は 少 数.滑 面 小 胞 体 は 比. Cristaeの 乱 れ は な い.糸 粒 体 内顆 粒 は1〜 数 箇 認 め. 較 的多 数 あ る. Golgi体 の 発 育 は 中 等度 で放 射 状排. られ る.糸 粒体 は 核 の 陥 凹 部 主 と して 中心 域 に 分 布. 列 を認 め る. Fibrillar formationあ. す る.胞 体 に は 未 熟 顆 粒 を 少 数 認 め る.粗 面 小 胞 体. で 切 れ こみ は 中等 度,核 質 は 明 る く色 質 結 節 は な い .. は少 数 で細 胞 全 域 に散 在 す る.滑 面 小 胞体 も少 数 存. 核 小 体 は大 き く,紐 状 構造 の 集 塊 と して み られ る.. 在 す る. Golgi体. の発 育 は 中 等 度 で あ る. Fibrillar. formation2), 6)あ り, Auer小. 休 を認 め る こと が あ る.. り.核 は類 円形. 赤 血 白血 病 の赤 芽 球 で は 胞 体,核 型 の不 整,巨 大 化,核 分 葉,成 熟 度 の 解 離(核 小 体 遺残,線 状 小 胞. 核 は 類 円形 乃 至 腎 形 で,中 等 度 電 子 密 度,辺 縁 に僅. 体, Golgi体 が成 熟 した 赤 芽 球 に もみ られ る)が み. かに色 質 結 節 あ り.核 仁 糸 は 明 瞭乃 至 不 明 瞭 で あ る.. られ,糸. 急性 骨髄 性 白血 病 の 骨 髄 芽 球 は慢 性 骨 髄 性 白血 病 の. 示 す3).. 骨髄 芽 球 と大 差 は な い が,核 くな りGolgi体. 粒体 は小 型 の もの が 多数 存 し,分 布 異 常 を. の陥 凹著 明 な もの が多. は小 さ くな る7). Peroxidase反. 応陰. 以 上 最 近 に お け る 白血 病 細 胞 の分 類 に 関 して 述 べ. 性 の骨 髄 芽 球 に お い て も上 述 と 同様 の所 見 を呈 す る. た が,従 来 の方 法 と と もに これ らの観 察 法 を加 え て. とい わ れ て い る8).. 綜 合 判 定 を行 うな らば殆 ん ど 確実 に細 胞 種 別 を決 定. 単芽 球.細 胞 は 大 型,不 整 形 で辺 縁 凹 凸,不 規 則 な 突 起 あ り,糸 粒 体 は 小 型 で 短 桿 状 乃 至 類 円形 を呈 し,暗 く, Cristaeの 乱 れ あ り,糸 粒 体 内顆 粒 を有 し,細 胞質 全 域 に 散 在 す る.一 部 中心 域 に集 合 して. 表1. 各 芽 球 のMay‑Giemsa染. す る こ とが 可 能 で あ り,臨 床 面 に お いて で き る だ け 広 く利 用 され る こ と を切 望 す る. な お 参 考 ま で に各 観 察 法 に よ る所 見 の概 要 を 表 示 し た.. 色所 見 上 の特 徴.

(4) 692. 真 表2. 田. 浩. 他6名. ブ リラ ン トク レシ ー ル青 超 生 体 染 色 所 見. 表3. 位 相 差 顕 微 鏡 所 見.

(5) 白 血. 病 表4. 表5. の. 細. 胞. 学. 的 分. 生 体 染 色 所 見. 細 胞 化 学 的 所 見. 類. 693.

(6) 694. 真. 田. 浩. 表6. 螢 光. 表7. 電. 所. 顕. 他6名 見. 像.

(7) 白. 血. 病. の. 細. 胞. 学. 文 1) Ackermann G. A. and N. C. Bellios:. A study. 10,. 3〜16,. 2) Akasaka. K.:. films with the. リ ジ ン オ レ ン ジ 使 用).日. 11). An electron. 915, 3). 芽 球 系 細 胞 の 微 細 構 造.日. 天 木 一 太,伊 分 類.日. 310〜326,丸. 藤 健 次 郎,堀. 内 篤:電. 本 血 液 学 会 雑 誌.. 5) Burstone M. S.:. 善,東. 26,. 本血液 京.. kemic. 20, 16). of a "fibrillar. human. blood.. The ul. formation". Blood,. 13,. 類.日 8). 原 文 雄:電. 本 血 液 学 会 雑 誌.. 伊 藤 亨:オ. 17). 26,. 9). 139〜141,. 橋 本 薫 明:赤. 10). 39〜42,. 科 宝 函.. I, H.. の赤血病お よび. 本 血 液 学 会 雑 誌.. 26,. 88〜. 1963.. 平 木 潔,小. 中 尾 喜 久,前. 光 顕 微 鏡 に よ る 分 類(ア. 1002〜1024,. Med.. 川 正:類. 1959.. Brachet-test Okayama.. (urine. 16,. 白 血 病 反 応.. 本 血 液 学 全 書. 善,東. 滝 川 清 治:白. 京.. of. 225〜. 5,白. A.臨. 床 病. 血 病 及 類 縁 疾 患,. 1962.. 血 病 の 細 胞 化 学 に よ る 分 類.日 26,. 10〜13,. 本. 1963.. Leukocyte drumsticks in. chronic granulocytic. leukemia and related di. sorders.. 581〜591,. Blood,. 18,. 朝 長 正 允,佐 Alkaline AS‑MX. 々 木 隆 子,奥. Phosphataseの phosphateを. Phosphatase証 塚 堯:蛍. 6,. Sanada:. 1961.. 本 血 液 学 会 雑 誌. 19). 白 血 病 の 経 験.そ. に その 治 療 に よ る影 響 に. 18) Tomonaga M. et al.:. 1963.. 1963.. 白 血 病 と の 境 界.日 92,. 顕 像 に よ る分. キ シ ダ ー ゼ 陰 性 の 白 血 病 性 骨 髓 芽 球.. 殊 に そ の 電 顕 像 に つ い て.日 26,. 液 及 び 骨髓細胞の正常所見 並び. 血 液 学 会 雑 誌. 坂 清 司,福. 本血液学. 1963.. cells. Acta. 1〜17,丸. 1958.. 伊 藤 亨,赤. 1958.. 1962.. 理.日. of leu. 725〜731,. of. hydrolysis test) as an aid to differentiation. 231,. trastructure. studies. 液 及 び骨 髓 細 胞 の位 相 差 顕 微 鏡 学. 1.血. つ い て.内. leukemic. 6) Freeman J. A. and M. S. Samueles:. 7). 13〜17,. 26,. 宮 崎 重 武:血. naphthol AS phosphates for the demonstration. 1958.. 17〜21,. 748〜756,. 会 雑 誌.. of phosphatases. 601〜616,. 13,. に 白 血 病 細 胞 所 見.特. Histochemical comparison of J. Nation. Cancer Inst.. Blood,. 血 病 細 胞 のEnolase.日. 15) Miyoshi. 1963.. 26,. Cytochemical. 三 輪 史 朗:白. 的 研 究.. 1963.. 顕像に よる. 35〜39,. 血 病 の種 類 と染 色 体 構. 本 血 液 学 会 雑 誌.. proliferation. 13). 14). 1,形 態.. 輪 卓 爾:白. glycogen content of lymphocytes in lymphocytic. 〜. 1958.. 学 全 書. 4). jap. 22, 899. 26,. 1963.. of acute myelo. bodies. Acta haemat.. 赤 坂 清 司:赤. 衣 笠 恵 士,三 成 に つ い て.日. microscopic study. genous leukemic cells: with particular reference. 本 血 液 学 会 雑 誌.. 1963.. 12) Mitus W. J. et al.:. 1955.. of blood cells. Ultrastructure to Auer. 695. 類. 22〜25,. phase contrast microscope. II. Blood and bone marrow from various hematologic dyscrasias. Blood.. 分. 献. of the morphology of the living cells of blood and bone marrow in supravital. 的. ク. 179〜192,. 研 究.. 1.. 血球. Naphthol. 基 質 と す る 白 血 球Alkaline. 明 法.日 1963.. 崎 美 江 子:白. 本 血 液 学 会 雑 誌.. 26,.

(8) 696. 真. Cytologial. 田. 浩. Classification. 他6名. of Leukemias. By Hiroshi Sanada Zensuke Ota Takashi Kotsuka Osamu Onoye Yoshinobu Sakikawa Tatsuro Saihara Kazunori Honke Department of Internal Medicine Okayama University (Director: Prof. Kiyoshi Hiraki). Medical School. In the attempts to classify leukemic cells it is often difficult to identify cells solely with fixed and stained blood smears as in acute leukemia where the percentage of blast cells is high. In such instances, however, it is generally possible to distinguish most cells when vital observations are carried out in conjunction with cytochemical methods, fluorescence micro scopy, as well as electronmicroscopy. The results of these observations have been briefly sum marized. The characteristic findings of lymphoblasts, myeloblasts, and monoblasts as revealed by May-Giemsa staining, brilliant cresyl blue supravital staining, phase-contrast microscopy, vital staining and electronmicroscopy. are illustrated in the tables..

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