岩医大歯誌 14：107−116，1989

岩医大歯誌 14：107−116，1989

¹⁰⁷

＆repZocooc粥pηeαmoη」αe同定に用いる オプトヒン感受性試験の評価

本田寿子 金子 克 斎藤勝明＊

村田政美承ホ佐藤政明＊＊＊

       岩手医科大学歯学部口腔微生物学講座        （主任：金子 克教授）

       北上済生会病院臨床検査科治        岩手県立久慈病院臨床検査科口        岩手県立胆沢病院臨床検査科京‥

      〔受付：1989年6月12日〕

 抄録：α溶血を示し，グラム陽性球菌で，オプトヒンディスク（5μg）に感受性を示した433株の分 離菌株を被検菌とし，オプトヒン感受性試験による8 reρεOCOCCμ8ρπθμmoπ αe同定法について検討

した。被検菌のうち胆汁で溶解した株については生物学的性状，血清学的検査から，Sρπeμmo励αe と同定し，オプトヒンに対する最小発育阻止濃度を測定した。

 その結果，胆汁で溶解したものは，433株のうち398株，非溶解のものは35株であった。この35株の内 訳はSsαπgμ sI2株， Sm砿απ81株，＆sαZiひαr μ82株，＆m垣s28株，＆απgjηosαs2株で あった。胆汁溶解のSρπθμmoπZαθ398株のうち67株（16．8％）がオプトヒンに耐性（≧5μg／m1）で，

そのMICは6．25〜＞200μg／mlに分布していた。

 また，オプトヒン耐性＆ρπeμ肌oπiαθはmucoid型colonyにはみられず， smoothあるいは rough型colonyに多く認めた。さらに， Sρπ四肌oη αθ398株はpenicillin， cephem系薬剤に対し て感受性を示したが，macrolide，1incomycin， tetracycline系薬剤には耐性株も多く，オプトヒン 感受性，耐性別に31薬剤に対する感受性を検討した結果，後者は前者に比して耐性の傾向を認めた。

 これらのことから，Sρπeμmo励αθをオプトヒン感受性試験のみで同定することは十分とはいえず，

Spηθμmo励αeに特異的な胆汁溶解性による同定を重視する必要性が示唆された。

 Key words：optochin sensitivity test， optochin．resistant 8Zreμococcαs pηθμ肌oηiαe， bile solubility， antimicrobial susceptibility．

緒 言

 Sεr￠ρεOCOCCμs pηeμmoη辺θは呼吸器感染症，

化膿性中耳炎などの起炎菌として臨床上，重要

な病原菌の一っであり，同定にさいしてはオプ トヒン感受性試験が広く用いられている。しか し近年，オプトヒン耐性＆ρπθαmoη元αθの存 在が報告されており，オプトヒン感受性の有無

Evaluation of optochin sensitivity test for the identification of Sεr昧）εocoocμsρπeμ肌oηZαθ．

 Hisako HoNDA， Masaru KANEKo， Katuaki SArFo＊Masami MuRATA念＊and Masaaki SATo ⑪．

 （Department of Microbiology， School of Dentistry， Iwate Medical University， Morioka

 O20， Department of Clinical Laboratory， Kitakami Saiseikai Hospital， Kitakami O24章，

 Department of Clinical Laboratory， Iwate Prefectural Hospital of Kuji， Kuji O32享 and

 Department of Clinical Laboratory， Iwate Prefectural Hospital of Isawa， Mizusawa  O23 ）

岩手県盛岡市中央通1丁目3−27（〒020）         1）θr ．」∫ω成eMe（LUπ加．14：107−116，1989

による同定が万全ではないという指摘12）があ るが，その実態はいまだ十分に把握されていな

い。

 著者らは近年，オプトヒン耐性S．ρπθ醐o励αθ の分離を経験したので，これらの菌株の生物学 的性状を検討することにより，オプトヒンによ る＆pηθ醐0πiαθ同定の評価を試み，加えて31 薬剤の感受性にっいても検討したので報告する。

材料と方法

1．被検菌

 1987年3月より1988年12月までに喀疾，咽頭 粘液など種々の臨床材料（Table 4）より分離 した433株を被検菌とした。これら分離株は羊 血球血液寒天培地上でα溶血を示したグラム陽 性球菌で，カタラーゼ陰性，オプトヒンディス

ク（5μg，栄研）に感受性を示した。

2．菌種の同定

 被検菌433株のうち胆汁による溶解3）を示し た株にっいては，イヌリン分解性4），および Phadebact pneumococcal test（Pharmacia）

による血清学的同定を試みた。また，胆汁で溶 解せず，Phadebact pneumococcal testで陰性 であった株にっいてはMinitek system（BBL）

により菌種の同定を行った。

3．オプトヒン感受性試験

 ＆ρπ飽mo励αθと同定された分離株のオプト ヒン（ethylhydrocupreine， Sigma）5μg／ml に対する感受性を寒天平板希釈法で行った。そ して，オプトヒン5μg／mlに対して耐性を示 した＆pπθμmo励αθにっいては，オプトヒン に対するminimum inhibitory concentration

（MIC）を測定した。測定は日本化学療法学会 標準法5）に基づき寒天平板希釈法で行った。す なわち，感受性測定用ブイヨン（ニッスイ）で 増菌した被検菌の106CUF／mlと108CUF／ml を接種菌として5％ヒト血球加感受性測定用寒 天培地（ニッスイ）にミクロプランター（佐久 間）で接種し，37℃，24時間培養後に判定した。

4．Colony形態の観察

 羊血球血液寒天培地で継代3代，37℃，24

岩医大歯誌 14：107−116，1989 時間，培養したcolonyを観察して（Table 5）

Bergey s manual of systematic bacterio−

10gy6）の記載に従ってmucoid型， smooth型，

central plaque elevated rim型およびrough型 に分けた。

5．薬剤感受性試験 1）被検菌

 オフ゜トヒン感受性S．ρη四moηiαθ331株とオ プトヒン耐性S．ρηθ仇oπiαθ67株の合計398株 を用いた。

2）使用薬剤

 Penicillin系薬剤：（PCG，明治製菓），

ampicillin（ABPC，明治製菓）， amoxicillin

（AMPC，ビーチャム）， piperacillin（PIPC，

富山化学）

 Cephem系薬剤：cephaloridine（CER，シ オノギ製薬），cefazolin（CEZ，藤沢薬品），

cefaclor（CCL，シオノギ製薬）， cefuroxime

（CXM，日本グラクソ）， cefotiam（CTM，武 田製薬），cefotaxime（CTX，ヘキスト），

ceftizoxime（CZX，藤沢薬品）， cefmenoxime

（CMX，武田薬品）， cefoperazone（CPZ，台糖 ファイザー），cefixime（CFIX，藤沢薬品），

ceftriaxone（CTRX，ロッシュ）， cefteram pivoxil（CFTM−PI，富山化学）

 Macrolide系薬剤：erythromycin（EM，大 日本製薬），midecamycin（MDM，明治製菓）

 Lincomycin系薬剤：lincomycin（LCM，アッ プジョン），clindamycin（CLDM，アップジョ

ン）

 Tetracycline系薬剤：tetracycline（TC，明 治製菓），minocycline（MINO，｜ヨ本レダリー）

doxycycline（DOXY，台糖ファイザー）

 Pyridone carboxylic acid系薬剤：norfloxa−

cin（NFLX，杏林製薬）， ofloxacin（OFLX，

第一製薬），ciprofloxacin（CPFX，バイエル），

T−3264（富山化学），NY−198（北陸製薬）

 その他：imipenem／cilastatin sodium（IPM

／CS，万有製薬）， chloramphenicol（CP，三 共）の合計31薬剤を使用した。

3）測定法

岩医大歯誌 14：107−116，1989   日本化学療法学会標準法5）に従い，

希釈法で行った。

結 果

寒天平板

1．被検菌の胆汁溶解性

羊血球血液寒天培地上でα溶血を示し，カタ ラーゼ陰性，グラム陽性球菌で，オプトヒンディ スクに感受性を示した433株の胆汁溶解性を調

109

べたところ（Table 1）398株（91．9％）が溶解 し，35株（8．1％）は非溶解であった。

 胆汁溶解を示した398株は血清学的にもすべ てS．ρπθμmoηiαθであった。これに対して，胆 汁非溶解の35株は，Phadebact pneumococcal testでも陰性であり， Minitek systemにより 同定を試みたところ8．sαηg廊12株， S．

m成απ81株，S．8αZiuαr μs 2株S．π1iεjs 28株，

Table 1 Result of screening of bile solubility test in 433 isolates of optochin−sensitive gram−

posltlve cocc1．

Bile

solubility

Bacterial species

Number of isolates Soluble

Non−soluble

8ZreμOCOCCμ8

ρπεμ7η0η膓αθ

8．8απ9μisI

8．7ημ古α7↓8 8．Sαliuαriμ8

8．m zis 8．απ9吻sμ8

 398

（91．9％）

りムー9臼82

   2

Total ³⁵

（8．1％）

Table 2 Biochemical characteristics of 398 isolates of 8εr￠ρεococcμ8 pηeμmoπiαe．

Optochin−sensitivity

Bile solubility

Inulin fermentation Number of isolates Sensitive

Resistant

十1）

十

十

の

十

331 （83．2％）

67 （16．8％）

DSoluble 2）Fermentation positive

Table 3

Minimum inhibitory concentrations of 67

ρπθμητoπ αeto optochin．

optochin−resistant 8Zrεぴ）Zococcμs

lnoculum size MIC（μ9／ml）

106CFU／m1 108CFU／ml

  6．25   12．5    25    50   100   200

＞200

108QV9臼59臼

 1111 068840000

  111

Optochin−resistant（MIC≧5μg／mD

 110

S．αη9 ηosμs 2株であった。

2．S．ρηθωπτoπiαθのオプトヒン感受性

 胆汁溶解，イヌリン分解陽性，カタラーゼ陰 性で血清学的にもS．迦θ励oηiαeと同定した 398株のうちオプトヒン5μg／mlに感受性を 示したものは331株（83，2％）であり，耐性を示

したものは67株、（16．8％）であづた（Table 2）b  なおオプトヒン耐性S．ρπ四mo励θ67株の オプトヒンに対するMIC分布（Table 3）は接 種菌量が106CFU／ml，あるいは108CFU／ml

Table 4

のいずれの場合でも6．25〜＞200μg／mlにあ り，MIC 50μg／ml以上の菌株が接種菌量106 CFU／m1では38株（56．7％），接種菌量108 CFU／mlでは43株（64．2％）あった。

3．臨床材料別8．ρηθμmO励αe 1の分離数とオ プトヒン感受性および耐性s．ρπθ硫oん辺θの 分布

 S．Me蹴oπεα⑫398株（Table 4）のうち喀疾 と咽頭粘液から分離されたものが348株（87．4％）

と大部分を占めた。オプトヒン耐性8．

Distribution of optochin−sensitive and optochin−resistant strains in 3988εreρZococω8 ρηεμη10ηiαeisolated from various specimens．

Specimens Optochin−sensitive          （％）

Optochin−resistant豪       （％）

Total

Sputum

Pharyngeal mucus Pus

Otorrhea Rhinorrhea

Dacryoblenn otorrhea Vaginal secreta Urine

Maxillary sinus liquor Gingiva

90 （ 79．6）

197 （ 83．8）

 3（100．0）

26 （100．0）

 4（100．0）

 2（66．7）

 2（100．0）

6（66．7）

 1（50．0）

 0

23 （ 20．4）

38 （ 16．2）

0 0 0 1（33．3）

0 3（33．3）

1（50．0）

1 （100．0）

113 235  3 26  4  3  2  9  2

 1

※

MIC≧5μ9／ml

Table 5 Colony type and optochin sensitivity of 398 isolates of Sぴ印Zococcμsρηeμητoπ αθ．

Colony type Optochin−sensitive          （％）

Optochin−resistant※

      （％）

Total

Mucoid 102 （100．0）

0 102

Smooth △^○

103 （ 65．7） 33 （34．3）

136

Central Plaque

elevated rim

】^◎

112 （ 87．5） 16 （12．5） 128

Rough

^{14 （ 43．7） 18 （56．3）} 32

※MIC≧5μ9／ml

岩医大歯誌 14：107−116，1989

ρηθμmo励αθは膿汁，耳漏，鼻汁，膣分泌物か ら分離したS．ρπ飽moηεαθにはみられなかっ た。しかし喀疾から分離した＆ρ厄醐oηれθ 113株のうち23株（20．4％），咽頭粘液からのS、

ρπθμmoηiαe 236株のうち38株（18．2％），涙嚢 液からの3株のうち1株（33．3％）にみられ，

さらに例数は少ないが上顎洞穿刺液からの1株

（50％）と歯肉からの1株（100％）にもみられ

た。

4．S．ρη四π20ηiαθのcolony形態とオフ゜トヒ

111

ン感受性

 Table 5に示すように， S．ρη斑〃Ioπ彪θ398

株のうちmucoid型のcolonyは102株で，これ らすべてがオプトヒン感受性（≦5μg／m1）

であり，smooth型のcolonyは136株のうち，

103株（65．7％）がオプトヒン感受性であった が，33株（34．3％）がオプトヒン耐性であっ た。また，中央がくぼんだ形のcentral plaque elevated rim型のcolony 128株のうち112株

（87．5％）がオプトヒン感受性で，16株（12．5

Table 6 Susceptibility of 398 isolates of Sεrεμococcμ8μeμmoηiαθto 31 antimicrobial agents．

Agents MIC※range

^MIC5。

^MICg。

PCG ABPC AMPC

PIPC

0．0063−3、13 0．0063−6．25 0．0063−6．25 0．0125−6．25

0．025 0．025 0．0125 0．025

0．1 0．1 0．05 0．1

CER CEZ

CCL

CXM CTM CTX CZX CMX

CPZ

CFIX

CTRX

CFTM−PI

FMOX

0．0063−6．25

0．025 −12．5 0．05  −3．13

0．0063−3．13 0．0063−3、13 0．0063−3．13

0．0063   12．5

0．0063−1．56 0．0125−12．5 0．0125−12．5 0．0125−12．5 0．0063−3．13

0．05  −12．5

0．025 0．2 0．2 0．025 0．05 0．0125 0．025 0．0125 0．05 0．1 0．025 0．0125 0．1

0．05 0．78 0．39 0．1 0．1 0．05 0．05 0．025 0．2 0．39 0．05 0．05 0．2

IPM／CS

0．025 −1．56 ^{0．1 0．39}

EM

MDM

0．0125   100 ^{0．0125−100}

1100 2100

LCM CLDM

^{0．025 −200}

^{0．0063−200 0．39 0．025}

8エ0

7000

TC

MINO

DOXY

0．1   200

0．05 −50 0．025  −50

1．56 0．2 3．13

50

12．5 12．5

CP

0．2  −25

3．13 12．5

NFLX OFLX CPFX

T−3264

NY−198

0．78 0．2 0．2 0．1 1．56

一50

−25

−

^12．5

−

^3．13

−50

12．5 1．56 0．78 0．2 6．25

25

3．13 0．78 0．2 12．5

※MIC（μ9／ml）

112       岩医大歯誌 14：107−116，1989 Table 7 Comparison of antimicrobial susceptibility between the optochin−sensitive 331       8かeρZococcμs pηα〃γ↓oπZαθand optochin−reristant 67 SZr匂Pωcoccμs peμmoπiαe（1）．

Agents MIC※range

^MIC5。

MIC田

PCG

SR 0．0063−3．13

0．39  −3．13

0．025 0．78

0．025 3．13

ABPC

SR 0．0063−6．25

0．05  −6．25

0．025 0．2

55

09● 0己U

AMPC

SR 0．0063−3．13

0．05  −6．25

0．025 0．1

0．025 1．56

PIPC

SR 0．0125−3．13

0．05  −6．25

0．025 0．39

にU

OO

O1

0nδ

CER

SR 0．0063−6．25

0．025 −6．25

0．025 0．39

亡0

0り0300

CEZ SR

0．025 −12．5

0．1   −12．5

 9

9ム3

00

9百◎

n

O

1

0弓O

CCL SR

0．05  −1．56

0．2   −3．13

 8

9α7

00 ^∩₀

3

3103

CXM

SR 0．0063−3．13

0．0063−3．13

0．025 0．2

亡

U

3

01000

CTM

SR 0．0063−6．25

0．025 −6．25

02005 1300  9

CTX

SR 0．0063−0．78

0．025 −3．13

0．0125 0．05

0．025 0．1

CZX

SR 0．0063−12．5

0．0125−12．5

0．025 0．1

0亡

8

0700

CMX

SR 0．0063−1．56

0．0125−1．56

0．0125 0．025

0．025 0．39

CPZ SR 0．0125−12．5

0．025 −12．5

0．0125 0．39

0．025 1．56

CFIX SR 0．0125−3．13

0．2  −12．5

5000700  5

29白

06

CTRX

SR 0．0125−3．13

0．05  −12．5

0．025 0．78

0．025 6．25

CFTM−PI

SR 0．0063−3．13 0．0125−3．13

0．0125 0．05

0．025 0．78

FMOX

SR

0．025   12．5

0．2  −12．5

 81700  5

2り白

06

濠

MIC（μ9／ml）

SIOptochin−sensitive

R：Optochin−resistant

岩医大歯誌 14：107−116，1989

％）はオプトヒン耐性であった。なお，rough 型のcolonyは32株のうち18株（563％）がオ プトヒン耐性であり，オプトヒン耐性株の検出 される割合が高い傾向にあった。

5．S． p酩μmo励￠の31薬剤に対する感受性  8．ρηeμノπoπiαθ398株の31薬剤に対する感

Table 8

113

受性（Table 6）をみるとpenicillin系薬剤と cephem系薬剤（penicillin系薬剤では≦0．05

μg／m1， cephem系薬剤では≦0．25μg／ml を感受性）に対するMIC分布は0．0063〜12．5 μg／mlと高い感受性を示したが， macrolid島 lincomycin系薬剤（≦0．1μg／mlを感受性，

Comparison of antimicrobial susceptibility between the optochin−sensitive 331 8ぴeρZococcμsρηeμmoηiαεand optochin−resistant 678Zrθρ孟ococcμ8ρηεα7ηoη αe〔2）．

Agents MIC※range

^MIC5。

^MIC9。

IPM／CS S

      R

0．025 −1．56 0．05  −1．56

 81700  6

9錫5

01

EM

SR

_{0．Ol25−100}

0．05  −100

 311000 10

°

0

01

MDM SR

_{0．0125−100}

0．05  −100

 81700 10

0

01

LCM

SR _{0．025 −200}

0．05  −200

O∨8

り

0 7

00

_四

〇〇

〇−

CLDM

SR

_{0．0063−200}

0．025  −200

0．025 0．05

0．025

100

TC

SR _{0．1  −200}

0．2  −200

56

°015  000「0

9台

MINO SR

_{0．05 −50}

α2  −50

2

°

［0

09倫 ₅ り白0 1にU

DOXY

SR

_{0．025  −50}

0．2  −50

3

1

°＝0

0

09白

1ど0 り40

5

CP

SR _{0．2  −50}

0．39 −50

3﹇0 1 

・

°り431 5

2＝0

12

NFLX

SR

_{0．78 −50}

3．13 −50

だ0

［0

2 ・

り白61

5 ^9ム﹁0

12

OFLX

SR _{0．2  −25}

0．78 −25

63

亡0

1

13 CU3

r

O

1

100

CPFX

SR

0．2   −12．5

0．2   −12．5

887700

只︶6

7501

T−3264 SR

_{0．1  −3．13}

0．1   −3．13

29自

00  9

9ム00

00

NY−198

SR

_{1．56 −50}

6．25 −50

U亡

5

り白 ．

°

2

61 ⊂

0

U

＝

リム94

11

峯

MIC（μ9／m1）

S ：Optochin−resistant

R：Optochin−sensitive

32−64μg／m1を耐性）やtetracycline系薬剤

（≦0．5μg／m1を感受性，32−64μg／m1を

耐性）に対するMICは0．0063μg／mlから

100〜200μg／mlと巾広く分布した。特に，

tetracycline系薬剤（TC， MINO， DOXY）に対 してはMIC，。が12．5〜200μg／mlと耐性株も多 かった。また，pyridone carboxylic acid系薬 剤に対するMIC分布は0．1〜50μg／mlでMIC、。

は0．2−12．5μg／ml， MICg。は0．2−25μg／m1と 低かった。

6．S．ρπ閲moπ垣θのオプトヒン感受性株およ び耐性株の薬剤感受性の比較

 オプトヒン感受性S．pπθ耽oπ辺θ331株とオ プトヒン耐性＆pηθ励o砿》θ67株の31薬剤に 対する感受性にっいて分析した（Table 7）。

Penicillin系薬剤に対するオプトヒン感受性S．

ρπθμπLoηiαeのMICは0．0063〜3．13μg／mlで，

オプトヒン耐性＆pπθ励oπiαθでは0．05〜6．25 μg／mlであった。さらにMIC、、ではオプトヒ ン感受性8．ρηeμmoηiαθで0．025μg／ml，オ プトヒン耐性＆ρ酩αmoπ αθでは0．1〜0．78μg

／ml，そしてMIC，。ではオプトヒン感受性S．

ρπθμπLo励αθは0．025〜0．05μg／ml，オプトヒ

ン耐性Sρηεμη20η》αεは1．56〜6．25μg／m］で

あり，オプトヒン感受性＆ρπθ醐0ηiαθより もオプトヒン耐性s．ρπ四moπiαθのほうが penicillin系薬剤に対し耐性側に分布してい た。このような傾向は他の薬剤でも見られ，

macrolide系薬剤（EM， MDM）においても，

MIC、。はオプトヒン感受性S． pπ四moηiαθで0．1 μ9／ml，オプトヒン耐性S．ρη四moηiαθで 100μg／mlと著しい差がみられるものと，

pyridone carboxylic acid系薬剤（NFLX，

OFLX， CPFX， T−3264， NY−198）における

MICg。はオプトヒン感受性S． pηθ肪ωη1αθで0．78−

12．5μ9／ml，オプトヒン耐性＆Pηθ耽oηiαθ では0、32−25μg／mlというようにその差が小 さいものもあったが，いずれの薬剤に対する感 受性もオプトヒン感受性＆ρ酩励oπiαθより

もオプトヒン耐性＆ρπθ醐oπ αθのほうが薬 剤耐性の傾向を示した。

岩医大歯誌 14：107−］16，1989

考 察

 著者らは羊血球血液寒天培地上でα溶血を 示し，グラム陽性球菌でカタラーゼ陰性そし てオプトヒンディスクに感受性があり，＆

ρη四moηiαθと同定された433株の生物学的性 状，血清学的検査から再検討した。その結果，

398株（91．9％）は＆pηθωπLOπ」αeと同定され たが，35株（8．1％）はS．pηθμπ↓oηiαθ以外の

α一streptococciであった。角田ら7）はオプトヒ ンディスク感受性試験によりS．pη四moηiαθ と同定した27株のうちPhadebact pneumococcal testによる血清学的検査，胆汁溶解性などの結 果S．ρηθμπLoηゐθ以外のα一streptococciが10 株（37％）存在していたことを報告している。

 著者らの本研究ではS．ρπ四moπゐθ398株の うち67株（16．8％）がオプトヒン耐性（≧5μg

／ml）株であり，＆pηe耽oη鋤でありなが らオプトヒン耐性であるため見落とされる可能 性のあることが示された。Phadebact pneumo−

coccal testでは，＆ρπθαπzoπ辺■がC群strep−

tococciと類属反応を示す場合がある（o．3％）

といわれているので，著者らは溶血レンサ球菌 群別用血清（Phadebactおよびデンカ生研）を 用いて血清反応を試み，C群とは反応せず，

Minitek systemにより＆ρπθμπLoηiαθである ことをも確認した。

 伴ら9）はPhadebact pneumococcal testによ る血清反応でS．pηθ励oπ αθと確認した59株 のうち27株（45％）がオプトヒン耐性株であっ たと報告している。著者らの成績とはその数値 において大きく異なるが，他に報告がないので 評価はできない。しかしこのような事実はオプ トヒン感受性のみによる＆ρηθ肌oη放θ同定 の危険性を示している。一方，Kontiainenら1°）

は血液と耳漏から分離したオプトヒン耐性S．

ρπ四moη泌θについて報告している。彼らの分

離したオプトヒン耐性S．ρηθμmoηiαθはオプ

トヒン感受性s．ρηθ醐oηiαθの阻止帯のな

かに発育したもので，optochin−resistant

variantとしており，生物学的および血清学的

岩医大歯誌 14：107−116，1989

性状などで著者らの分離したオプトヒン耐性S．

pπ四mo施θと異なる点があるのかもしれない。

＆ρηθωmoπゐθのcolony形態は英膜多糖体の 量的差異に左右されるといわれている6）。著者 らの観察ではmucoid型colonyにはオフ゜トヒ ン耐性＆ρπθ蹴o泌θはみられず，smoothあ るいはrough型colonyにオプトヒン耐性S．

ρπθμmoπiαθが多くみられた。なお，英膜多糖 体のもっ食菌抵抗性との関連があるかどうかは 不明である。

 一方，＆pηε硫o励θの薬剤感受性をみると，

penicillin， cephem系薬剤には感受性を示し，

macrolide， lincomycin， tetracycline系薬剤な どには耐性菌が多く見られた。こうした成績は 小栗1D，宍戸ら12）， Latorreら13）の報告と一致し ていたが，s．ρη側moπεαeの感受性をオプトヒ

ン感受性，耐性別に分析したところ，オプトヒ ン耐性S．ρη飽moπiαθはオプトヒン感受性＆

pπθ醐oηiαeに比較して31薬剤の全てに耐性の 傾向を示した。colony形態や薬剤感受性にお いて異なる性状を示したが，さらにさまざまな 角度からの解析を進めることによりオプトヒン 耐性＆ρ酩μmo励αθの性状は明らかにされる のではないかと考えられる。

 本研究において著者らは＆ρπ飽moπ辺e臨 床分離株の中にオプトヒン耐性＆ρπ四moη垣θ の存在が確認されたことから，＆ρπωmo励θ の同定をオプトヒンディスク（5μg）感受性 により行うことは一考を要するものと考え，

SZr￠ρεococω8属菌のうち胆汁溶解性の菌種は s．ρη劔moηiαθのみであることからその性状を 重要視すべきではないかと考える。

結 論

115

 ＆pπθωmo励αθ同定の一っの方法として用い られているオプトヒン感受性試験の評価を試み，

次のような結果を得た。

1．オプトヒンディスクで感受性を示し，S．

ρη四moη」αθと考えられたα溶血 カタラーゼ 陰性，グラム陽性球菌433株のなかに胆汁溶解 性，Phadebact pneumococcal testなどで再確 認すると，S． pπe醐oπ》αeが398株，他のα一 streptococciが35株（8．1％）あった。

2．＆ρηθμπ乙oηiαε398株のうちオフ゜トヒン耐

性S．ρη四moπ辺θが67株（16．8％）含まれ，オ プトヒン感受性試験（5μg／ml）のみの方法 で同定した場合S．ρπθμ励η：αθが見落とされ る危険性があることが示唆された。

3．オプトヒン耐性＆ρηθαmoπiαeはmucoid 型colonyにはみられず， smoothあるいは rough型colonyに多くみられた。

4．S．ρη側moπiαθ398株はpenicilin， cephem 系薬剤に感受性を示し，macrolidら1incomych tetracycline系薬剤ではMIC分布が広く，耐 性株も多かった。また，オプトヒン感受性，耐 性別にみた場合，オプトヒン耐性S．pπ毘m励αe

は31薬剤に対して耐性の傾向を示した。

 以上のことから＆ρηθμmoηiαθの同定をオ プトヒンディスクのみで行うことは不十分であ り，＆ρηθμmoπ辺θに特異的な胆汁溶解性によ る同定を重要視する必要性のあることが示唆さ

れた。

 論文の要旨は第63回日本感染症学会総会（盛 岡，平成元年4月19日）で発表した。

 Abstact：We evaluated optochin sensitivity test as a method for identification of

S舵μococcμ8ρηθμηLoπ↓αe． Four hundred thirty−three strains isolated from various clinical

specimens wereα一hemolytic， gram−positive streptococci and were sensitive to optochin disk The screening of optochin（5μg／ml）was performed on bile soluble strains which were identified as Sρπεμ肌oηiα￠． Then， minimum inhibitory concentration （MIC）to

optochin determind for optochin．resistant＆ρπθ研Loπ αe． The susceptibility test on isolated

SρηeμηLoπiαe was performed 31 antimicrobial agents． Out of 4330ptochin disk（5μg）

sensitive strains，398 strains werθbile soluble and 35 strains were nonsoluble． These 35

strains were identified as 20f＆8απg碗s I，10f＆mμZαπ8，20f S sαZ加αriμs，280f＆m垣8

岩医大歯誌 14：107−116，1989

and 20f S．のg加osμs by the Minitek system． While bile soluble 398 strains consisted of 311 0ptochin−sensitive strains and 670ptochin−resistant strains． MIC of optochin for the 67

strains ranged from 6．25 to 2000verμg／ml， and was MIC≧50μg／ml for 380f these 67 strains． In identification of S． pηeμ）れoη」αe， bile solubility test shoud be used with optochin

test． In the colonies of optochin−resistant＆ρηθμmoπiαε， smooth and rough type colonies

occupied the major portion but mucoid type colony was rare． All strains were highly

susceptible to penicillins and cephems， but MIC of macrolides， lincomycins and tetracy−

clines ranged widely（0．0063−200μg／ml）and a large number of strains were resistant to these antimicrobial agents． In addtion， optochin−resistant S．ρπe顕τoπ」αθshowed higher MIC than optochin−sensitive＆ρπeαητoπ：αe in susceptibility test of＆ρπeα㎜oπ αe to 31

antimicrobial agents．

文

献

1）西川きよ：菌側因子をめぐる最近の動向一

 ＆r印Zococcμsρηeμmoη」αe，臨床と細菌，11：

 5−9， 1984．

2）小栗豊子：肺炎球菌，臨床検査Mook，25：金

 原出版，東京，76−84ページ，1987．

3）Hawn， C． and Beebe， E、：Rapid method

 for demonstrating bile solubility of 1珈lo−

 coccμs pηeαmoηiαθautolysis． ・入 BαcZerioZ．

 90 ：549−552， 1965．

4）Rotta， J． and Facklam， R．R．：Manual of

 ．microbiological diagnostic methods for

 streptococcal infections and their sequelae．

 WHO／Bac／80．1，1038，1980．

5）五島嵯智子，徐慶一郎，河喜多竜，小酒井望，

 三橋 進，西野武志，大沢伸孝，多波 洋：最小  発育阻止濃度（MIC）測定法にっいて， cんθmo一

 ε九er（塑ッ， 29 ：76−79， 1981．

6） Bulter， J．P． and Sneath， P． ：Bergey s

 manual of systematic bacteriology， The  williams and wilkins Co．，baltimore． pp．

 1052〜1054， 1986．

7）角田美鈴，大門良男，松田正毅，桜川信夫，山  岸高由，小西健一：オプトヒン感受性，生化学性

 状および凝集反応による肺炎球菌の同定について，

 十全医会誌，92：757，1983．

8）Internal studies． Data on file， Pharmacia．

9）伴 景子，小野一徳，高橋久美子，横沢光博：

 呼吸器材料から分離される肺炎球菌鑑別のための  オプトヒン感受性試験の評価，衛生検査，33：546，

 1984．

10）Kontiainen， S． and Sivonen， A．：Optochin

 resisiance  in  SεreρZococcμ8  ρηeμητoπ乞αθ  strains isolated from blood and middie ear  fluid． Eμr．」． C膓iπ． MlcrobZo↓． 6 ：422−424，

 1987．

11）小栗豊子：肺炎球菌の臨床細菌学的研究，

 床材料からの検出状況，菌型分布，

 推移，特にβ一ラクタム剤耐性にっいて一，

 」∠1ηεεbjo琵c．39：783−805， 1986．

12）宍戸春美，永武 毅，松本慶蔵：

 と耐性菌の現状，臨床と薬物治療，

 1987．

一

^臨

薬剤感受性の

」αρ．

抗菌剤の使用

 6 ：983−991，

13）Latorre， C．，Juncosa， T． and Sanfeliu，1．：

 Antibiotic resistance and serotyre of 100

 ＆r4）孟ococcμ8 Pηeμmoπ αε strains isolated  in a children s hospital in Barcelona， Spain．

 Aπ￡iητicrob．∠1ge7Lε8 C1▲emoZ九er．28 ：357−359，

 1985、