低 級 脂 肪 酸 量 森 井 秀 昭

海 洋 性 イル カ 胃内容 液 中の微 生 物 数,pH, ア ミノ酸 量,ア ンモ ニ ア 量 お よび

低 級 脂 肪 酸 量 森 井 秀 昭

The Viable Counts of Microorganisms, pH Values, Amino Acid Contents, Ammonia Contents and Volatile Fatty Acid Contents in the Stomach Fluid of

Marine Little Toothed Whales

Hideaki MORII

In order to ascertain whether or not short-chain branched fatty acids in oil of marine little toothed whales are truly produced by deamination of amino acids by the microorganisms in the stomach of the animals, the author studied the viable counts of microorganisms, pH values, amino acid contents, ammonia contents and volatile fatty acid contents in the stomach fluid and the body temperature of the whales, Stenella attenuata and Stenella caeruleo-alba that were caught alive. The results obtained are as follows.

1) The body temperature was mostly about 35°C, but in some cases it was slightly elevated to 37.5°C.

2) The pH values of the stomach fluid varied from 1.90 to 8.10 in the process of digestion.

3) The bacteria of 103-104/m1 were isolated from the stomach fluid only in the pH area where growth was possible, but isolation was often unavilable even in the pH area where growth was posible.

4) The amino acids, ammonia and volatile fatty acids were found in the stomach fluid of all the animals, but relenancy between those substances and bacteria were not recognized.

前 報(1)で は,イ ル カ胃 内容 液 中 にiso吉 草 酸 な ど の低 級 分枝 鎖 脂 肪 酸(低 級 分枝 酸 と略 記)が 遊 離 の状 態 で存 在 し,ま た これ ら分 枝酸 は微 生 物 に よ るア ミノ 酸 の脱 ア ミノ作 用 で 生 成 され た と考 え られ る こ と(2

〜6)を 述 べ た。す な わ ち,イ ル カ油 脂 中 の低 級 分枝 酸 は これ ら胃 内で 生 成 す る分 枝酸 に 由来 す る と考 え られ るが,実 験 に供 した イ ルカ は死 後 か な りの時 間 を経 過 してい た の で低 級 脂肪 酸(低 級 酸 と略 記)の 量 的 関係 に つ いて は検 討 で きな か った。

本 研 究 は生 体 イル カ を用 い,胃 内容 液 中 の遊 離低 級 酸 量 を し らべ たが,こ れ らの成 因が 胃 内微 生 物 に よる ア ミノ酸 の脱 ア ミノ作 用 に基 い た もの で あ るか 否 か を 明 らか にす る た めに は,胃 内 に微 生 物 が存 在 す る こ と は もち ろん,反 す う動 物 で 見 られ る よ うに(7〜9)こ

れ らの低 級 酸 量 とア ミノ酸量 お よび ア ンモニ ア量 との 間 にお け る相 関性 が検 討 され な けれ ば な らな い。 これ らの 理 由か ら胃 内容 液 中 の 生菌 数,pH,ア ミノ酸 量, ア ンモ ニ ア量 の ほ か イル カ の体 温 を し らべ,生 体 イル カ 胃内 に お け る低級 分 枝 酸 の生 成 の 有無 や イル カ油 脂 中の 低級 分 枝 酸 との関 連 性 を検 討 した。

材 料 と 方 法

イル カ試 料1973年10,11月 に静 岡 県伊 東市 の川 奈

湾 へ 追 込 み 後 生 け捕 り した ア ラ リ イ ル カS伽 θ砺

α漉 鰍 α如 とス ジ イ ル カS伽6砺 αzs勉160一 α1∂ αの 乳 児

と成 体計24頭 を用 い た。 これ らの雌 雄別,体 長,第1

胃 内容 物 な ど をTable1に 示 した。

56

森井：海洋性イルカ胃内容液中の微生物数，pH，アミノ酸量，アンモニア量および低級脂肪酸量

Table 1． Samples of marine little toothed whales used for experiment．

Sample

 Na

^Species

   Body age length

    （cm）

Ist stomach contents

    Sampling

Body

temp．

    date

（oC）

123456789101112131415161718192021222324

Stenella attenuala     11     11     11     ノノ     17     11     ノノ     11     ノノ     11

Stenella caeruleo−alha     71

    2j     ノノ

    11     11

    ノノ

    v     11     17     21     12     n

104︻﹂

−⊥9々9白9右

111よ一

じ0だ0﹂恐り0

00480﹂ −よ111← 889自0 0﹂01∩◎ −⊥9白り41 879自7 0﹂019θ −り4り乙99 009自︻﹂ 4ρOQσ3

り白9臼り心9白

80ρ0ρ0 00444 9Ω29白94

9

温

血

N W

〃〃〃  耽 ノU

ノ﹂q

 A 〃〃〃〃〃〃〃〃〃〃〃〃〃〃〃〃〃

Milk−like juice    12    11 Gastric juice （B ）

   11 （11）

Milk−like juice Gastric juice（light B）

   11 （ 17 ） Squid beaks

＄quid beaks and gastric juice （B）

Squid beaks Gastric juice （Y−B）

Digestive squids and shrimps（R ） Gastric juice （Y）

Digestive squids and shrimps（R）

Digestive squids（dark B）

Digestive squids and shrimps（R）

   ノノ

Gastric juice （Y−B）

   n （dark B）

   72 （ 11 ）    v （light B）

   n （light Y ）    n （light B）

（i7）

    Oct． 73      21      12      17      11      ノノ      11      11      71      11      11      11      11

     v

     ／1      21      ノノ

37．5 v

35．5 Nov773

35．2 n 35．3 21 35．5 n 34．8 n 36．2 v

Sample 1−v ll， 12N18，and 19一一24 were caught alive from each pack in Kawana Bay at ltou of lzu

Peninsula． ＊ B：Brown， Y：Yellow， R：Red

 なお試料1〜11および19〜24は湾内追込み1昼夜後 に，試料12〜18は追込み直後に，それぞれ異なったイ ルカ群がら捕獲したものである。

 体温の測定 捕獲直後のイルカの頸動脈内に温度計

を差し込んで測定した。

 生菌数の測定 捕獲直後のイルカの第1胃（1胃）

および第III胃（III胃）内容液中の微生物数をZoBe11 2216培地を用い，混釈法で測定した。方法の詳細は前 報（2）で述べた通りである。なお生菌数の測定はイル カ試料1〜3，8，10，11，14，16〜24の計16試料に

ついて行なった。

 アミノ態およびアンモニア態窒素量の測定 捕獲直 後のイルカの1，III， IV胃（あるいは腸）内容液を別 々に採取し（II胃には内容液がほとんど存在しなかっ たので分析できなかった），ドライアイスを加え凍結し て実験室に持ち帰づたものを試料とした。アミノ態窒 素はニンヒドリン比色法（10），アンモニア態窒素は

フェノール・ハイボクロライト法（11）により，遊離の 量を測定した。なおアミノ態窒素は試料19〜24，また アンモニア態窒素は試料6，8，12，16〜24について

分析を行なった。

 低級酸量の測定 凍結して持ち帰った各胃の内容液 のうち，100ml以上存在した内容液について，前報（1）

と同様にして遊離の低級酸量を測定した。なお，測定 は試料6，8，16〜20について行なった。

結

果

 スジイルカの体温はTable 1の通りである。

試料18は37．5℃とやや高かったが，その他はいずれ も35℃前後で，他の海産哺乳動物（12）とほほ判じ体温

を示した。

供試イルカの胃内容液のpHをFig．1に示した。

供試イルカの胃内pHは3つの型に分類された。す

なわち，1胃はII〜IV胃に比べ著しく低く， II〜IV胃 にかけてpHが上昇する場合（1型）， II胃が1胃およ びHI胃より高い場合（2型），さらに各胃のpHにほと んど差がなく中性付近の値を示す場合（3型）に分けら れた。このうち1型は主として1胃内での消化が活発 に行なわれている状態，2型は消化が進行し1胃内容 物がlll胃に移行した状態，3型はほぼ消化が終了した

状態を示すと思われた。

 イルカの胃内pHは供試イルカ間で，また同一個体 でも各胃の間で著しく異なった。各胃におけるイルカ

間のpH変動幅は1およびIII胃ではそれぞれ

1．90〜6．45，2．35〜8．10と著しく大きく，IIおよびIV 胃では4．40〜7．57，4．20〜7．56と比較的小さかった。

このようなpHの変動は餌料の消化と密接に関連し，

消化が活発に行なわれている状態（1胃内に餌料が存 在し，またIII胃内容液は濁りの度合が大きかった）で はpHは低く，食物の消化が進むにつれて（1胃内容物 は消化が進行し，またIII胃内容液の色調は淡く，濁度 は小さくなり，場合によっては黄色を呈した）pHは上 昇すると思われる。また食物の消化がほぼ終了した時 点（各胃とも固形物は見られず，1〜IV胃とも黄色を 呈する）では1〜IV胃のpHにはほとんど差がなくな り，中性に近づく。すなわち，これらのpHは個々のイ

ルカの消化開始時から終了時までの変化を示すと考え

る。

 供試イルカの胃内からの微生物の分離状況と胃内 pHとの関係をFig．2に，また微生物が分離ざれた場 合の胃内容液中の生菌数をTable 2に示した。

 Fig．2に示すように，生体イルカの胃内からは微生 物（すべて細菌であった）が分離される場合とされな い場合があった。また分離された場合でも1胃あるい はm胃からのみ，あるいは双方からと様々であった。

微生物が分離された胃内pHを見ると， pH3．85（試料 16）を除くいずれもpH5．91〜7．11の微酸性〜微アル カリ性の範囲内にあった。なおpH3．85の試料から分 離された微生物（細菌のレあ万osp．）は同pHでも発育 が可能であった。また，今回，各イルカから分離され たVibrio sp．は1〜2種で，こうした結果は前報（2）

で述べた死後のイルカのデーターと同様であった。

 Table 2に示すように，胃内での生菌数は乳児イル カ（試料1と3）では103／ml，成体イルカでは104／mlの オーダーであったが，この両者の差が成長段階による

ものか否かについては明らかでない。

 胃内容液中のアミノ酸量と微生物の存否との関係を

Fig．3に示す。

 胃内容立中には微生物の存否に関係なく遊離のアミ

8 7 6

舌5 4

3 2

Type 2

Type 1

l  lI  川   IV l  II  川  IV

Stomach number

Type 3

I   Il  川   IV

Fig． 1 pH values of stomach fluids of the whales， Stenella attenuata and Stenella caeruleo−alba． The     pH values were classified into three groups．

58

8 7 6

玉5 4

3 2

森井：海洋性イルカ胃内容液中の微生物数，pH，アミノ酸量，アンモニア量および低級脂肪酸量

Fig． 2

Tソpel

Type 2

Type 3

 L一一一L一一一一L一一一一J 一 一

 l  ll  旧  IV   l  II ．川   IV   l  ll  lll  IV       Stomach number

pH values and bacteria in stomach fluids of the whales， Stenella attenuata and Sttenella caeruleo−alba，

e Counting of viable count （bacteria unisolated）， ＠ Bacteria isolated．

Table 2． Viable counts of bacteria isolated      from the stomachs of the whales，

     S彪ne〃a attenualz and Stene〃α      caeruleoalba．

No． of No． of Samples Stomachs

Viable counts per ml  of stomach fluid

（一m﹂Q6二＼O仁﹂︾〜一で噛りOOに男ヒく

20，000

10，000

s，eoo

1311161719

^III＊

III III I III

I III

1．84×103 3．00×lo3 1．58×104 3．60×lo4 2．50×lo4 3．10×lo4 4．10×104

 ＊ The letters，1 and III designate the first and third stomach respectively．

ノ酸が存在し，その量は通常1胃よりIII胃の方が多く，

またIV胃（あるいは腸）では著しく増加した。とく「 ﾉ，

胃内に微生物が認められたイルカ（試料19）では1胃

とIII胃の量的差異はほとんど認められず， III胃では他

のイルカ試料に比べその量は著しく少なかった。

 胃内容液中のアンモニア量と微生物の存否との関係

をFig．4に示す。

 胃内容液中のアンモニアもまた微生物の存否に関係 なくすべてのイルカで認められ，その量は通常1胃よ

1，000

500

へ丞有

﹁〜＼オノノ

Fig． 3

りIII胃の方が多く，腸液中では減少ずるが，

1胃よりIII胃あるいは1胃やIII胃よりもIV胃の方が多 い場合もあった。なお，微生物が存在する胃内では脱 アミノ作用によるアンモニア量の増加が予想されたが，

そうした傾向は認められず，1胃とIII胃の双方に微生 物が存在したイルカ（試料19）ではむしろ逆の結果さ

 1 11 lll IV

  ， Stomach number Amino acid−N and bacteria in

stomach fluids of the whale， Stenella caeruleo−alba．

e Counting of viable count

（bacteria unisolated）， ＠ Bacteria isoalted．

       なかには

-

E -

O

0

N

50—

0

I I III-II

Stomach number

Fig. 4 Ammonia-N and bacteria in stomach fluids of the whale, Sttenella caeruleo-alba.

• Counting of viable count (bacteria unisolated), Bacteria isolated.

0 0

0- 0.1

I( III IV

Stomach number

Fig. 5 Free volatile fatty acids ( FVFAs) and bacteria in stomach fluids of the whale,

Stenella caeruleo-alba.

• Counting of viable count (bacteria unisolated), 0 Bacteria isolated.

え示 した。

胃 内 容 液 中 の 低 級 酸 量 と微 生 物 の 存 否 との 関係 を Fig.5に 示 す 。

胃 内容 液 中の低 級 酸 量 は1胃 よ りIII胃の方 が わず か に多 い傾 向 を認 め たが,微 生物 の 存 否 に ともな う差 異 は見 られ な か った。 しか し これ らの 結果 につ い て は, 分 析 した試 料 数 が 少 な いの で,さ ら に検 討 を必 要 とす る。

考 察

反 す う動物 の ルー メ ン内のpHは 消化 の進 行 に と も な って 変 動 す るが,そ の変 動 はほ ぼ 中性 近 くに限 られ て い る(13,14)。イ ル カ胃 内pHを 消 化 の1段 階 と考 え る と,消 化 の各 過 程 でpHは1.90〜8.10ま で変 動 す る こ とに な り,こ う した変 化 は胃 内 で の微 生物 の発 育 を 制 限 す る と予想 され る。実 際,微 生 物 は発 育 可 能 なpH 域 か らの み分離 され た が,こ の こ とは 胃内 で の一 時 的

な微生 物 の 発育 を示 唆 して い る。 そ して発育 した微 生 物 が ア ミノ酸 を分 解 し,ア ンモニ ア や低 級 酸 を生 成 す

る こ とは考 え られ る。

と ころ で,イ ル カ油 脂 中 に存 在 す る低 級 分 枝酸 が 胃 内で 生成 され るで あ ろ う これ らの 脂肪 酸 に 由来 す るか 否 か は,イ ル カ胃 内 に微 生物 は一 時 的 に しか 存在 せ ず,

また胃 内 に微 生 物 が存 在 す る場 合 で もそ の数 は反 す う 動物(15〜18)に 比 べ極 めて 少 な い。 そ れ ゆ えた とえ胃 内 で低 級酸 が 生 成 す る として も反 す う動 物(7,14)に 比 べ 著 し く少 ない と思わ れ る。 す なわ ち,イ ル カ油 脂

中 に は反 す う動 物 に比 べ 著 し く多量 の低 級 分 枝酸 が存 在 す る こ とを考 え る と,こ れ ら脂 肪 酸 が 胃 内で微 生 物

に よ り産 生 され るで あ ろ う脂 肪 酸 に 由来 す る とは考 え に くい。 その た め,イ ル カ油 脂 中 の 低級 分 枝 酸 は体 内 で 生成 され る と考 え るの が妥 当で あ る。

胃 内 に はア ンモニ アお よび低 級 酸 が微 生 物 の 存否 に 関 係 な く見 い 出 さ れ た。また,摂 餌 直 後 め1胃 内pHは 極 めて低 いた め微 生 物 も分 離 され なか っ たが,こ れ ら の1胃 内か ら も他 の試 料 とほ ぼ 同量 の ア ンモニ ア や低 級 酸 が検 出 され た。 す なわ ち,胃 内容 液 中 に存 在 した ア ンモ ニ アや 低 級酸 は餌 料 由 来 の もの が 主体 を 占め る と思 わ れ た。 した が っ て,1胃 よ りIII胃の 方 で これ ら の含 有 量 が高 か った理 由 も消 化 の進 行 に と もな う絶対 量 の増 加 と考 え られ る。 しか し他 方,胃 内 か ら微 生物 が分 離 され た度 合 は1胃 よ りIII胃の方 が 高 か った 事 実 か ら,微 生物 の脱 ア ミノ作 用 も無 視 で きな い。 これ ら の点 に関 して は今 後検 討 す る必 要 が あ る。

要 約

伊 豆 伊 東沖 で生 け捕 り した ア ラ リイ ル カ とス ジ イル カ の 胃 内容 液 中 のpH,生 菌 数,ア ミ ノ酸 量,ア ンモニ ア 量,低 級 酸量 お よび体 温 を し らべ,次 の 結果 を得 た 。

1.体 温 は 大部 分 が35℃ 前 後 だが37.5℃ とや や高 い もの もあ った 。

2.胃 内容 液pHは 一 連 の 消 化 の過 程 で1.90〜8.10 まで 変動 した 。

3.胃 内 容 液 か ら103〜104/m1の 細 菌 が 発 育 可 能 な pH域 か らの み分 離 され た が,発 育 可 能 なpH域 で も 分 離 され ない 場合 が 多 くあ っ た。

4.い ずれ の 胃 内容 液 中 に も遊 離 の ア ミノ酸,ア ン

モニ ア お よ び低 級酸 が存 在 した が,こ れ ら と微 生物 と

60森 井:海 洋性 イ ル カ胃 内容 液 中 の微 生 物 数,pH,ア ミノ酸量,ア ンモ ニ ア量 お よび低 級脂 肪 酸 量

の関 連性 は見 い 出せ なか った。

終 りに,本 論 文 の こ校 閲 をい た だい た東 北 大学 農 学 部 教授 金 田 尚志 博 士 に対 し謝意 を表 す る。

文 献

1)森 井 秀 昭 ・金 津 良 一(1972).日 水 誌,38,

1035‑1039.

2)森 井 秀 昭(1972).日 水 誌,38,1177‑1183.

3)Morii,H.(1973).Bull.ノ4勿 η.Soc.Sci.Fish., 39,333.

4)森 井 秀 昭(1973).本 誌,35,85‑90.

5)森 井 秀 昭(1979).本 誌,47,43‑48.

6)森 井 秀 昭(1979).本 誌,47,49‑54.

7)EL‑Shazly,K.(1952).Biochem.1.,51,640

‑647 .

8)EL‑Shazly,K.(1952).Biochem./.,51,648‑653.

9)Lewiss,D.(1955).B万 乙J.Nutn'ent,9,215‑229.

10)日 本 分 析 化 学 会(1968).臨 床 化 学 分 析II.東 京 化

学 同 人,東 京,163‑177.

11)Sol6rzano,L.(1969).Limnol.Oceanog.,14,799

‑801 .

12)Irving,L.(1969).TheBiologyofMarine Mammals.AcademicPress,NewYork・London, 154.

13)Cason,J.L,Ruby,E.S.andStallcup,0.T.

(1954).J.Nutr」,52,457‑465。

14)Mcmanus,W.R.(1959).Nature,184,1572‑1573.

15)Bryant,M.P.(1959).Bact.Revり23,125‑153.

16)Hungate,R.E.,Bryant,M.P.andMah,R.A.

(1964).Ann.1〜ev.Microbiol.,18,131〜166, 17)Doetsh,R.N.andRobinson,R.Q.(1953).

/.DairソS6云,36,115‑143.

18)Fungate,R.E.(1947).1.Bacten'ol.,53,631.