Keramaphidin B （GL．901）
無色固体
［aL］，20 一22．20 （cl．10， CHCI，）
IR （film） v．．， 2940 cm i
日MS m／z380（M＋）and 283
HR日MS m／z 380．3199（M＋， calcd for C26H40N2，380．31 91）
H and 3C NMR （CDCi，） Table
Keramaphidin C （JgLL）
無色固体
IR （film）
FABMS
v・
i3
メ@NMR （CD，OD）
10）， 2．83 （1H， m， H−4）， 2．92 （1 H， m， H−11）， 2．95 （2H， m， H−13 and
H−22）， 2．99 （2H， m， H−13 and H−22）， 3．04 （1H， m， H−11）， 3．13
（1H， m， H−3）， 3．36 （1H， m， H−3）， 5．43 （2H， m， H−17 and H−18），
7．02（1H，t， J・＝7．8Hz， H−6），7．11（1 H，t，、ノ＝7．8Hz， H−7），7．32
（1 H， d， 」＝ 7．8Hz， H−8）， 7．43 1 H， d， J＝ 7．8Hz， H−5）， and 11 ．20
（1 H， brs， NH−9）
6 21 ．7 （t， C−4）， 23．0 （2C， t， C−14 and C−21）， 25．0 （2C， C−15 and
C−20）， 26．8 （2C， t， C−16 and C−19）， 27．7 （t， C−10）， 42．1 （t， C−3），
48．9 （t， C−13）， 52．9 （t， C−11）， 53．9 （d， C−1）， 109，5 （s， C−4a）， 2．2
（d， C−8）， 115．9 （s， C−9a），1t9．0 （d， C−5）， 120．3 （d， C−6），123．1 （d，
C−7）， 128．0 （s， C−4b）， 132．1 （2C， C−17 and C−18）， and 138．1 （s，
C−8a）
1rcino1 A （li｝）
無色固体
mp．
［cLID18
1R （KBr）
EIMS HREIMS
iH and i3C NMR
83−85℃
一1 go （c O．92， MeOH）
vMM． 3400 and 2940 cm max
m／z412（M ），394， and 162
m／z 41 2．31 07 （M ， calcd for C，，H，，N，02， 41 2．3090）
Table 15
1rcinol B （sc）
無色固体
mp．
［ct］Dls
IR （KBr）
EIMS HREIMS
78−790C
−2．3e （c O．12， MeOH）
V．．， 3400 and 2940 cm i
m／z414 （M ）， 397， and 164m／z 41 4．3248 （M ， calcd for C，，H，，N，O，， 41 4．3246）
115
三三騨騨騨騨一
・ 「 へ ｝
iH and 3C NMR Table 15
ユ9の光学分割
JJtlkのラセミ体の結晶を以下に示すような条件で分析したところ、（＋）一10と（一）一10は、それ
ぞれ保持時間11．5分と13．9分に1：1の強度のピークを与えた。魚の結晶化母液を同様の 条件で分析したところ、保持時間11．5分と13．9分に20：1の強度比で2個のピークを与え
た。
column Chiralpak OP， Daicel Chemical lnd．， Ltd，， 4．6 x 250 mm
eluent MeOH／H，O， 80：20 flow rate O，3 mUmin
Rl and ［ot］， detection
sample injection 50 ptg／100 ptL in MeOH
慮のNaBH4還元
慮（5．2mg）のTHF溶液1・．5mLを0℃に冷却し、150mM D旧ALHのトルエン溶液（0・2mL）を 加え、一78℃下で3時間撹絆した。反応液にメタノール3μ、エーテル（70μL）を加えて、
酒石酸ナトリウム・カリウム（0．5mL）を加えて室温で1時間撹窪した。酢酸エチル（3mLx3）
で抽出した。有機層を無水MgSO4で乾燥し、溶媒を減圧留去した。得られた残さをシリカ
ゲルカラム（5％クロロホルム／メタノール）により精製し、（＋）一JKtk（2．2 mg）を得た。
（＋）一lrcinol・A［（＋）一ユ田
無色固体
［ct］D17
1R （KBr）
EIMS HREIMS
iH NMR （CD，OD）
＋200 （c o．2， MeOH）
vwh 3400 and 2940 cm i max
m／i412 （M ）， 394， and 162
m／z 412．3 2 （M ， calcd for C，，H，，N，O，， 412．3090）
6 1．1 一3．0 （28H， m）， 3．27 （1 H， m）， 3．57 （1H， m）， 3．60 （1 H， m），
4．00 （2H， s）， 5．41 （1 H， m）， 5，54 一 5，46 （2H， m）， 5．69 （1 H， s）， and
116
♂鐸璽
翻醐騨醐騨1， F
「ilノ・b rL1 可
、 「 引 マ
6．20 （1H， m）
想のNaBH4還元
慮（4・1 mg）のTHF溶液1・．5mLを0℃に冷却し、150mM D旧ALHのトルエン溶液（0・2mL）を 加え、一78℃下で3時間撹搾した。反応液にメタノール3μ、エーテル（70μL）Lを加えて、
酒石酸ナトリウム・カリウム（0。5mL）を加えて室温で1時間撹搾した。酢酸エチル（3mLx3）
で抽出した。有機層を無水MgSO4で乾燥し、溶媒を減圧留去した。得られた残さをシリカ
ゲルカラム（5％クロロホルム／メタノール）により精製し、（＋）一慮（1・9m9）を得た。
（＋）一lrcinol B ［（＋）一一 ！su
無色固体
［（lx，ID17
1R （KBr）
EIMS HREIMS
iH NMR （CDCI，）
＋4．20 （co．2， MeOH）
vwtnu 3400 and 2940 cm i max
m／z414（M ），397， and 164
m／z 41 4．321 9 （M ， calcd for C，，H，，N，O，， 41 4．3246）
61．1 一・ 2，95 （29H， m）， 2．98 （1 H， m），3，00 （1H， m），3，32 （1 H， d， J＝
12．0 Hz）， 3．66 （1 H， s）， 3．86 （2H， s）， 5．25 一 5．35 （2H， m）， 5．42 （1 H，
m）， 5．54 （1H， m）， and 5．70 （1H， s）
117
i
W．）：v．．i一．一．L r一．，
第三章第一節に関する実験
渦鞭毛藻Amphidiflium sp．の培養
今回用いた渦鞭毛藻Amρhidinium sp．（Y−25株）は、以前に沖縄本島にて採取したヒラムシ Amphiscolops breviviridisの体内から分離したものでを実験室で大量培養したものである 培養には滅菌海水に下表に示すProvasoliの海水補強栄養剤を1％添加したES培地を用い
た。具体的な手順は以下の通りで、カブ型フラスコに2しの海水を入れて綿栓しその上から アルミ箔をかぶせた。オートクレーブ中121℃で20分間滅菌を行い、以後の操作はクリー ンベンチ中で行った。Provasoliの海水補強栄養剤を滅菌濾過（STERIVEX−GS，0．22μm Filter unit；Millipore Co．）し、カブ型フラスコあたり20mL加えた。そこへ平底試験管（培養液 20mL）中で予備培養した藻体を加え、火炎滅菌した綿栓でふたをして蛍光灯を光源として 25℃で16時間明期、8時間暗期を繰り返し2週間静置培養を行った。
2週間後、暗期のうちにカブ型フラスコを遮光し、上清を吸引により除去した。得られた 残さをさらに遠心分離（3500rpm、10分）により藻体を収穫した。藻体は使用するまで冷凍
保存した。
Provasoliの海水補強栄養剤（培養液3L中）
NaNO3
Na，C，H，（OH），PO，．5．5H，O FeCl． 6H．0
3 Vt ，2
Na，EDTA．2H，O
H，BO，
MnCI2 znCI2
coCl，
vitamin Bi2
Thiamine hydrochloride
D−Biotin
H，NC（CH，OH），