1. 高周波ばく露による形質転換（トランスフォーメーション）評価実験 (1) 使用細胞：C3H10T1/2 細胞（クローン8）
(2) ばく露条件
ばく露周波数：2.45GHz
平 均 S A R：50および100W/kg
50W/kg (peak SAR 300W/kg…1秒ばく露、5秒非ばく露）
(peak SAR 900W/kg…1秒ばく露、17秒非ばく露）
100W/kg(peak SAR 300W/kg…1秒ばく露、3秒非ばく露）
(peak SAR 900W/kg…1秒ばく露、9秒非ばく露）
ば く 露 時 間：2時間
(3) 1×106個の細胞を10cmシャーレに播種し、20-Methylcholanthrene（MC）入り 培地（最終濃度2.5μg/ml）、または、MC含まない培地で48時間培養
(4) 高周波ばく露用シャーレに移し変え、高周波2時間ばく露
（A）TPA入り培地（最終濃度0.5ng/ml）でばく露。以降、TPA入り培地で培養
（B）TPA含まない培地でばく露。以降、TPA含まない培地で培養 (5) トリプシン処理後、細胞を回収し
（A）生存率検定用に10cmシャーレに200個の細胞を播種
（B）形質転換頻度検定用に10cmシャーレに2000個の細胞を播種 (6) 1週間後、生存率を測定
(7) 5～6週間後、形質転換頻度を測定
(8) Student’s t-test（p<0.01）の統計処理にて有意差を検討
（結果）
トランスフォーメーション（形質転換）の例ならびに高周波間欠ばく露によるト ランスフォーメーション誘発頻度の結果を図1および図2に示す。
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2. ODC
2.1 オルニチン・デ・カルボキシラーゼ（ODC: Ornithine decarboxylase）の 性質
(1) ODCはポリアミン＊生合成系に関与する律連酵素で、下記のポリアミン合成経路 で、オルニチンからプトレッシン合成時に働く。
オルニチン
↓←ODCによってコントロール プトレッシン
↓ スペルミジン
↓↑
スペルミン
(2) ODCは細胞増殖、細胞周期の亢進に関係し、この時ODC発現が上昇する。
(3) また、細胞増殖因子、ホルモンなどの刺激により、ODC発現の上昇が確認され ている。
つまり、ODCは細胞増殖・分化の亢進状態の指標ともなっている。
＊3個以上のアミノ基を持つ非蛋白質性のアミンであり、細胞内に多量に存在して増 殖・分化の際に複雑な量的変動を引き起こす
2.2 培養条件と測定方法 (1) 培養条件
使用細胞：マウス線維芽細胞由来L-929細胞（大日本製薬より入手）
使用培地：Eagle’s MEM培地+5％牛胎児血清（+2mM L－グルタミン）
培養条件：37℃、5% CO2、湿度100%
(2) 測定方法
ばく露処理後の経時的な細胞数計測
フローサイトメーターによるODC発現の測定
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2.3 ODC発現の測定方法
(1) 高周波ばく露または熱処理（TPA(±)） ばく露条件
ばく露周波数：2.45GHz（連続波）
S A R：5、10、20、50、100および200W/kg ば く 露 時 間：連続2時間
熱処理条件（陽性対照）
温度：38、40、42℃および44℃ 時間：2時間（連続）
(2) 細胞を回収し、細胞数を測定 (3) 細胞数を調節する（106個/200μℓ）
(4) TritonX－100（0.05％）に細胞を浮遊し、冷却する（4℃、15min）
(5) PBS(－)で2回洗浄してゼラチン（0.1％）およびODC抗体（500倍希釈）と混合 する。その後、冷却する（4℃、30min）
(6) PBS(－)で3回洗浄してFITC標識IgG二次抗体（500倍希釈）を添加し、30分間 静置。
(7) PBS(－)で3回洗浄後、顕微鏡下でチェックしてからフローサイトメーターで
ODC発現を測定。
（結果）
細胞増殖に及ぼす高周波ばく露の影響結果を図3に示す。ODC発現測定について、
フローサイトメトリー解析の例を図4に示す。高周波ばく露ならびに熱処理によ るODC発現の結果を図5に示す。
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3. REFLEX