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Title
Histological and immunohistochemical observation of
the furcation area formation with the subpulpal
lobus of rat molar
Author(s)
大澤, 枝里
Journal
歯科学報, 118(6): 558-559
URL
http://hdl.handle.net/10130/4793
Right
５５８ 歯科学報 Vol．１１８，No．６（２０１８） おお さわ え り 氏 名（本 籍）
大
澤
枝
里
（東京都） 学 位 の 種 類 博 士（歯 学） 学 位 記 番 号 第 ２１６９ 号（甲第１３７０号） 学 位 授 与 の 日 付 平成２９年３月３１日 学 位 授 与 の 要 件 学位規則第４条第１項該当学 位 論 文 題 目 Histological and immunohistochemical observation of the
furcation area formation with the subpulpal lobus of rat molar
掲 載 雑 誌 名 JournalofHardTissueBiology 第２６巻 ２号 １４９－１５６頁
２０１７年 DOI：１０ .２４８５ /jhtb.２６ .１４９ 論 文 審 査 委 員 （主査） 村松 敬教授 （副査） 新谷 誠康教授 田﨑 雅和教授 阿部 伸一教授 山本 仁教授 論 文 内 容 の 要 旨 １．研 究 目 的 歯の形態形成に関する研究は歯の初期発生や歯冠形成に関するものが多く，歯根形成，特に多根歯形成に関 しては報告が少ない。ヒトでは多根歯形成の際に根分岐部相当部に髄下葉が出現して多根化が生じるが，髄下 葉の形成機構には不明な点が多い。そこでヒトと同様に髄下葉の形成により多根化が行われるラット臼歯を用 いて髄下葉の形成について組織学的および免疫組織学的に検索を行うとともに，根分岐部に出現する副根管の 形成について考察した。 ２．研 究 方 法 生後８日（PN８），PN１１，PN１３，PN１５，PN１８の Wistar 雄性ラット（各５匹）の上顎第二臼歯歯胚（M２）を 観察対象とした。ラットを４％パラフォルムアルデヒド溶液で灌流固定し，M２を摘出してヘマトキシリン染 色を行い，実体顕微鏡で観察をした。一部は M２を上顎骨ごと摘出して１０％EDTA で脱灰後，通法に従い４ µm のパラフィン切片を作製した。ヘマトキシリン・エオジン重染色と抗 pan-keratin（PK）抗体，抗 heat
shock protein（HPS）２７抗体と抗 sonic hedgehog（Shh）抗体を用いた免疫染色を行った。
３．研究成績および結論
上皮性根間突起（EP）は歯冠の大部分の形成後，歯乳頭底部中央に観察された。EP は経時的に対向する EP との接触，先端部の分岐や髄下葉形成前の断裂像を示さなかった。EP に面した歯乳頭細胞は立方形から円柱 を示し，抗 HSP２７抗体に陽性を示す象牙芽細胞に分化した。髄下葉は EP と分化した象牙芽細胞の間に出現 し始め，経時的に大きさと，厚みが増大した。EP は髄下葉形成部分で断裂し，Hertwig 上皮鞘と Malassez の上皮遺残に類似した形態を示した。EP は歯頸部の Hertwig 上皮鞘と接触をせず，それぞれが象牙質を形成 し，髄下葉と象牙質根間突起（DP）や髄下葉同士の癒合により，根分岐部が形成された。抗 Shh 抗体に対し て，歯冠部のエナメル芽細胞と象牙芽細胞が免疫陽性を示したが，髄下葉形成部でも，EP と髄下葉を形成す る象牙芽細胞に陽性反応を認めた。以上の結果から，髄下葉は歯冠部の象牙質と同様に歯乳頭細胞から分化し た象牙芽細胞により形成され，髄下葉形成に関わる象牙芽細胞は，EP と歯乳頭細胞との間の上皮－間葉相互 作用により，歯乳頭細胞から分化することが示唆された。また歯頸部の Hertwig 上皮鞘と EP は接合せず， それぞれが DP と髄下葉を形成することから，DP と髄下葉の境界部が副根管になることが示唆された。 ― ６２ ―
５５９ 歯科学報 Vol．１１８，No．６（２０１８） 論 文 審 査 の 要 旨 歯の形態形成に関する研究は歯の初期発生や歯冠形成に関するものが多く，歯根形成，特に多根歯形成に関 しては報告が少ない。そこで本研究ではヒトと同様に髄下葉の形成を伴って多根化を生じるラット臼歯を用い て髄床底根分岐部の形成過程について実体顕微鏡観察ならびに，組織学的および免疫組織学的観察を行った。 その結果，髄下葉は上皮性根間突起（EP）に面した歯乳頭細胞から分化した象牙芽細胞により形成され，髄下 葉の成長と髄下葉同士あるいは髄下葉と歯頸部から形成された象牙質根間突起（DP）との癒合により根分岐部 が形成されることが明らかとなるとともに，髄下葉形成に関わる象牙芽細胞は，EP と歯乳頭細胞との間の上 皮－間葉相互作用により，歯乳頭細胞から分化することが示唆された。また歯頸部の Hertwig 上皮鞘と EP は接合せず，それぞれが DP と髄下葉を形成したことから，DP と髄下葉の境界部が副根管になることが示唆 された。 本審査委員会では１．上顎第二臼歯歯胚（M２）を選択した理由 ２．抗 Hsp２７抗体と抗 Shh 抗体を用いた 理由 ３．歯根の数を決めるメカニズムについて，などについての質問があった。これらの質問に対して， １．予備実験の結果，上顎第一臼歯と比較して上顎第二臼歯は根分岐部が広く，その形成過程を観察しやすい ので選択した，２．抗 Hsp２７抗体は象牙芽細胞の分化とともに強陽性を示すことが知られていることから，ま た Shh は歯の形成過程での上皮－間葉相互作用を代表するシグナル遺伝子のため選択した，３．歯乳頭側に 伸長する EP の数により歯根の数が決まるが，どのような機構で伸長する EP の数や，伸長する部位が決めら れるのかについてはまだ不明である，との回答があり，その他質疑に対しても概ね妥当な説明が行われた。ま た論文のタイトル，図表などについて指摘事項があり，修正や加筆がなされた。 本研究で得られた結果は，今後の歯学の進歩，発展に寄与するところ大であり，学位授与に値するものと判 定した。 ― ６３ ―
