悪性 リンパ腫 の化学療法 に関す る研究
第2編血 液 腫 瘍 細 胞 に 対 す るin vitroの 薬 剤 併 用 効 果: Median effect analysisに よ る 検 討
岡 山 大 学 医 学 部 第 二 内 科 学 教 室(指 導:木 村 郁 郎 教 授)
上 野 邦 夫
(平成5年9月28日 受 稿)
Key words: median effect analysis, in vitro薬 剤 併 用 効 果
緒 言 悪 性 リ ン パ 腫 をは じめ とす る血 液 悪 性 腫 瘍 の 治 療 に お い て は,多 剤 併 用 療 法 が そ の 中心 的 役 割 を 担 っ て い る.多 剤 併 用 療 法 に お け る薬 剤 の 組 合 せ は,臨 床 的 に 明 ら か な 活 性 を示 す 薬 剤 の な か か ら,交 叉 耐 性 が 乏 し く しか も毒 性 の 重 複 が 軽 微 な薬 剤 を選 ぶ と い う経 験 則 に 基 づ くの が 一 般 的 で あ り 客 観 的 知 見 に 裏 付 け さ れ た もの は 少 な い.薬 剤 の 併 用 効 果 をin vitroで 評 価 す る 客 観 的 な 方 法 と し て 従 来 い くつ か の 検 討 が 試 み られ て きた. Chouお よ びTalalayに よ る median effect analysis1)は,薬 剤 の併 用 効 果 を 比 較 的 簡 便 な 操 作 で,し か も客 観 的 に 評 価 で き る 方 法 と して,有 用 で あ る と考 え ら れ る.今 回, 著 者 は こ の 方 法 を用 い て,血 液 悪 性 腫 瘍 の 治 療 に お け る 中 心 的 な 薬 剤 で あ る4種 類 の anthracycline-anthraquinone系 薬 剤 と,そ の 治 療 に繁 用 され て い る他 の 抗 腫 瘍 剤 と の 併 用 効 果 をin vitroに お い て 検 討 し た 結 果,興 味 あ る知 見 を得 た の で 報 告 す る. 方 法 1. 薬 剤 anthracycline-anthraquinone系 薬 剤 と して, adriamycin (ADM:協 和 発 酵), aclarubicin
(ACR:山 之 内 製 薬), mitoxantrone (MXT: 日本 レ ダ リー),お よ びtetrahydropyranyl-adriamycin THP-ADM:明 治 製 菓)と,併 用 薬 剤 と し て, cyclophosphamideの 活 性 体 で あ る4-hydroperoxycyclophosphamide (4HO2-CTX:塩 野 義 製 薬), cytosine arabinoside (Ara-C:新 日 本 製 薬), vincristine (VCR:塩 野 義 製 薬), etoposide (ETP:日 本 化 薬)お よ びcisplatin (CDDP:日 本 化 薬)を 用 い た.実 験 に 用 い た 薬 剤 は,い ず れ も 用 時 生 理 食 塩 水 に て 溶 解 し,目 的 濃 度 に 希 釈 し て 用 い た. 2. 腫 瘍 細 胞 腫 瘍 細 胞 と し て,10%牛 胎 児 血 清(FBS)加 RPMI-1640を 用 い,37℃,5%CO2下 で 継 代 培 養 中 の2つ の 細 胞 株,HL-602)(急 性 前 骨 髄 球 性 白 血 病 由 来)お よ びRaji3)(Burkittリ ン パ 腫 由 来)を 用 い た. 3. 薬 剤 併 用 効 果 の 判 定 (1) Growth inhibition assay
指 数 増 殖 期 に あ る 細 胞 をRPMI-1640に て3 回 洗 浄 し た 後,10ml培 養 用 プ ラ ス チ ッ ク 試 験 管
(Falcon)に て 目 的 の 細 胞 密 度 に 調 整,こ れ に 各 薬 剤 の 段 階 希 釈 液 を 目 的 濃 度 と な る よ う 単 独 あ る い は 併 用 の か た ち で 加 え,継 代 維 持 と 同 一 条 件 下 で 培 養 し, growth inhibition assayに 供 し た.予 備 実 験 の 結 果 か ら,培 養 開 始 時 の 細 胞 密 度 は,HL-60で は3×105個/ml, Rajiで は,
1×105個/mlと し, assayのend pointをHL-60で は 第4日, Rajiで は,第3日 に 定 め た. tripan blueを 用 い たdye cxclusion法 に よ り 生 細 胞 数
を 求 め,薬 剤 非 添 加 の 生 細 胞 数 を 対 照 と し て 各 薬 剤 濃 度 に お け る 生 細 胞 率 を 算 出 し, anthra cycline-anthraquinone系 薬 剤 単 独,併 用 の 対 象 と な る 各 薬 剤 単 独,お よ び 一 定 の モ ル 比 に お け る 両 薬 剤 併 用 時 の3本 のdose-response curve を 作 成 し た. 薬 剤 濃 度 は,各 細 胞 に 増 殖 抑 制 を ほ と ん ど 示 さ な い 濃 度 と ほ ぼ 完 全 な 増 殖 抑 制 を 示 す 濃 度 の 範 囲 で7濃 度 を 設 定 し た.併 用 の 場 合 に は,実 験 は 各 細 胞,各 薬 剤 の 組 合 せ に つ い てtriplicate で 行 い,少 な く と も2回 の 実 験 を 行 い 再 現 性 を 確 認 し た. (2) 併 用 効 果 の 解 析 併 用 効 果 の 定 量 的 解 析 を 行 う た め に, Chouと Talalayに よ るmedian-effect plotを 用 い た. median-effectの 理 論 に よ れ ば,薬 剤 濃 度 をD,
50%抑 制 濃 度(median-effect dose)をDm,抑 制 細 胞 率 をFa (fraction affected),非 抑 制 細 胞 率 をFu (fraction unaffected), mを 係 数 と す る と き,
D=Dm〔Fa/Fu〕1/m…… ①
あ る い は 両 辺 の 対 数 を と る と き,
log〔Fa/Fu〕=mlog(D)-mlog(Dm)… ② な る 関 係 式 が 成 立 す る(median effect equa tion). そ こ で, anthracycline-anthraquinone系 薬 剤 単 独,併 用 の 対 象 と な る 薬 剤 単 独,お よ び 一 定 の モ ル 比 に お け る 両 者 併 用 の3つ のdose -response curveを,式 ② に あ て は め て 線 形 化 し (median-effect plot),得 ら れ た 回 帰 曲 線 か ら mお よ びDmを 求 め た.併 用 効 果 の 定 量 的 指 標 と な る 併 用 係 数(combination index: CI) は,薬 剤Aの 濃 度 を(D)A, x%抑 制 濃 度 を(Dx)A, 薬 剤Bの 濃 度 を(D)B, x%抑 制 濃 度 を(Dx)B と す れ ば, CI
③
で 与 え ら れ る.こ こ で,併 用 す る2つ の 薬 剤 の 作 用 点 や 作 用 機 序 が 異 な る(α=1:mutually non-exclusive)か,作 用 点 を 競 合 す る(α=0:mutually exclusive)か は, median-effect plot に よ り 得 ら れ た 回 帰 曲 線 の 勾 配 に よ っ て 規 定 さ れ る が,2つ の 薬 剤 がexclusive(α=0)で あ る 場 合 に は,式 ③ の 第3項 が0と な り,そ の ぶ ん だ けnon-exclusive (α=1)で あ る 場 合 よ り もCIが 低 値 を 呈 す る こ と に な る.CIは 最 終 的 に 式 ① に よ りFaの 関 数 と し て 与 え ら れ る の で,こ の 目 的 の た め 作 成 し た コ ン ピ ュ ー タ ソ フ ト を 用 い 任 意 のFaに 対 応 す るCI値 を 算 出 し, グ ラ フ 化 し た. CI>1.2の と き を 拮 抗 的(antago nistic), CI=0.8∼1.2の と き を 相 加 的(addi tive), CI<0.8の と き を 相 乗 的(synergistic)
と 判 定 し た. 成 績 1. 単 独 薬 剤 の 効 果 実 験 に 用 い た 各 薬 剤 の50%増 殖 抑 制 濃 度(Dm) を 一 括 し て 表1に 示 す. anthracycline-anthra quinone系 薬 剤 のDmは, HL-60に お い て は 0.31∼2.64×10-9M, Rajiに お い て は0.27∼ 3.44×10-9Mと ほ ぼ 同 等 の 範 囲 内 に あ り,い ず れ の 細 胞 に 対 し て も 高 い 活 性 を 示 し た.こ れ ら 薬 剤 相 互 の 比 較 で は, HL-60に 対 す る 活 性 は THP-ADM, MXT, ACR, ADMの 順 に 高 く, Rajiに お い て はMXT, THP-ADM, ACR, ADMの 順 で あ っ た.し か し,薬 剤 の 臨 床 活 性 は 毒 性 と の 関 連 で 規 定 さ れ る と こ ろ か ら,各 薬 剤 の ヒ トに お け る 最 大 耐 量(MTD)を い くつ か の 臨 床 試 験 の 結 果 を 参 考 に4,5,6), ADM 60mg/m2 (103μM/m2), ACR 60mg/m2 (71μM/m2), THP -ADM 60mg/m2 (90μM/m2) , MXT 12mg/m2 (23 μM/m2)と 設 定 し,ヒ ト に お け る 予 測 臨 床 活 性 値 をin vitro に お け る50%増 殖 抑 制 濃 度
(median effect dose: Dm)と の 比(MTD/Dm) に て 算 出 し た7)(表1). HL-60を 指 標 と し た 場 合 の 予 測 臨 床 活 性 は, THP-ADM, ACR, ADM, MXTの 順 に 高 く, Rajiを 指 標 に 予 測 し た 場 合
に は, THP-ADM, MXT, ACR, ADMの 順 に 高 い と い う 成 績 が 示 さ れ た. 4HO2-CTXのDmはHL-60 855 .8, Raji 618.6と 高 値 で あ り,活 性 は 低 い と 判 定 さ れ た. Ara-Cの 活 性 はHL-60に お い て 低 く(Dm: 238.1), Rajiに お い て 高 い(Dm: 11.0)結 果 で あ っ た. VCRとETPは 両 細 胞 に ほ ぼ 同 等 の 中 等 度 の 活 性 を 示 し た が, CDDPの 活 性 は 両 細 胞 と も に 低 か っ た.
表1 各 薬 剤 の50%増 殖 抑 制 濃 度(median effect dose: Dm)と, anthracycline-anthraquinone系 薬 剤 に お け る 予 測 臨 床 活 性(MTD/Dm)の 比 較
*MTD:ヒ ト に お け る 最 大 耐 量(maximal tolerable dose) **Dm: median effective dose(50%増 殖 抑 制 濃 度)
ADM; adriamycin, ACR; aclarubicin, THP-ADM; THP-adriamycin, MXT; mitoxantrone, 4HO2-CTX; 4-hydroperoxycyclophosphamide, Ara-C; cytosine arabinoside, VCR; vincristine, ETP; etposide, CDDP; cisplatin 表2 50%増 殖 抑 制 濃 度 を基 準 と した併 用薬 剤 の 濃 度比 各 数 値 はanthracycline-anthraquinone系 薬 剤 を そ れ ぞ れ1と し た 場 合 の 濃 度 比 を 示 す.こ の 濃 度 比 は 単 独 薬 剤 に よ り50%増 殖 抑 制 を 示 す 濃 度 を 基 準 に 設 定 し た. 2. 2薬 剤 併 用 に よ る効 果 薬 剤 併 用 時 に お け るantracycline-anthra quinone系 薬 剤 と併 用 薬 剤 との 濃 度 比 を 表2に 示 す.検 討 を加 え た もの の な か か ら,代 表 的 パ タ ー ン を呈 し た 薬 剤 併 用 のmedian effect plot と,抑 制 細 胞 率(Fa)に 従 っ て 変 動 す る 併 用 係 数(CI)の 関 係 を 図 示 す る.図1はRajiに お い てADMとETPを 併 用 し た場 合 に 認 め ら れ た 所 見 で あ り,Fa=0.5の と きCI=0.68で あ る と こ ろか ら相 乗 的 併 用 効 果 と判 定 した.こ こ で 用 い た 両 薬 剤 の モ ル 比 は1:2で あ り,臨 床 的 に 用 い 得 る妥 当 な 比 率 で あ っ た. Rajiに お い て
ACRとCDDPを 併 用 した と き はCI=0.98(図 2)で あ り,相 加 的 と判 定 し た.ま た,HL-60に お け るACRとETPの 併 用 に お い て は(図3), CI=1.21で あ る と こ ろか ら拮 抗 的 で あ る と した.
図1 Rajiに お け るETP, ADM, ETP+ADMのmedian effect plot (A)お よ びFaとClと の 関 係(B)
HL-60に お け るanthracycline-anthra quinone系 薬 剤 と 他 薬 剤 併 用 のCIを 表3に 総 括 す る.相 乗 的 効 果 は,ADMで は 認 め ら れ ず, ACRに お い て はAra-Cと の 併 用(CI=0.70)
に お い て, THP-ADMの 場 合 に はCDDPと の 併 用(CI=0.55)に お い て 認 め ら れ た.一 方, anthraquinone系 に 属 す るMXTの 場 合 に は, 4HO2-CTX (CI=0.77), Ara-C (CI=0.65), VCR (CI=0.43),あ る い はETP (CI=0.69)
と の 併 用 に お い て 相 乗 的 併 用 効 果 が 認 め ら れ た. 拮 抗 的 効 果 を 示 し た 薬 剤 の 組 合 せ は,ADMと
4HO2-CTX (CI=1.45), ADMとETP (CI= 1.88), ACRとVCR (CI=1.56), ACRとETP
(CI=1.21)の4つ で あ り,他 の 組 合 せ に お け る 併 用 効 果 は 相 加 的 で あ っ た.ま た,併 用 薬 剤 側 か ら み る と,急 性 非 リ ン パ 性 白 血 病(ANLL) のkey drugの ひ と つ で あ るAra-Cは, anthra cycline-anthraquinone系 薬 剤 の い ず れ と併 用 し た 場 合 に も 相 加 的 な い し相 乗 的 な 効 果 を 示 し た.
Rajに お け る 成 績 を 表4に 総 括 す る.相 乗 的 な 併 用 効 果 は,ADMとETP (CI=0.68), ADM とCDDP (CI=0.79), ACRとVCR (CI= 0.11), THP-ADMとVCR (CI=0.52), THP -ADMとETP (CI=0
.33), THP-ADMと CDDP (CI=0.29), MXTとVCR (CI=0.52)
果 を 示 し た 薬 剤 の 組 合 せ は,ADMとAra-C (CI=1.26), ACRと4HO2-CTX (C=1.26), THP-ADMと4HO2-CTX (CI=1.48), THP-ADMとAra-C (CI=1.31), MXTとCDDP (CI=1.85)の5つ で あ り,そ の 他 の 併 用 に つ い て は 相 加 的 効 果 が 認 め ら れ た.一 方,併 用 薬 剤 側 か ら 見 る と,非 ポ ジ キ ン リ ン パ 腫(NHL) のkey drugと 目 さ れ て い るVCR, ETPは い ず れ のanthracycline-anthraquinone系 薬 剤 と の 併 用 に お い て も 相 加 的 な い し相 乗 的 効 果 を 示 し た.
図2 Rajiに お け るCDDP, ACR, CDDP+ACRのmedian effect plot (A)お よ びFaとClと の 関 係(B)
考 案 高 い 活 性 を示 す 新 薬 剤 の 開 発 と そ れ ら を 導 入 し た 多 剤 併 用 療 法 を用 い る こ とに よ り,悪 性 リ ン パ 腫 をは じめ とす る血 液 悪 性 腫 瘍 の 予 後 に は 近 年 著 し い 改 善 が 認 め られ つ つ あ る. 多剤 併 用療 法 の 目的 とす る と こ ろ は, ① 相 乗 的 あ る い は 相 加 的 効 果 が も た らす 大 き な 殺 細 胞 効 果, ② そ の こ と に よ る 薬 剤 耐 性 発 現 の 阻 止, ③ 副 作 用 の 分 散, な ど に 要 約 さ れ るが,従 来 の 多剤 併 用療 法 は も っ ぱ ら経 験 的 な 知 見 に 基 づ い て 立 案 さ れ,多 く の 臨 床 試 験 が 行 わ れ て き た.そ の 結 果,多 剤 併 用 療 法 が 効 果 的 で あ る ため の 条 件 と し て,以 下 の 事 柄 が 帰 納 さ れ た.す な わ ち, ① 単 独 投 与 で 明 らか な 活 性 を 有 す る薬 剤 を 用 い る こ と, ② そ れ ぞ れ の 薬 剤 の 作 用 機 序 が 異 な り,交 叉 耐
性 に 乏 し い こ と,
③ そ れ ぞ れ の 薬 剤 の 副 作 用 の 重 複 が 軽 微 で 各 薬 剤 のfull dose,あ る い は そ れ に 近 い 量 の 投 与 が 可 能 で あ る こ と,
な ど で あ る.
図3 HL-60に お け るETP, ACR, ETP+ACRのmedian effect plot (A)お よ びFaとClと の 関 係
一 方 よ り 効 果 的 な 併 用 療 法 を 指 向 し て ヒ ト悪 性 腫 瘍 細 胞 株 を 用 い たin vitroに お け る 検 討 が い く つ か 試 み ら れ て き た.併 用 効 果 を 評 価 す る 方 法 と し て,従 来 か らfractional product 法8)とisobologram法9,10,11)が 用 い ら れ て お り, 最 近 で はChouとTalalayに よ っ て 提 唱 さ れ たmedian effect equation に 基 づ く 方 法 (median-effect plot法)が 注 目 さ れ て い る.
median effect equationの 原 理 は,従 来 の 酵 素 反 応 の 速 度 式 にfractional velocity (Fa, Fu)
を 導 入 す る こ と に よ っ て,Km, Vmaxな ど を 用 い る こ と な く,Fa/Fuとdose (D)と の 関 係 をmedian effect dose (Dm)と 係 数(m)を 用 い て 表 し た も の で あ り12),阻 害 剤 の 酵 素 反 応 に 及 ぼ す 影 響 を 反 応 の タ イ プ や 基 質 の 数 に 無 関 係 に 表 す こ と が で き る8,13,14).す な わ ち,こ の 方 法 に お い て は,併 用 す る 薬 剤 の 作 用 が 競 合(mutually exclusive),非 競 合(mutually non-exclusive)
い ず れ の 場 合 に お い て も,2つ の 薬 剤 の 併 用 効 果 を 理 論 的 に 予 測 し,予 測 値 と 実 測 値 を 比 較 す る こ と に よ り,併 用 効 果 を 客 観 的 に 評 価 で き る15,16).ま た,最 小 限3濃 度 の 数 値 が あ れ ば median-effect plotが 可 能 で あ り,頻 回 の 実 験 操 作 を 省 略 で き る と い う 利 点 を 有 す る. 一 方 従 来 のfractional product法 に つ い て は
2つ の 薬 剤 が 別 々 の 作 用 機 転 で 標 的 細 胞 に 作 用 す る場 合,す な わ ち,非 競 合 な と き に 限 り適 切 な 評 価 が 可 能 で あ る とみ な さ れ て い る.ま た, 2つ の 薬 剤 のdose-response curveの 形 が 異 な っ て い る場 合 に も併 用 効 果 の 評 価 は で き な い と さ れ て お り,そ の 適 応 範 囲 は 限 定 さ れ て い る. ま た, isobologram法 は,各 薬 剤 のdose-response curveの 形 に か か わ らず 併 用 効 果 を正 確 に 評 価 で き る とみ な さ れ て い る が, fractional product法 の 場 合 と異 な り,両 薬 剤 が 非 競 合 な 条 件 下 で は 適 応 で き な い8)と い う制 約 が あ る.さ ら に,ひ とつ の 併 用 に つ い て 結 論 す る た め に は, い く通 り ものdose-response curveが 要 求 さ れ, 実 験 が きわめ て 煩 雑 に な る15)とい う弱 点 を有 す る. 表3 HL-60に お け るanthracycline-anthraquinone系 薬 剤 と 他 薬 剤 の 併 用 係 数 * additive ** synergistic 表4 Rajiに お け るanthracycline-anthraquinone系 薬 剤 と他 薬 剤 の 併 用 係 数 * additive ** Synergistic 今 回 著 者 は,血 液 腫 瘍 治 療 に お い てkey drug と考 え ら れ るanthracycline-anthraquinone系 薬 剤 を 中 心 に,5種 類 の 他 薬 剤 と の 併 用 効 果 を 前 述 のmedian effect analysisを 用 い て 検 討 し
た. 腫 瘍 細 胞 と し て は,NHLな い し は 急 性 リ ン パ 性 白 血 病(ALL)の モ デ ル と し てBurkittリ ン パ 腫 細 胞 由 来 のRajiを, ANLLの モ デ ル と し て 前 骨 髄 球 性 白 血 病 細 胞 由 来 のHL-60を 用 い た が,各 薬 剤 のDm(50%増 殖 抑 制 濃 度)は, Ara -Cを 除 い て は 比 較 的 類 似 して い た .す なわ ち, リ ンパ 球 系 細 胞,骨 髄 芽 球 系 細 胞 と し て の 特 徴 的 な感 受 性 スペ ク トラ ム を得 る こ とは で きず, 細 胞 株 を疾 患 モ デ ル と す る こ と の 妥 当 性 を示 す に は 至 ら な か っ た が, anthracycline-anthraquinone系 薬 剤 の 活 性, median effect analysisに よ っ て 得 ら れ た 薬 剤 併 用 効 果 の 成 績 に は い くつ か の 相 違 点 が 認 め ら れ た. ま ずanthracycline-anthraquinone系 薬 剤 の 予 測 臨 床 活 性 に つ い て み る と,両 細 胞 株 と もに THP-ADMの 活 性 が 抜 きん で て い た.他 の 報 告 で もTHP-ADMのin vitroに お け る 抗 腫 瘍 活 性 はADMよ り優 れ て い る こ とが 示 さ れ て い る が17),NHLに お け る 第 Ⅱ相 試 験 の 成 績 はADM とほ ぼ 同 等 の 活 性 を有 す る と結 論 さ れ て い る5). しか し なが ら, CHOP併 用 療 法 のADMをTHP -ADMに 置 換 したTHP-CHOP併 用 療 法 の 結 果 は そ れ ほ ど 印 象 的 とは い え ず18), in vitroの
成 績 を 臨 床 に 再 現 す る に 至 っ て い な い.HL-60 に お い て は 次 い でACR, ADM, MXTの 順, Rajiに お い て はMXT, ACR, ADMの 順 で あ
り,両 細 胞 株 間 に相 違 が 認 め られ た が, ANLL, NHLに お い て こ れ らの 活 性 の 優 劣 を検 証 す る 比 較 試 験 は な お 十 分 とは い え な い. 併 用 効 果 に つ い て は,血 液 悪 性 腫 瘍 のkey drugと も い う べ きanthracycline-anthra quinone系 薬 剤 と,単 独 に て 活 性 を 有 す る他 の 5種 類 の 薬 剤(4HO2-CTX, Ara-C, VCR, ETP, CDDP)を 組 み 合 わ せ て, median effect
analysisを 用 い て 評 価 し た.併 用 効 果 は 細 胞 株, 薬 剤 の 組 合 せ に よ っ て か な り特 徴 的 な 所 見 を得 る こ とが で き た.ま た,Faを ど こ に 設 定 す る か に よっ て い く らか 異 な る 成 績 が 得 られ た が,Fa= 0.5に お け る併 用 係 数(combination index: CI) を 指 標 に し て 評 価 す る と,相 乗 的 併 用 効 果 を 示
し た薬 剤 の 組 合 せ は,HL-60に お い て はACR とAra-C, THP-ADMとCDDP, MXTと4 HO2-CTX, MXTとAra-C, MXTとVCR, MXTとETPの6つ の 組 合 せ で あ り, Rajiに
お い て はADMとETP, ADMとCDDP, ACR とVCR, THP-ADMとVCR, THP-ADMと ETP, THP-ADMとCDDP, MXTとVCR の7つ の 組 合 せ で あ っ た.す な わ ち,HL-60に お い て はMXTが 最 も広 く他 薬 剤 との 相 乗 的 効 果 を 示 し, Rajiに お い て はTHP-ADMと の 組 合 せ が 最 も広 い相 乗 効 果 を示 した.以 上 の 所 見 か ら, anthracycline-anthraquinone系 薬 剤 の な か で はMXTとTHP-ADMが 他 剤 との 併 用 に お い て 最 も効 果 的 な 薬 剤 で あ ろ う と考 え られ た.
今 回, median effect ana1ysisの 結 果 か ら効 果 的 で あ る と結 論 さ れ た併 用 療 法 に つ い て は, そ の 臨 床 的 有 用 性 を検 証 す る こ と が 重 要 と思 わ れ る が,必 ず し も容 易 で は な い.し か しな が ら, 前 骨 髄 球 性 白 血 病 細 胞 由 来 のHL-60に お い て は,ACRとAra-Cお よ びMXTと4HO2-CTX, Ara-C, VCR, ETPと の 併 用 効 果 が 相 乗 的 で あ り,事 実, ANLLのsalvage治 療 な い しfirst line治 療 と して のMXT, Ara-C併 用 療 法19,20,21),お よ び,ACR, Ara-C併 用 療 法22,23), second line治 療 な い しは 地 固 め 治 療 と し てMXT, ETP併 用 療 法24-26)が効 果 を挙 げ て い る こ と も事 実 で あ り,臨 床 との 相 関 性 を 認 め る こ とが で き る.一 方,THP-ADMはBurkitt リンパ 腫 細 胞 由 来 のRajiに お い て,VCR, ETP, CDDPの3剤 と相 乗 的 併 用 効 果 が 認 め られ た. 前 述 の ご と く,NHLに お け るTHP-ADMの 臨 床 試 験 で は 本 剤 の 臨 床 的 有 用 性 は 必 ず し も明 確 に され て い な い が5,18),今回 の 成 績 は さ ら な る 臨 床 検 討 を促 す 所 見 で あ ろ う と考 え ら れ る. in vitroに お い て 得 られ た 新 し い 所 見 に 基 づ い て 臨 床 試 験 を実 施 し,そ れ を 立 証 す る こ とは 容 易 で は な い.し か し,現 在,肺 小 細 胞 癌 の 治 療 の なか で最 も効 果 的 とみ な され て い るCDDP・ ETP併 用 療 法 は,実 験 腫 瘍 に お い て 著 明 な 相 乗 的 併 用 効 果 が 示 され た こ とが27)その 臨 床 研 究 の端 緒 とな っ た の は ま ぎれ も な い 事 実 で あ る.最 初 に は そ のsalvage治 療 に お い て そ の 効 果 が 検 証 され28,29),続 い てfirst lineの 治 療 に お い て そ の 評 価 が 確 立 し た30-32)とい う 経 緯 を持 つ.従 っ て, 今 回最 も強 い相 乗 的 効 果 を示 した 薬 剤 の 組 合 せ をNHLあ る い は 急 性 白 血 病 のsalvage治 療 に 当 て,そ の 効 果 を検 証 して ゆ く過 程 が 必 要 で あ ろ う と思 わ れ る. 結 語 造 血 器 腫 瘍 に お け る効 果 的 な併 用 療 法 を確 立 す る 目的 で,そ の 治 療 に お け るkey drugで あ るanthracycline-anthraquinone系 薬 剤 と他 の 5剤 の 併 用 効 果 を,2つ の 細 胞 株(HL-60, Raji) を用 い てmedian plot analysisに て検 討 を加 え, 以 下 の 結 果 を得 た.
1. anthracycline-anthraquinone系 薬 剤4 剤 の 予 測 臨 床 活 性 は,THP-ADMとMXTが
高 く,ADM, ACRに 比 べ て 優 れ て い た. 2. median plot analysisに よ っ て 求 め たCI か らみ る と,前 骨 髄 球 性 白血 病 細 胞 由 来 のHL -60に お い て はACR・Ara-C THP -ADM・ CDDP, MXT・4HO2-CTX, MXT・Ara-C, MXT・VCR, MXT・ETPの 組 合 せ が 相 乗 的 効 果 を示 し,MXTに お い て 最 も広 い 相 乗 効 果 が 認 め ら れ た.ま た, Burkittリ ン パ 腫 細 胞 由 来 のRajiで は, ADM・ETP, ADM・CDDP, ACR・VCR, THP-ADM・VCR, THP-ADM・
ETP, THP-ADM・CDDP, MXT・VCRの 組 合 せ が 相 乗 的 効 果 を示 し,THP-ADMに お い て 最 も広 い 相 乗 効 果 が 認 め られ た. 3. in vitroに お い て 認 め られ た 相 乗 的 併 用 効 果 を 臨 床 に お い て 検 証 す る こ とは 容 易 で な い が,最 も 高 い相 乗 効 果 を示 し た 併 用 療 法 をsal vage治 療 に 導 入 して 検 討 す るこ とは可 能 で あ り, 妥 当 で あ ろ う と考 え ら れ た. 稿 を終 え るに あ た り,御 指導,御 校 閲 を賜 っ た木 村 郁 郎教 授 に深 甚 の 謝意 を表 します.ま た 終始 御 指 導 を賜 った 大熨 泰 亮助 教 授 な らびに林 恭 一 博士 に深 謝 い た し ます.本 論 文 の要 旨は 第46回 日本癌 学 会 総 会 に おい て発 表 した. 文 献
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