3－1
最 強 の シ ェ ル タ ー ！ ア ル テ ミ ア の 耐 久 卵 を 孵 化 さ せ る に は ？
研 究 者 小 山 田 渓 乃 村 上 史 佳 安 江 望 担 当 職 員 清 水 加 奈 １ ． ア ル テ ミ ア と は ？ ア ル テ ミ ア は 節 足 動 物 門 ・ 甲 殻 亜 門 ・ 無 甲 目 ・ ア ル テ ミ ア 属 に 属 す る 種 の 総 称 で 、 ホ ウ ネ ン エ ビ と 同 じ 目 に 属 す る 。今 回 材 料 に 用 い た a r t e m i a s a l i n a は「 ブ ラ イ ン シ ュ リ ン プ 」 と も 呼 ば れ る （ 以 下 本 文 で は a . s a l i n a を ア ル テ ミ ア と 呼 ぶ ）。 英 語 で ブ ラ イ ン( b r i n e ) は 「 塩 水 」、 シ ュ リ ン プ( s h r i m p ) は 「 小 エ ビ 」 と い う 意 味 で 、 ア ル テ ミ ア は 多 く の 生 物 が 生 活 で き る 海( 塩 濃 度 約 ３ ．５ ％ ) で は な く 、陸 地 に あ る 塩 濃 度 の 高 い 湖 ( 塩 濃 度 が ８ ‐ ２ ５ ％ ) に 生 活 し て い る 。 日 本 の 自 然 に は 見 ら れ ず 、 ア メ リ カ 合 衆 国 の グ レ ー ト ソ ル ト 湖 （ 図 ２ ） な ど で 多 く 見 ら れ る 。 ア ル テ ミ ア の 祖 先 は 数 億 年 前 の 古 生 代 で 現 れ た と い わ れ 、1 億 年 程 前 か ら 形 態 が 変 化 し て い な い た め 、「 生 き た 化 石 」 と 呼 ば れ て い る 。 図 １ ． ア ル テ ミ ア の 成 体 図 ２ ． グ レ ー ト ソ ル ト 湖 2 ． ア ル テ ミ ア の 耐 久 卵 ア ル テ ミ ア の 雌 は 生 活 し て い る 環 境 が 生 育 に 適 し て い る 時 、 育 房 か ら 直 接 幼 生 （ ノ ー プ リ ウ ス ）を 産 む が（ 卵 胎 生 ）環 境 が 適 し て い な い と き は 、耐 久 卵 を 生 む（ 図 ３ ）。耐 久 卵 と は 発 生 が 原 腸 胚 で 止 ま っ た 状 態 で あ り 、 長 期 間 の 乾 燥 に 耐 え る こ と が で き る 。 耐 久 卵 は 一 度 乾 燥 を 経 験 し な い と 孵 化 す る こ と が で き な い と い わ れ て い る 。 ふ つ う 耐 久 卵 は ２ ５ ℃ の 塩 濃 度 ２. ０ ％ の 食 塩 水 に 浸 水 さ せ る と 、約 ２ ４ 時 間 後 に 孵 化 す る 。 ア ル テ ミ ア の 耐 久 卵 が 乾 燥 に 耐 え る た め の 仕 組 み は 明 ら か に さ れ て い な い が 、 耐 久 卵 に は 、 ト レ ハ ロ ー ス と い う 物 質 が 乾 燥 重 量 の １ ５ ％ ほ ど 含 ま れ て い て 、 こ の ト レ ハ ロ ー ス の 作 用 に よ り 環 境 へ の 耐 性 を も つ と い わ れ て い る 。3－2 図 ３ ． ア ル テ ミ ア の 雌 が 産 む 幼 生 と 耐 久 卵 （ 予 備 実 験 ） ① ア ル テ ミ ア 耐 久 卵 の 大 き さ 今 回 の 実 験 で は 材 料 と し て テ ト ラ ブ ラ イ ン シ ュ リ ン プ エ ッ グ ス を 用 い た （ 図 ４ ）。 テ ト ラ ブ ラ イ ン シ ュ リ ン プ エ ッ グ ス は 乾 燥 状 態 の 耐 久 卵 で あ り 、主 に ア メ リ カ や 中 国 か ら 輸 入 さ れ て い る 。ア ル テ ミ ア の 幼 生 は 観 賞 魚 の 稚 魚 の 餌 と し て 一 般 に 用 い ら れ る 。 顕 微 鏡( ケ ニ ス F K - S ) と 接 眼 ミ ク ロ メ ー タ ー を 使 用 し て 乾 燥 時 と 浸 水 時 の 耐 久 卵 の 大 き さ を 調 べ た 。 倍 率 は 1 0 0 倍 で 測 定 し た 。測 定 部 位 は 図 ５ の a - c で あ る 。そ れ ぞ れ の 長 さ を 表 １ に 示 す （n は 計 測 し た 個 体 の 数 ）。 乾 燥 時 浸 水 時 図 ５ ． 耐 久 卵 の 測 定 に つ い て 表 １ ．a - c の 長 さ （ µ m ） a b c 2 0 8 . 5 1 5 5 . 2 2 3 5 . 3 n = 1 6 n = 6 n = 2 3 図 ４ ． 耐 久 卵 の パ ッ ケ ー ジ
a
b
c
図 ４ ． 耐 久 卵 の パ ッ ケ ー ジ3－3 ② ア ル テ ミ ア 耐 久 卵 の 浸 水 後 の 変 化 （ 経 過 時 間 を 下 に 示 す ） 耐 久 卵 を ２. ０ ％ 食 塩 水 に 入 れ 、 １ ０ 分 ご と に 観 察 し た 。 耐 久 卵 は 下 の よ う に 約 １ 時 間 で ほ ぼ 球 形 に な る 。 １ ０ 分 後 ２ ０ 分 後 ３ ０ 分 後 ４ ０ 分 後 ５ ０ 分 後 ６ ０ 分 後 3 ． 動 機 ・ 目 的 乾 燥 し て 凹 ん だ 状 態 の 耐 久 卵 を 食 塩 水 に 浸 す と 、 た っ た １ 日 で 生 き 返 っ た よ う に 孵 化 し た 。 こ れ は 耐 久 卵 の 中 で 発 生 が 止 ま っ て い た 原 腸 胚 期 が 、 水 を 吸 収 し て 発 生 を 進 め て 幼 生 に な っ た た め で あ る 。 私 た ち は こ の よ う な 耐 久 卵 の 性 質 を 知 っ て 衝 撃 を 受 け 、 ア ル テ ミ ア の 耐 久 卵 の 環 境 刺 激 に 対 す る 強 さ の 度 合 い や そ の 理 由 に つ い て 知 り た い と 考 え た 。 今 回 の 実 験 で は 、 ア ル テ ミ ア の 耐 久 卵 の 塩 濃 度 の 変 化 や 冷 却 ・ 加 熱 に よ る 孵 化 へ の 影 響 を 調 べ よ う と 考 え た 。 ま た 、 耐 久 卵 は ２ ０ 年 以 上 の 乾 燥 に 耐 え る こ と も あ る と さ れ て い る が 、 乾 燥 状 態 の 耐 久 卵 が 浸 水 の 後 に 再 び 乾 燥 を 経 験 し て も 孵 化 が 可 能 で あ る か に つ い て も 調 べ る 。 4 ． 実 験 方 法 今 回 の 研 究 で は 、 Ⅰ ． 塩 濃 度 、 Ⅱ ． 乾 燥 ・ 浸 水 、 Ⅲ ． 冷 却 ・ 加 熱 の ３ つ に つ い て 実 験 を 行 っ た 。 《 実 験 Ⅰ- ① ． 孵 化 に 最 適 な 塩 濃 度 》 耐 久 卵 を 、 ６ つ 設 定 し た 塩 濃 度 の 食 塩 水 に 入 れ 、 塩 濃 度 に よ る 孵 化 へ の 影 響 を 調 べ た 。 テ ト ラ ブ ラ イ ン シ ュ リ ン プ エ ッ グ ス に 添 付 さ れ て い る 説 明 書 に は 、耐 久 卵 を 孵 化 さ せ る 際 、 約 ２. ０ ％ の 食 塩 水 に 入 れ て 一 日 置 く よ う に 書 か れ て い る 。そ の た め ２ . ０ ％ と そ の 他 ０ ％ 、 ３. ５ ％ 、８ . ０ ％ 、１ ７ ％ 、２ ５ ％ の 塩 濃 度 を 設 定 し 、実 験 を 行 っ た 。な お 、３ . ５ ％ は 海 水 の 平 均 の 塩 濃 度 で あ り 、８- ２ ５ ％ は グ レ ー ト ソ ル ト 湖 で 測 定 さ れ る 塩 濃 度 で あ る（ 表 ２ ）。 ビ ー カ ー に 食 塩 水 （ １ ５ ０ ㎖ ） と さ じ １ 杯 分 の 耐 久 卵 を 入 れ て 、 ２ ５ ℃ に 保 っ た イ ン キ ュ ベ ー タ ー 内 に ２ ４ 時 間 入 れ て 孵 化 さ せ た 。 実 験 に 用 い た 耐 久 卵 は 、 食 紅 用 の さ じ を 用 い て 計 測 し た 。さ じ 一 杯 あ た り の 耐 久 卵 は ０. ０ ４ g で あ り 、約 １ １ ０ ０ ０ 個 が 含 ま れ る 。浸
3－4 水 さ せ た ２ ４ 時 間 後 に ビ ー カ ー を イ ン キ ュ ベ ー タ ー か ら 取 り 出 し 、 ビ ー カ ー 内 の 幼 生 数 を 数 え た 。 幼 生 数 は 駒 込 ピ ペ ッ ト を 使 い 、 ピ ペ ッ ト 内 で 遊 泳 し て い る 幼 生 を 肉 眼 で 確 認 し て 算 出 し た 。 ２ . ０ ％ 説 明 書 に 記 入 さ れ て い る 塩 濃 度 ３ . ５ ％ 海 水 の 平 均 的 な 塩 濃 度 ８ . ０ － ２ ５ ％ グ レ ー ト ソ ル ト 湖 で 測 定 さ れ る 塩 濃 度 １ ７ ％ 濃 口 醤 油 の 塩 濃 度 表 ２ ． 塩 濃 度 に つ い て 《 実 験 Ⅰ- ② ． 孵 化 の 限 界 塩 濃 度 》 実 験 Ⅰ- ① で 出 た 結 果 を も と に 、耐 久 卵 が 孵 化 で き る 限 界 の 塩 濃 度 を 調 べ た 。使 用 す る 耐 久 卵 の 計 測 法 や 温 度 な ど の 実 験 条 件 は 実 験 Ⅰ- ① に 準 ず る 。 塩 濃 度 は ８ . ０ － １ ６ ％ ま で を ２. ０ ％ 間 隔 （ ８ . ０ ％ 、 １ ０ ％ 、 １ ２ ％ 、 １ ４ ％ 、 １ ６ ％ ） で 設 定 し 、 孵 化 し た 幼 生 の 有 無 に つ い て １ ０ 日 間 調 べ た 。 《 実 験 Ⅱ ． 耐 久 卵 が 浸 水 後 に 乾 燥 を 経 験 す る こ と に よ る 孵 化 へ の 影 響 》 ビ ー カ ー に さ じ １ 杯 分 の 耐 久 卵 と 塩 濃 度 ２. ０ ％ の 食 塩 水（ １ ５ ０ ㎖ ）を 入 れ て 、図 ６ に 示 し た よ う に 耐 久 卵 を 浸 水 ・ 乾 燥 の 条 件 に 置 い た 。 耐 久 卵 を 再 び 乾 燥 さ せ る 際 は 、 耐 久 卵 を 入 れ た ２. ０ ％ 食 塩 水 を ろ 過 し 、 耐 久 卵 の 付 着 し た ろ 紙 を イ ン キ ュ ベ ー タ ー に 入 れ た 。 A ）耐 久 卵 を １ ２ 時 間 浸 水 条 件 に 置 い た の ち に ３ ０ 分 間 乾 燥 さ せ て 、再 び ２ . ０ ％ 食 塩 水 に 入 れ ２ ４ 時 間 ２ ５ ℃ の 条 件 に 置 い た 。 B ）耐 久 卵 を １ ２ 時 間 浸 水 条 件 に 置 い た の ち に １ ２ 時 間 乾 燥 さ せ て 、再 び ２ . ０ ％ 食 塩 水 に 入 れ ２ ４ 時 間 ２ ５ ℃ の 条 件 に 置 い た 。 C ）耐 久 卵 を １ ２ 時 間 浸 水 条 件 に 置 い た の ち に ２ ４ 時 間 乾 燥 さ せ て 、再 び ２ . ０ ％ 食 塩 水 に 入 れ ２ ４ 時 間 ２ ５ ℃ の 条 件 に 置 い た 。 A - C の そ れ ぞ れ に つ い て 、 孵 化 し た 幼 生 数 を 調 べ た 。 幼 生 数 の 算 出 方 法 は 実 験 Ⅰ - ① と 同 様 で あ る 。 孵 化 孵 化 孵 化 １２時間 ２４時間
A
C
B
図 ６ ． 実 験 Ⅱ の 浸 水 ・ 乾 燥 条 件 《 実 験 Ⅲ ． 冷 却 ・ 加 熱 に よ る 影 響 》 冷 却 ） 耐 久 卵 を ア ル ミ ニ ウ ム 箔 に 包 み 、 冷 凍 庫 内 （ － １ ０ ℃ 以 下 ） に ２ ４ 時 間 置 い た 。 加 熱 ① ） 耐 久 卵 を ア ル ミ ニ ウ ム 箔 に 包 み 、 ５ 秒 間 ガ ス バ ー ナ ー で 加 熱 し た 。 浸 水 乾 燥3－5 加 熱 ② ） 耐 久 卵 を ア ル ミ ニ ウ ム 箔 に 包 み 、 １ ５ 秒 間 ガ ス バ ー ナ ー で 加 熱 し た 。 加 熱 ③ ） 耐 久 卵 を ア ル ミ ニ ウ ム 箔 に 包 み 、 ３ ０ 秒 間 ガ ス バ ー ナ ー で 加 熱 し た 。 以 上 ４ つ で は す べ て 実 験 Ⅰ ・ Ⅱ と 同 量 の 耐 久 卵 を 用 い た 。 上 記 ４ 条 件 分 の 耐 久 卵 を ２ ％ 食 塩 水 に 入 れ ２ ５ ℃ で ２ ４ 時 間 静 置 し 、 個 体 数 を 調 べ た 。 ５ ． 結 果 《 実 験 Ⅰ- ① ． 孵 化 に 最 適 な 塩 濃 度 》 浸 水 ２ ４ 時 間 後 に 孵 化 し た 幼 生 数 と 孵 化 率 は 表 ３ お よ び 図 ７ の よ う に な っ た 。 孵 化 率 は 塩 分 ２. ０ ％ の 時 最 も 高 く 、 グ レ ー ト ソ ル ト 湖 の 塩 濃 度 に 近 い ８ . ０ － ２ ５ ％ で は ２ ４ 時 間 後 の 孵 化 は 認 め ら れ な か っ た 。 た だ し 、 塩 濃 度 ８ ％ に 浸 水 し た 場 合 は 、 ３ 日 後 に ３ ８ １ 個 体 が 孵 化 し て い た 。 一 方 食 塩 を 全 く 入 れ て い な い ０ ％ の 場 合 で も 、 １ ６ 個 体 が 孵 化 し 、 ビ ー カ ー 内 を 遊 泳 し て い た が 、 浸 水 か ら ３ 日 後 に は す べ て 死 ん で い た 。 塩 濃 度 （ ％ ） ０. ０ ２ . ０ ３ . ５ ８. ０ １ ７ ２ ５ 孵 化 数 １ ６ １ ３ ０ ０ ９ ０ ０ ０ ０ ０ 孵 化 率 （ ％ ） ０ ． １ ４ １ ０ ． ８ ８ ． １ ８ ０ ０ ０ 表 ３ ． 実 験 Ⅰ ‐ ① 孵 化 し た 幼 生 数 と 孵 化 率 0.14% 10.80% 8.18% 0% 0% 0% 0.00% 2.00% 4.00% 6.00% 8.00% 10.00% 12.00% 0 200 400 600 800 1000 1200 1400 0.0% 2.0% 3.5% 8.0% 17% 25% 孵化数 孵化率 図 ７ ． 実 験 Ⅰ ‐ ① 孵 化 し た 幼 生 数 と 孵 化 率 《 実 験 Ⅰ- ② ． 孵 化 の 限 界 塩 濃 度 》 実 験 Ⅰ の 結 果 を も と に 、 ８ ％ か ら １ ６ ％ の 間 の 濃 度 の 食 塩 水 を 作 り 、 １ ０ 日 間 様 子 を 見 た 結 果 、 表 ４ の よ う に な っ た 。 － は ま だ 孵 化 し て い な い 状 態 、 ○ は 孵 化 し た 個 体 が 現 れ た こ と を 示 す 。 ８ ％ 食 塩 水 に ２ 日 間 置 い た 場 合 で は 、 目 算 で １ ０ ０ ０ 個 体 以 上 が 、 １ ０ ％ 食 塩 水 に ２ 日 間 置 い た 状 態 で は ２ ０ ０ 個 体 前 後 の 幼 生 が 孵 化 し た 。１ ２ ％ 以 上 の 食 塩 水 で は 、 塩 濃 度 孵 化 率 （ ％ ） 孵 化 し た 幼 生 数
3－6 １ ０ 日 経 過 し た 後 で も 幼 生 の 孵 化 か 見 ら れ な か っ た 。 ８ ％ 、 １ ０ ％ 、 １ ２ ％ の 耐 久 卵 に つ い て 、 浸 水 ２ 日 後 の 様 子 を 図 ８ に 示 す 。 １ ０ ％ で は 凹 み が ほ と ん ど な く な り 球 形 に 近 い 状 態 に な っ て い る が 、 １ ２ ％ で は 乾 燥 状 態 の 形 態 と あ ま り 変 わ ら な い 。 ８ ． ０ ％ １ ０ ％ １ ２ ％ １ ４ ％ １ ６ ％ １ 日 後 － － － － － ２ 日 後 ○ ○ － － － ３ 日 後 － － － １ ０ 日 後 － － － － … 孵 化 し て い な い ○ … 孵 化 し た 表 ４ ． 実 験 Ⅰ- ② 結 果 ８ ％ １ ０ ％ １ ２ ％ 図 ８ ． 浸 水 ２ 日 後 の 耐 久 卵 《 実 験 Ⅱ ． 耐 久 卵 が 浸 水 後 に 乾 燥 を 経 験 す る こ と に よ る 孵 化 へ の 影 響 》 実 験 Ⅱ の 結 果 を 表 ５ お よ び 図 ９ に 示 す 。A （ 乾 燥 ０ . ５ 時 間 ） の 孵 化 率 は 実 験 Ⅰ の ２ . ０ ％ 食 塩 水 に 浸 水 さ せ た 場 合 の 孵 化 率（ １ ０. ８ ％ ）の ３ 倍 近 く 高 い 。ま た A の 時 に 比 べ 、B（ 乾 燥 １ ２ 時 間 ） と C （ 乾 燥 ２ ４ 時 間 ） で は 圧 倒 的 に 孵 化 率 が 低 く な っ た 。 表 ５ ． 実 験 Ⅱ の 幼 生 数 と 孵 化 率 Ａ Ｂ Ｃ 孵 化 数 3 7 1 8 2 8 8 4 1 4 孵 化 率 （ ％ ） 3 3 . 8 2 . 6 2 3 . 7 6
3－7 図 ９ ． 実 験 Ⅱ 孵 化 し た 幼 生 数 と 孵 化 率 《 実 験 Ⅲ ． 冷 却 ・ 加 熱 に よ る 影 響 》 孵 化 に つ い て の 結 果 を 表 ６ に 示 す 。冷 却 し た 耐 久 卵 は 、３ ０ ４ ６ 匹 の 孵 化 が 確 認 さ れ た 。 こ の こ と か ら 耐 久 卵 は あ る 程 度 の 低 温 状 態 に お い て も 影 響 が な く 、 孵 化 す る こ と が 可 能 で あ る こ と が わ か っ た 。 加 熱 し た 耐 久 卵 は い ず れ の 場 合 も 孵 化 し な か っ た 。 ガ ス バ ー ナ ー で ５ 秒 以 上 加 熱 す る と 孵 化 で き な く な る こ と が わ か っ た 。加 熱 時 間 が ５ 秒（ 加 熱 ① ）、１ ０ 秒（ 加 熱 ② ）の 耐 久 卵 は 浸 水 の ２ ４ 時 間 後 に ほ ぼ 球 形 に な っ た 。 一 方 、 ３ ０ 秒 （ 加 熱 ③ ） 加 熱 し た 場 合 で は 、 ２ ４ 時 間 浸 水 さ せ て も 乾 燥 状 態 と 変 わ ら ず 、 凹 ん だ 状 態 の ま ま で あ る 。 冷 却 加 熱 ① 加 熱 ② 加 熱 ③ ２ ４ 時 間 後 ○ － － － － … 孵 化 し て い な い ○ … 孵 化 し た 表 ６ ． 実 験 Ⅲ の 結 果 ５ 秒 １ ５ 秒 ３ ０ 秒 図 １ ０ ． 実 験 Ⅲ の 加 熱 後 ２ ％ 食 塩 水 に ２ ４ 時 間 浸 水 さ せ た 耐 久 卵 孵 化 率 （ ％ ） 孵 化 し た 幼 生 数
3－8 ６ ． 考 察 《 実 験 Ⅰ- ① ． 孵 化 に 最 適 な 塩 濃 度 》 ア ル テ ミ ア は 塩 濃 度 ０ － ８. ０ ％ の 範 囲 で 孵 化 が 可 能 で あ り 、そ の う ち ２ . ０ － ３ . ５ ％ の 周 辺 の 濃 度 が 孵 化 に 適 し て い る こ と が 推 測 さ れ る 。 一 方 ア ル テ ミ ア が 生 息 し て い る グ レ ー ト ソ ル ト 湖 の 塩 分 は ８ － ２ ５ ％ で あ る 。 ア ル テ ミ ア が こ の よ う な 高 濃 度 の 塩 湖 で 生 息 で き る 理 由 の 一 つ に 、 塩 湖 の 塩 分 は 季 節 変 動 が 激 し い こ と が 挙 げ ら れ る 。 さ ら に 、 ア ル テ ミ ア が 孵 化 し て か ら 成 体 に な る ま で 要 す る 期 間 は １ － ２ か 月 で あ り 、 短 期 間 で 成 長 し 生 殖 す る こ と が で き る 。 そ の た め 、 ア ル テ ミ ア は 比 較 的 濃 度 が 低 い 塩 分 ８ ％ 前 後 の 時 期 に 孵 化 し 、 生 活 環 境 が 生 育 に 適 し た 期 間 中 に 急 激 に 増 殖 し て 、 生 活 環 境 が 悪 化 す る と 耐 久 卵 の 状 態 で 再 び 好 条 件 に な る の を 待 つ と 考 え ら れ る 。 ま た ア ル テ ミ ア は 塩 湖 に 生 息 す る に も か か わ ら ず 、 食 塩 を 含 ま な い ０ ％ の 水 で も 孵 化 す る 個 体 が 見 ら れ た 。 耐 久 卵 は ア ル テ ミ ア の 原 腸 胚 が 休 眠 し た 状 態 の も の で あ り 、 食 塩 水 に 浸 す と 発 生 を 再 開 し て 幼 生 が 孵 化 す る 。 耐 久 卵 が ０ ％ で も 孵 化 し た こ と か ら ア ル テ ミ ア の 幼 生 は 、 あ る 一 定 よ り も 低 濃 度 の 食 塩 水 に 浸 せ ば 耐 久 卵 か ら 孵 化 す る こ と が で き 、 幼 生 ま で の 発 生 や 孵 化 に 塩 分 は ほ と ん ど 必 要 な い と 考 え ら れ る 。 《 実 験 Ⅰ- ② ． 孵 化 の 限 界 塩 濃 度 》 耐 久 卵 は 塩 濃 度 が ３. ５ ％ ま で の 時 は 約 ２ ４ 時 間 で 孵 化 す る の に 対 し 、 ８ . ０ ％ で は ４ ８ 時 間 で 約 １ ０ ０ ０ 匹 の 孵 化 が 確 認 さ れ 、 １ ０ ％ で は ４ ８ 時 間 で 約 ２ ０ ０ 匹 と 、 濃 度 が 高 い ほ ど 孵 化 す る た め に 時 間 を 要 す る こ と が わ か っ た 。 以 上 の こ と か ら 、 耐 久 卵 の 外 界 の 塩 濃 度 が 低 い ほ ど 耐 久 卵 は 早 く 発 生 を 進 行 さ せ る こ と が で き る と 考 え ら れ る 。 さ ら に １ ２ ％ 以 上 の 食 塩 水 で は 浸 水 か ら １ ０ 日 間 経 過 し て も 孵 化 が 認 め ら れ な か っ た 。 一 方 、 図 ８ の よ う に １ ０ ％ 食 塩 水 に 浸 し た 耐 久 卵 の 一 部 や １ ２ ％ 食 塩 水 に 浸 し た 耐 久 卵 は ２ ４ 時 間 経 過 し た 後 も 凹 ん だ ま ま で あ る こ と が 観 察 さ れ た 。 凹 ん だ 状 態 の 耐 久 卵 は 十 分 に 水 分 を 吸 収 し て い な い と 考 え ら れ る 。 そ の た め 、 耐 久 卵 は 浸 透 圧 を 利 用 し て 外 界 か ら 水 分 を 吸 収 し て お り 、 吸 水 す る た め に は 外 界 の 塩 水 は あ る 程 度 塩 濃 度 が 低 い 状 態 で あ る 必 要 が あ る と 推 測 さ れ る 。 ま た 、 表 ４ よ り 耐 久 卵 が 孵 化 す る 限 界 の 濃 度 （ 孵 化 の 限 界 塩 濃 度 ） は １ ０ ％ か ら １ ２ ％ の 間 に あ り 、 こ の 濃 度 は 同 時 に 耐 久 卵 が 水 分 を 吸 収 す る 限 界 で あ る と 考 え ら れ る 。 《 実 験 Ⅱ ． 耐 久 卵 が 浸 水 後 に 乾 燥 を 経 験 す る こ と に よ る 孵 化 へ の 影 響 》 １ ２ 時 間 の 浸 水 後 ０. ５ 時 間 乾 燥 を 経 験 さ せ た 耐 久 卵 の 孵 化 率 は 、 実 験 Ⅰ の ２ . ０ ％ 食 塩 水 に 浸 水 さ せ た 場 合 の 孵 化 率 よ り も 高 く な っ た 。 実 験 Ⅰ の 考 察 で 述 べ た よ う に 、 浸 水 さ せ た 耐 久 卵 は 浸 透 圧 に よ っ て 外 界 か ら 水 分 を 吸 収 す る と 考 え ら れ る 。０. ５ 時 間 乾 燥 さ せ た A に お い て 孵 化 率 が 下 が る ど こ ろ か 著 し く 高 く な っ た こ と は 、０. ５ 時 間 程 度 の 乾 燥 で は 耐 久 卵 の 内 部 ま で 水 分 を 失 う ま で に 至 ら ず 、 内 部 の 胚 が そ の ま ま 発 生 を 進 め る こ と が で き た た め で あ る と 考 え ら れ る 。 す な わ ち 、A で は 最 初 の 浸 水 に よ る 成 長 が そ の ま ま 継 続 さ れ 、 実 質 連 続 ４ ８ 時 間 浸 水 さ せ た こ と に な っ た と 思 わ れ る 。 乾 燥 状 態 か ら 一 度 浸 水 さ せ た 耐 久 卵 を １ ２ 時 間 以 上 乾 燥 さ せ る と 、 孵 化 率 が 著 し く 低 下 す る こ と が わ か っ た 。 こ の こ と か ら 、 一 度 吸 水 し １ ２ 時 間 以 上 経 過 し た 耐 久 卵 の 多 く は 乾 燥 に 耐 え る 性 質 を 失 っ て い る と 考 え ら れ る 。一 方 で 、B や C で も ３ ％ 前 後 の 個 体 が 孵 化 し た 。こ の こ と か ら 、浸 水 後 の 乾 燥 に 耐 え る こ と の で き る 個 体 が 少 数 存 在 す る と 推 測 さ れ る 。 こ れ は 浸 水 に 伴 う 発 生 の 速 度 に 個 体 差 が あ る た め で あ る と 考 え ら れ る 。
3－9 《 実 験 Ⅲ ． 冷 却 ・ 加 熱 に よ る 影 響 》 冷 凍 さ せ た 耐 久 卵 は 問 題 な く 孵 化 す る こ と が で き た 。 冷 凍 し た 耐 久 卵 の 孵 化 率 が 実 験 Ⅰ の ２. ０ ％ 食 塩 水 に 浸 水 さ せ た 場 合 の 孵 化 率 よ り も 高 く な っ た 理 由 は 不 明 で あ る が 、冷 凍 状 態 か ら の 温 度 上 昇 が 孵 化 率 の 改 善 に 関 与 し て い る 可 能 性 が あ る 。 耐 久 卵 が 低 温 状 態 に 耐 え る 理 由 は 耐 久 卵 に 水 分 が ほ と ん ど 含 ま れ て い な い た め で あ る と 考 え ら れ る 。 通 常 の 生 物 で は 細 胞 内 に 水 が 多 く 含 ま れ て い る た め 低 温 状 態 に 置 く と 水 の 膨 張 に よ り 細 胞 が 壊 れ て し ま う 。 は じ め に 述 べ た よ う に ア ル テ ミ ア の 耐 久 卵 に は ト レ ハ ロ ー ス が 多 く 含 ま れ て お り 、 水 分 が 非 常 に 少 な い 。 そ の た め ア ル テ ミ ア の 耐 久 卵 は 低 温 に も 耐 え る こ と が で き る と 考 え ら れ る 。 熱 耐 性 に つ い て 、 耐 久 卵 は ガ ス バ ー ナ ー で ５ 秒 以 上 加 熱 し た 場 合 は す べ て 孵 化 し な か っ た 。 こ れ は 熱 に よ る タ ン パ ク 質 の 変 性 に よ る も の で あ る と 考 え ら れ る 。 一 方 加 熱 時 間 が １ ０ 秒 以 下 の 耐 久 卵 で あ る 「 加 熱 ① 」 と 「 加 熱 ② 」 で は 浸 水 の ２ ４ 時 間 後 ほ ぼ 球 形 に な っ て い た が 、 ３ ０ 秒 加 熱 し た 「 加 熱 ③ 」 で は 凹 ん だ ま ま の 状 態 で あ っ た こ と か ら 、 ３ ０ 秒 以 上 加 熱 す る と 耐 久 卵 は 吸 水 す る 性 質 あ る い は 形 状 を 柔 軟 に 変 え る 性 質 を 失 う と 考 え ら れ る 。 ７ ． ま と め ア ル テ ミ ア の 成 体 は 生 息 環 境 が 生 育 に 適 さ な く な る と 耐 久 卵 を 産 む が 、 耐 久 卵 は 塩 濃 度 が 孵 化 の 限 界 塩 濃 度 よ り も 高 い 時 、 水 分 を 吸 収 せ ず 孵 化 し な い 。 そ の 後 、 耐 久 卵 は 乾 期 な ど の 乾 燥 状 態 を 経 験 後 、 塩 濃 度 が 孵 化 の 限 界 塩 濃 度 よ り も 低 く な る と 浸 透 圧 に よ り 吸 水 し 孵 化 が 始 ま る と い う こ と が 考 え ら れ る 。 し か し 、 耐 久 卵 が あ る 一 定 時 間 以 上 吸 水 し た 後 に 再 び 長 時 間 の 乾 燥 状 態 に 置 か れ る と 、 多 く の 個 体 が 死 ん で し ま う と 考 え ら れ る 。 ま た ア ル テ ミ ア の 耐 久 卵 は 加 熱 に は 弱 い が 、 あ る 程 度 の 低 温 に は よ く 耐 え る こ と が わ か っ た 。 今 回 は 実 験 器 具 の 都 合 上 、 飼 育 容 器 に 通 気 を 行 う こ と が で き な か っ た 。 そ の た め 、 孵 化 率 が 全 体 的 に 低 く な っ た と 考 え ら れ る 。 今 後 実 験 を 行 う 場 合 は 通 気 処 理 を 行 う た め の 工 夫 が 必 要 で あ る 。 ８ ． 参 考 ウ ェ ブ ペ ー ジ ・ 文 献 ・ 世 界 大 百 科 事 典 第 ２ 版 ア ル テ ミ ア h t t p : / / k o t o b a n k . j p / w o r d / % E 3 % 8 2 % A 2 % E 3 % 8 3 % A B % E 3 % 8 3 % 8 6 % E 3 % 8 3 % 9 F % E 3 % 8 2 % A 2 ・ ウ ィ キ ペ デ ィ ア 「 ア ル テ ミ ア 」（ 図 １ ） h t t p : / / j a . w i k i p e d i a . o r g / w i k i / % E 3 % 8 2 % A 2 % E 3 % 8 3 % A B % E 3 % 8 3 % 8 6 % E 3 % 8 3 % 9 F % E 3 % 8 2 % A 2 ・ テ ト ラ 社 公 式 H P h t t p : / / w w w. t e t r a - j p . c o m / a q u a / p r o d u c t s / f o o d / f o o d 0 4 / s h r i m p - e g g s / f o o d 1 0 . h t m l ・ 南 仏 自 然 写 真 館 （ 図 ２ ） h t t p : / / w w w. i - s u z u k i . c o m / n a n f u t s u / k o n c h u k i / i d - 7 0 . h t m l
3－10 ・C u l t u r e d A q u a t i c S p e c i e s - B r i n e S h r i m p s （ 図 ３ ） h t t p : / / w w w. f a o . o r g / f i s h e r y / c u l t u r e d s p e c i e s / A r t e m i a _ s p p / e n ・ 京 都 市 青 少 年 科 学 セ ン タ ー 塩 湖 の 不 思 議 な 生 物 「 ア ル テ ミ ア 」 h t t p : / / w w w. e d u . c i t y. k y o t o . j p / s c i e n c e / o n l i n e / s t o r y / 1 7 / i n d e x . h t m l ・ア ル テ ミ ア ト レ ハ ラ ー ゼ そ の 経 時 的 発 現 パ タ ー ン と ゲ ノ ム 構 造（ 産 業 医 科 大 学 学 会 総 会 発 表 要 旨 ） h t t p : / / c i . n i i . a c . j p / e l s / 11 0 0 0 1 2 6 1 4 4 7 . p d f ? i d = A R T 0 0 0 1 6 4 0 1 2 6 & t y p e = p d f & l a n g
= j p & h o s t = c i n i i & o r d e r _ n o = & p p v _ t y p e = 0 & l a n g _ s w = & n o = 1 3 6 1 7 5 3 2 0 0 & c p=
ク リ プ ト ビ オ シ ス: 驚 異 的 な 乾 燥 耐 性 を も つ 生 き 物 た ち
h t t p : / / c i . n i i . a c . j p / e l s / 11 0 0 0 11 5 8 6 4 6 . p d f ? i d = A R T 0 0 0 1 4 1 7 1 2 3 & t y p e = p d f & l a n g
= j p & h o s t = c i n i i & o r d e r _ n o = & p p v _ t y p e = 0 & l a n g _ s w = & n o = 1 3 6 2 0 9 9 9 4 2 & c p=
・T h e M e t a b o l i s m o f Tr e h a l o s e d u r i n g M o r p h o g e n e s i s o f t h e B r i n e S h r i m p A r t e m i a s a l i n a . A . K . H u g g i n s a n d A . P. B o u l t o n P r o c e e d i n g s o f t h e b i o c h e m i c a l s o c i e t y （ 発 表 要 旨 ） h t t p : / / w w w. n c b i . n l m . n i h . g o v / p m c / a r t i c l e s / P M C 11 7 8 9 3 1 / ? p a g e = 1 ・T h e e f f e c t o f s a l i n i t y u p o n t h e r a t e o f e x c y s t m e n t o f A R T E M I A . R . H . J E N N I N G S a n d D . M . W H I TA K E R. B i o l . B u l l . A p r i l 1 , 1 9 4 1 v o l . 8 0 n o . 2 1 9 4 - 2 0 1 ・ H i g h h y d r o s t a t i c p r e s s u r e t o l e r a n c e o f f o u r d i f f e r e n t a n h y d r o b i o t i c a n i m a l s p e c i e s D a i k i D . H o r i k a w a , K e n - I c h i I w a t a , K i y o s h i K a w a i , S h i g e n o b u K o s e k i , T a k a s h i O k u d a a n d K a z u t a k a Y a m a m o t o Z o o l o g i c a l S c i e n c e , 2 6 ( 3 ) : 2 3 8 - 2 4 2 . 2 0 0 9 . Z o o l o g i c a l S o c i e t y o f J a p a n
