日消外会誌 23(6):1220∼ 1231,1990年
大腸癌肝転移か らみた原発巣 における局所免疫能 と
プロスタグランジン E 2 との関係に関す る研究
東京大学第 1 外科 ( 指導 : 森岡恭彦教授)洲
之
内
広
紀
大腸癌 の肝転移 と原発巣局所 の免疫能 に対 す る P G E 2 の 役 害」を大腸癌4 6 例 ( 非肝転移3 2 例 : G r u o p A ; 肝 転移 1 4 例 : G r o u p B ) を 対象に検索 した。腫瘍灌流静脈血 (V),動 脈血 (A),末 檎血 (PB) を採取 し, 血 中 P G E 2 値 を R I A 法 にて測定 した。その結果 V t t P G E 2 値( 1 1 9 . l p g / m l ) はA ( 1 5 4 p g / m l ) お よび P B ( 1 3 4 p g / m l ) に 比較 して明 らかに高値 を示 した。P G E 2 V / A 比 ( 灌流 静脈血 P G E 2 値 / 動脈血 P G E 2 値 ) を 算 出す る と, G r O u p A ( 1 3 . 3 ± 2 4 ) で は G r o u p B ( 5 6 ± 0 . 6 ) に 比較 して, 有 意 に高値 を示 した。次に病理組織学的 ( 炎症細胞浸潤 の程度),免 疫組織学的 (T‐c e l l s u b s e t s ) , 生化学 的 ( P C E 2 局所不活化率) に 局所 免疫 と P G E 2 と の関係 を検討 した。肝転移群では細胞浸潤 の程度, I L 2 r e c e p t o r 陽性細胞数, P G E 2 不 活化率 いずれ も低 い値 を示 した。以上 よ りP C E 2 が 局所免疫を低下 さ せ る ことに よ り, 肝 転移 の成立 しやす い原発巣局所 の環境が作 られてい ると考 え られた。Key words : prostaglandin E, (PG&), liver metastasis of colorectal cancer, local immunity of colorectal
cancer, inactivation of PGEz in colorectal cancer tissue, immunosuppression
結 言 近年 本邦 において大腸癌 が増加 して いる。診 断技術 の進歩,治 療法 の開発,工 夫 な ど治療成績 向上への努 力 が な されてい るが,肝 転移,肺 転移 な どに よ り死亡 す る例 も少 な くない1レ上 したが って肝転移 の予防 と治 療 は大腸癌患者 の予後 向上 のため に極 めて重要 な問題 と言 える。一方夕画像診断お よび外科技術 の進歩 によ り肝切 除術 が比較的安全 に施行 され る よ うにな って き た。大腸癌の肝転移巣 に対 して も積極的 な肝切除術 が 施行 され るよ うにな り,肝 転移症例 の予後が向上す る よ うにな って きたり0.ま た予防的肝動とな どの治療 に よ り大腸癌肝転移 の予防が試み られている。●。こ うし た時代的背景の中で,大 腸癌 の肝転移の予防や治療 の ため に も,肝 転移機構 の解 明 と肝転移のハ イ リスク因 子 の検索 は極 めて重要 な今 日的課題 とな って きた.し か し従来 か ら原発巣 の病理組織学的諸因子 と肝転移 と の関係 は盛 んに検討 されて きたが,臨 床的 に十分役立 つ もの とは言 い難 か ったつ 1の現 在 で は この大 腸癌 肝 転移機序 の解 明には病理組繊学的検討 に加 えて,細 胞 生物学的 あ るいは宿主側 の因子か らの検討が必要 とさ <1990年 3月 7日 受理>別 刷請求先 :洲之内広紀 〒 113 文 京区本郷 7-3-1 東 京大学医学部第 1 外科 れてい る。 最近,腫 瘍 に対す る生体 の防御機構,特 に癌組織間 質 や癌 増 殖 先進 部 に お け る炎 症 性細 胞 浸潤 が注 目さ れ,癌 組織 において細胞浸潤 の程度が強いな どその宿 主 の予後 は よい と報告 され てい る11)121,特に癌 と担癌 生体 との接点 であ る原発巣増殖局所 における癌 に対す る免疫,い わ ゆ る “局所免疫"は 癌増殖先進部 におけ る細胞 浸潤 の程度 と関係 し,肝 転移 をは じめ とす る転 移 に対す る第 1段 階 の防御機構 として極 めて重要 であ る ことが明 らか に されつつ ある。す なわ ち大腸癌患者 において も局所免疫能 が低下すれば肝転移が起 こ りや す くな る もの と推祭 され る。 一方,プ ロスタグランジン E2(以 下 PGE2と 略す) は こ うした免疫抑制機構 に関与す る物質 として以前 よ り免疫薬理学 的 に注 目されていた が1ゆ1り,担 癌 生体 の 局 所 免 疫 能 に対 して そ の PGE2が どの よ うな作 用 を もってい るかは これ まで明 らか に されていなか った。 そ こで筆者 は大陽癌患者 において,肝 転移 とそれ に対 す る生体 の第 1段 階 の防御機構 であ る局所免疫能 の関 係 を解 明す る 目的で,PGE2に 注 目し,PGE2と 局所免 疫能 との関係 につ いて検討 を加 え,興 味あ る知見を得 たので報告す る。
1990年6月 対象 と方法 1.対 象 対象 は大腸進行癌 患者46例 とコン トロール群 として の非担癌 の胆石症患者 8例 の計54例であ る。大腸癌患 者 の内訳 は手術時 に肝転移 のみ られ なか った非肝転移 群32例 (男21例女11例,平 均年齢62.2±22歳 ),手 術 時肝転移 の認め られた肝転移群 14例 (男10例女 44/1, 平均年齢58.7±36歳 )であ った。 コン トロール群 8例 は,男 6例 女 2例 ,平 均年齢57.3±2.7歳であ った.各 群 の間 に性差年齢差 は認 め られ なか った。 部位別 では (非肝転移例 vs肝 転移例)そ れぞれ盲腸 癌 1例 (l vsO),上行結 腸癌 3例 (O vs 3)横行結腸 癌 1例 (l vsO),下 行結腸癌 4例 (4 vsO),S状 結腸 癌 13421(8 vs5)直 腸癌24例 (18 vs 6)であ った。非 肝転移32例の Dukes分 類 では Dukes A 4例,Dukes B 19例,Dukes C 9例 で あ った。 2.方 法 1)末 檎血,腫 瘍流入動脈血,お よび腫瘍濯流 静脈血 の採取法 血 中 PGE2濃 度 お よび CEA値 を測 定 す るた め に術 中 に腫瘍流 入動脈血,濯 流静脈血 お よび末檎血 を以下 の手順 にて採取 した。す なわ ち癌巣か ら流 出す る最 も 近傍 の主幹静脈 か ら採血す るため に,癌 巣 が盲腸で は 回結腸静脈,上 行結腸 で は右結腸 静脈 ,横 行結腸 では 中結腸静脈,下 行結 腸で は左結腸静脈 ,S状 結腸,直 腸 では下腸間膜 静脈 か ら採血 を行 った。腫瘍濯流静脈血 に続 いて腫瘍流入動脈血 を採取 した。 いずれ も主幹静 脈切離直前 に切離端腫瘍側主幹動 静脈 お よび外頭静脈 を テル モ21G翼 状針で穿刺 し,10mlデ スポシ リンジで 採血 し,そ れぞれ腫瘍 流入動脈血,腫 瘍濯 流静脈血 お よび末浦血 として採取 した。 コン トロール群 で は採血 手技 に関係す る血腫,腸 管 の循環 障害 な どの合併症 を 最 小限 に抑 えるため,腸 管 の動脈血 は採取 せず,ま た 結腸 静脈 の代 りとして小腸静脈血 を末檎血 とともに採 取 した。採取 した血液 は PGE2,CEA測 定,お よび単 核球 の培養 のため に直 ちに以下 の よ うに 3種 類 の採血 管 にわ けた.す なわ ち一 つは PGE2の 血 中濃度涙J定の た め に採血 後直 ち に EDTA,Indomethacin10 4Mを 含む ガ ラス採血管 に入れ,冷 却遠沈後 の上清を-80℃ にて凍結保存 した。一方 CEA値 預」定 のた め に血液 を 常温 にて遠沈 し,そ の血 清を採取 し,測 定 まで-20℃ にて保存 した。 また単核球培養のためには採取 した血 液 をヘパ リン加採血管 にいれ,分 離 まで常温 にて保存 した。 15(1221) 2)腫 瘍 濯 流 静脈 血 と末浦血 中 の単 核 球 の PGE2産 生能力 の比較 腫瘍濯流静脈血 と末給血 中 の単核球 の PGE2産 生能 力 を比較検討す るため に,上 記 の よ うに して採取 した 腫瘍濯流 静脈血 と末裕血 中の単核球 培養上 清 中 PGE2 濃度 を源」定 した。単核球 は Ficoll遠心分離法 を用 いて 1 ×1 0 6 個/ m l 分離 し, 1 0 % 子牛 血 清 ( G I B C O ) 加 RPM11640(GIBCO)溶 液 中で48時間,37℃ ,5%C02 中で培養,そ の上清中の PGE2濃 度 を測定 した。測定 は triplicateで行 い,預」定値 の近 い 2つ の値 の平均 を上清 中 PGE2濃 度 とした。 3)癌 増殖局所 にお け る病理組織 学 的検討 と炎 症 性 細胞浸潤 の検討 Hematoxylin‐Eosin染 色 標 本 に お い て癌 腫 の 中心 切 片 とそ れ に平 行 した辺 縁 2切 片 の計 3切 片 を観 察 し,病 理組織学的 に検討 した。す なわ ち腫瘍 の大 きさ, 深達度, リ ンパ管侵襲,静 脈侵襲 な どの因子 につ いて 各 部 位 に お け る血 中 PGE2濃 度 との比 較 検 討 を行 っ た。また癌増殖先進部 における細胞浸潤 の程度を Jass ら12jの分類 に準 じて,細 胞 浸潤 のほ とん ど見 られ ない ものを Gl,強 い細胞浸潤 の見 られ る ものを G3と し, その中間の ものを G2と 3段 階 に分類 した。Glか ら G3 までのそれぞれの細胞 浸潤 の程 度 と血 中 PGE2濃 度 と の比較検討 を行 った。 4)癌 増殖局所 にお け る浸潤細胞 の免疫組織 学 的 同 定 さらに新鮮凍結生標本 を用 いた免疫組織学的 な蛍光 二重染色法に よって浸潤細胞 のサ ブセ ッ トを明 らかに す る こ とに よ り,PGE2と 浸潤細胞 との関係 を検 討 し た。凍 結 生 標 本 は 切 除 標 本 を 切 除 後 直 ち に OCT‐ compoundで 包埋,ア セ トンー ドライアイスで急速凍 結 させた後,-80℃ にて凍結保存 した。この組織 を ク リ オスタ ッ トで6μに薄切 し,ア ル ブ ミンス ライ ドグ ラス にて貼付 し,風 乾 した。この組織 片 を F七 .1に 示す よ うな酵素抗体間接法 に よって染色 した。染色標 本 はオ リンパ ス落射型顕微鏡 (AH-2)で 観察 した。400倍視 野下 にて 3箇 所 において増殖先進部 の陽性浸潤細胞数 を算定 し,そ の平均 を陽性浸潤細胞 数 とした。 5)大 腸癌 組 織 お よび非癌 部 粘 膜 の PGE2不 活 化 率 の検討 大腸癌患者19例 うち肝転移例 6例 ,非 肝転移例 13例 において,大 腸癌 組織 お よび非癌 部大 腸粘膜 の PGE2 不活化率 を検討 した。 こ の うち同一症例で腫瘍濯流静 脈血 と流 入動脈血 の PGE2濃 度 も測定 した症例 は11例
16(1222)
Fig. I Method for immunohistochemical staining A ) S t a i n i n g s c h € d u l e f o r L e u z a a n d g ) S t a i n i n g s c h e d u t e f o r t l - 2 r e c e p t o r
L e u l S p o s i t i v e c e l l s
l ) W a s h i n c o l d p h o s p h a t e b u f f e r s a t i n e ( p B S ) f o r 1 5 m i n I
2 ) I n c u b a t e w i t h I : l 0 d i l u t e d b o v i n e s e r u m ( F t o w L a b o r a t o r i e s ) for 30 min at room temperature
t 3 ) w a s h i n c o l d P B S l o r 1 5 m , n - - - l - \
/
\
4 ) I n c u b a t e w i t h | : 2 0 d i l u t e d b i o t i n 4 ) I n c u b a t e w i r h | : 2 0 d i l u t e d p h y c o e r y r h n n - c o n J u g a t e d a n t i - L e u 2 a a n t i b o d y , c o n j u g a t e d a n t i _ l L - 2 r e c e p t o r a n t i b o d y ( B e c t o n - O i c k i n s o n ) { o . 1 2 h a t 4 ' C ( B e c t o n . O i c k i n s o n ) t o r 1 2 h a t 4 C t 5 ) w a s h i n c o l d P B S f o r 15 min t 6 ) I n c u b a t e w i t h | : 100 diluted FITC - c o n j u g a t e d A v i d i n (B e c r o h - Dickinson) t 7 ) W a s h in c o l d P B S for 15 min t 8 ) I n c u b a t e w i t h I :30 dituted phycoerythrin ( p e )‐conJugated ant‐Leu 15 an、し。dy (B・cton‐Dにk nson)for 6 h at 4C
＼
9)Wash n。 。d PBsす。r〕5mn 10)Emb● dhgけ ●er n であ り,他 の 8例 は組織 の PGE2不 活化率 のみを測定 した。 す なわ ち,そ の方法 は まず標本切除後直 ちに切除標 本 の癌増 殖先進 部 お よび痛巣 か ら10cm離 れた非癌部 大腸粘膜 を採取 した。これを眼科用鋏 で 5分 間細切 し, 6cmの 円形 プラスチ ック容器上 で正確 に5.00×102mg 締量 した。 これ にス トレプ トマ イシ ン20単位/mlぉ ょ びペ ニシ リン20単位/mlを 含む RPM11640(Cibco社 ) を3ml加 え,37℃ 5%C02の 条件下で 1時 間 イ ンキ ュ ベ ーシ ョンした。そ の上 清 中 の PGE2と PGE2の 不活 化代謝産物量 を測定 した。そ して組織 におけ る PGE2 の不活化率 (R)を R(%)=100× cyc10 PGE2/(Cyclo PGE2+PGE2)の 計算式 で算 出 した。 6)PGE2,PGE2の 不活化代謝物 お よび CEA濃 度 の ul」定PGE2の 測定は New Engiand Nuclearを 上の PGE2 〔1 2 5 1 〕測定 キ ッ トにて行 った。P G E 2 の 不活化代謝物で あ るケ トジ ヒ ドロプ ロスタグ ランジン E 2 ( K H 2 P G E 2 ) は不 安 定 なた め3 7 ℃2 4 時間 pH 10.4で イ ンキ ュベー シ ョン し,安 定 な cycio PGE2に変換後,cyClo PGE2 を測定 し, そ の総量 を P G E 2 の 不活化代謝物量 として 表 した。c y c 1 0 P G E 2 の測定は A m e r s h a m 社 の cyc10 P G E 2 〔3 H 〕R I A 測定 キ ットで 行 った, C a r c i n O e m ‐
大陽癌肝転移からみた原発巣における局所免疫能 日消外会議 23巻 6号
bryonic antigen(以 下 CEA)の 測定 は DAINABOT 社 の R I A キ ッ トで 行 った。P G E 2 の 測 定 上 の C V 値 ( c o e f f i c i e n t O f v a r i a t i o n ) の平均 は1 1 . 2 % で あ った。 7 ) 統 計学的処理 測定数値 は平均値 士標準誤差 ( M e a n ± S E M ) で 表 し た, 統計学的 な有意差検定は Studentのt検 定で行 い, p < 0 , 0 5 以 下 を有 意差 あ りと判定 した。 また統 計学 的 な相関関係 は s i m p l e r e g r e s s i o n a n a l y s i s にて行 った。 結 果 1 ) 腫 瘍濯流静脈血,流 入動脈血 お ょび末精血 中の P G E 2 濃 度 非担癌 の胆石症患者 8 例 ( コン トロール群)の 末精 血 P G E 2 濃 度 は1 7 . 1 ±4 . 9 p g / m l , 小揚静脈血 のそれは 1 4 8 ± 5 . 2 p g / m l であ った。大腸癌 患者46例にお け る 末補血 中 P G E 2 濃 度 は1 3 . 4 ±1 . 9 p g / m l であ り,コ ン ト ロールのそれ と比較 して差が認め られなか った。一方, 大 腸 癌 患 者 に お け る 濯 流 静 脈 血 中 PCE2濃 度 は 119.1±14.3pg/mlで あ り,末 檎血13.4±1.9pg/mlお よび獲 流 動脈 血 中 PGE2濃 度154± 2.3pg/miに 比 較 して明 らかに上昇 していた (p<0001)(Fig.2). 各血 中 PGE2濃 度 を肝転移群 と非肝転移群 とで比較 す る と末精血 にお いては肝転移群 vs非 肝転移群 それ ぞれ135± 2.4pg/mi vs 13.5±2.8pg/ml,流 入動脈血 においては11.1±2.lpg/ml vs 17.8±3 3pg/ml,腫 瘍 濯流静脈血 では143.4±25.6pg/ml vs l10.4±17.4pg/ mlで あ った。肝転移群 と非肝転移群 の間にはいずれの 血液 に も統計学的 な有意差は認め られなか った。 ところが PGE2の 濯流静脈血/動脈血比 (以下 PGE2 V/A比 と表 す)は 肝転移711では13.3±2.4と非肝転移
Fig.2 PGE2 1eVeis in patients with c010rectal
cancer and with cholecystOlithiasis.
Ｐ Ｇ Ｅ を
伽
P B A V P B A O V
c h o l e c y s t o l i t h i a s i s c o t o r e c t a t i a n c e r PB : peripheral blood, A : afferent artery V : j e j u n a l v e i n D V : d r a i n i n g v e i n
1990年6月 例5`6±0.8に比較 して平均 値 で2.3倍 と高 い値 を示 し た (p<0.001)(Fig.3)。 そ して肝転移群 では PGE2 V/ A比 が10,0以上 の症471が144/11中12例 (86%)も あ るの に対 し,非 肝転移群 で は32例中 7 Trl(22%)に す ぎな か った。 14例の同時性肝転移例 におい て この PGE2 V/A比 と肝転移巣 の数や大 きさ とを比較検討 した。症例 1)2) 4)5)に見 る ご と く肝 転 移 巣 が2.Ocm以 下 の症 例 で も PGE2 V/A比 は 全 例 高 値 を 示 し て い た。術 前 の computed tomography(以 下 CT),超 音波検査 で発見 しえず.術 中 に発見 され るよ うな徴 小肝転移 の症例 1) 2)に お いて特 に PGE2の V/A比 は20倍以 上 と高値 で あ った (Table l)。また非肝転移群 の中で経過観察 中 に 3例 (治癒切除32421中3例 -10%)が ,術 後 6か 月 か ら 9か 月に肝転移 を きた した。 これ らの症例 の原発 巣手術 時 の PGE2 V/A比 は11.2,8.2,12.9と や は り
Fig,3 PGE2 V/A Ratio in colorectal cancer patients、vith or、vithout liver inetastasis.
PGE2 V/A Ra苗o
M e a n i S E M ★ ,p<0001
・子
control no liver metast6is livef metastasis
( n = 8 ) ( n = 3 2 ) ( n : 1 4 )
o : Postoperatrve liver metastasis
Table I CEA levels and PGE, levels in colorectal cancer patients 1 7 ( 1 2 2 3 ) 高 い値 であ り, F i g 。3 に 白丸 で示 す症例 であ った. 同様 に肝転移症例 におけ る末檎血 と濯流 静脈血 中の C E A 値 と肝転移 巣 の数や大 きさ との比 較検 討 を行 っ た。T a b l e l において症例 1 ) 2 ) 4 ) 5 ) のよ うな2 . O c m 以 下の肝転移巣において末給血 と灌流静脈血 の C E A 値 との間にほとんど差が認め られなかった. 末 精血 と進 流静脈血 の C E A 値 の間に差が認め られたのは1 4 7 1 1 中 症例5 ) 6 ) 9 ) 1 3 ) の4 例 ( 2 9 % ) で あるが, い ずれ もH 2 ない し H 3 症例であった。 また 3 例 の術後肝転移症例 では T a b l e l 下段 にみ るよ うに原発巣手術時の末浦 血 C E A 値 と濯流静脈血 C E A 値 はほぼ同 じ値 であっ ブこ. 2 ) 腫 瘍 濯 流 静 脈 血 と末 浦 血 中 の 単 核 球 の P G E 2 産 生 能 力 の比 較
酎じ。4 Correlationship between PCら levels in the supernatant of cultured medium of mononuclear cells in the peripheral biood and in the draining
veln DV‐PGE2 ( n g / 賊)
5 ( n g / 記 ) PB―PGE2
PB―PGE2 1 PGE21eVetin the su,ernatant oすCuにured med um DV‐PGE2 1 PGE2 1ove in tho supernatant of Cuttured medtum
Jぃ ononuoiear ceⅢs in the draining vein
Fig.5 PGE2 V/PB Ratio in colorectal cancer patients、vith or、vithout liver inetastasis PGE2 V/PB Ratio
(n=6) (n=15) (n=4)
属
陥 雛と
' 措宿科隅 縄与
: 肝
J 的
にd
PGEz level in the suPernatant of cultured m o n o n u c l e a r c e l l s i n t h e p e r i p h e r a l b l o o d PB : poripharal blod, A : afierent a4.ry, DV
M : d . 1 . , F : i s n a l e , t : n o t h 6 $ u r . d int. : int.operative, pre : prsop.raliv., post
A g o . s e x Ｓ ｉ (ng/械) て。ど/mを ｒ． 引 ５ ９ ７ ︲ ５ ７ ７ ４ ７ ６ ６ ２ ５ ２ 郷 ４ ︲ ６ ０ ６ ５ ７ ３ ４ ８ り Ｄ Ｄ Ｏ Ｄ Ｏ Ｄ Ｄ ９ ０ い の ゅ ｎ ｍ Ｈ Ｈ Ｉ Ｈ ｌ Ｈ ｌ Ｈ ２ Ｈ ２ Ｈ ３ Ｈ ３ Ｈ ３ Ｈ ３ Ｈ ２ Ｈ ２ ” 1 0 3 0 2 0 3 5 3 0 2 0 5 0 6 0 1 5 8 0 ｉ ｎ ｔ ｒ ａ ｉ ｎ ｔ ｒ ａ 匹 沖 い い い い 昨 呼 中 い い 匹 3 5 3 9 1340 6 1 6 402 7 3426 3 7 3 9 1 7 3 1423 2 2 3 8 ３ ７ ︲ ７ ９ お ︲ ３ ︲ ７ ５ ８ ６ ︲ ０ ３ ５ ５ ８ い ︲ ５ ２ ︲ ２ ２ ︲ ３ ４ ２ ３ ６ 的 ︲ ６ ︲ ２ ７ ︲ ４ ０ ︲ ０ ６ ︲ ５ ０ ４ ４ ８ ６ ８ ︲ ︲ ９ ２ ︲ ２ ２ ７ ︲ Ｓ ︲ ５ セ ２ ３ ５ 旧 １ ８ ︲ ５ 的 “ ︲ ５ ７ ４ ５ ８ “ PGE2 V/PB Rabo=
18(1224) 腫瘍濯流静脈血 と末補血 中の単核球 の PGE2産 生能 力 を比較す るため に腫瘍灌流静脈血 と末精血か ら得 ら れた単核球 を培養 し,そ の上清中 PGE2濃 度 を測定 し たが,両者 の間 には Fig.4に み られ るよ うに正 の相関 が認め られた。 し か し肝転移群 と非肝転移群 とで検討 す る と,濯 流静脈血 と末浦血 におけ る単核球 の PGE2 産生能力 には大 きな差 はみ られ なか った (Fig.5). 3)癌 増殖局所 におけ る病理組織学的検討 と炎症性 細胞 浸潤 の検討 PGE2 V/A比 と腫場 の大 きさ,深 達度, リンパ管侵 襲 (ly因子),静 脈 侵襲 (V因 子)な どの病理組織学的 因子 との間 には統 計学 的 に有意 な差 は認め られ なか っ た (Table 2). しか し癌増殖局所 における炎症性細胞浸潤 の程度 と P G E 2 V / A 比 とを検 討 す る と P G E 2 V / A 比 は G 3 で は7.8±1.3,G2で は8.9±1.4,Glで は122± 1,4と細 胞浸潤 の程度 が高度 (G3)か ら軽度 (Gl)と 小 さくな るにつれて上 昇 し,G3と Glと の間 には統計学的 に有 意差 が認 め られた (Table 2)。また腫瘍 の浸潤様式 と の関連 を検討す る と inf 2を 示す群 の PGtt V/A比 6.4±0。9は inf γを示す群156± 3.6,お よび inf βを 示す群 10.3±1.1に比較 して統 計学 的 に有意 に低値 で あ った。 4)癌 増殖局所 におけ る浸潤細胞 の免疫組織学 的 同 定 Leu2a陽 性細胞 は緑色 に,Leu15陽 性細胞 は赤色 に 発 色 し た。 こ の た め L e u 2 a 陽性 L e u 1 5 陽性 細 胞 ( L e u 2 a ■L e u 1 5 + ) は黄色 に発色 した( F i g 。1 1 ) . L e u 2 a ■ L e u 1 5 + , すなわ ちサ プ レ ッサ ーT 細 胞数 とP G E 2 V / A 比 との間 には統計学的 に有意 な相関関係 は認め られな
Table 2 PGE2 V/A Ratio and histopathological variables 1 ) く, 0 ぐげ ( n = 1 0 ) 7 9 ± 1 8 2)10o"≦ く 30m (内=25) 97土 iONS 3)30。ば≦ (n=11) 30± 13 1)=pm (n= 9) 67士 ,0 2 ) s s 封 ( 内 = 1 9 ) l o o と1 4 N S 3 ) s 2 2 2 ( n = i 8 ) 9 7 ±1 4 l ) l y ( - ) 1 n = 3 6 ) 8 . 4 1 0 . 9 2 ) l y ( + ) ( n = t 0 ) , t . s t , . U * ' L l t 0 . 9 9 . 8 a z . o ^ ' Gro*th
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大腸癌肝転移か らみた原発巣における局所免疫能 日消外会誌 23巻 6号 か った ( F i g . 6 ) 。また インター ロイキン 2 リ セ プター ( 以下 I L ‐2 リ セ プ ター) 陽 性 細 胞 は赤 色 に発 色 した ( F i g 。1 2 ) . I L ‐2 リセ プ ター陽 性細胞 数 は P G E 2 V / A 比 が大 きくな るにつれ て減少 し, 両 者の間 には統計学 的 に負の相関関係が認め られた ( F i g . 7 ) . 5 ) 大 腸癌 組織 及 び非癌 部粘膜 の PGE2不 活化 率 の 検討 大腸癌組織 か ら遊 離 され る P G E 2 量 は1 9 例の平均で 3 9 7 . 6 ±1 0 7 2 n g / g w e t t i s s u e であ るのに対 し, 非 癌部 粘膜 で は1 0 1 . 0 ±1 4 . 4 n g / g , w . t . であ り, 両 者 の間 には 統 計学 的有意差 が認め られた ( p < 0 0 5 ) ( T a b l e 3 a ) . 一方 PGE2の 不活化代謝物の検討では癌組織 において は3 4 1 . 0 ±1 3 5 . 7 n g / g o w t Ⅲ非 癌 部 粘 膜 で は1 8 6 . 0 土 2 2 . 9 n g / g w t . であ り, 癌 組織 におけ る不活化代謝物 は 非癌部粘膜 に比較 して多 い傾 向がみ られたが,統 計学 的有 意 差 は認め られ なか った ( T a b l e 3 b ) 。ところが P G E 2 の 不 活 化 率 ( R ) % を R = 1 0 0 × c y c l o P G E 2 / ( c y c l o P G E 2 + P G E 2 ) で表す と, 癌 組織 における平均 の不活化率4 3 . 2 ±4 . 0 % は 非癌部粘膜の65.2±3.0%よFig.6 PGE2 V/A RatiO and the nurnber Of
tumor‐inllitrating Leu2a and Leu15 pOsitive cells.
Number。 すLou2a and Leu15 posit ve ce‖s
Fig. 7 Correlationship and the the number receptor positive cells. N u m b e r of lL-2 receptor p o s i t a v e cells
between PCL V/A Ratio of tumOr・inllitrating IL‐2
Y=152-08本 X r=-047.t=25 (p<005)n=25
1 9 9 0 年 6 月
Table 3 Leveis of PGE2 and its lnetabolites in the cultured tissue of colorectal cancer and norlllal
colonic mucosat
19(1225) Fig. 9 The inactivation rate of PGE, in the cul'
tured tissue of colorectal cancer and normal colonic mucosa. l n a c t i v a t i o n r a t e ( % ) り つ め ゆ ０ ０ ” い い ０ い り ゆ 的 ０ ０ の ０ ０ れ ７ ４ ６ ５ ６ ４ ５ ４ ５ ３ ５ ７ ５ ４ ６ ８ ７ ４ ５ ５ ７ ４ ７ ２ ４ ９ ６ ５ ２ ９ ４ ︲ ７ ３ ７ ６ Ａ Ｒ ｂ Ｃ 鷺 Ａ Ａ Ｄ Ｓ Ｒ Ｒ Ｓ Ｒ ｂ Ｓ 酌 Ｒ Ｓ 的 Ａ Ｒ ２ ４ ０ ２ ０ ２ ︲ ７ ２ ６ ５ ２ ４ ８ ２ ４ ０ ︻ ３ ０ ０ ︼ ． は ． ２ ４ ０ ∩ ４ ３ 土 帥 ２ ２ ∩ 0 1 o < 0 0 S ⑥ : N S ⑥ : 。く0 0 0 , 4 i n e t m e a w 出 泌°= C e E , 十にンコo ' 6 E , X 仰 o f P G E z ( o i ) c a n c e r n o r m a l c a n c e r n o l m a l t i s s u e m u c o s a t i s s u e m u c o s a
( n o liver metastasis) (liver metastais)
Fig. 10 Correlationship between PGEz V/A Ratio
and the inactivation rate of PGEz in the cultured tissue of colorectal cancer.
I n a c t i v a t i o n r a t e of PGEz
( % )
PGE2 V/A Raい0
大 腸 癌 組 織 P G E 2 不 活 化 率 の低 い症 例 ほ ど P G E 2 V / A が 高 くな ってお り, 両者 の間 には統 計学的 に負の 相関関係が認め られた ( n g 。 l o ) . P G E 2 V / A 比 は大 腸癌組織や非癌部粘膜 か らの P C E 2 遊 離畳 とは有 意 な 相関 は認 め られ なか った。 考 察 癌 に免疫応答 があ る とすれば, そ れ は癌 と担癌生体 の接点であ る癌増殖先進部 に最 も強 く現れ るはずであ る. 腫 瘍 に対す る生体 の防御機構 は細胞性免疫 がつ か ☆: p く0 0 1 ●: P < 0 0 5
Fig. 8 The inactivation rate of mary colorectal cancer tissue
liver metastasis. lnactiVation rate O f P G E 2
PGE2 in the pri‐ with or without ★:p<001 no hver metastasts ( n ‐ 1 3 ) hver metastas S ( n ‐6 ) り低値 であ り, ま た個 々の症7 1 1 において も前者 はすべ て低 い値 を示 していた, 両 者 の間 には統計学的 に有意 差が認め られた ( p < 0 . 0 0 1 ) ( T a b l e 3 c ) . さらに同時性肝転移例 の原発大腸癌組織 におけ る不 活化率2 9 . 9 ±5 . 1 % は 非肝転移例 の5 1 . 3 ±4 . 0 % に 比較 して明 らかに低値 であ った( p < 0 . 0 1 ) ( F i g . 8 ) . ま た 非癌部大腸粘膜 におけ る P G E 2 の 不 活化率 は同時性肝 転移4 / 1 では5 6 . 6 ±4 , 0 % , 非 肝転移例 で は6 9 . 4 ±3 . 1 % と前者 が低値 であ り, 統 計学的 に も有意差が認 め られ た ( p < 0 . 0 5 ) ( F i g . 9 ) . 6 ) P G E 2 V / A 比 と大 腸癌組織 P G E 2 不 活 化 率 の相 関 Y = 6 8 7 - 2 6 志 X r = - 0 7 0 , t = 2 9 ( p く0 0 5 ) n = 1 1
2 0 ( 1 2 2 6 ) 大腸癌肝転移か らみた原発巣における局所免疫能 日消外会誌 23巻 6号 局所 におけ る局所免疫能 は炎症性細胞浸潤 の程度 を指 標 とすれば早期癌 で最 も強 く, 癌 の進行度特 に転移 と ともに低下す ることを報告 した.す なわ ち癌 と生体 と の接点 における局所免疫 は肝転移 をは じめ転移 に対す る第 1 段 階の防御機構 と考 え られ,局 所免疫能が低下 すれ ば転移 が成立 しやす くなるもの と推察 され る。 局 所 免 疫 は T ‐c e l l を主体 とす る細胞 性免痩 に よ り 担 わ れ て い るが, 一 方 で そ の細 胞 性 免 疫 は P G E 2 に よって抑待J され る こ とが知 られて い る13)14)1の1 8 ) . 担癌 マ ウスの免疫不全状態1のや Hodgkin病 患者 の アネル ギ ー状態2 のが プ ロスタグ ランジンの合成阻害剤 であ る イ ン ドメサ シ ンで改善 をみた とい う報告 は PGE2が 担 癌生体 の免疫不全 に重要 な係わ り合 いを持つ ことを示 唆 して い る. しか し P G E 2 が 大腸癌原発巣 にお け る局所 免疫能 や 肝転移 とどの よ うな関係 を有す るかについては これ ま での ところ報告 がみ られていない。そ こで筆者 はまず 局所循環 の観点 か ら腫易 の影響 を最 も強 く受 けてい る と考 え られ る腫瘍濯流静脈血 ( V ) 中 P G E 2 濃 度 と腫易 流入動脈 ( A ) 中 P G E 2 濃 度 を測定 した. そ の結果腫瘍 濯 流 静脈 血 中 P G E 2 濃 度 は流 入動脈 中 P G E 2 濃 度 に比 較 して 明 らか に 高 値 で あ った。腫 瘍 濯 流 静 脈 血 中
Fig. 11 A double arrow indicates a LeuZa*Leu15+cell(yellow) ; suppressor T
cell. A single arrow indicates aLeuZa*Leu15- cell(green) ; Cytotoxic-killer T
cell. Right ; increased number of tumor-infiltrating Leu2a+Leu15* cells. Left ;
decreased number of tumor-infiltrating Leu2a*Leu15* cells
Fig. 12 An arrow indicates an lL-Z receptor posi-tive cell (red).
さどる といわれてい る.菊 池 ら19は胃癌 において非癌 粘膜 は B ‐c e l l の浸潤 が大部分であ るのに対 し,癌 組織 で は リンパ球反 応 の あ る場合 に T,cellが圧 倒 的 に多 く, し か も初期粘膜 内癌 で既 に T , c e l l がB _ c e l l に優越 していた と報告 した.また久保 田 ら1ゆは,大腸癌 におい て も癌増殖先進部 に集 る細胞 浸潤 のほ とん どが T‐cell であ る と報告 した。 さらに彼 らは大腸腺腫,大 腸早期 癌, 進 行癌 を比較検討 し, 大 腸癌患者 におけ る癌増殖
1990年6月 PGE2高 値 につ いて は筆者 が検索 した範 囲では大腸癌 ばか りか他 のいかな る腫瘍 において も今 までに報告 を み ない, 一般に固形悪性腫瘍組織では PGE2を 多 く産生す る との報告 は,Bennet21)が1977年乳癌 で報告 して以来子 宮癌221,大腸癌2り,肺 癌20などでみ られている。しか し PGE2は 1回 の肺 循環 でそ のほ とん どが代謝 され るた め,末 檎血 で PGE2の 上昇をみ ることは少 ない20。今回 預J定した大腸癌患者 での採血部位 の うち腫瘍濯流静脈 血 だ け PCE2濃 度 が上昇 していた のは この理 由に よる と考 え られ る。Vergoteら 2いも乳腺 の悪性腫瘍 組織 の PGE2濃 度 は 良性 腫 場 の そ れ に比 較 して有 意 に高 い が,末 浦血 中濃度 は必ず しも高 くなった と報告 してお り,同 様 の機序 に よる もの と考 え られ る. 一方,肝 転移群 と非肝転移群の末梢血,動 脈血,お よび濯流 静脈血 の PGE2値 を比較検 討 した が,そ の絶 対 値 で は ほ とん ど差 は 認 め られ な か った。 しか し PGE2は 局所 で産 生 され,そ の局 所 で一 部 代 謝 され る1つ41)。この よ うな物質では個 々の血 中の絶対値 をみ るよ りは,ク リア ランスを とる ことが適切 と考 え られ る。通常局所 の ク リア ランスは (V― A)/Aで 表 され る。 これ を変形す る と(V/A-1)と な り,こ の結果 V/ A比 は ク リア ランスを表 す一 つ の指標 と考 え られ る。
そ こで PGE2 V/A比 を とり,検 討すると,V/A比 は肝転移群では非肝転移群に比較 して有意に高値を示 していた。特にその直径が2.Ocm以 下の小肝転移症421 では PGE2 V/A比 は高い値を示 していた.ま た,術 後 経過観察中 (最長 3年 ,最 短 1年 6か 月)に 3例 (治 癒切除32例中 3例 ;10%)が ,術 後 6か 月から9か 月 に肝転移をきた した。これ らの症例の PGE2 V/A比 は それぞれ13.2,11.2,8.2で,Fig。3に おける白丸の症 例にあた り,手術時肝転移の発見 されなかった症例(非 肝転移群)中で も PGE2 V/A比 が高値を しめす症例で あった。一方 PGE2 V/A比 が 8以 下の低値を示 した症 例では少な くとも経過観察中 (最長 3年 ,最 短 1年 6 か月)に は術後肝転移再発が認め られていない。以上 の事実か らPCE2 V/A比 と肝転移の発症 とは密接 な 関係があ り,PGE2 V/A比 は術中の微小肝転移巣の存 在 によ り起 こると考 えられている治癒切除後肝転移の ハイ リスク群選別の指標 として有用 と考えられる。 臨床的に肝転移検索のための指標 として CEA値 が 頻用 されてお り,濯 流静脈血の CEA値 を測定 した論 文 も散見 され る2の.多 淵 ら2つは肝転移例における灌流 静脈血中の CEA値 は末精血 に比較 して全例陽性を示 2 1 ( 1 2 2 7 ) し,その損j定は肝転移 の予知 に有用 であ る と報告 した。 今 回検 索 した14例の肝 転 移 4/11にお い て濯 流 静脈 血 の CEA値 を検討 した。Table lに おいて症例 1)2)4)5)の よ うな2,Ocm以 下 の肝 転 移 巣 にお い て は末 精 血 と進 流 静脈 血 の CEA値 の間 にほ とん ど差 が認 め られ な か った。末精血 と灌 流 静脈 血 の CEA値 の間 に明 らか な差 が 認 め られ た の は14例中 症 例5)6)9)13)の4例 (29%)で あ ったが,6)9)13)の 3例 は末精血濃 度が極 めて高 いため肝転移 の存在 は臨床上 ほぼ間違 いない と 推察 され,(実 際 H2,H3症 例 であ った)術 後肝転移予 預」におけ る濯 流 静脈 血 の CEA値 測 定 の意義 は少 ない と考 え られ る。 したが って今回の検 討 か ら臨床上重要 な微 小肝転移巣 の検索 お よび治癒切除後肝転移 のハ イ リス ク群 の選 別 のた め に は PGE2 V/A比 の ほ うが CEAよ りも逢 かに優 れた指標 で あ る と考 え られ る。 濯流静脈血 中の PCE2濃 度 の上 昇機 序 につ いて は 2 つ の可能性が考 え られ る。す なわち血中因子 と腫瘍局 所 の因子 で あ る。血 中 因子 には単核球 の PCE2産 生29 のほかに採血手技 に伴 う赤血球,血 装板,血 管内皮損 傷 な どがあげ られ るが2り,今 回の採血 で は各症例 とも 同一 の採血 手技 で行 ったため,測 定値 の比較 の際 に手 技 に伴 う因子 を除外 して考 えて よい。 したが って血 中 PGE2上 昇 にお け る血 中 の主要 因子 として は単核 球 の PCE2産 生 を主 に考 えれば よい。 単核球 にはマ ク ロファージ と リンパ球 とが含 まれて い るが,PGE2を 産生す るのは主 として マ ク ロファー ジ とされ, また PGE2産 生 マク ロフアージのほ とん ど が免疫抑制性 (サプ レッサ ー)マ ク ロフアージである ともいわれ てい る3の.Balchら 31)は健 常人 と大腸癌 患 者 の末檎血 の単核球 の培養 を行 い,大 腸癌患者 の方 が 統 計学的 に有意 に PGE2の 産 生量 が多 い こ とを報告 し ブこ. これ らを考慮す る と濯流静脈血 中の PGE2濃 度 の上 昇機序 につ いては,1)灌 流静脈血 中単核球 の PGE2産 生元進,2)腫 瘍局所 の因子 の 2つ を検討す る必要 があ る と考 え られ る。そ こで筆者 は先ず,1)濯 流静脈血 中 単核球 の PGE2の 産生が元進 して い るか否 か を検索 す るため に,末 給血 と腫瘍濯 流 静脈 血 の単核球 の PGE2 産 生能 の差異 を検討 した。 この よ うに末浦血 と腫瘍濯 流静脈血 の単核球培養 を行 い,比 較検討 した報告 は こ れ までの ところみ られていない。 その結果,腫 瘍濯流 静脈血単核球 の48時間培 養上清 中 の PGE2量 は末浦血 のそれ よ りもやや上昇 していたが,今 回の検討で得 ら れた腫瘍濯流 静脈血 中 の PCE2上 昇 を説 明で き うるほ
2 2 ( 1 2 2 8 ) ど,腫 瘍濯流血 中単核球 の PGE2産 生能 が元進 してい る とはい えなか った. ところで今 回の検 討 では流入動脈血 の単核球 PGE2 産生能力 の測定 を行わ なか った。 し か し,流 入動脈血 と末浦血 の PGE2濃 度 がほぼ同 じであ った ことか ら, 流入動脈血 の単核球 PGE2産 生能 力 は末裕血 とほぼ 同 じであ る と考 えれ ば,腫 瘍灌流血 中単核球 の PGE2産 生能 が際立 って元進 して い なか った事実 か ら,PGE2 V/A比 の上昇 を血 中単核球 出来 で あ る と説 明す るに は無理 がある。したが って PGE2 V/A比 の上昇は灌流 静脈血 中単核球 の PGE2産 生能 元進 に よる もので はな く,む しろ腫瘍局所 その ものに出来 してい るもの と考 え られた。 そ こで筆者 は腫瘍局所 におけ る病理組織学的 な諸因
子 と PGE2 V/A比 との関係 につ いて検討 した。PGE2
V/A比 と腫瘍 の大 きさ,深 達度,ly,v因 子 な どとは相
関関係 は認め られ なか った。 し か し,炎 症性細胞 浸潤
の程度が高度 (G3)か ら軽度 (Gl)と 小 さくなるにつ
れ て,PCL V/A比 が増大す る傾 向がみ られ,G3と Gl
の間には統計学的に有意差が認め られた。 また腫瘍 の 浸潤 形態 と PGE2 V/A比 との比 較 で は inf β群 お よ び inf γ群 の PGE2 V/A比 は inf α群 のそれ に比べ て 高 く,い ず れ も統 計学 的有意 差 が認 め られ た (Table 2)。したが って PGE2 V/A比 には腫瘍局所 因子 として の炎症性細胞浸潤 の程度 お よび腫瘍 の浸潤形態が大 き く関与 してい る と考 え られた。 そ こで PGE2 V/A比 に炎症性細胞浸潤 の程度 が関 与 してい ることか ら,そ の詳細 を検討す るため免疫組 織 化学 的手 法 を用 いて浸潤 細 胞 の T細 胞 サ ブセ ッ ト を検 討 した。その結果,PGE2 V/A比 の上昇 とともに 腫瘍 増 殖 局所 に IL,2リセ プ ター陽 性 細 胞 数 の減 少 が 認 め られた. PCE2に はそ の免疫薬理作用 として細胞性免疫 の抑 制 1のISlとサ プ レ ッサ ー細胞 の誘導32湾いがみ られ る とさ れ てい る。免疫反応 は一般 に Helper/1nducer T細 胞 と Suppressor/Cytotoxic T細 胞相互のバ ランスに よ り営 まれてい る。 この中で,サ プレ ッサ ーT細 胞 は一 般 に免疫反応 を進 ませ ない よ うに規制す る役害」を果 た して い る と され30,腫 瘍 免 疫 に関 して は cytotOxic killer T細胞や natural killer細胞 な どの抗腫瘍 効果 を持つ細胞 の機能 を抑 えることに よ り,正 の免疫応答 を負 の方 向に向け る役害」を果 た して い る30.ま た サ プ レ ッサ ー細胞 は腫瘍免疫の抑制 のみな らず腫瘍細胞 が 生体 の免疫監視機構 か ら くぐりぬける逃避現象 に重要 大腸癌肝転移からみた原発巣における局所免疫能 日消外会誌 23巻 6号 な働 きを もつ もの として も注 目されてい る361。今 回の
検討で は PGE2 V/A比 とともに Leu2att Leu15+,すな わ ちサ プ レ ッサ ーT細 胞 数 の増加 は認 め られ なか っ た。 しか し,PGE2 V/A比 の増加 とともに炎症性細胞 浸潤 が明 らかに減 少 してい るに もかかわ らず,細 胞浸 潤 の一 つ の サ ブセ ッ トで あ るサ プ レ ッサ ーT細 胞 数 が少 な くとも減少 していない とい うことは癌増殖局所 にお いて細胞 浸潤 の中 にお け るサ プ レッサ ーT細 胞 の害J合が増加 してい ると推察す ることも可能 であ る, しか し, この問題 は さらに検討 しなければな らない。 一方,IL‐2リセプター抗体 は Uchiyamaら 3のが発見 した Tac抗 原 (T―activated antigen)に対す る抗体 と して作 られた もので,そ の陽性細胞 は活性化 リンパ球 を表 す とされてい る。 こ の意味で真 の イ ンター ロイキ ン 2リ セ プター とは多少意味合 いが異 なるが30,PGE2 V/A比 の増加 とともに活性化 リンパ球 自体 の数 が減 少 してい る ことは,細 胞性免疫 の抑制 がみ られ る と考 える ことがで きよ う。以上 の免疫組織学的 な検討 か ら PGE2 V/A比 が増 加す るにつ れ,局 所 免疫能 が低 下 し,一 種 の局所免疫不全状態 に陥 っていることが推察 された。したが って PGE2 V/A比 は局所免疫不全 を表 す一つ の指標 で あ る可能性 が示唆 された。 さ らに PGE2 V/A比 と腫瘍 の浸潤 形態 が深 い関連 を持 ってい ることが判 明 したため,筆 者 は腫瘍組織 と PGE2の 関係 を検討 してみた。Langeら 3りは ク ロ_ン 病 の大腸粘膜 と大腸癌組織 を比較 し,大 腸癌組織 にお いて PCE2不 活化酵素 の活性が低 い ことを報告 した。 筆者 も局所 において PGE2が 不 活化 され てい る ことに 注 目し,PGE2の 不活化率 を上記 の計算式 で算 出 した. その結果,大 腸癌 組織 の PGE2不 活化 率 は個 々の症例 においてすべ て非癌部粘膜 に比較 して明 らかに低 か っ た。 この事実 は癌組織 内におけ る PGE2不 活化酵素 の 活性 が非癌粘膜 に比較 して明 らか に低 い ことを示唆 し てお り,Langeら と同様 の結果が得 られた。 しか し彼 らの報告 では, ク ロー ン病 の病期 に よる違 いや大腸癌 の病理組織学的 な因子 と PGE2の 不活化率 との比較検 討 がな されていなか った,本 検 討で は 自験例19例 (肝 転移例 6例 ,非 肝転移例 1321j)で,大 腸癌組織 の PGE2 不活化 率 と病理組織学的諸因子 との比較検討 を行 った が,統 計学的 に有意差の認め られた因子は肝転移 の有 無 のみであ った。す なわ ち,肝 転移例 における大腸癌 組織 の PGE2不 活化率 は非肝転移例 に比較 して明 らか に低値 を示 した。 この ことは同時性肝転移例 の原発腫 瘍組織 内 PGE2不 活化酵素活性 が非肝転移例 に比較 し
1990年6月 て低 い こ とを示 唆 して い る.特 に PGE2不 活 化 率 が 12.8%と 最 も低 い症4/114)は著 明 な静脈 侵 襲 と リンパ 管侵嚢 を伴 った 同時性肝転移症例 であ った。 こ の症例 は PGE2の 組織不活化率が肝転移や脈管侵襲 に深 く関 与 してい る可能性 を示唆 してい る と考 え られ,今 後症 Trl数を増加 させ るこ とに よ り,そ の関連性 を よ り詳細 に検討 してゆ きたい と考 えている. 次 に大腸癌組織 の PGE2不 活化 率 と局所 免疫 不全 の 指標 と考 え られ る PGE2 V/A比 が ともに肝転移 の有 無 と深 い関係 を有 してい る ことか ら両者 の関連 を比較 検討 した結果,癌 組織 PGE2不 活化率 の低 い症例 ほ ど PGE2 V/A比 が高 くなって い る ことが明 らか となっ
た.前 述 の よ うに PGE2 V/A比 は PGE2の 癌増殖局所 にお け るク リア ランスを表 しているが,一 般に この比 は産生 と喪失 のパ ランスに よ り変化 し, この比の上昇 す る機序 は組織 におけ る PGE2産 生 の元進 お よび喪失 の低下 な どが考 えられ る。今回の検討で PGE2 V/A比 は大 腸癌 組織 か らの PGE2産 生 量 で は な く,癌 組 織 PCE2不 活化 率 の低 下 と有意 な相関が認 め られた こ と か ら,PBE2 V/A比 上昇 は PGE2喪 失 の低 下す なわ ち 癌組織 におけ る PGE2不 活化 率 の低 下 に起 因す る と考 え られ る。言 い換 えれ ば局所 にお け る PGE2不 活化酵 素活性 の低下 こそが局所免疫不全 の主要 因であ る と考 え られ る。 さらに興味深 い ことに同時性肝転移例 の非癌部大腸 粘膜 の PGE2不 活化率 は手術時肝転移 のみ られ なか っ た症例 の非癌部大腸粘膜 の PGE2不 活化率 に比較 して 有意 に低 い値 を示 していた。す なわ ち この ことは肝転 移 を有す る症例で は大腸癌組織 のみ な らず非癌部粘膜 において も PGE2の 不活化酵素活 性 が低 い ことを示 唆 してい る。 し か し, この ことを証 明す るためには, さ らに数多 くの検討 が必要 であ る。 また,今 回の検討で癌組織 か らの PGE2の 遊離 が非 癌部粘膜 に比較 して多か った事実 は一体何 に由来す る ので あろ うか。癌組織 中で PGE2を 産生す る可能性 の あ る ものは,腫 瘍細胞 自身 とマ ク ロファージや 白血球 な ど炎症性浸潤細胞 の 2種 類 が考 え られ るが,そ のい ずれ かにつ いては未だ結論 を えるまで には至 っていな い。Fultonら4いのマ ウス乳癌細胞株 における報告 にみ るよ うに PCE2を 産生す る腫瘍 細胞 が存在 す る ことも 事実 であ る。彼 らは転移能 の高 い細胞 ほ ど PGE2の 合 有量 が高 い と報告 してい る。筆者 は以下 の理 由で,癌 組織 中の PCE2の 出来 を炎症 性細胞 よ りも腫瘍 細胞 の 因子 のほ うに求 めた い。仮 に癌 組織 中 の PCE2の 由来 23(1229) が炎症 性細胞 に大 き く関与 して い る とす れ ば,PGE2 V/A比 が大 き くな るにつれ て炎 症 性細 胞 浸潤 の程 度 は 大 き くな る はず で あ る。 しか し筆 者 の検 討 で は PGE2 V/A比 が大 き くな るにつ れて炎症性細胞 浸潤 の程度 は小 さ くな っていた。 この ことか ら癌組織 中の PGE2上 昇 に炎症 性細胞 浸潤 が関与 す る害J合は少 ない と考 え られ る。 また今回の検討 で,腫 瘍 の浸潤形態 が inf αか ら inf γと圧排性 か ら浸潤性 にな るにつれ, PGE2 V/A比 が上昇していた結果からも,癌 組織中の PGE2は腫瘍細胞に由来すると考えるほ うが無理がな い. 以上,大 腸癌 の増 殖 局 所 に お け る免疫 不 全 状 態 を PGE2の 観点 か ら解析 し,肝 転移 との関連 を検討 した。 その結果,大 腸癌増殖 局所 にお け る PGE2不 活化 率 の 低下 に よ りPGE2が 局所 に蓄積 し,そ の PGE2が 局所 免痩能 を抑制 し, このため肝転移 が起 こ りやす い環境 が作 られてい る と考 え られた。 したが って,例 えばシ ク ロキ シゲナーゼ合成阻害剤 であ るイ ン ドメサ シ ン投 与 に よ りPGE2産 生 を抑制 した り,PGE2の 組織不活化 率 をなん らかの方法 で上 昇 させ るな ど,癌 増殖 局所 に おけ る PGE2を 蓄積 させ ない よ うな治療上 の工 夫 が行 えれ ば,そ れ は大腸癌肝転移 の予防や予後 向上 に繋 が る もの と推察 された。 今後大腸癌肝転移 の発生機序 に 関 して ア ラキ ドン酸 カス ケー ドとの関連 で さらに多 く の研究がな され,そ の機序が解 明 され,臨 床応用 され る ことを期待す る。 稿を終えるにあた り,御指導,御校閲を賜 りました森岡恭 彦教授に深甚なる謝意を捧げます とともに,終始御指導,御 助言を賜 りました武藤徹一郎助教授,沢田俊夫博士,斎藤英 昭博士,久保田芳郎先生,お よび医局諸兄姉に心 より御礼を 申上げます。 本論文の要旨は第88回外科学会総会 (1988.4新潟)お よ び第32回消化器外科学会 (1988.7金沢)において発表 した. また本研究の一部は文部省科学研究費63480299及び厚生省 がん研究助成金6221の補助を受けた。 文 献 1)森 岡恭彦,小西文雄,武藤徹一郎 1大腸癌患者治療 のプロ トコール.臨 外 42:802-809,1987 2)武 藤徹一郎,上谷潤二郎,沢田俊夫ほか 1大腸診断 学の歩み と外科.胃 と腸 201273-281,1985 3)Fortner JG, Silva JS, Golby RB et al:
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The Role of Prostaglandin E2 on Liver Metastasis of Colorectal Carcinoma
Koki Sunouchi
First Department of Surgery, University of Tokyo
The role of prostablandin E, (PGE) both on hepatic metastasis of colorectal carcinoma and on the local immunity at the primary site was investigated. Forty six patients with colorectal carcinoma were divided into two groups; 14 with liver metastasis (group A) and 32 without liver metastasis (group B). Samples were obtained from the draining vein, from the afferent artery, and from the peripheral vein. The level of PGE2 was measured by RIA assay for each sample. The mean level of PGE2 from the draining vein was higher than those from both the feeding artery and the peripheral vein. These differences were statistically significant. The V/A ratio of PGE, @GEz level of the draining vein,/PGE, level of the afferent artery) was also calculated. The V/A ratio of group A $/as significantly higher than that of group B. Histological (inflammatory cell infiltration), immunohistochemical (T cell subsets) and biochemical (inactivation of PGE) examinations were performed to determine the local immunity in about half of the patients. In patients with liver metastasis, inflammatory cell infiltration, IL-2 receptor positive cells infiltration and the inactivation of PGE2 were decreased. We conclude that PGE2 could play a role in suppressing local immunity and have adverse effect on liver metastasis.
Reprint requests: Koki Sunouchi First Department of Surgery, University of Tokyo 7-3-1 Hongo, Bunkyo-ku, Tokyo, ll3JAPAN
