Development of new screening methods by thin layer chromatography for abused drugs, poisons and related compounds

Development of new screening methods by thin layer chromatography for abused drugs, poisons and related compounds

著者 加藤 範行

著者別名 Kato, Noriyuki

雑誌名 博士学位論文要旨 論文内容の要旨および論文審査

結果の要旨／金沢大学大学院自然科学研究科

巻 平成21年6月

ページ 304‑307

発行年 2009‑06‑01

URL http://hdl.handle.net/2297/26952

加藤範行 博士（薬学）

博甲第１０９７号 平成２１年３月２３日

課程博士(学位規則第４条第１項）

DevelopmentofNewScreenmgMethodsbyThinLayerChromatograph fbrAbusedDrugs,PoisonsandRelatedCompounds（乱用薬物、毒物及Ｚ 関連物質を対象とする薄層クロマトグラフィーによる新規スクリーニンク 法の開発）

早川和一（医薬保健研究域・教授）

木村和子（医薬保健研究域・教授)，鳥羽陽（医薬保健研究域・准教授)，

木津良一（同志社女子大学・教授)，山本敦（中部大学・教授）

氏名 学位の種類 学位記番号 学位授与の日付 学位授与の要件 学位授与の題目

論文審査委員（主査）

論文審査委員（副査）

Abstract

Thecriminalcaseswithstimulantssucllasmethamphetamine,designersdrugsand poisonshaverecentlyincreasedandbccomeasocialproblemmJapanThescreeningas apreliminarytestisveryimportanceinordertoearlyresolutionandthereliefofcrime victims，amongseveralnlethodstoanalyzethesesubstances・Sinccthinlayer cllromatography(TLC)isthcmostsimple,basicanalyticalproccdurc,andhasalotof advantagesfortheseparationofwidelyapplicablecompounds,itisastrongcandidate fOraninitialscreenmginfOrensicscience、Nowadays，crilninalcaseswithdrugsand poisonshavevariousfOrms・Theauthorconsideredthattheconventionaltechniqueand screemngcaｎｂｅｉｍｐｒｏｖｅｄｂｙｕｓｉｎｇＴＩＣｂｅｃａｕｓｅｉthasalotofdisadvantageswith specificitylsensitivityandseparationtoanalyzethesesubstances､Thus,Authormainly researchsthenewscreenlngandanalyticalmethodusingTLCfOrthesesubstances,and appliedtosamples,Thefmlowingresultswereobtained，

LThescreeningmethodfOrabusedtertiaryaminodrugscontaining dimethylamphetamine(NNDMA)usingcitricacid/aceticanhydridereagent(CAR)on TLCplatewasdevclopedThismethoｄｗａｓａｐｐｌｉｅｄｆＯｒＮＮＤＭAabuser，surine,could

successfUllydetectthespotｏｆＮＮＤＭＡ.'）

２．ThescreeningmethodfOrsaltsofabuseddrugsandseveralanionsbyTLCwith aboveInentionedCARwasdevelopedThemethodcouldanalyzcabusedtertiary aminesandtheirsaltssimultaneously6Anditwasdemonstratedtoefficientlydetect

tOxiCarSeniteinCurrySauCe､2）

3．ThescreeningmethodfOrofp-hydroxymethamphetamine(pOHMA)inurineby TLCandHPLCwithfluorescencedetection（ＦＤ;化ｘ３２０ｎｍ－入ｅｍ４０Ｓｎｍ）was developedThepOHMAinmethamphetamineabusers,urineissuccessfillly analyzed3'4）

－３０４－

4．nlcscrecningmcthodfOrpsychoactivctryptamines(PAIも)ｂｙＴＩＣｗｉｔｈＦＤ(UV 365nm).ThismcthodiseffectivelyapplicdfOrconfiscatedPATpowdcrandPAT abusers,urine､5）

5．ThescrecningmethodfOrsixmethylencdioxylatedphenethylaminescontaining 3,4-methylcnedioxymcthamphetaminc(ＭＤＭＡ)byTLCwithFDwasdevclopcd､This

methodwaseffectivelyapplieｄｔｏＭＤＭＡａｂｕｓｅｒｓ,ｕrine,6）

【背景および目的】

現在曰本において覚せい剤やデザイナーズドラッグ等を乱用する犯罪､更に毒物を 使用した犯罪等、薬毒物に関わる犯罪が増加して社会問題となっている。これらを分 析するための方法は各種あるが、予備試験としてのスクリーニングは犯罪の早期解決 または被害者救済の観点から非常に重要と考える。分析手法においてクロマトグラフ ィーは重要な位置を占めており、中でも薄層クロマトグラフィー(TLC)は､短時間で簡 易、安価に行えることや、試料に特異的な検出方法が選択できる上、スクリーニング として多検体を同時に分析することが可能であるため、他のクロマトグラフィーに比 べメリットは多いと考える。

薬毒物を使用した犯罪が多様化した現在､従来の分析法やスクリーニング法では対 応が困難なものも出てきたため、特異J性や感度並びに分離についてTLCを使うことで 改善の余地があると考えた。そこで本研究では､ＴＬＣにより、デザイナーズドラッグ 等の乱用薬物や毒物に対する新たなスクリーニング法若しくは分析法の開発を目的と して行い、かつ実試料若しくは擬似試料への応用も併せて検討した。本研究における 主要な成果は以下の通りである。

【研究成果】

1．ＴＬＣ上でクエン酸-無水酢酸試薬(CAR)を用いて第三級アミンの乱用薬物を検出す るためのスクリーニング法を考案した。従来のＦラーゲンドルフ試薬と比較して、ジ メチルアンフェタミン(NNDMA)を含むフェネチルアミン系、フェノチアジン系、キ サンチン誘導体系、ニコチン、数種類の麻薬に関して２．５から１５倍検出感度が向上す る結果を得た。本法はＮＮＤＭＡ乱用者の尿への応用が可能である結果が得られた。’）

２．ＮＮＤＭＡ等の塩を含む２１種類の陰イオンをＴＬＣ上で検出するスクリーニング法を 考案した。上述ＣＡＲで処理をするとＴＬＣプレート全体が赤桃色に対し、陰イオンは 白色のスポットとして検出される。この方法は特に塩素酸､硫酸、リン酸、クロム酸、

重クロム酸に感度が高く、検出限界はおよそ0.02から0.05肥という結果を得た｡本法 により三級アミンの乱用薬物とその塩を同時に分析することが可能となった｡また､和歌山県 で発生した亜ヒ酸混入によるカレーライス無差別殺傷事件をモデルに作成した擬似 サンプルに本法を適用したところ､ＴＬＣ上で亜ヒ酸のスポットを検出することが出来

－３０５－

た。２）

3．ＴＬＣ上で覚せい剤であるメタンフエタミン(ＭＡＭP)の代謝物のp-ヒドロキシメタン フェタミン(pOHMA)を蛍光検出(入ｅｘ３２０ｎｍ－入ｅｍ４０５ｎｍ)するためのスクリーニング 法を提案した。また、ＴＬＣへの手法を元に液体クロマトグラフィー(HPLC)への応 用も試みた。液-液抽出及び固層抽出の複合によりｐＯＨＭＡを効率よく抽出する方法 を考案した。抽出後、ＴＬＣ及びＨＰＬＣに適用された目的成分はＴＬＣプレート上並び

にＨＰＬＣポストカラム内でフェリシアン化カリウム(Ⅲ)により酸化されpOHMA蛍光

体となり検出される｡pOHMAの検出限界はＴＬＣでlongであり､ＨPLCでＭg/ｍＬ(絶

４．５－メトキシーハHALジイソプロピルトリプタミン(5-MeO-DPT)を含むトリプタミン系 薬物(EAq[b)１０種類について蛍光体化により高感度な検出を可能にするスクリーニン グ法を開発した。各試料の青色蛍光スポットはＴＬＣプレートに次亜塩素酸ナトリウ ム、過酸化水素若しくはフェリシアン化カリウム(、)いずれかの酸化剤を噴霧後、ホ ットプレート上で加熱することで紫外線(UV)３６５，ｍのランプを照射すると観察され る。各試料の検出限界は10,9から６０，９の範囲であった。本法をPAmBの押収粉末 並びにMI1s乱用者の尿へ適用したところ良好な結果が得られた。５）

5.3,4-メチレンジオキシメタンフエタミン(ＭＤＭＡ)を含む６種類のメチレンジオキシ 環を持つフェネチルアミンのTLC/蛍光検出によるスクリーニング法を考案した。本

法はＴＬＣプレートに酸化剤として次亜塩素酸及びフェリシアン化カリウム(Ⅲ)の混

合試薬を用い､加熱することで波長範囲250,ｍから400,ｍのＵＶランプ照射下で上

述試料は青色蛍光を示す。本法による検出限界は各試料共５０，９であった｡本法を

ＭＤＭＡ錠剤並びにＭＤＭＡ乱用者の尿へ応用したところ良好な結果が得られた｡6）

【参考文献】

Kato,Ｎ・andOgamo,Ａ・(2001)脳.伽rice,41(4),239-244

Kato,Ｎ､,Sakaymagi,Ｍ､,Nakayama,、,Nishimura,Ｈ､andOgamo,Ａ・(2002)エ C7j加川α、97Ｍ,973,159-166．

Kato,Ｎ､,Kubo,HandHomma,Ｈ､(2005Ｍ"αＬＳｂｊ.,21,1117-1119．

Kato,Ｎ､,FUjita,Ｓ,Kubo,Ｈ､andHomma,Ｈ・(Z005MLj9C加川rog7UM Zbc〃"o1,28,3099-3108．

Kato,Ｎ､,KOjima,、,YOshiyagawa,Ｓ､,Ohta,Ｈ,Ibriba,Ａ,Nishimura,Hand Hayakawa,Ｋ(2007)エＣｈｍ川"9Ｍ,1Ｍｓ,229-233．

Kato,Ｎ､,FUjita,Ｓ,Ohta,Ｈ,Fukuba,Ｍ,Toriba,Ａ,andHayakawa,Ｋ・(2008）

`〃９Ｗｅ"ｓｊｃＳｂｊ.,53(6),1367-1371.

1．

２．

●●（”《．）△勾扣一，

5．

●〔ず島、叩）

－３０６－

学位論文審査結果の要旨

…[審査経過:L審査ZtZ塞士｝三従k糾基礎婁力塗確認上,…３畳曇i員!≦圭量j瓦j妾と.讃閲塗jfm迄｡L一 旦且旦且｛三目頭発表…儀終誌験)…塗f、』,…終Ｘ憧腫闇催.Ｌ迄騒終議韮i溌員会嬉諺lf1nZZ議 ｐ結晶…迭QJE・亘｣二制憲上‘た,L………－－－…－－…_………_………－－…………_…………－－

－購鴦結果]_混在2.月杢應鐙］し)エ裳i主1K.釧圭量;11量ご[:土罵慕臓乏芝ri(ご塗乱用宣萢犯罪L､菫ら

腫胤.毒物ｉ量l室田L左墾罪篝`.』蕊毒物1鰯ねる｣Ｊ曝重臘狐Ｌｎ－左室なj±含問題上など２，週輿.二 奴らの薬i雄{毒物,_関連l塑質２重分11(t::ﾂｰ三)産めＱ友迭煙種点迄薊詮.懇懇Ｑ旱:瓢耀i:R;:!i弓111篭煮救

重雄山妻ij｡！[熊な灘層之亘冠上三HZz式罵囚私点をi苣田式jln旨迄:､皇似貝飽熈恒:zL｣Z1L:三熟ご乞迭溌 開塗:X葛Z:>③煮陰轍』左とのヱゴ：宝Ｚ應棊ゴjさLE.毒式1.犯罪増２１１蕊著以〕i識二k１劃應關i塵:ｺﾞｰ畳壼 芝式士罵Ｚｌｒ乏以互及班關連物j識[対象1三』し､乱思煮尿董`ｌｍＫ工雲霧)新た蓮裏烈烹景;ZZi瀧闇 發比且夏嶋装在:宣二i爵L懇jj曇Eif2jZjji§jLtj.の勲囚孤比惑鰯塗迄關轟L処惹の鑑定能力童高め ぬ.』ﾆｵｺ仏らの友j蟻【実際ｎ重ufjj煮尿隆適思LJi:j繍晨n.岳刎罵景些<:’鷲迭とL::巨高』.>裏HJj:ｋｉ鮪:式畳 二と薮I進j認k鱒迄｡…泰lHf寵隣.翼強、X鮒z莞;の房、ｐ課題責:jii:抵丈畳友迭塗ｉｔ量t生式鼠Ｍ１蚕 迄.，.」し.､会後の屡關._e・龍展典調撹ZsL童魚風－以上!pL二糞血巨典－本審査委員会1主捜土…蟻裳Ｍ二 値丈畳と測定上上只一…－－…_………．…………＿…－－－－…－－…－－…＿…_………

－３０７－