パインアップル果実中の糖類、有機酸類の分離固定（第1報）: 沖縄地域学リポジトリ

Title

パインアップル果実中の糖類、有機酸類の分離固定（第1

_報）

Author(s)

比嘉, 信吉; 屋我, 吉一; 大城, 豊政

Citation

沖縄農業, 7(1): 31-35

Issue Date

1968-05

URL

http://hdl.handle.net/20.500.12001/1067

Rights

沖縄農業研究会

パインアップル果実中の糖類、有機酸類の分離固定（第１報）

比嘉信吉・尾我吉一・大城豊政

（琉大農化）（沖縄煙草）（オリエンタル煙草）

ShinkiChiHiga，YoshiichiYaga，andToyomasaOshiro：Separationandldentificationof

SacChoroidandorganicacidsinfruitofpinapPle（１）

第１図糖類試料調整法

Ｉ緒

一 目 パイン果実 パインアヅプル果実中の糖および酸類については多く の研究があるが，それは食品加工資料上から検討された ものが多い。例えばBrix，ｐＨ等の果実生育期間中の変 化などである．しかし，どのような種類がどれだけ含ま れているかということについては研究が少ないようであ １） ろ．現在までに知られている糖類としては蕨糖の外に転 ２） 化糖ｶﾇ含まれていること，酸類としてはクエン酸，酒石 酸，リンゴ酸が含まれることなどである．筆者等はこの 成分を追究することは食品加工の面ばかりでなく生物学 的にも意義をもつものと考え，先づペーパークロマトク ラフイーによってパインアップル果実中の糖類および酸 類を分離固定し，さらに定性反応（酸類のみ）によって も確認することができたので，取敢えず第１報として報 告する．

］Ｉ実験方法および結果

１糖類 Ａ試料の調製法 糖類試料の調製は第１図および下記補足説明の順序で 行なった． １）パインアップル果実は1967年12月26日羽地村字源河 より，スムースカイエン種の５果を採取し，糖類および 酸類分析の試料とした． ２）除蛋白は中性錯酸鉛Pb(CH3CO2)３Ｈｚ0の飽和液老 沈でんが生じなくなるまで加える．さらに過剰の錯酸鉛 を除くため炭酸ソーダを加えろ過する． ４） ３）イオン交換樹脂処理：除蛋白したろ液は前処理した イオン交換樹脂(AmberliteCG-120Na型，Amberlite lR-4BOH型)を順次にとおして糖以外の物質をできる だけ吸着せしめろ． ４）濃縮：イオン交換樹脂より流出した糖質果汁は60° Ｃの温湯で，ロータリーエパポレターによって約10剛ま ←-果頂，果底，果皮，果芯除去 ←－細断，破砕（ホモジナイザー） 毛－ガーゼ２枚重ね，搾汁 １１ 搾汁’100桃

１－遠心分離(3000回転15分）

'上清 ←－除蛋白 ←－濾過 濾液’８０砿

Iイオン交換樹脂処理

流出液’６０秘

ｌ濃縮(ﾛｰﾀﾘｰｴﾊﾞﾎﾟﾚﾀｰ）

濃縮液ｌ６０ｏＣ

義一′･愚|Ⅳ

で濃縮し，ペーパークロマトグラフィ用試料とした． ５）糖類の標準試料はすべて水で約１％溶液としてスポ ットした． ５） Ｂペーパークロマトグラフィー実験 １）ろ紙はすべて東洋ろ紙No.50を使用し，原線上２“ 間隔に濃縮試料およびスタンダード溶液を径５１，Mz位にス ポットし，室温，上昇法によって15～17噸位に１次元展 開を行なった． ２）溶媒は(a)、－プタノール：酢酸：水（４：１：５） (b)ｎ－プタノール：ピリジン：水（２：３：1.5）の２ 種類を，発色剤はアニリンフタル酸を用いた． ３）実験は(a)，(b)２種類の溶媒を用いて各２回以上展開 を行なった．

沖縄農業第７巻第１弓（１９６８） 3２ Ｃ実験結果 １）溶媒(a)による展開結果は第２図のとおりで濃縮試料 のスポットは明らかに３つに分離しており，そのRf値 はスタンダードの糖類（薦糖，葡萄糖，果糖）のRf値と 一致していることを３回の実験から確認できた． ４）有機酸のスタンダード液はすべて濃縮液同様にｐＨ 調整，アンモニア塩またはエステル化してヒドロオキサ ム酸として標準試料を調製した． Ｂペーパークロマトグラフィー実験および結果 １）クロマト用ろ紙，スポット間隔，展開法等はすべて 糖類に準じ，１次元展開を行なった． ２）溶媒および発色剤は各表のとおりである． ３）実験結果は下記，第１，第２，第３表のとおりであ る． 第２図溶媒（α）による展開 Ｒｆ値_{０９８７６５４３２１０ 結果} ●●●●●●●●●● １０００００００００ 第１表水蒸気蒸溜によって得た濃縮液をアンモニア 塩とした場合のペーパークロマトグラフィー 実験結果 (1)溶媒ｎ－プタノール：1.5Ｎ，ＮＨ３（１：１） 発色剤：プロムフェノールブルー

◎0.265

００．１９ ．○ 0.1020.102 ◎ ０．２６ 0 0.19

孟讓塗=~|発色強度|展開距離|移動距離|Ⅲ［

試料薦糖葡萄糖果糖

iｌｉＩ

ｌｌｌ

董ポョ勤

酢酸｜

カブ。ン酸ｉ

プロピオン酸’

0.0231 0.019 0.10 0.52 0.41 0.5 0.4 ＋ ＋ 十＋＋＋十 ２）溶媒(b)の展開結果からは環縮試料が第２図のように 分離しないで，一点となり，そのRf値は0.75であった． またスタンダードの蘇糖，葡萄糖，果糖溶液のＲｆ値も 0.71,0.75,0.76と接近し，判定ができなかった． 2.141 11.181

8.821

|酢

|カブ

|プ。

２酸類 Ａ試料の調製法 酸類試料の調製は第３図および下記補足説の順序によっ て行なった． ６） １）前処理した果汁（上清）は常法により，水蒸気蒸 溜，エーテル抽出，イオン交換樹脂法で，できる限り酸 以外の物質を除去して試料調製を行なった． ６),7),8） ２）イオン交換樹I旨法では前処理したAmberliteCG‐ 400CO3型およびAmberlite［R-120H型を順次使用し て有機酸を吸着せしめ，１Ｎ炭酸ナトリウムおよび１Ｎ 硫酸アンモンで溶出した．溶出液はロータリーエパポレ ターを用いて45゜～47°Ｃの温湯で約20ｶMm'に濃縮した． ３）前記３法によって得た濃縮液は定性反応供試料とす る外，ｐＨ7.5～9.0のアンモニア塩としてペーパークロ マト用とした．またイオン交換樹脂法による濃縮液は上 ９） ドロオキサム酸法によるペーパークロマト用試料調製も 行なった． (2)溶媒９５％アルコール：濃ＮＨ３（100：１） 発色剤：ブロムフェノールブルー

１－~～実験区分’

_{発色強度展開距離移動距離lRf値}

|酸の種類～～

濃縮試料｜

#…iim

lプロピオン酸’ 25.01 24.81

2481

25.1

25.11

0.781

7441

M31

16.32

,,.041

0.0311 0.30 0.34, 0.65 0.44 十 十 ＋＋ 十十十＋十

比嘉・屋我・大城：パインアップル果実中の糖類、有機酸類の分離同定 ３３ 第３図酸類試料調製法 風乾 果底除去 破砕(ホモジナイザー） ２枚重ね搾汁 遠心分離(3000回転15分） 上漬ｌｌＯＯｍｌ lOOml 上漬 100ｍI （２以下)調整 (硫酸酸性） ｐＨ(1.4～2.6)調整 （硫酸酸性） 醜樹脂処j１ｆ 水蒸気蒸溜(Ａ） エーテル抽出(Ｂ） 受器に5％NaOH50ml を入れ試料の３倍容を 溜出せしめる ぐ－－連続抽出40bｒ 溶出液

_｣300m’

濃縮(60｡’ 抽出液 ）

溜出液l300ml

-R縮,…肱,ト鞠ﾃ獺」

濃縮液ｌ２０ｍｌ 5ｍ’ lＯｍＩ 濃縮液

辮灌L,幕

液一ス lＯｍｌ pＨ（7.5～9.0)調整 （アンモニア塩） ←－ｐＨ（7.5～9.0)調整（アンモニア塩） テル化_ロオキサ

(アンモニア塩)ｋヒド

酸 ム ペークロ試料 ペークロ試料 ペークロ意i科

FiLi

「

pＨ

し

パイン果実 上清 イオン （Ｃ）交換樹脂1m理

沖縄農飛業…第７巻第１号（１９６８） 3４ 第３表⑧，（c)法によって得た濃縮液をヒドロオキサ ム酸とした場合のペーパークロマトグラフィ ー実験結果 第２表エーテル抽出(B)，交換樹脂法(C)によって得た 濃縮液をアンモニア塩とした場合のベーパー クロマトクラフィー実験結果 (1)溶媒：アルコール：ＮＨ３：水（８０：５：１５） 発色剤：アンモニア性硝酸銀 試料ｌＲｔ値｜試料ＩＲｔ値

⑧濃縮試料'8:i1,Ｍ６ﾏﾚｲﾝ酸｜Ｍ２

，－醜Ｍ７轍プリＭ４

鯵酸Ｕ７２ＨＢﾌ蓮ｶﾌﾞ。OBO

コハク酸'077鼠ﾛﾋﾟｵﾝＪ０２Ｏ

酒石酸10.32’ギ酸0.008

Ｌリンゴ酸Ⅲ６１酢酸Ⅲ０

烈芝lIiii’:濃縮試:｣癖…

溶媒イソアミルアルコール：ギ酸：水(７５：２５：７５） 発色剤：５％塩化第２鉄のアルコール溶液 第４表定性反応試験結果

hi1l恥'１

特料川

｡:蕊

○鯛■

_〒･棚’

Ｒｆ 0.68 0.68

iiWtl

_{'･濃縮試料'1:Mo8,}

0.605 0.732 0.645 0.80 082 0.5

試料|(A）液,(B）液,に）液

(2)溶媒：ｎ－プタノール：ギ酸：水(４：１：１） 発色剤：0.1％プロムフェノールプルー 反応 リンゴ酸反応 ＋＋＋ 十十

試料Ｒｆｍ試料｜Ｒｔ値

臓)濃縮試料lIw754ﾏ川ﾝ酸｜Ⅲ

〃〃l8w7551呈藪川１

酒石酸〃〃 リンゴ酸〃〃 ＋ 備考１．クエン酸反応は石灰水，酢酸鉛，酢酸バリウ ム添加反応によって判定した． ２．酒石酸反応は，硝酸銀添加反応によって判定 ３．リンゴ酸反応はカメレオン，酢酸銀，硝酸銀 反応によって判定． ｂ第１表の(1)(2)から果汁濃縮試料のRf値は他のいづ れの揮発性酸に比較しても異なっていることがわかる．

従って試料中にはこれ等の揮発性酸以外の物質が存在し

ていることが窺わｵ'iii.

ｃ定性反応試験 上記の含有酸をさらに確認するため(A)，(B)，に)の濃縮 液について，クエン酸，酒石酸，リンゴ酸反応を行なっ た結果第４表を得た．

讓筥｡I釘

ii鯛l1lLi1J

￣－－－－－－ 0756 ○クエン酸 鯵酸 コハク酸 ○酒石酸 ○Ｌ－リンゴ酸 0.15 0.619 0.842 フマル酸 0.79 マロン酸 0.480 ａ第２～３表から果汁濃縮試料のスポットは明らか に３つの成分が分離しており，そのRf値はスタンダード の酸類（クエン酸，酒石酸，リンゴ酸）のRf値とよく一 致していることがわかる．

Ⅲ考察

１第２図の実験結果より，冬実果実中には蕨糖，葡 萄糖，果糖の存在が認められるが溶媒(b)の展開実験から

比嘉。屋我・大城：パインアップル果実中の糖類、有機酸類の分離同定 3５ マトグラフィーおよび定性反応（酸類のみ）試験を行な った結果，糖類では，蕨糖，葡萄糖，果糖の存在が認め られ，有機酸類ではクエン酸，酒石酸，リンゴ酸の外未 知の揮発性の物質が含有されることを確認した． 引用文献 1）渡辺正一1961．パインアップルの栽培と加工 ２）緒方邦安1963．園芸食品の加工と利用：５７ ３）尾崎準一1955．果汁ハンドブック（下巻）：５９６ ４）佐竹一夫1960．クロマトグラフィー：４５～4６ ５）紫田村治1959．ペーパークロマトクラフ法の実際 ：１２～28,94～９７ 。）東大農化教室1963．実験農芸化学（下巻）：５０２ ～504 ７）山口一考1946．植物成分分析法(下巻)：215～216 ８）本田，垣花，吉野1963．イオン交換樹脂：115～ 131,248～251 9）井上，野田1951．農業化学会誌２４：２９１ １o）宮道悦男1949．植物成分研究法：８３～8５ }よ試料を各糖類に分離することができなかった.今後他 の展開溶媒も検討すると同時にさらに定性反応によって もこれを確認し，定量まで実施することが必要と考え る． ２酸類では前記のペーパークロマトグラフィー実位 および定性反応の結果から明らかにクエン酸，酒石酸， リンゴ酸を含むことが確認できたが，今後それらの定量 も実施する必要があり，またこのような低級脂肪酸ばか りでなくさらに高位の脂肪族および芳香族有機酸につい ても検討しなければならないと考えろ． ３第１表の(1)(2)の試料側からＲｆ値0.023,0.031の験 置にある未知の物質が検出された．一般の水蒸気蒸溜法 では揮発性酸（ギ酸，酢酸，プロピオン酸，カプロン酸 など）を分離するといわれているが，それぞれのスタン ダード酸のRf値とは明らかに異なっており，今後さらに 検討する必要があろう．

Ⅳ要約

羽地産パインアップル冬実（スムースカイエン種）中 に含有される糖類および有機酸類についてペーパークロ