カ テ コ ール ア ミン蛍 光 組 織 化 法 学 研 究
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(2) 390. 芳 表1の. FA法. 説. 原. 達. 也. 明. で処 理 した もの を対 照 とす る.. (1) 蛍 光 強 度 (±). 対 照 よ りや や 弱 い蛍 光 を発 す る もの.. (+). 対 照 と同 程度 の蛍 光 を発 す る もの.. (++). 対 照 よ り強 い 蛍光 を発 す る もの.. (+++) 対 照 よ り非 常 に強 い蛍 光 を発 す る もの. ②. 組織 像 の乱 れ (‑). 対 照 と同 程度 の組 織 像 の 乱 れ.. (±). 対 照 よ りや や強 い 組織 像 の乱 れ.. (+). 対 照 よ り強 い 組織 像 の乱 れ.. (3). CA拡. 散. (‑). 対 照 と同程 度 のCA拡. (+). 対 照 に比 べ,強 いCA拡 散 CA細 胞 及 びCA線 維 とbackgroundと. 散 の 区 別 が や や つ きに くい.. ① は5%CH‑リ. ン酸緩 衝 液(pH 7.0)と3%GA‑リ. ン酸緩 衝 液(pH7.0)と. の 混 合 液.. ② は5%CH‑リ. ン酸緩 衝液(pH7.0)と3%GA‑リ. ン酸緩 衝 液(pH7.0)と. を別 個 に潅 流 した場 合(液 量 は単. 独 の液 量 を示 す.) 表I. CH‑GA‑FA法. 髄,橋,中. のRabbitへ. 脳被 蓋 のCA神. の 適 応.. 経 細 胞及 びCA神. 経 線維. の 分 布 を調 べ た. 3). ィ ンに入 れ, 1時 間真 空 包 埋 す る.包 埋組 織 を7〜. 家 兎 のCH‑GA‑FA法. によ る処 理 法.. 8μ に薄 切 し, 60℃ に加 温 し た ス ライ ドグ ラスの上. 家 兎 を ネ ン ブ ター ル麻 酔 後,両 側 の 頚 動脈 を表 出 して,氷 冷5%CH,‑リ 氷 冷3%. に1時 間暴 露 し た後, 60℃ に加 熱 した無 蛍 光 パ ラフ. GA,‑リ. ン酸緩 衝 液(pH 7.0)1容. ン 酸緩 衝 液(pH 7.0)1容. と. の混合液. に置 いて 伸 展 し,流 動 パ ラフ ィンで 封 入す る.こ れ を, Osram とZeiss. 12 filter(3〜4mm)の "50". (20mm)の. 励 起 フ ィル ター. 〓 過 フ ィル ター をつ け た. 又 は,別 々 に 注 入 し,そ れ と同 時 に 両側 頚 静 脈 を切. 蛍 光 顕微 鏡 で,波 長300〜400入(mμ)のCA蛍. 断,脱 血 す る.続 い て,低 温 下 で 断 頭,脳. 観 察 す る.連 続 切 片 は,厚 さ30μ ご とに, 1組3枚. て,中 脳 被蓋,橋,延 5〜7mmの. を摘 出 し. 髄 を切 り出 し,前 頭 断 で厚 さ. と して,最 初 の1枚 は蛍 光 顕 微 鏡 で 観 察 す るの に用. 作 成 す る.こ れ を. い る.次 の1枚 は トル イ ジ ン ブ ル ーで 染 色,最 後 の. イ ソ ペ ンタ ン,ド ライ ア イ スで −80℃ で 瞬 間凍 結 す. 1枚 は ヘ マ トキ シ リンエ オ ジ ン染 色 を行 うこ と によ. る.次 に 凍結 乾 燥 機 に移 し,‑35℃. り,組 織 片 の位 置 及 び場 所 の 同 定 を行 う.. ℃ で24時. 小 組 織 片 を12〜13個. 光を. 間,+35℃. で2時 間,+50℃. で5日 間,‑20 で1時 間 と順. Ⅲ. 次 温 度 を あ げつ つ,真 空 乾燥 す る.凍 結 乾 燥 終 了後, 組 織 片 を80℃ に加 熱 したパ ラホル ム アル デ ヒ ド蒸 気. 1). CH‑GA‑FA法. 成. 績. の家兎への適応結果.
(3) カ テ コー ル ア ミン蛍 光 組 織 化法 学 研 究. 表1に. 示 す 様 に, 3%GA‑リ. 1容,. 5%CHー. 混 合 液 を, 500ml,. 800m1,. を そ れ ぞ れ10分 処 理 し,. FA法. 7.0). 7.0)1容. 1000ml,. の氷 冷. 1200ml,. 1500ml で. 単 独 で 処 理 し た も の を 対 照 と して, 光 組 織 像 を 比 較 観 察 し た.. 光 強 度 は,灌. 時 に 最 も強 く,組. 織 像 の 乱 れ は,液 CA拡. め ら れ な か っ た.従. っ て, CH,. に 用 い る時 は,液. GA混. 下 の 時認. ra1is. oralis. る方 法 で,全 1200ml,. ン 酸 緩 衝 液 を5分 灌 流 液 量 を500ml,. FA法. 1500mlと. し,そ. のCA組 CA蛍. reticularis. lateralis(以. か け て,蛍. 光 度 が 前 記CA神. 経 細 胞 が 散 在 し,. のCA神. 経 細 胞 及 びCA神. ②. Map. 内 側 か ら腹 外 側 に 走 るCA神. 下 で,. 織 像 の 乱 れ は,灌. CA拡. 散 は, 1200ml以. っ て,灌. 流 液量 が. 下 の 時 に認. et. pars. praepositus. α(以 下Prphと. け て 隣 接 し て い るRgcの. 流 液 にCHとGAを. 別個 に. で あ る と考 え ら れ た.こ. 使 用 し た 場 合 と比 較 す る と, 1000mlの とGA別. の 理 由 か ら,著. 背 側 部 に,横 断 性 のCA神. 中 脳,橋,延. 細 胞 及 びCA神 269か. 534ま. leus. 経. Meesen. 脳 地 図tllを 参 照. 一 中 脳 境 界 領 域 と 中 脳 中 部 は,Lieselotte 脳 地 図12)を 参 照 し て,ト. 269で. 示 した2つ. のCA神. 経細胞群間 にお. 経 線 維 束 と 同 様 な 背 内 側 か ら腹 外 側. 269(上. 記Mapの. 経 線. 地 図 番 号). や 蛍 光 度 の 強 いCA神. 下N.. longitudinalis. 経 細 胞 群 と,横. 経 線 維 が,. Nuc1eus. XDと す る)の posterior(以. 断性 及 び縦 走 nervi. hypog. 腹 側 部 とFasciculus 下Flpと. 下Alと. 側 部 に か け て,. す る)の 外 側. 下Nr. Ⅶ reticularis. 腹 側 部 に か け て,や. 強 度 の や や 弱 いCA神 縦 走 性 の 混 在 し たCA神 記 のCA神. のCA神. 経 経線. 断 性 及 び縦 走. 経 線 維 の 散 在 が 認 め ら れ た.. retrofacialis(以. す る)の 外 背 側 部 か ら, N.. 部 やRpcの. 下Trg CA神. 背 内 側 部 か らNucleus. す る)に か け て,横. 側 に 隣 接 し たNucleus Rlと. 断性. 下Prphと. triangularis(以. 維 束 に連 続 した 形 で, Rpcの. Nucleus. 散 在 性 に 広 が っ た 中 等 度 の 大 き さ の 核 を 持 つ,や. 性 に 走 るCA神. hypoglossi(以. と す る)の 内 側 及 び 背 側,腹. 性 の 混 在 し たCA神. Map. す る)の 背 側 部. 腹 内 側 部 に,横. 経 線 維 が 散 在 し て い た.. す る)の 外 側 部 か らNucleus. 切 片 で 位 置 を 確 認 し, CA神. 示 す.. Nuc. す る)の 背 側 部 か ら. 下Pyrと. praepositus. alaris(以. 経 細 胞 及 びCA神. 下poldと. 335. ジ ン ブ ル ー と ヘ マ トキ シ リ ン ・エ オ ジ ン で 染 色 し た. 維 の 分 布 を観 察 し た もの を 図1に. 経 線 維 束 が 認 め ら れ た.又,. 線 維 の 横 断 性 集 束 が 散 在 して い た.こ ルイ. や散在. 経線維束の 間に. pyramidalis(以. Map. 腹外側部 に. 経 線 維 束 が,や. に か け て 隣 接 し て い るRgcの. ③. βの腹. のCA神. paraolivalis(以. Nuc1eus. で は, Hubert. OlszewskyのRabbitの. GerhardのRabbitの. Map. け る 連 絡CA神. spo. 記2つ. 及 び縦 走 性 にCA神. 髄 に 存 在 す るCA神. 経 線維 の分 布 らMap. 性 に 認 め ら れ た.前 は,. V.. retrofacialis(以. す る)の 背 側 部 か らRpcの に 横 断 性 のCA神. Tractus の中で. 別 個 に 灌 流 す る方 法 を 採 用 し た.. 2)Rabbitの. Jerzy. CH‑GA‑FA法. Wと. か け て,主. hypog. す る)の 腹 側 部 に か. 内 側 部 とNucleus. に 走 る連 絡CA神. 織 蛍 光 が強 く認. 者 はRabbitのCA脳. 地 図 を 製 作 す る 方 法 と し て, も, CHとGAを. 合液 を. 灌 流 液 をCH. 個 に 灌 流 し た 時 の 方 が,組. め ら れ た.こ. 最適. れ を 先 のCH‑GA混. 下Nr.. 経線. 309. 外 側 部 か らNucleus. lossi. 記. 経 線 維 群 の 間 に は,. 内 側 部 とLoの. 用 い た 場 合 に も,全 灌 流 液 量 が800〜1000m1が. lossi(以. す る)の 背 側 部 に. 経 線 維 が 横 断 性 及 び 縦 走 性 に 散 在 し た,前. F1pの. 流 液 量 が800m1と1000mlの. parvo. 経 細 胞 と 同 程 度 で,中. 光 強 度 は,灌. め ら れ な い.従. ①. reticularis. 下Rlと. 維 の 連 絡 路 が 観 察 さ れ た.. 単 独 処 理 の もの と. 下Loと. す る)の 腹 側 部 か ら, Nucleus. 経 線 維 が 散 在 性 に 分 布 し て い た.N.. 1000ml以. し,橋. 下Rpcと. 延 髄 前 頭 断 で,背. 1000m1,. α(以. す る). ob1ongatae(以. の 半 量分. 間で脳 灌 流す. oralis. medulla. 織 蛍 光 像 を 比 較 検 討 し た.. 時 が 最 強 で あ っ た.組. Map. trigemini. late. ン酸緩 衝. れ ぞ れ を 脳 灌 流 し た 後,. で 処 理 した も の と, FA法. spinalis. CA神. 800m1,. giantocellul. α とす る)の 内 側 部 とNuc1eus. 等 度 の 大 き さ の 胞 体 を もつCA神. 間 で 脳 灌 流 し た 後 に,後. の 氷 冷3%GA‑リ. spo. 最 適 と考 え ら. 次 に,灌 流 液 量 の 半 量 の 氷 冷5%CH‑リ. &. V.. 2つ. 7.0)を5分. tractus. 下N.. reticularis. す る)の 背 側 部 に 認 め ら れ た. Su. 合 液 を脳 灌 流. 量 が800〜1000mlが. れ た.. 液(pH. 下Rgcと. cellularis(以. 量 が1000ml以. 散 は, 1200ml以. aris(以. の 背 側 部 に 隣 接 す るNucleus. 流 液 量 が800m1と1000mlの. 下 の 時 認 め ら れ ず,. 部 に 隣 接 し たNucleus. bnucleus. 間 で 脳 灌 流 を 行 っ た 後 に, FA法. 蛍 光 顕 微 鏡 でCA蛍 CA蛍. ン 酸 緩 衝 液(pH. リ ン 酸 緩 衝 液(pH. 391. と す る)の 内 背 latera1is(以. V.. spo. 下. β の腹 内側. や小 型 の 胞 体 で蛍 光. 経 細 胞 の 小 群 と,横. 断性及び. 経 線 維 と が 認 め ら れ た.前. 経 細 胞 群 とCA神. 経 線 維 束 の 間 に は,腹.
(4) 392. 芳. 原. 達. 也. 図1. 1 269. 2. 309. 3. 335.
(5) カ テ コ ー ル ァ ミン蛍 光 組織 化 学 法 研 究 外 側 か ら背 内側 にか けて,連 絡CA神. 経線維束が認. め られ た.さ らに, Pyrに 隣 接 す るRgcの. 腹 内側 か. ら腹 外 側 にか け て,横 断 性 及 び縦走 性 のCA神. 経線. Map. Rpcα CA神. Map642. Coeか. らSubnucleus. る)に か け て,大. 424. の 内背 側部 か らRpcの. 外 背 側 部 にか けて,. 経 線 維 の か な り大 きな横 断 性 の 集束 が認 め ら. chium. leas. の腹 外 側部 に か けて,横 断 性 と縦 走 性. の 混在 したCA神. 経 線 維 が認 め られ た.そ の 他 に,. Pyrの 背 側 に隣 接 す るRgcの. 腹 側 部 で中央 部か ら. 外 側 に か け て,横 断 性 と縦 走 性 の混 在 したCA神 線 維 が 存 在 した.さ. らに前記3領 域 のCA神. の 間 に は,縦 走 性 の連 絡CA神. 経. 経 線維. 経 線 維 は存 在 しな か. った.. motorius. とす る)の 外 側 部 とN.. parsα(以. 下N.. Wの 中 央 部 とに は さ. の領 域 に,横 断 性 及 び縦 走 性 のCA神. trigemini. mesencephalicus(以. なCA神. 背 側 部 に 隣 接 す るRpcα. ⑧. 橋一 中脳 境 界 領 域 mesencephalicus. Vと. nervi. す る)に 隣 接 し,さ. junctivium(以. 下Bcと. (以 下Cnfと. られ た. Nucleus. す る)の. 経 細 胞 の 小 集 団 と,. 横 断 性 及 び 縦 走性 に混 在 す るCA神 bechterew(以. 経 線 維 とが認 め. 下Bechと. す る)の. 腹 内 側 部 と, N. VDの 中央 部 に は さま れ たRpcα 腹 内側 部 に 前 記CA神. るCA神. の. 経 線 維 か ら分 岐 した もの と思. 経 線維 が,横 断 性 と縦 走 性 に認 め られ. た. N. Vmtα. の外 側 部 に隣 接 す るRpcα. 領域 にあ. 経 線維 束 と,Olsの 背 側 部 に隣接 す るRpcα. 領 域 に あ るCA神. 経 細 胞 群 とは,連 続 した もの とし. て 認 め られ た. Nucleus す る)の 背 外 側 部 で,第. triangularis(以 下Trgと. さなCA神. 細 胞 群 と,横 断 性及 び縦 走 性 に散 在 す るCA神. 経 経線. 維 が 認 め られ た. ⑥. gray. matter(以 下H.. Gと す る)の 外 側. 部 とBechの. 内側 部 に隣 接 したNucleus. (以下Coeと. す る)領 域 に,大 型 で楕 円 形 の 細 胞 体. を もっCA神. 経 細 胞 が 散 在 性 に認 め られ るとと もに,. CA神. alemiscal. tegmentaI. coeruleus. の 外 側部 で, Regio. hに 隣 接 した部 位 か らRegio. h. め られ た.. 経 線維 束 が 認. 経. と して 内背. びSCの. 領 域 に,大. 経 細 胞 が 散在 性 に. 断 性 及 び 縦 走 性 のCA神. 線 維 が 観 察 さ れ た.Bcの. 経. 内 腹 側 部 に 隣 接 し たPar‑ field(以. 下Ftpと. 側 部 に 緻 密 で 太 い 横 断 性 のCA神. す る)の 外. 経線維東が観察 さ. れ た. ⑨. 中脳 中部. Ocu10motor Medial. nucleus(以. longitudinal. 下N.. Ⅲ と す る)か. bundle(以. 下Mlbと. す る)の 腹 側 部 に か け て,横. 縦 走 性 のCA神 (以 下Rmと. 経 線 維 が 観 察 され た.. field(以. 緻 密 で,や. や 太 い 横 断 性 のCA神. 下Ftcと. Substantia. nucleus. 経 線 維 束 が存 在 し 下Snと. す る)の 領 域. 円 形 の 細 胞 体 を も ち,蛍. 経 細 胞 群 と,横. 光度 は. 断性 及 び 縦走 性 に走. 経 線 維 が 認 め ら れ た. Ⅳ. 1). Rabbitに. Rat以 FA法. Red. す る)の 中 央 領 域 に,. nigra(以. や 小 型 で,楕. 中 等 度 なCA神 るCA神. gray 断性 及 び. す る)の 背 外 側 部 に 隣 接 す るCentral. tegmental. に,や. ら. す る)の. 背 外 側 部 に 隣 接 す る 領 域 か らPeriaqueductal. 経 線 維 が横 断 性 及 び縦 走性 に認 め られ た. Rpc. の腹 内側 部 に か けて,横 断 性 のCA神. nucleus. 周 囲 で,主. 型 で 楕 円 形 の 細 胞 体 を もつCA神 認 め ら れ る と と も に,横. て い た.. Map 539. Central. con. す る)とCuneiform. す る)の 境 界 部 領 域 か ら 背 側 に延 び,第. (以 下Pagと. 四脳 室 の 外 側 部 に 隣接 す る. 部 位 に小 型 で,蛍 光 度 のや や 弱 い,小. trigemini(以. ら にBrachium. 四 脳 室 の 外 側 部 に 向 う縦 走 性 の 緻 密 な 太 いCA神. の 外 側部 に,小 型 で,や. や 蛍 光 度 の強 い,紡 錘 形 のCA神. 背内. 経 線 維 束 が 認 め られ る.こ の 集 束 はCoeの. 側 か ら腹 外 側 に か け て のLC及. 下Olsと. Vmes. 腹 外 側 部 か ら発 し て い る よ う に 思 わ れ た.. Nucleus. superior(以. 下N. pBrpcの. 側 部 か ら 第 四 脳 室 の 外 側 部 に 向 う縦 走 性 の 太 い 緻 密. 線 維 東 が 認 め られ た.Bcの. oliuaris. parvo. す る)の 内 背 側 部 でNuc. 経 線 維 の 混 在 が認 め られ た.こ の集 束 に連 続 して,. わ れ るCA神. 経線. す る)の 腹 内 側. と す る)の 外 側 部 に 隣 接 す る部 位 に,. 下N.. trigemini. まれ たRpcα. CA神. parabrachialis. 下pBrpcと. Tractus. Map484. 下Bconと. 部 に 隣 接 す るSubnucleus. 部 か らRpcα. Vmtα. す. 型 で 楕 円 形 の 細 胞 体 を もっCA神. conjunctivium(以. cellularis(以. Nucleus. 下SCと. 維 が 横 断 性 及 び 縦 走 性 に 混 在 し て 認 め ら れ た. Bra. れ た. N. V. spoδ の 腹 内 側 部 と, N. VDα の外 側. ⑤. coeruleus(以. 経 細 胞 が 散 在 性 に 認 め られ る と と も に,. 維 が混 在 して認 め られ た. ④. ⑦. 393. 考. 察. お け るCH‑GA‑FA法. の 適 応10). 上 の 大 動 物 で の 脳 灌 流 実 験 に,従 で 組 織 のCA観. 来 のGA‑. 察 が 不 可 能 で あ っ た が,新. た.
(6) 394. 芳. にCHを. 加 えたGA‑FA変. 原. 法 で 可 能 とな った理 由 は,. 比 較 的 高 温 度 に お い て, GAで. はCA‑GA結. こ りに く く12)CHで はCA‑CH結. 合 がお. 合 が促 進 す る こ と. 達. 也. に存 在 す る た め,両 者 の 中 間 的位 置 に あ る もの と考 え られ る. 中 脳 黒 質 部 に存 在 す るCA細. 胞 群 は, RatのAe〜. に あ る と考 え られ る. Rat以 上 の大 動 物 で は,動 物. A10に 相 当 す る もの と思 われ る.そ してRatの. の体 が 大 き く,血 液 量 が 多 い た め に,絶 対 体 温 が高. と比 較 す る と,散 在性 に存 在 し,細 胞 数 が 多 く,そ. くな る.氷 冷 したGA灌. の上, CA神. 流 液 で脳 灌流 す る場 合,体. 経 細 胞 とCA神. 経 線維 の存 在領 域 がRat. 温 度 に よ り,灌 流 液 温 度 が 上 昇 し,そ の結 果,組 織. ほ ど明 確 で はな い が, MonheyやCatな. のCA流. る と,蛍 光 度 は強 く,密 に存 在 して い る.. 出及 びCA拡. CH‑GA‑FA法 CAが. 散 を促 進 す る.こ れ に対 して,. の場 合 は,比 較 的高 温 度 で も, CHと. 結 合 して, 6, 7‑dihydro. Map. 1, 2, 3,4‑tetrahydr. oisoquinoline1‑trichlorocarbonが. 335でRIの. 腹 側 部 に存 在 す るCA神. 群 は, RatやDogやCatで. 物 体 温 を徐 々 に低 下 させ る.動 物 体 温 が低 下 した所. 細 胞 群 で あ る.又,. で, GA灌. A10に 相 当す るCA神. 流 液 を注 入 す る こ とに な るか ら, GA‐CA. 結 合 が,さ CA結. らに促 進 され, GA‑CA結. 合 物 質 とCH‑. 合 物 質 の両 方 を生 成 し,蛍 光 強度 を 強 め る も. の と考 え られ る. 2). Dahlstorm. たRat及. )CA神 Map. 他 の 研 究 者 達 が作 っ. 経 細 胞 及 びCA神. 地 図 と, Rabbitに. お. 経 線維 の比 較2)3)4)7)8. 経細胞の比較. 269に おけ るRpcの. 部 に存 在 す るCA神. 腹 外側 部 か らRlの 背 側. 経 細 胞 群 はRatのA、. に相 当 し,. RatのA4,. 同 様,そ れ ぞ れ1つ. CA神. 経. 線 維 束 は, 1束 しか認 め られ な いが, Rabbitで. は,. 腹 外 側 系 と背 内 側 系 の2束 のCA神. 経線維束が認め. られ る.腹 外側 部 系 は, RatのA1に. 相 当 す るCA神. 経 細 胞 群 に そ の起 源 を もち, RatのA5に CA神. 相 当 す るも. この経 路 は,延 髄 の中 部 か ら上 部 にか けて 分 岐 し, Pyr及. 経細 胞 と同様,広 範 囲 に散 在 し,細 胞数 が 多 い と思. のA2に. わ れ る.し か し,上 記2つ. でRatのA4に. MonkeyやCatに. 経 細 胞 群 も,. 比 較 す る と,全 体 的 に密 に存 在 し. て い る, Map. び その 周 辺 に 分布 して い る.背 内 側 系 は, Rat 相 当 す るCA神. 経 細 胞 群 を起 源 と し,途 中. 相 当す るCA神. 経細 胞群 は, RatのA,に. の外 側 部 に 存 在 す るCA神 相 当 す る もの と思 わ れ,同. 系 の2つ のCA神 RatやCatに. お いて も,腹 側 系 と背 側. 経 線 維 系 が 認 め られ る.し か し. 比 較 す る と, Rabbitの 背 側 系 は,太. じ断 面 で, Trgの 背 外 側 で,第 四脳 室 の外 側 部 に 隣. く緻 密 で,蛍 光 度 の強 いCA神. す る部 位 に,や や 弱 い蛍 光 を も ったCA神. され る.. が存 在 す る.こ れ は, RatのA、 思 わ れ る.前 記,両CA神. 経細胞群. に相 当す る もの と. LC及. 経 細 胞 群 と も, Ratに 比. いCA神. べ る と散 在 性 で あ るが, MonkeyやCatに. 比べ ると. 密 で あ る. Map. びSCの. 経 線 維 系 と して観 察. 背 外 側 部 に,蛍 光 度 が 強 くて,太. 経 線維 束 が,橋 上 部 か ら中 脳 下 部 にか けて. 認 め られ る.こ の 線 維 束 は, TMTに. 隣 接 したpBrpc. の背 内側 部 か ら第 四脳 室 の 外 側 部 に 向 う縦 走 性 の. 534〜Map. 域 のCA神. 経 細 胞 群 と連 絡 レて. い る.橋 か ら中 脳 に か け て は, RatやMonkeyや Cat等 と同 様 にRabbitに. 484で のRpcα. で 認 め られ て い. 経 細 胞 群 と中 部延 髄 で連 絡 して い る.又. の と思 わ れ, Ratの それ と比 較 す る と,前 記CA神. のCA神. 相当す る. 経 細 胞 群 と その 経 路 の途 中で 連 絡 して い る.. この経 路 は, RatやDogやCat等. 経 細 胞 群 は, RatのA,に. の 連 続 し た もの と し. の 延 髄 か ら橋 へ のCA神. な いCA神. 在 す るCA神. Ag, おいて. 経 線維 の比 較. RatやDogやCat等. う に思 わ れ る.又,同. 背 内側 部 に存. A6, A7とA8,. 経細 胞 群 は, Rabbitに. Ratに 比 べ 細 胞 数 が 多 く,広 範 囲 に散 在 して い るよ じ断 面 でRgcの. 経細 胞. は認 め られ な か ったCA. て観 察 され る. b). & Fuxeや. び他 の 動 物 のCA脳. け るCA神. はDogと. ど と比 較す. 背 外 側 部 か ら, N, V. spoβ の. 腹 内側 部 やRpcの. 生 じ なが ら,動. それ. 642に 認 め られ るLC及. 経 細 胞群 は, RatのCA神. びSC領. 経 細 胞 に比 べ. CA神. 経 線 維 束 で あ る.こ の線 維 束 は, LC及. か ら小脳 へ 連 絡 し て い るCA神. て,散 在 性 で,蛍 光 度 は少 し弱 い よ うに思 わ れ る.. CA神. さ ら に分 布領 域 と して, RatやMonkeyで. 判 断 で きな い.. して 中 心 灰 白質 にCA神. は,主 と. びSC. 経 線 維 路 か,背 側. 経 線 維系 の 一部 で あ るか は,こ の地 図 か らは. 経 細 胞 が存 在 す る の に対 し. て, DogやCatの 場 合 は,網 様 体 を中 心 に存 在 す る, 一方 , Rabbitの 場 合 は,中 心 灰 白質 と網 様体 の 両方. V Rabbitの. 結. 中脳 被 蓋,橋,延. 論 髄 のCA含. 有神経細胞.
(7) カテ コー ル ア ミン蛍 光組 織 化 学 法 研 究. 及 びCA含. 有 神 経 線 維 の 分 布 を 観 察 す る た め に,. CH‑GA‐FA法. を 用 い て 作 製 し たCA脳. ④. CH‑GA‑FA法. は,比. hloral. 6, 7‑dihydroxy. ②. 2‑carboxymethyl. ⑥. 3, 4‑dihydroisoguinolineの. 経 細 胞 群 とRatと. Ratに. り も大 き く,一. はRlの. 腹 内 側 部 やRpcの. Falck.. 細. unds 2). spoβ. 4). 5). 6). の. 本論文 の要 旨は,第17回 日本組 織細胞化 学会(1976年 11月東京)で 発表 した.. nervous. Fuxe.. K.:. Evidence. Distribution. nd.,. Suppl., M,. and. pathways. 66: Maeda.. fiber N.. Bloom.. tegmentum.. existence of. of. of. in. compo. 1962.. the. rat. in. the. monoamine. monoamines. 232:•@. in. 1-55,. monoamine. terminals. and. the. Tanaka.. pontine. F.E.:. C,:. brain.. Acta. Phy. neurons central. containing. the. cell. neurons. bodies. of. in. the. brain. 1964. in. nervous. Histochemical. tegmentum. The. Distribution. T.. Pin.. C. pontique. et. leurs. Battista.. A. and. 9). Olson.. (Basel),. Gesch.,. the. 348-354,. pathways. related. the. central. system.. nervous Acta. system.. Physiol.. Sca. of. catecholamine of. the. cell. D.:. Les. mapping. the. dog.. containing bodies. and. of. Brain. neurons. some. catecholamine. Research, in. axonal. neurons. 86:. the. cat. 1-16,. 1975.. dorsolateral. projections. Brain. po Research,. 1974.. 8). and. for. 10:. and. 1965. S. in. monoamine. Suppl.,. existence. 38-120,. Shimada.. and. 1-21,. the. Cytochem.,. the. Demonstration Scand.. monoamine. 247:. Ishikawa.. Chu.. for of. catecholamine. 1971.. I.. Physiol.. of. Histochem. of. Evidence. system.. Acta. IV.. K.:. 献. Fluorescence. J.. 1-48,. Fuxe.. 経線維 かに. 東邦大 学 医 学部 森忠 繁 教授 に深 く感謝致 します.. Thieme.:. mapping 367:. and. neurons.. ntine. 7). A.. central. G.. formaldehyde.. Suppl.,. 光が強 く. 稿 を終 わ るに臨 み,御 指導,御 校閲 を賜わ りま した 岡. 経細胞. V,. and. Stereotaxic. Scand.. stem. A,. with U.:. Dahlstrom. the. N.. condensed. Ungerstedt. siol.. 3). Hillarp.. 背 外 側 部 に,CA螢. 経 線 維 が 観察 され た が, Ratの 背 側. 山大 学 第一 解剖学 教室 大塚長康 教授,佐 々木順造 助手,. 腹 外 側 部 に か け て 認 め られ た.. B,. びSCの. を比 較 す. 文. 1). LC及. つ い て は,こ の 地 図 か らは判 断 で きな か っ た.. 般 に 散 在 し て い た.. 外 側 部 か らN,. 経 線 維系 は, Ratと 同. 系 に相 当す る もの か,小 脳 へ 向 うCA神. お い て 発 見 さ れ て い な いCA神. 群 が, Rabbitで. 橋 か ら中 脳 へ のCA神. て,太 いCA神. 在 部 位 は 大 体 一 致 し て い る が, Rabbitの. 胞 自 体 がRatよ. は 腹 外側 系 と背 内側. 様,腹 側 系 と背側 系 の2束 が 観察 され た.. 6, 7‑. 光 物 質 を 同 時 に 産 生 す る と考 え られ た.. RabbitのCA神. ③. 結合す る. 3, 4‑dihydroisoguinolineと2‑hydroc‑. 2っ のCA螢. る と,存. ⑤. 較 的 高 温 度 下 で もCA. 温 度 下 で の みCAと. 使 用 す る こ と に よ り,. dihydroxy. 経 線 維 系 と して, Rat. 系 の2束 が 観 察 され た.. と結 合 す るCHと,低 GAを. 延 髄 か ら橋 へ のCA神. で は一 束 しか な いが, Rabbitで. 地 図 よ り,. 次 の 様 な 結 論 を 得 た. ①. 395. 28: L. and voies. Fuxe.. projection. chez. Mapping. of. Histochemical. containing 259-282,. neurones le. central. contenant chat.. des. Brain. catecholamines. Research,. monoamine. neurons. 57: in. neuron. demonstration systems. in. and the. human. mapping. 11) Meesen, H. andOls zewsky, J.; A cytoarchitectonic Basel.. 119-152,. tegmentum 1973.. monkey.. Experientia. f etal. of brain.. 5-hydroxytryptamine Z.. Anat.. Entwickl.. 1973.. 10) 芳 原 達 也;抱 水 ク ロ フ ール を加 えた グ リオ キ サ ル酸 一ホ ル ム ァ ル デ ヒ ド法.岡. S. Karger.. the. du. 1972.. Boreus. O.:. catecholamine 139:. de K.:. 688-690,. and. Salvert.. New York.. 1949.. 山医 学 会 雑 誌 に投 稿 中. atlas of the rhombencephalon. of the rabbit..
(8) 396. 芳. 12) Lieselotte. Gerhard.:. lin.-Heidelberg-New 13) Axelsson. of biogenic. 原. Atlas. of the mes-and. York:. 1968.. S, Bjorklund.. 達. diencephalon. A and Lindvall. O.:. monoamines.. Acta.. Physiol.. Map. 269. FLP N.. Fasciculus V. posterior. trigemini. N. ‡Z. Nucleus. nervi. vertibularis. N. ‡Z. Nucleus. nervi. hypoglossi. Ntsl. Nucleus. tractus. OL. Nucleus. olivaris. Pyr. Tractus. pyramidalis. Rgc. Nucleus. reticularis. gigantocellularis. RI. Nculeus. reticularis. lateralis. Rpc. Nucleus. reticularis. parvocellularis. Rrph. Nucleus. praepositus. Nucleus. triangularis. Nucleus. raphes. 2. Map. 309. Map. 335. Trg 3. Ramg 4. Map Arov. Area. Dt. Subnucleus. W. Map. hypoglossi. magnus. Deiters g. Nucleus. Tuboac 5. solitarii. ovalis. Regio. N.. spinalis. 424. g. nervi. Tuberculum. facialis acusticum. 484. Bech. Nucleus. Bechterew. N.. V. Nucleus. trigemini. motorius. N.. Vsnpr. Nucleus. tirgemini. sensibilis. Nucleus. supragenualis. Sg Trm. Subnucleus. trapezoides. Hg. Hohlengrau. central. h. Regio. h. m. Regio. m. k. Zeligruppe. 6. Map. Nucleus Map. Bcon. principalis. medialis. 534. N. 7. longitudinalis. Nucleus. k trigemini. 642 Brachium. gray. conjunctivum. motorius. matter. Glyoxylic. Scand.,. 図1の. 1. 也. of the rabbit.. acid condensation.. 89: 57-62,. 説. 明. Springer-Verlag. 1973.. Ber. A new fluorescence.
(9) カテ コー ル ァ ミン蛍 光組 織 化学 法研 究. 8. 9. Brpc•@. Subnucleus. parabrachialis. parvocellularis. Cents•@. Nucleus. centralis. Coe•@. Nucleus. coeruleus. Lmld•@. Nucleus. lemnisci. lateralis. dorsalis. Lmly•@. Nucleus. lemnisci. lateralis. ventralis. Lmm•@. Lemniscus. superior. medialis. P•@. Griseum. Ppl•@. Nucleus. papilioformis. pontis. Rpo•@. Nucleus. reticularis. pontis. oralis. 橋 一中 脳 境 界 領 域 Cnt•@. Nucleus. Ftp•@. paralemniscal. cuneiform. Ice•@. central. nucleus. Pg•@. Pontine. gray. tegmental of. field. the. inferior. colliculus. Sag•@. Nucleus. Trc•@. tegmental. sagulum reticular. nucleus. centralis. Trp•@. tegmental. reticular. nucleus. pericentralis. 中脳 中部 Aod•@. Nucleus. Aot•@. accessory. of. Bin•@. Nucleus. Mgp. principal. Mlp. medial. N.‡V•@. Oculomotor. Pag•@. periaqueductal. Pgr•@. pontine. Pp•@. pes. pedunculi. Rm•@. Red. Nucleus. Rr•@. retrorubral. Sc•@. Superior. Vtd•@. Ventral. the. accessory. optic. tract. the. brachium. of. nucleus. of. longitudinal. of the. tract. the. medial. inferior geniculate. dorsal. division. colliculus body. bundle. nucleus gray gray,. rostroventral. division. magnocellular nucleus colliculus. tegmental. ●……CA神 ・……CA神. optic. area. of. Tsai. 経細胞 経線維. 写. 真. の. 写 真1. RatのA1に. 写 真2. RatのA、. 写 真3. Ratで は発 見 で きず, Rabbitで 発 見 され たRlの. 写 真4. LCの. 写 真5. 延 髄 か ら橋 へ の腹 外 側 系 線 維 路(CH‑GA‑FA法)×70. 写 真6. 延 髄 か ら橋 へ の背 内側 系 線 維 路(CH‑GA‑FA法)×70. 説 明. 相 当す る細 胞群(CH‑GA‑FA法)×70 に相 当 す る細 胞 群 とA2に 相 当 す る細胞 群 間 のCA連. 細 胞(CH‑GA‑FA法)×140. 写 真7. LCの. 写 真8. 黒 質 のCA細. 外 側 部 に あ るCA神. 経 路(CH‑GA‑FA法)×70. 胞(CH‑GA‑FA法)×70. 絡線 維(CH‑Gf4‑FA)×70. 外側 部 に存 在 す る細 胞群(CH‑GA‑FA法)×70. 397.
(10) 398. 芳. 芳 原. 原. 達 也. 達. 論 文. 也. 附 図.
(11) カテ コ ー ル ァ ミン蛍 光 組 織 化 学 法 研 究. The Part. II.. and. fiber. by. histochemical. The. distribution. pathway. the. study. of. the. catecholamine. of catecholamine. in the. rabbit's. 399. containing. neurons. medulla-pontine-tegmentum. chloralhydrate-glyoxylic. acid-formaldehyde. method. by Tatsuya Department. of Anatomy. Okayama,. (Director The. distribution. of. catecholamine. medulla-pontine-tegmentum There. are. cholamine cated. fundamental. within. the. the. nucleus. of. between. the. locus. Medical School. neurons. and. fibers. chloralhydrate-glyoxylic. similarities Most. University. Prof. N. Otsuka). containing. by. distribution.. HOBARA. the. rabbit. catecholamine. coeruleus,. was. studied. in the. acid-formaldehyde and. the. fluorescent. subcoeruleus. other. mammals. cell bodies. and. substantia. in the. rabbit. method. on rabbit. nigra. in the. connective. than. the. cate are lo. pontine. tegmentum. They the. are more. There. are. catecholamine the. extensive. than. those. of the. rat,. monkey. and. more. those. of. dog and cat.. dorsomedial These One. two. two. main. originating. catecholamine pathways. catecholamine. laris lateralis. catecholamine. pathway. of the. pathway. associate containing. rabbit,. fiber from. but. with. the. systems area. originating the. upper. cell group it has not. been. at the. medulla. corresponding from medulla. extends found. level.. One. the area. corresponding. oblongatae. level.. toward in the rat.. is ventrolateral. to Al in the rat and the. dorsolateral. in the. other. is. to A2 in the rat.. nucleus. reticu.
(12)
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