三盈大東亜研轍 節12骨：ユ3l〟137 1985イドlO月1‡ヨ
養殖魚の栄登性ミオパテー症候群に関する研究−Ⅸ．
ブラウンミールで飼育したコイの病理組織像
＊＊
宮崎照雄・津田 晃＊・窪田三郎 三桑大挙水魔学部
Studies on NutritionaIMyopathy Syndrome
in CuLtured Fishes−ⅠⅩ
輔stopathoIogy of Carp fed Brown Meai
Teruo M】YÅZAKi，Akira Tsul〕A＊
and Saburoh S．KuBOでA＊＊
Faculもy of Fisheries，Mie Ulliv￠柑比y
in recent yeal・S，tlle quality of w】lite fisllmealfol・fish diets hasもecome poor beeause of the decI†ease（lqu孜ntity of cI・ude pI、Otein．On t】le Oモher‡1and，quaIity of broIVn mealhas beco肌e＝明叩0Ved anditsl）rO（‡uetionhasinc‡・eaSed significant】y．
In t！1e preSenもStudy，tllree difぎel，ent typeS Of（lietsin8ludミng b】†OWれmeal（sard与れe
lVhole body）lVere pl†0Vided．Dieい1was vitamin E fI、ee，inc】uded brown meal with aloIVlevelof c文一ude protein a】ldlVa5 eXpOSed to sun−rayS fol・5 days after mixture．Dieト21柑S Vitamin E f】・ee，inelude（lbroIVn mea王 wiもIla highlevelof cI，ude p】・oteinilnd was exposed to sun−王・ayS fαr5days aぎter mjxture・Diet−3 was Vitamin E rree andincIl王de（王bI・OlVn meallVith tllelolヤIeve】of eltudepl・oteillandsun−
Itay eXpOSuIホe fol・5dilyS．T‡1eSe（liets；nc】uding t】1e（leterioratedmea】werefed to Carp fol・160days．
Carp fed the dieト15】101Ved goodlVeight gainl）ut On histopatilOlogicaIexamina−
tion，theI・edilnd pinlくmuSCulature disp王ayed s王ight to modeェ・そIte VaCuOlar（lege‡le−
ration of mu5ぐ1e fibel・S，an（】wIlite muscle fibel傷S SllOlVed atropI】y and necrosi5．
Carp fed the（王ieト2sよ10Wed good weight gainモInd only siight vaeuo！ardegenel、ation of the red all（l】）ink mllSCle fibers．Carp fed the dieレ3showedlesslVelgIlt gai11 and extensive vacuola】・degeneヱ・a山川Of仁heI、ed and pink muscle fibers．A feeding examination was a】so conducted oれthe controlearI）WitIla dietinこ1u（‡inglVhite fis】1mealand vitamin E．The carp showedless welg‡1t gain but noobviouspatho−
＊：現在，奈良麟野迫川村役場 …：現私 E‡本淑医都政大学
櫛嘲！翫姉・津服1免・窪川三朗
logicalchange．The results of this studyindicate that bl・OWn mealis usable fol・
rish diets un主essitlVi塵孟be sevellely deteriorated．
Key words：Brown meal，Carp，Histopathology，Myopa七重Iy．
1：う2
現在，養魚飼料の原料である魚粉には北洋で採れるスケトウダラを原料とするホワイトフィシ ュミールとイワシ額を原料とするブラウンミールがある。近年，北洋のスケトウダラ漁をめぐる 国際間題のため，本魚を原料とする飼料用ホワイトフィシュミールは晶質低下を余儀無くされて いる。それに対して沿岸漁業で商漁獲高を示すイワシ類を原料とするブラウンミ…ルは近年，生 産高が上がり，品質も向上しており，飼料原料に占める割合も大きくなってきた。ブラウンミー ルの晶繋が往年に比粧して向上したものの本魚粉は変質しやすく，餐魚用飼料に製品化した後，
その保管の拙さから慈愛した飼料が原因と考えられる疾病が餐殖ニジマスで発生している（窺闇 ら1981）。今臥 人為的に慈愛させたブラウンミールを基本とする飼料でコイの飼育爽救を行い，
本魚粉の寒魚用飼料原料としての安全性と悪変した魚粉の有審性を病理組織学的に検討した。
材料および方法
供紙魚は平均体盈約6gのコイ稚魚で，水産庁養殖研究所において1対の観魚から採卵，飼育 した魚群の一部である。供紙魚粉ほ組タンパク脅威73％のブラウンミール（8Ma），同69％のブ ラウンミール（BMb）および同46％のホワイトフィシュミール（WFM）で，患椅飼料株式会社 から入手した。実験飼料の組成はTablelに示し，BMaとBMbの組成成分はTable2に示した。
実験条件としての憩変した8Mの有番性をみるため，BMbとBMaを基本にビタミンE欠乏飼料 を網解後，5日間日光に曝した飼料（失敬区1，2），およぴ5日間日光に曝したBMbを基本に 綱解したビタミンE欠乏飼料（実験区3）投与区をそれぞれ紋けた。また，対照区にはWFMを 基本とした飼料を投与した（Tablel）。
飼育実験は50Lのプラスチック水槽に各区20尾ずつ放発し，流水地下水（0．5L／分）で行っ た。実験期間は5月中旬からユ60日間で，この間の水温は約ユ6〜24℃であった。紛糾は1日3‡司 で飽食盈とした。
実験終了後，各区よi）10尾ずつ採取し，採血後，体側筋および内臓諸器官をプアン液で固定し，
僚法に従って3〜5〟mのパラフィン切片を作製し，へマトキシリン・エオジン，PAS，アザ ン，ベルリン脅，アルデヒドブタンン，ズダン黒Bなどの染色を施して検規した。血液性状闇雑 赤血球数（クレイ・アダムス祉 赤血球算窟器），へ毎グロビン威（クレイ・アダムス祉 アキ ェスタトシステム），ヘマトクリット低（毛細管法）を求めた。
結 果
成長結果 160日間のブラウンミ ル（BM）投与区と対照のホワイトミ叫ル（WFM）投与区 の成長結果はTab〜e3に示した。ユ60日後でほ5日間日光に曝したBMbを基本に調糾したビタ
ミンE欠乏飼料（爽験区3）投与区が有窓に惑い成長率を示した。また，BMaとBMb基本ビタ ミンE欠乏飼料を別解後，5別間目先に曝して投与した区（実験区1，2）では成蔑率は良いが，
136日以降に体藍の減少が起こっていた。WFM基本飼料を投与した対照区は，実験期間中その
成長状況に特に鼎状が無かったが，威儀率は惑かった。なお，BMを投与した3実験区の魚は共
通して体袈のメラニン色紫の沈着が顕著で，特に，衆靡区1，3でほ，約ユ00日以降から背こけ
基殖魚の髄磯増ミオパテー症候群に関する研究−Ⅸ
Tab）e 7．Composition of cxperi川ental（1icts fol・CaIl）
13：さ
Control Experiments
1 2 3
‡ngredjen主
White fi5h meal Brown meal＿a Browrlmeaトb α−StarCh Soybean oil Vitamin mixture蝉
（Vitanlin E free）
Milleralmixture＝
合一tOCOl）Ilel・ol
C10
0 2 0 4
6 2 1 0 ワ︼ 0 4
6 2 1 5 5 イ叫．
2 1
2 0 4
2 1
4
0．025
Experimentl：fed the diet exposed to sun−ray for5days（dieト1）
Experiment2：fed the diet exposed毛o sun−ray for5days（dieト2）
E叩eriment3：fed t！le d；et eontaining mealexposed to sun−ray for5days（dieト3）
Brown meaトa：crude protein65％ 糾al・anteed 臥oIVn meal−b：crude protein6＄％guar8nteed White fish meal：crude protein45．6％
＊：MIYÅZAKlet al．1981 ＊＊：MIYAZAKlet al，1981
Table 2．Chcmicalcomposition of mealand oil Bl・owrlmeaトa Browl】meaトb
Ingredient Soybean oii
笠猶弼磯蛸霊哺Ppm− ． 3 ． 7
7 7 ハU 一−ユ 0 2 ハU りん 3
Moj5亡ure Crude protein Crl】de fat CI・ude fiber Cru（le asll
Solullle nol卜niけ叩即 Sull．
Suluble nitrogen
Vo】atile basic ni汁Ogen Histamin
Et】10Xyquin Vitamin E Extraeted oil
Aeid vallle peroxide value 王odine value Carbonyiva王ue
％ 禰
0・2⁝137 仙 m
g
／
q e m
5 9 ・ 4
7 5 3 2 1 1 1 5
宮崎照雄・津闇 兇・窪‡軋三郎
134
症状を示す個体が見られるようになったが，弗死にほ至らなかった。
病理組織学的所見 160日冒にBM投与の3実験区とWFM投与の対照区から各10尾づつ取り 上げて病理組織学的観察に供した。コイの体側筋組織は漁常白色筋組織と血▲合筋組織から成るが，
厳密には両筋組織の境界部分には桃色筋組織と呼ばれる筋組織が介在する。BM投与の3実験区 の魚でほ共通してその桃色筋組織と血合筋組織の筋線維に空腹変性が起こっていた。空胞変性を 起こした桃色筋線経と血合筋線維は，ともに軽度の腫大（Fig．1）から肉舞塊の出現を伴う筋原 線維の萎縮（Fig．2）に至る変化を示していた。しかし，劉包変性の顕著な筋線経でもマクロフ ァージの授潤イ象および筋線維周囲の結合織の増殖條は見られなかった。爽験区3の魚ではこうし た桃色筋組織と血合筋組織における筋線維の空胞変性の出現率は高く，その程度は高度で広範囲 に及ぶ個体が多かった（Fig．2）。それに対して，実験区2でほ同病変の発生率は低く，個々の個 体でもその程度は非職に軽微であった（Fig．3）。実験区1では同病変の発生率は高かったが，そ の程度は概して軽度から中等度であった。また失政区1では白色筋組織の筋線維の亭綿と壊死が 併発している個体も見られた。その壊死した筋線維はマクロファージの浸潤と会食を受け，その 周りには結合穐が相場していた（Fig．4）。内臓諸器官の病変として，セロイドを余念したマクロ ファージの馴射象が肝臓，脾臓，腎臓，膵臓に見られたが，3突放区の魚ともその程度は軽度で あった。また肝臓や腎臓の突撃に輿状條は見られなかった。
なお対照区の魚には肝臓，脾臓，腎臓，膵臓に非常に軽微なセロイドを会食したマクロファー ジの授盲！鞘健が見られたが，体側筋組織に特に異状は菩忍められなかった。
血液性状 ブラウンミールを投与した3実験‡夏および対照区との間で血液性状に特記すべき変 化は見られなかった（Table4）。
考 察
近乳 飼料用ホワイトフィシュミールの原料不足と晶繋の低下のためイワシ類を原料としたブ ラウンミールの生産高が大きくなりその晶繋も良くなってきた。ブラウンミ岬ルは盤魚飼料の原 材料として多用されるようになり，盤鰻用飼料の山部にはブラウンミ…ルを主原料とした製品も 出ている。また，ブラウンミールを主煉料としたブリ用配合飼料も実用段階の物が開発された
（高知水試1984）。しかしながら，過去にはブラウンミールの品傑が怒く，それを含む飼料を搾取 した魚は短期間で蕊璃な中毒症に陥ったと習われている（石丸 私信）。また螢近でも，ブラウン ミールを多く含む養魚用飼料は保管中の悪条件によって変質することがあり，それによる事故が ニジマスで起こっている（窪閏ら1981）。本来放では二種類の品繋の輿なるブラウンミールを日光 に曝すことによって慈愛させ，それを原料にしてコイの鋼管実験を行った。そのうち，低タン
パク価のブラウンミール（BMb）と商タンパク佃のブラウンミ…ル（BMa）をそれぞれ基本と した飼料を，網桝後日光に曝して怒変させて投与した爽験区1と2の供紙魚を比較検討すると，
低タンパク仰のブラウンミールを投与した実験区1のほうが成長率が怒く，ミオパテ…の発現率 も高かった。この事爽はブラウンミールを含有した飼料が悪変すると魚にミオバナーを起こすが，
商品繋のブラウンミールのほう（BMa）は変質しにくく，かつ魚に対する障喜作用も弱いことを
示している。本来倣では，怒変彼のブラウンミール基本飼料の脂質の状磯やビタミン類の成分盈
を検討していないが，供拭魚に発現したミオパテーは変敗した脂質を摂取した魚に見られたミオ
パテー（卵寄ら1881，MIYAZAKI1985）と同じであった。このことから，ブラウンミール基本飼
料の悲変に！祭してブラウンミールに含有されていた脂繋分が変敗して，供拭魚の筋組織にミオパ
滋殖魚の栄養性ミオパテ一顧戯評に関する研究−Ⅸ
Table 3，Weight gain of earp fed brown mealand white fish meal
ユ35
Wei紳七郎血（g）（mean 土SE）
y a D
S
0 4 6 8 6 0 ％ 6 8 ハU 3 6 ′．・︑
1 1 ▲1 n
a G
5．1±1．6 20．5± 2．9 35．4土 7．9 45．8土12．4 60．8土20．6 53．6士16．6
951
6．2±1．1 22．2土 3．7 37．7士 8．2 57．3士ユ6．4 67．6士ユ5．2 67．4土 9．7
987
7．2士1．5 6．5± 0．9
18．6± 4．1 14．8土 2．7 35．8± 7．3 30．9土 2，2 55．9士13，8 50．1± 9，4 58．7±22．3 56，1士 9．5 62．0±ユ6．5 63．3土20．0
761 874
Averag80flO fish
Feeding：satiation．FloIV−through systemlVith subterranean＼Vater（16−24℃）
TabIe 4．Hematologicaldata of earps fed bl・OWn mealand
、Vhite fisllmealat t】le160th day
Ex．1 Ex．2 Ex．3
RBC 178±21．7 177土23．1
Hb lO．ユ士1．4 10．4士1．3
rft 39．3士 8．4 43．2土 6−0
171± 0．6 16B士 3．5
9．2士1．1 7．2± 0．6
39．2± 6．4 38．9± 5．3
RBC：Red blood ccllcount（xlO ice】V離），Hb：Hemoglobin（g／dl）
トtt：Hematocriと（％）
チーを主徴とする障蕃を及ぼしたと考えられた。
低タンパク欄のブラウンミール（BMb）では，粥研後と嗣飼前にそれぞれ惑変させて投与実験
（実験区1，3）に供した。その結束実験区3のほうが成長が怒く，また個々の魚のミオバナー の程度も高度であった。この事実は嗣術後の悪変凍作では飼料中に含有しているビタミン類が脂 質の変敗を弱めたのに対し，網研前にブラウンミールを憩変した場合にはそのなかの脂質の変敗 が進み供試魚により強い障喜を及ぼしたと考えられた。また，これら慈愛したブラウンミール基 本飼料で飼督した魚に発現したミオパチーは，体側筋のうち掛こ血合筋組織と桃色筋組織に好発 していた。それに対してホワイトフィシュミール基本飼料（宮崎ら1981）やカゼイン基本飼料（
MIYAZAK王ユ985）で免験的に起こしたコイのミオパテーは白色筋組織に好発する傾向があった。
飼料原料によってミオパテーの発現部位が異なるのはそれぞれの筋線維の代謝との関連を考える
上で興味深い。
宮崎照雄・漸〕l兇・窪川三郎
1：う（う
