種々のカニ類中腸腺の蛋白質分解酵素 : 2．ハナサキガニ中腸腺の蛋白質分解酵素の季節的変動

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(1)Title. 種々のカニ類中腸腺の蛋白質分解酵素 : 2．ハナサキガニ中腸腺の蛋白質分解酵素の季節的変動. Author(s). 伊藤, 裕三. Citation. 北海道教育大学紀要. 第二部. A, 数学・物理学・化学・工学編, 23(2) : 74-80. Issue Date. 1973-03. URL. http://s-ir.sap.hokkyodai.ac.jp/dspace/handle/123456789/5963. Rights. Hokkaido University of Education.

(2) . ｌＶｏ・２３．２，ＮＯ. ｉｄｏＵｎｉｖｅｒｉｉｏｎ（Ｓｅｃｉｏｎ．ＩＡ）ｊｏｕｒｎａｌ。ｆＨｏｋｋａｔｙｏｆＥｄｕｃａｔｔｓ. Ｍａｒｃｈｌ９７３. 種々カニ類中腸腺の蛋白質分解酵素２．ハナサキガニ中腸腺の蛋白質分解酵素の季節的変動. 藤. 伊. 三. 格. 北海道教育大学釧路分校化学教室. ｉｉＰｒｏｔｅｏｌｙｔｏｕｓＣｒａｂｓｒｏｍｔｈｅＨｅｐａｔｏｐａｎｃｒｅａｓｏｆＶａｒｃＥｎｚｙｍｅｆｉｉｖｉｉｉエーｔｙｏｎｏｆｐｒｏｔｅｏ．ｙｔｃＥｎｚｙｍｅＡａｃｔａｔ・ＳｅａｓｏｎａＩＶａｒ. ｌｖｅＥｄＷａｒｄｅｓｅｔＬｕｃｕｓｆｐｑｍＺＺ放りｄｅ）ｓｂｒｅ災汐ｅｓ（日．ＭｉｏＹａｓｕｚｏＩＴＯｉｌｄ｛ｉｄｏＵｎｉｉｔｙｏｆＥｄｕｃａｔＣｈｅｍｉｓｏｎｒｏＢｒａｎｃｈａｖｅｒｏｒｙｃａＩＬａｂｏｒａｔ，Ｈｏ，Ｋｕｓｈｉ. 緒. 論. ）でタラバガニプ前報１，ハナサキガニ及びケガニの三種のカニ中腸腺に含まれるトリシン様活性. を有する蛋白質分解酵素のカラムクロマトグラフィー及び電気泳動的挙動を検索した結果を報告した．. 本報告はハナサキガニ中腸腺の蛋白質分解酵素の酵素活性の季節的変動を雌雄…別に検索した結果. である．即ち，一般にヵ二類（甲殻類全体を含め）は生長するに従って脱皮を行なうが，成体になると年一回脱皮すると報告されている．カニの種類によって脱皮の時期は異なっているがハナサキ. ガニは脱皮時期が６月頃である．この時期の中腸腺の状態は他の時期，５月及び８月以降と比較して著しく着色していることが多かった．そこで脱皮前の時期と脱皮時期と脱皮後の時期とで，中腸）で報告したのと同一の腺に含まれる蛋白質分解酵素の活性に差があるのではなし・かと考え，前報ー. ：期方法で各時期の酵素を雌雄 …別に調製しその酵素活性を比較検討した。その結果脱皮時期と他の時. との間に顕著な差が認められたので報告する．. 実験試料及び方法ｌ））は１９７０年５月，６月，ｖｅＥｄｗａｒｄｅｓｅｔＬｕｃｕｓハナサキガニ（Ｐαγα励んｏｄｅｓｂ彫り中ＢＳ（Ｈ．Ｍｉ. 卜で漁獲されたもので，水揚げ後直ち８月，９月，１０月及び１１月浜中町霧多布沖及び根室市花咲きこ区別し脱甲し中腸腺を採取した．採取した中腸腺は直ちにドライアイスで－２０ｏＣで凍結にー雌雄を）と同一の操作で行なった即ち中腸腺し，研究室に持ち帰った，中腸腺から酵素の調製は前報１，，ｏＣ４２２ｌｏ６８～７Ｍ１５Ｈを）加え時間以下で抽出したに３倍量の／リン酸塩緩衝溶液（Ｐ．．．次いで. 酢酸鉛処理，硫安分別，アセトン分別を行なった．また一部は硫安分別後セファデツクスＧ－５０.

(3) . 第２３巻第２号. 北海道教育大学紀要（第２部Ａ）. 昭和４８年３月. ３×２０ｃｍ）を用いてカラムクロマトグラフィーを行なった後アセトン分別を行なった（．. ）と同一の方法で行なった酵素活性の測定及び蛋白質の定量は前報１，. 実験結果並びに考察１．各時期における蛋白質分解酵素の調製）と同一の方法で蛋白質分解酵素の調製を行なった結果は第１表に示した前報１．，第１表各時期におけるハナサキガニ中陽腺の蛋白質分解酵素の調製結果Ｆｒａｃｉｔｏｎ. ＴｏｔｉｎｔａＩＰｒｏｅＴｏｔｉｔａＩＵｎＮｉｔ）ｒｏｇｅｎ（ｍｇ. Ｉ２. ６５. 童５６Ｉ２. ６６. え５６Ｉ２. ６８. 三. ８３２５．７５１４．. ６１４５ ‐ ，１４８Ｏ．７２．２２７．. １４６４Ｏ．，１３８４Ｏ，，９９５Ｏ１，．６０２Ｏ．. ２３５，２７６１．. ３８０Ｏ１．，２６Ｏ１０，．５８０Ｏ．. ５. ３２２Ｏ．７２．. ６. ９１１．. Ｕｎｉ／ｍｇｔ. ｉＦｒａｃｔｏｎ. ９１０．０５５，. Ｉ. ２９６４．. ６４１Ｏ． ‐ ６４５７．４６４Ｏ，. ３１４．３１．３. ６４．５３５５，. ８９０，６６１５．. １３７６Ｏ．，５８２４Ｏ，．. ９４０．８７１．１０８．. ２１４５Ｏ．，３１２０Ｏ，．１４５７．. ５１８，６２０．. ＴｏｉｎｔａＩＰｒｏｔｅＩＵｎｉＴｏｔｔａＮｉｔｒｏｇｅｎ（ｍｇ）. ２. 宇５. 童. １２０８Ｏ，，９８４Ｏ．. Ｏ１０１６．，６４０Ｏ．. ０８４，６５０．. ７２２４．. Ｏ１１６３，，Ｏ２３０４．，. ５７５．５２０４．. ０７８，１４３０．. ５６８Ｏ．９７２Ｏ１，．８Ｏ２３１，．. １００．１０６．０５２．. ５. Ｏ７２８．５４４，. ５６８Ｏ，９Ｏ１０４，．６１２１Ｏ，．. ６９７Ｏ．. ５. ７３５．１４４，. ６Ｉ２. 宇６. Ｕｎｉｔ／ｍｇ. 豆. ６７１．３１９．. ２８００Ｏ．，２９３７，. ８５３．６０６，. ３３６８４，，. １１４７．. ６. ２１７Ｏ，. ６０ｌ３３．，ｒ. ９０１３．. Ｏ７３２．８６１０Ｏ，．１１４０Ｏ，．. ５３０．４８１．９７１．. Ｉ. ２７３０Ｏ，，６８Ｏ１３，．. ２０４０Ｏ，，６１１４Ｏ，，. ７４０．０７１，. ２０６５，. １７３５．. ２３１，１３９２．. ８２１，８０８Ｏ２，．. ０７０．００１５，. １０１００， ’ １４Ｏ．. ３１４．９１．４. ２. ９８. 室. ９２０Ｏ３．，２５９Ｏ．. ５６. ７８００Ｏ．，９２０Ｏ．. ９０１，３５０．. ５：脱皮前，６：脱皮時期，８：脱皮後，５飽和）０２４時間後）１：粗抽出液（３時間後），，５：硫，２：組抽出液（，３：酢酸鉛処理後，４：硫安塩析物（６６０２飽和０（％安塩析物（）アセトン沈澱物），．，：６月）の試料と他の時期との相違第２表脱皮時期（. 辛. ５６６１． ‐ １１４７，. ０５３，. ８９０．６２０，９４１，. ０８４．１００．. ０７８．６６．０. １４２０．９１３．０. ６. ９１０．０９４．. ８５. ５６. ６８. ０７５．. ０７０，. ５：脱皮前，６リ脱皮時期，８：脱皮後．Ｆｒｉａｃｔｏｎｌ，６は第１表を参照，，５. （７５）. １７３５．. １５００，.

(4) . ｌＶｏ．２，２３，Ｎｏ. ＩＪ０ｕｒｎａ１ｏｆＨ０ｉｄｏＵｎｉｖｅｒｉ｛ｋａｉｏｔｙｏｆＥｄｕｃａｔｉｏｎ．ＩＡ）ｓｌｌ（Ｓｅｃｔ. . Ｍａｒｃｈｌ９７３. Ｏｇ１，. . . 製. 隊０５，. ５雷ｏ．ＡＩ. ＡＩ. Ａ２. １０. ２０. ３０. Ａ２２０. １０. ４０試験管教. ３０. 試験管数. ０言１． . ：濠Ｑ５，. ＡＩ. 聾ｏ．. Ａ２. Ａ‘. ２０. １０. ３０. Ａ２４０試験管数. ３０. ２０. １０. ４０試験管数. ｇ１Ｏ，. ０き１，. 闘ｌ. 含. 駅０５，ＡＩ２０. １０. 警. 自. Ａ２. ３０. ４０試験管数. ＡＩ. Ａ２. ０１. ２０. ３０. ４０試験管数. 第１図各時期の粗酵素のセファデラックスＧ－５０カラムクロマトグラフィー第３表. セファデラックスＧ‐５０カラムクロマトグラフィーにより分離されたＡ．及びＡ２区分の蛋白量と酵素活性Ｆｒａｃｔｉｏｎｌ（Ａ，）. ５６. ６８５. ９. ６８. ．．. Ｆｒａｃｔｉｏｎｌｌ（Ａ２）. Ｐｒｏｔｉｎ（％）ｅ. Ａｃｉｉｔｔｖｙ（％）. Ｐｒｏｔｉｎ（％）ｅ. １５７３．５８０，２７０９７，. ７６８１．４４３，０６５８７，. ２６８５，９４１．８２９０３，. １９、・２３．５５７０．. ６７０２．. ６０９２，５０６４．. ９８３２．４４２８．. ３９０８．４９３６，. ５５７２．６８４６．. ６１７８．. ３１５４．. Ａｃｉｉｔｔｖｙ（％）. １２３４．. ２１３９，. ５：脱皮前，脱皮時期，８：脱皮後，Ｆｒａｃｔｉｏｎｌ（Ａ，ｉｏｎｌｌ（Ａ２））：第１図参照，，Ｆｒａｃｔ. 第１表から各時期における蛋白質分解酵素の比活性は粗抽出液からアセトン粉末の段階で５月の０倍以上に増加し著しく精製されたことが認められたしかし雌雄は凡そ１７倍強，８月の雌雄は２，６月の雌雄は共に１３倍前後にしか比活性の増加が認められなかった脱皮時期即ち６月の試料と，．他の時期の試料との相違を示したのが第２表であって，第２表から５月及び８月の試料では活性を示さない硫安分別の区分に６月の試料では活性が認められた．（７６）.

(5) . ３巻第２号第２. 北海道教育大学紀要（第２部Ａ）. 昭和４８年３月. この事からカニの脱皮前（５月）６月）８月）の３時期の間には明らかに含有，脱皮時期（，脱皮後（される蛋白質分解酵素の状態に相違があると考えられた．次にこれらの事を詳しく検討する目的で硫安分別後セファデツクスＧ－５０カラムクロマトグラ，フィーを行なった結果は第１図に示した，．. 第１図に示されたように各時期共二つの区分（Ａ及びＡ）が表われたＡ区分の変動は雌雄，２ ‐ ．，とも脱皮時期（６月）に最低になったＡ，区分は８月以降徐々に増加し５月の値に近づくことが雄．の場合には認められた，. 一方Ａ‐ ６月）に雌雄ともに最大になり以後２の区分はＡ，の区分の変化とは対照的に脱皮時期（次第に減少し，９月，］０月，１１月にかけ徐々に増加し５月の値に近づくことが雄の場合には明らかに認められた．. Ａ，Ａ２区分の蛋白質量酵素活性は第３表に示した第３表からＡとＡ区分について脱皮，，２，．）６月）には特異的であることが明らかであった２時期（．. 以上の事から，脱皮時期（６月）のハナサギガニ中腸腺の蛋白質分解酵素は他の時期と比較してその挙動を異にすると考えられるこのＡ２区分と第２表に示した硫安分別区分との関係について．はまだ明らかでなし・．. ２．各時期のＡ，区分に含まれる蛋白質分解酵素の二，三の性質各時期のＡ，区分を更にＤＥＡＥ－セファデックスを用いてクロマトグラフず一を行ない，得られ. １）た区分をアセトン粉末としたは．このアセトン粉末は前報で報告した様にディスク電気泳動的に２）一均であった．このアセトン粉末の紫外部吸収測定結果の一部は第２図に示した．またアセトン. 粉末から得られた結晶は第３図に示した．結晶についての詳細は他に報告する．ｉ）至. 適. ｐＨ. ０の間で３７ｏＣｐＨ５．５から９．，１０分間反応を行ない酵素作用を測定した，結果は第４図に示し. た．０であった．これは夕第４図に示したように，５月，８月の試料の結果は雌郷！共に至適ｐＨは７．１０・. ０８，. ６閃０，. ０４．. ０２．. ３２０. ２５０. ２７０. ２９０. ３１０. ３０３. 第２図酵素のアセトン粉末の紫外部吸収（７７）. ３５０ｍ “.

(6) . １Ｖ◇ ．２．２３，ＮＯ. Ｊ◇ｕｒｎａｌｏｆＨ０ｋｋａｉｄｏＵｎｉｖｅｉｔｙｏｆＥｄｕｃａｔｉｏｎ（ＳｅｃｔｒｉｓーＡ） ◇ｎエ. Ｍａｒｃｈ・９７３. 二〆さＦ嚢す達頚部電器ｉｒ具ず. 第３図酵素の結晶 → ０. ０６．. （きＱき. ６／. . . . ▲ ＼ ′ ＼＼ ▲ －／. ４米０，. ０２，. －／／ ▼ ＼６. ０２．. ０７．Ｈ反応髭夜のｐ. ８０．. ５０．. 第４図ｐＨと作用の関係. ６０．. ８０７０．．夜のＰＨ反応鳶反応昆液の. ）しかし６月の試料の結果は雌雄共にネラバガニ中腸腺の蛋白質分解酵素の結果と同じであった３酋．々酸性に偏っていた，さらにアリカリ側にも活性が認）られた，ｉｉ）至ｐＨ. ０. 適. で. 温. 度. ２５ｏＣから. 果は第５図に示した．. ７０ｏＣまでの温度範囲で各１０分間反応を行ない酵素作用を測定した結．. 第５図に示したように５月，８月の試料の結果は雌雄共に. ５０ｏＣ～５５ｏＣ. の間に至適温度が認めら. ）しかしれた．これはタラバガニ中腸腺の蛋白質分解酵素について得られた結果と同じであった３．ｏｏＣ５５６Ｃ０～６月の試料では雌雄…共に）ではザしこ偏っていた．ｐＨに対する安定性を検討した結果４. ）と同じ傾向を示した温度に対する安定性を検討した結リガニ中腸瞬きのトリプシン様酵素の結果５．（７８）.

(7) . 昭和４８年３月. 北海道教育大学紀要（第２部Ａ）. 第２３巻第２号. ０４. ０６０５反応混液の温度. Ｃ００７. ５０６０反応混液の温度. ０．７. 第５図温度と作用の関係）は５０ｏＣ５５ｏＣでは３０分以内に速やかに失活した，しかし３５ｏＣ前後ではザリガニ中腸腺の果４，，. ）と同じく長時間安定であったトリプシン様酵素の結果５．. 以上の事から精製したＡ，区分については５月と８月の試料ではザリガニ中腸腺のトリプシン様）で報告したタラバガニ中腸腺の蛋白質分解酵素で酵素ときわめて類似した傾向が認められ，前報３. の結果とよく一致した，しかし６月の試料ではその結果は他と比較して異なっていた．６月の試料が５月，８月の試料の結果と異なることは１９６９年度の実験でも認められているので脱皮時期特有のものと考えられる，この相違が何に由来するのかまだ明らかではないがインシュリンＢ. 鎖に対. ）合成基質ＢＡＥＥに対する分解特異性７）の結果及び大豆トリプシン阻害剤を使する分解特異性８，８っての阻害実験）の結果から触媒作用には差がないと考えられる，その他の理由については目下検討中である．約. 要. １）ハナサキガニ中腸腺の蛋白質分解酵素を脱皮前，脱皮時期，及び脱皮後の３時期に分けて調製した．. 各時期の試料を比較すると，脱皮時期の試料は至適ｐＨ，至適温度，セファデックスクロマトグラフィー等の検討結果，他の時期との間に特異的な相違が認められた，３）脱皮時期の試料を除く他の時期の試料から得られた中腸腺の蛋白質分解酵素の性質はタラバ２）. ガニ中腸腺の蛋白質分解酵素の性質と同じ傾向であった，この事はまたザリガニをはじめ無脊椎動. 物中腸腺のトリプシン様酵素の諸性質ともきわめて類似した．. 試料の採取にご協力下さった北海道釧路水産試験場相沢悟科長，浜中町霧多布漁業協同組合，浜中町山崎缶詰株式会社及び根室市漁業協同組合の各位に深謝する．また，結晶写真を撮影して戴いた本学生物学教室長尾善助教授並びに分析にご協力頂いた小沢成子氏に深謝する，. （７９）.

(8) . ＶＯ１，２３，２，Ｎｏ. ＪｏｕｒｎａｌｏｆＨｏｋｋａｉｄｏＵｎｉｉｉｏｎ（ＳｅｃｉＩＡ）ｔｔｒｓｖｅｏｎｌｙｏｆＥｄｕｃａｔ. Ｍａｒｃｈｌ９７３. Ａｂｓｔｒａｃｔ. ｌｎｔｈｅｐｒｅｖｉｏｕｓｐａｐｅｒ，ａｒｅｐｏｒｔｗａｓｐｒｅｓｅｎｔｅｄｏｎｔｈｅｃｏｌｕｍｎｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙａｎｄｅｌｅｃｔｒｏ‐ ｉｆｐｒｏｔｅｏｌｙｔｉｃｅｎｚｙｍｅｓｆｓｏｎｔｈｅｈｅｐａｔｏｐａｎｃｒｅａｓｏｆｖａｒｉｏｕｓｃｒａｂｓ，ｐｈｏｒｅｓｒｏＩ. Ｔｈｅｐｒｅｓｅｎｔｐａｐｅｒｄｅａｌｉｖｉｔｈｔｈｅｓｅａｓｏｎａｌｖａｒｉａｔｉｏｎｏｆｐｒｏｔｅｏｌｙｔｉｃｅｎｚｙｍｅａｃｔｔｙｆｓｗｉｒｏｍｔｈｅｈｅｐａｆｔｈｈｂ餌鷲卿ｄＰ彰ＭＥｄｄｅｓｏｐａｎｃＨｉｌｒｅａｓｏｔｅｓｏｒｅｃｒａ，（嵐鯛鮎臨まｇαれＺ好ｇｓの珍ｅｓ（ｗａｒｖｅ，，ｅｔＬｕｃ））ｕｓ．Ｔｈｅｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｒｅｓｕｌｔｓｏｂｉｎｅｄｍａｙｂｅｓｕｍｍａｒｉｚｅｄａｓｆｏｌｌｔａｏｗ；１，Ｐｒｏｔｅｏｌｙｔｉｈｈｆｈｈ士ｔｂｃｅｎｚｙｍｅｆｔｅｓｉｔｏｒｏｍｅｐａｐａｎｃｒｅａｓｏｅｏｅｃｒａ，Ｈａｎａｓａｋ ‐ １ｇａｎ，１ｎｍｏｕｌｔｉｎｇ. ６ｅｄａｎｄｃｒｙｓｔａｌｌｉｚｅｄ．ａｎｄｎｏｎ‐ｍｏｕｌｔｉｎｇｐｅｒｉｏｄｓｈａｖｅｂｅｅｎｉｉｔｓｏｌａｅｄ，ｐｕｒ. ２，Ｐｒｏｔｅｏｌｙｔｉｃｅｎｚｙｎ・ｅａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｔｈｅｓｈｏｒｅｃｒａｂ，Ｈａｎａｓａｋｉｉｎｇｐｅｒｉｔｏｄｗａｓ ‐ｇａｎｉ，ｉｎｎ・ｏｕｌｉｄｅｒａｂｌｃｏｎｓｅｎｔｆｒｏｎｌｔｈａｔｏｆｅｎｚｙｍｅ・ｉｎｎｏｎ－ｍｏｕｌｔｉｎｇｐｅｒｉｏｄ，ｙｄｉ畳ｅｒ３．ｏｐｉｍｕｍｐＨｏｆｔｈｅｅｎｚｙｍｅｆｔｒｏｍｔｈｅｈｅｐａｔｏｐａｎｃｒｅａｓｏｆｔｈｅｓｈｏｒｅｃｒａｂｉｎｎ・ｏｕｌｔｉｎｇａｎｄｌｉｉｄｆｈｈｄｎｏｎ‐ｍｏｕｔｎｇｐｅｒｏｓｏｒｔｅｙｒｏｌｙｓｉｓｏｆｃａｓｅｉｎｗａｓｆｏｕｎｄａｔｐＨ６．６‐７．ｏａｎｄｐＨ７０－７．４，ｌｉｖｅｙｒｅｓｐｅｃｔｆｔｈｅｓｅｅｎｚｙｍｅｗａｓｓｔａｂｌｅｏｖｅｒｔｈｅｐＨｒａｎｇｅ６．０－８．ｏａｔｂｅｌｏｗｔｙｏ・ｖ・．Ｔｈｅａｃｔ. ４０ｏＣｆｏｒ２４ｈｏｕｒｓ，ｗｈｉｌｌｙｉｎｅｄｇｒａｄｕａｌｅｉｔｙｄｅｃｌｎｍｏｒｅｐｒｏｌｏｎｇｅｄｔｉｍｅｓｔｈｅａｃｔｉｖｉ．ＢｅｙｏｎｄｔｈｉｆａｃｔｉｖｉｔｙｐｒｏｃｅｅｄｅｄｒａｐｓｐＨｒａｎｇｅ，ｔｈｅｌｏｓｓｏｉｄｌｙ．４ｉｍｕｍｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｏｆｔｈｅｅｎｚｙｍｅｆｔｆｔｈｅｓｈｏｒｅｃｒａｂ，ｉｎｍｏｕｌｔｉｎｇ．ｏｐｒｏｍｔｈｅｈｅｐａｔｏｐａｎｃｒｅａｓｏａｎｄｎｏルｍｏｕｌｔｉｎｇｐｅｒｉｏｄｓｆｏｒｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓａｔｐ日７，ｏｗａＳ５５‐６００Ｃａｎｄ５０－５５０Ｃｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ，，. Ｔｈｅａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｔｈｅｓｅｅｎｚｙｍｅｓｄｅｃｌｉｉｃｕｌａｒｌｙａｔ４５ａｎｄ５０ｏＣｎｅｄｓｈａｒｐｌｙａｔｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｓ，ｐａｒｔ，ｔｈｉｎｃｕｂａｔｉｏｎｔｉｍｅｌｏｎｇｅｒｔｈａｎｌｏｍｉｎｕｔｅｓ，・ｖｈｉｌｅａｔｂｅｌｏｗ４０ｏＣｎｏｃｈａｎｇｅｓｏｆｔｈｅａｃｔ・ｖ・ｔｙｗｉｉｆ２４ｈｏｕｒｓ，ｗｅｒｅｏｂｓｅｒｖｅｄｏｖｅｒａｐｅｒｏｄｏ. ５ｉｉｎｇｐｅｒｉｏｄｗａｓｓｔｉｍｉｌｆｔｈｅｋｔｈｔｈｅｅｎｚｙｍｅｉｉａｎｅｄｗｉｔｏｎｎｏｎ‐ｎ・ｏｕｌｔ．Ｔｈｅｖａｌｕｅｏｂａｒｔｏｔｈａｎｇ. ｉルｌｉｋｅｅｎｚｙｍｅ，ｃｒａｂｔｒｙｐｓ. 文. 献. １）伊藤格三・小沢成子・帆保圏雄北教大紀要１１（Ａ）２１６（１９７１）．，６. ２５年４月）講演，）伊藤格三日本水産学会（於東京昭和４. ３ｔｔｉａ薙ｓ九，２８）Ｔ，Ｓａｉｔｏ１９６２ｓｈｉｈａｒａａａｎｄＹ，ｌｏ１９６３）），Ｙ，ｌ，Ｙ，Ｍａｉ， β““．／砂，Ｓｏｃ．Ｓｃ，，１０１５（，２９，９４２（. ４５年８月）講演，）伊藤格三日本化学会秋季大会（於札幌昭和４. ｌｉｎｇｉｄｅｒｅｒ５！破り２８）Ｒ１９６９７ぬれ β！αあの，２）．Ｚｗｉｌ，Ｇ．ＰＨｅ，ａｎｄ日．日．Ｓｏｎｎｅｂ。ｒｎ，Ｃの’ ．Ｐゐｙｓ，１２７５（．. ６０回北海道栄養食糧学会（於札幌昭和４）伊藤格三・小沢成子第２５年９月）講演，７）伊藤格三日本水産学会秋季大会（於函館昭和４６年１０月）講演，８）伊藤格三未発表，. （８０）.

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