す影 響 特 異的免疫応 答 妊娠 免疫 仔 可溶性蛋白抗原

可 溶 性 蛋 白抗 原 による妊 娠 ^{マ ウ ス} 免 疫 ^が仔 ^マ ウ ス の

特

異 的免 疫 応

答 ^へ

お よ^ぼ す影

響

^{に つ い て}

金

沢

大学

が ん 研

究 所 病 態

生 理

部

( 主

任

^:

倉

田

自費 教 授

)

金

沢

医 科 大 学

血

清 学 教 室

(

指 導

^:

西 東 利

男

教 授)

浦 美 洋

(

昭

和

^{5 8}

年

³ 月 ^{3 1} 日

受 付)

妊 娠 動 物

の

免 疫

が そ の

仔 動 物

の

特 異免 疫 反応

^に お よ ぽ す

影 響

^{に つ い} て の

実験 的 研 究

^{に は}

不 充 分

な

点

が あ り

,

そ の

機作

に も

不 明

な

点

が

多

^い

. 著者

は T

細 胞 依存 性

の

可 溶 性 異種 蛋白 (

o v a l b u m i n

_,

0 V A

)

を

免 疫 原

と し て ^{m a t} e r n a l e 庁 e c t の

検 索

を

行

^っ た

.

ま

ず,

マ ウ ス で 0 V A に

対

し

高

い p l a q ^{u e} f o r m i n g c e 11

(

P F C

) 値

を

得

る

実験 条件

を

求

め た

.

C 5 7 B L

/

1 0 ^マ ウ ス に

約

2

週 間 隔

^{で 2 回}

(

1

次

2 0 ノ ノ g

,

2

次

2 0 0 〟 g

)

0 V A を A l

(

O H

),

ゲ ^{) t}

^/

と し て

腹 腔 内 注 射

し

,

4

^〜

5 日

後

^に

測定

す る と

高

^い P F C

値

が

得

ら れ た

^.

な ^お

,

0 V A 50 m g

/

m l と ^{e t} h _y l di m e t h _y l a m i n o p ^{r o} p y l c a r b o d ii m id e lO O m g

/

^m l を 6 ^: 1 の

量 比

^に し て

感 作

し た

羊

血

球

を

使

用 す る と

最

も

高

^い P F C

値

が

得

ら れ た

.

つ い で

,妊 娠 約

^{1 0 日}

日

に 0 V A 2 0 〟g を A l

(

O H

)3

ゲ ^ル と し て 1 回

腹腔 内 注射

し た C 57 B L

/

1 0 ^マ ウ ^ス か ら

生

ま れ た

仔

マ ウ ^ス は

,

上

述 同様

に 0 V A を

投 与

し た

後

^の P F C

誘 導

が

強

く

抑制

さ れ て い る こ と を

明

ら か ^に し た

.

そ の

抑 制 因

子 は

仔

^マ ウ ス の 血

清

と

脾 細 胞,

と く に

後 者

^に

存 在

し た が

,

そ れ ら の

活 性

は

抑 制

を

説

明 す る に は

充 分

で は な か っ た

.

K

e y ^{w o r}

d

s

I

m m u n o

l

o g y

, M

a t e r n a

l

e

ff

e c t

, Pl

a q ^{u e}

^‑f

o r m

i

n g ^{c e}

ll, P

r e n a t a

l

S e n S

i

t

i

z a t

i

o n

, T

o

l

e r a n c e

抗原 刺 激

を

受

け た

妊 娠 動 物

か ら

生

ま れ た

仔 動物

^の

特 異 免疫 応 答

を

実験

^{レ ベ} ル で

検 索

す る こ と は

, 免疫 系

^の

個 体発 生

^に

関

す る

知見

を

増

す の み な ら

ず, 妊 娠母 体

^の

感 染

や

, 予 防接 種

が

新 生 児

の

特 異 免疫 機 能

に

及

ぼ す

影 響, 即

ち

母

子

免 疫 問題

の

本 質

^に

関

し て

基 礎 的

な

知 識

を

与

え る で

あ

ろ う

.

妊

娠 中 あ

る い は

妊 娠 前

の

動物

を ウ イ ル ス

, 細 菌, 異 種血 球

な ど で

免 疫

し た

場 合,

そ の

仔 動 物

の

特 異免 疫 反 応

は

非 免疫 妊 娠 動物 由来

の

仔 動物

の そ れ と は

異

^っ て く る こ と が

以 前

か ら

知

ら れ て い る ^り

^〜4

⁾

.

そ ^の

変 化

は

, あ

る い は

抑 制

と し て

, あ

る ^い は

促 進

と し て

現

わ れ る が

,

そ れ に

関与

す る

困

子 と し て

抗 原

の

化学, 量, 免疫 時】札 動 物 系統 ( 遺 伝 的 背 景)

な どが

あ げ

ら れ る

⁵

⁾

.

しか し

,

こ の

間題

に

関

す る

実験 的 研 究

^{は 比}

較 的乏

し く

,

ま た

基 礎 的

デ

^ー

タ の

集 積

が

望

ま れ る

段 階

で

あ

る

^.

著 者

は

可溶 性

で

高 純 度

^に

得

ら れ る

異種 蛋 白 (

T

細胞 依 存 性 抗 原

) を

免疫 原

と し て

選

び

, 高 反 応 系

^の i n b r e d

マ ウ ス を

使

用 し て

実 験

を

行^っ

た

. 仔動 物

の

免 疫

反

応

は P l a q u e f o r m i n g c e ll

(

以

下

P F C と

略)

の

測 定

^に よ り

検 索

し た が

,

こ の

場 合, 仔 動 物

に

高

^い P F C

値

を

得

る よ う な

実験 系

を

確

立 す る こ と が

先 決 問題

と な

っ

た

.

そ ^こ で

著 者

は

種

々 の

検 討

を

行

^い

, 高

^い P F C

感 度

を

得

る い

く つ か の

条件

を

明

ら ^{か に} し た

^.

^つ い で

,

そ の 至

適 条件 下

で m a t e r n o f e t a l i n t e r a c t i o n に つ い て の

実 験

を

行

い

,

二

,

三 の 知

見

を

得

た

.

材料

^お よ び 方 法 1

. 実験 動 物

S p e c ifi c p ^a t h o g e n f r e e で

飼 育

し た 1 2

^〜

1 5

週 齢

(

体

重 2 5

^〜

3 0 g

)

の C 5 7 B L

/

¹ 0 マ ウ ス

(

以

下

B l O と

略

)

O

n t

h

e

Eff

e c t s o

f I

m m u n

i

z a t

i

o n o

f P

_{r e g} n a n t

M i

c e w

i

t

h S

o

l

u

bl

e

P

r o t e

i

n

A

n t

i

_g e n o n

t

h

e

S

_p e c

ifi

c

I

m m u n e

R

e s p ^{o n s e o}

f T h

e

i

r

O ff

s p ^r

i

n g

^. Y

o s

h ihi

r o

M i

u r a

, D

e p ^{a r} t m e n t o

f P

a t

h

o p

h

_y s

i

o

l

o g y

^, C

a n c e r

R

e s e a r c

h I

n s t

i

t u t ^e

, K

a n a z a w a

U

ⁿ

i

v e r s

i

_{t y}

_,

a n

d D

e p ^{a r} t m e n t o

f S

e r o

l

o g y

^, K

a n a z a w a

M

e

d i

c a

l U

n

i

v e r s

i

_{t y}

.

と C 3 H

/

H e マ ウ ^ス

(

以

下

C 3 H と

略),

お よ び

妊 娠

B ^l O ^{マ ウ ス} と そ の

仔

マ ウ ス を

使

用 し た

.

2

.

抗 原 ^お よ び

免 疫 方

法

抗原

と し て c h i c k e n e g g a l b u m i n

(

0 V a lb u m i n

,

G ^{r a} d e V

,

S i g m a C h e m i c a l C o

.,

以

下

0 V A と

略)

お よ び b o v i n e γ

‑

g l o b u li n s

(

C h o n f r a c t i o n I I

,

Si _g m a

,

以

下

B G G と

略)

を用 ^い た

. 各 抗原

を

生

理

的食 塩 水 ( 以 下生 食水

と

略)

^に

溶 解

し

,

そ の ま ま

あ

る い は

水 酸 化

ア ル ミ

^ニ

ウ ム

( 和 光純 薬,

以

下

A l u m と

略)

1 0 m g

/

m l と

等遺漏 和

し た ゲ ル

_,

ま た は F r e u n d

^】

s c o m p l e t e a d

j

^u

^･

v a n t

( 生化 学

工

業, 以 下

F C A と

略)

と

等量 混 和

し た

乳

濁

液

を ^マ ウ ス

腹 腔 内

^に

注射

し た

.

3

. 抗

原

感作

血

球

^の

作製

1 ) ト e t h y l

‑

³

^‑(

3

‑

^{d i m e t h y l a m i n o} p ^{r o} p y l

)

c a r b o dii

^･

m

i d e h _y d r o c hl o r id e

(

以

下

E C D I と

略)

を 用 ^い る

方 法

G o l u b ら

⁶

⁾ 0 )

方 法

に よ

^っ

た

. 羊 赤 血 球 (

s h e e p r e d bl o o d c e ll

,

以

下

S R B C と

略)

を リ ン

酸緩 衝 化 生 食 水

p H 7

･

2

(

p h o s p h a t e

^‑

b u f f e r e d s a li n e p H 7

^.

2

,以 下

P B S と

略)

で 3

回洗 浄後,

p a C k e d c e ll l

容,

P B S に と か し た

抗

原

溶 液 (

2

^〜

5 0 ^m g

/

m i

)

6

容,

P B S ^に と か し た E C D I

溶 液

⁽⁴

^〜

^{1 00 m} g

/

m l

)

1

容

の

割合

に

涙 含

し

, 水 冷

し な が ら 60

分

反

応

さ せ た

.

そ の

後

1

%

の f e t a l c a lf

S e r u m を

含

む P B S ^で 3

回 洗 浄

^し

, 同 液

で 5

%

v

/

v

血

球浮遊 液

^を

作製

し て

使 用

し た

^.

こ の

血 球

を E C D I

法 感 作血 球

と

呼

ぶ

.

2

)

タ ン

^ニ

ン

酸 (

t a n n i c a c id

,

以

下

^t a n n と

略)

を 用 ^い る

方 法

B o y d e n

^{7 )}

の

方 法

に よ っ た

.

P B S で 2

.

5

%

S R B C

浮 遊 液

を

作 製

し

,

そ れ ^に

等量

の 40

,

0 0 0

倍

^t a n n

生 食 水 溶 液

を

加

え

, 室 温

¹⁰

分 放 置

し

,

P B S で

洗 浄 後, 生 食 水

^で 2

･

5

%

Ⅴ

/

v

血 球 浮遊 液

を

作^っ

た

.

こ の

浮 遊 液

¹

容

^に リ ン

酸緩衝 化 (

p H 6

^.

2

) 生食 水

⁰

^.

^{25 m} g

/

m l に と か し た

蛋 白抗原 液

4

容

を ま ぜ

, 室温

5 分 反

応 後,

1

% 家 兎血 清 含生食 水

^で 2 回

洗浄, 同 生 食 水

で 2

.

5

%

Ⅴ

/

v

浮 遊 液

と

し た

^.

こ の

血球

を t a n n

法 感作

血

球

と

呼

^ぶ

.

3 ) 塩

化

ク ^ロ ム ( C r C l

｡)

を用 い る

方 法

S w e e t ら

⁸

⁾ の

方法

^に よ

^っ

た

.

S R B C を

生 食 水

^で 3 回

洗浄

し て

得

た p a c k e d c e ll l

容

^に 0

^.

0 4 M C r C1

3水溶 液 (

4

⁰

C

保存)

の

生食 水

に よ る 2 0

倍 稀釈 液

1

容

と

蛋 白抗 原生食 水 液 (

^{5 m} g

/

m l

)

1

容

を

加

え

, 室温

で 1 5

分 反応

さ せ た

後,

1

%

f e t a l c a lf s e r u m

含有 生 食 水

で 3 回

洗 浄

し

, 同 溶液

^で 5

%

Ⅴ

/

v

浮 遊 液

と し た

.

こ れ を C r

法 感 作血球

と

呼

ぶ

.

4

.

P F C

測 定

マ ウ ス

屠 殺 後, 直

ち に

牌臓

を

摘 出

し

,

1 0

%

f e t a l c a l f

S e r u m

含 有

R P M ト 1 64 0

(

日

水 製 薬) 中

で

細 胞

を

分 離

し

,

ナ イ ^{ロ ン} メ ッ シ

ュ ( 孔径

5 0 J L S w i s s N _y b o l t

社)

を

通

し た

後, 遠心 (

6 0 0 _{× g} l O

分)

と 上

記 培養 液

^に よ る

稀 釈

を 3 回 く り か え し て

洗浄

し

,

1

^〜

5 × 1 0

⁷個/

m l の

牌 細 胞 浮 遊 液( 以下

S P C と

略)

を

作 製

し た

.

こ の S P C と

抗 原 感 作 血 球 浮 遊 液

^の

各

0

.

1 m l を 4 3

⁰

C の

寒

天

溶 液

(

E a g l e m i n i m u m e s s e n t i a l m e di u m

中

^に

寒

天 0

^.

6

%

W

/

V

) 中

で

混 和

し

,

シ ャ

^ー

レ

( 内径

60 m 皿

) 内

へ

注

入

^･ 固化

し た

.

5

%

C O

2下

で 3 7

⁰

C 6 0

分 培養 後,

2

群

^に わ け て 1

群

に は 2

%

ゼ ラ チ ン

含 有

C a

^{+ 十},

M _g

^{+ +}加

0

^.

01 M ^ベ

ロ ナ

^ー

ル

緩 衝 液

p H 7

.

2 で 1 5

倍 稀 釈

し た モ ル モ ッ ト

乾 燥 補体

^を

寒

天 上 ^に

重層

し

,

30

分 後

に

溶 血

斑 を

数

え た

( 直 接

P F C

⁼

I _g M P F C

). 他

の l

群

に は

抗

^マ ウ ^ス I g G

抗 血 清

を

加

え

,

3 7

⁰

C 60

分 反 応

さ せ て か ら

洗 浄

し

, 前 群 同 様

^に

補 体

を

加

え て 反

応

さ せ

溶 血

斑 を

数

え た

( 間 接

P F C

⁼

I g M P F C + 1 _g G P F C

).

I _g G P F C

値

は

間接

P F C

僅

か ら

直 接

P F C

値

を

差 引

^き

, 統 計 処

理 を

行

っ て

得

た

⁹

^ト

^{1 2}

⁾

成 績

1

.

可

溶性 抗

原 ^で

高

P F C

備

を

得

^る

方 法

^の

検 討 ( り

B l O ^マ ウ ス に 0 V A ま た は B G G を

^一

匹

^一

回 5 0 _J J g

,

1

次 投 与

は F C A で

乳 化

し て

投 与

し

,

5

週 後

に 2

次 投 与

を A l ^{u m} ゲ ル と し て

行

^い

,

4 日

後

^に P F C

測 定

を

行

っ た

( 図

1

).

E C D I

法 感 作 血球

を 用 ^い る と P F C の

検 出

率

が

最

も

高

く

,

t a n n

法 感 作 血 球

で は

検 出

さ れ る P F C

数

は

少

く

,

C r

法 感 作 血 球

を 用 ^い た の で は ほ と ん ど P F C を

検 出

で き な か ^っ た

.

B l O ^マ ウ ス で は 0 V A

免 疫

の

方

が B G G

免 疫

よ り

多

く の P F C

( 間接

P F C

)

を

誘 導

し た

.

C 3 B ^マ ウ ス で は

同様

な

実 験

に お い て P F C の

誘 導

が B l O ^マ ウ ^ス よ り

全 般

^に

弱

か

っ

た

( 図

1

).

こ こ で も E C D I

法 感 作

血

球

が P F C

検 出

^に

最

も

有効

で あ ^っ た が

,

刷

珊

瑚

皿

U d S

㌔

L

＼ U

監

F i _g

･

1

^･

E 庁 e c t s o f s e n s i t i z e d e r y t h r o c y t e s o n i n d u c

^･

t i o n o f t h e p l a q u e

‑

^{f o r m i n} g c e ll

(

P F C

)

r e s p o n s e

.

T h e c o r r e s p o n d i n g a n t i _g e n w a s c o u p l e d t o s h e e p e r y t h

･

r ^{O C y t e S W i t h l}

^‑

^{e t h y ト3}

^‑(

3

T

^{di m e t} h y ト a m i n o

^･

p r o p y l

)

c a r b o dii m i d e

(

E C D I

) (

I

),

t a n n i c a c i d

(

Ⅰ Ⅰ

),

O r c h r o m i c c hl o r id e

(

III

)^.

0 V A

,

O V a lb u m i n ;

B G G

,

b o v i n e γ

^‑

g l o b u li n ; S P C

,

S p l e e n c e ll

^.

B l O ^マ ウ ス の

場 合

と

異

な り

,

B G G

免 疫

の

方

が 0 V A

免疫

よ

り

P F C

値

は

大

き か っ た

.

最

も P F C の

検 出 率

が

長

^い E C D I

法 感 作 血 球

^{に つ い} て

感 作 条 件

の

検 討 を 行

^っ た

. 抗 原

と E C D I の

濃度

を

変

え て

作魂

^{し た}

血 球

に よ る P F C

検 出率

の

変 動

を し ら ^べ た

.

0 V A

免疫

B l O ^マ ウ ^{ス に} お い て

^,

0 V A 5 0 ^m g

/

^{m l}

‑

E CI)I l O O m g

/

^m l で

感 作

し た

血 球

を

用

^い た

場 合

^に

高

い P F C

値

を

得

た が

,

そ れ

以 外

^の

組

み

合

わ せ

(

0 V A 5 0

m g

/

m ト E C D I 2 0 m g

/

m l

,

0 V A 5 0 m g

/

m 卜 E C D I 4

m g

/

^m l

,

0 V A lO ^m g

/

^m 卜 E C D I l O O ^m g

/

^m l

,

0 V A 2

m g

/

m トE C D I lO O m g

/

m l

)

で

感作

し た

血球

を

用

^い る と ほ と ん ど P F C を

検 出

で き な か っ た

( 図

2

).

B G G

免 疫

棚

知

珊

皿

U d

♂

ミ

U J L

A

n

t l g

^帥

知

刃

知 畑 2

労 災

知 迅

2

E C D I l 0 0

か q

川 畑 1

聞

卸

q

l 0 0 1

t 氾

C

o n c e n

t

r a

t j

o n

(

^m

g /

^m

り

F i g

^.

2

^.

E ff e c t o f a n t i g e n : E C D I r a t i o f o r p r e p a r i n g S e n S i t i z e d

^‑

e r y t h r o c y t e s o n t h e P F C a s s a y

^.

R e a c

^･

t i o n m i x t _{u r e c o n s} i s t s o f O

^.

1 m l o f p a c k e d s h e e p e r y t h r o c y t e s

,

6 ^m l o f t h e a n t ig ^{e n s o} l u t i o n a n d l

m l o f E C D I s o l u t i o n

.

U d S

も

L

､ U 山 d

A F S A F S

Fi g

^.

3

^.

Eff e c t s o f a d

j

^{u v a n t s} o n i n d u c t i o n o f t h e

P F C r e s p o n s e i n m i c e

.

C 5 7 B L

/

10 m i c e w e r e

i m m u n i z e d w i t h 5 0 J L g O f O V A i n A l

(

O H

)3(

A

),

i n

F r e u n d

^'

s c o m p l e t e a d

j

^{u v a n t}

(

F

),

O r i n s a li n e

(

S

)^.

T w o w e e k s l a t e r

,

a ll m i c e w e r e b o o s t e d w i t h 50 F ^L g ^O f O V A

.

T h e P F C a s s a y ^w a s p ^{e r} f o r m e d o n t h e

4 t h a n d 6 t h d a y ^a f t e r t h e 2 n d i ⁿ

j

^{e c t} i o n

.

B l O ^マ ウ ス の

場 合

^に は B G G 50 m g

/

m l

^‑

E C D I l OO

m g

/

m l の

組

み

合

せ ^に よ る

感 作 血 球

を 用 ^い る と

低値

な が ら P F C を

検 出

で き た が

,

そ れ

以 外

の B G G

^‑

E C DI

洩 度

に よ る

感 作 血 球

^{で は}

検 出

で き る P F C

値

は

極

_{め て}

低

か っ た

( 図

2

).

C 3 H ^マ ウ ス の

場 合

で も 0 V A

あ

る い は B G G

免 疫

^に お い て

抗 原

5 0 ^m g

/

m ト E C DI l O O m g

/

m l の

組

み

合

わ せ に よ る

感作 血 球

を

用

^い る と P F C

検出 率

は

最

も

高

か っ た

( 囲

2

).

こ の ^マ ウ ス で は 0 V A

免疫

よ り も B G G

免疫

の

方

が P F C の

誘 導

は

高

か っ た が

,

そ れ も B l O ^マ ウ ス を 0 V A で

免 疫

し た

場 合

^に

比

べ て

遥

か に

低 値

で

あ

っ た

^. 以 上

の

結果

か ら

, 以後

の

実験

は す べ て 0 V A で

免 疫

し た B l O ^マ ウ ^{ス に つ い} て 0 V A 50

m g

/

m l

^‑

E C D I l O O m g

/

m l の

組

み

合

せ で

作

っ た E C D I

法 感 作 血 球

を

使用

し て P F C

測定

を

行

う こ と に し た

.

2

^. 可 溶 性 抗

原 で

高

P F C

値

を

得

_ろ

方

法 ^の

検討 (

Ⅰ Ⅰ

)

0 V A 5 0 J L g を

生食 水,

あ る ^い は A l u m

,

F C A と とも に

腹 腔 内 注 射

^{し た B l O マ ウ ス の 4}

,

6

,

9 日

日

の

脾

を

摘 出

し て P F C を

測 定

し た が ^い

ず

れ も

陰 性

で あ っ た

.

そ こ で

,

上

記 注 射 群

の 2

週 目

^に 0 V A 5 0 j

^L

g を A l u m

と と も に

再 往 射

し

,

そ の 4 日 お よ び 6 日

後

^に P F C を

測 定

し た

( 図

3

).

A l u m を

加

え て 1

次 免 疫

し た ^マ ウ ス は 2

次 免 疫 後

4 日

目

に

多数

の P F C を 示 し た が

,

6 日

目

で は

著

し く

減 少

^{し た}

^.

¹

次 免 疫

を F C A を

加

え て

行

っ た ^マ ウ ^ス は 2

次 免 疫 後

4 日

目

の P F C は

少

な い が

,

6 日

日

^に は か な り の

増 加

を 示 し た

.

0 V A を 生

食 水溶 液

の ま ま a d

j

u v a n t な し で 1

次 免 疫

^に

使

用 し た

場合

は そ の

量

を 0

^.

2

,

2

^.

0

,

2 0

,

2 0 0

,

2

,

00 0 J J g と

変

え て も 2

次 免擾^後

^{に P F C の}

^{発 生}

^は

^認

^{め ら れ な か っ た}

^.

0 V A の

投 与 量

を す ^べ て 5 0 _〟g と し

,

1

次^･

2

次 免疫

と も A l u m を

加

え て

行

^い

,

そ の

間 隔

を

変

え て 2

次 免疫

4 日

後

^の P F C を

測 定

し た

( 図

4

). 間 隔

1 6 日 ^の 場

合

^に

高

^い P F C

値

が

得

ら れ た が

,間隔

2 0 日

,

1 0 日 で は

少

く

,

5 10 1 6 20 d ^a

y

^s

F i g

^.

4

^.

E f f e c t o f i ⁿ t e r v a l b e t w e e n t h e l s t a n d 2 n d

i n

j

^{e c t i o n o n t h e P F C r e s} p o n s e

.

5 日 で は

陰性

で あ っ た

.

免^{疫 抗 原量}

^{と P F C}

^{誘 導}

^の

^関係

^を

^調

^{べ た}

^,

^{0 V A の 1}

次投与 量

を 0

^･

2

,

2

･

0

, 犯

2 0 0

,

2

,

0 0 0 _ノ

^J

g と

変

え

,

2

次免疫 量

を す ^べ て 2 0 _/ J g と し

,

い

ず

れ も A l u m を

加

え て

行

い

,投 与 間隔

を 2

過

と し て 2

次 投 与

4 日

後

の P F C を

測定

し た

( 図

5

).

1

次 投 与量

2 〟g で P F C が

認

め ら れ た が

,

2 0 _/

^̀

_g で は

著

し

く 増 加

し

,

2 0 0 〟g で は や や

低 下,

2

,

0 0 0 〟 g で は 2 ノ

^J

g と

同程 度

で

あ

っ た

^.

1

次投 与 堂

を す ^べ て 2 0 J

^̀

g と し 2

次投 与 量

を 0

^.

2

,

2

^.

0

,

2 0

,

2 0 0

,

2

,

0 0 0 〟g と す る と

図

6 の よ う に 2

次 投 与 量

^{が 2 0 0} 〟 g の

時

^に

最 高値

が

得

ら れ た

.

な お

_,

以 上 の P F C は ^い

ず

れ も

間接

P F C で

, 直 接

P F C は ^い

ず

れ も ほ と ん ど

陰 性

^で

あ

っ た

.

0

.

2 2 2 0 2 0 0 2

.

0 0 0

A

n t i g ^{e n} d o s e

(

^u g

/

m o u s e

)

Fi g

^.

5

.

E f f e c t o f a n t i _g e n d o s e i n t h e l s t i n

j

^{e c t i o n}

O n i n d u c t i o n o f t h e P F C r e s p o n s e

.

qO O

訣

^{ヨ 0 0}

u⊃

⊂)

l^{̀■■■■■■■■}

巳

²⁰⁰

L

lOO

O

0

.

2 2 2 0 2 00 2

‑

0 0 0

A

n t

i

_g e n d o s e

(

^u g

/

^{m o u s e}

)

Fi _g

･

6

^･

E f f e c t _o f a n t i g e n d o s e i n t h e 2 n d i n

j

^{e c t} i o n O n i n d u c t i o n o f t h e P F C r e s p o n s e

.

3

.

可

溶 性 抗

原 ^に よ る

妊 娠

^マ ウ ^ス

免疫

^と

仔

マ ウ ス の

免 疫 応 答

妊 娠約

1 0 日 ^の B l O ^マ ウ ス に 0 V A 2 0 _〟g の

生 食 水 溶 液

を

腹 腔 内

^に

注射

し

,

そ の

仔

^マ ウ ス 3

^〜

5 匹 ^に

生後

6

遇

お よ び 8

週 目

^に そ れ ぞ れ 2 0 〟 g と 飢 0 _{〟 g} の 0 V A を A l u m と と も に

腹 腔 内注 射

し

,

4 日 お よ び 6 日

後

_{の P F C を}

測 定

し た

. 対 照 群

^{に は}

非免疫 妊 娠

マ ウ ス

由 来

の

仔

^マ ウ ス を

使 用

し た

^. 結 果

は

,

4 日

後

で は 4 5 ±1 2

,

6 日

後

で は 1 7 ± 4 P F C

/

1 0

⁶

P F C で

あ

り

,対 照

^マ

ウ ^ス の そ れ ぞ れ 9 1 ±2 6

,

2 8 ± 8 P F C

/

10

⁶

S P C と

比 較

す る と 5 0

^〜

6 0

%

で

あ

っ た

.

妊娠

マ ウ ^ス の

免 疫

を a d

j

^{u v a n t} を

加

え て

行 う

と

,

そ

の

異常 刺 激

^に よ っ て

流 産

の お こ る

危険 性

が

あ

る

^.実 際,

著 者

も 0 V A に F C A を

加

え て

免疫

し た

妊 娠

^マ ウ ^ス が す ^べ て

流 産

す る こ と を

認

め た

.

そ ^こ で

起 炎 性

の

少

^い A l u 皿 を

使 用

し

,

0 V A 2 0 _{〟 g} を 1

回 妊 娠約

1 0 日

目

の B l O ^マ ウ ス に

投 与

し た

^.

1 0 匹

中

8 匹 が 正

常

^に

出産

した の で そ の

仔

マ ウ ス に

生 後

6

過

と 8

過 日

^に そ れ ぞ れ 0 V A 2 0 _J

̀

g お よ び 2 0 0 _J

L

g を A l u m と と も に

腹 腔 内 注 射

し て 4 日 と 6 日

後

の P F C を

測 定

し た

( 図

7

).

4 日

目

の P F C は

対 照群

の そ れ の 3 0

% 以下

で

あ

っ た

^.

抗原 量

と m a t e r n a l e ff e c t の

関 係

を し ら ^ペ た

. 妊 娠 約

1 0 日

目

の B l O ^マ ウ ス に そ れ ぞ れ 0

^.

2

,

2

^.

0

,

2 0

,

2 00

,

2

,

0 0 0 J

^L

g の 0 V A を A l u m と と も に

投 与

し

, 生

ま れ た

仔

^マ ウ ス に

生 後

⁶

過

と 8

過 日

に そ れ ぞ れ 2 0 _{〟 g} と 2 0 0

〃g の 0 V A を

投 与

し

,

3

,

5

,

7 日

後

の P F C を

測 定

し た

( 図

8

). 対 照群

の P F C

値

の

最

も

高

^い 5 日

目

に お ^い て 0 V A 2 0 J ノ g で

免 疫

し た

妊 娠

マ ウ ス の

仔

^マ ウ ス に

最

も

強

^い

抑 制

が

見

ら れ

,対 照 群

の そ れ の

約

4

%

で

あ

っ た

.

0 V A 2 0 _J ( g を A l u m と と も に

投 与

し た

妊 娠

マ ウ ス

由 来

の

仔

^マ ウ ス か ら

生後

6

週 目

の S P C と

血 清

を

採 取

4 6

d a Y ^{S a} f t e r b o o s t e r i n コ ^{e C} t

i

o n Fi _g

^.

7

^.

T h e P F C r e s p ^{o n s e o} f o ff s p ^r i n g ^o b t a i n e d f r o m i m m u m i 2:e d

(

Ⅰ

)

^{o r n o n}

^‑

i m m u n i z e d

(

II

)

f e m a l e s

.

訣

1 00

uも

｢^‑

､､

ヒ

⁰

3

r

d d

a y

L o

.

2 2 2 0 20 0 2

′

00 0

U q

/

^{m o u s e}

5 00

巳

､よ

^{ハ 2 00}

⊂⊃

r

､､‑

詮

¹⁰⁰

0

巳

､よ

^{ハ 10 0}

⊂⊃

r

､､

U

ヒ

⁰

0

.

2 2 2 0 20 0 2

′

0 0 0 叩

/

^{m o u s e}

7

t

h

d a y

0

.

2 2 20 2 00 2

‑

00 0 0

γ

^g

^/

^{m o u s e}

F i _g

^.

8

^.

E 抒 e c t o f v a r l O u S d o s e s o f a n t i _g e n o n

i n d u c t i o n o f t h e P F C r e s p ^{o n s e} i n m a t e r n a ll _y i m m u n i z e d o f f s p r i n g

^.

知

(

盟

心 S U O d s

巴 U J d

0

.

5 1

.

0 10

¹

1 0

⁵

が 10

⁷

Ⅰ ⅠI

S e r u m (

^m

^l

)

s p l

^{e e n}

c e l l (

^{n u m}

^{b e}

^T･

) ^{c o}

ⁿ

^t

^{r o}

^l F i g

^.

9

.

E ff e c t o f s e r a a n d s p l e e n c e ll s o f t h e

O f f s p ^r i n g f r o m i m m u n i z e d f ^{e m} a l e s o n i n d u c t i o n O f t h e P F C r e s p ^{o n s e} i n u n r e l a t e d m i c e

.

C o n t r o l :

(

Ⅰ

)

P F C o f o f f s p r i n g f r o m n o n

‑

^{i m m u n i z e d f e m a l e s}

^, (

II

)

P F C o f o f f s p r i n g f r o m i m m u n i z e d f e m a l e s

.

し た

.

0 V A 2 0 F L g を A l u m と と も に

注射

^{し て 2}

週目

の B l O マ ウ ^ス の

血 中

^に 上

記

S P C ま た は

血 清

を

移

入 し

,

そ の 2 日

後

に 0 V A 2 0 0 _F

^L

_g を A l ^{u m} と と も に

追 加 投 与

し て 5 日

後

の P F C を

測 定

^{し た}

^.

^{S P C の}

移

入

量

は 1 0

^4,

1 0

^5,

1 0

⁸,

】

.

0

⁷個^{, 血 清}

^の

^移

^入

^畳

^{は 1}

^.

^{O m l お よ び 0}

^.

⁵

m l と し た

. 対 照

と し て 0 V A 2 0 J

^L

g を A l u m と と も に

投 与

し た

妊 娠

^マ ウ ス と

非 免疫 妊 娠

^マ ウ ス の

各 仔

^マ ウ ス に 0 V A 2 0 _ノ J g

,

2

過 後

^に 0 V A 2 0 0 F

^L

g を そ れ ぞ れ A l u m と と も に

投 与

し て 5 日

目

^の P F C を

測 定

し た

.対 照 群

^に お け る

免 疫 妊 娠

マ ウ ス

由 来 仔

マ ウ ス の P F C

値

は

非 免疫 妊 娠

^マ ウ ス

由 来 仔

^マ ウ ^{ス の} そ れ の 1 9

.

4

%

で あ

っ

た の に

対

し

,

S P C

移

入 ^マ ウ ス の P F C

値

は

最

も

抑 制

さ れ た も ^{の で} も

非 移

入 ^マ ウ ^ス P F C

値

の 64

^.

4

%

^で

あ

り

, 血 清 移

入 ^マ ウ ス の P F C

値

は

非移

入 ^マ ウ ス の そ れ の ほ ぼ 9 0

%

で あ

っ

た

( 図

⁹

).

考 察

妊

娠 母 体

の

免疫

が 子 の

免 疫 応答

^に

影 響

を 示 す ^こ と は

古

く ^か ら

臨 床 医学 的

^に も

動 物 実験

^{レ ベ ル} で も

知

ら れ て い る

.

こ の

現 象

は

臨床 応

用 の

面

^か ら も 重

要

な

意義

^の あ る

問題

で は

あ

る が

, 多数

^の

因

子 が か ら み

あ^っ

て

関与

す る

現 象

で

あ

る た め

実験

^レ ベ ル で c l e a r c u t な

成績

を

得

が た い し

, 機 作

^{に つ い} て も 不 明 な

点

が

多

^い

.

種

々 の

可 溶 性 抗 原

^を

新 生 児

^に

投 与

す る と 比

較 的容易

に

免 疫 学 的 寛 容

が

成

立 す る ^こ と が

,

B u r n e t & F e n n e r

(

1 9 4 9

)^{1 3}

⁾ 以

来 良

く

知

ら れ る よ う ^に な り

,新 生 児免疫系

の

未成 熟

に

基

く

現 象

と 理

解

さ れ て き て い る

.

も し そ

う

な ら ば

^, 免 疫 系

が よ り

未 熟

で あ る

胎児

^に

抗 原

が

接触

す れ ば

^一 層 容 易

^に

寛 容

が

成

立 し て も よ ^い

筈

で あ る

.

S h i n k a ら

^{1 4}

⁾ は ^マ ウ ^ス

(

C 3 H

)

を

使

用 し て

実 験

を

行

い

_,

妊 娠

1 4

^〜

1 5 日 ま た は そ れ

以 後

の

母

マ ウ ス を と 卜

^･

_γ

^･

グ ^ロ ブ リ ン

( 非 凝 集)

^で

免 疫

す る ^こ と ^に よ り

, 仔

^マ ウ ス に

同抗 原

に

対

す る

安 定

な

寛 容

が

誘 導

さ れ る こ と を

認

め た

.

そ の よ う な ^{c r} i t i c a l s t a g e の

前

^に

免疫

さ れ た

妊 娠

^マ ウ ス の

仔

で は

部 分 的 ( ^一過 性) 寛 容

が

誘 導

さ れ る

.

異種 赤血 球

で

妊 娠

^マ ウ ^ス

(

B l O

)

や

妊 娠

ラ ッ ト

(

h o o d e d L i s t a r r a t

)

を

妊娠

1 4 日 以

前

に

免 疫

し た

実 験

で も

仔動 物

^に

部 分 的 寛 容

^の

成 立

が

細 胞

^{レ ベ ル} で 認 め ら れ る

^{3 ) 4 )}

.

S R B C や

馬 血 球

の

溶

血

液

上

清

^の よ う な

免 疫

原

性

^の

低

い

抗 原

を

妊 娠

3

^〜

5 日 ^の マ ウ ス

(

B A L B

/

c

)

に

投与

し た

場 合

で も

同様

^に

仔 動物

^の

同血 球

^に

対

す る

免 疫 応答

の

抑 制

が

見

ら れ て ^い る

^{1 5}

⁾

.

し か し

,

妊

娠

以

前

^に

免 疫

を

行っ

た

動 物

を

交 配

さ ^せ て

生

ま れ た

仔 動 物

^の

場合

は

,結 果

が 上

記

と は異 な

っ

て くる

.

マ ウ ス

(

C 3 H

)

を S R B C で

免 疫 後

^に

交 配

さ せ て 生 まj

･

¹

た

仔

^の

免 疫 応 答

は

対 照

と

比

べ て

変 化

は な く

,

そ の

血清

や S P C に も

免 疫応 答

^に

影 響

す る

活性

が な ^い

^{1 6}

⁾

.同様

な

現

象

は

抗 原

を

合 成

ポ リ ^ペ プ チ ド と し

,

ラ ッ ト

(

A C I) を

使

用 し た

場 合

^に も

認

め ら れ ^{て い} る

^{1 7}

⁾

^.

し か し

,

メ チ ^ル

化 牛

血

清

ア ^ル ブ ミ ン を

加

え て

凝 集

さ せ た

, 合 成

ポ リ ^ペ プ

チ ド や

加 熱 変 性 牛 胸腺

^{デ オ キ シ リ ボ}

核 酸

の よ う な

抗

原

を

使

用 し て

行

っ た

同様

な

実 験

で は

仔 動 物

の

免 疫応 答

^の