人工艀化クロマグロの脂肪蓄積に関する研究
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(2) 近 大 水 研 報11号(2008). 緒. 論. 太 平 洋 ク ロ マ グ ロ,跣 BaylifrWH.1994b),太. 〃η〃〃507∫θ脚1な,は. マ グ ロ 類 中 最 も 大 型 で(Bayliff1980;Bayliffl994a;. 平 洋 横 断 や 赤 道 を 跨 い で の 大 回 遊 を 行 う 魚 と し て 知 られ て い る(Orange. andFink1963;Bayliff1993)。. ク ロ マ グ ロ の よ う な 大 型 の 回 遊 性 魚 類 の 生 理 ・生 態 は,広. 域 に 亘 る フ ィ ー ル ドで の 調 査 ・研 究 が 困 難 で あ る こ と,飼 れ て い な い 点 が 多 く,科. 育 が 困 難 で あ る こ と か ら,未. 学 者 の 興 味 の 対 象 と な っ て い る 。 マ グ ロ 類 は,沿. を 経 て 外 洋 表 層 域 へ と 生 息 場 所 を 変 え る 進 化 の 過 程 で(中 を 獲 得 し て き た 。 例 え ば,他 速 い 成 長,発. 大 な生 息. 村1989),独. だ解 明 さ. 岸 中 層 か ら外 洋 中層. 特 の 生 理 ・生 態 学 的 特 質. 魚 種 に 比 べ 高 い 特 有 の エ ネ ル ギ ー 代 謝(KorsmeyerandDewar2001),. 育 初 期 か ら 顕 示 され る 魚 食 性 な ど(Miyashitaetal.1998;Miyashitaetal.2001;澤. 史 ・熊 井 英 水2000)で. あ る 。 こ の う ち,特. 有 の エ ネ ル ギ ー 代 謝 は,回. 持 続 的 遊 泳 を 可 能 に す る 重 要 な 生 理 学 的 機 構 で あ り,太. 田好. 遊 時 に必 要 な長 い時 間 の. 平 洋 横 断 な どで 餌 が 少 な くエ ネ ル ギ ー の. 補 給 が 困難 な 海 域 で の 遊 泳 に備 え て の 効 率 的 な エ ネ ル ギー 蓄 積 機 構 が 注 目に 値 す る。 エ ネ ル ギ ー 貯 蔵 物 質 と し て は,脂. 質 が 単 位 重 量 当 た りの エ ネ ル ー が 高 く,比. む 多 く の 生 物 に 利 用 さ れ て い る 。 し た が っ て,回. 重 が 小 さ い こ と か ら,魚. 類 を含. 遊 性 魚 類 の エ ネ ル ギ ー 代 謝 の 観 点 か ら,ク. ロマ. グ ロの脂 質蓄積 機 構 が生物 学 的 に興 味の持 たれ る とこ ろで ある。 一 方 マ グ ロ類 利 用 の 歴 史 を 見 る と. ,日. 本 で は 古 代 の 遺 跡 や 貝 塚 か ら そ の 骨 が 発 見 さ れ る よ う に,. あ る い は 地 中 海 沿 岸 で は 大 西 洋 ク ロ マ グ ロ,窃 れ て き た(田. 口2004)。. 〃朋 〃3吻 ηη〃5,が 先 史 時 代 か ら 食 糧 と し て 利 用 さ. 近 年 世 界 的 な マ グ ロ類 需 要 の 増 加 を背 景 に マ グ ロ類 養 殖 が 盛 ん に 行 わ れ. る よ う に な っ た 。 現 在 メ キ シ コ と 日本 で 太 平 洋 ク ロ マ グ ロ が,ス 地 中 海 諸 国 で 大 西 洋 ク ロ マ グ ロ が,さ ら3種. の 生 産 量 は 約3万. ル コな どの れ. れ らの 世 界 の 総 生 産 量 の約 半 分 を 占 め て い る。 こ. ナ ミ マ グ ロ 養 殖 は 産 業 的 に 非 常 な 成 功 を お さ め て い る が,養. 魚 を 天 然 魚 に 依 存 し て い る 。 し か し な が ら,2006年. に は,ICCATがCCSBTマ. 理 を 行 う 国 際 委 員 会 は 相 次 い で 漁 獲 量 の 削 減 を 決 定 し て お り,今 状 況 に あ る 。 し た が っ て,こ. ル タ,ト. ら に オ ー ス ト ラ リア で ミ ナ ミ マ グ ロ が 養 殖 生 産 さ れ,こ. トン の 水 準 に あ り,そ. の よ う に 現 在 ク ロ マ グ ロ,ミ. ペ イ ン,マ. 殖用 原. グ ロ類 の 資 源 管. 後 の 原 魚 供 給 減 が 避 け られ な い. れ ら の マ グ ロ 養 殖 の 将 来 の 持 続 的 発 展 を 図 る た め に は,人. 工艀 化 に. よ る種 苗 の 供 給 が 必 須 で あ る。 我 が 国 で は,近. 畿 大 学 水 産 研 究 所 が,1979年. 産 卵 に 成 功 し て お り,そ. に 世 界 で 初 め て 飼 育 下 で の太 平 洋 ク ロ マ グ ロ の. の 後 も ク ロ マ グ ロ の 種 苗 生 産 技 術 開 発 に 取 り組 み,2002年. ク ロ マ グ ロ の 生 活 史 全 て を 飼 育 下 で 実 現 す る 完 全 養 殖 に 成 功(Sawadaetal こ れ に よ り 生 産 さ れ 養 成 さ れ た ク ロ マ グ ロ を 市 場 に 出 し,人 さ ら に2007年. に は,完. 業 セ ン タ ー(升. .2005),2004年. 間2006),(有)奄. 畿 大 学 以 外 に も,(独)水. 美 養 魚,(株)日. には. 工 艀 化 技 術 の 産 業 化 も達 成 して い る。. 全 養 殖 で 生 産 ・養 成 さ れ た ク ロ マ グ ロ が 成 熟 ・産 卵 し ,人. 代 の ク ロ マ グ ロ も 誕 生 し た 。 日本 で は,近. に は太 平 洋. 工 艀 化 第3世. 産 総合 研 究セ ン ター栽 培漁. 本 配合 飼 料 で太 平洋 クロマ グ ロの人 工艀 化 に. 成 功 し て い る 。 ま た,東 京 都 葛 西 臨 海 水 族 園 が 陸 上 飼 育 水 槽 で の 産 卵 に 成 功 し て い る 。 ま た,(独) 水 産 総 合 研 究 セ ン タ ー 栽 培 漁 業 セ ン タ ー が キ ハ ダ マ グ ロ の 産 卵,人 2006)。. 海 外 で は,パ. fbrMaricultureが. ナ マ のTheAchotinesLaboratoryと. 工 艀 化 に 成 功 し て い る(升. イ ン ドネ シ ア のGondolResearchInstitute. キ ハ ダ マ グ ロ の 陸 上 水 槽 で の 産 卵 と 人 工 艀 化 し た 仔 稚 魚 飼 育 に(Marguliesetal. 一86一. 間. ..
(3) 藤 本:人. 2007),ス. 工艀 化 クロマ グ ロの脂肪 蓄積. ペ イ ン で は 大 西 洋 ク ロマ グ ロ の 産 卵 に 成 功 して い る(Mylonasetal.2007)。. 今後マグロ. 類 養 殖 は キ ハ ダ マ グ ロや メ バ チ マ グ ロへ と対 象 種 を拡 大 す る 可 能 性 が あ る と 同 時 に,原 魚 を人 工 艀 化 魚 に よ っ て 供 給 す る シ ス テ ム へ と移 行 す る で あ ろ う。 しか しな が ら,人 工 艀 化 して の 種 苗 生 産 に お い て は,未 て い る(澤. だ 大 量 生 産 の 域 に達 して お らず,特. に仔 稚 魚 期 の 生 き残 りの 改 善 が 課 題 と され. 田2005)。. マ グ ロ類 の 養 殖 技 術 開 発 で は,人 工 種 苗 の 生 産 技 術 以 外 に 生 産 され る魚 の 食 品 と して の 品 質 向 上,す. な わ ち うま 味 向 上 や 収 穫 後 の 肉 質 劣 化 の 遅 延(Nakamuraetal.2006)や,水. (Nakaoetal.2007)な. ど安 全 性 の 向 上 が 図 られ て い る が,こ. 銀含 量 の低 減. の 他 に も栄 養 的 価 値 の 向 上 が 図 られ. る べ き で あ ろ う。 マ グ ロ類 の 肉 質 の評 価 に お い て は,脂 肪 組 織 で あ る 「 トロ 」の 形 成 状 態 が 重 要 な ポ イ ン トとな る。 「 トロ 」は1個 体 の マ グ ロか ら取 れ る量 が 少 な く,特 に 美 味 で あ る こ と か ら, 最 高 値 で 取 引 され る。 養 殖 マ グ ロ は,一 般 に豊 富 な 給 餌 量 と,少 な い 運 動 量 か ら,「 トロ 」が 多 い の が 特 徴 で あ る。 しか しな が ら消 費 者 の 要 求 は 多 様 で あ り,ク ロ マ グ ロや ミナ ミマ グ ロの 「赤 身 」に 対 す る需 要 も あ る。 した が っ て,理 想 的 に は養 殖 マ グ ロ の 「 トロ 」の 形 成 を コ ン トロー ル し,多 様 な 要 求 に 合 わせ た 肉質 の作 り分 け が で き る こ とが 必 要 で あ る。 ま た,近 年 魚 類 の 脂 質 は, 食 品 と して 摂 取 した 場 合,多. く の 重 要 な 生 理 作 用 を 有 す る 高 度 不 飽 和 脂 肪 酸 の 含 量 が 高 く血 栓 性. 疾 患,動 脈 硬 化 性 疾 患 の 予 防 に 有 効 な こ とな どか ら,栄 養 的 な価 値 が 高 く評 価 され て い る(室 1984;"肺. 田. と心"編 集 同 人1984)。 した が っ て,単 に養 殖 ク ロマ グ ロ の 脂 質 含 量 の 多 寡 を コ ン トロ ー. ル す る だ け で な く,脂 質 の 脂 肪 酸 組 成 な ど も コ ン トロ ー ル して 食 品 と して の 価 値 を 高 め る こ とが 必 要 で あ ろ う。 本 研 究 で は,こ れ ま で 述 べ た3つ の 観 点,す な わ ち,大 回 遊 性 魚 類 の持 つ 特 質 へ の 生 物 学 的 関 心, 人 工 種 苗 生 産 に お け る生 残 率 改 善,養 殖 ク ロ マ グ ロ の 品 質 向 上 か ら,人 工艀 化 ク ロマ グ ロ仔 稚 魚 に お け る脂 肪 蓄 積 に つ い て,組 織 学 的,生 化 学 的 解 析 を行 っ て 明 らか に す る こ と を 目的 と した 。 本 研 究 で は,ク. ロマ グ ロの 脂 肪 蓄 積 に つ い て 仔 稚 魚 を 対 象 と して研 究 を行 っ た 。 これ に は2つ の. 理 由 が あ っ た 。1つ は,ブ. ロ イ ラ ー(JonesandFarrelll992),ア. (北海 道 立 畜 産 試 験 場2005),ウ. シ(Robertsetal.2007),あ. ヒル(Chartrinetal.2005),ブ. タ. る い は ヒ トで も発 育 初 期 の 栄 養 条 件 が,. 成 長 して か ら の 脂 肪 蓄 積 に 大 き く影 響 す る こ とが 知 られ て い る こ とが あ る。 これ が 魚 類 で も起 こ る とす れ ば,飼 育 環 境 や 栄 養 条 件 の 調 節 が 容 易 で な発 育 初 期 に お い て,後. の脂 肪 蓄 積 を制 御 す る. コス トが 低 い 技 術 が 開 発 され る 可 能 性 が あ る と言 え る。 も う1つ は,現 在 生 残 率 が 低 い ク ロ マ グ ロの 仔 稚 魚 期 の 栄 養 状 態 改 善 を 脂 肪 蓄 積 を指 標 と して 行 い,生 残 率 向 上 に 資 す るた め で あ る。 本 研 究 の 第1章. で は,人 工 艀 化 ・飼 育 した ク ロマ グ ロ仔 稚 魚 を組 織 学 的 に解 析 し,中 性 脂 質 蓄. 積 の 発 育 変 化 を 明 ら か に した 。 ま た,仔 稚 魚 期 の 中 性 脂 質 蓄 積 が,飼 変 わ るの か,ど. の よ うな 水 温 が 生 残 率 向 上 に,あ. 育 水 温 に よ っ て どの よ うに. るい は 脂 肪 組 織 形 成 に 適 当 で あ る の か を 明 らか. に し,ま た 脂 質 蓄 積 コ ン トロ ー ル の た め の 基 礎 的 知 見 を 得 よ う と した 。 第H章. で は,人. 工艀 化 ・. 飼 育 した ク ロマ グ ロ とマ ダ イ 仔 稚 魚 を 生 化 学 的 に解 析 し,中 性 脂 質 の 大 部 分 を 占 め る トリア シル グ リセ ロー ル 含 量 の 発 育 変 化 を 明 ら か に し,比 較 した 。 ま た,異. な る飼 育 水 温 下 で の ク ロ マ グ ロ. 仔 稚 魚 の ト リア シ ル グ リセ ロ ー ル 蓄 積 の 発 育 変 化 を 比 較 し,飼 育 水 温 に よ る影 響 を 明 らか に し よ う と した 。 第 皿 章 で は,人. 工艀 化 ・飼 育 した ク ロ マ グ ロ稚 魚 を 生 化 学 的 に解 析 し,脂 肪 酸 組 成 の. 発 育 変 化 を 明 らか に した 。 ま た,餌 料 中 の 脂 肪 酸 組 成 と も比 較 し,栄 養 学 的 知 見 を 得 た 。 ク ロ マ グ ロ仔 稚 魚 に つ い て,異 な る 飼 育 水 温 下 で の脂 肪 酸 組 成 の 発 育 変 化 を 明 らか に し,脂 質 蓄 積 の 質. 一87一.
(4) 近 大 水 研 報11号(2008). 的 コ ン トロー ル の た め の 基 礎 的 知 見 を 得 よ う と した 。. 第1章. 人 工 購 化 ク ロマ グ ロ仔 稚 魚 の 中性 脂 質 蓄 積 の 発 育 変 化 と そ の 飼 育 水 温 に よ る違 い(F頗motoetal.2008). マ グ ロ 類 は,大. 型 高 度 回 遊 性 魚 類 と し て 特 徴 的 な 生 理 学 的 特 質 で あ る 内 温性(Brilletal.1994;. GrahamandDickson2001),効. 率 的 な 循 環 器 系 な ど を 有 す る(Sanchez-QuintanaandHurlel987;. BrillandBushnell2001)。. そ の よ う な 生 理 学 的 特 質 に は,餌. 回 遊 す る こ と を 可 能 に す る,長. 距 離 の 渡 り を 行 う鳥 類 と 同 様 の 体 内 に 効 率 よ く 脂 肪 を 蓄 積 す る シ. ス テ ム(McWilliamsetal.2004;Pierceetal.2005)も 一方 で. ,マ. あ る こ とが 予 想 され る。. グ ロ 類 筋 肉 へ の 脂 肪 蓄 積 状 態 は,食. い る 。 特 に 脂 肪 を 多 く 含 む 「 ト ロ 」 は,刺 (Cameronetal.1994),ブ. 生 物 の 分 布 が 限 られ る 外 洋 を 長 距 離. 品 と して の 評 価 基 準 と して 重 要 な もの とな っ て. 身 や 寿 司 の 材 料 と し て 価 値 が 高 い 。 そ れ ゆ え,ウ. タ(Leeetal.1973;Mersmannetal.1975),ト. の 畜 産 に お け る と 同 様,筋. リ(Adrizaletal.2002)等. 肉 中 の 脂 肪 の 量 と 組 成 の コ ン ト ロ ー ル は,養. 最 需 要 課 題 と し て 位 置 づ け られ る べ き で あ る 。 し か し な が ら,養 構,特. 育 段 階(Cejas2004a),成. 熟 の 状 態(Cejas2004b)は. に 影 響 す る 要 因 で あ る 。 太 平 洋 ク ロ マ グ ロ の 仔 稚 魚 飼 育 に お い て は,現 あ る,ワ. ム シ,ア. ル テ ミ ア 幼 生,イ. シ ダ イ 艀 化 仔 魚,イ. 殖 マ グ ロ類 の 肉 質 改 善 の. 殖 マ グ ロ類 に お け る脂 肪 蓄 積 機. に そ の 発 育 変 化 は 研 究 例 が な い 。 餌 料(Bandarraetal.2006),環. Ibarzetal.2007),発. シ. 境 条 件(Ibarzetal.2005; 魚 類 にお いて脂 肪 蓄積 在 用 い られ て い る餌 料 で. カ ナ ゴ 魚 肉 ミ ン チ は,そ. 陥 が 指 摘 さ れ て い る に も か か わ らず(Sawadaetal.2000;宮. れ らの 栄 養 的 欠. 下2002;Seokaetal.2007),栄. を 満 た す 他 の も の で 代 替 す る こ と が 困 難 で あ る(Miyashitaetal.2001)。. し た が っ て,現. 養要求 時点でク. ロマ グ ロ仔 稚 魚 の 脂 肪 蓄 積 を コ ン トロー ル す る最 も有 効 な 方 法 は飼 育 条 件 の 調 節 で あ る。 仔 稚 魚 飼 育 条 件 の な か で は,最 も 容 易 で,そ の 脂 肪 蓄 積 に お け る 重 要 性 が 指 摘 さ れ て い る こ と か ら(Ibarz etal.2007),水 第1章. 温 の 調 節 が 最 初 に 検 討 され る べ き で あ ろ う。. で は,ク. ロ マ グ ロ 仔 稚 魚 を 飼 育 し,主. 変 化 の 概 要 を 明 ら か に す る と と も に,異. 要 なエネ ル ギー源 で あ る中性脂 質 蓄積 の初 期発 育. な る 飼 育 水 温 下 で こ れ を 比 較 し,水. 温 調 節 に よ る 中性 脂. 質 蓄 積 コ ン トロ ー ル の 可 能 性 を 検 討 し た 。. 材料および方法 仔 稚魚 飼 育 と供試 魚 近 畿 大 学 水 産 研 究 所 奄 美 実 験 場 で 養 成 され た1998年 月5日. 級 群 の 親 魚 の 自然 産 卵 に よ っ て2005年8. に 得 られ た 受 精 卵 を 同研 究 所 大 島 実 験 場 へ 移 送 し飼 育 に 供 した 。 受 精 卵 は 体 節 形 成 期 に オ. ゾ ン 消 毒 を行 っ た 後,4基 稚 魚 は,以. 下 の2つ. の20m3容. コ ン ク リー ト水 槽 に,各95,000粒. を収 容 した 。 得 られ た 仔. の 水 温 系 列 で 飼 育 した 。 高 温 区 で は,艀 化 水 温 の25°Cか. 率 で27°Cま で 上 昇 させ,そ. ら1°C/dayの 上 昇. の 後 は そ の 水 温 を 維 持 し た 。低 温 区 で は,艀 化 水 温 の25°Cか. 一88一. ら1°.
(5) 藤 本:人. C/dayの. 下 降 率 で24°Cま. の 上 昇 率 で25°Cま び1°C/dayの 温 区 も2反. 工艀 化 ク ロ マ グ ロ の 脂 肪 蓄 積. で 下 降 さ せ て 脊 索 の 上 屈 開 始(艀. で 上 昇 さ せ て 稚 魚 期 へ の 移 行 開 始 期(艀. 上 昇 率 で27°Cま. で 上 昇 さ せ,そ. ズ に 達 し た 艀 化 後47日. と 夕 方4時. リ ン グ ロ ス,日. ル テ ミ ア 幼 生,イ. オ〃2〃20の ∫ ε∫ρεr∫oηo∫ 〃3,肉 毎 日 朝8時. 化 後25日)ま. で 飼 育,そ. ま で,低. の後 は再 どち らの水. 水 温 区 で は 高 水 温 区 と同 じ体 サ イ. ま で 飼 育 を継 続 した 。. 販 の 強 化 剤(マ. 養 強 化 し た ワ ム シ,ア. で 飼 育 し た 後,1°C/day. の 後 は そ の 水 温 を 維 持 し た(Fig.1-1)。. 復 区 を 設 け た 。 高 水 温 区 で は 艀 化 後40日. 餌 料 に は,市. 化 後12日)ま. ミ ン チ を,仔 に,各. 清 マ リ ン テ ッ ク 株 式 会 社,横. シ ダ イ,ρ. ρ1θ9ηo伽3カ3c謝 〃5,艀. 浜)でDHAを 化 仔 魚,イ. 栄 カ ナ ゴ,. 稚 魚 の 成 長 に 合 わ せ て 与 え た(Fig.1-2).. 水 槽 の 水 温,溶. 存 酸 素 濃 度,pHを. 測 定 した 。. 仔 稚 魚 の サ ン プ リン グ と体 サ イ ズ 測 定 各 水 槽 か ら毎 日5個 体 を ラ ン ダ ム に採 取 し,5-10%ホ. ル マ リ ン溶 液 中 で 保 存 した 。 こ れ らの 個. 体 は す べ て 中 性 脂 質 蓄 積 を 明 ら か に す る 目的 で 組 織 学 的 検 査 を 行 っ た 。 これ に加 え て,各 水 槽. Days. Fig.. posthatch. I-1. Temperature (lower stand), dissolved oxygen (DO) concentration (middle stand), and pH (higher stand) in the rearing water of Pacific bluefin tuna larvae and juveniles in four rearing tanks. Lower 1 and Lower 2 indicate the rearing under the lower temperature regime, and Higher 1 and Higher 2 indicate the rearing under the higher temperature regime.. — 89 —.
(6) 近 大 水 研 報11号(2008). か ら 毎 日10個 HC-300,富. 体 を 採 取 し,実. 態 顕 微 鏡 に 装 着 し た デ ジ タ ル カ メ ラ(FUJIXDEGITALCAMERA. 士 フ イ ル ム 株 式 会 社,東. 京)で,デ. ジ タ ル 画 像 を 記 録 し,画 像 解 析 ソ フ トウ ェ ア(Scion. ImageBeta4.02Win,ScionCorp,Fredrick,U.S.A.)を. 用 い て 体 長 を 測 定 した 。 本 研 究 で は,体. 上 屈 後 仔 魚 期 よ り前 の 発 育 段 階 で は 上 顎 前 端 か ら脊 索 後 端 ま で の 長 さ,上 前 端 か ら 下 尾 骨 後 端 ま で の 長 さ と す る 。 さ ら に,こ. 長 を,. 屈後 仔魚 期以 降 は上顎. れ ら の 個 体 は 宮 下 ら(2000)の. 記載 に基づ い. て 発 育 段 階 を 同 定 した 。. 組 織 学 的 観 察 の た め の 凍 結 切 片 作 成 と染 色 組 織 学 的 観 察 に供 した 個 体 はす べ て 体 長 を 測 定 した 。 ホ ル マ リ ン を 除 去 す る た め 仔 稚 魚 を 流 水 で25時. 間 洗 浄 後,Holt'shypertonicgum-sucrose溶. 液 に,仔. し た 。 そ の 後 仔 稚 魚 は10%OCTcompound(Tissue-Tec,サ 東 京)に. 包 埋 し た 。 そ の 後10Fmの. GmbHCo.Ltd.,Wetzlar)に 株 式 会 社,東. 稚魚 また は仔稚 魚 が沈 下す るまで浸漬 ク ラ フ ァ イ ン テ ッ ク ジ ャ パ ン 株 式 会 社,. 横 断 切 片 を 凍 結 切 片 作 成 機(CM1850,LeicaMycrosystems. て 作 成 し た 。 切 片 は メ ッ シ ュ セ メ ン ト(Biodenmeshcement,応. 京)。 切 片 は オ イ ル レ ッ ド0で. Days. 染 色 し た 。 細 胞 学 的 な 観 察 を 行 う た め,組. 研商事 織 学的観. posthatch. Fig ,..L-Z,Growth of body length and feeding schedule of Pacific bluefin tuna rearing. Lower indicates the rearing under the lower temperature regime, and Higher indicates the rearing under the higher temperature regime. Values are mean±S.D. (n=100).. — 90 —.
(7) 藤 本:人. 工 艀 化 ク ロマ グ ロ の 脂 肪 蓄 積. 察 を行 っ た 切 片 の す ぐ次 の 切 片 を 粘 着 フ ィ ル ム(フ. ァイ ン テ ッ ク株 式 会 社,東 京)に. 貼 り付 け,. ヘ マ トキ シ リ ン ・エ オ シ ン 染 色 を 施 した 。 オ イ ル レ ッ ド0で 染 色 した 切 片 は 水 溶 性 シ ー リン グ 液(MOuNT・QuICKAQuEOS,大. 同 産 業 株 式 会 社,戸 田)で 封 入 した 。 ま た ヘ マ トキ シ リ ン ・エ. オ シ ン 染 色 を施 した 切 片 は30%グ. 結. リセ リン 溶 液 で 封 入 した 。. 果. 飼 育環 境 飼 育 水 温 は概 ね 計 画 され た 経 過 を た ど っ た(Fig.1-1)。. 飼 育 水 の 溶 存 酸 素 濃 度 はgo%以. 上,pH. は7.8以 上 を 維 持 した 。 これ らの 値 は 太 平 洋 ク ロ マ グ ロ仔 稚 魚 の飼 育 適 範 囲 で あ る 。. 生 残,成. 長,発. 育. 飼 育 実 験 終 了 時 の 生 残 個 体 数 は,各 水 槽 と も400-600(生 現 在 の 太 平 洋 ク ロ マ グ ロ 仔 稚 魚 飼 育 で は,普. 残 率0.42-0.63%)個. 体 で あ っ た 。 こ れ は,. 通 の 生 残 で あ る。 飼 育 期 間 中魚 病 の 発 生 は 観 察 され. な かっ た。 高 温 区 に お け る 体 長 の 成 長 は 艀 化 後18日(12.15土1.32mm,mean圭SD,〃=50)か 後40日. で99.01±8.37mmに. mm)か. ら 加 速 し,47日. ら加 速 し,艀. 化. 達 し た(Fig.1-2)。 低 温 区 に お け る 体 長 の 成 長 は 艀 化 後24日(11.76士1.47 で98.05士12.Olmmに. 達 し た 。 両 区 に お け る 成 長 差 は 艀 化 後18日. 以降大. き くなった。 両 区 と も に 艀 化 後2日 1-3)。 し か し な が ら,発. で 後 期 仔 魚 に 移 行 し た が,そ 育 を 体 長 で み た 場 合,両. の 後 は 高 温 区 で 発 育 が 速 く進 行 し た(Fig.. 区 と も,1mm以. 内 の 差 で,同. じ 体 長 で 同 じ発 育. 段 階 を 経 過 した 。. 鰐 化後 日数の経 過 でみ た 中性脂 質分 布 の変 化 本 研 究 で は,中 性 脂 質 分 布 を6つ の 部 位 で 組 織 学 的,細 胞 学 的 に観 察 した。 そ れ らは,脳,耳 鰐,肝. 臓,脊. 椎 骨,体. 側 筋 で あ る。 艀 化 後2日. 蓄 積 が 観 察 され た(Fig.1-4A)。 れ た(Fig.1-4B)。. で,両. 水 温 区 と も に脳 周 囲 と 内 部 で最 初 に脂 肪 の. さ ら に,両 区 と も,耳 胞 内 部 で 艀 化 後14日. に脂 肪蓄 積 が観 察 さ. こ れ ら以 外 の す べ て の 部 位 で は,中 性 脂 質 の 最 初 の 蓄 積 は,高. よ り早 い 艀 化 後 日数 で 観 察 され た(Fig.1-5)。. 胞,. こ の パ ター ン は 特 に,鯉. 温 区 で低 温 区. 弓 と背 部,腹. 部 普通 筋皮. 下 で 顕 著 で あ っ た 。 これ ら の 部 位 で の 中性 脂 質 蓄 積 は,高 温 区 で 低 温 区 よ り8日 以 上 早 く観 察 さ れ た。 加 え て,こ. のパ タ ー ン は,艀 化 後24日. に飼 育 水 温 が 同 じ27°Cに な っ て 以 降 も持 続 した 。. 体長 の経 過 でみ た 中性脂 質分 布 の変 化 脳 周 囲 と 内 部 に お い て,最 低 温 区 で は 体 長3.96mmで 区 で は 体 長7.91mmで,低 高 温 区,低. も 小 さ な 体 サ イ ズ で 中 性 脂 質 蓄 積 が,高 観 察 さ れ た(Figs.1-4Aand6)。. 温 区 で は 体 長5.86mmで. 温 区 そ れ ぞ れ 体 長7.92mmお. 下 で の 脂 肪 蓄 積 は,高. 温 区,低. 耳 胞 内 部 で は,中. 観 察 さ れ た(Fig.1-4B)。. よ び8.10mmで. 性 脂 質 蓄 積 が,高. 温. 肝 臓 で の 脂 肪 蓄 積 は,. 観 察 さ れ た(Fig.1-4C)。. 温.区 で そ れ ぞ れ 体 長45.90mmBL(Fig.1-4E)お. 一91一. 温 区 で は 体 長3.42mmで,. 腹 部 普 通筋 皮 よ び47.67mmBL.
(8) 近 大 水 研 報11号(2008). Daysposthatch Eig。.1巴 薮.DevelopmentofPacificbluefintunaunderthelowertemperatureregime(A)and thehighertemperatureregime(B)in2005.Developmentwasexaminedfor100 individualsforeachrearingcondition.. で 観 察 され た 。 そ の 他 の 部 位 で は,脂 部 と 周 囲 で は,高 12.82mmBLお 59.23mmお. 肪 蓄 積 が 観 察 さ れ た 最 小 体 長 の 両 区 で の 差 が 顕 著 で あ っ た。 脊 椎 骨 内. 温 区,低. 温 区 で そ れ ぞ れ 体 長12.82mmと20.13mmで. よ び33.65mmで よ び78.88mmで. お よ び78.88mmで. 観 察 され た 。 鯛 弓 で は,. 観 察 さ れ た 。 背 部 普 通 筋 皮 下 で は,高 観 察 さ れ た(Figs.1-4G,H)。. 観 察 さ れ た(Figs.1-4J)。. 温 区,低. 深 部 血 合 筋 で は,そ. 温 区 で,体. 長. れ ぞ れ69.44mm. 低 温 区 の 方 が,高 温 区 で の 体 長59.25mmよ. こ れ に 対 し て,表 層 血 合 筋 で は,深 部 血 合 筋 と は 逆 に, り小 さ な 体 長47.63mmで. 脂 肪 蓄 積 が 観 察 さ れ た(Figs.. 1-4K,L)。 両 水 温 区 で の 最 初 に 中 性 脂 質 蓄 積 が 観 察 さ れ た 体 長 の 差 に 加 え て,中 染 色 性 の 違 い と 染 色 面 積 の 違 い に よ っ て 確 認 さ れ た 。 肝 臓 で は,両 脂 肪 蓄 積 が 観 察 され た が,高 体 長58-59mmで 1-7A,B)。. は,腹. 性 脂 質 蓄 積 の 程 度 の 差 が,. 区 で 同 じ 体 長8mmで. 初 めて. 温 区 で は 低 温 区 よ り脂 肪 蓄 積 が 顕 著 で あ っ た(Figs.1-4c,D)。. 部 普 通 筋 皮 下 で,高. 温 区 で よ り顕 著 に 中 性 脂 質 が 蓄 積 さ れ て い た(Figs.. 高 温 区 の 個 体 の 腹 部 普 通 筋 皮 下 で は,筋. 一92一. 節 中 隔 に お い て 中 性 脂 質 が 筋 間 脂 肪 と して 蓄.
(9) 藤 本:人. 工 艀 化 ク ロマ グ ロ の 脂 肪 蓄 積. 積 され て い た 。 そ れ に対 し,低 温 区 の 個 体 は こ の よ うな 蓄 積 を 持 た な か っ た 。 さ らに,高 温 区 で の 腹 部 普 通 筋 皮 下 の脂 肪 蓄 積 部 位 で は,ヘ マ トキ シ リ ン ・エ オ シ ン染 色 に よ っ て 複 数 の 細 胞 が 観 察 され た 。 体 長92mmの. 深 部 血 合 筋 で は,高 温 区 で 低 温 区 よ り広 い 範 囲 で 脂 肪 蓄 積 が 観 察 され た(Figs.. 1-7C,D)。 表 層 お よ び 深 部 血 合 筋 で は,中. 性 脂 質 は 筋 細 胞 内 に 蓄 積 され た(Figs.1-8A,B)の. 腹 体 側 筋 で は,中 性 脂 質 は 皮 下 お よび 筋 間 脂 肪 と して 蓄 積 され た(Figs.1-4E-H,7A,B)。 腹 部 体 側 筋 で は,中 性 脂 質 を含 む 細 胞 が 観 察 され た(Figs.1-8c,D)。. に 対 し,背 加 え て,. これ らの 細 胞 は,本 研 究 の. 範 囲 で は 背 部 皮 下 で は観 察 され な か っ た 。. Fig. 1-4. Neutral lipid deposition in the Pacific bluefin tuna larval and juvenile body parts. Red color in the figures indicates the neutral lipids stained by oil red 0. Larvae and juveniles of A, B, C, E, G, I, and K were reared under the higher temperature regime, and those of D, F, H, J, and L were reared under the lower temperature regime. A: brain (b), 3.42 mm in body length (BL); B: auditory vesicle (a), 7.91 mm BL; C: liver (1), 7.92 mm BL; D: liver 8.10 mm BL; E: subcutaneous region of the ventral ordinary muscle, 45.90 mm BL; F: subcutaneous region of the ventral ordinary muscle, 47.67 mm BL; G: subcutaneous region of the dorsal ordinary muscle, 59.23 mm BL; H: subcutaneous region of the dorsal ordinary muscle, 78.88 mm BL; I: internal dark muscle, 69.44 mm BL; J: internal dark muscle, 78.88 mm BL; K: superficial dark muscle, 47.63 mm BL; L: superficial dark muscle, 59.25 mm BL. Bars indicate 0.1 mm in A and B, and 0.5 mm in others. "e" means eye in Fig. 4A. Arrows indicate lipid deposition in brain (4A), auditory vesicle (4B), liver (4C and 4D), subcutaneous region of dorsal ordinary muscle (4G and 4H), internal dark muscle (41 and 4J), and superficial dark muscle (4K and 4L).. — 93 —.
(10) 近 大 水 研 報11号(2008). 考. 察. 中 性 脂 質 は,エ 代 謝 調 節,絶. 縁(保. ネ ル ギ ー 源,膜 温 ・断 熱),緩. 要 な 生 理 学 的 機 能 を 有 す る(手 類 の 初 期 発 育 に お い て は,生 1975)。. そ れ は,体. 内 に,飢. 餓. 構 成 成 分,必 衝 材(外. 島1995;赤. 須 栄 養 素(必. 須 脂 肪 酸,脂. 溶 性 ビ タ ミ ン な ど),. 界 か ら の 機 械 的 損 傷 の 防 御),浮. 力 獲 得 な ど多 くの 重. 崎1987;Hel且nanetal.1997;Moyleetal,2000)。. 残 率 は 低 く,大. 魚. 量 減 耗 が し ば し ば 起 こ る(Cushing1975;Lasker. 病 原 微 生 物 の 攻 撃,外. 傷 な どの ス トレ ス に 抵 抗 す る の に 必 要 な. エ ネ ル ギ ー 蓄 積 が 少 な い か らで あ る。 こ の よ うな 因 果 関 係 は 太 平 洋 ク ロマ グ ロ の 仔 稚 魚 飼 育 にお い て も 生 ず る(宮. 下2002;Miyashitaetal.2000;Sawadaetal.2005)。. し た が っ て,仔. 稚 魚 の 主要 な. エ ネ ル ギ ー 源 で あ る 中性 脂 質 の 量 は 発 育 初 期 の 生 残 を 左 右 す る 重 要 な 要 因 で あ る。 こ の 観 点 か ら す れ ば,そ. の 大 き さ が 発 育 初 期 の 生 き 残 り を 左 右 す る と さ れ る 魚 類 の 個 体 群 変 動(Hjort1914). の 機 構 を 明 ら か に す る こ と,あ. る い は 養 殖 用 種 苗 生 産 の 生 産 効 率 を 改 善 す る こ と に と っ て,発. 育. 初 期 に お け る 脂 質 代 謝 や 脂 肪 蓄 積 状 態 を 研 究 す る こ と に は 大 き な 意 味 が あ る 。 し か し な が ら,魚 類 の 脂 肪 蓄 積 特 に そ の 発 育 変 化 は,わ い な い 。 そ の 意 味 で,本. ず か にUminoら(1996)の. 例 を 除 い て ほ と ん ど研 究 され て. 研 究 は 太 平 洋 ク ロマ グ ロ仔 稚 魚 に お け る 中性 脂 質 蓄 積 の 発 育 変 化 に つ い. て 重 要 な 情 報 を 与 え る も の で あ る 。 太 平 洋 ク ロ マ グ ロ で は,中. 性 脂 質 蓄 積 は,脳,内. 臓,筋. 肉の. 順 に 起 こ っ た 。 魚 類 が 脳 で の エ ネ ル ギ ー 源 と し て 脂 質 を 使 う こ と は 良 く 知 られ て い る(Johnston andRootslg64;Krepsetal.1975;TocherandHarvie1988)。 後2日. で 脂 肪 が 脳 内 部 と 周 囲 に 蓄 積 さ れ た 。 こ の こ と は,こ. し て,ま. Fig.. 太 平 洋 ク ロ マ グ ロ で は,艀. た 脳 の 温 度 を 保 ち,外. の 部 位 で の 脂 肪 が,エ. 部 か ら の 衝 撃 に 対 し て 保 護 を す る な ど,生. ネル ギー源 と. 存 に 重 要 な役 割 を 果 た. 1-5. Deposition of neutral lipids in body parts of Pacific bluefin tuna larvae juvenile. The forefront of bars in the figure indicates the first day posthatch of neutral lipid deposition. Open and close bars indicate the rearing under the higher lower temperature regime, respectively. Histological examination was conducted five individuals collected from each rearing tank every day.. — 94 —. 化. and the and for.
(11) 藤 本:人. 工艀 化 ク ロマ グ ロの脂肪 蓄積. Body length. 1-6. Deposition of neutral lipids in body parts of Pacific bluefin tuna larvae and juvenile according to the age in day (upper) and growth of body length (lower). The forefront of bars in the figure indicates the body length of the first neutral lipid deposition. Open bars indicate the rearing under the higher temperature regime, and closed bars indicate the rearing under the lower temperature regime. Histological examination was conducted for five individuals collected from each rearing tank every day.. Fig.. -7.. し. 冑. 1. 4- _. n4,. Uminoら(1996)は 下 脂 肪,筋. (mm). —1—. 。 マ ダ イ の 脂 肪 組 織 の 発 育 を 調 べ た 。 一 般 に魚 類 で は,脂 肪 は 内 臓 周 囲,皮. 間 脂 肪 と し て,あ. る い は 肝 臓,脳,筋. この こ と と,そ れ に 合 致 す るUminoら(1996)の ら は,マ ダ イ で,艀 化 後37日. 肉 細 胞 内 に 蓄 積 され る 。 本 研 究 で の 結 果 に は, 研 究 結 果 と合 致 す る点 も しな い 点 も あ っ た。彼. で は 肝 臓 と膵 臓 に,艀 化 後42日. で は腸 管周 囲へ の脂 肪組 織形 成 を. 観 察 し て い る。 太 平 洋 ク ロマ グ ロ で も,早 期 に 肝 臓 へ の 脂 肪 蓄 積 が 観 察 され た 。 肝 臓 は 内臓 の な か で も,脂 質 合 成 な ど脂 質 代 謝 に 関 して 重 要 な臓 器 で あ り(MayesandBotham2003),魚 に は 中 性 脂 質 は 極 性 脂 質 と と も に 多 量 に存 在 す る(C句asetal.2004b;Craigetal.2000)。. 類 肝臓 した が っ. て,肝 臓 へ の 早 期 の 脂 肪 蓄 積 は,魚 類 の 初 期 発 育 に とっ て も合 理 的 で あ る。 一 方で ,太 平 洋 ク ロマ グ ロ で は,本 研 究 の 範 囲 で は膵 臓 や 腸 管 周 囲 へ の 脂 肪 蓄 積 は 観 察 され な か っ た 。 加 え て,太. 平 洋 ク ロ マ グ ロ で は,肝 臓 と生 殖 腺 以 外 の 臓 器 に は 顕 著 な脂 肪 蓄 積 が 起 こ ら. 一95一.
(12) Fig. 1-7. Neutral lipid deposition in the subcutaneous region of ventral ordinary muscle (A and B) and internal dark muscle (C and D). Juveniles of A and C were reared under the higher temperature regime, and those of B and D reared under the lower temperature regime. A: a juvenile of 59. 21 mm BL; B: a juvenile of 58.34 mm BL; C: a juvenile of 92.13 mm BL; D: a juvenile of 92.65 mm BL. Bars indicate 0.3 mm in A and B, and 1 mm in C and D. Arrows indicate the subcutaneous region of ventral ordinary muscle.. Fig. 1-8. Neutral lipid deposition in the superficial (A) and internal (B) dark muscles of a PBT of 92.13 mm BL and 38 dph. Neutral lipid deposition (C, oil red 0 staining) and cellularity (D, hematoxylin and eosin staining) in the ventral ordinary muscle subcutaneous region of a PBT juvenile (78.80 mm BL, 42 dph). Arrows indicate the internal dark muscles. Bars indicate 0.1 mm..
(13) 藤 本:人. な い こ と が 観 察 さ れ て お り,内. 工艀 化 クロマ グ ロの脂肪 蓄積. 臓 へ の脂 肪 蓄 積 の 様 相 は 他 魚 種 と異 な る こ とが 推 察 され る。 こ の. 点 に つ い て 詳 細 な 研 究 が 今 後 期 待 され る。 太 平 洋 ク ロ マ グ ロ の 筋 肉 で は,脂. 肪 蓄 積 は,餌. 料 が 艀 化 仔 魚 か ら イ カ ナ ゴ 肉 ミ ン チ へ と 切 り替. わ る 稚 魚 期 か ら 観 察 さ れ た 。 本 研 究 の 飼 育 で 用 い ら れ た イ カ ナ ゴ 肉 ミ ン チ は 約2.3%の ん で お り,そ. れ は 艀 化 仔 魚 の 脂 肪 含 量 の 約1.3倍. に お け る 体 側 筋 へ の 脂 肪 蓄 積 の 開 始 は,こ. で あ っ た(第. 皿 章 参 照)。. 脂 肪 を含. し た が っ て,稚. 魚期. の 時 期 か ら脂 肪 含 量 の 高 い 餌 料 か ら脂 肪 を 蓄 積 で き る. よ うに な る こ とを 意 味 す る。 脂 肪 は,ブ etal.1993)な. リ(Tha㎞retal.2003),大 ど で は,筋. 西 洋 サ ケ(Zouetal.1996),カ. 〃5,で. は,肝. か し な が ら,血. ラ フ グ,蹴. 臓 に は 脂 肪 蓄 積 が 起 こ る が,筋. 肪 が 蓄 積 さ れ る の み で あ る(Andoetal.1993)。 の タ イ プ で あ っ た が,本. マ ア ジ(Ando. 肉 中 の 脂 肪 含 量 が 増 え る に つ れ て 筋 節 隔 膜 に 特 に 蓄 積 さ れ,薄. 結 合 組 織 内 に 蓄 え ら れ る よ う に な る 。 こ れ と は 異 な り,ト Pαro1た励 脚o伽ocθ. ン パ チ,シ. 吻g〃 励 吻 ε5,ヒ. ラ メ,. 肉 中で は筋 肉細胞 中 に少 量 の脂. 太 平洋 ク ロマ グ ロの普 通 筋 へ の脂 肪 蓄積 は前者. 研 究 で の 発 育 段 階 で は 結 合 組 織 内 へ の 脂 肪 蓄 積 は観 察 され な か っ た 。 し. 合 筋 で は,こ. れ と 異 な り,筋. 肉 細 胞 中 に 脂 肪 が 蓄 積 さ れ た 。 血 合 筋 は,魚. 類 では. 普 通 筋 と 同 様 に 脂 肪 の 蓄 積 機 能 を 持 つ こ と が 知 ら れ て い る が(HendersonandTocherl987),筋 の 種 類 に よ っ て 異 な る 脂 質 蓄 積 が,筋 高 温 区 で は,多. い. 肉 の 機 能 と どの よ うな 関 わ りを 持 つ の か が 興 味 深 い。. く の 部 位 で 脂 肪 蓄 積 が 早 期 に,あ. る い は よ り小 さ な 体 長 で 起 こ り,ま. れ る 脂 肪 の 量 も 低 温 区 に 比 べ て 多 か っ た 。 高 温 の 条 件 で は,魚 ギ ー 要 求 も 増 え る こ と で,摂. 肉. 類 仔 稚 魚 の 代 謝 が 充 進 し,エ. 餌 量 が 増 え る と 考 え られ る 。 こ れ ら の こ と が,余. ら 合 成 さ れ る 脂 肪 蓄 積 を 増 や す の で あ ろ う。 例 外 的 に,表. た蓄積 さ ネル. 剰 のエ ネル ギー か. 層血 合 筋 で は 中性 脂 質 蓄積 が高 温 区. で 遅 れ た 。 こ の 理 由 は 今 の と こ ろ 不 明 で あ る 。 血 合 筋 は 持 続 的 な 遊 泳(AltringhamandShadwick 2001)や. 恒 温性(Grahaml975;GrahamandDickson2001;Careyl981)な. どにおい て重 要 な役割 を. 果 た す と さ れ て い る 。 今 後 こ の 疑 問 を 解 決 す る た め に も,血. 合 筋 に お け る脂 質 代 謝 の 詳 細 が 明 ら. か に され る べ き で あ る。 環 境 水 温 に よ っ て 魚 類 の 脂 質 代 謝 が 変 化 す る こ と は,ヨ etal.2005;Ibarzetal.2007),ヨ サ ケ(Ruyteretal.2006),ヒ. ー ロ ッ パ ス ズ キ,D'oε ラ メ(Kim2006)等. ー ロ ッ パ ヘ ダ イ,勘07〃M〃70∫. ηかακ加51α 加 ακ(Skallietal.2006),大. 肪 蓄 積 の コ ン トロ ー ル に つ い て は,Fauconneauら(1997)が,タ い 水 温 に お い て,脂. 以 外 に は 研 究 例 が な い 。 本 研 究 で は,高 高 く 起 こ る こ と が,両. 育 水 温 に よ る脂. ラ 肝 油 を 与 え た ニ ジ マ ス よ り も, 肪 細 胞 の 直 径 増 加 が 顕 著 で あ る と した 報 告. 温 区 で 低 温 区 よ り脂 肪 蓄 積 が 小 さ い 体 サ イ ズ で,程. 区 と も 水 温 が 同 じ に な っ て か ら も 持 続 し た 。 こ の こ と は,そ. 追 跡 す る 必 要 性 が あ る と し て も,飼. 西洋. 数 種 の 魚 種 で 報 告 さ れ て い る 。 し か し な が ら,. 魚 類 の 初 期 発 育 に お け る 環 境 水 温 の 脂 質 代 謝 に つ い て は 報 告 が な い 。 さ ら に,飼. コ ー ン 油 を 与 え た ニ ジ マ ス で,低. α(Ibarz. 度も. の後 の経過 を. 可 能 性 を 示 す も の で あ る 。 加 え て,脂. 育 水 温 に よ る 太 平 洋 ク ロ マ グ ロ の 脂 肪 蓄 積 の コ ン トロ ー ル の 肪 蓄 積 の 早 期 化 と 程 度 の 向 上 は,強. い ス トレス が 起 こ る よ. う な 養 殖 あ る い は 自然 環 境 下 で の 太 平 洋 ク ロ マ グ ロ の 発 育 初 期 で の 生 き 残 り を 改 善 す る こ と に 繋 が る と考 え ら れ る 。. 一97一.
(14) 近 大 水 研 報11号(2008). 第H章. 人 工 鰐 化 ク ロマ グ ロ と マ ダ イ の 仔 稚 魚 に お け る トリア シル グ リセ ロー ル 含 量 の 発 育 変 化. マ グ ロ属 魚 類 は 古 くか ら 日本 人 に 利 用 され,現 在 で は 刺 身 の 材 料 や 寿 司 ネ タ な ど と して 人 気 が 高 く,最 も好 ま れ る魚 介 類 の1つ で 生 産 され るマ グ ロの 約3分. と言 え る 。 日本 は マ グ ロ 属 魚 類 の 世 界 一 の 消 費 国 で あ り,世 界. の1が 消 費 され,お. よそ70力. 国 か ら輸 入 され て い る(中 井1998)。. そ の 中 で 大 西 洋 ・太 平 洋 ク ロマ グ ロは マ グ ロ属 魚 類 全 体 の 生 産 量 の うち わ ず か2%程 そ の希 少 価 値 と美 味 で あ る こ とか ら非 常 な 高 値 で 取 引 され て い る(澤 ま た,マ. 度 と少 な く,. 田 ・熊 井2000)。. グ ロ 属 魚 類 は 可 食 部 位 の 脂 質 の 多 少 に よ っ て 価 格 が 大 き く変 動 し,特 に 脂 質 の 多 い. 「トロ」 と呼 ば れ る部 位 は 珍 重 され,マ グ ロの 価 格 決 定 に 大 き な ウエ イ トを 占 め て い る。 そ の た め, 現 在 で は 世 界 各 地 で マ グ ロの 未 成 魚 や 成 魚 を捕 獲 し,数 ヶ 月 の 短 期 間 ニ シ ン,イ ワ シ,サ バ 類 等 の 脂 質 の 多 い 餌 を 与 え る こ とで 脂 の 乗 りを 良 く して か ら出 荷 す る と い うい わ ゆ る畜 養 が 産 業 化 さ れ て お り,オ ー ス トラ リア で は ミナ ミマ グ ロz肋 朋 〃5〃2αccoッ 〃,地 中 海 沿 岸 諸 国 で は タ イ セ イ ヨ ウ ク ロマ グ ロ 窃 槻 η〃5吻 ηη〃5,メ キ シ コで は 太 平 洋 ク ロ マ グ ロ7肋 ηη〃50r'θ η1α1'∫,の 畜養 が 行 わ れ て い る。 これ らに 対 し 日本 で は,太 2年 以 上,体 重20kg以. 上 に 育 て て 出 荷 す る 養 殖 が 各 地 で 行 わ れ て い る(熊 井1998;澤. これ ら の 畜 養 ・養 殖 マ グ ロ(JAS法 部 位 が 多 い こ とや,安. 平 洋 ク ロ マ グ ロ の 当歳 魚 を 釣 りに よ り捕 獲 し,飼 育 期 間 田2005)。. 上 は す べ て 養 殖 マ グ ロ と称 す る)は 天 然 マ グ ロ に 比 ベ トロ の. 定 した 品 質 を安 定 的 に供 給 す る こ とが 可 能 で あ る こ と が利 点 で あ る。 そ の. 肉 質 も以 前 は 脂 質 の 多 さ ゆ え に 酸 化 に よ る変 色 が 早 い こ とが 問 題 と な っ て い た が,こ れ は 肉 質 形 成 や 包 装 技 術 の 発 展 に よ っ て 改 善 され て き て お り,年 々 養 殖 マ グ ロ の需 要 が 高 ま っ て い る。 大 型 の魚 食 魚 で あ る マ グ ロ は 外 洋 に お い て 食 物 連 鎖 の 頂 点 に 位 置 す る。 そ れ ゆ え 生 物 濃 縮 に よ り水 銀 を,あ. る い は 人 為 的 な 環 境 汚 染 等 が進 む とPCB,ダ. イ オ キ シ ン 等 の 脂 溶 性 の 有 害 物 質 を,. そ の貯 蔵 庫 で も あ る脂 肪 の 中 に 蓄 積 しや す くな る(須 山1998)。2003年 品 医 薬 品 局)は,妊. 婦 ヘ マ グ ロ摂 取 量 制 限(12オ. に は ア メ リカ のFDA(食. ン ス=約340g/週)の. 勧 告 を 行 っ た 。 しか し. な が ら,生 息 環 境 や 餌 料 を コ ン トロー ル す る こ とが 困 難 な 天 然 魚 と は 異 な り,養 殖 管 理 下 で の 生 産 で は,環 境 や 餌 料 を 選 択 す る こ と に よ り,こ れ らの 問 題 も解 決 で き る可 能 性 は 十 分 に あ る と考 え られ る。 以 上 の 様 な 産 業 的 側 面 か ら 見 た マ グ ロ に と っ て の 脂 質 と は 別 に,生 物 学 的 側 面 か ら考 え る と, 常 に 高 速 で 泳 ぎ 続 け る マ グ ロ に とっ て 単 位 重 量 当 た りの 熱 量 が 多 く(Love1980;能 常 に 重 要 な エ ネ ル ギ ー 源 で あ る こ とが 考 え られ,適 定 付 け る 要 因 の1つ 見 は,マ. 勢1985),非. 切 な 脂 質 代 謝 と蓄 積 が養 殖 マ グ ロ の 健 康 を決. に も な り得 る。 しか しな が ら,魚 類 に お け る 脂 肪 の 代 謝 ・蓄 積 に 関 す る 知. ダ イ を は じ め とす る養 殖 魚 で い く らか 得 られ て い る も の の(Uminoeta1.1996;Okuand. Ogata2000;大. 里1991),ク. ロマ グ ロ,特 に 仔 稚 魚 に 関 す る 報 告 は 手 塚 ら(2004)に. よって体 成分. と して の脂 質 含 量 を測 定 した 程 度 で あ り,皆 無 で あ る と い え る 。 ま た 脂 質 に は,エ ネ ル ギー 源 と して の 役 割 の 他 に,生 体 膜 の 構 成 成 分,生. 理 活 性 シ グ ナ ル 分 子 と して の 役 割 が あ り(清 水2004),. これ らを解 明 す る脂 質 生 物 学 研 究 は ど の動 物 種 で も重 要 性 を増 して い る。 ク ロマ グ ロ に お け る 「 トロ 」の 形 成 は,筋 と考 え られ る。 これ ま で に,マ. ダ イ,ア. 上 を ト リア シ ル グ リセ ロ ー ル(以. 肉 に 中性 脂 肪 が 蓄 積 され る こ とに よ っ て な され る. ユ,キ. 下TAG)が. ジ ハ タ な ど さ ま ざ ま な 魚 種 で 中 性 脂 肪 の90%以 占 め(Nakagawaetal.1986;Nakagawaetal.1984;. Kayanoetal.1990;Nakagawaetal.1995),TAGが. 主 要 なエ ネ ル ギ ー 源 と して 用 い られ る こ とが 知. 一98一.
(15) 藤 本:人. られ て い る(Sheridan1988)。. 工艀 化 ク ロマ グ ロ の 脂 肪 蓄 積. した が っ て,「 トロ 」形 成 は,TAG含. す る こ とが 推 察 され る。 ま た,TAG含. 量 の 増 加 と密 接 な 関 連 を有. 量 の レベ ル は,魚 類 の 栄 養 状 態 の 指 標 で あ る と考 え られ. て い る(Fraserl989)。 本 章 で は,人. 工 艀 化 した ク ロマ グ ロ仔 稚 魚 に お い て,TAG含. 量 を 測 定 し,発 育 初 期 に お け る. ク ロ マ グ ロ の 中性 脂 肪 蓄 積 過 程 を 明 らか に し よ う と した 。 さ ら に,魚 体 の脂 肪 蓄 積 を コ ン トロ ー ル す る技 術 の 開 発 に 資 す る 目的 で,仔 稚 魚 期 の 飼 育 水 温 の 違 い に よ る 中 性 脂 肪 蓄 積 の 様 相 の 違 い を 明 らか に す る た め,異. な る飼 育 水 温 で 飼 育 した ク ロマ グ ロ仔 稚 魚 に お い てTAG含. 量 の発 育変. 化 を 調 べ た。2-1で は,種. 苗 生 産 用 に 育 て た ク ロ マ グ ロ の 魚 体 サ イ ズ ご と のTAG含. 量 を 測 定 し,. そ の 発 育 変 化 変 化 の 特 徴 を 明 ら か に す る と共 に,代 表 的 な 養 殖 魚 で あ る マ ダ イ のTAG含. 量 との. 比 較 を行 っ た 。2-2で は 飼 育 水 温 の 違 い に よ る脂 質 蓄 積 へ の 影 響 を 明 らか に す る た め,飼 育 実 験 1で はlm3水. 槽 を 用 い て 予 備 的 に 実 験 を 行 い,飼. 育 を 行 い,そ れ ぞ れ 水 温 の 違 い に よ るTAG含. H-1.ク. 育 実 験Hで. は20m3水. 槽 で種 苗 生産 規 模 の飼. 量 の 変 化 を検 証 した 。. ロ マ グ ロ 仔 稚 魚 と マ ダ イ 仔 稚 魚 の ト リ ア シ ル グ リ セ ロ ー ル(TAG)含. Takiiら(1997)はTAGが. 量 の比較. の ク ロマ グ ロ の胚 発 生 に お い て は 主 な 内 部 栄 養 と して 利 用 され て い. る こ と を 示 唆 して い る。 彼 らは ま た,エ ネ ル ギ ー 利 用 の 観 点 か ら,ク ロマ グ ロ 受 精 卵,仔 稚 魚 の TAG含. 量 とそ の脂 肪 酸 組 成 に 関 心 が 持 た れ る べ き で あ る と して い る。. 脂 質 含 量 が 高 い 魚 種 で あ る ク ロ マ グ ロ(Nakamuraetal.2006)で. は,艀 化 後 に お い て も,摂 餌. 開 始 前 の 前 期 艀 化 仔 魚 は も ち ろん,摂 餌 開 始 後 の 後 期 仔 魚,稚 魚 以 降 もTAGを. 主要 なエ ネル ギー. 源 と して 利 用 して い る 可 能 性 が 考 え られ る。 し か しな が ら ク ロ マ グ ロの 仔 稚 魚 期 に お け るTAG の 代 謝 ・蓄 積 に 関 す る 知 見 はSeokaetal..(2007)ら. が 艀 化 後23日. か ら6日 間 の 飼 育 試 験 を 行 っ. た 報 告 を 除 い て 皆 無 で あ る。 そ こで 本 実 験 で は,各 成 長 段 階 に お け るTAGの ク ロマ グ ロ仔 稚 魚 に お け るTAGの. 魚 体 含 量 を 測 定 し,. 蓄 積 パ タ ー ン を 明 らか に す る こ と を 目的 と した 。 ま た,ク. マ グ ロ仔 稚 魚 の 特 徴 を よ り明 確 に す る た め の 比 較 対 照 と し て,我. ロ. が 国 の 代 表 的 な 養 殖 魚 で あ り,. 外 洋 大 回 遊 性 の ク ロ マ グ ロ とは 生 活 様 式 が 異 な り沿 岸 性 で,白 身 の 魚 で あ るマ ダ イ 仔 稚 魚 に つ い て もTAGの. ∬-1-1ク. 定 量 を行 った。. ロ マ グ ロ 仔 稚 魚 のTAG含. 量. 材料および方法 供試 魚 近 畿 大 学 水 産 研 究 所 大 島 実 験 場 で養 成 した1995・6年 年7月24日. 級 群 ク ロマ グ ロ天 然 捕 獲 親 魚 よ り2004. に 自然 産 卵 に よ っ て 得 た 受 精 卵 を艀 化 させ,同. 実 験 場 で 飼 育 した 仔 稚 魚 を供 試 した 。. 採 卵 は 以 下 の 方 法 で 行 っ た 。 ま ず 生 賓 の 周 囲 に 浮 上 卵 の 流 出 を 防 ぐた め に 深 さ25mの シー トを 張 っ た 。 次 に,マ. グ ロ が 産 卵 の 疑 い が あ る 行 動 を し た と き,も. の プ ラ ン ク トン ネ ッ ト(目 合 い576μm)を. ビニ ル. し くは 随 時 ナ イ ロ ン製. 張 っ た 産 卵 確 認 用 の タ モ を 水 面 で 曳 き,産 卵 が 確 認. され た ら 同 じ 目合 い の プ ラ ン ク トンネ ッ トを 張 っ た採 卵 用 ネ ッ ト(1×2×3m)を. 一99一. 生 賓 内 に 浮 か べ,.
(16) 近 大 水 研 報11号(2008). 生 賓 の 周 囲 を曳 き採 卵 した 。 受 精 卵 の 保 管 お よび 運 搬 中 に は携 帯 用 の エ ア ポ ン プ で エ ア レー シ ョ ンを行 った。 採 集 し た 受 精 卵 は 実 験 室 に 持 ち 帰 り,ご (1×1×1m)内. に 収 容 し た 。 ま た,受. み と沈 下 卵 を 取 り除 い た 後 に艀 化 水 槽 に 張 っ た ネ ッ ト. 精 卵 を 無 作 為 に30∼50粒. 取 り 上 げ,デ. DEGITALCAMERAHC-300,F邨PhotoFilmCo.,Ltd.,Tokyo)を を パ ー ソ ナ ル コ ン ピ ュ ー タ に 取 り込 み,画 Corp,Fredrick,U.S.A.)で. ジ タ ル カ メ ラ(FUJIX. セ ッ ト した 実 体 顕 微 鏡 か ら画 像 像 解 析 ソ フ ト ウ ェ ア(ScionImageBeta4.02Win,Scion. 卵 径 お よ び 油 球 径 を 測 定 した 。. 供 試 し た 卵 は 平 均 卵 径0.99±0.35mm,平. 均 油 球 径0.25土0.08mm(炉30),正. 常 艀 化 率 は91.6%. で あ った。. 飼育 飼 育 は 近 畿 大 学 水 産 種 苗 セ ン タ ー 大 島 事 業 場 の30m3容FRP円 微 生 物 に よ る 環 境 改 善 剤(マ. リ ン ベ ッ ト種 苗,ミ. 形 水 槽 で 飼 育 した 。 飼 育 水 に は. ヤ コ 化 学 株 式 会 社,東. に 入 れ て 水 面 下 に 吊 る し た 。 ま た 艀 化 開 始 の 直 前 に は,浮. 京)を. ナ イ ロ ン製 ネ ッ ト. 上 発 死 防 止 の た め に フ ィ ー ドオ イ ル を. 撒 い た。 3日 令 に 開 口 を 確 認 後,栄. 養 強 化 剤(マ. リ ン グ ロ ス,日. 養 強 化 し た ワ ム シ βroo痂oηπ5zo∫〃〃!dの7〃2おを 与 え,12日 イ ル で 栄 養 強 化 し た ア ル テ ミ ア オπε〃加sp.を ナ ノ ク ロ ロ プ シ ス1V卿 ηoo〃orgρ廊sp.を ル50'伽5の. 艀 化 仔 魚 を 与 え 始 め,25日. た(Fig.II-1)。 びDOメ. 毎 日午 前8時. 清 マ リ ン テ ッ ク 株 式 会 社,横. 浜)で. 栄. 令 か らはマ リング ロ スお よびす じこオ. 与 え た 。 な お,ワ. ム シ を与 え てい る間 は飼 育 水 に. 適 量 添 加 し た 。 そ の 後17日. 令 よ り イ シ ダ イ(2ρ1θgηo∫ 加5. 令 あ た り か ら徐 々 に 細 か く刻 ん だ イ カ ナ ゴ を 与 え は じ め. と 午 後4時. に,飼. 育 水 の 水 温 お よび 溶 存 酸 素 を そ れ ぞ れ 水 温 計 お よ. ー タ ー(YSIMODEL95,YSIIncorporated,YellowSprings,U.S.A.)で. Daysposthatch Fig.II-1.Rearingtemperature,dissolvedoxygen,andfeeding scheduleinthePacificbluefintunarearing.. 一100一. 測 定 した 。.
(17) 藤 本:人. 工艀 化 クロマ グ ロの脂肪 蓄積. サ ン プ リング サ ン プ リ ン グ は 艀 化 後3,7,14,20,25,30,35,40,45お 午 前6時. よ び50日. の 問 に 給 餌 前 の 個 体 を 取 り上 げ た 。 サ ン プ ル は 艀 化 後14日. ク ロ チ ュ ー ブ に 収 容 し た 。 サ ン プ ル 尾 数 は 艀 化 後3,7お 個 体 ず っ と し,シ の 個 体 は,水. リ ン ジ で 水 分 を 抜 い た 後,重. 分 を ふ き 取 っ た 後 に1個. し た 。 艀 化 後14日 降 は1尾. を1検. 体 と し,そ. れ ぞ れ6検. か ら のマ イ. 令 で そ れ ぞ れ10,5お. 量 を 測 定 し,-40°Cで. 以 前 の サ ン プ ル は マ イ ク ロ チ ュ ー ブ1個. 前4時. 以 前 の 個 体 は1.5m￡. よ び14日. 体 ず つ 体 重 を 測 定 し,ビ. に 行 い,午. よ び5. 凍 結 保 存 し た 。20日. 令以降. ニ ル 袋 に 入 れ て 一40°Cで 凍 結 保 存. に 収 容 し た も の を1検. 体,20日. 令以. 体 と な る よ うサ ン プ リ ン グ した。. 脂 質の抽 出 脂 質 の 抽 出 は す べ てFolchら(1957)の. 方 法 で 行 っ た 。 た だ し魚 体 サ イ ズ に よ っ て 抽 出 法 を 以. 下 の よ うに 変 え た 。 抽 出 方 法1(艀. 化 仔 魚 か らpostHexion期. ま で の 仔 魚). マ イ ク ロ チ ュ ー ブ に 入 れ た サ ン プ ル に ク ロ ロ ホ ル ム:メ m￡ 加 え,マ Gで10分. タ ノ ー ル(2:1)(以. 下 比 率 省 略)を0.5. イ ク ロ チ ュ ー ブ 用 の プ ラ ス チ ッ ク 製 ホ モ ジ ナ イ ザ ー で ホ モ ジ ナ イ ズ し た 。 次 に3000 間 遠 心 し,上. タ ノ ー ル を0.5m￡. 澄 み を ろ 紙 で 濾 し て ス ピ ッ チ に 移 し た 。 沈 殿 物 に 再 び ク ロ ロ ホ ル ム:メ. 入 れ ボ ル テ ッ ク ス で 混 合 し た 後,上. こ の 過 程 を 再 度 繰 り返 し,ろ. 紙. ロ ー ト,ス. 記 同 様 遠 心 し上 澄 み を ス ピ ッチ へ 移 した 。. ピ ッ チ の 縁 を 脂 質 が 残 ら な い よ う に ク ロ ロ ホ ル ム:. メ タ ノー ル で 入 念 に洗 浄 した 。 抽 出 方 法2(体 10m￡. 重 約lgま. で の 稚 魚). の ガ ラ ス ホ モ ジ ナ イ ザ ー に サ ン プ ル を 入 れ,ク. く ホ モ ジ ナ イ ズ し た 後,10m￡. タ ノ ー ル を3m￡. 加 え,よ. の 共 栓 お よ び 目 盛 り付 き ス ピ ッ チ へ 移 し た 。 ま た ガ ラ ス ホ モ ジ ナ. イ ザ ー に 再 び ク ロ ロ ホ ル ム:メ 移 し た 。 な お,洗. ロ ロ ホ ル ム:メ. 浄 は2回. タ ノ ー ル を3m￡. 加 え,よ. く 洗 浄 し,洗. 浄 液 を 上 記 の ス ピ ッチ へ. 行 っ た 。 こ れ に 栓 を し て3000rpm/minで15分. 間 遠 心 し,液. 量 を記 録. した 。 抽 出 方 法3(体. 重 約1g以. 魚 体 を 約2cm間. 隔 で 頭 尾 軸 方 向 に 垂 直 に 切 断 し,真 空 凍 結 乾 燥 機(NEOCOOLUNIT,Yamato,東. で24時. 上 の 個 体). 間 以 上 凍 結 乾 燥 さ せ た 。 乾 燥 後 は 重 量 を 測 定 し,そ. し な が ら粉 末 状 に し た 。 そ れ を0.1gガ を3mε. TAGの. の 後 包 丁 で 細 か く 切 り刻 み よ く 混 合. ラ ス ホ モ ジ ナ イ ザ ー に 移 し,ク. 加 え ホ モ ジ ナ イ ズ し た 。 以 降 は 抽 出 方 法2と. 京). ロ ロ ホ ル ム:メ. 同 様 に 洗 浄 し,遠. タ ノー ル. 心 にか けた。. 定量. 抽 出 し た 脂 質 か らTAGの. 定 量 を 行 っ た 。 定 量 に は 市 販 のTAG定. 協 和 メ デ ッ ク ス 株 式 会 社,東 抽 出 液 か ら そ れ ぞ れ0.6m￡ ポ レ ー シ ョ ン ヘ ッ ド(タ. 京)を. 用 い,抽. お よ び0.1m￡. 出 方 法1で. は そ の ま ま,抽. を 別 の ス ピ ッ チ へ 移 し,ア. イ テ ッ ク 株 式 会 社,越. 谷 市)を. タ ノ ー ル を 揮 発 さ せ た 。 完 全 に ク ロ ロ ホ ル ム:メ. ノ ー ル:ジ. エ チ ル エ ー テ ル(3:1)を20F￡ 量 キ ッ トの 酵 素 液Rlを2.25m￡. 入 れ,シ. 出 方 法2お. よ び3で. は,. ル ミ ドラ イ ブ ロ ッ ク とエ バ. タ ノ ー ル が 揮 発 した らそ こ ヘ エ タ. ェ ー カ ー で 再 び 溶 解 さ せ,市. 入 れ よ く 混 合 し た 。 こ れ を37°Cの. 一101一. タ ミナ ーLTGII,. 用 い て 窒 素 の 噴 射 に よ り抽 出 液 の ク ロ ロ. ホ ル ム:メ. るTAG定. 量 キ ッ ト(デ. 販 の酵 素法 に よ ウ ォ ー ター バ ス に.
(18) 近 大 水 研 報11号(2008). 5分. 間 置 い た 。 そ の 後 酵 素 液R2を. し た 。 な お,こ. 入 れ よ く 混 合 し再 び37°Cの. れ ら の 反 応 の 原 理 はFig.2-6に. 吸 光 度 計(U-1800,HITACHI,東. 京)を. 液 と し て ト リオ レ イ ン を エ タ ノ ー ル:ジ. 結. ウ ォ ー タ ー バ ス の 中 に5分. ま と め た と お り で あ る 。 こ れ を585nmの. 間静置. 用 い て 吸 光 度 を 測 定 しTAG値. エ チ ル エ ー テ ル(3:1)で. 波長 で. を 求 め た 。 な お,標. 準. 希 釈 した も の を 用 い た 。. 果 飼 育 中 の 水 温 お よ び 溶 存 酸 素 濃 度 の 変 化 はFig.II-1に 体 重(Fig.II-2)お. し か し,単. よ び 総TAG量(Fig.II-3)は. 位 体 重 当 た り のTAG含. 伴 い 増 減 を 繰 り返 し,20μg/mgBW以 令 変 化 と 同 様 に,体. 量(Fig.II-9)は. ま と め た と お りで あ る 。. 日 令 に と も な っ て 増 加 し,よ く 似 た 推 移 を み せ た 。 緩 や か な 増 加 傾 向 を 示 し た が,日. 下 に と ど ま っ た 。 単 位 体 重 当 た り のTAG含. 重 増 加 に と も な い 緩 や か に 増 加 す る も の の,増. II-10)。. り. Zり4UbU Daysposthatoh. Fig.II-2.GrowthofbodyweightofthePacificbluefilltuna (PBT)andtheRedseabream(RSB).. 令 の経過 に 量 は,そ. の 日. 減 を 繰 り返 し て 推 移 し た(Fig.
(19) u.1. 0. 40. 20. 60. Daysposthatch Fig.II-3.Changeoftriacylglycerol(TAG)contentofthePacific bluefintuna(PBT)andtheRedseabream(RSB).. Daysposthatch. Fig.II-4.ChangeoftriacylglycerolcontentofthePacificbluefin tuna(PBT)andtheRedseabream(RSB)perunitbodyweight.. H-1-2マ. ダ イ 仔 稚 魚 のTAG含. 量. 材料および方法. 供 試魚 近 畿 大 学 水 産 養 殖 種 苗 セ ン タ ー 大 島 事 業 場 で,2005年 供 試 魚 と し て 用 い た 。 な お,使. 春 の 種 苗 生 産 用 に 飼 育 され た マ ダ イ を. 用 した 卵 は 同 事 業 場 で 養 成 され た マ ダ イ 親 魚 よ り,2005年2月. 一103一.
(20) 近 大 水 研 報11号(2008). 14日 に 自然 産 卵 に よ っ て 得 た。 仔 稚 魚 の 飼 育 は30m3容FRP円 FRP円. 形 水 槽 で 行 っ た 。 ま た,艀. 化 後50か. ら65日. 形 水 槽 で 飼 育 した 。 餌 料 系 列 は,栄 養 強 化 した ワ ム シ を 艀 化 後3か. 化 した ア ル テ ミア を 艀 化 後20か 配 合 飼 料 を 艀 化 後19日. ら29日. ら23日. ま で,冷 凍 コペ ポ ー ダ を 艀 化 後24か. の 問 はlm3容 ま で,栄 養 強. ら35日 ま で,市 販. 以 降継 続 して 与 え た。 環 境 測 定 は ク ロマ グ ロの 場 合 と同 様 に行 っ た 。. サ ンプ リング 艀 化 後3,8,15,20,25,30,35,40,45,50,55お. よ び65日. 6時 頃 に 給 餌 前 の 個 体 を 取 り 上 げ た 。 艀 化 後3日. で は10個. 艀 化 後8,15お. で1個. よ び20日. 限 り 抜 き 取 っ た 後,重 き 取 っ た 後 に1個. で は5個. 体 ず つ,25日. TAGの. 前. の マ イ ク ロ チ ュ ー ブ に,. 体 ず つ 収 容 し,シ. リン ジ で 水 分 を で き る. 化 後30日. 以 降 で は水 分 をふ. 体 ず つ 体 重 を 測 定 し ビ ニ ル 袋 に 入 れ て 一40°Cで 凍 結 保 存 し た 。 艀 化 後25日 を1検. 体,艀. 化 後30日. 以 降 は1個. 体 を1検. 体 と し,そ. 以 れ. 体 ず つ サ ン プ リ ン グ した。. 定量. 定 量 は 前 節 と 同 様 の 方 法 で 行 い,艀 ま で の 個 体 は 抽 出 方 法2に. 結. 体 ず つ1.5m￡. 量 を 測 定 し 一40°Cで 凍 結 保 存 し た 。 ま た,艀. 前 の サ ン プ ル は マ イ ク ロ チ ュ ー ブ1個 ぞ れ6検. に サ ン プ リ ン グ を 行 い,午. 従 っ て,艀. 化 後25日 化 後45日. ま で の 個 体 は 抽 出 方 法1,艀 以 降 は 抽 出 方 法3に. 化 後30か. ら40日. 従 っ て行 った。. 果. ク ロ マ グ ロ 仔 稚 魚 の 体 重(Fig.II-2)お. よ び 総TAG量(Fig.II-3)は. 化 後40日. の 後 少 し増 加 率 が 減 少 す る と い う よ く似 た 推 移 を した。. ま で 指 数 関 数 的 に 増 加 し,そ. マ ダ イ で も,艀 50日. 化 後 日数 の 経 過 に 伴 い,体. ま で 指 数 関 数 的 に 増 加 し,そ. v.1. ■. 重(Fig.II-2),魚. 艀 化 後 日数 に と も な っ て 艀. 体 の 総TAG含. の 後 増 加 率 が 減 少 す る と い う,ク. lV. lUlu-. Bodyweight(mg) Fig.II-5.Changeoftriacylglycerol(TAG)contentofthePacific bluefintuna(PBT)andtheRedseabream(RSB)perunitbody weightwiththegrowthofbodyweight.. 一104一. 量(Fig.II-3)が. 艀化後. ロ マ グ ロ と よ く似 た 推 移 を. Iu. lu.
(21) 藤 本:人. 工艀 化 ク ロマ グ ロの脂肪 蓄積. した 。 こ れ に 対 し,ク 後25日)ま な り,高. ロ マ グ ロ で は,魚. で5-10μg/mgBWの. 体 重10mg(艀. 化 後14日)以. 範 囲 で 推 移 し,体. い 含 量 を 持 つ 個 体 で は15-22ドg/mgBWの. マ ダ イ で は,単. 位 体 重 当 た り のTAG含. 以 下 の 低 い 値 で 推 移 し た(Fig.II-4)。. 重10g(艀. 降 一 旦 増 加 し,体 化 後30日)か. 量 は,艀 そ の 後30目. 考. 体差 が大 き く. 化 後25日. ま で は 増 減 も 少 な く,2μg/mgBW. 令 か ら は,個. 体 差 は あ る も の の,急. 激 に増加. 量 の 変 化 を み る と,体. 重10mg. の 後 急 激 な 増 加 に 転 じ た(Fig.II-5)。. ク ロ マ グ ロ と マ ダ イ を 比 較 す る と,体 当 た り のTAG含. 化. 水 準 へ 急 増 し た(Fig.II-4,II-5)。. す る 傾 向 を 示 し た 。 体 重 の 増 加 に 伴 う 単 位 体 重 当 た り のTAG含 を 超 え る 頃 か ら徐 々 に 増 え 始 め,そ. ら,個. 重1g(艀. 重100mgよ. り 大 き な サ イ ズ で,マ. ダイ の方 が 単位 体 重. 量 が 著 し く 高 い こ とが 特 徴 で あ る。. 察. ク ロマ グ ロ とマ ダ イ の 単 位 魚 体 重 当 た りのTAG含 両 種 と も に5Fg/mgBW以. 下 で 低 く推 移 した が,そ. 含 量 が 増 加 した 。 これ に 対 し,ク ロ マ グ ロ で は,魚 体 重lg(艀. 化 後25日)ま. で5-10μg/mgBWの. 量 を 比 較 結 果 で は,魚. の 後 マ ダ イ で は 艀 化 後25日 体 重10mg(艀. 上 で は マ ダ イ の 方 がTAG含. 魚 とマ ダ イ 仔 稚 魚 のTAG蓄. 下では. 以 降 急 激 にTAG. 化 後14日)以. 範 囲 で 推 移 し,体 重10g(艀. 個 体 差 が 大 き く,高 い含 量 を持 つ 個 体 で は,15-22μg/mgBWの mg以. 体 重10mg以. 降 一 旦 増 加 し,. 化 後30日)か. らは. 水 準 へ 急 増 した 。 ま た,体 重10. 量 が 顕 著 に 高 い 傾 向 に あ っ た。 以 上 の よ うに,ク. ロマ グ ロ仔 稚. 積 の 発 育 に 伴 うパ タ ー ン に は 大 き な 違 い が あ る こ と が 明 らか と な っ. た 。 こ の原 因 と して は,ま ず 両 魚 種 の 稚 魚 期 の 行 動 が 異 な る こ とが 考 え られ る。 沿 岸 の 底 層 に 生 息 す る マ ダ イ に 対 して,ク. ロ マ グ ロ は 外 洋 表 層 に 生 息 し,常 に 高 速 で 遊 泳 す る とい う特 徴 を 有. す る。 ク ロマ グ ロ は 稚 魚 期 に お い て す で に 高 い 遊 泳 性 を 持 つ(宮 マ ダ イ に 比 べ て 仔 稚 魚 期 の 成 長 が 極 め て 速 く,購1化 後20日. 下2002)ま. た,ク. ロマ グ ロは. か ら成 長 が 加 速 す る(Miyashitaetal.. 2001)。 した が っ て,稚 魚 期 の ク ロ マ グ ロ は マ ダ イ に 比 べ,運. 動 や 成 長 に 消 費 され るエ ネ ル ギ ー. が 多 く,餌 か ら吸 収 した脂 質 は 蓄 積 され ず に 消 費 され る割 合 が 高 い こ と が 考 え られ た。 稚 魚 期 に お い て は,エ ネ ル ギ ー 蓄 積 よ り も,高 成 長 と,外 洋 に に お い て そ の た め の 餌 を 獲 得 す る た め の 活 発 な 遊 泳 運 動 に摂 取 エ ネ ル ギ ー を 優 先 して 用 い る こ と は ク ロ マ グ ロ初 期 発 育 に お け る 生 き 残 り戦 略 で あ ろ う。 さ らに,第1章. で 述 べ た よ うに,マ. ダ イ と ク ロマ グ ロ で は,初 期 発 育 に お け る脂 肪 蓄 積 の 組 織. 学 的 様 相 が 顕 著 に 異 な る こ と も,TAG蓄 ま た,艀 化 後20日 mgBWと. 以 前,体. 重10mg以. 積 量 の 発 育 変 化 に大 き な 影 響 を 与 え て い る と推 察 され る。 下 で は 両 種 と もに 単位 魚 体 重 当 た りのTAG含. 低 か っ た こ とか ら,仔 魚 期 とお そ ら く は 稚 魚 期 の 初 期 に お い て は,エ. 量 が5μg/. ネル ギー の 蓄積. が 著 し く少 な い と推 察 され る。 こ の こ と は,さ ま ざ ま な ス トレス に さ ら され る こ の 時 期 の 生 き残 りが か な り困難 で あ る こ と を示 唆 す る。. ∬-2.飼. 育 水 温 が 異 な る ク ロ マ グ ロ仔 稚 魚 の ト リグ リセ リ ド含 量 の 比 較. 一105一.
(22) 近 大 水 研 報11号(2008). II-1に お い て ク ロ マ グ ロ仔 稚 魚 の 成 長 に 伴 うTAG含 な っ た。 ま た,ク. 量 変化 の基 本 的 なパ ター ンが 明 らか と. ロ マ グ ロ 仔 稚 魚 とマ ダ イ 仔 稚 魚 のTAG含. ダ イ 仔 稚 魚 に 比 ベ ク ロ マ グ ロ 仔 稚 魚 は 体 重 増 加 に 伴 うTAG含. 量 の発 育 変 化 を 比 較 した と こ ろ,マ 量 の 増 加 が 緩 や か で あ り,種 に よ. る 明 らか な違 い が 見 られ た 。 1-2で. は,飼 育 水 温 の 違 い が ク ロ マ グ ロ 仔 稚 魚 の脂 肪 蓄 積 パ タ ー ン に 及 ぼ す 影 響 を 明 らか に. す る こ と を 目的 と した 。 本 学 水 産 研 究 所 で は 和 歌 山 県 串 本 と鹿 児 島 県 奄 美 大 島 の2つ の 実 験 場 で ク ロマ グ ロ を飼 育 して い るが,串. 本 で は 最 低 水 温 が 低 く(約14°C),年. し,奄 美 で は 串 本 に 比 べ 水 温 が 高 く(最 低 水 温 約20°C),年. 間 の変 動 が大 きい の に対. 間 の 変 動 が 小 さ く安 定 して い る。 こ. の よ うに 水 温 の 異 な る 両 実 験 場 で 飼 育 され た ク ロマ グ ロ は,成 長 や 肉 質 に も違 い が 見 られ,串. 本. で 飼 育 した ク ロマ グ ロ は 脂 質 が 多 い の に 対 し,奄 美 で は 脂 質 が 少 な い こ とが 経 験 的 に 知 られ て い る。 こ の こ とは 飼 育 水 温 が ク ロマ グ ロ の 脂 質 蓄 積 量 に影 響 を 及 ぼ す こ と を示 唆 して い る。 そ こで, 異 な る飼 育 水 温 下 で の ク ロ マ グ ロ仔 稚 魚 のTAG蓄 予 備 的 な 実 験 と して,飼 区 設 け た。 飼 育 実 験Hで. 育 実 験1で は1m3容. は,飼. 水 槽 で 艀 化 後20日. 育 実 験1の1m3容. を得 る た め,実 際 の 生 産 規 模 と 同 様 の20m3容 ン プ リン グ の 間 隔 を 本 章 第1節. 積 パ ター ン を 比 較 検 討 した。 ま で 飼 育 し,飼 育 水 温 区 を3. 水 槽 で は 飼 育 が 難 しい 稚 魚 期 以 降 の サ ン プ ル 水 槽 で 飼 育 し,水 温 区 を2区 設 定 した。 ま た,サ. に お け る 実 験 よ りも 短 く し,TAG含. 量 の よ り詳 細 な 変 動 を 明 ら. か にす る こ とを 目的 と した。. O l n∠. 5 1. 0 1. 5. '願'6. Fig.II-6.Rearingtemperature,dissolvedoxygenconcentration,pHinthePacificbluefin tunarearing.Lowertemperaturecondition;LT,lowertemperatureconditionduring earlystage;ELT,andhighertemperaturecondition;HT.. 一106一.
(23) 藤 本:人. ∬-2-1.飼. 工 艀 化 ク ロマ グ ロ の 脂 肪 蓄 積. 育 実 験1. 材料 と方法 供試 魚 近 畿 大 学 水 産 研 究 所 奄 美 実 験 場 で養 成 中 の1998年. 級 群 ク ロ マ グ ロ天 然 親 魚 よ り,2005年7月. 20日 に 自然 産 卵 に よ っ て 得 た 受 精 卵 を 空 輸 お よび 陸 路 で 同 水 産 研 究 所 大 島 実 験 場 ま で 運 搬 した 。 こ れ らを オ ゾ ン 消 毒 した 後,各 水 槽 へ 収 容 し艀 化 させ て 実 験 に 供 試 した 。. 実 験 区の設 定 飼 育 水 温 の設 定 は23°Cで 飼 育 す る低 温 区,27°Cで. 飼 育 す る 高 温 区 に 加 え,ク. ロマ グ ロの 発 育. 初 期 で は 低 水 温 の 方 が よ り高 い 生 残 が 得 られ る と い う報 告 が あ る た め(宮 下2005),ま. た低水 温. で 飼 育 を継 続 す る と成 長 が 極 端 に 遅 れ る た め,且exion期 に 入 る ま で23°Cで 飼 育 し,そ れ 以 降25 °Cに 上 昇 させ た 初 期 低 温 区 の 合 計3区 設 け た 。 な お,全 て の 実 験 区 に お い て,最 適 艀 化 水 温 と され る25°C(宮 下 ら2000)で 艀 化 させ た 後,摂 餌 開 始 を 同 調 させ る た め,艀 化 後2日 °Cで 飼 育 し ,そ の 後1°C/dayの 変 化 率 で 目的 水 温 ま で 調 節 した 。. 令 ま で23. 飼育 受 精 卵 は,lm3容FRP水. 槽 に そ れ ぞ れ20,000粒. 収 容 し た 。 各 実 験 区3反. 飼 育 し た 。 飼 育 水 に は 環 境 改 善 剤 を ナ イ ロ ン 製 ネ ッ トに250g入. 復 と し,計9水. 槽 で. れ て 水 面 下 に 吊 る した。 ま た 艀. 化 開 始 確 認 後 は 浮 上 鰭 死 防 止 の た め に フ ィ ー ドオ イ ル を 水 面 に 適 量 を 滴 下 し た 。 飼 育 期 間 は,全 て の 区 で 同 じ体 長 ま で 飼 育 す る こ と を 目 的 と し,低 日 ま で,高. 温 区(HT)で. 化 ワ ム シ を15個. は20日. 体/m￡. ら18日. ま で と し た 。 餌 料 系 列 は 低 温,初. 養 強 化 し た ア ル テ ミ ア 幼 生,18日. リ ン グ ロ ス,日. れ ぞ れ 水 温 計,DOメ. よ びpHメ. ー タ ー(カ. ら. 栄 養 強 化 した ワ ム シ,. 清 マ リ ン テ ッ ク 株 式 会 社,横. 浜)で. 栄. か らイ シ ダ イ 艀 化 仔 魚 を 与 え た 。 な お 栄 養 強 化 の 方 法 は 第 前. 節 と 同 じ方 法 で 行 っ た 。 環 境 測 定 は 毎 日 午 前8時. U.S.A.)お. は 艀 化 後23. 期 低 温 区は実 験終 了 まで 栄養 強. リ ン グ ロ ス,日 清 マ リ ン テ ッ ク 株 式 会 社,横 浜)で. ま で 市 販 の 強 化 剤(マ. 測 定 項 目 と し,そ. 期 低 温 区(ELT)で. と な る よ う維 持 し て 与 え た 。 高 温 区 は 成 長 が 速 か っ た た め 艀 化 後2か. 16日 ま で 市 販 の 強 化 剤(マ 艀 化 後16か. 温 区(LT),初. と 午 後4時. に 行 い 水 温,溶. 存 酸 素 お よ びpHを. ー タ ー(YSIMODEL95,YSIIncorporated,YellowSprings,. ス タ ニ ーACTpHメ. ー タ ーD-24,HORIBA,京. 都)を. 使 用 した 。. サ ンプ リング 1日 令 か ら1日 お き に 午 前4時 か ら20個. 体 を1.5m￡. に給 餌 前 の 個 体 を サ ン プ リン グ した 。 魚 体 サ イ ズ に あ わ せ,1. の マ イ ク ロチ ュ ー ブ に 入 れ,シ. リ ン ジ で 水 分 を 抜 き 取 っ た 後 一40°Cで凍 結. 保 存 した 。 これ を1検 体 と した 。 な お,マ イ ク ロチ ュー ブ の 重 量 を あ らか じめ 測 定 し,そ れ ぞ れ の サ ン プ ル を収 容 した 重 量 を 測 定 して,収 容 個 体 数 か ら平 均 体 重 を算 出 した 。 各 水 槽6個 サ ン プ リン グ し,各 実 験 区 で18個. 体ず っ. 体 の サ ン プ ル を 得 た 。 ま た,体 長 測 定 用 に 毎 日夕方 に約20個. 体 を 取 り上 げ,魚 体 サ イ ズ に あ わ せ5%リ. ン酸 緩 衝 ホ ル マ リン溶 液 で 固 定 した 。. 一107一.
(24) 近 大 水 研 報11号(2008). 体 長測 定 体 長 測 定 用 の サ ン プル は,時 計 皿 も し くは ガ ラ ス シ ャ ー レ に移 し,前 節 で使 用 した デ ジ タ ル カ メ ラお よび 画 像 解 析 ソ フ トウ ェ ア で 測 定 した 。. TAGの 定 量 脂 質 の 抽 出 か らTAGの. 定 量 ま で 前 節TAGの. お よび 日令 で 抽 出 方 法1に. 結. 定 量 と 同 じの 方 法 で 行 い,抽. 出はす べ て の実 験 区. 従 い 行 っ た。. 果. 成長 飼 育 期 間 中 の 飼 育 水 温 は ほ ぼ 設 定 通 り,飼 育 水 の 溶 存 酸 素 濃 度,pHは. 問題 の ない範 囲 を経過. した(Fig.II-6)。 体 長 を飼 育 水 温 で 比 較 す る と,飼 育 期 間 中 高 温 区 が他 の2区 (Fig.II-7)。 体 重 は3区. と も艀 化 後11日. 降 急 激 な 増 加 を示 した 。 発 育 段 階 は3区. に 比 べ 明 らか に 高 い 値 で 推 移 した. 前 後 ま で は増 加 率 は 高 く な か っ た が,高 温 区 で は そ れ 以 と も お お む ね 同 じ体 長 で 同 じ発 育 段 階 に あ っ た が,同. じ. 発 育 段 階 で は,低 水 温 区 ほ ど体 重 が 重 い 傾 向 が 見 られ た 。. TAG含 量 魚 体 当 た りの 総TAG含. 量 は 前 節 と同 様 に艀 化 後 日数 の 経 過 と と も に 増 加 し,体 重 の艀 化 後 日. UOIUIo∠u乙u. Daysposthatch Fig.II-7.GrowthofbodylengthandbodyweightofthePacificbluefin tuna(PBT)underlower(LT),earlyIow(ELT),andhigher(HT) temperaturecondition.. 一108一.
(25) 藤 本:人. u. u. 工 艀 化 ク ロマ グ ロの 脂 肪 蓄 積. ■VI覧. ノ. `u. 乙り. Daysposthatch. Fig.II-8.Changeoftriacylglycerol(TAG)contentofthePacificbluefin tuna(PBT).TotalTAGcontent(upper)andTAGcontentperunit bodyweight(lower)withthegrowthofbodyweight,. 0.1. 1. ⊥u. Bodyweight(mg). Fig.II-9.Changeoftriacylglycerol(TAG)contentperunitbodyweightof thePacificbluefintuna(PBT)withthegrowthofbodylength(upper) andbodyweight(lower).. 一109一. ⊥u凹.
図
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