当院における Helicobacter cinaedi（H. cinaedi）分離例の 臨床的・細菌学的検討
1）国立病院機構熊本医療センター臨床検査科，2）国立病院機構九州がんセンター臨床検査科
川 上 洋 子
１）２）（平成 24 年 10 月 3 日受付）
（平成 26 年 1 月 9 日受理）
Key words : antimicrobial agent, blood culture, chemotherapy,Helicobacter cinaedi, relapsing
要 旨
国立病院機構九州がんセンターにおいて 2009 年 9 月より血液培養からのHelicobacter cinaediの分離例が 増加した．増加した原因を調査する目的で分離症例について検討を行った．対象は 2009 年 9 月〜2010 年 3 月に，H. cinaediが分離された血液培養 24 症例（45 株），胸水 1 症例（1 株）とした．患者背景は化学療法 歴が 44 株，ステロイド使用歴が 42 株にみられた．臨床症状では発熱を示した 43 株，消化器症状を示した 4 株，皮膚症状を示した 8 株であった．血液培養の症例は全て好気用ボトルから分離され，血液培養陽性ま で平均 4.1 日±1.60 であった．25 症例中 14 症例（56％）の患者からH. cinaediが再分離された．この 14 症 例について検討を行った結果，患者背景，臨床症状，化学療法歴，ステロイド使用歴との間では有意差を認 めなられなかったが，キノロン系抗菌薬との間に有意差（p＝0.0018）が認められた．当センターのように 悪性腫瘍を基礎疾患に有する患者が多い施設にとって，H. cinaedi感染症は化学療法のサイクルごとに再分 離を繰り返しうる感染症であり，有効な治療法が確立しておらず，治療期間の延長をもたらす可能性も示唆 される．また，H. cinaediが疑われる場合，血液培養時間の延長や培養条件の設定が重要であり，医療施設 で実施可能である迅速な検出・同定方法の開発が望まれる．
〔感染症誌 88：417〜422，2014〕
序 文
Helicobacter cinaedi（H. cinaedi）はハムスターな ど のげっ歯類や，イヌ，ネコおよびヒトの腸管からの分 離が報告がされている１）２） Enterohepatic Helicobacter に属するグラム陰性らせん状菌である３）．海外では，
Human Immunodeficiency Virus（HIV）感染者など の免疫不全患者の血液や糞便からの分離例が報告され
ている４）〜６）．本邦ではH. cinaediが血液培養から分離
される頻度は増加傾向にあるとされており７）８），免疫不 全患者のみならず９）１０），免疫能が正常な患者の血液培 養からの分離報告も散見される１１）．しかしながら，医 療施設でのH. cinaediの培養や同定は困難であり１２），H.
cinaediの分離状況や特性については明らかとなって
いない．そこで今回，国立病院機構九州がんセンター
（以下，当院）における血液培養からのH. cinaedi分
離状況および同定方法について検討を行った．
対象と方法 1．対象
2009 年 9 月〜2010 年 3 月に当院臨床検査科細菌室 に提出された血液培養検体から，H. cinaediが分離さ れた 25 症例（45 株）を対象とした．尚，本研究は，
国立病院機構九州がんセンターの倫理委員会の承認を 得て実施した．
2．H. cinaediの培養および同定
H. cinaedi培養は BACTEC 9050 system（日本べク トンディッキンソン：BD）を使用し（好気用血液培 養ボトル：Plus Aerobic!F Culture Vials，嫌気用血 液培養ボトル：Plus Anaerobic!F Culture Vials），
35℃ で最大 7 日間培養した．培養液のグラム染色所 見で，2 巻き以上のやや長めのグラム陰性らせん状菌 が観察されたものに関して，直ちに培養容器内を湿潤 にした 5％ ヒツジ血液寒天培地（栄研化学），ブルセ ラ HK 寒天培地（RS）（極東製薬）にて 35℃ の微好 原 著
別刷請求先：（〒860―0008）熊本県熊本市中央区二の丸 1―5 独立行政法人国立病院機構熊本医療センター臨
床検査科 川上 洋子
Fig. 1 Period until detection with a blood culture.
The growth of H. cinaedi required 2-7 days.
Table 1 Age distribution and basic disease of iso- lated cases
Age 40-49 50-59 60-69 70-79 Total
Male 0 6 6 3 15
Female 2 2 3 3 10
Basic disease of isolated cases Male Female Total
Hematological malignancy 7 2 9
Gyenecological tumor 0 7 7
Respiratory organ tumor 2 0 2
Gastrointestinal tumor 2 0 2
Bone and soft tissue malignancy 1 1 2
Tumor of the urinary organs 1 0 1
Head and neck area tumor 1 0 1
No basic disease 1 0 1
Of 25 cases in which H. cinaedi was isolated at the Kyushu can- cer center between September 2009 and March 2010.
Table 2 Patient background and clinical sign of iso- lated cases
Therapy and symptomatic state Positive Negative Chemotherapy after dose＜14 days 34
after dose＞14 days 10 2
Steroid therapy after dose＜14 days 33 after dose＞14 days 9 4
Fever 37.0-37.9 ℃ 4
＞38 ℃ 39 3
Diarrhea 4 42
Cellulitis/dematitis 8 38
Recurrence 14 11
(n＝46 episodes)
気培養を行った．数日培養後，H. cinaediに特徴的な thin spread colony を確認した株に関して，専門機関 で本菌に特異的なプライマーを用いた PCR 法による 同定検査を実施した．また，陽性ボトルの種類，血液 培養陽性日数についての検討も行った．
3．H. cinaediが再分離された患者の検討
H. cinaediが血液培養により分離され，抗菌薬の投
与により軽快した患者から再度分離された患者背景に ついて検討を行った．検討項目は年齢，性別，基礎疾 患を，臨床症状，治療歴，検体採取前後の発熱，消化 器症状（下痢，胃腸炎症状）の有無，皮膚症状（発赤，
腫脹，蜂窩織炎）の有無，治療歴は本菌分離 3 カ月前 までの化学療法歴の有無，ステロイド使用歴および再 発前に患者に投与されていた抗菌薬について検討を 行った．
4．統計解析
患者背景とH. cinaediによる再燃の検討において，
Chi-square test（Fisherʼs exact test）を用い統計解
析を行った．尚，統計ソフトは SPSS Ver18 を使用し，
有意水準は p＝0.05 として判定を行った．
成 績 1．患者背景
対象期間にH. cinaediが分離された患者は，男性 15 名，女性 10 名（median 62 歳，range 42〜79 歳）で あった．また，基礎疾患は造血器腫瘍 9 例（悪性リン パ種 9 例），婦人科腫瘍 7 例（子宮頸癌 4 例，子宮体 癌 1 例，卵巣癌 2 例），呼吸器腫瘍（肺癌 2 例），消化 器腫瘍（胃癌 1 例，直腸癌 1 例），骨軟部組織腫瘍（骨 肉腫 1 例，骨腫瘍 1 例）各 2 例，泌尿器腫瘍（前立腺 癌 1 例），頭頸部腫瘍（喉頭癌 1 例），基礎疾患なしが 1 例であった（Table 1）．
2．H. cinaediの分離と培養期間
血液培養 45 株全て好気用ボトルからの分離で，嫌 気用ボトルから菌の発育は認めなかった．血液培養陽 性までの期間は 2 日〜7 日で，平均 4.1 1.60 日であっ た（Fig. 1）．
3．患者の化学療法歴
分離されたH. cinaedi 46 株中，化学療法を受けた 患者から分離されたH. cinaediは 44 株（95.7％）であ り，化学療法後 14 日以内の分離が 34 株，14 日以降 の検出が 10 株であった．また，ステロイド投与歴が ある患者から分離されたH. cinaediは 42 株であり，ス テロイド投与後 14 日以内の検出が 33 株，14 日以降 の検出が 9 株であった．さらに，発熱を示した患者よ り分離されたH. cinaediは 43 株，下痢などの消化器 症状を示した患者から分離されたH. cinaediが 4 株，
皮膚症状を示した患者から分離されたH. cinaediは 8 株であった（Table 2）．
4．H. cinaediが再分離された患者の検討
25 症 例 中 14 症 例（56.0％）か らH. cinaediの 再 分 離が認められた．再分離された 14 症例の患者背景，臨 床症状，治療歴と，H. cinaediの再分離の関係につい て検討を行った結果，患者背景，臨床症状では有意差
Table 3 Relationship between case of recurrence case and patient background
Patient characteristics Recurrence Statistical
significance Positive Negative
Sex Male 10 5
Female 3 7 N.S.
Age
40-49 0 2
50-59 5 3 N.S.
60-69 5 4
70-79 3 3
Underlying disease
Hematological malignancy 6 3
N.S.
Gynecological tumor 1 1
Respiratory organ tumor 1 0
Gastrointestinal tumor 2 5
Bone and soft tissue malignancy 2 0
Tumor of the urinary organs 1 1
Head and neck area tumor 0 1
No basic disease 0 1
Hematopoietic disorder
Hematological malignancy 6 3
Non hematological malignancy 7 9 N.S.
Statistical differences were assessed using the chi-square test (Fisherʼs exact test) with the sig- nificance at p＜＿ 0.05. N.S.: Non significance.
Table 4 Relationship between cases of recurrence and clinical finding.
Patient characteristics Recurrence Statistical
significance Positive Negative
Fever
37.0-37.9 ℃ Positive 10 5
Negative 0 2 N.S.
＞38 ℃ Positive 5 3
Negative 5 4 N.S.
Diarrhea Positive 1 2
Negative 12 10 N.S.
Cellulitis/dematitis Positive 2 1
Negative 11 11 N.S.
Chemotherapy
After dose＜14 days Positive 10 8
Negative 3 4 N.S.
After dose＞14 days Positive 3 2
Negative 10 10 N.S.
Steroid herapy
After dose＜14 days Positive 9 8
Negative 4 4 N.S.
After dose＞14 days Positive 4 1
Negative 9 11 N.S.
Antibiotic therapy
Penicillin Positive 4 5
Negative 17 21 N.S.
Cephems Positive 15 13
Negative 6 13 N.S.
Calbapenems Positive 2 3
Negative 19 23 N.S.
Quinolones Positive 7 0
p＝0.0018
Negative 14 26
Notes and abbreviations are the same as for Table 3.
を認めなかった（Table 3）．しかし，化学療法歴，お よびステロイド使用歴との間では有意な差が認めな かったが，キノロン系抗菌薬投与歴の有無との間に有
意な差（p＝0.0018）が認められた（Table 4）．
考 察
当院では 2007 年までは血液培養から分離される菌
Fig. 2 Break down transition of a spiral Gram-negative bacterium from blood culture. H. cinaedi had accounted from more than 90% of a spiral Gram-negative bacterium.
種は Coagulase-negative staphylococciをはじめとする
Staphylococcus属や腸内細菌が中心であった．しかし，
血液培養でH. cinaediを 2008 年から分離するように なり，その割合は 2009 年 11.2％，2010 年 18.9％ と増 加 傾 向 が 認 め ら れ た（Fig. 2）．こ の 要 因 と し て，
H. cinaediを保有すると考えられるペットを飼う頻度
の増加に加え，医療施設における同定が困難であり，
臨床的な評価が得られず，適切な治療が行われていな いとも考えられる．しかしながら，今回の検討では
H. cinaediが分離された患者のペット飼育歴の有無等
については検討しておらず，今後の更なる検討が必要 と思われる．
血液培養によりH. cinaediが分離された患者の自他 覚症状として，発熱が主症状であり，蜂窩織炎を伴っ ているケースが多いとの報告がされている９）１３）．また，
馬場らは１４），H. cinaediが分離された多くの患者では，
下痢や胃腸炎などの消化器症状が認められることを報 告している．今回対象とした症例の多くは，化学療法 歴がある患者であり，消化器症状は化学療法により誘 発される場合もあり，消化器症状発現の可能性は高い と推測される．しかし，蜂窩織炎を含む皮膚症状が認 められた患者は 17.4％，消化器症状が認められた患者 は 8.70％ であった（Table 2）．これらのことより，H.
cinaediが分離された患者であっても，消化器症状が
認められない場合もあることが示唆された．
化学療法を受けている患者の場合，H. cinaediによ る菌血症治療で，適切な抗菌薬投与により軽快した患 者であっても，菌血症の再燃を繰り返す症例も多く報
告されている１０）１５）．また，これら再燃した症例から分 離されたH. cinaediの levofloxacin に対する MIC が，4 μg!mL から 12μg!mL に上昇した報告や１３），ヒトから 分離され たH. cinaediの 19％ が ciprofloxacin に 耐 性 を示したという報告もされている１）．今回，対象とし た患者の半数以上（56.0％）でH cinaediが繰り返し 分離され，キノロン系抗菌薬の投与歴がある患者から 有意（p＝0.0018）に分離されてい た（Table 4）．H.
cinaediに対する抗菌薬による治療期間は 10 日以内の
短期的な治療より，2〜6 週間の長期的な治療が望ま しいとの報告もされている１３）．これらのことより，H.
cinaediによる感染症治療に有効な抗菌薬の使用方法
の確立が望まれる．
今回の検討では，好気用ボトルで血液培養陽性とな り，BACTEC9050 システムで培養陽性シグナルが得 られるまでの日数は最短 2 日，最長 7 日，平均 4.1 1.60 日であった．また，対象とした 45 株中 10 株において，
血液培養陽性になるまでに 6〜7 日の日数が必要で あった．田中らによれば，全自動血液培養装置で陽性 シグナルが確認された日数は 4〜9 日で，28 株中 10 株が 7 日以上の培養で陽性シグナルが確認されたと報 告している１２）．血液培養を 5 日間で終了する施設も見 受けられるが，H. cinaediの分離では，5 日の培養期 間では陽性シグナルを見過ごす可能性が示唆された．
これらのことより，H. cinaediは発育が遅いため，培 養期間は最低でも 7 日間は必要であり，陽性シグナル を見過ごさないためには，培養延長を行う必要がある ことが明らかとなった．
医療施設での，H. cinaediの分離培養や同定は非常 に困難である１２）．H. cinaediの発育させる条件として，
5〜10％ の高濃度の水素存在下での微好気培養が必要 である．しかしながら，現在，ガスパックシステムで 水素ガスが発生できるものは発売されていない．また，
市販のキットではH. cinaediの同定が困難である．ア ピヘリコ（シスメックス・ビオメリュー）のデータベー スに本菌種は収載されているものの，推定同定の域を 出ないのが実情である１２）．そのため，専門機関での結 果を基にして同定を行う必要がある．しかし，培地上 で特有な集落が認められ，グラム染色所見でもH.
cinaediが疑われる場合には，田中らの報告１２）にある生
物学的性状試験の項目，簡易同定キットの結果を併用 することで，医療施設においても推定的な同定が可能 と考えられる．さらに，適切な抗菌薬治療のために薬 剤感受性試験を実施することも重要であると考える．
これらのことより，H. cinaediの臨床的な評価は未 だ明らかにされていない．しかし，H. cinaediの血液 培養からの検出頻度も増加傾向が認められ，入院期間 の延長や治療期間の延期などに影響を及ぼしている可 能性も否定できない．そのため，医療施設で実施可能 となる迅速な同定方法や有効な治療法の確立が望まれ る．
利益相反自己申告：申告すべきものなし 文 献
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Clinical and Bacteriological Examination in Hospital ofHelicobacter cinaedi(H. cinaedi) Yoko KAWAKAMI１）２）
1)National Hospital Organization Kumamoto Medical Center,2)National Hospital Organization Kyushu Cancer Center The spiral Gram-negative bacteriumHelicobacter cinaedi(H. cinaedi) is usually isolated from immunocom- promized patients, and the number of patients in whomH. cinaediis isolated from their blood culture is in- creasing in Japan. To elucidate why the number of cases is increasing, we tried to analyze separate cases of H. cinaedi.H. cinaediwas isolated from the blood culture of 24 cases, and the isolate was from the pleural ef- fusion of 1 cases between September 2009 and March 2010. In our cases,H. cinaedi was frequently isolated after anticancer chemotherapies (44 isolates) and steroid therapies (42 isolates). The patientsʼ clinical symp- toms were fever (43 isolates), gastrointestinal symptoms (4 isolates）and skin symptoms（8 isolates). In all cases, the H. cinaedi growth was found only in an aerobic bottle, and it needed a long time (2-7 days) to grow. In 14 cases out of 25 cases,H. cinaedibacteremia was recurred. We analyzed recurrent cases statisti- cally. The result showed there was a significant difference between the kinds of quinolones (p＝0.0018). H.
cinaediinfections have a good prognosis, but the infection tends to recur after anticancer chemotherapies. A report has suggested that the minimal inhibitory concentrations of quinolones increased is case of recur- rence, we should pay attention to the use of antibacterial agents. Furthermore, the effective method to eliminate or prevert infection [recurrence] remains unknown. Our results show that H. cinaedi infections may prolong the duration of hospitalization. IfH. cinaediis isolated in a patient, it is necessary to set the cul- ture conditions forH. cinaedi. Furthermore, there is a need for appropiate antibiotic selection and medication forH. cinaedi.
