テリボン皮下注用
56.5 μg
テリパラチド酢酸塩
第
2 部（モジュール 2）
2.6 非臨床試験の概要文及び概要表
(2) 薬物動態
旭化成ファーマ株式会社
2.6(2)項 略号一覧 (1) 略号 省略していない表現
AUC area under the plasma concentration-time curve（血漿中濃度-時間曲線下面積）
AUCall area under the plasma concentration-time curve from the time of dosing to the time of the last observation （最終観察時間までの血漿中濃度-時間曲線下面積）
AUCinf area under the plasma concentration-time curve from the time of dosing extrapolated to infinity （無限大時間までの血漿中濃度-時間曲線下面積）
AUClast area under the plasma concentration-time curve from the time of dosing to the last measurable concentration（濃度測定が可能な最終時点までの血漿中濃度-時間曲線下面積） ALT alanine aminotransferase（アラニンアミノトランスフェラーゼ）
AST aspartate aminotransferase（アスパラギン酸トランスフェラーゼ） BA bioavailability（バイオアベイラビリティ）
BCA bicinchonic acid（ビシンコニン酸）
BSA bovine serum albumin（ウシ血清アルブミン） BUN blood urea nitrogen（血液尿素窒素）
cAMP cyclic adenosine 3',5'-monophosphate（アデノシン 3’,5’-環状一リン酸） CL clearance（全身血漿クリアランス）
CL/F apparent clearance（見かけの全身血漿クリアランス） Cmax maximum plasma concentration（最高血漿中濃度） cpm counts per minute（1 分間あたりの放射線の計測数） CYP cytochrome P450（チトクロム P450）
DMSO dimethylsulfoxide（ジメチルスルホキシド） EC50 50% effective concentration（50%有効濃度）
eGFR estimated glomerular filtration rate（推定糸球体濾過量） ELISA enzyme-linked immunosorbent assay（酵素固定化免疫測定）
HPLC high performance liquid chromatography（高速液体クロマトグラフィー） hr hours（時間）
Ht hematocrit（ヘマトクリット）
IRMA immunoradiometric assay（イムノラジオメトリックアッセイ） kel elimination rate constant（消失速度定数）
LC/MS/MS liquid chromatography-tandem mass spectrometry（液体クロマトグラフィー/タンデム質量 分析）
LDH lactate dehydrogenase（乳酸脱水素酵素） Leu leucine（ロイシン）
min minutes（分）
MRTinf mean residence time extrapolated to infinity （平均滞留時間） n number（例数）
NA not analyzed［測定（または検討）せず］ ND not detected（定量もしくは検出限界以下） OVX ovariectomized（卵巣摘除）
PTH parathyroid hormone（副甲状腺ホルモン）
PTH(1-34) parathyroid hormone 1-34 fragment（副甲状腺ホルモン 1-34 フラグメント） RB ratio of blood to plasma concentration（血液／血漿濃度比）
R2 R-squared（寄与率）
2.6(2)項 略号一覧 (2) 略号 省略していない表現 Vd distribution volume（分布容積） 本薬、本剤 2.6(2) 項において、テリパラチド酢酸塩を示す場合「本薬」、テリパラチド酢酸塩 製剤を示す場合「本剤」と略した。本薬の生物活性単位はテリパラチド酢酸塩の 生物活性単位であり、比活性によってテリパラチド酢酸塩の質量表示に換算可能 である。本薬および本剤200 単位はテリパラチド酢酸塩として 60.6 μg、テリパラ チドとして56.5 μg に相当する。
目次 [2.6(2)－頁] 2.6.4 薬物動態試験の概要文 ... 1 2.6.4.1 まとめ ... 1 2.6.4.1.1 薬物動態試験の概略 ... 1 2.6.4.1.2 吸収 ... 1 2.6.4.1.3 反復投与後の吸収 ... 2 2.6.4.1.4 分布 ... 2 2.6.4.1.5 代謝 ... 3 2.6.4.1.6 排泄 ... 3 2.6.4.1.7 薬物動態学的薬物相互作用 ... 3 2.6.4.1.8 その他の薬物動態試験 ... 3 2.6.4.2 分析法 ... 5 2.6.4.2.1 標識化合物 ... 5 2.6.4.2.2 非標識化合物 ... 8 2.6.4.2.3 血清中抗体価測定法 ... 10 2.6.4.3 吸収 ... 11 2.6.4.3.1 単回投与時の吸収 ... 11 2.6.4.3.2 イヌを用いた製剤間での薬物動態比較... 18 2.6.4.3.3 反復投与時の吸収 ... 19 2.6.4.4 分布 ... 26 2.6.4.4.1 ラット単回投与時の組織内濃度 ... 26 2.6.4.4.2 血漿蛋白結合 ... 27 2.6.4.4.3 血球移行性 ... 28 2.6.4.4.4 胎盤通過性 ... 28 2.6.4.5 代謝 ... 29 2.6.4.5.1 In vitro における代謝 ... 29 2.6.4.5.2 In vivo における代謝 ... 29 2.6.4.5.3 薬物代謝酵素誘導および阻害作用 ... 30 2.6.4.6 排泄 ... 32 2.6.4.6.1 尿中排泄 ... 32 2.6.4.6.2 乳汁中排泄 ... 32 2.6.4.7 薬物動態学的薬物相互作用 ... 32 2.6.4.8 その他の薬物動態試験 ... 33 2.6.4.8.1 腎機能障害モデルラットでの薬物動態... 33 2.6.4.8.2 肝機能障害モデルラットでの薬物動態... 36 2.6.4.9 考察および結論 ... 38 2.6.4.10 図表 ... 39 2.6.4.11 文献一覧 ... 39 2.6.5 薬物動態試験の概要表 ... 41 2.6.5.1 薬物動態試験一覧表 (1) ... 41 2.6.5.2 分析方法およびバリデーション試験 ... 43 2.6.5.3 単回投与後の吸収... 44
2.6.5.3.5 単回投与：製剤間での薬物動態比較 ... 48 2.6.5.4 反復投与後の吸収... 49 2.6.5.4.1 反復投与：ラット ... 49 2.6.5.4.2 反復投与：イヌ（雄性） ... 50 2.6.5.4.3 反復投与：イヌ（雌性） ... 51 2.6.5.5 分布 ... 52 2.6.5.5.1 ラット単回投与時の組織内濃度 ... 52 2.6.5.6 In vitro における血漿蛋白結合 ... 53 2.6.5.7 妊娠または授乳動物における試験 ... 54 2.6.5.7.1 胎盤通過性 ... 54 2.6.5.7.2 乳汁中排泄 ... 54 2.6.5.8 その他の分布試験... 55 2.6.5.8.1 血球移行性 ... 55 2.6.5.9 In vitro における代謝試験 ... 56 2.6.5.10 In vivo における代謝試験 ... 57 2.6.5.11 推定代謝経路 ... 58 2.6.5.12 薬物代謝酵素の誘導／阻害 ... 59 2.6.5.12.1 薬物代謝酵素誘導 ... 59 2.6.5.12.2 薬物代謝酵素阻害 ... 60 2.6.5.13 累積排泄 ... 61 2.6.5.13.1 尿中排泄 ... 61 2.6.5.14 胆汁中排泄 ... 62 2.6.5.15 薬物相互作用 ... 62 2.6.5.16 その他 ... 63 2.6.5.16.1 腎機能障害モデルラットでの薬物動態 ... 63 2.6.5.16.2 肝機能障害モデルラットでの薬物動態 ... 66
2.6.4 薬物動態試験の概要文 2.6.4.1 まとめ 2.6.4.1.1 薬物動態試験の概略 テリパラチド酢酸塩（以下、本薬）の非臨床薬物動態試験では、薬理試験および毒性試験で 用いた動物種であるラット、イヌおよびサルにおける単回投与時および反復投与時の薬物動態 を検討した。 なお、本薬は化学合成されたポリペプチドであるため、本薬の非臨床薬物動態試験について は、「バイオテクノロジー応用医薬品の非臨床における安全性評価について」（平成12 年 2 月22 日付、医薬審発第 326 号）を参照し、低分子医薬品で通常実施される非臨床薬物動態試 験項目の一部（in vitro での血漿蛋白結合および推定代謝経路）については試験を実施しなかっ た。 本薬の投与量はテリパラチド重量で示し、本薬の血漿中および尿中濃度はテリパラチド酢酸 塩濃度として表示した。また、in vitro 代謝、血球移行性、および薬物代謝酵素誘導・阻害試験 の添加濃度は、本薬の血漿中濃度を基に設定したため、テリパラチド酢酸塩濃度として示した。 2.6.4.1.2 吸収 2.6.4.1.2.1 単回投与後の吸収 雌性ラットに本薬1.1、5.6、28.2 μg/kg（4、20 および 100 単位/kg）を単回皮下投与したとこ ろ、本薬の血漿中濃度は、それぞれ投与後18.3、6.67 および 18.3 分で Cmaxに達し、5.6 および 28.2 μg/kg（20 および 100 単位/kg）投与群ではそれぞれ 29.7 および 25.6 分の t1/2で速やかに消
失した後、投与後3 時間には定量下限未満に低下した。CmaxおよびAUCallは投与量に比例して
増大し、28.2 μg/kg（100 単位/kg）まで線形性が認められた。骨粗鬆症モデルである卵巣摘除 ラット（以下、OVX ラット）においても薬物動態に差異は認められなかった。
雌雄のイヌに本薬0.7、1.2、2.8、4.9 および 19.8 μg/kg（2.5、4.4、10、17.5 および 70 単位/kg） を単回皮下投与したところ、投与後25.0～60.0 分で Cmaxに達し、43.6～88.4 分の t1/2で速やか
に消失した。CmaxおよびAUClastは投与量に比例して増大し、0.7～19.8 μg/kg（2.5～70 単位/kg）
の範囲で線形性が認められた。薬物動態に顕著な雌雄差は認められなかった。 雌性サルを用いて静脈内持続投与時と皮下投与時の薬物動態を比較したところ、静脈内持続 投与時のt1/2が11.4 分であったのに対し、皮下投与時の t1/2は約30 分であった。このことから、 本薬は皮下投与時にフリップフロップ現象を示すと考えられた。また、同一用量のAUClastか ら算出されるBA は 81.3%と高値であった。 以上の結果から、皮下投与された本薬の皮下から循環血中への移行は良好かつ速やかであり、 循環血中からの消失もまた速やかであることが推察された。 2.6.4.1.2.2 イヌを用いた製剤間での薬物動態比較 テリパラチド酢酸塩製剤（以下、本剤）は臨床開発過程において、添加剤がD-マンニトー ルから精製白糖・塩化ナトリウムに変更されたことから、D-マンニトール製剤と精製白糖・塩 化ナトリウム製剤をイヌに単回皮下投与し、その薬物動態を比較検討した。その結果、両製剤 の薬物動態パラメータのD-マンニトール製剤に対する精製白糖・塩化ナトリウム製剤の比は、
2.6.4.1.3 反復投与後の吸収 雌性ラットに本薬1.1、5.6、28.2 μg/kg（4、20 および 100 単位/kg）を週 3 回 28 日間皮下投 与し、血漿中濃度を初回投与時のものと比較した。その結果、いずれの投与量においても初回 投与時の薬物動態に比べ大きな差異は認められなかった。 雌雄のイヌに本薬0.7 および 2.8 μg/kg（2.5 および 10 単位/kg）を 1 日 1 回 9 ヵ月間皮下投与 し、血漿中濃度を初回投与時のものと比較したところ、投与3 ヵ月以降は 2.8 μg/kg（10 単位/kg） によりAUC および Cmaxの増大が認められ、0.7 μg/kg（2.5 単位/kg）投与によってもその傾向 が認められたが、2.8 μg/kg（10 単位/kg）投与ほど顕著ではなかった。次いで、雌雄のイヌに 本薬1.2、4.9 および 19.8 μg/kg（4.4、17.5 および 70 単位/kg）を週 1 回、9 ヵ月間皮下投与し、 血漿中濃度を初回投与時のものと比較した。その結果、1.2 μg/kg（4.4 単位/kg）投与では反復 投与による薬物動態の顕著な変動は認められなかったものの、4.9 μg/kg（17.5 単位/kg）、 19.8 μg/kg（70 単位/kg）投与と投与量が増すにつれ、CmaxおよびAUClastは反復投与により増大
する傾向にあった。1 日 1 回投与と週 1 回投与での反復投与による薬物動態の変動を、週当た りの投与量を基準に比較したところ、4.9 μg/kg（17.5 単位/kg）の週 1 回投与の方が 0.7 μg/kg （2.5 単位/kg）の 1 日 1 回投与よりも CmaxおよびAUClastの変動は小さく、同様の傾向が
19.8 μg/kg（70 単位/kg）の週 1 回投与と 2.8 μg/kg（10 単位/kg）の 1 日 1 回投与の比較でも認 められた。 以上の結果から、イヌでは1 日 1 回反復投与により、初回投与と比べて CmaxおよびAUC の 増大といった薬物動態の変動が認められた。しかしながら、イヌの週1 回投与ではその変動幅 は小さく、1.2 μg/kg（4.4 単位/kg）の週 1 回投与では薬物動態の変動は顕著でなかったことか ら、本薬の皮下投与時の薬物動態は、投与量を下げることや投与間隔をあけることで反復投与 による変動が小さくなることが示唆された。 2.6.4.1.4 分布
本薬の125I-標識アミノ酸置換体である[125I]-[Nle8,18,Tyr34]-Parathyroid Hormone 1-34 (h) （以下、
125I-標識体）をラットに単回皮下投与し、肝臓および腎臓への放射能濃度分布を検討した。血 漿についてはHPLC 分析により未変化体濃度を測定し、血漿中未変化体濃度に対する組織中の 総放射能濃度の比を算出した。その結果、肝臓では投与後15 分で血漿の 3.56 倍の総放射能濃 度を示し、腎臓では投与後15 分で血漿の 12.27 倍の総放射能濃度を示した。腎臓は肝臓に比べ 3～4 倍の放射能濃度の分布を示した。ただし、in vitro での代謝の検討から、肝臓および腎臓 に分布した本薬は速やかに代謝されるものと推察され、認められた組織内放射能は分解物に由 来するものと示唆された。 また、125I-標識体をラットに単回皮下投与した際、血漿のゲルろ過クロマトグラムには未変 化体より大きな分子量画分にピークは認められなかった。したがって、本薬は血漿蛋白とはほ とんど結合しないものと示唆された。 ヒト血液を用いた in vitro での検討から、本薬の血球移行率は 37.0%、RBは1.0 であった。す なわち、本薬は、血液中で血球画分／血漿画分によらず、ほぼ均等に分布することが示された。
2.6.4.1.5 代謝 ラット肝臓および腎臓に125I-標識体を添加してホモジナイズを行い、その上清中の代謝物を HPLC 分析により検討した。その結果、125I-標識体は添加直後にホモジネート中にほとんど認 められなかったことから、皮下投与後に肝臓および腎臓に分布した本薬は速やかに低分子の分 解物へと代謝されることが示唆された。 125I-標識体をラットに皮下投与し、血漿中の放射能を HPLC 分析により検討した結果、血漿 中放射能に占める未変化体の割合は投与後15 分には 36.0%、投与後 2 時間には 0.6%と速やか に代謝された。 ヒト肝細胞を用いて、本薬のヒトCYP 分子種に対する酵素誘導および酵素阻害作用を評価 したところ、本薬は3 ng/mL まで、誘導作用（CYP1A2 および CYP3A4）および阻害作用（CYP1A2、 CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6 および CYP3A4）を示さなかった。 2.6.4.1.6 排泄 ラットに本薬113.0 μg/kg（400 単位/kg）を単回皮下投与し、投与後 0～8 時間での尿を採取 し、尿中の本薬濃度を測定したところ、尿中濃度は定量下限未満となり、尿中排泄率は、投与 量に対して0.01%未満となった。したがって、本薬は尿中への未変化体としての排泄がほとん ど認められず、また、本薬のポリペプチドという構造上、胆汁への未変化体の排泄は考えがた いことから、本薬は代謝臓器にてほとんどが分解され、体内から消失するものと推察された。 乳汁中排泄を検討するため、125I-標識体を哺育中ラットに投与した結果、未変化体の乳汁中 への移行は認められなかった。この結果から、本薬は、未変化体として乳汁中に移行しないこ とが示された。 2.6.4.1.7 薬物動態学的薬物相互作用 本薬はポリペプチドであり、in vitro における代謝の検討結果等から、生体内で速やかに分解 を受け、代謝されると推察された。さらに、本薬にはヒトCYP 代謝酵素の阻害および誘導作 用は認められなかったことから、薬物動態学的薬物相互作用を引き起こす可能性は低いと考え られた。 2.6.4.1.8 その他の薬物動態試験 2.6.4.1.8.1 腎機能障害モデルラットでの薬物動態 グリセロールで誘発した腎機能障害モデルラット（以下、急性腎不全モデルラット）および 無処置ラットに、本薬5.6 μg/kg（20 単位/kg）を単回皮下投与し、薬物動態を比較した。その 結果、急性腎不全モデルラットでの血漿中濃度推移は、無処置ラットの血漿中濃度推移に比べ、 tmaxが22.5 分から 52.5 分と遅くなり、t1/2が24.2 分から 66.6 分に延長し、AUCinfが無処置ラッ
トの3.2 倍に増大し、CL/F は約 1/3 に低下した。Cmaxは大きな影響を受けなかった。
腎臓を5/6 摘出したラット（以下、慢性腎不全モデルラット）、無処置ラットおよび偽手術 ラットに、本薬5.6 μg/kg（20 単位/kg）を単回皮下投与し、薬物動態を比較した。その結果、 慢性腎不全モデルラットの薬物動態は、偽手術ラットに比べ、Cmaxは3.1 倍に、AUClastは5.9
2.6.4.1.8.2 肝機能障害モデルラットでの薬物動態 四塩化炭素で誘発した肝機能障害モデルラット（以下、肝障害モデルラット）および媒体投 与ラットに、本薬5.6 μg/kg（20 単位/kg）を単回皮下投与し、薬物動態を比較した。その結果、 肝障害モデルラットの血漿中濃度推移は、媒体投与ラットとほとんど差異は無く、薬物動態パ ラメータも両者でほぼ同様であった。したがって、本薬の薬物動態に肝機能障害はほとんど影 響しないことが示された。
2.6.4.2 分析法 2.6.4.2.1 標識化合物 添付資料番号 4.2.2.1-8～11（参考）, 4.2.2.2-2, 4.2.2.4-1（参考） 2.6.4.2.1.1 経緯 薬物動態試験では、適切な標識化合物を用いると、臓器中の放射能濃度およびオートラジオ グラフィーのデータといった分布試験結果をはじめとする有用な情報を得ることができる。こ のことから、本薬においても標識化合物を得るために、以下の検討を実施した。 まず、[35S] 標識体を得るために、[35S] で標識した を用いた部分合成を実施した が、非標識 で可能であった合成反応が [35S]-標識 で再現されず、標識化 合物が取得できなかった（19 年）。次いで、 を用いた 法によって、本薬の [125 I]-標識化を検討したが、生成物の生物活性が保持されておらず、被験物質として不適切と判断し た（20 年）。次に、 による によって、本薬の [3H] 標識化を検討し たが、生成物が確認されなかった（20 年）。さらに、本薬のアミノ酸配列の 番目の を に置換した を合成し、 との反応 による [3H] 標識化の検討も実施したが、 では可能であった反応が では進行せず、生成物を取得できなかった（20 年）。 つづいて、特定のアミノ酸残基を置換した放射性トレーサーが使用可能か検討するため、 PTH レセプターへの結合活性を有する [125I]-[Nle8,18,Tyr34]-Parathyroid Hormone 1-34 (h) （以下、
125I-標識体）をラットに皮下投与し、血漿中濃度推移を本薬と比較した。その結果、125I-標識体 では血漿中放射能濃度推移が本薬の推移と異なり、t1/2がより大きく延長した。しかしながら、 得られた血漿をHPLC により分析したところ、t1/2の延長は代謝物（分解物）に起因するもの であり、未変化の125I-標識体は本薬と同様、速やかに血漿中より消失していることが判明した （2.6.4.3.1.1 項）。さらに、生物活性も本薬と同等であったことから（表 2.6.4-1）、125I-標識 体を被験物質としてラットにおける分布、代謝および乳汁中排泄試験を実施した。 2.6.4.2.1.2 被験物質 125I-標識体を用いた。本被験物質は PerkinElmer にて合成されたものを購入して使用した。比 放射能は、19.3～20 MBq/μg、放射化学的純度は 96.2%以上であった。125I-標識体の生物活性を、 ヒトPTH1 型受容体を安定発現した SaOS-2 細胞の cAMP 上昇を指標に検討したところ、125 I-標識体は本薬と同等の生物活性を保持していた（表 2.6.4-1）。また、投与の際には必要に応じ て本薬で希釈した。 表 2.6.4-1 125 I-標識体のプロファイル Lot No. 比放射能 (MBq/μg) 放射化学的純度(%) 生物活性EC50 (×10-10 mol/L) a) 添付資料番 号 HPLC TCA 125I-標識体 本薬（対照） KF71090 19.3 96.9～97.0 99.0～99.5 NA NA 4.2.2.2-2 KFB1190 20 NA 96.2～97.9 NA NA 4.2.2.4-1 （参考） KF20500 20 NA 98.0 6.28 7.38 4.2.2.3-1 96.9 7.07 6.99 4.2.2.5-2 NA: 測定（または検討）せず a) ヒト PTH1 型受容体発現細胞での cAMP 上昇作用（2.6.2.3.1.2 項参照）による。
2.6.4.2.1.3 放射能測定法
試料中の放射能の測定は、ガンマーウェルカウンター（AUTOGAMMA5530、PerkinElmer） にて行った。なお、一部の試料については、TCA 処理を行い、未変化体を含む TCA 不溶性画 分と、脱離した125I を含む TCA 可溶性画分に分離し、TCA 不溶性画分の放射能濃度を測定し た。放射能濃度は、125I-標識体当量に換算し、ng eq./mL または ng eq./g で表示した。
2.6.4.2.1.4 HPLC による分析 [1] 分析条件 1 125I-標識体をラットに投与した後に採取した血漿および乳汁、ならびに125I-標識体を添加 して調製したラット血漿、肝臓、腎臓および胎盤ホモジネートを、HPLC カラムを用いて 分画し、各フラクションの放射能を測定した。分析条件は図2.6.4.-1 に示した。HPLC クロ マトグラム上、未変化の125I-標識体が溶出される約 19 分のピーク（図 2.6.4-1）を「未変 化体画分」とし、未変化体の割合を求めた。血漿と乳汁では、その割合から未変化体濃度 を求めた。また、一部の試験では、代謝物画分についても試料中放射能量に対する割合を 算出した。 20,000 40,000 60,000 80,000 100,000 120,000 140,000 160,000 180,000 0 時間（分） 125 I-標識体 c p m /fr a c ti o n 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 図 2.6.4-1 125I-標識体の HPLC クロマトグラム（分析条件 1） 分析条件
カラム: YMC-Pack ODS AM-302、5 m、4.6×150 mm (YMC) 移動相: (A) 0.1%トリフルオロ酢酸水溶液 (B) 0.1%トリフルオロ酢酸･アセトニトリル溶液 グラジエント条件: 時間 (min) 0 5 40 50 B 濃度 (%) 10 10 100 100 流速: 1 mL/min カラム温度: 40°C
[2] 分析条件 2 125I-標識体をラットに投与した後に採取した血漿については、ゲルろ過クロマトグラ フィーによる分子量分布を検討した。分析条件は図2.6.4.-2 に示した。クロマトグラム上で、 未変化体は約19 分をピークとして溶出された（図 2.6.4-2）。 時間（分） 125 I-標識体 20,000 40,000 60,000 80,000 100,000 120,000 0 c p m /f rac ti on 0 5 10 15 20 25 30 図 2.6.4-2 125 I-標識体のゲルろ過クロマトグラム（分析条件 2） 分析条件 カラム: TSKgel G2000SW、7.5×300 mm（東ソー） 移動相: 0.2 mol/L 塩化ナトリウム:アセトニトリル = 9:1 流速: 0.5 mL/min カラム温度: 室温 UV 検出波長: 225 nm 放射能検出: 30 秒ごとに分取した各フラクションの放射能を測定 分析時間: 30 min
2.6.4.2.2 非標識化合物 2.6.4.2.2.1 被験物質 本薬を用いた。ただし、イヌを用いた製剤の薬物動態を比較した試験では該当製剤を使用し た。 2.6.4.2.2.2 定量分析法 2.6.4.2.2.2.1 ELISA 法 添付資料番号 4.2.2.1-1、-2、-7（参考） ラット血漿中および尿中での本薬濃度については、ヒトPTH(1-34) に特異的な 2 種の抗体を 用いたELISA キット（Immutopics 社）を用いて測定した。定量範囲を含むバリデーション試 験結果の概要を表 2.6.4-2 に示した。いずれの結果も基準範囲内で良好であったことから、本 測定系をラットの薬物動態試験の定量法として使用した。一方、上記試料の安定性に関しては 表 2.6.4-2 中の条件下においていずれも安定であることが示され、試料採取時から分析に至る までの過程における本薬の安定性が保証された。また、一部の薬物動態試験ではELISA キット の製品を変更したが、ELISA キット変更に伴うパーシャルバリデーション試験を実施し、製品 の変更に問題がないことを確認した。 なお、濃度はテリパラチド酢酸塩換算濃度として表示した。 表 2.6.4-2 ELISA 法バリデーション試験結果の概要 動物種 ラット マトリクス 血漿 尿 検量線範囲 (ng/mL) 下限 0.040 0.100 上限 1.000 1.000 最低希釈倍数*（倍） 5 10 希釈可能倍数（倍） 200 100 定量下限 (ng/mL) 0.200 1.000 測定内変動 精度 (%) 0.7～3.3 0.2～5.5 真度 (%) −12.0～−5.8 4.6～10.8 測定間変動 精度 (%) 0.7～4.7 2.5～19.1 真度 (%) −12.0～−6.5 6.7～14.1 安定性が 保証された 保存条件 室温 4時間 2時間 冷蔵 24時間 24時間 冷凍** 30日間 4ヵ月 凍結融解 3回 3回 *: マトリクスの影響を受けない希釈倍数 **: 血漿は−20°Cおよび−80°C、尿は−30°C
2.6.4.2.2.2.2 IRMA 法 添付資料番号 4.2.2.1-3～5 イヌおよびサル血漿中での本薬濃度については、ラットPTH の N 端を認識する 2 種の抗体 を用いたIRMA キット（Immutopics 社）を用いて測定した。定量範囲を含むバリデーション試 験結果の概要を表 2.6.4-3 に示した。いずれの結果も基準範囲内で良好であったことから、本 測定系をイヌおよびサルの薬物動態試験の定量法として使用した。一方、上記試料の安定性に 関しては表 2.6.4-3 中の条件下においていずれも安定であることが示され、試料採取時から分 析に至るまでの過程における本薬の安定性が保証された。 なお、濃度はテリパラチド酢酸塩換算濃度として表示した。 表 2.6.4-3 IRMA 法バリデーション試験結果の概要 動物種 イヌ サル マトリクス 血漿 血漿 検量線範囲 (ng/mL) 下限 0.010 0.0086 上限 1.000 0.8612 最低希釈倍数*（倍） 1 1 希釈可能倍数（倍） 20 20 定量下限 (ng/mL) 0.010 0.0086 測定内変動 精度 (%) 1.0～7.9 0.0～1.3 真度 (%) −6.7～5.6 −7.6～3.1 測定間変動 精度 (%) 1.0～9.0 2.7～8.2 真度 (%) −5.4～4.5 −1.2～6.5 安定性が 保証された 保存条件 室温 4 時間 4 時間 冷蔵 24 時間 24 時間 冷凍** 30 日間 90 日間 凍結融解 3 回 3 回 *: マトリクスの影響を受けない希釈倍数 **: −20°C および−80°C 定量限界は、検量線範囲と希釈倍数の積により定められる。
2.6.4.2.3 血清中抗体価測定法 添付資料番号 4.2.2.1-6 本薬に対する血清中抗体価の測定は、イヌの反復投与毒性試験にて実施した。測定系は、ウ サギの抗 PTH(1-34) 抗体を標準品として用い、抗原と酵素標識したプロテイン A を組み合わ せた測定法を用いた。標準品の検量線より算出された投与前血清の抗体価に対して、反復投与 後血清の抗体価が2 倍以上になった場合を陽性と判断した。定量範囲を含むバリデーション試 験結果の概要を表 2.6.4-4 に示した。いずれの結果も基準範囲内で良好であったことから、本 測定系をイヌの血清中抗体価測定法として使用した。一方、上記試料の安定性に関しては表 2.6.4-4 中の条件下においていずれも安定であることが示され、試料採取時から分析に至るまで の過程における安定性が保証された。 表 2.6.4-4 血清中抗体価測定法のバリデーション試験結果の概要 動物種 イヌ マトリクス 血清 検 量 線 範 囲 (ng/mL) 下限 100 上限 5,000 最低希釈倍数*（倍） 100 希釈可能倍数（倍） 5,000 定量下限 (ng/mL) 10,000 測定内変動 精度 (%) 1.7～4.9 真度 (%) −17.1～−6.5 測定間変動 精度 (%) 2.4～9.2 真度 (%) −14.6～3.5 安定性が 保証された 保存条件 室温 4 時間 冷蔵 24 時間 冷凍** 60 日間 凍結融解 3 回 *: マトリクスの影響を受けない希釈倍数 **: −20°C および−80°C 定量限界は、検量線範囲と希釈倍数の積により定められる。
2.6.4.3 吸収 2.6.4.3.1 単回投与時の吸収 2.6.4.3.1.1 ラット 添付資料番号 4.2.2.2-1, -2, -4 雌性SD 系ラット（投与開始時 15 週齢）（以下、健常ラット）および骨粗鬆症モデルである OVX ラット（同系同週齢）に、本薬 1.1、5.6 および 28.2 μg/kg（4、20 および 100 単位/kg）を 週3 回、28 日間皮下投与し、血漿中の本薬濃度を測定した。初回投与時の血漿中濃度推移を図 2.6.4-3 に、ノンコンパートメントモデルにて解析した薬物動態パラメータを表 2.6.4-5 に示し た。 健常ラットに本薬1.1 μg/kg（4 単位/kg）を初回皮下投与した際、血漿中濃度は、tmax; 18.3 分 でCmax; 0.285 ng/mL に達し、投与後 1 時間には定量下限未満となった。一方、5.6 μg/kg（20 単 位/kg）を皮下投与した際の血漿中濃度は、tmax; 6.67 分で Cmax; 1.500 ng/mL に達し、t1/2; 29.7 分 で消失した。28.2 μg/kg（100 単位/kg）を皮下投与した際の血漿中濃度は、tmax; 18.3 分で Cmax; 6.230
ng/mL に達し、t1/2; 25.6 分で消失した。CmaxおよびAUCallは投与量に比例して増加し、線形性
が認められた（図 2.6.4-4）。
OVX ラットの初回投与時の薬物動態は、いずれの投与量においても健常ラットの初回投与 時の薬物動態に比べ大きな差は認められず、卵巣摘除による薬物動態への影響は無いものと考 えられた。また、CmaxおよびAUCallには線形性が認められた（図 2.6.4-4）。
以上の結果から、ラットにおける本薬の薬物動態は、皮下より速やかに循環血中に移行した 後、速やかに消失することが示され、1.1～28.2 μg/kg（4～100 単位/kg）の用量範囲で線形性が 認められた。また、OVX ラットの薬物動態と健常ラットの薬物動態に差異は認められなかっ た。 0.1 1.0 10.0 0 20 40 60 80 100 120 投与後時間（分） 血漿中濃度 ( ng/ m L ) 4単位/kg (健常) 20単位/kg (健常) 100単位/kg (健常) 4単位/kg (OVX) 20単位/kg (OVX) 100単位/kg (OVX) 図 2.6.4-3 雌性健常ラットおよび OVX ラットに本薬を週 3 回 28 日間 皮下投与した際の初回投与時の血漿中濃度推移 平均値 + 標準偏差、n = 3
表 2.6.4-5 雌性健常ラット (a) および OVX ラット (b) に本薬を週 3 回 28 日間 皮下投与した際の初回投与時の薬物動態パラメータ (a) 健常ラット 投与量 （単位/kg） 4 20 100 kel (/min) -* 0.0234 ± 0.0016 0.0311 ± 0.0155 t1/2 (min) -* 29.7 ± 2.1 25.6 ± 10.1 tmax (min) 18.3 ± 10.4 6.67 ± 2.89 18.3 ± 10.4 Cmax (ng/mL) 0.285 ± 0.027 1.500 ± 0.170 6.230 ± 3.950
AUClast (ng·min/mL) 9.90 ± 5.28 62.1 ± 1.7 365 ± 256
AUCinf (ng·min/mL) -* 76.7 ± 3.6 386 ± 268
AUCall (ng·min/mL) 13.4 ± 5.4 67.2 ± 0.1 377 ± 265
CL/F (mL/min/kg) -* 79.2 ± 3.7 148 ± 155 MRTinf (min) -* 42.6 ± 3.4 43.2 ± 9.5 (b) OVX ラット 投与量 （単位/kg） 4 20 100 kel (/min) -* 0.0263 ± 0.0092 0.0338 ± 0.0005 t1/2 (min) -* 28.3 ± 8.3 20.5 ± 0.3 tmax (min) 13.3 ± 2.9 5.00 ± 0.00 15.0 ± 0.0 Cmax (ng/mL) 0.264 ± 0.027 1.300 ± 0.120 7.090 ± 1.910
AUClast (ng·min/mL) 11.3 ± 4.4 55.5 ± 29.7 397 ± 151
AUCinf (ng·min/mL) -* 66.8 ± 28.2 406 ± 148
AUCall (ng·min/mL) 14.5 ± 4.2 60.1 ± 27.4 404 ± 152
CL/F (mL/min/kg) -* 107 ± 58 84.1 ± 38.9 MRTinf (min) -* 40.9 ± 9.5 36.0 ± 2.6
平均値 ± 標準偏差、n = 3
4 単位は 1.1 μg、20 単位は 5.6 μg、100 単位は 28.2 μg のテリパラチドに相当する。 *: 消失相において定量下限未満となったため、採用しなかった。
図 2.6.4-4 雌性健常ラットおよび OVX ラットに本薬 4～100 単位/kg を皮下投与した際の 初回投与時の Cmax (a) および AUCall (b) と投与量の相関性
平均値 ± 標準偏差、n = 3 回帰式は原点を通る一次式にて作成した。 4 単位は 1.1 μg、20 単位は 5.6 μg、100 単位は 28.2 μg のテリパラチドに相当する。 つづいて、125I-標識体を雌性 SD 系ラット（投与時 11～12 週齢）に単回皮下投与した際の血 漿中濃度推移を検討した。125I-標識体を本薬と共に 5.6 μg/kg（20 単位/kg）で雌性ラットに単回 皮下投与し、血漿中の本薬濃度（ELISA 法）と、総放射能濃度および TCA 不溶性画分の放射 能濃度を測定した。さらに、投与後15 分、2 時間および 6 時間の血漿検体について HPLC 分析 （分析条件1；2.6.4.2.1.4 項）を行い、総放射能に占める未変化体の割合を求めた。
その結果、125I-標識体の血漿中総放射能濃度は、投与後 2 時間に Cmax; 13.2957 ng eq./mL を示
した後、t1/2; 403 分で消失した。TCA 不溶性画分中放射能濃度は総放射能濃度より低い濃度で 推移した。一方、本薬の血漿中濃度は、投与後15 分に Cmax; 2.4269 ng/mL を示したのち、t1/2; 31.4 分で消失し、投与後4 時間で定量下限未満となった［図 2.6.4-5 (a)］。HPLC 分析の結果、投 与後15 分の血漿中には未変化体画分（約 19 分、図 2.6.4-1）に放射性ピークが 23.9%認められ た。他に溶出時間2 分前後に試料中放射能の 50.0%、12 分前後に 15.7%、18 分前後に 4.3%検 出された。投与後2 時間および 6 時間では、いずれも溶出時間 2 分前後に放射性ピークが認め られたのみであった［図 2.6.4-5 (b)］。この未変化体の割合から、未変化の125I-標識体の血漿 中濃度推移を求めると、本薬の血漿中濃度推移と類似した速やかな消失を示す結果が得られた。 健常ラット y = 0.0628x R2 = 0.9968 0 2 4 6 8 10 0 20 40 60 80 100 投与量（単位/kg） C ma x (n g /m L ) OVX ラット y = 0.0707x R2 = 0.9995 0 2 4 6 8 10 0 20 40 60 80 100 投与量（単位/kg） C ma x ( ng/ m L ) 健常ラット y = 3.7536x R2 = 0.9991 0 200 400 600 800 0 20 40 60 80 100 投与量（単位/kg） AU C al l (n g ·m in /m L ) .. . OVX ラット y = 3.9996x R2 = 0.9954 0 200 400 600 800 0 20 40 60 80 100 投与量（単位/kg） AU C al l ( ng· m in/ m L ) .. (a) Cmax (b) AUCall
すなわち、投与後15 分の未変化の125I-標識体濃度は 1.8707 ng eq./mL となり、投与後 2 時間お よび6 時間では未変化の125I-標識体は血漿中に認められなかった。 したがって、皮下投与された125I-標識体は生体内で速やかに代謝を受け、[125I]-チロシンなど に経時的に低分子化されるものと考えられ、未変化の125I-標識体の血漿中濃度推移は本薬と類 似していることが示された。 図 2.6.4-5 ラットに125 I-標識体を単回皮下投与した際の血漿中濃度推移 (a) と HPLC クロマトグラム (b) (a) 平均値 + 標準偏差、n = 3、(b) 矢印は未変化体画分を示す。 2.6.4.3.1.2 イヌ 添付資料番号 4.2.2.2-4, 4.2.3.2-5 雌雄のビーグルイヌ（投与開始時 7～8 ヵ月齢）に本薬を 1 日 1 回および週 1 回、9 ヵ月間 皮下投与し、血漿中の本薬濃度を測定した。1 日 1 回投与群の投与量は公比 4 で、0.7 および 2.8μg/kg（2.5 および 10 単位/kg）とし、週 1 回投与群は、1 日 1 回の投与量の 7 倍に相当する 4.9 および 19.8μg/kg（17.5 および 70 単位/kg）をそれぞれ投与した。さらに、週 1 回投与群に は、低用量群として公比4 で 1.2μg/kg（4.4 単位/kg）投与群を加えた。初回投与時の血漿中濃 度推移を図 2.6.4-6 に、ノンコンパートメントモデルにて解析した薬物動態パラメータを表 2.6.4-6 に示した。イヌに初回皮下投与した際の本薬の血漿中濃度推移は、投与後 1 時間以内 （25.0～60.0 分）に Cmaxに到達し、t1/2; 43.6～88.4 分で消失した。顕著な雌雄差は認められな
かった。CmaxおよびAUClastは投与量に比例して増加し、0.7～19.8μg/kg（2.5～70 単位/kg）で
線形性が認められた（図 2.6.4-7）。 0.1 1.0 10.0 100.0 0 6 12 18 24 投与後時間（時間） 本薬あ る い は 12 5 I-標識体 血漿中 濃度 (n g /m L ある いは ng e q ./m L ) (a) 血漿中濃度推移 (b) HPLC クロマトグラム 125I-標識体；総放射能 125 I-標識体；TCA不溶性画分 本薬 0 10 20 30 40 50 時間（分） 0 10 20 30 40 50 投与後6時間 投与後2時間 投与後15分 0 1,000 2,000 3,000 4,000 5,000 c p m /f rac ti on 0 500 1,000 1,500 2,000 2,500 c p m /fr a c ti o n 0 10 20 30 40 50 0 1,000 2,000 3,000 4,000 5,000 c p m /fr a c ti o n
(a) 雄性イヌ 0.00 0.01 0.10 1.00 10.00 0 60 120 180 240 投与後時間（分） 血 漿中濃度 (n g /m L ) 2.5単位/kg 4.4単位/kg 10単位/kg 17.5単位/kg 70単位/kg (b) 雌性イヌ 0.00 0.01 0.10 1.00 10.00 0 60 120 180 240 投与後時間（分） 血漿中濃度 (n g /m L ) 図 2.6.4-6 イヌに本薬を 1 日 1 回および週 1 回 9 ヵ月間皮下投与した際の初回投与時の 血漿中濃度推移 平均値 + 標準偏差、n = 3（70 単位/kg 投与群のみ n = 5） 2.5 単位は 0.7 μg、4.4 単位は 1.2 μg、10 単位は 2.8 μg、17.5 単位は 4.9 μg、70 単位は 19.8 μg のテ リパラチドに相当する。 (a) Cmax y = 0.0882x R2 = 0.9875 0 2 4 6 8 10 0 20 40 60 80 投与量（単位/kg） C ma x ( ng/ m L ) (b) AUClast y = 8.7176x R2 = 0.9792 0 200 400 600 800 1,000 0 20 40 60 80 投与量（単位/kg） AU C la s t ( ng· m in/ m L ) 図 2.6.4-7 イヌに本薬 2.5～70 単位/kg を皮下投与した際の初回投与時の Cmaxおよび AUClastと投与量の相関性 平均値 ± 標準偏差、n = 3（70 単位/kg 投与群のみ n = 5） 回帰式は原点を通る一次式にて作成した。 2.5 単位は 0.7 μg、4.4 単位は 1.2 μg、10 単位は 2.8 μg、17.5 単位は 4.9 μg、70 単位は 19.8 μg のテリパラチドに相当する。
表 2.6.4-6 イヌに本薬を 1 日 1 回および週 1 回 9 ヵ月間皮下投与した際の初回投与時の 薬物動態パラメータ (a) 雄性イヌ 投与量（単位/kg） 2.5 4.4 10 17.5 70 t1/2 (min) 49.5 ± 7.8 57.1 ± 11.4 58.8 ± 2.4 51.1 ± 9.0 46.8 ± 7.0 tmax (min) 40.0 ± 17.3 50.0 ± 17.3 40.0 ± 17.3 40.0 ± 17.3 36.0 ± 13.4 Cmax (ng/mL) 0.2557 ± 0.0267 0.3984 ± 0.0437 0.6931 ± 0.0837 1.3671 ± 0.3419 6.7401 ± 1.7410 AUClast (ng·min/mL) 25.6 ± 2.5 50.6 ± 3.3 84.4 ± 8.4 137.0 ± 14.8 677.8 ± 129.2 AUCinf (ng·min/mL) 26.9 ± 1.7 54.0 ± 5.2 89.9 ± 8.0 143.5 ± 11.7 701.6 ± 123.2
(b) 雌性イヌ 投与量（単位/kg） 2.5 4.4 10 17.5 70 t1/2 (min) 88.4 ± 28.5 43.6 ± 7.5 47.8 ± 12.1 50.4 ± 11.0 50.0 ± 7.1 tmax (min) 30.0 ± 0.0 40.0 ± 17.3 60.0 ± 0.0 25.0 ± 8.7 30.0 ± 0.0 Cmax (ng/mL) 0.2321 ± 0.0259 0.4599 ± 0.0438 0.9098 ± 0.2439 1.4346 ± 0.2280 5.6986 ± 1.4516 AUClast (ng·min/mL) 31.8 ± 3.2 48.0 ± 5.6 106.9 ± 41.1 125.6 ± 29.8 549.0 ± 127.5 AUCinf (ng·min/mL) 36.7 ± 5.0 49.3 ± 6.2 111.3 ± 38.2 131.2 ± 33.5 575.3 ± 134.0
平均値 ± 標準偏差、n = 3（70 単位/kg 投与群のみ n = 5） 2.5 単位は 0.7 μg、4.4 単位は 1.2 μg、10 単位は 2.8 μg、17.5 単位は 4.9 μg、70 単位は 19.8 μg のテリパラチドに相 当する。 2.6.4.3.1.3 サル 添付資料番号 4.2.2.2-3 雌性カニクイザル（投与時6～7 歳）に本薬 0.56μg/kg（2 単位/kg）を 10 分間単回静脈内持 続投与、ならびに0.56 および 5.6μg/kg（2 および 20 単位/kg）を単回皮下投与し、血漿中の本 薬濃度を測定すると共に、薬物動態パラメータをノンコンパートメントモデルにて解析した。 サルに10 分間静脈内持続投与した際、本薬の血漿中濃度は投与終了時にかけて上昇し、Cmax; 1.4048 ng/mL に達した後、t1/2; 11.4 分で速やかに消失した。0.56 および 5.6μg/kg（2 および 20 単位/kg）を皮下投与した際、本薬の血漿中濃度は、それぞれ投与後 30.0 および 21.0 分で Cmax; 0.1898 および 2.5976 ng/mL に達した後、t1/2; 32.0 および 30.5 分で消失した（図 2.6.4-8、表 2.6.4-7）。皮下投与時の Cmax およびAUC は投与量に伴い増加した。 皮下投与時のt1/2は静脈内持続投与時のt1/2と比較して緩やかであり、本薬は皮下投与時にフ リップフロップ現象を示すと考えられた。0.56μg/kg（2 単位/kg）投与時の AUClastより算出さ れるBA は 81.3%であり、皮下から循環血中への吸収は良好であることが示された。
0.01 0.10 1.00 10.00 0 30 60 90 120 投与後時間（分） 血漿 中濃 度 ( ng/ m L ) 静脈内持続投与（2単位/kg） 皮下投与（2単位/kg） 皮下投与（20単位/kg） 図 2.6.4-8 サルに本薬を単回皮下および静脈内持続投与した際の血漿中濃度推移 平均値 + 標準偏差、n = 5 2 単位は 0.56 μg、20 単位/kg は 5.6 μg のテリパラチドに相当する。 表 2.6.4-7 サルに本薬を単回皮下および静脈内持続投与した際の薬物動態パラメータ 投与量 2 単位/kg 2 単位/kg 20 単位/kg 用法 静脈内持続 皮下 皮下 t1/2 (min) 11.4 ± 6.6 32.0 ± 3.1 30.5 ± 3.2 tmax (min) 8.0 ± 2.7 30.0 ± 10.6 21.0 ± 8.2 Cmax (ng/mL) 1.4048 ± 0.3824 0.1898 ± 0.0523 2.5976 ± 0.9052
AUClast (ng·min/mL) 15.3 ± 5.4 11.9 ± 4.5 164.9 ± 48.7
AUCinf (ng·min/mL) 15.9 ± 5.5 13.5 ± 4.7 176.6 ± 49.5
Vd (mL/kg) 634.0 ± 332.0 -* -* CL** (mL/min/kg) 41.8 ± 15.0 48.5 ± 15.2 36.4 ± 10.9 MRTinf (min) 7.1 ± 2.8 59.1 ± 4.9 56.6 ± 5.6 BA (%) -* 81.3 ± 31.2 -*** 平均値 ± 標準偏差、n = 5 *: 該当せず、**: 皮下投与時は CL/F、***: 算出せず 2 単位は 0.56 μg、20 単位/kg は 5.6 μg のテリパラチドに相当する。
2.6.4.3.2 イヌを用いた製剤間での薬物動態比較 添付資料番号 4.2.2.2-5（参考） 本剤の臨床開発過程において、本剤に含まれる添加剤がD-マンニトールから精製白糖・塩 化ナトリウムに変更された。臨床開発初期においてはD-マンニトールを用いた製剤（以下、 D-マンニトール製剤）を臨床試験に供していたが、19 年 月以降は一部の臨床試験を除いて、 より保存安定性に優れた精製白糖・塩化ナトリウムを添加剤とした製剤（以下、精製白糖・塩 化ナトリウム製剤）を用いて、検証試験を含む主要な臨床試験を実施した（2.7.1.1.1 項）。 そこで、精製白糖・塩化ナトリウム製剤とD-マンニトール製剤の薬物動態を、雄性ビーグ ルイヌ（投与時約16 ヵ月齢）を用いて 3 頭のクロスオーバー試験で比較検討した。イヌに 28.2μg （100 単位）製剤を単回皮下投与し、血漿中の本薬濃度を経時的に測定した。その結果、両製 剤の血漿中濃度推移に差異はなく（図 2.6.4-9）、薬物動態パラメータの D-マンニトール製剤 に対する精製白糖・塩化ナトリウム製剤の比は、tmaxを除き、6 頭平均 100～104%と、薬物動 態学的に同一プロファイルを示した（表 2.6.4-8）。 0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 1.4 0 30 60 90 120 150 180 210 240 270 投与後時間（分） 血漿中濃度 ( ng/ m L) .. . D-マンニトール製剤 精製白糖・塩化ナトリウム製剤 図 2.6.4-9 イヌに 100 単位製剤を単回皮下投与した際の製剤間での比較－血漿中濃度推移－ 平均値 + 標準偏差、n = 6、1 群 3 頭のクロスオーバー 100 単位は 28.2 μg のテリパラチドに相当する。 表 2.6.4-8 イヌに 100 単位製剤を単回皮下投与した際の製剤間での比較 －薬物動態パラメータ－ D-マンニトール 製剤 精製白糖・ 塩化ナトリウム製剤 比 (%)* t1/2 (min) 30.6 ± 3.8 31.4 ± 7.3 104 ± 24 tmax (min) 30.0 ± 0.0 23.3 ± 5.2 78 ± 17 Cmax (ng/mL) 1.01 ± 0.13 1.02 ± 0.29 101 ± 26
2.6.4.3.3 反復投与時の吸収 2.6.4.3.3.1 ラット 添付資料番号 4.2.2.2-1 雌性SD 系ラット（投与開始時 15 週齢）（以下、健常ラット）およびOVX ラットに本薬 1.1、 5.6 および 28.2 μg/kg（4、20 および 100 単位/kg）を週 3 回 28 日間皮下投与し、血漿中の本薬 濃度を測定した。最終投与時の血漿中濃度を初回投与時のものと比較した（図 2.6.4-10）。ま た、薬物動態パラメータをノンコンパートメントモデルにて解析した結果を表 2.6.4-9 に示し た。 その結果、健常ラット、OVX ラット共に、初回投与時の薬物動態（2.6.4.3.1.1 項）に比べ大 きな差は認められず、反復投与による薬物動態への影響は小さいものと考えられた。 (a) 健常ラット 0.1 1.0 10.0 0 30 60 90 120 投与後時間（分） 血漿中濃 度 ( ng/ m L ) .. . 4単位/kg；初回 20単位/kg；初回 100単位/kg；初回 4単位/kg；最終 20単位/kg；最終 100単位/kg；最終 (b) OVX ラット 0.1 1.0 10.0 0 30 60 90 120 投与後時間（分） 血漿 中濃度 ( ng/ m L ) .. . 4単位/kg；初回 20単位/kg；初回 100単位/kg；初回 4単位/kg；最終 20単位/kg；最終 100単位/kg；最終 図 2.6.4-10 健常ラット (a) および OVX ラット (b) に本薬を週 3 回 28 日間 皮下投与した後の血漿中濃度推移 平均値 + 標準偏差、n = 3 4 単位は 1.1 μg、20 単位は 5.6 μg、100 単位は 28.2 μg のテリパラチドに相当する。
表 2.6.4-9 健常ラット (a) および OVX ラット (b) に本薬を週 3 回 28 日間 皮下投与した後の薬物動態パラメータ (a) 健常ラット 投与量 （単位/kg） 4 20 100 kel (/min) -* 0.0302 ± 0.0043 0.0409 ± 0.0018 t1/2 (min) -* 23.3 ± 3.1 17.0 ± 0.8 tmax (min) 18.3 ± 10.4 15.0 ± 13.2 20.0 ± 8.7 Cmax (ng/mL) 0.274 ± 0.035 1.920 ± 0.970 7.660 ± 1.590 AUClast (ng·min/mL) 14.1 ± 1.4 87.7 ± 71.6 351 ± 113 AUCinf (ng·min/mL) -* 101 ± 76 359 ± 111 AUCall (ng·min/mL) 17.3 ± 1.5 93.6 ± 72.0 357 ± 113 CL/F (mL/min/kg) -* 95.0 ± 77.5 91.3 ± 33.7 MRTinf (min) -* 38.5 ± 7.4 30.9 ± 4.7 (b) OVX ラット 投与量 （単位/kg） 4 20 100 kel (/min) -* 0.0240 ± 0.0013 0.0349 ± 0.0017 t1/2 (min) -* 29.0 ± 1.6 19.9 ± 0.9 tmax (min) 18.3 ± 10.4 13.3 ± 2.9 15.0 ± 0.0 Cmax (ng/mL) 0.247 ± 0.008 1.800 ± 0.370 6.630 ± 0.880 AUClast (ng·min/mL) 10.5 ± 3.6 98.8 ± 25.5 312 ± 43 AUCinf (ng·min/mL) -* 109 ± 26 321 ± 41 AUCall (ng·min/mL) 13.5 ± 3.6 103 ± 27 319 ± 44 CL/F (mL/min/kg) -* 58.2 ± 15.9 95.6 ± 12.9 MRTinf (min) -* 44.8 ± 2.3 33.3 ± 3.8
平均値 ± 標準偏差、n = 3
4 単位は 1.1 μg、20 単位は 5.6 μg、100 単位は 28.2 μg のテリパラチドに相当する。 *: 消失相において定量下限未満となったため、採用しなかった。
2.6.4.3.3.2 イヌ
添付資料番号 4.2.2.2-4, 4.2.3.2-5 雌雄のビーグルイヌ（投与開始時 7～8 ヵ月齢）に本薬 0.7 および 2.8μg/kg（2.5 および 10 単位/kg）を 1 日 1 回 9 ヵ月間皮下投与し、血漿中の本薬濃度を初回投与時のものと比較した。 薬物動態パラメータはノンコンパートメントモデルにて解析した。その結果、2.8μg/kg（10 単 位/kg）の 1 日 1 回投与によって 3 ヵ月以降、CmaxおよびAUClastの増大が認められた。0.7μg/kg
（2.5 単位/kg）の 1 日 1 回投与でもその傾向は認められたが、2.8μg/kg（10 単位/kg）投与ほど 薬物動態の変動が顕著ではなかった［図 2.6.4-11 (a) (b)、表 2.6.4-10 (a) (b)］。
次いで、雌雄のイヌに本薬1.2、4.9 および 19.8μg/kg（4.4、17.5 および 70 単位/kg）を週 1 回、9 ヵ月間皮下投与し、血漿中濃度を初回投与時のものと比較した。その結果、1.2μg/kg（4.4 単位/kg）投与では反復投与による薬物動態の変動は顕著に認められなかったものの、4.9μg/kg （17.5 単位/kg）、19.8μg/kg（70 単位/kg）投与と投与量が増すにつれ、CmaxおよびAUClastは
反復投与により増大する傾向にあった［図 2.6.4-11 (c)～(e)、表 2.6.4-10 (c)～(e)］。
そこで、反復投与による薬物動態の変動を投与頻度から考察するため、週当たりの投与量を 基準に1 日 1 回投与と週 1 回投与での薬物動態を比較した。すなわち、0.7μg/kg（2.5 単位/kg） 1 日 1 回投与時の CmaxおよびAUClastを7 倍し、0.7μg/kg（2.5 単位/kg）の 7 倍に相当する 4.9μg/kg
（17.5 単位/kg）週 1 回投与時の CmaxおよびAUClastと比較した。同様に、2.8μg/kg（10 単位/kg）
1 日 1 回投与と 19.8μg/kg（70 単位/kg）週 1 回投与を比較した。その結果、4.9μg/kg（17.5 単 位/kg）週 1 回投与の方が 0.7μg/kg（2.5 単位/kg）1 日 1 回投与よりも CmaxおよびAUClastの反
復投与による変動は小さく、同様の傾向が19.8μg/kg（70 単位/kg）週 1 回投与と 2.8μg/kg（10 単位/kg）1 日 1 回投与の比較でも認められた（図 2.6.4-12）。なお、抗体価は全例で陰性であっ た。
以上の結果から、イヌに本薬を反復皮下投与した際、CmaxおよびAUClastの増大といった変
動が、1 日 1 回 2.8μg/kg（10 単位/kg）投与で顕著に認められた。しかしながら、週 1 回 19.8μg/kg （70 単位/kg）投与や 1 日 1 回 0.7μg/kg（2.5 単位/kg）投与では変動幅が小さかった。すなわち、 本薬の皮下投与の薬物動態は、投与量を下げることや投与間隔をあけることで反復投与による 変動が小さくなることが示唆された。
(a) 2.5単位/kg、1日1回 0.00 0.01 0.10 1.00 10.00 0 60 120 180 240 300 投与後時間（分） 血漿中濃度 (n g /m L ) .. (c) 4.4単位/kg、週1回 0.00 0.01 0.10 1.00 10.00 0 60 120 180 240 300 投与後時間（分） 血漿 中濃度 (n g /m L ) .. (d) 17.5単位/kg、週1回 0.00 0.01 0.10 1.00 10.00 0 60 120 180 240 300 投与後時間（分） 血漿中濃度 (n g /m L ) .. (e) 70単位/kg、週1回 0.00 0.01 0.10 1.00 10.00 0 60 120 180 240 300 投与後時間（分） 血 漿中濃度 (n g /m L ) .. 初回, 雄 初回, 雌 3ヵ月, 雄 3ヵ月, 雌 9ヵ月, 雄 9ヵ月, 雌 (b) 10単位/kg、1日1回 0.00 0.01 0.10 1.00 10.00 0 60 120 180 240 300 投与後時間（分） 血 漿中濃度 (n g /m L ) ..
表 2.6.4-10 イヌに本薬を 1 日 1 回および週 1 回 9 ヵ月間皮下投与した際の 薬物動態パラメータ (1) (a) 2.5 単位/kg、1 日 1 回 初回 3 ヵ月 9 ヵ月 雄 t1/2 (min) 49.5 ± 7.8 187.5 ± 132.9 78.7 ± 14.7 tmax (min) 40.0 ± 17.3 50.0 ± 17.3 40.0 ± 17.3 Cmax (ng/mL) 0.2557 ± 0.0267 0.2828 ± 0.0725 0.3151 ± 0.0133
AUClast (ng·min/mL) 25.6 ± 2.5 48.7 ± 21.0 40.4 ± 2.7
AUCinf (ng·min/mL) 26.9 ± 1.7 94.6 ± 80.0 47.1 ± 6.5
雌 t1/2 (min) 88.4 ± 28.5 58.4 ± 7.6 50.8 ± 4.7
tmax (min) 30.0 ± 0.0 30.0 ± 0.0 20.0 ± 8.7
Cmax (ng/mL) 0.2321 ± 0.0259 0.3096 ± 0.0242 0.3721 ± 0.0994
AUClast (ng·min/mL) 31.8 ± 3.2 30.1 ± 3.5 33.5 ± 9.8
AUCinf (ng·min/mL) 36.7 ± 5.0 32.4 ± 4.5 34.8 ± 9.9
(b) 10 単位/kg、1 日 1 回
初回 3 ヵ月 9 ヵ月
雄 t1/2 (min) 58.8 ± 2.4 60.9 ± 32.1 54.3 ± 24.9
tmax (min) 40.0 ± 17.3 60.0 ± 52.0 80.0 ± 34.6
Cmax (ng/mL) 0.6931 ± 0.0837 1.9179 ± 1.8043 2.5645 ± 1.8268
AUClast (ng·min/mL) 84.4 ± 8.4 291.1 ± 324.7 411.2 ± 359.3
AUCinf (ng·min/mL) 89.9 ± 8.0 302.2 ± 318.8 425.7 ± 356.0
雌 t1/2 (min) 47.8 ± 12.1 52.4 ± 11.8 58.4 ± 7.9
tmax (min) 60.0 ± 0.0 50.0 ± 17.3 30.0 ± 0.0
Cmax (ng/mL) 0.9098 ± 0.2439 3.8866 ± 2.3000 3.1654 ± 3.8417
AUClast (ng·min/mL) 106.9 ± 41.1 590.0 ± 396.2 464.1 ± 649.1
AUCinf (ng·min/mL) 111.3 ± 38.2 605.4 ± 397.6 487.8 ± 682.1 平均値 ± 標準偏差、n = 3（70 単位/kg 投与群のみ n = 5）
2.5 単位は 0.7 μg、4.4 単位は 1.2 μg、10 単位は 2.8 μg、17.5 単位は 4.9 μg、70 単位は 19.8 μg のテリパラチドに 相当する。
表 2.6.4-10 イヌに本薬を 1 日 1 回および週 1 回 9 ヵ月間皮下投与した際の 薬物動態パラメータ (2) (c) 4.4 単位/kg、週 1 回 初回 3 ヵ月 9 ヵ月 雄 t1/2 (min) 57.1 ± 11.4 60.0 ± 10.8 56.1 ± 7.4 tmax (min) 50.0 ± 17.3 40.0 ± 17.3 50.0 ± 17.3 Cmax (ng/mL) 0.3984 ± 0.0437 0.4682 ± 0.0792 0.5154 ± 0.0613 AUClast (ng·min/mL) 50.6 ± 3.3 53.2 ± 8.9 61.3 ± 6.4 AUCinf (ng·min/mL) 54.0 ± 5.2 57.4 ± 10.5 65.5 ± 7.9 雌 t1/2 (min) 43.6 ± 7.5 55.3 ± 2.4 47.0 ± 5.4
tmax (min) 40.0 ± 17.3 40.0 ± 17.3 40.0 ± 17.3 Cmax (ng/mL) 0.4599 ± 0.0438 0.5339 ± 0.1376 0.5993 ± 0.0899
AUClast (ng·min/mL) 48.0 ± 5.6 55.0 ± 5.3 54.4 ± 2.2 AUCinf (ng·min/mL) 49.3 ± 6.2 58.9 ± 6.0 56.7 ± 1.5 (d) 17.5 単位/kg、週 1 回
初回 3 ヵ月 9 ヵ月
雄 t1/2 (min) 51.1 ± 9.0 67.2 ± 14.2 95.1 ± 32.8 tmax (min) 40.0 ± 17.3 35.0 ± 22.9 20.0 ± 8.7 Cmax (ng/mL) 1.3671 ± 0.3419 1.2685 ± 0.1979 1.3928 ± 0.2016 AUClast (ng·min/mL) 137.0 ± 14.8 152.2 ± 5.1 193.3 ± 7.3 AUCinf (ng·min/mL) 143.5 ± 11.7 166.5 ± 9.7 233.0 ± 23.4 雌 t1/2 (min) 50.4 ± 11.0 61.3 ± 20.7 66.2 ± 23.6
tmax (min) 25.0 ± 8.7 40.0 ± 17.3 30.0 ± 0.0 Cmax (ng/mL) 1.4346 ± 0.2280 1.7643 ± 0.5035 1.5792 ± 0.2862
AUClast (ng·min/mL) 125.6 ± 29.8 178.9 ± 18.7 172.8 ± 10.6 AUCinf (ng·min/mL) 131.2 ± 33.5 195.8 ± 19.5 189.7 ± 14.0 (e) 70 単位/kg、週 1 回
初回 3 ヵ月 9 ヵ月
雄 t1/2 (min) 46.8 ± 7.0 60.3 ± 18.3 60.1 ± 4.9 tmax (min) 36.0 ± 13.4 54.0 ± 13.4 48.0 ± 16.4 Cmax (ng/mL) 6.7401 ± 1.7410 6.5002 ± 1.5519 7.5792 ± 0.5662 AUClast (ng·min/mL) 677.8 ± 129.2 744.0 ± 106.2 889.1 ± 86.5 AUCinf (ng·min/mL) 701.6 ± 123.2 807.1 ± 85.1 964.6 ± 97.3 雌 t1/2 (min) 50.0 ± 7.1 56.1 ± 9.3 54.1 ± 8.3
tmax (min) 30.0 ± 0.0 42.0 ± 16.4 36.0 ± 13.4 Cmax (ng/mL) 5.6986 ± 1.4516 8.1785 ± 1.6089 9.2285 ± 0.7766
0 1 2 3 初回 3ヵ月 9ヵ月 C ma x (n g /m L ) 2.5単位/kg、 1日1回×7、雄 2.5単位/kg、 1日1回×7、雌 17.5単位/kg、週１回、雄 17.5単位/kg、週１回、雌 0 100 200 300 400 初回 3ヵ月 9ヵ月 A UC la s t (n g ・mi n /m L ) .. . 0 5 10 15 20 25 30 初回 3ヵ月 9ヵ月 C ma x (n g /m L ) 10単位/kg、 1日1回×7、雄 10単位/kg、 1日1回×7、雌 70単位/kg、週１回、雄 70単位/kg、週１回、雌 0 1,000 2,000 3,000 4,000 5,000 初回 3ヵ月 9ヵ月 AU C la s t (n g ・mi n /mL ) .. . 図 2.6.4-12 本薬 1 日 1 回反復投与と週 1 回反復投与における週当たりの投与量を 標準化した場合の Cmaxおよび AUClastの比較
1 日 1 回投与時の CmaxおよびAUClastは7 倍した。平均値、n = 3（70 単位/kg 投与群のみ n = 5）
2.5 単位は 0.7 μg、10 単位は 2.8 μg、17.5 単位は 4.9 μg、70 単位は 19.8 μg のテリパラチドに相当する。
(b) 10 単位/kg 1 日 1 回投与と 70 単位/kg 週 1 回投与の比較 Cmax AUClast
(a) 2.5 単位/kg 1 日 1 回投与と 17.5 単位/kg 週 1 回投与の比較 Cmax AUClast
2.6.4.4 分布 2.6.4.4.1 ラット単回投与時の組織内濃度 添付資料番号 4.2.2.3-1 本薬はヒトPTH の分解産物である PTH(1-34) と同一構造であることから、組織分布および 代謝はPTH(1-34) に類するものと考えられた。PTH および PTH(1-34) 等の代謝には、腎臓お よび肝臓が関与していると報告されている1-7)。 そこで、125I-標識体をラットに皮下投与し、本薬の肝臓および腎臓中への分布について推察 した。ただし、in vitro での代謝の検討から、125I-標識体は血漿中では安定であるものの、肝臓 および腎臓組織に125I-標識体を添加すると、その直後に125I-標識体がほとんど分解されたこと （図 2.6.4-16、2.6.4.5.1 項）から、血漿についてのみ、HPLC 分析（分析条件 1；2.6.4.2.1.4 項） にて検体中の未変化体の濃度を求め、血漿中未変化体濃度に対する組織濃度比を算出した。 雄性SD 系ラット（投与時 7 週齢）に125I-標識体を本薬と共に 5.6 μg/kg（20 単位/kg）単回 皮下投与し、投与後15 分、30 分、2 時間に血漿、肝臓および腎臓を採取した。総放射能濃度 およびTCA 不溶性画分中放射能濃度を測定し、血漿については HPLC 分析（分析条件 1）にて 検体中の未変化体の濃度を求めた。その結果、血漿中未変化体濃度は投与後15 分を Cmaxとし て速やかに血漿から消失した。一方、肝臓では投与後15 分で血漿中未変化体の 3.56 倍の総放 射能濃度を示し、腎臓では投与後15 分で血漿中未変化体の 12.27 倍の総放射能濃度を示した。 肝臓に比べ腎臓では3～4 倍の放射能濃度の分布を示した（図 2.6.4-13）。いずれの組織も投与 後2 時間では、投与後 15 分、30 分と比較して放射能濃度が減少した。 以上のことから、腎臓が本薬の主たる分布組織の一つであることが示された。また、in vitro での代謝の検討（2.6.4.5.1 項）から、腎臓および肝臓に分布した本薬は速やかに代謝されるも のと推察され、認められた組織内総放射能は分解物に由来するものと示唆された。 0.01 0.10 1.00 10.00 100.00 0 20 40 60 80 100 120 投与後時間（分） 125 I-標 識体換 算放 射能濃 度 ( ng eq. /g また はng eq ./ m L ) 血漿（未変化体） 肝臓（総放射能） 肝臓（TCA不溶性） 腎臓（総放射能） 腎臓（TCA不溶性） 図 2.6.4-13 ラットに125 I-標識体を単回皮下投与した際の放射能分布の推移
2.6.4.4.2 血漿蛋白結合 添付資料番号 4.2.2.3-1 In vitro での血漿蛋白結合試験は実施しなかった。雄性 SD 系ラット（投与時 7 週齢）に125 I-標識体を本薬と共に5.6 μg/kg（20 単位/kg）投与し、血漿中放射能の分子量分布をゲルろ過ク ロマトグラフィー（分析条件2；2.6.4.2.1.4 項）により分析した。その結果、投与後 15 分、30 分、2 時間のいずれの時点においても、未変化体より大きな分子量画分にピークは認められず、 125I-標識体が血漿中でアルブミン等の血漿蛋白と結合していないことが推察された（図 2.6.4-14）。なお、本分析では、卵白アルブミンは約 14 分に溶出されることが確認されている。 したがって、本薬は血漿蛋白とはほとんど結合しないものと示唆された。 0 1000 2000 3000 4000 5000 6000 7000 8000 9000 10000 0 5 10 15 20 25 0 1000 2000 3000 4000 5000 6000 7000 8000 0 5 10 15 20 25 0 500 1000 1500 2000 2500 3000 0 5 10 15 20 25 cpm /f ract ion 12 5 I-標識 体 投与後15 分 cp m/ fr a c ti o n 12 5 I-標識 体 投与後30分 時間（分） c p m /fr ac ti on 投与後2時間 3,000 2,500 2,000 1,500 1,000 8,000 7,000 6,000 5,000 4,000 3,000 2,000 1,000 500 00 0 8,000 7,000 6,000 5,000 4,000 3,000 2,000 1,000 10,000 9,000 0 30 25 20 15 10 5 0 30 25 20 15 10 5 0 30 25 20 15 10 5 0 図 2.6.4-14 ラットに125I-標識体を皮下投与した際の血漿における ゲルろ過クロマトグラム n = 3 の血漿をプールして分析した
2.6.4.4.3 血球移行性 添付資料番号 5.3.2.3-1 動物での血球移行性試験は実施しなかった。ヒト血液に本薬をテリパラチド酢酸塩として 0.5 ng/mL の濃度になるように添加し、血球移行性を in vitro で検討した。ヒト血液での血球移 行率は37.0%、RBは1.0 であり（表 2.6.4-11、2.7.2.2.1.1 項）、本薬は血球、血漿画分とも同 程度に分布することが示された。 表 2.6.4-11 本薬の血球移行率（ヒト） ボランティアNo. Ht (%) 血球移行率 (%)* RB* 1 37 33.6 0.9 2 42 42.0 1.0 3 41 41.0 1.0 4 35 35.8 1.0 5 34 32.7 1.0 平均 NA 37.0 1.0 Ht: ヘマトクリット、RB: 血液／血漿濃度比、NA: 測定（または検討）せず *: 各被験者での平均値 (n = 3) 2.6.4.4.4 胎盤通過性 添付資料番号 4.2.2.4-1（参考） 胎盤通過性試験は実施しなかった。ただし、ラット胎盤組織にプロテアーゼインヒビター存 在下で125I-標識体を本薬と合わせて約 3 ng/mL のテリパラチド酢酸塩濃度になるように添加し てホモジネートを調製し、その上清をHPLC 分析（分析条件 1；2.6.4.2.1.4 項）した。その結 果、125I-標識体を添加した直後に125I-標識体はほとんど分解され、12 分後に溶出されるピーク になることが確認された（図 2.6.4-15）。 したがって、本薬は胎盤を通過したとしても、そのほとんどが分解物に速やかに代謝される ことが示唆された。 0 2000 4000 6000 8000 10000 12000 14000 16000 16,000 14,000 12,000 10,000 8,000 6,000 4,000 2,000 c p m /fr a c ti o n 12 5 I-標識 体 1. 0 % 0
2.6.4.5 代謝 2.6.4.5.1 In vitro における代謝 添付資料番号 4.2.2.4-1（参考） 雄性SD 系ラットの肝臓および腎臓組織に、125I-標識体を本薬と合わせて約 3 ng/mL のテリ パラチド酢酸塩濃度になるように添加してホモジネートを調製し、その上清をHPLC 分析（分 析条件1；2.6.4.2.1.4 項）することで、肝臓および腎臓中の代謝物を検討した。 その結果、肝臓ホモジネートおよび腎臓ホモジネート中に125I-標識体は添加直後で 1.2%以下 とほとんど認められなかった（図 2.6.4-16）。したがって、皮下投与後に肝臓および腎臓に分 布した本薬は速やかに低分子の分解物へと代謝されることが示唆された。 一方、同ラットの血漿に同量の125I-標識体および本薬を添加し、その上清の HPLC 分析を行っ たところ、未変化体の割合は94.9%であり、本薬は血漿中で安定であることが示された。 0 1000 2000 3000 4000 5000 6000 7000 8000 9000 10000 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 時間（分） c p m /fr ac ti on 腎臓 125 I-標識 体 0. 6% 9,000 8,000 7,000 6,000 5,000 4,000 3,000 2,000 1,000 10 5 0 15 20 25 30 35 40 45 50 0 0 2000 4000 6000 8000 10000 12000 14000 16000 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 c p m /f rac ti on 肝臓 12 5 I-標識体 1. 2% 16,000 14,000 12,000 10,000 8,000 6,000 4,000 2,000 10 5 0 15 20 25 30 35 40 45 50 10,000 図 2.6.4-16 ラット組織に125 I-標識体を添加した直後のホモジネート上清の HPLC クロマトグラム 2.6.4.5.2 In vivo における代謝 添付資料番号 4.2.2.3-1 雄性SD 系ラット（投与時 7 週齢）に125I-標識体を本薬と共に 5.6 μg/kg（20 単位/kg）単回 皮下投与し、血漿中の代謝物をHPLC 分析（分析条件 1；2.6.4.2.1.4 項）により検討した。血 漿中総放射能に占める未変化体の割合は投与後15 分で 36.0%、30 分で 13.0%、投与後 2 時間 では0.6%と減少し、低分子分解物と考えられるピークが経時的に増加した（図 2.6.4-17）。
c p m /fr a c ti o n 12 5 I-標識 体 36. 0% 投与後15分 39 .1 % 14. 5 % 2. 8 % 3. 0 % 3,000 2,500 2,000 1,500 1,000 50 500 0 10 5 0 15 20 25 30 35 40 45 50 c p m /f rac ti on 125 I-標識体 13. 0 % 68. 4% 9. 4 % 2. 1% 1. 0% 投与後30分 7,000 6,000 5,000 4,000 3,000 2,000 1,000 0 10 5 0 15 20 25 30 35 40 45 50 c p m /fr a c ti o n 時間（分） 12 5 I-標識 体 0. 6% 94. 9% 投与後2時間 7,000 6,000 5,000 4,000 3,000 2,000 1,000 8,000 9,000 10 5 0 15 20 25 30 35 40 45 50 0 図 2.6.4-17 ラットに125 I-標識体を単回皮下投与した際の血漿における HPLC クロマトグラム n = 3 の血漿をプールして分析した 2.6.4.5.3 薬物代謝酵素誘導および阻害作用 2.6.4.5.3.1 薬物代謝酵素誘導（in vitro 試験） 添付資料番号 5.3.2.2-2 非凍結ヒト初代培養肝細胞（3 個体）を用いて、本薬によるヒト CYP 分子種に対する酵素誘 導作用を評価した。本薬の濃度はテリパラチド酢酸塩として0.3 ng/mL から、公比約 3 で 1 お
表 2.6.4-12 非凍結ヒト初代培養肝細胞を用いた本薬の CYP 代謝酵素誘導作用 CYP 分子種 酵素活性値 (pmol/mg protein/hr) ［陽性対照に対する割合 (%)］ 陰性対照* 本薬濃度 (ng/mL) 陽性対照** 0.3 1 3 CYP1A2 143 130 139 137 9,007 [0.0] [0.0] [0.0] [0.0] [100] CYP3A4 236 247 245 246 2,490 [0.0] [0.3] [0.3] [0.7] [100] 3 個体の平均値、各個体で 3 回測定 *: 陰性対照 0.1% DMSO/ 0.001% BSA/ 1%生理食塩水
**: 陽性対照 CYP1A2; 20 μmol/L β-Naphthoflavone
CYP3A4; 10 μmol/L Rifampicin
本薬および陽性対照による細胞毒性は認められなかった。 2.6.4.5.3.2 薬物代謝酵素阻害 添付資料番号 5.3.2.2-1 凍結ヒト肝細胞を用いて、ヒトCYP 分子種に対する本薬の酵素阻害作用を評価した。本薬 の濃度はテリパラチド酢酸塩として0.3 ng/mL から、公比約 3 で 1 および 3 ng/mL とし、本薬 未添加時の薬物代謝酵素の残存活性を100%としたときの活性残存率を算出した。その結果、 最高濃度3 ng/mL 添加時の CYP 分子種の活性残存率は CYP1A2、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6 およびCYP3A4 でそれぞれ 101.6%、98.1%、102.1%、116.7%および 102.5%であった（図 2.6.4-18）。 したがって、本薬は3 ng/mL まで、いずれの分子種（CYP1A2、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6 およびCYP3A4）に対しても阻害作用を有しないものと考えられた（2.7.2.2.1.2 項）。 0 20 40 60 80 100 120 0.0 1.0 2.0 3.0 本薬濃度 (ng/mL) 活性残存 率 (% ) CYP1A2 CYP2C9 CYP2C19 CYP2D6 CYP3A4 図 2.6.4-18 凍結ヒト肝細胞を用いた本薬の CYP 代謝酵素阻害作用 平均値、n = 3 典型的阻害剤の活性残存率は13.4%～22.3%であった。
2.6.4.6 排泄 2.6.4.6.1 尿中排泄 添付資料番号 4.2.2.5-1（参考） 雄性SD 系ラット（投与時 7 週齢）に本薬 113.0μg/kg（400 単位/kg）を単回皮下投与し、投 与後0～8 時間の尿を採取した。尿中の本薬濃度を ELISA 法で測定したところ、尿中濃度は定 量下限未満となり、尿中排泄率は投与量に対して0.01%未満となった。したがって、本薬は未 変化体のままでは尿中へ排泄されないことが示された。 2.6.4.6.2 乳汁中排泄 添付資料番号 4.2.2.5-2 哺育中のSD 系ラット（投与時 11 週齢）に125I-標識体を本薬と共に 5.6 μg/kg（20 単位/kg） 単回皮下投与し、投与後15 分、30 分、2 時間の乳汁および血漿を採取した。これらの試料を HPLC 分析（分析条件 1；2.6.4.2.1.4 項）し、試料中の未変化体の割合から、未変化体濃度を求 めた。その結果、乳汁中に放射能濃度は認められたものの、HPLC 分析ではいずれの時点にお いても未変化体画分にピークを認めず、未変化体の乳汁中への移行は認められなかった（表 2.6.4-13）。以上の結果より、本薬は未変化体として乳汁中へ移行しないことが示唆された。 表 2.6.4-13 哺育中ラットに125I-標識体を単回皮下投与した際の未変化体の乳汁移行性 15 分 30 分 2 時間 血漿 未変化体濃度 (ng eq./mL) 2.5274 0.5767 0.0588 乳汁 未変化体濃度 (ng eq./mL) ND ND ND 血漿に対する割合 (%) 0 0 0 ND: 定量または検出限界以下 2.6.4.7 薬物動態学的薬物相互作用 本薬はポリペプチドであり、組織中代謝物での検討結果から、生体内で速やかに分解を受け、 代謝されると推察された。さらに、ヒトCYP 代謝酵素の阻害作用は認められず、ヒト CYP 代 謝酵素の誘導作用もなかったことから、薬物動態学的薬物相互作用を引き起こす可能性は低い と考えられた。
2.6.4.8 その他の薬物動態試験 2.6.4.8.1 腎機能障害モデルラットでの薬物動態 添付資料番号 4.2.2.7-1, -2（参考）, -3（参考） 腎機能が本薬の薬物動態に及ぼす影響を考察するため、以下に示す2 種のモデルラット（い ずれも雄性SD 系ラット、投与時 10 週齢）を用いて検討を行った。 急性腎不全モデルラットでの薬物動態 グリセロールで誘発した腎機能障害モデルラット（以下、急性腎不全モデルラット）に、 本薬5.6 μg/kg（20 単位/kg）を単回皮下投与し、血漿中の本薬濃度を測定した。ラットに 50%グリセロール溶液 10 mL/kg を両側の下腿部筋肉内に半量ずつ投与し、その 24 時間後 に血清BUN およびクレアチニン濃度が無処置ラットに比べ顕著に上昇したことを確認（表 2.6.4-14）した後に本薬を投与した。 急性腎不全モデルラットの血漿中濃度推移は、無処置ラットの血漿中濃度推移に比べ、 tmaxの遅延、t1/2の延長およびAUC の増大が認められた（図 2.6.4-19）。すなわち、無処置 ラットのtmaxが22.5 分であったのに対し、急性腎不全モデルラットでは 52.5 分と延長し、 t1/2は無処置ラットでは24.2 分であったのに対し、急性腎不全モデルラットでは 66.6 分で あった。急性腎不全モデルラットのCmaxは無処置ラットの同パラメータの131%であった
が、AUClastは277%、AUCinfは322%と大きく増大した。CL/F は無処置ラットの 32%に低
下した（表 2.6.4-15）。 表 2.6.4-14 急性腎不全モデルラットの血清 BUN およびクレアチニン 無処置ラット 急性腎不全モデルラット BUN (mg/dL) 15.9 ± 1.2 129.1 ± 5.5 クレアチニン (mg/dL) 0.16 ± 0.01 3.00 ± 0.27 平均値 ± 標準偏差、n = 4 0.1 1.0 10.0 0 30 60 90 120 150 180 投与後時間（分） 血漿 中濃度 (n g /m L ) .. 無処置ラット 急性腎不全モデルラット 図 2.6.4-19 急性腎不全モデルラットに本薬 20 単位/kg を単回皮下投与した際の 血漿中濃度推移 平均値 + 標準偏差、n = 4 20 単位は 5.6 μg のテリパラチドに相当する。
![表 2.6.4-12 非凍結ヒト初代培養肝細胞を用いた本薬の CYP 代謝酵素誘導作用 CYP 分子種 酵素活性値 (pmol/mg protein/hr) ［陽性対照に対する割合 (%)］ 陰性対照 * 本薬濃度 (ng/mL) 陽性対照 ** 0.3 1 3 CYP1A2 143 130 139 137 9,007 [0.0] [0.0] [0.0] [0.0] [100] CYP3A4 236 247 245 246 2,490 [0.0] [0.3] [0.3] [0.7]](https://thumb-ap.123doks.com/thumbv2/123deta/6486079.657015/37.892.148.742.131.461/作用CYP分子酵素活性陽性対照に対する割合対照本薬濃度陽性対照.webp)
